專利名稱：一類治療乙型肝炎的嘌呤類衍生物、其制備方法與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物合成和藥理學(xué)領(lǐng)域。具體地，涉及含有L-氨基酸和非留類抗炎藥 基團(tuán)的非環(huán)核苷膦酸酯類化合物及其組合物的制備方法，以及該類化合物在制備抗病毒藥 物中的用途。
背景技術(shù)：
乙型肝炎病毒Ofepatitis B Virus, HBV)，是最易感染人類的病毒之一。WHO報(bào) 告認(rèn)為全球有超過20億人曾被感染，目前仍約有3. 5-4億為慢性HBV感染者。統(tǒng)計(jì)表明 世界上有80%的肝癌病例都是由于乙肝病毒感染而引起的，此外乙肝病毒感染也是引起 肝衰竭的主要原因，全世界每年約有一百萬(wàn)人死于與乙型肝炎病毒感染相關(guān)的肝疾病。當(dāng) 前，治療乙型肝炎病毒感染主要有兩個(gè)途徑一是免疫治療，如α干擾素；二是針對(duì)病毒 靶點(diǎn)進(jìn)行抗病毒治療，如核苷類化合物(包括核苷類似物和非環(huán)核苷膦酸酯)。目前已有 三個(gè)非環(huán)核苷膦酸酯類藥物上市，其中阿德福韋酯(Adefovir Dipivoxil, ADV)是2002 年經(jīng)FDA批準(zhǔn)第一個(gè)用于治療慢性乙肝的小分子非環(huán)核苷膦酸前藥，該藥能明顯改善乙 型肝炎患者肝臟組織學(xué)性質(zhì)，降低血清HBV-DNA及轉(zhuǎn)氨酶水平，增加e抗原(HBeAg)轉(zhuǎn)化 率(Yuen，M.-F. Expert Opin Pharmacother 2004,5, (11) :2361)。盡管阿德福韋酯具 有以上優(yōu)點(diǎn)，但是臨床研究發(fā)現(xiàn)其不足是產(chǎn)生劑量依耐性腎毒性，釋放出具有細(xì)胞毒性 的特戊酸和甲醛，同時(shí)化合物在胃腸液中穩(wěn)定性較差，不能有效增加作用靶點(diǎn)的藥物濃 it (RouIa B.Clinical Therapeutics 2003,25(12) 3084 ；Nozomu Τ.Human Pathology 2001,32(7)734 ；Douglash, H. S. Am J Physiol RenalPhysiol. 2001,281, F 197)。研究表 明Adefovir Dipivoxil設(shè)計(jì)上是將外源性的片段與非環(huán)核苷膦酸通過酯鍵相連接，因而在 釋放原藥阿德福韋的過程中可能會(huì)產(chǎn)生有細(xì)胞毒性的載體片段；另外該前藥設(shè)計(jì)上沒有考 慮到如何降低載體裂解后形成的膦酸雙負(fù)離子所產(chǎn)生的劑量依賴性腎毒性，從而在一定程 度上可能限制這些前藥的臨床應(yīng)用。在前期研究中我們根據(jù)小腸黏膜肽轉(zhuǎn)運(yùn)體(PEPTl)對(duì)寡肽的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)理和已 報(bào)道的核苷L-氨基酸酯類抗病毒前藥的設(shè)計(jì)原理(Isabel，Rubio-A. TrendsPharmacol Sci 2003,23,(9) :434)，設(shè)計(jì)、合成了未見報(bào)道的新型阿德福韋雙L-氨基酸酯前藥。抗HBV 活性研究發(fā)現(xiàn)該類化合物具有較阿德福韋酯更強(qiáng)的抗HBV活性，更低的細(xì)胞毒性和更高的 血菜穩(wěn)定性(Xiaozhong Fu. Bioorg MedChem Lett. 2007,17(2) :465-470)。通過對(duì)阿德福韋酯產(chǎn)生劑量依賴性腎毒性的病因?qū)W機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，藥物進(jìn)入血 液循環(huán)后裂解形成的阿德福韋膦酸雙負(fù)離子能被存在于腎小管基底膜上的有機(jī)陰離子轉(zhuǎn) 運(yùn)體l(hOATl)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)而沉積于腎臟近曲小管內(nèi)，后者通過抑制近曲小管上皮細(xì)胞線粒 體DN(mtDNA)的復(fù)制從而使mtDNA耗碣，并最終降低由mtDNA編碼的細(xì)胞色素C氧化酶 (COX)水平，破壞上皮細(xì)胞氧化呼吸過程是藥物產(chǎn)生腎毒性的根本原因(Edmund，S. H.J Am Soc Nephrol. 2000,11,383 ；Roula B. Clinical Therapeutics 2003,25(12) :3084)。藥理 學(xué)研究發(fā)現(xiàn)在阿德福韋的治療濃度下，非留體抗炎藥(NSAIDs)如布洛芬(Ibuprofen)，酮洛芬(Ketoprofen)，氟比洛芬(Flurbiprofen)，萘普生(Naproxen)等能有效抑制hOATl 介導(dǎo)的阿德福韋跨腎小管基底膜轉(zhuǎn)運(yùn)過程并降低后者產(chǎn)生的腎細(xì)胞毒性，非甾體抗炎藥 對(duì)阿德福韋的轉(zhuǎn)運(yùn)抑制機(jī)理與丙磺舒相同，且其半數(shù)抑制濃度低于丙磺舒，研究同時(shí)還發(fā) 現(xiàn)NSAIDs不影響阿德福韋酯的抗病毒活性。另外上述NSAIDs對(duì)表達(dá)hOATl的中國(guó)倉(cāng)鼠 卵巢細(xì)胞(CHOmat)生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度遠(yuǎn)大于其對(duì)hOATl介導(dǎo)的阿德福韋跨腎小管基底 膜轉(zhuǎn)運(yùn)的半數(shù)抑制濃度(Andrew，S.M.J Pharmacol Exp The. 2000,295,10 ；Tomas Cihlar Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids, 2001, 20 (4-7) :641)。研究同時(shí)發(fā)現(xiàn)可 以利用hOATl介導(dǎo)的非甾體抗炎藥與阿德福韋之間的相互轉(zhuǎn)運(yùn)拮抗關(guān)系實(shí)現(xiàn)臨床上降 低兩類藥物腎毒性而不降低其治療效果的策略(Douglas H. S. Toxicology andApplied Pharmacology 2005，204，198)。這些研究表明NSAIDs在不產(chǎn)生細(xì)胞毒性的前提下可以有 效抑制腎小管上皮細(xì)胞對(duì)阿德福韋吸收，減少阿德福韋的腎細(xì)胞毒性。本專利以降低阿德福韋酯臨床應(yīng)用中產(chǎn)生的劑量依耐性腎毒性為關(guān)鍵突破口，以 具有較高抗HBV活性與較低細(xì)胞毒性的阿德福韋雙L-氨基酸酯為先導(dǎo)化合物，運(yùn)用藥物設(shè) 計(jì)中的結(jié)構(gòu)拼合原理將L-氨基酸與非甾體抗炎藥物結(jié)構(gòu)片段同時(shí)引入阿德福韋的膦酸基 團(tuán)上設(shè)計(jì)、合成阿德福韋單L-氨基酸酯，單非留體抗炎藥物羧酸酯前藥，旨在利用前藥結(jié) 構(gòu)中的L-氨基酸酯片段提高其抗HBV活性與作用選擇性，利用非留體抗炎藥物片段降低其 腎毒性，以期發(fā)現(xiàn)具有較高抗病毒活性、較低腎毒性的抗HBV阿德福韋前藥。從而實(shí)現(xiàn)降低 阿德福韋酯臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的劑量依賴性腎毒性同時(shí)提高藥物的抗HBV活性的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類具有抗乙肝病毒活性的嘌呤類化合物及其藥理上可以 接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)鹽結(jié)晶水合物、溶劑合物。本發(fā)明的另一目的是提供上述化合物的制備方法本發(fā)明的再一目的是提供包含上述化合物的藥物組合物本發(fā)明的再一目的是提供上述化合物的醫(yī)藥用途本發(fā)明的再一目的是提供上述組合物的醫(yī)藥用途本發(fā)明提供了一類具有以下結(jié)構(gòu)式I所示結(jié)構(gòu)的嘌呤類化合物及其藥理上可以 接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)鹽結(jié)晶水合物、溶劑合物。
權(quán)利要求
1. 一類具有以下結(jié)構(gòu)式(I)所示的嘌呤類化合物及其藥理上可以接受的有機(jī)、無(wú)機(jī)鹽 結(jié)晶水合物、溶劑合物。
2.如權(quán)利要求1所述的嘌呤類化合物，其特征再于，所述化合物為1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單阿司匹 林丙基酯2)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單阿司匹 林丙基酯3)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單阿司 匹林丙基酯4)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單阿司 匹林丙基酯5)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基甘氨酸丙基酯，單布洛芬丙基6)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-丙氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯7)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯8)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單布洛芬 丙基酯9)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單布洛 芬丙基酯10)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單布洛 芬丙基酯11)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基甘氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯12)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-丙氨酸丙基酯，單氟比洛 芬丙基酯13)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-纈氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯14)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-亮氨酸丙基酯，單氟比洛 芬丙基酯的合成15)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-異亮氨酸丙基酯，單氟比 洛芬丙基酯16)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單N-叔丁氧羰基L-苯丙氨酸丙基酯，單氟比 洛芬丙基酯17)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯18)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯19)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯20)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單阿司匹林丙基酯21)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單甘氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯22)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-丙氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯23)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯24)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯25)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯26)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單布洛芬丙基酯27)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單甘氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯28)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-丙氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯29)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-纈氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯30)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-亮氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯的合成31)9-[2-(膦酰基甲氧基)乙基]腺嘌呤單L-異亮氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯32)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤單L-苯丙氨酸丙基酯，單氟比洛芬丙基酯
3. 一種用于制備權(quán)利要求1的嘌呤類化合物的方法，其特征在于所述方法包括以下步驟(1)9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤(PMEA)與N-叔丁氧羰基-L-氨基酸3-溴丙 基酯在極性非質(zhì)子溶劑中，以N，N' -二環(huán)己基-4-嗎啉基-脒(DCMC)或1，8_ 二氮雜雙 環(huán)[5、4、0]十一烷-7烯為堿，反應(yīng)得到化合物。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟1)中N-叔丁氧羰基-L-氨基酸 3-溴丙基酯加入量與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的比例為1.0 5. 5 Imol, 在30-90°C下反應(yīng)4 48小時(shí)，優(yōu)選N-叔丁氧羰基-L-氨基酸3-溴丙基酯與9-[2-(膦酰 基甲氧基)乙基]腺嘌呤的比例為1.0 2.0 Imol以N，N' -二環(huán)己基_4_嗎啉基-脒 (DCMC)為堿，在N，N- 二甲基甲酰胺為溶劑條件下，在30 60°C下反應(yīng)4 10小時(shí)。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟2)中非留體抗炎藥3-溴丙基酯加入 量與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌呤的比例為1.0 5. 5 lmol，在60 120°C下 反應(yīng)10 48小時(shí)，優(yōu)選非留體抗炎藥3-溴丙基酯與9-[2-(膦?；籽趸?乙基]腺嘌 呤比例為1.0 2.0 lmol，體系在60 100°C反應(yīng)10 18小時(shí)。
6.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟3)溶劑可以選用氯仿、二氯甲烷或四 氫呋喃，或者在乙酰氯/甲醇體系中，在-10 25°C下反應(yīng)0. 2 16小時(shí)，優(yōu)選在氯仿為溶 劑條件下，體系用85%磷酸在_5°C 室溫下反應(yīng)8 12小時(shí)，或乙酰氯/甲醇體系0°C 25°C反應(yīng)5-12小時(shí)，獲得目標(biāo)化合物。
7.—種藥物組合，其特征在于包括有效治療劑量的權(quán)利要求1的嘌呤類化合物、以及 輔劑。
8.權(quán)利要求1所述的嘌呤類化合物在制備用于治療乙型肝炎的藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1所述的嘌呤類化合物在治療乙型肝炎的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明設(shè)計(jì)藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體地本發(fā)明涉及一類能夠治療乙型肝炎的具有以下結(jié)構(gòu)通式I所示結(jié)構(gòu)的嘌呤類化合物及其藥理上可接受的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸鹽、及其制備方法與用途。藥理實(shí)驗(yàn)證明，這類化合物具有明顯的抗乙肝病毒活性，可用于制備抗病毒藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P1/16GK102070670SQ20091010287
公開日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2009年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日
發(fā)明者傅曉鐘, 蘭燕宇, 周雯, 李勇軍, 歐瑜, 王永林, 王愛民, 羅春, 鄭林, 黃勇 申請(qǐng)人:貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院