專利名稱：一種藥物組合物及其制劑的檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物的檢測方法，特別涉及安腦丸及其制劑的檢測方法。
背景技術：
安腦丸是記載于衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第十三冊77頁的中藥處方，標準 編號為WS3-B-2517-97，標準中記載了安腦丸的處方包括人工牛黃、豬膽粉、朱砂、冰片、 水牛角濃縮粉、珍珠、黃芩、黃連、桅子、雄黃、郁金、石膏、赭石、珍珠母和薄荷腦；專利號為 93100258. 3專利申請公開了安腦丸的處方用量配比關系，及其常規(guī)制備工藝；現有資料公 開安腦丸具有清熱解毒、醒腦安神、豁痰開竅、鎮(zhèn)驚熄風的功效，如今是一種常用的治療急 性炎癥引發(fā)的高熱不退、神志昏迷的臨床用藥。部頒標準中記載了安腦丸的質量控制方法為膽酸、豬去氧膽酸的鑒別方法及黃連 中鹽酸小檗堿的鑒別方法。上述兩種定性檢測方法不能全面保證該處方產品的質量，缺乏 定量的檢測方法或針對該處方法一套質量檢測方法體系，才能全面保證該處方產品的質 量。而且該處方中含有毒性原料，如雄黃、朱砂等，其中毒性成分的含量須有一定限度，這 也將是本處方產品質量檢測方法的關鍵所在，否則將會危及患者的生命。因此，研究一套針 對安腦丸及其其他制劑的質量檢測方法體系將是該處方亟待解決的問題。

發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于公開中藥安腦丸及其配方原料制成的制劑的檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術方案實現的本發(fā)明檢測方法包括如下鑒別和含量測定中的一種或幾種鑒別包括如下方法中的一種或幾種A.膽酸、豬去氧膽酸的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g，研勻，加乙醇10-30ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加乙醇制成每Iml含 0. 5-1. 5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 2μ1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以異辛烷-乙酸乙 酯-冰醋酸為10-20 5-10 2-8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12%硫酸乙醇溶液 (即8-12ml硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈 365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；B.黃連的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/3-2/3，粉碎，加甲醇5_15ml， 置水浴上加熱回熱0. 5-1. 5小時，放冷，濾過，濾液作為供試試品溶液；對照藥材溶液的制備另取黃連對照藥材30-70mg，加甲醇3_7ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 2-0. 7mg的溶 液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各 2μ1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲 酸-水為8-12 5-10 0.5-1.5 0. 5-1. 5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm 下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色熒光 斑點；C.桅子苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g，研勻，加乙醚10-30ml，超聲處理3_7分鐘，濾過，棄去乙醚液，殘渣揮去乙醚，加 乙酸乙酯20-40ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2_細1使溶 解，作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液， 作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 4 μ 1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲 酸-水為8-12 5-10 1-3 0.3-0. 7為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12%硫酸乙醇 溶液(即8-12ml硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加熱至斑點顯色清晰；供試 品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；D.黃芩苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加甲醇5_15ml， 超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-0. 5mg的溶液， 作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 1 μ 1，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm 下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的暗色斑點；含量測定包括如下方法中的一種或幾種A.桅子苷的含量測定照高效液相色譜法(附錄VI D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈-水為 10-15 85-90 或正丁醇-甲醇一水-磷酸為 10-15 30-50 30-40 0.3-0.5 或正丁醇-水-磷酸為50—70 30-40 0. 3-0. 5作為流動相；檢測波長為238nm ；理論 板數按桅子苷峰計算應不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含20_40μ g的溶 液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 20-60%乙醇或丙酮-20-60%乙醇為1 1的混合液80-90ml，加2-3%鹽酸調PH2-3，超聲 提取10-15分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加氫氧化鈉調PH = 7，濾過，濾液加乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 每日用制劑量含桅子苷(C17H24Oltl)O. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黃芩苷的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定，以十八烷基硅 烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水為10-15 85-90或正丁醇-甲醇一水-磷酸為 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或正丁醇-水-磷酸為 50—70 30-40 0. 3-0. 5 或 甲醇-水-磷酸=40-50 50-60 0. 1-0. 3作為流動相；檢測波長為^Onm;理論板數按 黃芩苷峰計算應不低于2500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含40_80μ g的溶 液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加 入80-90%乙醇80-90ml，調PH= 7，超聲提取10-15分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加 2-3%鹽酸3-5ml，攪勻，再加入氫氧化鈉調PH = 7，靜置20-30分鐘，濾過；濾液加80-90% 乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本 品按干燥品計算，凈黃芩、酒黃芩含黃芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本發(fā)明每日用制劑量 含黃芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黃連的含量測定供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 1-3%鹽酸60-80ml，超聲提取10-15分鐘，濾過；濾液加鹽酸乙醇溶液(即l_2ml鹽 酸與IOOml乙醇的混合液)至刻度，于40-50°C下水浴中加熱10-20分鐘，濾過；濾液作為 供試品溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 02-0. 06mg的溶 液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液Ιμ 、對照品溶液Ιμ 與3μ1，交叉點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為 5-7 1-3 1-2 1-2 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水為 5-7 0.8-1 1-1.5 0.5-1.5 為展開劑，另槽加入等體積的濃氨試液，展開8-15厘米，取出，揮干，照薄層色譜法(附錄 VIB薄層掃描法)進行熒光掃描，波長λ = 356-366nm，測量供試品與對照品熒光強度的 積分值，計算，即得；每日用制劑量含小檗堿以鹽酸小檗堿(C2tlH17NO4 · HCl)計，不得少于 0. 8mg-8mg或不得少于3. 2mg ；D.薄荷腦和冰片的含量測定照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI E)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性 試驗色譜柱=HP-INNOWax毛細管色譜柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；檢測器溫度240°C;氣化室 溫度240°C ；柱溫為程序升溫，初始溫度為150°C，保持4分鐘，以每分鐘8°C的速率升溫至 200 0C ；理論板數按丁香酚峰計算應不低于5000 ；內標溶液的制備取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 3-0. 7mg的溶液，搖勻，作 為內標溶液；
校正因子測定另取冰片對照品10_30mg，薄荷腦對照品5_15mg，精密稱定，置 25ml量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取Iy 1，注入氣相色譜儀，計算校正 因子；取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，精密稱定，加硅藻土 2_4g，精密稱定， 研勻后，取l-3g，精密稱定，置25ml量瓶中，精密加入內標溶液10-20ml與水0. 5-1. 5ml，密 塞，搖勻，稱定重量，浸漬過夜，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，吸取 Iy 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每日用制劑量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg;含薄 荷腦(C10H20O)不得少于 6. 4-9. 6mg。其中，鑒別優(yōu)選包括如下方法中的一種或幾種A.膽酸、豬去氧膽酸的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加 乙醇20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加乙醇制成每Iml含Img的混 合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 2μ1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以異辛烷-乙酸乙 酯-冰醋酸為15 7 5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液(即10ml 硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈365nm下檢視；供 試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；B.黃連的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/2，粉碎，加甲醇10ml，置水浴 上加熱回熱1小時，放冷，濾過，濾液作為供試試品溶液；對照藥材溶液的制備另取黃連對照藥材50mg，加甲醇5ml，超聲處理15分鐘，濾 過，濾液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作 為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各 2μ1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲 酸-水為10 7 1 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色 譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色熒光斑點；C.桅子苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加 乙醚20ml，超聲處理5分鐘，濾過，棄去乙醚液，殘渣揮去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加熱回流 1小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇3ml使溶解，作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 4 μ 1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲 酸-水為10 :7:2: 0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液(S卩10ml硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色 譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；D.黃芩苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加甲醇10ml，超聲處 理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作為 對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各 1 μ 1，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm 下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的暗色斑點。其中，含量測定優(yōu)選包括如下方法中的一種或幾種A.桅子苷的含量測定照高效液相色譜法(附錄VI D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙 腈-水為12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸為12 32 35 0. 4或正丁醇-水-磷 酸為60 35 0.4作為流動相；檢測波長為238nm;理論板數按桅子苷峰計算應不低于 1500 ；對照品溶液的制備精密稱取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含30μ g的溶液， 即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入40% 乙醇或丙酮-40%乙醇為1 1的混合液85ml，加3%鹽酸調PH2-3，超聲提取12分鐘，濾 過；濾液置IOOml量瓶中，加氫氧化鈉調PH = 7，濾過，濾液加乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得； 每日用制劑量含桅子苷(C17H24Oltl)不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黃芩苷的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定，以十八烷基硅烷鍵 合硅膠為填充劑；以乙腈-水為12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸為12 40 35 0.4 或正丁醇-水-磷酸為60 35 0.4或甲醇-水-磷酸=45 55 0. 2作為流動相； 檢測波長為280nm ；理論板數按黃芩苷峰計算應不低于2500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液， 即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85% 乙醇85ml，調PH = 7，超聲提取12分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加3 %鹽酸細1，攪勻， 再加入氫氧化鈉調PH = 7，靜置25分鐘，濾過；濾液加85%乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本 品按干燥品計算，凈黃芩、酒黃芩含黃芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本發(fā)明每日用制劑量 含黃芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黃連的含量測定供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入2%鹽 酸70ml，超聲提取12分鐘，濾過；濾液加1-2%鹽酸乙醇溶液(即l_2ml鹽酸與IOOml乙醇的混合液)至刻度，于45°C下水浴中加熱15分鐘，濾過；濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 04mg的溶液，作 為對照品溶液；照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液Ιμ 、對照品溶液Ιμ 與3μ1，交叉點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為 6 2 1.5 1.5 1或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水為6 0.9 1.2 1為展開劑， 另槽加入等體積的濃氨試液，展開12厘米，取出，揮干，照薄層色譜法(附錄VI B薄層掃描 法)進行熒光掃描，波長λ = 356-366nm，測量供試品與對照品熒光強度的積分值，計算，即 得；每日用制劑量含小檗堿以鹽酸小檗堿(C2tlH17NO4 · HCl)計，不得少于0. Smg—Smg或不 得少于3. 2mg ；D.薄荷腦和冰片的含量測定照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI E)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性 試驗色譜柱=HP-INNOWax毛細管色譜柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；檢測器溫度240°C;氣化室 溫度240°C ；柱溫為程序升溫，初始溫度為150°C，保持4分鐘，以每分鐘8°C的速率升溫至 200 0C ；理論板數按丁香酚峰計算應不低于5000 ；內標溶液的制備取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，搖勻，作為內 標溶液；校正因子測定另取冰片對照品20mg，薄荷腦對照品10mg，精密稱定，置25ml量瓶 中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取 μ 1，注入氣相色譜儀，計算校正因子；取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，精密稱定，加硅藻土 3g，精密稱定，研勻 后，取2g，精密稱定，置25ml量瓶中，精密加入內標溶液15ml與水1ml，密塞，搖勻，稱定重 量，浸漬過夜，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，吸取1 μ 1，注入氣相色 譜儀，測定，即得；每日用制劑量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg ；含薄荷腦(CltlH2tlO)不得
少于6.4-9. 6mg。
本發(fā)明安腦丸配方制劑的原料藥組成為
人工牛黃 0.5-2重量份豬膽粉7-20重量份黃連5-15重量份
黃芩5-15重量份珍珠1-5重量份桅子5-15重量份
郁金5-15重量份赭石2-6重量份雄黃3-9 1■量份
朱砂2-6重量份薄荷腦0. 5-2重量份石膏5-12重量份
冰片0. 5--4重量份水牛角濃縮粉7-20重量份
珍珠母2--8重量份。
本發(fā)明安腦丸配方制劑的原料藥組成優(yōu)選為
人工牛黃 1重量份豬膽粉13重量份黃連10]■量份
黃芩10]■量份珍珠3重量份桅子10]■量份
郁金10 1■量份赭石4重量份雄黃6重量份
朱砂4重量份薄荷腦1重量份石膏8重量份
冰片2重量份水牛角濃縮粉13重量份珍珠母5重量份-
本發(fā)明安腦丸配方制劑的原料藥組成優(yōu)選為
人工牛黃 0.7重量份豬膽粉18重量份黃連6重量份
黃芩14重量份珍珠2重量份桅子14重量份郁金6重量份赭石5重量份雄黃4重量份朱砂5重量份薄荷腦0.7重量份 石膏11重量份冰片1重量份水牛角濃縮粉18重量份珍珠母3重量份。本發(fā)明安腦丸配方制劑的原料藥組成優(yōu)選為人工牛黃1.8重量份豬膽粉9重量份黃連14重量份黃芩6重量份珍珠4重量份桅子6重量份郁金14重量份赭石3重量份雄黃8重量份朱砂3重量份薄荷腦1.8重量份 石膏6重量份冰片3. 5重量份水牛角濃縮粉9重量份珍珠母7重量份。本發(fā)明所述的質量檢測方法中的安腦丸配方制劑是取上述原料藥，加入常規(guī)輔 料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于散齊 、顆粒齊 、片齊 、膠囊齊 、分散 片、滴丸劑、水丸劑、蜜丸劑、微丸劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑。本發(fā)明所述的質量檢測方法中的安腦丸配方制劑也可以由如下方法中的一種或 幾種制備而成工藝1 由如下步驟A、B、C、D和E組成步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80 %乙醇，靜置 12-48小時，取上清液回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每 次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥 渣與原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃 縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，靜置12-48小時，取上清液回收乙 醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A4 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥 渣與原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃 縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱，30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃 縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；步驟B:制備中間體IIBl 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入3-10% 稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化鈉 (或其他堿液)調PH值至3-5 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙醇， 靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B2:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入 3-10%稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫 氧化鈉(或其他堿液)調PH值至3-5 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍8/26 頁
的乙醇，靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂 柱，30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B3 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入3-10% 稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化鈉 (或其他堿液)調PH值至3-5 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙醇， 靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取 物，混合后即得中間體II ；或混合干燥后得中間體II的粉末；或B4:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，，分別加入 3-10%稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫 氧化鈉(或其他堿液)調PH值至3-5;濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍 的乙醇，靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂 柱，30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提 取物，混合后即得中間體II ；或混合干燥后得中間體II的粉末；步驟C:制備中間體IIICl 取豬膽粉和雄黃碎成細粉，混合，加入3-5%氫氧化鈉4-8重量倍，靜置12_48 小時，過濾，濾液調PH值至3-5，濃縮，加入30-80%乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇， 濃縮，即得中間體III ；或干燥后得中間體III的粉末；或C2 取豬膽粉碎成細粉，加入3-5%氫氧化鈉4-8重量倍，靜置12_48小時，過 濾，濾液調PH值至3-5，濃縮，加入30-80 %乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮， 即得豬膽粉提取物，或干燥后得豬膽粉提取物粉末；取雄黃粉碎成細粉，加入4-8重量倍 5-10%鹽酸，靜置8- 小時，過濾，濾液調PH值至3-5，濃縮，加入水洗至無色，即得雄黃提 取物，或干燥后得雄黃提取物粉末；將豬膽粉提取物與雄黃提取物混合，得中間體III或得 中間體III的粉末；步驟D 制備藥粉Dl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉；或D2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加5-8重量倍水研至糊狀，再按 1 60-70加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復3-6次，合并各次混懸 液，靜置，取沉淀于25-45°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合 得藥粉；步驟EjI^lJ將中間體I、II、III或中間體I、II、III的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常 規(guī)輔料制成藥學上可接受的劑型，如散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、分散片、滴丸劑、水丸劑、 蜜丸劑、微丸劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑。其中步驟A優(yōu)選如下方法Al 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小 時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回 收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5 小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原 料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏 中加入7重量倍的50%乙醇，靜置對小時，取上清液回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A4 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原 料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度 1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末。其中步驟B優(yōu)選如下方法Bl 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入6%稀鹽 酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿液) 調PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液，回收 乙醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B2 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入6%稀 鹽酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿 液)調PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液， 回收乙醇，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃 縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B3:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入6%稀 鹽酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿 液)調PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液， 回收乙醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中間 體II ；或混合干燥后得中間體II的粉末；或B4:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入6%稀 鹽酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿 液)調PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液， 回收乙醇，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃 縮，分別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中間體II ；或混 合干燥后得中間體Π的粉末。其中步驟C優(yōu)選如下方法Cl 取豬膽粉和雄黃碎成細粉，混合，加入4%氫氧化鈉6重量倍，靜置M小時，過 濾，濾液調PH值至4，濃縮，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮，即得中間 體III ；或干燥后得中間體III的粉末；或C2 取豬膽粉碎成細粉，加入4%氫氧化鈉6重量倍，靜置M小時，過濾，濾液調 PH值至4，濃縮，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮，即得豬膽粉提取物， 或干燥后得豬膽粉提取物粉末；取雄黃粉碎成細粉，加入6重量倍8%鹽酸，靜置M小時， 過濾，濾液調PH值至4，濃縮，加入水洗至無色，即得雄黃提取物，或干燥后得雄黃提取物粉 末；將豬膽粉提取物與雄黃提取物混合，得中間體III或得中間體III的粉末。
其中步驟D優(yōu)選如下方法Dl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉；或D2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加6重量倍水研至糊狀，再按 1 65加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復4次，合并各次混懸液，靜 置，取沉淀于35°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合得藥粉。其中，上述任何步驟均可由常規(guī)方法替代。其中，上述大孔樹脂柱型號均為YPR-II，X5,AB-8，HPD-100, DX-5，D101, DA201, DMl30，WLD-3 或 NKA-9。本發(fā)明安腦丸及其制劑的制備方法還可以為如下方法工藝2 由如下步驟A、B、C和D組成步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80 %乙醇，靜置 12-48小時，取上清液回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每 次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥 渣與原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃 縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，靜置12-48小時，取上清液回收乙 醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A4 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥 渣與原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃 縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱，30-80 %乙醇洗脫，回收乙醇，濃 縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；步驟B:制備中間體IIBl 將原料藥水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠、珍珠母、豬膽粉和雄黃粉碎成細粉， 混合，加入4-10重量倍的30-80%乙醇，40-60°C溫浸12-48小時，過濾，取濾液，回收乙醇， 濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；步驟C:制備藥粉Cl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉；或C2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加5-8重量倍水研至糊狀，再按 1 60-70加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復3-6次，合并各次混懸 液，靜置，取沉淀于25-45°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合 得藥粉；步驟D 制劑將中間體I、II或中間體I、II的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成 藥學上可接受的劑型，如散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、分散片、滴丸劑、水丸劑、蜜丸劑、微丸 劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑。
其中步驟A優(yōu)選如下方法Al 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小 時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回 收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5 小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收 乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原 料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏 中加入7重量倍的50%乙醇，靜置對小時，取上清液回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A4 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原 料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度 1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末。其中步驟B優(yōu)選如下方法Bl 將原料藥水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠、珍珠母、豬膽粉和雄黃粉碎成細粉， 混合，加入7重量倍的50%乙醇，50°C溫浸M小時，過濾，取濾液，回收乙醇，濃縮，即得中間 體II ；或干燥后得中間體II的粉末。其中步驟C優(yōu)選如下方法Cl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，分別或混合得藥粉；或C2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加6重量倍水研至糊狀，再按 1 65加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復4次，合并各次混懸液，靜 置，取沉淀于35°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合得藥粉。其中，上述任何步驟均可由常規(guī)方法替代。其中，上述大孔樹脂柱型號均為YPR-II，X5,AB-8，HPD-100, DX-5，D101, DA201, DMl30，WLD-3 或 NKA-9。本發(fā)明藥物組合物檢測方法可以應用于組合物的各種劑型，如散劑、顆粒劑、片 齊U、膠囊劑、分散片、滴丸劑、水丸劑、蜜丸劑、微丸劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液 體制劑或注射劑等臨床可接受的劑型，由于不同劑型的制劑其中所含的相當生藥量是相同 的，因此各個劑型在進行檢測時，所選用樣品量可統(tǒng)一折算為日用制劑量為計量單位，每單 位制劑可以為每片、每粒、每支或每丸等。


圖1 供試品和對照品色譜分離2:標準曲線圖3:陰性對照色譜圖本發(fā)明檢測方法經實驗表明均表現良好的線性關系、精密度、穩(wěn)定性、重現性和回 收率。
下述實驗例或實施例進一步說明但不限于本發(fā)明。實驗例1黃芩苷含量測定方法學試驗(1)儀器與試藥儀器Agilent_1100高效液相色譜儀，包括真空脫氣機，四元梯度泵，自動進樣 器，二級管陳列檢測器(DAD檢測器)，AgilenLChemistation數據處理系統(tǒng)。試藥正丁醇、甲醇為色譜純，水為雙蒸水，其它試劑均為分析純，黃芩苷對照品 (中國藥品生物制品檢定所提供)。(2)色譜條件色譜柱DiamonsilC18，200 X 4. 6mm ID，5 μ m ；流動相分別以乙腈-水為 12 88 或正丁醇-甲醇一水-磷酸為15 35 40 0.4或正丁醇-水-磷酸為60 35 0. 4 或甲醇-水-磷酸=45 58 0.2作為流動相檢測波長280nm;柱溫室溫；流速
1.Oml/min ；進樣體積；IOy 1 ；自動進樣，數據處理定量方法外標峰面積法。(3)檢測波長選定按上述色譜條件對對照品進行光譜分析，乙腈-水或甲醇-水-磷酸流動相時黃 芩苷在280nm處有最大吸收，在正丁醇-甲醇一水-磷酸或正丁醇-水-磷酸為流動相時 在276nm處有最大吸收，故選276nm或280nm為黃芩苷檢測波長。樣品黃芩苷峰的光譜圖
與對照品一致。(4)對照品溶液，供試品溶液與陰性樣品溶液的制備對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液， 即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明片劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85% 乙醇85ml，調PH = 7，超聲提取12分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加3 %鹽酸細1，攪勻， 再加入氫氧化鈉調PH = 7，靜置25分鐘，濾過；濾液加85%乙醇至刻度，搖勻，即得；陰性樣品溶液的制備取不含黃芩的陰性樣品2g，精密稱定，同供試品溶液的制 備方法制備陰性樣品溶液。(5)空白試驗及色譜圖分別吸取黃芩苷對照品溶液、本發(fā)明片劑供試品溶液及陰性樣品溶液，注入高效 液相色譜儀進行分析，實驗結果表明陰性樣品溶液對黃芩苷的含量測定沒有干攏。(6)線性關系考察精密稱取在60°C減壓干燥4小時的黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含 0. 1248mg 的溶液，再用甲醇分別稀釋成 0. 04352mg/ml,0. 07252mg/ml、0. 08703mg/ml、 0. 11604mg/ml的溶液.分別取10 μ 1注入高效液相色譜儀中，按上述色譜條件進行測 定，以濃度(mg/ml)為橫坐標，峰面積的積分值(Mau)為縱坐標，繪制標準曲線，Y =
2.689X104X+2. 3264X 10-1，V = 0. 99996.表明黃芩苷濃度在 0. 04352 0. 14500mg/ml 范 圍內具有良好的線性關系，結果見表1。表1黃芩苷線性考察
權利要求
1. 一種藥物組合物的檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定方法中的一種或 幾種A.桅子苷的含量測定照高效液相色譜法(附錄VI D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 為 10-15 85-90 或正丁醇-甲醇一水-磷酸為 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或 正丁醇-水-磷酸為50—70 30-40 0. 3-0. 5作為流動相；檢測波長為238nm ；理論板 數按桅子苷峰計算應不低于1500 ；對照品溶液的制備精密稱取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含20-40 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 20-60%乙醇或丙酮-20-60%乙醇為1 1的混合液80-90ml，加2-3%鹽酸調PH2-3，超聲 提取10-15分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加氫氧化鈉調PH = 7，濾過，濾液加乙醇至刻 度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；每日 用制劑量含桅子苷(C17H24Oltl)O. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；B.黃芩苷的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定，以十八烷基硅烷 鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水為10-15 85-90或正丁醇-甲醇一水-磷酸為 10-15 30-50 30-40 0. 3-0. 5 或正丁醇-水-磷酸為 50—70 30-40 0. 3-0. 5 或 甲醇-水-磷酸=40-50 50-60 0. 1-0. 3作為流動相；檢測波長為280nm ；理論板數按 黃芩苷峰計算應不低于2500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含40-80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 80-90%乙醇80-90ml，調PH = 7，超聲提取10-15分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加 2-3%鹽酸3-5ml，攪勻，再加入氫氧化鈉調PH = 7，靜置20-30分鐘，濾過；濾液加80-90% 乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本品按 干燥品計算，凈黃芩、酒黃芩含黃芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本發(fā)明每日用制劑量含黃 芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ；C.黃連的含量測定供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，置IOOml量瓶中，加入 鹽酸60-80ml，超聲提取10-15分鐘，濾過；濾液加鹽酸乙醇溶液(即l_2ml鹽酸與 IOOml乙醇的混合液)至刻度，于40-50°C下水浴中加熱10-20分鐘，濾過；濾液作為供試品 溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 02-0. 06mg的溶液， 作為對照品溶液；照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液1 μ 1、對照品溶液1 μ 1 與3μ1，交叉點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為5-7 1-3 1-2 1-2 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水為 5-7 0.8-1 1-1.5 0.5-1.5 為展開劑，另槽加入等體積的濃氨試液，展開8-15厘米，取出，揮干，照薄層色譜法(附錄 VIB薄層掃描法)進行熒光掃描，波長λ = 356-366nm，測量供試品與對照品熒光強度的 積分值，計算，即得；每日用制劑量含小檗堿以鹽酸小檗堿(C2tlH17NO4 · HCl)計，不得少于 0. 8mg-8mg或不得少于3. 2mg ；其中，該藥物組合物的原料藥組成為人工牛黃0. 5-2重量份 豬膽粉7-20重量份 黃連5-15重量份珍珠1-5重量份 赭石2-6重量份 薄荷腦0. 5-2重量份桅子5-15重量份 雄黃3-9重量份 石膏5-12重量份水牛角濃縮粉7-20重量份黃芩5-15重量份 郁金5-15重量份 朱砂2-6重量份 冰片0. 5-4重量份 珍珠母2-8重量份； 該藥物組合物的制備方法為取上述原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于散 齊U、顆粒劑、片齊 、膠囊齊 、分散片、滴丸齊 、水丸劑、蜜丸齊 、微丸齊 、濃縮丸齊 、軟膠囊齊Ml 釋劑、口服液體制劑或注射劑。
2.如權利要求1所述的檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定方法中的一種 或幾種Α.桅子苷的含量測定照高效液相色譜法(附錄VI D)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 為12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸為12 32 35 0. 4或正丁醇-水-磷酸為 60 35 0.4作為流動相；檢測波長為238nm ；理論板數按桅子苷峰計算應不低于1500 ； 對照品溶液的制備精密稱取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含30μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入40%乙醇 或丙酮-40%乙醇為1 1的混合液85ml，加3%鹽酸調PH2-3，超聲提取12分鐘，濾過；濾 液置IOOml量瓶中，加氫氧化鈉調PH = 7，濾過，濾液加乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；每日 用制劑量含桅子苷(C17H24Oltl)不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ； B.黃芩苷的含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定，以十八烷基硅烷鍵合硅 膠為填充劑；以乙腈-水為12 88或正丁醇-甲醇一水-磷酸為12 40 35 0.4 或正丁醇-水-磷酸為60 35 0.4或甲醇-水-磷酸=45 55 0. 2作為流動相； 檢測波長為280nm ；理論板數按黃芩苷峰計算應不低于2500 ；對照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含60μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入85%乙醇 85ml，調PH = 7，超聲提取12分鐘，濾過；濾液置IOOml量瓶中，加3%鹽酸細1，攪勻，再加 入氫氧化鈉調PH = 7，靜置25分鐘，濾過；濾液加85%乙醇至刻度，搖勻，即得；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本品按 干燥品計算，凈黃芩、酒黃芩含黃芩苷(C21H18O11)不得少于8.0%;本發(fā)明每日用制劑量含黃 芩苷不得少于0. 6-6mg或不得少于3. 6mg ； C.黃連的含量測定供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，置IOOml量瓶中，加入2%鹽酸 70ml，超聲提取12分鐘，濾過；濾液加1-2%鹽酸乙醇溶液(即l_2ml鹽酸與IOOml乙醇的 混合液)至刻度，于45°C下水浴中加熱15分鐘，濾過；濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 04mg的溶液，作為對 照品溶液；照薄層色譜法(附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液1 μ 1、對照品溶液1 μ 1與3 μ 1，交叉 點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-水為6 2 1.5 1.5 1 或正丁醇-冰乙酸-甲醇-水為6 0.9 1.2 1為展開劑，另槽加入等體積的濃氨試 液，展開12厘米，取出，揮干，照薄層色譜法(附錄VI B薄層掃描法)進行熒光掃描，波長 λ = 356-366nm，測量供試品與對照品熒光強度的積分值，計算，即得；每日用制劑量含小 檗堿以鹽酸小檗堿(C2tlH17NO4 · HCl)計，不得少于0. 8mg-—8mg或不得少于3. 2mgo
3.如權利要求1-2任一所述的檢測方法，其特征在于該方法還包括如下鑒別方法中的 一種或幾種A.膽酸、豬去氧膽酸的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g， 研勻，加乙醇10-30ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加乙醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的 混合溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以異辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸 為10-20 5-10 2-8為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12%硫酸乙醇溶液(即8_12ml 硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在100-110°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈365nm下檢 視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；B.黃連的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/3-2/3，粉碎，加甲醇5-15ml，置水 浴上加熱回熱0. 5-1. 5小時，放冷，濾過，濾液作為供試試品溶液；對照藥材溶液的制備另取黃連對照藥材30-70mg，加甲醇3-7ml，超聲處理10-20分 鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 2-0. 7mg的溶液，作 為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2 μ 1，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水為 8-12 5-10 0.5-1.5 0. 5-1. 5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視； 供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色熒光斑點；C.桅子苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加硅藻土 0. 5-1. 5g， 研勻，加乙醚10-30ml，超聲處理3-7分鐘，濾過，棄去乙醚液，殘渣揮去乙醚，加乙酸乙酯 20-40ml，加熱回流0. 5-1. 5小時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2_細1使溶解，作為供 試品溶液；對照品溶液的制備另取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5-1. 5mg的溶液，作為 對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4 μ 1，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 為8-12 5-10 1-3 0.3-0. 7為展開劑，展開，取出，晾干，噴以8-12%硫酸乙醇溶液 (即8-12ml硫酸與IOOml乙醇的混合液)，在100_110°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜 中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；D.黃芩苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，加甲醇5-15ml，超聲 處理10-30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 1-0. 5mg的溶液，作為 對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各1 μ 1，分 別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視； 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的暗色斑點。
4.如權利要求1或2所述的檢測方法，其特征在于該方法還包括如下鑒別方法中的一 種或幾種A.膽酸、豬去氧膽酸的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加乙醇 20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取膽酸、豬去氧膽酸對照品，加乙醇制成每Iml含Img的混合溶 液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各2 μ 1，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以異辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸 為15 7 5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液(即10ml硫酸與IOOml 乙醇的混合液)，在105°C加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；B.黃連的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/2，粉碎，加甲醇10ml，置水浴上加 熱回熱1小時，放冷，濾過，濾液作為供試試品溶液；對照藥材溶液的制備另取黃連對照藥材50mg，加甲醇5ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾 液作為對照藥材溶液；對照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對 照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2 μ 1，分別點于同-以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水 為10 7 1 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中， 在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色熒光斑點；C.桅子苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加硅藻土 lg，研勻，加乙醚 20ml，超聲處理5分鐘，濾過，棄去乙醚液，殘渣揮去乙醚，加乙酸乙酯30ml，加熱回流1小 時，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇3ml使溶解，作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取桅子苷對照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品 溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各4 μ 1，分 別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水 為10 7 2 0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液(即10ml硫酸 與IOOml乙醇的混合液)，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應的位置上，顯相同顏色的斑點；D.黃芩苷的鑒別供試品溶液的制備取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，加甲醇10ml，超聲處理20 分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；對照品溶液的制備另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每Iml含0. 3mg的溶液，作為對照 品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各1 μ 1，分 別點于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視； 供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的暗色斑點。
5.如權利要求1-4任一所述的檢測方法，其特征在于該方法還包括如下含量測定方法薄荷腦和冰片的含量測定照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI E)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 色譜柱=HP-INNOWax毛細管色譜柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；檢測器溫度240°C;氣化室溫度 240°C;柱溫為程序升溫，初始溫度為150°C，保持4分鐘，以每分鐘8°C的速率升溫至200°C; 理論板數按丁香酚峰計算應不低于5000 ；內標溶液的制備取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 3-0. 7mg的溶液，搖勻，作為內 標溶液；校正因子測定另取冰片對照品10-30mg，薄荷腦對照品5-15mg，精密稱定，置25ml量 瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取 μ 1，注入氣相色譜儀，計算校正因子；取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/6-1/2，粉碎，精密稱定，加硅藻土 2-4g，精密稱定，研 勻后，取l_3g，精密稱定，置25ml量瓶中，精密加入內標溶液10-20ml與水0. 5-1. 5ml，密 塞，搖勻，稱定重量，浸漬過夜，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，吸取 Iy 1，注入氣相色譜儀，測定，即得；每日用制劑量含冰片(CltlH18O)不得少于8-12mg;含薄 荷腦(C10H20O)不得少于 6. 4-9. 6mg。
6.如權利要求1-4任一所述的檢測方法，其特征在于該方法包括如下含量測定方法薄荷腦和冰片的含量測定照氣相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI E)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 色譜柱=HP-INNOWax毛細管色譜柱(30m*0. 32mm*0. 25 μ m)；檢測器溫度240°C;氣化室溫度 240°C ；柱溫為程序升溫，初始溫度為150°C，保持4分鐘，以每分鐘8°C的速率升溫至200°C ； 理論板數按丁香酚峰計算應不低于5000 ；內標溶液的制備取丁香酚，加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，搖勻，作為內標溶液；校正因子測定另取冰片對照品20mg，薄荷腦對照品10mg，精密稱定，置25ml量瓶中， 加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取1μ 1，注入氣相色譜儀，計算校正因子；取本發(fā)明制劑日用制劑量的1/4，粉碎，精密稱定，加硅藻土 3g，精密稱定，研勻后，取 2g，精密稱定，置25ml量瓶中，精密加入內標溶液15ml與水1ml，密塞，搖勻，稱定重量，浸 漬過夜，再稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，濾過，吸取1 μ 1，注入氣相色譜儀， 測定，即得；每日用制劑量含冰片O^H18O)不得少于8-12mg;含薄荷腦(CltlH2tlO)不得少于 6. 4-9. 6mg。
7.如權利要求1-6所述的檢測方法，其特征在于該方法中所述的藥物組合物的原料藥 組成為豬膽粉13重量份 珍珠3重量份 赭石4重量份 薄荷腦1重量份 水牛角濃縮粉13重量份黃連10重量份 桅子10重量份 雄黃6重量份 石膏8重量份 珍珠母5重量份；人工牛黃1重量份 黃芩10重量份 郁金10重量份 朱砂4重量份 冰片2重量份 或人工牛黃0. 7重量份 黃芩14重量份 郁金6重量份 朱砂5重量份 冰片1重量份水 或人工牛黃1. 8重量份 黃芩6重量份 郁金14重量份 朱砂3重量份 冰片3. 5重量份
8.如權利要求1-7任一所述的檢測方法，其特征在于該方法中所述的藥物組合物的制 備方法為如下方法中的一種方法1 由如下步驟A、B、C、D和E組成 步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5 小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80%乙醇，靜置12-48小時，豬膽粉18重量份 珍珠2重量份 赭石5重量份 薄荷腦0. 7重量份 牛角濃縮粉18重量份豬膽粉9重量份 珍珠4重量份 赭石3重量份 薄荷腦1. 8重量份 水牛角濃縮粉9重量份黃連6重量份 桅子14重量份 雄黃4重量份 石膏11重量份 珍珠母3重量份；黃連14重量份 桅子6重量份 雄黃8重量份 石膏6重量份 珍珠母7重量份。取上清液回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與 原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至 稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，靜置12-48小時，取上清液回收乙醇，濃 縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A4 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與 原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至 相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱，30-80 %乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴 入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末； 步驟B:制備中間體IIBl 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入3-10%稀鹽 酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化鈉(或 其他堿液)調PH值至3-5 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙醇，靜置， 取上清液，回收乙醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B2 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入3-10% 稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化 鈉(或其他堿液)調PH值至3-5;濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙 醇，靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮至相對密度1-1.0 1.4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或B3:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入3-10%稀鹽 酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化鈉(或 其他堿液)調PH值至3-5 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙醇，靜 置，取上清液，回收乙醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取物， 混合后即得中間體II ；或混合干燥后得中間體II的粉末；或B4:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，，分別加入3-10% 稀鹽酸，用量為5-15重量倍，使成混懸液，靜置12-48小時，過濾，濾液用10-20%氫氧化 鈉(或其他堿液)調PH值至3-5;濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入8-10重量倍的乙 醇，靜置，取上清液，回收乙醇，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取 物，混合后即得中間體II ；或混合干燥后得中間體II的粉末； 步驟C:制備中間體IIICl 取豬膽粉和雄黃碎成細粉，混合，加入3-5%氫氧化鈉4-8重量倍，靜置12-48小 時，過濾，濾液調PH值至3-5，濃縮，加入30-80%乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，濃 縮，即得中間體III ；或干燥后得中間體III的粉末；或C2 取豬膽粉碎成細粉，加入3-5%氫氧化鈉4-8重量倍，靜置12-48小時，過濾，濾 液調PH值至3-5，濃縮，加入30-80 %乙醇8-15重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮，即得豬膽粉提取物，或干燥后得豬膽粉提取物粉末；取雄黃粉碎成細粉，加入4-8重量倍5-10%鹽 酸，靜置8-M小時，過濾，濾液調PH值至3-5，濃縮，加入水洗至無色，即得雄黃提取物，或干 燥后得雄黃提取物粉末；將豬膽粉提取物與雄黃提取物混合，得中間體III或得中間體III 的粉末；步驟D 制備藥粉Dl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉； 或D2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加5-8重量倍水研至糊狀，再按 1 60-70加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復3-6次，合并各次混懸 液，靜置，取沉淀于25-45°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合 得藥粉；步驟E 制劑將中間體Ι、Π、ΙΙΙ或中間體Ι、Π、ΙΙΙ的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料 制成藥學上可接受的劑型，如散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、分散片、滴丸劑、水丸劑、蜜丸劑、 微丸劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑； 方法2 由如下步驟Α、B、C和D組成 步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5 小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30-80%乙醇，靜置12-48小時， 取上清液回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取2-4次，每次 0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 0 1. 4，離心，上清液過大孔樹脂柱， 30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與 原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至 稠膏；稠膏中加入4-10重量倍的30% -80%乙醇，靜置12-48小時，取上清液回收乙醇，濃 縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α4 將郁金先加熱水回流提取2-4次，每次0. 5-2. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與 原料藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮2-4次，每次0. 5-2. 5小時，合并水煎液，濃縮至 相對密度1-1.0 1.4，離心，上清液過大孔樹脂柱，30-80%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴 入揮發(fā)油，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末； 步驟B 制備中間體IIBl 將原料藥水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠、珍珠母、豬膽粉和雄黃粉碎成細粉，混合， 加入4-10重量倍的30-80%乙醇，40-60°C溫浸12-48小時，過濾，取濾液，回收乙醇，濃縮， 即得中間體Π ；或干燥后得中間體II的粉末； 步驟C:制備藥粉Cl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉； 或C2 將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加5-8重量倍水研至糊狀，再按 1 60-70加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復3-6次，合并各次混懸 液，靜置，取沉淀于25-45°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合得藥粉；步驟D 制劑將中間體I、II或中間體I、II的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成藥學 上可接受的劑型，如散齊 、顆粒劑、片齊 、膠囊齊 、分散片、滴丸齊 、水丸齊 、蜜丸齊 、微丸齊U、 濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑。
9.如權利要求8所述的檢測方法，其特征在于該方法中所述的藥物組合物的制備方法 為如下方法中的一種方法1 由如下步驟Α、B、C、D和E組成 步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小時， 合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回收乙 醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小 時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙 醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原料藥 黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加 入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體 I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α4 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原料 藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度 1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末； 步驟B 制備中間體IIBl 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入6%稀鹽酸， 用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿液)調 PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液，回收乙 醇，濃縮，即得中間體II ；或干燥后得中間體II的粉末；或Β2 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，混合；加入6%稀鹽 酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿液) 調PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液，回收 乙醇，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50 %乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮， 即得中間體Π ；或干燥后得中間體II的粉末；或Β3 分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入6%稀鹽酸， 用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿液)調 PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液，回收乙 醇，濃縮，分別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中間體II ； 或混合干燥后得中間體II的粉末；或Β4:分別將水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母研成細粉，分別加入6%稀鹽酸，用量為10重量倍，使成混懸液，靜置M小時，過濾，濾液用15%氫氧化鈉(或其他堿液)調 PH值至4 ；濾過，濾液濃縮至稠膏，濃縮液中加入9重量倍的乙醇，靜置，取上清液，回收乙 醇，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50 %乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，分 別得水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠和珍珠母的提取物，混合后即得中間體Π ；或混合干燥 后得中間體II的粉末； 步驟C:制備中間體IIICl 取豬膽粉和雄黃碎成細粉，混合，加入4%氫氧化鈉6重量倍，靜置M小時，過濾， 濾液調PH值至4，濃縮，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮，即得中間體 III ；或干燥后得中間體III的粉末；或C2 取豬膽粉碎成細粉，加入4%氫氧化鈉6重量倍，靜置M小時，過濾，濾液調PH 值至4，濃縮，加入50%乙醇12重量倍；取上清液，回收乙醇，濃縮，即得豬膽粉提取物，或干 燥后得豬膽粉提取物粉末；取雄黃粉碎成細粉，加入6重量倍8%鹽酸，靜置M小時，過濾， 濾液調PH值至4，濃縮，加入水洗至無色，即得雄黃提取物，或干燥后得雄黃提取物粉末；將 豬膽粉提取物與雄黃提取物混合，得中間體III或得中間體III的粉末； 步驟D 制備藥粉Dl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，混合得藥粉； 或D2:將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加6重量倍水研至糊狀，再按1 65 加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復4次，合并各次混懸液，靜置，取沉 淀于35°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合得藥粉； 步驟E 制劑將中間體Ι、Π、ΙΙΙ或中間體Ι、Π、ΙΙΙ的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料 制成藥學上可接受的劑型，如散齊 、顆粒劑、片齊 、膠囊齊 、分散片、滴丸齊 、水丸劑、蜜丸齊U、 微丸劑、濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑； 方法2 由如下步驟Α、B、C和D組成 步驟A 制備中間體IAl 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小時， 合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回收乙 醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α2 將原料藥黃芩、黃連、桅子、郁金和石膏共同加熱水回流提取3次，每次1. 5小 時，合并水煎液，濃縮至相對密度1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50%乙醇洗脫，回收乙 醇，濃縮，即得中間體I ；或干燥后得中間體I的粉末；或A3 將郁金先加熱水回流提取3次，每次1. 5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原料藥 黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至稠膏；稠膏中加 入7重量倍的50%乙醇，靜置M小時，取上清液回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間體 I ；或干燥后得中間體I的粉末；或Α4:將郁金先加熱水回流提取3次，每次1.5小時，揮發(fā)油備用；郁金藥渣與原料 藥黃芩、黃連、石膏和桅子共同水煎煮3次，每次1. 5小時，合并水煎液，濃縮至相對密度 1-1. 2，離心，上清液過大孔樹脂柱，50 %乙醇洗脫，回收乙醇，濃縮，噴入揮發(fā)油，即得中間 體I ；或干燥后得中間體I的粉末；步驟B:制備中間體IIBl 將原料藥水牛角濃縮粉、人工牛黃、珍珠、珍珠母、豬膽粉和雄黃粉碎成細粉，混合， 加入7重量倍的50%乙醇，50°C溫浸M小時，過濾，取濾液，回收乙醇，濃縮，即得中間體 II ；或干燥后得中間體II的粉末； 步驟C:制備藥粉Cl 分別將冰片、薄荷腦、朱砂和赭石制備極細粉，分別或混合得藥粉； 或C2:將冰片、薄荷腦和赭石制備極細粉，將朱砂加6重量倍水研至糊狀，再按1 65 加入水攪拌，靜置，傾出混懸液，沉渣再研磨；如上法反復4次，合并各次混懸液，靜置，取沉 淀于35°C涼干，研粉即得朱砂極細粉；將上述四種原料藥的極細粉混合得藥粉； 步驟D 制劑將中間體I、II或中間體I、II的粉末與藥粉混合，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成藥學 上可接受的劑型，如散齊 、顆粒劑、片齊 、膠囊齊 、分散片、滴丸齊 、水丸齊 、蜜丸齊 、微丸齊U、 濃縮丸劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或注射劑。
10.如權利要求8-9任一所述的檢測方法，其特征在于該方法中所述的藥物組合物的 制備工藝中的任意步驟由常規(guī)方法替代；所述大孔樹脂柱型號均為YPR-II，X5，AB-8，HPD-100，DX-5，DlOl，DA201，DM130，WLD-3 或 ΝΚΑ-9。
全文摘要
本發(fā)明公開了中藥安腦丸及其配方原料制成的制劑的檢測方法。本發(fā)明檢測方法包括鑒別和/或含量測定方法，其中鑒別方法為膽酸、豬去氧膽酸的鑒別、黃連的鑒別、梔子苷的鑒別和黃芩苷的鑒別中的一種或幾種，含量測定方法為梔子苷、黃芩苷、黃連、薄荷腦和冰片含量測定方法中的一種或幾種。本發(fā)明所述檢測方法均表現良好的線性關系、精密度、穩(wěn)定性、重現性和回收率，對于嚴格控制安腦丸及其制劑的質量具有重要意義。
文檔編號A61K35/56GK102058828SQ20091023756
公開日2011年5月18日 申請日期2009年11月12日 優(yōu)先權日2009年11月12日
發(fā)明者劉麗穎, 鄭松濤 申請人:劉麗穎