專利名稱：一種合成5,6,4’-三羥基黃酮-7-0-d-葡萄糖醛酸的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥物化學領域，具體涉及一種合成5， 6， 4'-三羥基黃酮 -7-0-D-葡萄糖醛酸的方法。
背景技術：
在天然藥物中，黃酮是黃酮類化合物中最常見的一種，約占黃酮類 化合物總數(shù)的四分之一以上，具有明顯的結構多樣性?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)黃酮類
化合物具有多種生理活性，主要有抗心腦血管疾病、抗炎、抗肝臟病
毒、保肝、抗菌、抗癌、抗氧化等作用。其中，5， 6， 4'-三羥基黃酮 -7-0-D-葡萄糖醛酸，又稱為燈盞乙素或野黃芩苷(scLitellarin，結構 如圖一所示)，具有降低腦血管阻力，改善腦血循環(huán)、增加腦血流量及 抗血小板凝集的作用。目前，天然來源的5， 6， 4'-三羥基黃酮-7-O-D-葡萄糖醛酸已開發(fā)成注射劑、片劑和顆粒劑等多種劑型在臨床上用于治 療缺血性腦血管疾病，如腦血栓形成、腦栓塞、腦溢血等所致后遺癥癱 瘓病人等，具有較好的療效。因此，5， 6， 4，-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄 糖醛酸有著廣闊的市場空間。
在我國，目前已發(fā)現(xiàn)只有少數(shù)藥用植物含有燈盞乙素，其中主要品 種有唇形科植物高黃芩(5"c^e72sw'a W""iz^L.)的葉，黃芩(6". 6aicWe/L j's Georgi)的莖、葉以及半枝蓮(6".萬arZ ars D. Don)全草， 等等，因此，天然資源極其有限，大量開發(fā)對生態(tài)環(huán)境將造成極大破壞。 另外，近年來隨著燈盞乙素臨床療效的肯定和應用范圍的拓展，其市場 需求量也呈逐年增加的趨勢。
綜上所述，因此有必要研究其化學合成的有效路徑，降低其原料藥 的生產成本，減少對自然資源的過度依賴，盡快滿足國內外醫(yī)藥市場的 現(xiàn)實需求。早在1974年，F(xiàn)arkas等就首次完成了 5， 6， 4，-三羥基黃 酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的全合成研究，但總收率僅0.6%，不可能實現(xiàn)工 業(yè)化生產。近年來，國內外有很多關于其全合成方法的報道，其中Cui等(JIAN-Mei Cui， GANG Fang， YA-Bo Duan. Total synthesis of scutellarin—7—O—Glucuronide. /0〃777aJ ^57'a" jVatiAra2 j^toc/〃cz^s M朋rc力.2005， 7(4): 655-660)優(yōu)化了 Farkas的合成路線，將總收 率提高至13%，仍然難以產業(yè)化。因此，文獻方法雖然具有一定的實用 價值，但與天然提取物相比仍然沒有競爭優(yōu)勢，所以有必要進一步探討 燈盞乙素的化學合成方法。
經(jīng)典的黃酮類化合物的合成方法主要有二條路線，即查耳酮路線和 丙二酮路線。近年來，許多新技術、新方法在黃酮類化合物合成中得到 了廣泛應用，即改進的Baker-Venkataraman法、催化羰基化等方法在 構建黃酮骨架中得到了巧妙的應用。報道的合成方法的共同點均放在黃 酮骨架化合物中間體的構建上。其實，按現(xiàn)有的技術水平和工業(yè)條件， 化學合成建構黃酮骨架并不難，生產成本還可以降得更低，更何況還有 大量的黃酮類化合物的植物資源。Cui等(JIAN-Mei Cui， GANG Fang， YA-Bo Duan. Total synthesis of seutellarin-7-O-Glucuronide. 力iAT朋2 0/爿si朋jYat〃raJ jProc/〃ct51 ^fesearc力.2005， 7(4) : 655-660) 利用Baker-Venkataraman法通過丙二酮路線完成了 5， 6， 4，-三羥基黃酮 -7-0-D-葡萄糖醛酸的全合成，存在產率低、合成路線長等缺點(具體 路線見圖二)。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種原料易得，合成路線簡便，產率高，對 環(huán)境友好的5， 6， 4，-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的化學合成方法。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的
本發(fā)明一種合成5， 6， 4'-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的方法， 其特征在于原料為3， 4, 5-三乙酰氧基苯酚與對乙酰氧基肉桂酸酰氯， 通過傅-克?；磻瓿刹槎暮铣?，査耳酮在碘的DMS0溶液中 氧化下成環(huán)，形成黃酮的母體結構，然后，對黃酮母體的酚羥基進行保 護和選擇性去保護，再進行7位酚羥基的糖苷化；最后得到目標化合物。
以3， 4, 5-三乙酰氧基苯酚和對乙酰氧基肉桂酸酰氯為起始原料， 在BF:,-Et20溶液中，通過傅-克酰基化反應，完成查耳酮的合成，査耳 酮在碘的氧化下成環(huán)，形成黃酮的母體結構，由于黃酮7位酚羥基具有
較強的酸性，用乙?；Ｗo酚羥基及芐基選擇性烴化保護黃酮的7位酚 羥基，然后在Pd/C氫氣的環(huán)境下脫掉7位的芐基，或者用醋酸-濃硫酸體系脫掉7位的芐基。然后利用裸露出來7位酚羥基與溴代三乙酰氧基 -D-葡萄糖醛酸甲酯進行苷化，制備得到乙酰氧基與甲氧基保護的5， 6， 4，-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸。最后，通過酯水解反應脫除各保護 基，從而得到目標化合物，目標化合物的空間構型為P構型，粗品經(jīng)純 化、重結晶和真空干燥后得到成品。
本發(fā)明的制備方法包括3， 4， 5-三乙酰氧基苯酚和對乙酰氧基肉桂 酸酰氯通過傅-克酰基化反應、環(huán)氧化、酚羥基的保護與去保護、糖苷 化、去保護基等過程。具體的合成路線如圖三所示以3， 4， 5-三乙酰 氧基苯酚和對乙酰氧基肉桂酸酰氯為起始原料，經(jīng)傅-克?；磻?環(huán)氧化、酚羥基去保護、糖苷化、去保護基等過程，最終得到成品。總 體來說，該方法具有操作簡便，環(huán)境友好，產物純度高的特點。
經(jīng)HPLC分析，成品中5， 6， 4'-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的 含量為99.31%。整條合成路線以3， 4， 5-三乙酰氧基苯酚計，目標化 合物5， 6， 4'-三羥基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的產率為38%，經(jīng)紅外、 核磁共振、質譜與高效液相分析，目標產物與文獻值基本吻合。該路線 的優(yōu)勢在于合成步驟僅六步，所有試劑均廉價易得，產物的空間選擇性 強，有利于產業(yè)化。


圖1為5， 6， 4'-三輕基黃酮-7-0-D-葡萄糖醛酸化學結構。 圖2為已有技術合成路線圖。 圖3為本發(fā)明合成路線圖。
具體實施例方式
實施例1
取2.68 g 3， 4， 5-三乙酰氧基苯酚與2.50 g對乙酰氧基肉桂酸 酰氯，置入20 mL BF3-EO)溶液，使之充分溶解，加入2g 4A分子篩， 加熱回流15分鐘，停止加熱，過濾，用石油醚-醋酸乙酯(3:1)重結 晶，得到9-羥基-5，6，7，4，-四乙酰氧基査耳酮，共4.15 g，該步驟的 轉移率為91%。
取4.56g 9-羥基-5，6，7，4，-四乙酰氧基查耳酮，200 mg的碘，溶 入25 mL DMS0中，回流2小時，然后小心傾入200 g碎冰中，過濾， 沉淀用20 % Na2S03洗滌，以石油醚-醋酸乙酯(10 : 1)重結晶，得到 5， 6， 7， 4，-四乙酰氧基黃酮3.95 g，轉移率為87%。取4. 54g 5， 6， 7， 4，-四乙酰氧基黃酮、5.25 g K2C03、 0.21 g KI， 2. 3mLPhCH2Cl，置于600 mL干燥丙酮中，40 45。C下加熱回流4小時。 反應完成后，溶液用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。萃取液減壓回收溶劑， 產物用乙醇重結晶，得到3.77g 7-芐氧基-5，6，4，-三乙酰氧基黃酮， 轉移率為75%。
取5g 7-芐氧基-5， 6, 4，-三乙酰氧基黃酮、1 g 10 % Pd-C催化劑， 分散于100 mL四氫呋喃溶液中，通入氫氣，常溫常壓下加氫，至溶液 不再吸收氫氣為止。反應結束后，過濾回收催化劑，溶液傾入400 g碎 冰中。過濾得到沉淀，產物用乙醇重結晶，得到3.9g7-羥基-5，6，4，-三乙酰氧基黃酮，轉移率為92 %。
取4. 12g 7-羥基-5，6，4，-三乙酰氧基黃酮、8.8 g溴代三乙酰氧 基-D-葡萄糖醛酸甲酯、4 g干燥的CaS04、 5.6 g Ag20和80 mL喹啉， 置于干燥的圓底燒瓶中，混合物在室溫下攪拌5小時，然后用CHCl3稀 釋，過濾，取有機層。有機層用稀硫酸洗滌，回收溶液，得到產物。產 物用乙醇重結晶，得到7.01g 5, 6， 4，-三乙酰氧基黃酮-7-0-三乙酰氧 基-D-葡萄糖醛酸甲酯，轉移率為96%。
取7. 3g 5， 6， 4，-三乙酰氧基黃酮-7-O-三乙酰氧基-D-葡萄糖醛酸 甲酯，250 mL丙酮，置于將有滴液漏斗和溫度計的三頸燒瓶中。冰水 浴控制溶液的溫度為O °C，反應體系加氮氣保護。緩慢滴入濃度為2.5 M的氫氧化鈉溶液，保持溶液溫度在0 。C，加入150 mL氫氧化鈉溶液 后，停止滴加，繼續(xù)攪拌l小時。滴加稀鹽酸，調節(jié)pH值為4.5，繼續(xù) 攪拌0.5小時。得到的黃色沉淀用乙醇重結晶，干燥，得到3.37 g目 標化合物，產率為73 %。 '
實施例2
目標產物的純化
取全成產品100 g，加入1000 mL純水，用30%氫氧化鈉溶液，調 pH值至7，使完全溶解，濾過，濾液在25'C下加8倍丙酮，進行沉淀， 邊加丙酮邊攪拌，使沉淀完全，靜置12小時，濾過，加丙酮洗滌三次， 再將沉淀物移至另一容器中，加入6倍量40%丙酮，攪勻，再加25%鹽 酸調pH值至l 2，靜置10小時，抽濾，用水洗滌至中性，再加乙醇洗 一次，烘干，即得精制品。HPLC分析，所得樣品中5， 6， 4'-三羥基黃 酮-7-0-D-葡萄糖醛酸的含量為99. 31%。
權利要求
1、一種合成5，6，4’-三羥基黃酮-7-O-D-葡萄糖醛酸的方法，其特征在于原料為3，4，5-三乙酰氧基苯酚與對乙酰氧基肉桂酸酰氯，通過傅-克?；磻?，完成查耳酮的合成，查耳酮在碘的DMSO溶液中氧化下成環(huán)，形成黃酮的母體結構，然后，對黃酮母體的酚羥基進行保護和選擇性去保護，再進行7位酚羥基的糖苷化；最后得到目標化合物。
2、根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于以3， 4， 5-三乙酰氧 基苯酚和對乙酰氧基肉桂酸酰氯為起始原料，在BF廠Et20溶液中，通過 傅-克?；磻瓿刹槎暮铣?，査耳酮在碘的氧化下成環(huán)，形 成黃酮的母體結構，由于黃酮7位酚羥基具有較強的酸性，用乙?；Ｗo酚羥基及芐基選擇性;徑化保護黃酮的7位酚羥基，然后在Pd/c氫氣的環(huán)境下脫掉7位的芐荃，或者用醋酸-濃硫酸體系脫掉7位的芐基。 然后利用裸露出來7位酉分羥基與溴代三乙酰氧基-D-葡萄糖醛酸甲酯進 行苷化，制備得到乙酰氧基與甲氧基保護的5， 6， 4'-三羥基黃酮 -7-0-D-葡萄糖醛酸。最后，通過酯水解反應脫除各保護基，從而得到 目標化合物，目標化合物的空間構型為P構型，粗品經(jīng)純化、重結晶和 真空干燥后得到成品。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種制備5，6，4’-三羥基黃酮-7-O-D-葡萄糖醛酸的化學方法，解決已有合成方法原料難得，合成路線長，合成產率低的問題。該方法包括多步化學反應首先用3，4，5-三乙酰氧基苯酚與對乙酰氧基肉桂酸酰氯為原料經(jīng)傅-克酰基化反應，構建查耳酮結構，環(huán)醚化得到黃酮母體；然后對其酚羥基進行保護和選擇性去保護，再進行7位酚羥基的糖苷化；最后脫保護基得到目標化合物；該方法所得產品的空間構型為構型。本發(fā)明的方法可以制備得到高純度和高質量的5，6，4’-三羥基黃酮-7-O-D-葡萄糖醛酸產品。
文檔編號A61P7/00GK101538299SQ200910059140
公開日2009年9月23日 申請日期2009年4月29日 優(yōu)先權日2009年4月29日
發(fā)明者何正有, 劉君焱, 潔 姚, 張建強, 李薔薇, 放 楊, 偉 熊, 鄧小寬 申請人:四川抗菌素工業(yè)研究所有限公司