專利名稱：：一種抗感染藥物組合物和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種抗感染藥物組合物和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：香鱗毛蕨(DryopterisfragransL.)為鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物，主要生長在黑龍江省五大連池及華北地區(qū)。該藥目前還未收入藥典，國內(nèi)外對其研究只涉及到生藥學(xué)、化學(xué)和藥效學(xué)的理論研究。本申請人長期深入的致力于香鱗毛蕨的相關(guān)研究，并取得了研究成果。在2005年5月第36巻第5期的《中草藥》上發(fā)表了《香鱗毛蕨對真菌的抑制作用》，闡述了香鱗毛蕨提取物的抗真菌作用；在2006年4月第22巻第2期的《中草藥》發(fā)表了香鱗毛蕨C02超臨界萃取物的GC-MS分析》一文，公開了首次從香鱗毛蕨中分離得到的15種脂溶性成分；在2006年7月第37巻第7期的《中草藥》中發(fā)表了從香鱗毛蕨乙醇提取物中分離鑒定出的3個化合物，并提供了提取和分離方法；特別是在2006年6月第29巻第6期的《中藥材》中發(fā)表了《香鱗毛蕨中間苯三酚衍生物的研究》一文，利用多種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)并輔以化學(xué)方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，分離出4個單體，分別鑒定為AspidinPB(I)、Dryofragin(II)、Aspidinol(lll)、AspidinBB(IV)。申請人對其進(jìn)行了生藥學(xué)研究，部分藥效學(xué)及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)化學(xué)研究，實驗結(jié)果顯示香鱗毛蕨具有良好的藥用價值。但香鱗毛蕨中間苯三酚衍生物具體應(yīng)用于制備藥物還未見技術(shù)報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種抗感染藥物組合物。本發(fā)明的另一個目的是提供所述抗感染藥物組合物的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來予以實現(xiàn)本發(fā)明提供一種抗感染藥物組合物，由香鱗毛蕨提取物和藥學(xué)上常用的輔料組成，所述香鱗毛蕨提取物所占重量百分比為199%;所述香鱗毛蕨提取物包括香鱗毛蕨素(Dryofragin)、綿馬素AB(AspidinAB)、綿馬素PB(AspidinPB)、綿馬素BB(AspidinBB)、綿馬酚(Aspidinol)和折葉苔醇(Albicanol)。本發(fā)明技術(shù)方案之一是直接采用香鱗毛蕨提取物配以輔料利用常規(guī)技術(shù)制備得到組合物，作為優(yōu)選的方案，所述香鱗毛蕨提取物中六種成分所占重量百分比為199%，所述藥學(xué)上常用的輔料所占重量百分比為991%。本發(fā)明技術(shù)方案之二是提供一種更優(yōu)的組合，通過大量實驗確定上述六種成分的具體配比，獲得更好的抗感染效果。本發(fā)明確定的香鱗毛蕨素(Dryofragin)、綿馬素AB(AspidinAB)、綿馬素PB(AspidinPB)、綿馬素BB(AspidinBB)、綿馬酚(Aspidinol)和折葉苔醇(Albicanol)的重量比例為1020:2040:1020:110:1020:1020。所述藥學(xué)上常用的輔料包括固態(tài)制劑成型輔料，例如糊精、淀粉、明膠、聚乙二醇或硬脂酸等；半固態(tài)成型輔料例如凡士林、石蠟、羊毛脂或十二垸基硫酸鈉以及水等，參照常規(guī)劑型選擇一種或兩種以上混合使用。本發(fā)明所述抗感染藥物組合物優(yōu)選的一種劑型為軟膏。所述軟膏的制備方法包括以下步驟(1)制備提取物混合溶液，將提取物混合溶液加至水中攪勻得到水相；將輔料加熱熔化后制備得到油相；(2)將油相加至水相制備得到軟膏。所述抗感染藥物組合物可應(yīng)用于制備治療細(xì)菌、真菌或病毒性感染疾病的藥物。所述香鱗毛蕨提取物的制備參照現(xiàn)有技術(shù)，通?？刹捎萌軇┨崛》?、溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、超臨界流體萃取法、柱色譜法、液一液逆流分配色譜法等任意一種方法，或這些方法的任意組合由植物香鱗毛蕨(DryopterisfragransL.)制備獲得。根據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)并輔以化學(xué)方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，數(shù)據(jù)如下化合物I:無色柱狀結(jié)晶，mp.134-136。(MeOH)，F(xiàn)AB-MS:m/z447(M+H)，(C24H如08)。H麗R(500MHz，CDC1):80.99(3H，t，J=7Hz，H-ll)，1.17(3H，t,J:7Hz，H—10)，1.45，1.53(3H，brs,H-ll，12)，1.72(2H，J=7Hz，H-10)，2.14(3H，s，H-12)，3.08(2H，t，7Hz，H-9)，3.2(2H，q，J=7Hz，H-9)，3.57(2H，H-7)，3.73(3H，S，H-7)，10.0(1H，s，6'-0H)，10.7(1H，s，6—0H)，15.6(1H，s，2,0H)，18.5(1H，s，4一0H)。"C麗R(125MHz，CDC1):88.4(C.10)，9.2(C_12)，13.9(C-11)，17.1(C-7)，18.2(C—10)，24.3(C一ll)，25.3(C—12)，34.8(C—9)，42.9(C—9)，44.2(C—5)，61.5(C—7)，107.5(C—3)，108.0(C-3)，109.4(C一5)，110.9(C.1)，112.4(C.1)，159.6(C—4)，160.2(C-6)，162.8(C—2)，171.8(C—6)，187.5(C—4)，198.0(C-2)，206.8(C.8)，207.4(C.8)。以上數(shù)據(jù)與目前本領(lǐng)域已有文獻(xiàn)資料對照一致，確定該化合物為AspidinPB?；衔颕I:無色針狀結(jié)晶，mp.180—181。(MeOH)，F(xiàn)AB-MS:m/z459(M+H)，(C28H4205+H)。H腿(500MHz,CDC13):80.73(s，H—13)，0.88(s，H—14,15)，0.99(t，J=7Hz，H—11)，1.34，1.35(s，H.12,13)，1.66(J=7.OHz，H—IO)，2.51(t，J二7Hz)，2.13(m，H-9，12，7)，2.98(dt，J=7Hz，H-9)，3.71(dd，J=ll.0，9.OHz，H-l1)，4.08(d，J=l1.OHz，H-11),5.64(H-7)，19.12(4—OH)。"C麗R(125MHz，CDC1):835.3(C—l)，18.8(C-2)，35.8(C-3)，33.0(C_4)，49.6(C-5)，25.2(C—6)，124.8(C-7)，136.6(C—8)，55.0(C—9)，39.6(C—10)，63.O(C—ll)，22.3(C-12),14.3(C—13)，22.0(C—14)，105.5(C—1)，197.8(C—2)，106.8(C—3)，189.0(C—4)，42.1(C_5)，175.6(C_6)，29.7(C—7)，203.7(C—8)，41.9(C-9)，18.5(C—10)，14.O(C—l1)，23.6(C.12)，24.5(C—13)。以上數(shù)據(jù)與已有相關(guān)文獻(xiàn)資料一致，確定該化合物為Dryofragin。化合物III:無色針狀結(jié)晶，mp.145*146。，ESI—MS:m/z225(M+H)，(C12H1504)。H麗R(500MHz，CDC1):80.99(3H，t，J二7Hz，H—ll)，1.73(2H，sextet,J=7Hz，H—lo)，2.01(3H，s，H—12)，3.06(2H，t，J=7Hz，H-9)，3.82(3H，s,H_7)，5.95(1H，s，H-5)，"CNMR(125MHz，CDC1)8:7.1(C—12)，14.0(C—11)，18.2(C—10)，46.1(C—9)，55.6(C-7)，85.6(C—l)，91.5(C—5)，104.8(C-3)，159.6(C—2)，161.1(C—4)，163.2(C-6)，206.2(C-8)。以上數(shù)據(jù)與已有相關(guān)文獻(xiàn)資料一致，確定該化合物為Aspidinol?；衔颕V:無色針狀結(jié)晶，mp.124—125。，ESIMS:m/z460(M+H)，(C25H308)。H麗R(500MHz，CDC1):80.99(3H，t，J=17Hz，H-11)，1.01(3H，t，J二7Hz，H-ll)，1.44(3H，s，H-12)，1.53(3H，s，H.13)，1.71(2H，m，H—IO)，1.71(2H，m，H10)，2.14(3H，s，H-12)，3.08(2H,m，H-9)，3.08(2H，m，H-9)，3.57(2H，s，H-7)，3.73(3H，s,H-7)，10.O(IH，s，6-OH)，10.7(1H，s，4，-OH)，15.6(1H，s，2—0H),18.6(1H，s，6-OH)。"C麗R(125MHz，CDC1)8:9.2(C-12)，13.9(C-11)，13.9(C—11)，17.1(C--7)，18.0(C一IO)，18.1(C-10)，24.2(C-12)，25.2(C-13)，42.9(C—9)，44.2(C—5)，44.2(C—9)，61.5(C—7)，107.4(C—3)，108.2(C—3)，109.1(C-5)，110.9(C-1)，112.4(C-1)，159.5(C-4)，160.2(C-6)，162.8(C-2)，171.7(C-6)，187.4(C—4)，198.6(C—2)，206.5(C一8)，206.8(C8)。確定該化合物為AspidinBB。CompoundV黃色油狀物質(zhì)，ESIMS:/z/z223(M+H)+，(C15H260)[a]D13.3。(cl.0，CHC13)，^NMR(500MHz,CDC13)S:0.71(3H，s，H-13)，0.80(3H，s，H—15)，0.87(3H，s,H—14)，1.97(1H，brd，J二6.5Hz，H-9ct)，2.02(1H,m，H-7a)，2.45(1H，m，H-7P)，3.79(2H，JAX=5.5HzJl!x=9Hz，JAB=llHz，H—11)，4.63，4.94(各lH，s，H—12).13CNMR(500MHz，CDC13)S:15.4(C—13)，19.1(C-2)，21.6(C-5)，24.1(C-6)，33.1(C-4)，33.5(C-14)，37.7(C-1)，38.8(C-10)，33.9(C-7)41.8(C-3)，55.0(C-5)，58.5(C-9)，106.3(C-12)，147.6(C-8).'HNMRSO.71,0.80,0.87是3個甲基信號，4.63，4.94是雙鍵上的2個質(zhì)子信號。"C麗R5106.3，147.6是雙鍵上的2個C信號。以上數(shù)據(jù)與已有相關(guān)文獻(xiàn)資料一致，確定該化合物為Albicanol。所述抗感染藥物組合物可應(yīng)用于制備治療細(xì)菌、真菌和病毒性感染等疾病的藥物。本發(fā)明具有以下有益效果1、本發(fā)明提供了香鱗毛蕨提取物的新應(yīng)用，獲得一種新型抗感染藥物組合物，抗菌譜廣、抗多藥耐藥性好的可來源于天然植物資源，安全性高；2、所述藥物組合物具有重要的潛在產(chǎn)業(yè)化開發(fā)價值，對其進(jìn)一步研究有望開發(fā)成具有耐藥性好的新型抗感染藥物，為人類造福。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明實施例l:提取物抗真菌作用的實驗1.1材料與試劑菌種表皮癬菌屬絮狀表皮癬菌小孢子菌屬大小孢子菌毛癬菌屬紅色毛癬菌許蘭氏毛癬菌石膏樣毛癬菌斷發(fā)毛癬菌培養(yǎng)基沙堡瓊脂培養(yǎng)基1.2供試液的制備提取物的制備香鱗毛蕨一乙醇提取一乙醇提取液，采用現(xiàn)有常規(guī)技術(shù)。1.3實驗內(nèi)容瓊脂擴散法根據(jù)文獻(xiàn)用打孔器打出小圓濾紙片(直徑0.5cm)。將實驗用鑷子、L型玻璃棒、培養(yǎng)皿、滴管及小燒杯和小圓濾紙片等干熱滅菌。采用沙堡瓊脂基，在無菌實驗室內(nèi)，向每個培養(yǎng)皿倒入約25ml培養(yǎng)基，晾涼。取小燒杯，每個燒杯中放入小圓濾紙片，分別用香鱗毛蕨醇提取液和所對應(yīng)的陰性對照液浸泡10min。將傳代的菌株取出，向每個裝菌株試管內(nèi)加入5ml生理鹽水，搖勻后，用lml滴管取出0.5ml菌液加入下一個試管，并向此試管加4.5ml生理鹽水，此為中濃度試管。同樣方法制成低濃度試管。6種菌株皆按此方法配制高、中、低濃度菌液。向?qū)?yīng)的培養(yǎng)皿中滴入0.lml菌液，用L形玻璃棒將其刮勻，用鑷子取出小圓濾紙片，放入對應(yīng)的培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿內(nèi)放入三個濾紙片(含藥液)。將溫度調(diào)至37'C培養(yǎng)，觀察結(jié)果。測量抑菌環(huán)直徑的大小，香鱗毛蕨提取物抗真菌作用的實驗結(jié)果見表1和表2:表1香鱗毛蕨抗真菌作用(n=15)紅色毛癬菌(cm)高中低石膏樣毛癬菌(cm)高中低大小孢子菌(cm)高中低醇提液0.60,81.00.91.01.00.60.80.9醇提液陰性對照—————一———陽性對照(達(dá)克寧)0.91.11.10.91.01.00.80.81.0表2香鱗毛蕨抗真菌作用(n=15)絮狀表皮癬菌(cm)許蘭氏毛癬菌(cm)斷發(fā)毛癬菌(cm)高中低高中低高中低醇提液0.20.40.50.91.01.00.60.80.9醇提液陰性對照—————————陽性對照(達(dá)克寧)0.60.90.90.91.01.10.80.80,9數(shù)字代表抑菌圈的大小，單位厘米可直接采用香鱗毛蕨提取物配以輔料利用常規(guī)技術(shù)制備得到組合物應(yīng)用于制備治療細(xì)菌、真菌和病毒性感染等疾病的藥物。實施例2抗感染藥物組合物15的制備及抗感染作用對比實驗組合物中提取物的制備采用常規(guī)技術(shù)方法1:香鱗毛蕨一乙醇提取一石油醚或正己垸萃取一柱色譜法精制一即得提取物中六種成分。方法2:香鱗毛蕨一石油醚或正己垸萃取一柱色譜法精制一即得提取物中六種成分。陽性對照液采用達(dá)克寧的甲醇提取溶液。將六種成分按照下述比例混合得到提取物混合溶液提取物混合溶液l:按重量比，將香鱗毛蕨素(Dryofragin)20%，綿馬素AB(AspidinAB)30%，綿馬素PB(AspidinPB)10%，綿馬素BB(AspidinBB)5%，綿馬酚(Aspidinol)15%和折葉苔醇(Albicanol)20%的提取物混合后總重量占組合物重量百分比為1%;采用2重量份的月桂醇硫酸鈉、5重量份的甘油、18重量份的十八醇、20重量份的白凡士林、12重量份的液體石蠟、0.2重量份的尼鉑金乙脂和適量的水等作為輔料，輔料總重量占組合物的重量百分比為99%，制備得到組合物l。提取物混合溶液2按重量比，將香鱗毛蕨素(Dryofragin)lO%，綿馬素AB(AspidinAB)40%,綿馬素PB(AspidinPB)20%，綿馬素BB(AspidinBB)1%，綿馬酚(Aspidinol)19%和折葉苔醇(Albicanol)10%的提取物混合后總重量占組合物重量百分比為10%;采用月桂醇硫酸鈉、甘油、十八醇、白凡士林、液體石蠟、尼鉑金乙脂等輔料，參照常規(guī)技術(shù)制備得到組合物2，輔料占組合物的重量百分比為90%。提取物混合溶液3按重量比，將香鱗毛蕨素(Dryofragin)14%，綿馬素AB(AspidinAB)30%，綿馬素PB(AspidinPB)16%，綿馬素BB(AspidinBB)8%，綿馬酚(Aspidinol)20%和折葉苔醇(Albicanol)12%的提取物混合后總重量占組合物重量百分比為60%;采用月桂醇硫酸鈉、甘油、十八醇、白凡士林、液體石蠟、尼鉑金乙脂等輔料，參照常規(guī)技術(shù)制備得到組合物3，輔料占組合物的重量百分比為40%。提取物混合溶液4按重量比，將香鱗毛蕨素(Dryofragin)20%，綿馬素AB(AspidinAB)20%，綿馬素PB(AspidinPB)20%，綿馬素BB(AspidinBB)10%，綿馬酚(Aspidinol)10%和折葉苔醇(Albicanol)20%的提取物混合后總重量占組合物重量百分比為75%;采用月桂醇硫酸鈉、甘油、十八醇、白凡士林、液體石蠟、尼鉑金乙脂等輔料，參照常規(guī)技術(shù)制備得到組合物4，輔料占組合物的重量百分比為25%。提取物混合溶液5按重量比，將香鱗毛蕨素(Dryofragin)15%，綿馬素AB(AspidinAB)30%，綿馬素PB(AspidinPB)20%，綿馬素BB(AspidinBB)5%，綿馬酚(Aspidinol)15%和折葉苔醇(Albicanol)15%的提取物混合后總重量占組合物重量百分比為99%;采用月桂醇硫酸鈉、甘油、十八醇、白凡士林、液體石蠟、尼鉑金乙脂等輔料，參照常規(guī)技術(shù)制備得到組合物5，輔料占組合物的重量百分比為1%。選取組合物進(jìn)行抗感染試驗，試驗方法參照實施例1，試驗結(jié)果如表3和表4所示<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>組合物1陰性對照一組合物20.6組合物2陰性對照一組合物50.8組合物5陰性對照一陽性對照(達(dá)克寧)0.60.90.9_0.91.01.1_0.80.80.9_數(shù)字代表抑菌圈的大小，單位厘米從表3和表4可以看出，組合物的抗感染作用比醇提物的抗感染作用大大增強。實施例3—種抗感染軟膏的制備(1)制備提取物混合溶液，將提取物混合溶液加至水中攪勻得到水相；將輔料加熱熔化后制備得到油相；(2)將油相加至水相制備得到藥膏。具體操作過程舉例如下取月桂醇硫酸鈉0.2g、甘油0.5mL于小燒杯中，用水浴鍋76。C條件下加熱至熔化；取十八醇1.8g、白凡士林2g、液體石蠟1.2g、尼鉑金乙脂0.02g，于水浴鍋內(nèi)76。C加熱至完全熔化，用移液管取所述提取物混合溶液6mL，加至水中，并用玻璃棒攪勻后取出，用自動攪拌器快速攪拌，同時將油相緩緩加至其中，隨著溫度的下降逐漸降低攪拌速度，并在冷卻前滴加12滴液體石蠟，轉(zhuǎn)移藥膏至包裝容器內(nèi)即得。0.50.60.91.01,00.60.70.70.91.01.01.01.20.81.01.權(quán)利要求1、一種抗感染藥物組合物，包括香鱗毛蕨提取物和藥學(xué)上常規(guī)使用的輔料，其特征在于所述香鱗毛蕨提取物所占組合物重量百分比為1～99％；所述香鱗毛蕨提取物包括香鱗毛蕨素、綿馬素AB、綿馬素PB、綿馬素BB、綿馬酚和折葉苔醇。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述抗感染藥物組合物，其特征在于所述香鱗毛蕨素、綿馬素AB、綿馬素PB、綿馬素BB、綿馬酚和折葉苔醇的重量比例為1020:2040:1020:110:1020:1020。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述抗感染藥物組合物，其特征在于所述輔料為糊精、淀粉、明膠、聚乙二醇、硬脂酸、凡士林、石蠟、羊毛脂或十二垸基硫酸鈉中的一種或兩種以上的混合物。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述抗感染藥物組合物，其特征在于所述組合物為軟膏。5、一種權(quán)利要求4所述抗感染藥物組合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)制備提取物混合溶液，將提取物混合溶液加至水中攪勻得到水相；將輔料加熱熔化后制備得到油相；(2)快速攪拌下將油相加至水相，隨溫度的下降逐漸降低攪拌速度，冷卻前滴加適量液體石蠟制備得到軟膏。6、一種權(quán)利要求1所述抗感染藥物組合物的應(yīng)用，其特征在于應(yīng)用于制備治療細(xì)菌、真菌或病毒性感染疾病的藥物。全文摘要本發(fā)明公開了一種抗感染藥物組合物和應(yīng)用。所述抗感染藥物組合物包括香鱗毛蕨提取物和藥學(xué)上常規(guī)使用的輔料，所述香鱗毛蕨提取物所占組合物重量百分比為1～99％；所述香鱗毛蕨提取物包括香鱗毛蕨素、綿馬素AB、綿馬素PB、綿馬素BB、綿馬酚和折葉苔醇。所述抗感染藥物組合物可應(yīng)用于制備治療細(xì)菌、真菌或病毒性感染疾病的藥物，抗菌譜廣、抗多藥耐藥性好，且來源于天然植物資源，安全性高。文檔編號A61K31/12GK101502501SQ20091003751公開日2009年8月12日申請日期2009年3月3日優(yōu)先權(quán)日2009年3月3日發(fā)明者沈志濱申請人:廣東藥學(xué)院