專利名稱：用于治療癌癥的多激酶抑制劑的制作方法
相關申請案
本申請案主張2008年2月15日申請的美國臨時申請案第61/029,196號；2007年7月25日申請的美國臨時申請案第60/951,906號；和2007年7月25日申請的美國臨時申請案第60/951,901號的優(yōu)先權。所述各申請案的全部內容以引用的方式并入本文中。
背景技術：
玉米赤霉烯酮類大環(huán)內酯F152(LL-Z1640-2)最初是從搖瓶發(fā)酵分離出來，其粗提取物會抑制纖毛原生動物梨形四膜蟲(Tetrahymena pyriformis)(參看McGahren等人.J.Org.Chem.1978，43，2339)。

盡管使用所述天然產物進行的最初生物學研究未能獲得任何特別有益的活性，但保證了制備其它衍生物和/或另外利用其生物活性的可能性。舉例來說，F152和其某些異構體抑制磷酸化酶Map/Erk激酶(MEK)，且可能適于治療某些MEK相關癌癥和特征為形成新生血管的其它疾病(例如參看GB 323845)。F152的衍生物還顯示具有作為酪氨酸激酶抑制劑的活性，其適于例如治療癌癥和發(fā)炎性病癥(例如參看EP 606044；WO00/38674；JP 8-40893；WO 96/13259；5,728,726；5,674,892；5,795,910)。然而，F152和其衍生物通常通過發(fā)酵技術和對天然產物的改性獲得，且因此受可制備且評估生物活性的衍生物數目和類型限制。此外，盡管已證實F152和其某些衍生物具有有效活體內活性，但這些化合物可能在生物學上不穩(wěn)定(例如，其可能在小鼠和人類血漿中容易發(fā)生烯酮異構作用)，從而限制這些化合物開發(fā)成治療人類或其它動物的治療劑。
最近，已顯示F152類似物為NF-κB活化和MEK1的抑制劑(例如參看美國申請案第10/507,067號和美國申請公開案第US 2004/0224936號)。還報導所述化合物會抑制AP-1活化和一些蛋白激酶(例如MEKK、PDGFr、VEGFr)?；谶@些作用機制，提出所述化合物會抑制多種促炎性和/或免疫性細胞因子的產生，諸如TNFα、IL-1、IL-6、IL-8、IL-2等，且還在NF-κB路徑調節(jié)下抑制多種促炎性分子的產生，諸如由COX-2、ICAM-1和MMP-1和3等產生的前列腺素。而且，還報導所述化合物能夠在AP-1路徑調節(jié)下通過抑制MEK1來抑制細胞增殖。此外，還報導所述化合物能夠抑制血管新生，此可能是基于對VEGFr激酶的抑制活性和對PDGFr激酶的弱抑制活性。


發(fā)明內容
本發(fā)明至少部分基于以下發(fā)現式(I)或(II)化合物具有獨特多激酶抑制特征，此可能適于對抗基于化合物的獨特多激酶抑制特征所選的特定癌癥。一般來說，化學治療藥物通常缺乏特異性且具有與此有關的不良副作用。因此，本發(fā)明的目標是提供用于靶向癌癥療法的癌癥特異性藥劑和治療和/或預防癌癥的靶向方法，其可避免通常與化學治療劑有關的不良副作用。
因此，在一些方面中，本發(fā)明提供治療有需要個體中的SrcTK/MEK相關癌癥的方法。所述方法一般包括向個體投與包含有效治療SrcTK/MEK相關癌癥量的SrcTK/MEK抑制劑的組合物。在一些方面中，本發(fā)明還涉及SrcTK/MEK抑制劑用于制造用以治療SrcTK/MEK相關癌癥的藥物的用途。
在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約75％。Src酪氨酸激酶家族的成員可以是Src家族的任何成員，包括cSrc、Fyn、Lyn、Lck、Yes、Fgr、Hck和Blk。在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約50％。在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約50％。
在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑是式(I)化合物
其中 R1是H R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分； Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基； Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且 Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一些實施例中，SrcTK/MEK相關癌癥為慢性骨髓白血病或結腸直腸癌。在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑還抑制Bcr-Abl的活性，且SrcTK/MEK相關癌癥是白血病。在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑還抑制TrkB的活性。在一些實施例中，SrcTK/MEK抑制劑還抑制TrkB的活性至少達本文另外描述的程度，例如在約0.1μM濃度下抑制至少約75％。
在一些方面中，本發(fā)明針對治療有需要個體中的TrkB/MEK相關癌癥的方法。所述方法一般包括向個體投與包含有效治療TrkB/MEK相關癌癥量的TrkB/MEK抑制劑的組合物。在一些方面中，本發(fā)明還涉及TrkB/MEK抑制劑用于制造用以治療TrkB/MEK相關癌癥的藥物的用途。
在一些實施例中，TrkB/MEK抑制劑在約0.1μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約75％。在一些實施例中，TrkB/MEK抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約50％。
在一些實施例中，TrkB/MEK抑制劑是式(I)化合物
其中 R1是H R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分； Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基； Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且 Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一實施例中，化合物(I)是式(II)化合物
其中 R3是-NHRb，且Rb是經0、1或2個羥基部分取代的C1-C3烷基；或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
本文提到式(I)或(II)化合物(或包含所述化合物的組合物)包括所述化合物的醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯(或包含所述化合物的醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯的組合物)。
在一些實施例中，TrkB/MEK相關癌癥是胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤或視網膜母細胞瘤。在一些實施例中，TrkB/MEK抑制劑還抑制Src酪氨酸激酶家族至少一個成員的活性。在一些實施例中，TrkB/MEK抑制劑還抑制Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性達至少本文另外描述的程度，例如在約0.1μM的濃度下抑制至少約75％。
在一些方面中，本發(fā)明提供治療有需要個體中的至少一種選自由以下組成的群組的癌癥的方法慢性骨髓白血病、胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤、卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌和黑素瘤。所述方法一般包括向個體投與包含有效治療癌癥量的式(I)、(II)化合物或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯的組合物。式(I)或(II)化合物可為本文所述的任何式(I)或(II)化合物。
在一些方面中，本發(fā)明還涉及式(I)或(II)化合物在制造用以治療慢性骨髓白血病、胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤、卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌或黑素瘤的藥物中的用途。在一些方面中，本發(fā)明提供抑制有需要個體中的轉移過程的方法。所述方法一般包括向個體投與包含有效抑制轉移過程量的式(I)或(II)化合物或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯的組合物。式(I)或(II)化合物可為本文所述的任何式(I)或(II)化合物。
在其它方面中，本發(fā)明提供治療有需要個體中的B-RAF突變型癌癥的方法。所述方法一般包括向個體投與包含有效治療B-RAF突變型癌癥量的至少一種式(I)或(II)化合物或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯的組合物。式(I)或(II)化合物可為本文所述的任何式(I)或(II)化合物。在一些實施例中，B-RAF突變型癌癥是B-RAF V600E突變型癌癥。在一些實施例中，B-RAF突變型癌癥是卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌或黑素瘤。
在其它方面中，本發(fā)明提供治療有需要個體中的FLT3突變型癌癥的方法。舉例來說，所述方法可包含向個體投與有效治療FLT3突變型癌癥量的式(I)或(II)化合物或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯(或包含其的組合物)。在所述方法的某些實施例中，FLT3突變型癌癥具有殘基D835突變和/或殘基I836突變，例如D835Y突變。在一些實施例中，FLT3突變型癌癥是急性骨髓白血病(AML)。
在其它方面中，本發(fā)明提供治療有需要個體中的中樞神經系統(tǒng)腫瘤的方法。所述方法一般包括向個體投與包含有效治療腫瘤量的式(I)或(II)化合物或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯的組合物，使得至少20％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。式(I)或(II)化合物可為本文所述的任何式(I)或(II)化合物。在一些實施例中，以腦中式(I)或(II)化合物的量與血漿中式(I)或(II)化合物的量的比率計，至少約65％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。在一些實施例中，中樞神經系統(tǒng)腫瘤是腦腫瘤、神經膠質瘤或神經母細胞瘤。
在一些實施例中，式(I)中的

表示雙鍵。在一些實施例中，

表示三鍵。在一些實施例中，R3是-NRbRc，Rc是H 且Rb是未經取代的C1-4烷基。在一些實施例中，Rc是H且Rb是甲基或乙基。舉例來說，式(I)化合物包括以下化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
在一些實施例中，本發(fā)明的任一方法均包括靜脈內投與本文所述組合物。在一些實施例中，本發(fā)明的任一方法均包括投與每公斤體重約0.10毫克至每公斤體重約25毫克之間的劑量的本文所述組合物。
在一些方面中，本發(fā)明針對以下化合物


和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
在一些實施例中，關于式(II)化合物，R3是未經取代的C1-3烷基氨基。在一些實施例中，R3是選自由甲基氨基和乙基氨基組成的群組的基團。在一些實施例中，R3是選自由2-羥基乙基氨基和2，3-二羥基丙基氨基組成的群組的基團。舉例來說，式(II)化合物包括(但不限于)以下化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
在一些實施例中，本發(fā)明的任一方法包括投與第二化學治療藥物。



圖1描繪RAS-MAPK信號傳導路徑的圖示。
圖2A描繪例示性式(I)或(II)化合物在生物化學檢定和基于細胞的MEK1檢定中的結果。
圖2B描繪化合物的例示性激酶抑制結果。
圖3描繪例示性式(I)或(II)化合物在細胞生長抑制檢定中在多種癌細胞系中的結果。
圖4包括描繪例示性式(I)或(II)化合物在Colo-205人類結腸癌異種移植物中的活體內抗腫瘤活性結果的曲線圖。
圖5包括描繪例示性式(I)或(II)化合物在BxPC-3人類胰腺癌異種移植物中的活體內抗腫瘤活性結果的曲線圖。
圖6包括描繪例示性式(I)或(II)化合物在LOX人類黑素瘤異種移植物中的活體內抗腫瘤活性結果的曲線圖。
圖7描繪化合物對B細胞驅使的血液科惡性癌細胞生長的結果。
圖8描繪化合物對CPT-11(SN-38)在PANC-1胰腺癌細胞中的抗癌活性的作用。
圖9描繪化合物的血腦屏障(BBB)實驗。
圖10描繪化合物對Flt-3受體在MV-4-11AML細胞中的磷酸化的作用。
圖11是描繪化合物對MV-4-11細胞增殖的抑制的曲線圖。

具體實施例方式 如WO 05/023792和WO 03/076424中所論述，已報導F152的某些類似物對MEK1具有抑制活性，已證實穩(wěn)定性增加且為NF-κB活化、AP-1活化和蛋白激酶(例如MEKK、MEK1、PDGFr、VEGFr)的有效抑制劑。本發(fā)明至少部分基于以下發(fā)現某些F152大環(huán)內酯類似物也具有獨特多激酶抑制特征。也就是說，式(I)或(II)化合物是本文進一步詳述的多種特異性激酶的有效抑制劑。先前已展示某些多激酶有效對抗癌癥。最近已發(fā)現，例如作為Bcr-Abl激酶抑制劑的甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)(STI571，格列衛(wèi)(GLEEVEC))已成功用于治療慢性骨髓白血病。此成果至少部分歸因于甲磺酸伊馬替尼的多激酶活性。因此，不希望受任何特定理論約束，相信具有這些獨特激酶抑制特征的化合物(例如式(I)或(II)的F152大環(huán)內酯類似物)比選擇性MEK1抑制劑的治療范圍廣。舉例來說，相信具有此獨特多激酶抑制特征的化合物可用于治療和/或預防特定癌癥。
定義 為了更清楚且簡明地描述所主張的標的，以下定義欲指導本文所用特定術語的含義。
應注意，除非另外說明，否則如本文所用的單數形式“一(“a”和“an”)”和“所述”包括“至少一個/種”和“一個/種或多個/種”。因此，例如提及“藥理學上可接受的載劑”包括兩種或兩種以上載劑的混合物以及單一載劑，等。
如本文所用的術語“SrcTK/MEK抑制劑”指的是同時抑制MEK1和Src酪氨酸激酶家族至少一個成員的單一化合物。Src酪氨酸激酶家族的例示性成員包括cSrc、Fyn、Lyn、Lck、Yes、Fgr、Hck和Blk。在一些實施例中，術語“SrcTK/MEK抑制劑”指的是同時抑制MEK1和Src酪氨酸激酶家族1至5個成員，例如Src酪氨酸激酶家族的1、2、3、4或5個成員的單一化合物。
如本文所用的術語“TrkB/MEK抑制劑”指的是同時抑制MEK1和TrkB的單一化合物。
當在本文中使用時，特定蛋白激酶由例如Src、TrkB的特定名稱和本文具體提及的其它激酶指稱，而且可能具有所屬領域中已知的多種同義名。舉例來說，Src蛋白激酶還可以稱為ASV、c-Src、p60-Src、pp60c-src、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src、SRC1、AW259666、神經元原癌基因酪氨酸蛋白激酶、fc54g04、wu:fc54g0和/或SDR。另外，TrkB還可稱為BDNF/NT-3生長因子受體前驅物、GP145-TrkB、2型神經營養(yǎng)性酪氨酸激酶受體、Trk-B、TrkB酪氨酸激酶、AI848316、C030027L06Rik、GP145-TrkB/GP95-TrkB和/或Tkrb。Yes也可稱為c-Yes、HsT441、p61-Yes、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes、Yes、AI323763、p61-Yes、酪氨酸蛋白激酶Yes、MGC94936和/或p60c-yes。Lck也可稱為LSK、淋巴細胞特異性蛋白酪氨酸激酶、p56-LCK、原癌基因酪氨酸蛋白激酶LCK、T細胞特異性蛋白酪氨酸激酶、Hck-3和/或Lsk-t。Fyn也可稱為MGC45350、p59-Fyn、原癌基因Syn、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Fyn、SLK、SYN、AI448320、AW552119、MGC115870、MGC132140、MGC52878、Src激酶p59、c-fyn和/或zgc:86720。Lyn也可稱為FLJ26625、JTK8、酪氨酸蛋白激酶Lyn、AA407514、Hck-2、Lyncein和/或TBC1結構域家族成員1。所屬領域的技術人員完全能夠使用例如可查找蛋白數據庫確定名稱是否為本文所述蛋白激酶的同義名。
當在本文中使用時，特定蛋白激酶不僅包括天然存在的激酶，例如Src、TrkB和本文具體提及的其它激酶，而且還包括經修飾激酶。因此，在一些實施例中，式(I)或(II)化合物抑制與天然存在相對物共享至少90％序列一致性的激酶。在其它實施例中，式(I)或(II)化合物抑制與天然存在相對物共享至少95％序列一致性的激酶。在其它實施例中，式(I)或(II)化合物抑制與天然存在相對物共享至少97％序列一致性的激酶。在其它實施例中，式(I)或(II)化合物抑制與天然存在相對物共享至少99％序列一致性的激酶。與天然存在相對物共享序列一致性的激酶可以是天然存在或合成的激酶。術語“序列一致性”一般指的是兩個聚核苷酸或多肽序列在特定比較區(qū)上在逐殘基比較基礎上的一致程度。通過在所述比較區(qū)上比較兩個經最佳對準的序列，測定兩個序列中出現一致核酸堿基(在核酸的情況中，例如A、T、C、G、U或I)的位置數以獲得匹配位置數，將匹配位置數除以比較區(qū)中位置的總數(即窗尺寸)，且結果乘以100獲得序列一致性百分比，從而計算出術語“序列一致性百分比”。在一些實施例中，窗尺寸為至少20個核苷酸位置，例如至少25-50個核苷酸。在其它實施例中，窗尺寸大于50個核苷酸。在一些實施例中，窗尺寸為整個天然存在的蛋白激酶。在其它實施例中，窗尺寸為至少與天然存在蛋白激酶上的ATP結合位點對應的序列。
如本文所用的術語“SrcTK/MEK相關癌癥”指的是與MEK1和Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性或功能相關或以其它方式受其影響的癌癥。在一方面中，在SrcTK/MEK相關癌癥中，MEK1的活性或功能提高，且Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性或功能提高。本文中更詳細論述例示性SrcTK/MEK相關癌癥，且其可包括慢性骨髓白血病(CML)和結腸直腸癌。
如本文所用的術語“TrkB/MEK相關癌癥”指的是與MEK1和TrkB的活性或功能相關或以其它方式受其影響的癌癥。在一方面中，在TrkB/MEK相關癌癥中，MEK1的活性或功能提高，且TrkB的活性或功能提高。本文中還更詳細論述例示性TrkB/MEK相關癌癥，且其可包括胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤和視網膜母細胞瘤。
在一些實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于蛋白激酶活性失調的癌癥。在其它實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于蛋白激酶路徑中的上游事件或下游事件失調的癌癥。在其它實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于調節(jié)蛋白激酶活性的基因突變的癌癥。在一些實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于一個或多個信號分子的活化增強或組成性活化的癌癥。在一些實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于蛋白激酶使蛋白質磷酸化的能力提高或組成性能力的癌癥。在其它實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于三磷酸腺苷(ATP)與酶結合位點的結合改變使得酶活性提高的癌癥。在一些實施例中，與一種或多種蛋白激酶的“活性或功能相關或以其它方式受其影響”的癌癥是可歸因于配位體與蛋白激酶結合和/或蛋白激酶二聚的癌癥。
如本文更詳細描述，命名為“SrcTK/MEK相關”、“TrkB/MEK相關”、“與B-RAF突變相關”和/或“與FLT3突變相關”的癌癥是因為與某些蛋白激酶或特定蛋白突變明顯相關而選擇的癌癥。一旦判定癌癥(例如胰腺癌)與MEK1、Src、TrkB或本文所述的任何其它激酶或蛋白質突變相關(例如文獻或實驗中)，那么所屬領域的技術人員將會理解所述特定癌癥的治療即為本發(fā)明癌癥(例如TrkB/MEK相關癌癥)的治療。
式(I)或(II)化合物會抑制如本文所述的多種蛋白激酶。如本文所用的術語“抑制”在關于蛋白激酶使用時，指的是式(I)或(II)化合物至少部分降低蛋白激酶活性的能力。不希望受任何特定理論約束，相信蛋白激酶抑制劑可直接與ATP競爭特定激酶的結合袋，或以其它方式與激酶相互作用使得結合袋不再可用于ATP?？赏ㄟ^所屬領域中已知的多種檢定確定化合物抑制蛋白激酶的量。舉例來說，可在可接受緩沖劑(例如MOPS、EDTA、Brij-35、甘油、NaCl、BSA、HEPES、曲通X-100(Triton X-100)或TRIS)中稀釋化合物，且在特定量的[γ-33P-ATP]和底物肽存在下暴露于激酶。在培育和中止后，取等分試樣以測定所并入33P的量。舉例來說，將使用閃爍計數器量測電離輻射，以測定并入底物中的γ-33P的量，此量與激酶活性有關。此值將與合適對照值比較，例如無抑制劑存在的相同過程。應了解可通過任何合適方法評估或測量化合物抑制激酶活性的能力。舉例來說，結合磷酸肽或磷酸蛋白底物的抗體可用于偵測所述磷酸化產物，所述產物為激酶活性的指征?？赏ㄟ^任何合適方法(諸如經標記第二抗體)檢測抗體與底物的結合。在一些實施例中，可評估或測量化合物抑制受體酪氨酸激酶亞基轉磷酸化的能力或抑制受體酪氨酸激酶自體磷酸化的能力。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約30％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約45％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約50％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約55％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約40％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約50％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制至少約75％、80％、85％或90％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的抑制劑濃度下將指定蛋白激酶的活性抑制約95％。在一些實施例中，在ATP存在下進行測定抑制量的檢定。在一些實施例中，在10μM ATP存在下進行測定抑制量的檢定。在一些實施例中，在[γ-33P-ATP]存在下進行測定抑制量的檢定。在一些實施例中，在提供約500cpm/pmol比活性的量的[γ-33P-ATP]存在下進行測定抑制量的檢定。在一些實施例中，在痕量[γ-33P-ATP]存在下進行測定抑制量的檢定。
如本文所用的術語“轉移過程的抑制”指的是式(I)或(II)化合物不僅抑制單一腫瘤的生長，而且還抑制腫瘤自原發(fā)位置向遠處器官傳播的能力。不希望受任何特定理論約束，相信轉移是癌癥治療失敗的常見原因。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞與其相鄰細胞分離的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞通過胞外基質的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞分泌分解基質的酶的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞通過血管內皮襯里的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞通過淋巴系統(tǒng)的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞在循環(huán)系統(tǒng)中存活的能力。在一實施例中，轉移過程的抑制包括抑制腫瘤細胞外滲到氣管的周圍組織中的能力。應理解，當關于轉移過程使用時，術語“抑制”可指完全阻止個體的轉移過程或減緩個體的轉移過程。不希望受任何特定理論約束，相信式(I)或(II)化合物抑制轉移過程的能力至少部分歸因于化合物抑制Src酪氨酸激酶的能力。
如本文所用的“治療(“Treatment”或“treating”)”定義為向患者，或向來自患者的分離組織或細胞系施用或投與治療劑(例如，本發(fā)明的特定多激酶抑制劑)。患者一般患有疾病或病癥，具有疾病或病癥的癥狀，或具有疾病或病癥的誘因。治療目的一般是治愈、痊愈、減輕、解除、補救、改善或改良所述疾病、病癥、癥狀或誘因。如本文所用的“被治療”指的是疾病或病癥被治愈、痊愈、減輕、解除、補救、改善或改良。舉例來說，本發(fā)明的治療方法投與本文所述的抑制劑，從而減緩或停止特定癌癥或特定類別的癌癥(例如SrcTK/MEK相關癌癥)的進展。本發(fā)明的治療方法還包括投與抑制劑，從而治愈特定癌癥。
術語“有效劑量(“effective dose”或“effective dosage”)”定義為足以達成所要效果的量。術語“所要效果”一般指的是當向個體投與式(I)或(II)化合物或組合物時所屬領域的技術人員預測的任何結果。在一些實施例中，所要效果是疾病或病癥完全好轉。在其它實施例中，所要效果是部分治療疾病或病癥。在其它實施例中，所要效果是完全或部分治療疾病或病癥的癥狀。舉例來說，在一些實施例中，所要效果是使實體腫瘤收縮。在另一例示性實施例中，所要效果是消除實體腫瘤。術語“治療有效劑量”定義為足以治愈或至少部分抑止已患病個體中所述疾病和其并發(fā)癥的量。
如本文所用的術語“個體”指的是動物，諸如哺乳動物，包括(但不限于)人類、靈長類、牛、綿羊、山羊、馬、豬、狗、貓、兔、豚鼠、大鼠、小鼠或其它牛類、羊類、馬類、犬類、貓類、嚙齒類或鼠類動物。在一些實施例中，個體是人類。
結合本發(fā)明的不同實施例引用數值和范圍，例如組合物中所存在的式(I)或(II)化合物的量。應理解，除非另外明確說明，否則本發(fā)明欲涵蓋處于所列值和范圍之間的所有值和范圍。本文結合參數、范圍和量使用的術語“約”意謂參數或量在規(guī)定參數或量的±1％之內。
如本文所用的術語“穩(wěn)定”一般指的是化合物具有足以允許進行制造的穩(wěn)定性，且保持化合物完整達足夠用來檢測的時間。在一些實施例中，穩(wěn)定的式(I)或(II)化合物是保持其完整性達足夠適用于本文詳述目的的時間的化合物。舉例來說，盡管前藥最終在身體中代謝，但認為其為“穩(wěn)定”的。
如本文所用的“烷基”包括具有一個或多個碳原子的飽和烴，包括直鏈烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基等)、環(huán)狀烷基(或“環(huán)烷基”或“脂環(huán)”或“碳環(huán)”基團)(例如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等)，分支鏈烷基(異丙基、叔丁基、仲丁基、異丁基等)，和經烷基取代的烷基(例如，經烷基取代的環(huán)烷基和經環(huán)烷基取代的烷基)。在某些實施例中，直鏈或分支鏈烷基在主鏈中可具有8個或8個以下碳原子，例如C1-C8直鏈或C3-C8分支鏈。在某些實施例中，直鏈或分支鏈烷基在主鏈中可具有6個或6個以下碳原子，例如C1-C6直鏈或C3-C6分支鏈。在其它實施例中，烷基包括約1至4個碳。在其它實施例中，烷基包括約1至3個碳。在其它實施例中，烷基包括約1或2個碳。術語“低級烷基”指的是鏈中具有1至6個碳的烷基，和環(huán)結構中具有3至6個碳的環(huán)烷基。如“C1-C6烷基”中的術語“C1-C6”意謂含有1至6個碳原子的烷基。術語“烯基”和“炔基”指的是類似于烷基，但分別含有至少一個碳-碳雙鍵或三鍵的不飽和脂肪族基團。
如本文所用的術語“烷氧基”意謂連接有氧原子的烷基。在一些實施例中，烷氧基包括具有1至約8個碳原子的基團。在其它實施例中，烷氧基包括具有1至約6個碳原子的基團。在其它實施例中，烷氧基包括具有少于約4個碳原子的基團。烷氧基的實例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、異丙氧基、丙氧基、丁氧基和戊氧基。烷氧基可為直鏈烷氧基或分支鏈烷氧基。
術語“雜環(huán)基團”包括與碳環(huán)基團類似的閉環(huán)結構，其中環(huán)中的一個或多個碳原子為除碳之外的元素，例如氮、硫或氧。雜環(huán)基可為飽和雜環(huán)基或不飽和雜環(huán)基。此外，雜環(huán)基(諸如吡咯基、吡啶基、異喹啉基、喹啉基、嘌呤基和呋喃基)可具有芳香族特征，在此情況下，其可稱為“雜芳基”或“雜芳香族”基團。例示性雜環(huán)基包括(但不限于)咪唑基，例如
嗎啉基，例如
哌啶基，例如
吡咯烷基，例如
哌嗪基，例如
如本文所用的術語“胺”或“氨基”指的是未經取代或經取代的式-NRaRb部分，其中Ra和Rb各獨立是氫、烷基、芳基或雜環(huán)基，或Ra和Rb與其所連接的氮一起形成在環(huán)中具有3至8個原子的環(huán)狀部分。因此，除非另外說明，否則術語氨基包括環(huán)狀氨基，諸如哌啶基或吡咯烷基。
相關來說，“芳基烷基”例如為經芳基取代的烷基(例如苯基甲基(即苯甲基))?！巴榛蓟辈糠质墙浲榛〈姆蓟?例如對甲基苯基(即對甲苯基))。因此，術語咪唑基-烷基指的是經咪唑基部分取代的烷基。
在指定情況下，式(I)或(II)化合物的化學部分(包括上文所述的基團)可“未經取代或經取代”。在一些實施例中，術語“經取代”意謂部分上安置有不為氫的取代基(即，在多數情況下，置換氫)，此允許分子執(zhí)行其預定功能。應理解，“取代”或“經...取代”包括以下隱含條件，即所述取代符合經取代原子和取代基的允許價數，且取代產生穩(wěn)定化合物，例如，其不會通過諸如重排、環(huán)化、消去等方式自發(fā)經歷轉變。如本文所用的術語“取代基”欲包括有機化合物的所有允許取代基。在廣泛方面中，允許取代基包括有機化合物的非環(huán)狀和環(huán)狀、分支和未分支、碳環(huán)和雜環(huán)、芳香族和非芳香族取代基。如本文所述，式(I)或(II)化合物可具有一次或多次取代。
如本文的說明書和附圖中所用，可選雙鍵/三鍵由兩個實線連同第三虛線表示，且指的是兩個碳原子之間的共價鍵聯，所述鍵聯可為雙鍵或三鍵。舉例來說，結構
可表示丁烯或丁炔。
在本文中使用混合化學名稱時，例如“烷基芳基”、“芳氧基”等，其可理解為與化學結構的核心具有特定連接。最右邊所列的部分(例如“烷基芳基”中的芳基)是與核心直接連接的部分。也就是說，例如在結構V-CH2CH2CH3中，當代號“V”是烷基芳基時，所述結構理解為烷基-芳基-CH2CH2CH3。
如本文所用的術語“化合物”欲意謂由分子構成的物質，所述分子又由原子組成。化合物可為任何天然或非天然材料，例如肽或多肽序列、有機或無機分子或組合物、核酸分子、碳水化合物、脂質或其組合?；衔镆话阒傅氖枪滔唷⒁合嗷驓庀嗟幕瘜W實體，且不管是處于粗混合物中抑或經純化和經分離?；衔锖w化合物本身，且適當時涵蓋化合物的無定形和結晶形式，包括多晶型，所述形式為混合物形式或分離形式；化合物的游離酸和游離堿形式；化合物的異構體，包括幾何異構體、光學異構體和互變異構體，所述光學異構體包括對映異構體和非對映異構體、手性異構體和非手性異構體，所述光學異構體包括經分離光學異構體或光學異構體混合物(包括外消旋和非外消旋混合物)；所述幾何異構體包括反向和順向形式，其中異構體可為經分離形式或與一個或多個其它異構體的摻雜物形式；化合物的同位素，包括含氘和含氚化合物，且包括含有放射性同位素的化合物，所述放射性同位素包括治療上有效的同位素和診斷上有效的同位素；化合物的多聚形式，包括二聚、三聚等形式；化合物的鹽，包括酸加成鹽和堿加成鹽，包括有機平衡離子和無機平衡離子，且包括兩性離子形式，其中若化合物與兩個或兩個以上平衡離子締合，則所述兩個或兩個以上平衡離子可相同或不同；和化合物的溶劑合物，包括半溶劑合物、單溶劑合物、二溶劑合物等，包括有機溶劑合物和無機溶劑合物，所述無機溶劑合物包括水合物；其中若化合物與兩個或兩個以上溶劑分子締合，則所述兩個或兩個以上溶劑分子可相同或不同。
在一些實施例中，術語“化合物”明確指的是小分子。如本文所用，如本文所用的術語“小分子”指的是本身不為基因轉錄或翻譯產物(例如蛋白質、RNA或DNA)，且優(yōu)選具有低分子量的化合物，例如分子量小于約2,000道爾頓(dalton，Da)的有機分子。在一些實施例中，小分子的分子量小于約1,500Da。在其它實施例中，小分子的分子量小于約1,000Da。在其它實施例中，小分子的分子量小于約750Da。在其它實施例中，小分子的分子量小于約500Da。
如本文所用的“醫(yī)藥學上可接受的前藥”一詞指的是一般具有顯著降低的藥理學活性的化合物衍生物，其含有容易在活體內移除以產生呈藥理學活性物質形式的母分子的額外部分。前藥的實例是酯，其在活體內裂解產生所關注化合物。已知多種化合物的前藥，和使母化合物衍生形成前藥的材料和方法，且所述前藥、材料和方法適于本發(fā)明。
如本文所用的術語“酯”指的是具有式R′-COOR的基團，其中R′或R中的一個是例如烷基、鹵代烷基或芳香族基團，且R′和R中的另一個是活性部分。“醫(yī)藥學上可接受的酯”指的是用作前藥的酯，例如在活體內從核心結構上至少部分移除(例如通過水解或其它裂解)的酯。
如本文所用的術語“保護基”(例如關于式(I)或(II)化合物的合成)指的是特定官能部分(例如O、S或N)被暫時封阻使得可在多官能化合物中在另一反應性部位選擇性進行反應。在優(yōu)選實施例中，保護基以良好產率選擇性反應，獲得對所計劃反應穩(wěn)定的經保護底物；保護基須以良好產率由容易獲得的不攻擊其它官能基的優(yōu)選無毒試劑選擇性移除；保護基形成可容易分離的衍生物(更優(yōu)選不產生新立體中心)；且保護基具有最小額外官能性以避免產生其它反應部位。
如本文所用的術語“胺”或“氨基”指的是未經取代或經取代的式-NRaRb部分，其中Ra和Rb各獨立是例如氫、烷基、芳基或雜環(huán)基，或Ra和Rb與其所連接的氮一起形成在環(huán)中具有3至8個原子的環(huán)狀部分。
式(I)和(II)化合物 本發(fā)明包括式(I)化合物
其中 R1是H R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分； Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基； Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自由以下成的群組中獨立選出的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且 Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一些實施例中，

表示雙鍵。在一些實施例中，

表示三鍵。在一些實施例中，R2是H。在一些實施例中，R3是-NRbRc，其中Rb是未經取代的C1-4烷基。在一些實施例中，Rb是甲基。在一些實施例中，Rb是乙基。在一些實施例中，R3是-NRbRc，其中Rb是經1或2個-OH基團取代的C1-4烷基。在一些實施例中，Rb是2-羥基乙基。在一些實施例中，Rb是2，3-二羥基丙基。在一些實施例中，R3是-ORa，其中Ra是經咪唑基取代的C2-3烷基。
例示性咪唑基包括(但不限于)，

在一些實施例中，咪唑基是

例示性嗎啉基包括(但不限于)，

在一些實施例中，嗎啉基是

例示性哌啶基包括(但不限于)

在一些實施例中，哌啶基是

例示性N-甲基哌啶基包括(但不限于)


在一些實施例中，N-甲基哌啶基是

例示性吡咯烷基包括(但不限于)

在一些實施例中，吡咯烷基是

例示性哌嗪基包括(但不限于)

在一些實施例中，哌嗪基是

例示性N-甲基哌嗪基包括(但不限于)


在一些實施例中，N-甲基哌嗪基是
在其它實施例中，式(I)或(II)化合物包括以下所列的化合物



和其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一些實施例中，化合物是至少一種選自由以下組成的群組的化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是化合物029、化合物069、化合物091或化合物106。在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是美國申請公開案第2004/0224936號中列出的特定化合物。
在一些方面中，本發(fā)明針對新穎式(I)化合物。本文所述的所有新穎式(I)化合物包括于本發(fā)明中作為化合物。在一些實施例中，本發(fā)明針對以下所列的一種或多種化合物



和其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一些實施例中，式(I)化合物包括式(II)化合物
其中 R3是-NHRb，且Rb是經0、1或2個羥基部分取代的C1-C3烷基；或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在一些實施例中，R3是未經取代的C1-3烷基-氨基。在一些實施例中，R3是甲基氨基。在一些實施例中，R3是乙基氨基。在一些實施例中，R3是經一個羥基部分取代的C1-3烷基-氨基。在一些實施例中，R3是經兩個羥基部分取代的C1-3烷基-氨基。羥基部分可在C1-3烷基鏈中的任何碳上。此外，C1-3烷基鏈的單個碳上可存在一個以上羥基部分。在一些實施例中，烷基鏈的2-碳上存在羥基部分。在一些實施例中，R3是羥基乙基氨基，例如2-羥基乙基氨基。在其它實施例中，R3是二羥基丙基氨基，例如2，3-二羥基丙基氨基。在一些實施例中，C1-3烷基是非環(huán)狀C1-3烷基鏈。
在一些實施例中，化合物是至少一種選自由以下組成的群組的化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是化合物029、化合物069、化合物091或化合物106。在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是美國申請公開案第2004/0224936號中列出的特定化合物。
在一些方面中，本發(fā)明針對新穎式(I)化合物。本文所述的所有新穎式(I)化合物包括于本發(fā)明中作為化合物。在一些實施例中，本發(fā)明針對以下所列的一種或多種化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯前藥。
在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是化合物029、化合物091或化合物106。在至少一個實施例中，式(I)或(II)化合物不是美國申請公開案第2004/0224936號中列出的特定化合物。
式(I)或(II)化合物可包括一個或多個不對稱中心，且因此可以各種異構形式存在，例如立體異構體和/或非對映異構體。因此，式(I)或(II)的化合物和醫(yī)藥組合物可呈個別對映異構體、非對映異構體或幾何異構體形式，或可呈立體異構體混合物形式。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物是對映異構純化合物。在某些其它實施例中，提供立體異構體或非對映異構體的混合物。
除非另外說明，否則式(I)或(II)化合物還可具有一個或多個以Z或E異構體形式存在的雙鍵。本發(fā)明另外涵蓋實質上不含其它異構體的單獨異構體形式，或各種異構體的混合物(例如立體異構體的外消旋混合物)形式的化合物。
式(I)或(II)化合物另外可以式(I)或(II)化合物的結晶形式(例如多晶型物)、溶劑合物或水合物形式中的一個或組合形式存在?？墒褂糜糜谠俳Y晶的不同溶劑或不同溶劑混合物；通過在不同溫度下進行結晶；或通過使用各種冷卻模式(在結晶期間極快至極慢冷卻)，來鑒別和/或制備各種結晶形式。還可以通過加熱或熔融化合物，隨后逐漸或快速冷卻，來獲得不同結晶形式。可通過固體探針NMR光譜、IR光譜、差示掃描量熱法、粉末X光衍射圖和/或其它技術來測定多晶型物的存在。
合成方法 在例如WO 05/023792第32-38頁和WO 03/076424第28-36頁，以及其中提供的實例中可發(fā)現制備適用于實踐本發(fā)明的化合物的指南。所述申請案的全部內容以引用的方式并入本文中。所述參考文獻以及本文所含的信息和關于大環(huán)內酯化學性質的其它知識體系向所屬領域的技術人員提供關于適用于合成式(I)或(II)化合物的合成策略、保護基和其它材料和方法的指南。舉例來說，上述參考文獻提供關于制備與本文所述化合物或相關中間體類似的化合物的背景信息，以及與該等化合物的調配、使用和投與有關的信息。
本文還提供關于各種例示性化合物和其中間體有關的特定指南和實例。因此，可通過本文的實例進一步理解式(I)或(II)化合物和其制備，所述實例說明藉以制備或使用這些化合物的一些方法。然而，應了解，所述實例不限制本發(fā)明。認為目前已知或將另外開發(fā)的本發(fā)明的變體在如本文所述和如下文所主張的本發(fā)明范疇內。
根據本發(fā)明，可使用任何可獲得的技術來制造或制備本發(fā)明化合物或包括本發(fā)明化合物的組合物。舉例來說，可使用多種溶液相合成法，諸如下文詳細論述的方法?；蛘呋蛄硗?，可使用所屬領域中已知的任何多種組合技術、平行合成和/或固相合成法制備本發(fā)明化合物。
適用于合成式(I)或(II)化合物的起始物質和試劑可從供應商處購買，或可通過所屬領域的一般技術人員已知的方法制備。可使用慣用技術分離和純化起始物質、中間體和式(I)或(II)化合物，所述技術包括過濾、蒸餾、結晶、色譜等。其可使用慣用方法，包括物理常數和光譜數據來表征。
例證中提供式(I)或(II)化合物的例示性合成。應了解，本文所述的方法可應用于本文揭示的每一化合物和其等效物。此外，試劑和起始物質為所屬領域的技術人員所熟知。盡管上文引用的參考文獻中所述的方案描繪了某些例示性化合物，但應了解使用替代起始物質將產生式(I)或(II)的其它類似物。
除非明確說明，否則反應混合物冷卻至室溫或室溫以下，接著在需要時用水或氯化銨飽和水溶液中止。通過在水與合適水不混溶溶劑(例如乙酸乙酯、二氯甲烷和乙醚)之間分配來萃取所要產物。相繼用水和飽和鹽水溶液適當洗滌含有所要產物的萃取物。在認為含有產物的萃取物含有殘余氧化劑的情況下，在上文所述的洗滌程序之前，萃取物以亞硫酸鈉于碳酸氫鈉飽和水溶液中的10％溶液洗滌。在認為含有產物的萃取物含有殘余酸的情況下，在上文所述的洗滌程序之前，萃取物以碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌(所要產物本身具有酸性特征的情況除外)。在認為含有產物的萃取物含有殘余堿的情況下，在上文所述的洗滌程序之前，萃取物以10％檸檬酸水溶液洗滌(所要產物本身具有堿性特征的情況除外)。洗滌后，含有所要產物的萃取物經無水硫酸鎂干燥，且接著過濾。接著通過在減壓下在適當溫度下(一般低于45℃)旋轉蒸發(fā)移除溶劑來分離粗產物。
在三苯膦氧化物是反應的主要副產物的情況下，將反應混合物直接添加至大量經充分攪拌的己烷中。通過過濾移除所得三苯膦氧化物沉淀物，且以一般方式處理濾液。
除非明確說明，否則使用色譜純化。色譜純化指的是急驟硅膠管柱色譜，其使用單一溶劑或混合溶劑作為洗提劑。合并含有洗提劑的經適當純化的所要產物，且在適當溫度(一般低于45℃)下減壓濃縮至恒定質量。若為固體形式，則最終產物以其固體形式用于生物測試中。若需要或必需凍干，則最終產物一般溶解于50％乙腈水溶液或其它適當溶劑或溶劑混合物中，過濾并轉移至小瓶，接著在高度真空下凍干，隨后用于生物測試。
醫(yī)藥組合物 在本發(fā)明的另一方面中，提供醫(yī)藥組合物，其包含本文所述的任一化合物(或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯)，且任選地包含醫(yī)藥學上可接受的載劑。在某些實施例中，所述組合物任選地還包含一種或多種其它治療劑?；蛘?，可向有需要的患者投與本發(fā)明化合物以及投與一種或多種其它治療劑。舉例來說，與具有本發(fā)明化合物的醫(yī)藥組合物結合投與或納入所述醫(yī)藥組合物中的其它治療劑可為如本文更詳細描述的批準用于治療癌癥的抗癌劑，或其可為經食品和藥品管理局(Food and Drug Administration)審批且最終獲得批準用于治療癌癥的多種藥劑中的任一藥劑。還應了解，某些本發(fā)明化合物可以用于治療的游離形式，或適當時以其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯形式存在。
如本文所用的術語“醫(yī)藥學上可接受的鹽”指的是在正確醫(yī)學判斷范疇內、適于與人類和低等動物的組織接觸使用而無不當毒性、刺激、過敏反應等，且與合理利益/風險比相稱的鹽。所屬領域中熟知胺、羧酸和其它類型化合物的醫(yī)藥學上可接受的鹽。舉例來說，S.M.卑爾格(S.M.Berge)等人在藥學雜志(J.Pharmaceutical Sciences)，661-19(1977)中詳細描述醫(yī)藥學上可接受的鹽，其以引用的方式并入本文中。如下文一般性描述，鹽可在式(I)或(II)化合物的最終分離和純化期間當場制備，或通過使游離堿或游離酸官能基與合適試劑反應單獨制備。舉例來說，可使游離堿官能基與合適酸反應。此外，若式(I)或(II)化合物具有酸性部分，則其合適醫(yī)藥學上可接受的鹽可包括金屬鹽，諸如堿金屬鹽，例如鈉鹽或鉀鹽；和堿土金屬鹽，例如鈣鹽或鎂鹽。醫(yī)藥學上可接受的無毒酸加成鹽的實例為與無機酸形成的氨基鹽，所述無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸；或與有機酸形成的氨基鹽，所述有機酸諸如乙酸、乙二酸、順丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、丁二酸或丙二酸，或通過使用所屬領域中所用的其它方法(諸如離子交換)形成的氨基鹽。其它醫(yī)藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘化物、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙堿酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、乙二酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過氧硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一酸鹽、戊酸鹽等。代表性堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等。其它醫(yī)藥學上可接受的鹽包括(若適當)使用平衡離子形成的無毒銨、季銨和胺陽離子，平衡離子諸如鹵離子、氫氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低級烷基磺酸根和芳基磺酸根。
另外，如本文所用的術語“醫(yī)藥學上可接受的酯”指的是可活體內水解的酯，且包括在人體內容易地分解留下母化合物或其鹽的酯。合適酯基包括例如自醫(yī)藥學上可接受的脂肪族羧酸，尤其鏈烷酸、鏈烯酸、環(huán)烷酸和鏈烷二羧酸衍生的酯，其中各烷基或烯基部分宜具有不超過6個碳原子。特定酯的實例包括甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和乙基丁二酸酯。
如上文所述，包含式(I)或(II)化合物的醫(yī)藥組合物可另外包含醫(yī)藥學上可接受的載劑，如本文所用的載劑可包括任何和所有適于所要特定劑型的溶劑、稀釋劑或其它液體媒劑、分散助劑或懸浮助劑、表面活性劑、等滲劑、增稠劑或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤滑劑等。雷明登氏制藥科學(Remington′s Pharmaceutical Sciences)，第16版，E.W.馬丁(E.W.Martin)(馬克出版公司(Mack Publishing Co.)，賓夕法尼亞州伊斯頓(Easton，Pa.)，1980)揭示用于調配醫(yī)藥組合物的各種載劑和其已知制備技術。除非任何慣用載劑介質與式(I)或(II)化合物不相容，諸如產生任何不合需要的生物作用，或在其它方面與醫(yī)藥組合物的任何其它組份以有害方式相互作用，否則其用途涵蓋于本發(fā)明范疇內。一些可用作醫(yī)藥學上可接受載劑的材料實例包括(但不限于)糖，諸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，諸如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素和其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和乙酸纖維素；粉末狀黃芪膠；麥芽；明膠；滑石粉；賦形劑，諸如可可脂緩沖劑和栓劑蠟；油，諸如花生油、棉籽油；紅花油、芝麻油；橄欖油；玉米油和大豆油；二醇；諸如丙二醇；酯，諸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，諸如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；無熱原水；等滲生理食鹽水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇，和磷酸鹽緩沖溶液，以及其它無毒相容潤滑劑，諸如月桂基硫酸鈉和硬脂酸鎂，且根據調配人員的判斷，組合物中還可以存在著色劑、脫模劑、涂布劑、甜味劑、調味劑和芳香劑、防腐劑和抗氧化劑。
包含式(I)或(II)化合物的組合物可調配成任何所要濃度。在一些實施例中，調配組合物，使其包含至少治療有效量。在一些實施例中，調配組合物，使其包含不會引起一種或多種不當副作用的量。在某些實施例中，調配組合物，使化合物以介于約1mg/mL與約20mg/mL之間；介于約1mg/mL與約15mg/mL之間；介于約1mg/mL與約10mg/mL之間；介于約2mg/mL與約9mg/mL之間；介于約3mg/mL與約8mg/mL之間；介于約4mg/mL與約7mg/mL之間；介于約4mg/mL與約6mg/mL之間的濃度存在。在某些實施例中，調配組合物，使化合物以約5mg/mL的濃度存在。
治療方法 如上文所述，式(I)或(II)化合物展現獨特激酶抑制特征。在一些實施例中，至少部分基于此獨特激酶抑制特征，式(I)或(II)化合物適用于治療和/或預防如本文更詳細描述的多種癌癥。例示性癌癥包括實體腫瘤、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤，諸如多發(fā)性骨髓瘤、神經癌(例如神經膠質瘤、神經母細胞瘤或視網膜母細胞瘤)、白血病(例如慢性骨髓白血病、急性骨髓白血病和/或急性淋巴母細胞白血病(ALL))、黑素瘤、胰腺癌、結腸直腸癌、甲狀腺癌和/或乳癌。因此，在一些方面中，本發(fā)明針對治療和/或預防個體中的癌癥的方法。舉例來說，在一些方面中，本發(fā)明針對治療個體中的SrcTK/MEK相關癌癥的方法。在其它實施例中，本發(fā)明針對治療個體中的TrkB/MEK相關癌癥的方法。
本發(fā)明方法一般包括向個體投與有效量的包含所選多激酶抑制劑的組合物，從而治療癌癥。所選多激酶抑制劑因具有靶向癌癥或在其它方面與癌癥相關的獨特多激酶抑制特征而得以選擇。舉例來說，在一些實施例中，治療SrcTK/MEK相關癌癥的方法包括向有需要的個體投與SrcTK/MEK抑制劑或另一式(I)或(II)化合物。在其它實施例中，治療TrkB/MEK相關癌癥的方法包括向有需要的個體投與TrkB/MEK抑制劑或另一式(I)或(II)化合物。
式(I)或(II)化合物具有獨特多激酶抑制特征。舉例來說，在一些實施例中，式(I)或(II)化合物對多種蛋白激酶具有抑制活性，所述蛋白激酶包括Src酪氨酸激酶家族、MEK1、MEKK1、TrkB、BCR-ABL、FLT-3和KDR激酶。所述化合物包括例如化合物106和091，其合成和某些生物學特性在本文的實例和附圖中表征。此獨特激酶抑制特征表明式(I)或(II)化合物比選擇性MEK1抑制劑的治療范圍廣。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物包括展現MEK1抑制劑活性；Src家族成員(例如Src、Lyn、Fyn、Lck、Yes)的抑制劑活性；通過MEKK1抑制作為NF-κB路徑抑制劑的活性；TrkB抑制劑活性；Bcr-Abl抑制劑活性；FLT-3抑制劑活性；和/或KDR抑制劑活性的化合物。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物包括展現MEK1抑制劑活性的化合物。因此，在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約50％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約51％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約52％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％或甚至60％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約85％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約86％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將MEK1的活性抑制至少約87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％或甚至95％。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物抑制MEK1。舉例來說，在一些實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于10μM的IC50值。在某些其它實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于7.5μM的IC50值。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于5μM的IC50值。在某些其它實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于2.5μM、小于1μM、小于0.75μM、小于0.5μM、小于0.25μM、小于0.1μM、小于75nM或小于50nM的IC50值。本發(fā)明欲涵蓋介于所列出值之間的所有范圍和值。
基于在調節(jié)來自大范圍人類腫瘤的細胞的生長和存活的重要作用，RAS-MAPK信號傳導路徑也視為抗癌治療的重要路徑(圖1)。MEK1在RAS和RAF蛋白的下游，在癌癥中，RAS和RAF蛋白通常突變且活性異常。因此，在B-RAF突變基礎上具有高MEK信號傳導的腫瘤為使用本發(fā)明組合物和方法的誘人目標。
相信Ras/Raf/MEK/ERK信號轉導路徑在不同類型細胞中調節(jié)細胞增殖。通常在經轉化細胞系中觀測到此路徑中的突變，且通常與人類癌癥有關。戴維斯(Davies)等人(自然(Nature)417，949-954，2002)例如在67％的惡性黑素瘤和12％的結腸直腸癌中鑒別出B-RAF(Raf的同功異型體)體細胞錯義突變。所有突變都在具有單個取代(諸如V600E(V599E))的激酶結構域中，此占這些突變的90％。突變型B-RAF蛋白具有高激酶活性，導致MEK組成性活化，此接著觸發(fā)ERK磷酸化，且活化下游路徑。相信B-RAF突變型癌癥(包括黑素瘤)為MEK抑制劑的誘人治療目標。黑素瘤和結腸直腸癌中的B-RAF突變頻率，和所述疾病晚期有效療法的相對缺乏表明抑制B-RAF活性可為這些癌癥類型的重要新穎策略。此外，在某些實施例中，B-RAF突變可用作“患者富集策略”(即，靶向將受益于本發(fā)明組合物和方法的帶有B-RAF突變的患者)的分子標志。
本發(fā)明者發(fā)現式(I)或(II)化合物為B-RAF突變型癌細胞生長的有效抑制劑，且因此可選擇性靶向B-RAF突變型癌癥。如本文所用的術語“B-RAF突變型癌癥”指的是與B-RAF特定點突變相關的癌癥。因此，在一些實施例中，本發(fā)明提供用于治療B-RAF突變型癌癥的組合物和方法。式(I)或(II)化合物包括對B-RAF突變型癌癥展現抗增殖活性的化合物；對活體外維持或在使用科學上可接受模型的動物研究中維持的合適細胞系具有抗增殖作用的化合物；和/或展現有利治療特征(例如安全性、功效和穩(wěn)定性)的化合物。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物適用于治療和/或預防具有高MEK信號傳導的腫瘤，包括(但不限于)具有B-RAF突變的腫瘤。已關注作為高MEK信號傳導目標的多種蛋白質(參看下文表1，自癌癥自然綜述癌癥(Nature Reviews Cancer)4937-947，2004中的表1修改)。這些蛋白質中的突變可導致MEK-ERK路徑的活化。具體來說，卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌和黑素瘤顯示高頻率B-RAF突變。
表1 因此，在某些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防具有高MEK信號傳導的腫瘤，包括(但不限于)具有B-RAF突變的腫瘤的方法。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物適用于治療和/或預防黑素瘤、結腸直腸癌、卵巢癌和/或甲狀腺癌。因此，在某些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防B-RAF突變型癌癥的方法。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物適用于治療和/或預防帶有B-RAF突變(例如V600E突變)的癌癥。在某些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防帶有V600E突變的B-RAF突變型癌癥的方法。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物包括展現Src酪氨酸激酶家族的多個成員抑制劑活性的化合物。因此，在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約40％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約45％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％或甚至55％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約85％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約90％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約91％、92％、93％、94％或甚至95％。Src酪氨酸激酶家族的例示性成員包括(但不限于)cSrc、Fyn、Lyn、Lck和Yes。
在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少四個成員的活性抑制至少約40％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少四個成員的活性抑制至少約45％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少四個成員的活性抑制至少約46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％或甚至55％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少四個成員的活性抑制至少約90％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少四個成員的活性抑制至少約91％、92％、93％、94％、95％、96％或甚至97％。在一些實施例中，受本發(fā)明抑制劑(例如SrcTK/MEK抑制劑)抑制的Src酪氨酸激酶家族的四個成員為cSrc、Fyn、Lyn和Lck。
在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少三個成員的活性抑制至少約55％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少三個成員的活性抑制至少約60％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少三個成員的活性抑制至少約61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％或甚至69％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少三個成員的活性抑制至少約93％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少三個成員的活性抑制至少約94％、95％、96％、97％或甚至98％。在一些實施例中，受本發(fā)明抑制劑(例如SrcTK/MEK抑制劑)抑制的Src酪氨酸激酶家族的三個成員選自cSrc、Fyn、Lyn和Lck。舉例來說，在一些實施例中，受本發(fā)明化合物和/或抑制劑抑制的Src酪氨酸激酶家族的三個成員為Fyn、Lyn和Lck。舉例來說，在其它實施例中，受本發(fā)明抑制劑抑制的Src酪氨酸激酶家族的三個成員為cSrc、Fyn和Lck。
在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少兩個成員的活性抑制至少約65％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少兩個成員的活性抑制至少約70％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少兩個成員的活性抑制至少約71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％或甚至79％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少兩個成員的活性抑制至少約95％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少兩個成員的活性抑制至少約96％、97％、98％或甚至99％。在一些實施例中，受本發(fā)明化合物和/或抑制劑(例如SrcTK/MEK抑制劑)抑制的Src酪氨酸激酶家族的兩個成員為Fyn和Lck。
在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約70％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約75％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％或甚至85％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約97％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約98％、99％或甚至100％。在一些實施例中，受本發(fā)明化合物和/或抑制劑(例如SrcTK/MEK抑制劑)抑制的Src酪氨酸激酶家族的一個成員選自Fyn和Lck。
所屬領域的技術人員將理解任何或所有上述Src酪氨酸激酶特征可與一種單獨化合物精確相關。也就是說，約0.1μM濃度下的本發(fā)明單一抑制劑可將Src酪氨酸激酶家族的五個成員抑制至少約45％，將Src酪氨酸激酶家族的四個成員抑制至少約50％，將Src酪氨酸激酶家族的三個成員抑制至少約60％，將Src酪氨酸激酶家族的兩個成員抑制至少約70％且將Src酪氨酸激酶家族的一個成員抑制至少約75％。還應理解，在前述方案中，抑制至少75％的Src酪氨酸激酶家族的一個成員也可為抑制至少45％的五個成員中的一個。因此，在一例示性情況下，式(I)或(II)化合物在約0.1μM濃度下可具有以下特征50％抑制cSrc、31％抑制Fyn、42％抑制Lyn、73％抑制Lck和56％抑制Yes。
不希望受任何特定理論約束，還相信Src酪氨酸激酶家族的成員也可適用于抑制轉移過程。舉例來說，Src與通過細胞運動和浸潤建立轉移有關。因此，在一些實施例中，本發(fā)明方法包括抑制個體中的轉移過程的方法。
最近，還顯示Lyn(Src酪氨酸激酶家族成員)在甲磺酸伊馬替尼抗性機制中起重要作用。不希望受任何特定理論約束，還相信Src酪氨酸激酶家族的某些成員與慢性骨髓白血病和/或結腸直腸癌相關。因此，在一些實施例中，本發(fā)明針對治療慢性骨髓白血病和/或結腸直腸癌的方法。此外，Src酪氨酸激酶家族的某些成員與甲磺酸伊馬替尼抗性相關，例如在慢性骨髓白血病中。因此，本發(fā)明針對治療對伊馬替尼和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯(例如甲磺酸伊馬替尼)具有抗性的癌癥的方法。在一些實施例中，本發(fā)明針對甲磺酸伊馬替尼抗性慢性骨髓白血病。
如本文所用，術語“抗性”指的是個體隨時間變得對治療劑的反應性降低的情況。因此，在一些實施例中，對治療劑具有抗性指的是與不存在藥劑投與的情況相比，個體對所述藥劑完全無反應性(例如腫瘤生長速率未受抑制的情況)。在一些實施例中，對治療劑具有抗性指的是與不存在藥劑投與的情況相比，個體對所述藥劑部分無反應性(例如腫瘤生長速率受抑制程度極低的情況)。對治療劑具有抗性的特性是高度可變特性，在不同情況下，不同腫瘤對指定治療劑會展現不同程度的“抗性”。在其它實施例中，對治療劑具有抗性指的是與藥劑的先前投與相比，個體對所述藥劑完全或部分無反應性。在其它實施例中，對治療劑具有抗性指的是已投與藥劑的個體需要其它療法。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物包括展現TrkB抑制劑活性的化合物。因此，在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約65％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約70％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約75％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約76％、78％、80％、82％、84％、86％或甚至88％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約85％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約90％。在其它實施例中，本發(fā)明化合物或抑制劑在約1.0μM濃度下將TrkB的活性抑制至少約91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或甚至98％。
不希望受任何特定理論約束，相信TrkB(神經來源生長因子(NDGF)受體)在諸如神經膠質瘤、視網膜母細胞瘤和神經母細胞瘤的神經癌的增生和存活中可能起重要作用。此外，還相信TrkB活性可能與胰腺癌相關。舉例來說，通過TrkB的信號轉導可能引起胰腺癌患者嚴重疼痛。因此，在一些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防神經膠質瘤、視網膜母細胞瘤和神經母細胞瘤的方法。在其它實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防胰腺癌的方法。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物或其活性代謝物展現通過血腦屏障(BBB)的高穿透性。當關于穿過BBB的量使用時，術語“式(I)或(II)化合物”欲包括其活性代謝物。因此，在一些實施例中，本發(fā)明方法包括治療有需要個體中的中樞神經系統(tǒng)腫瘤的方法。如在合適動物中證實，方法一般包括投與如本文所述的組合物(包括式(I)或(II)化合物)，使得至少部分式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。在一些實施例中，如在合適動物中證實，以腦中式(I)或(II)化合物的量比血漿中式(I)或(II)化合物的量的比率計，至少約20％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。在一些實施例中，如在合適動物中證實，以腦中化合物的量比血漿中式(I)或(II)化合物的量的比率計，至少約40％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。在其它實施例中，如在合適動物中證實，至少約50％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。在其它實施例中，如在合適動物中證實，至少約55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或甚至100％的式(I)或(II)化合物穿透血腦屏障。因此，可在合適動物(例如嚙齒動物，諸如小鼠)中測定式(I)或(II)化合物是否穿透個體(例如人類)的血腦屏障。應注意，百分比是基于腦相對于血漿中指定時期的濃度-時間曲線下面積(AUC0-t)來計算。因此，百分比表示濃度比。也就是說，若腦中化合物的(AUC0-24h)為20ng/mL而血漿中為80ng/mL，則穿透血腦屏障的化合物的百分比為20％(腦中20ng/ml除以總濃度(20ng/mL+80ng/mL))。在一些實施例中，百分比是基于t＝0(給藥時間)至最后可定量濃度點時間段的濃度-時間曲線下面積(即(AUC0-last))來計算。例示性中樞神經系統(tǒng)腫瘤包括(但不限于)腦瘤、神經膠質瘤和神經母細胞瘤。
在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑會抑制Bcr-Abl和/或FLT-3。Bcr-Abl和FLT-3是白血病治療的已知目標。因此，在某些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防白血病的方法。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約40％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約45％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約46％、47％、48％、49％、50％、52％或甚至54％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約75％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約80％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將Bcr-Abl的活性抑制至少約81％、82％、83％、84％、85％、86％、88％或甚至90％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約45％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約50％。在一些實施例中，本發(fā)明抑制劑在約0.1μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約52％、54％、56％、58％、60％、65％或甚至70％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約85％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約90％。在其它實施例中，本發(fā)明抑制劑在約1.0μM濃度下將FLT-3的活性抑制至少約91％、92％、93％、94％、95％或甚至96％。
式(I)或(II)化合物和組合物適用于治療個體中的FLT3突變型癌癥。如本文所用，FLT3突變型癌癥是與FLT3中的活化突變相關的癌癥，所述活化突變激活所編碼蛋白質的激酶功能。
FMS樣酪氨酸激酶3基因(FLT3或FLT-3)編碼受體酪氨酸激酶的III型血小板源生長因子家族的一員。FLT3表現于許多血液科惡性疾病中，且其信號傳導級聯已涉及于多個腫瘤發(fā)生路徑中。舉例來說，FLT3突變會導致STAT5和Ras/MAPK路徑的活化。(帕瑟爾(Parcells)等人，干細胞(Stem Cells)，24(5)；1174-1184(2006)) 白血病患者中已報導FLT3的活化突變。舉例來說，與成人細胞遺傳正常急性骨髓白血病(CN-AML)相關的兩種最常見FLT3突變類型為(1)近膜結構域中的內部串聯重復(ITD)(存在于約30％的CN-AML患者中)；和(2)第二酪氨酸激酶結構域(TKD)中的突變(存在于約7％的CN-AML患者中)。常見TKD突變包括影響TKD的活化環(huán)(A環(huán))中的氨基酸殘基D835和/或I836的核苷酸取代、缺失或插入。D835Y取代構成約50％的所報導TKD突變。還觀測到Y842C、K663Q和V592A突變。具有這些ITD或TKD突變的FLT3蛋白通過自體磷酸化展現配位體獨立性FLT3二聚和組成性活化。(惠特曼(Whitman)等人，血液學(Blood)，111(3)1552-1559(2008)；還參看帕瑟爾(Parcells)等人，干細胞(Stem Cells)，24(5)；1174-1184(2006))FLT3的活化突變與較差預后相關。(斯通(Stone)，血液學(Blood)，104I915-916(2004)) 在一些實施例中，式(I)或(II)化合物可抑制FLT3突變型癌細胞生長。在某些實施例中，化合物可展現對抗FLT3突變型癌癥的抗增殖活性；展現對活體外維持或在動物模型中維持的合適細胞系(例如包含FLT3的活化突變)的抗增殖作用；和/或展現有利治療特征(例如安全性、功效和穩(wěn)定性)。
因此，本發(fā)明提供治療有需要個體中的FLT3突變型癌癥的方法，其包含向所述個體投與治療有效量的式(I)或(II)化合物或組合物。在所述方法的某些實施例中，式(I)或(II)化合物或包含所述化合物的組合物用于治療具有FLT3突變的癌癥。在所述方法的某些實施例中，FLT3突變型癌癥在近膜結構域中具有內部串聯重復(ITD)。在所述方法的某些實施例中，FLT3突變型癌癥在第二酪氨酸激酶結構域中，例如在活化環(huán)中具有突變。在所述方法的某些實施例中，FLT3突變型癌癥具有殘基D835突變和/或殘基I836的突變，例如D835Y突變。在所述方法的某些實施例中，FLT3突變型癌癥具有Y842C、K663Q或V592A突變。此外，在某些實施例中，FLT3突變可用作“患者富集策略”的分子標志以鑒別供治療的患者。
如上文所述，白血病患者中已報導FLT3的活化突變，且本發(fā)明提供治療個體中的白血病的方法，其包含向個體投與治療有效量的式(I)或(II)化合物或組合物。在所述方法的一個實施例中，白血病是急性骨髓白血病(AML)。
不希望受任何特定理論的約束，相信式(I)或(II)化合物的獨特多激酶抑制特征表明所述化合物適用于靶向血液科惡性疾病以及實體腫瘤。(例如參看瓦穆斯，M(Warmuth，M)等人.血液學年報(Ann Hematol.)78(2)49-64(1999)和哈德，KW(Harder，KW)等人.免疫學(Immunity).15(4)603-15(2001)。)在某些實施例中，式(I)或(II)化合物以B細胞非霍奇金氏淋巴瘤(B-cell non-Hodgkin′s lymphoma)中的細胞凋亡為證據展現抗癌活性，此可能通過抑制MEKK1(NF-κB活化的上游分子)實現，導致對細胞凋亡的化學抗性。因此，在某些實施例中，本發(fā)明方法包括治療和/或預防血液科惡性癌細胞生長(諸如多發(fā)性骨髓瘤和B細胞淋巴瘤)的方法。
在其它實施例中，式(I)或(II)化合物活體外抑制腫瘤細胞系生長。舉例來說，在一些實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于10μM的IC50值。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于7.5μM的IC50值。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于5μM的IC50值。在某些其它實施例中，式(I)或(II)化合物展現小于2.5μM、小于1μM、小于0.75μM、小于0.5μM、小于0.25μM、小于0.1μM、小于75nM或小于50nM的IC50值。本發(fā)明欲涵蓋介于所列出值之間的所有范圍和值。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物引起活體內腫瘤衰退。在某些例示性實施例中，式(I)或(II)化合物在合適小鼠腫瘤異種移植模型中引起活體內腫瘤衰退。如本文實例中所證明，某些式(I)或(II)化合物在多種異種移植物中通過靜脈內給藥具有強活體內功效。在某些實施例中，在合適癌細胞異種移植模型中，式(I)或(II)化合物使腫瘤尺寸減小至化合物開始投與時腫瘤尺寸的70％以下。在某些實施例中，在合適癌細胞異種移植模型中，式(I)或(II)化合物使腫瘤尺寸減小至化合物開始投與時腫瘤尺寸的65％以下。在某些實施例中，在合適癌細胞異種移植模型中，式(I)或(II)化合物使腫瘤尺寸減小至化合物開始投與時腫瘤尺寸的60％以下、55％以下或50％以下。本發(fā)明欲涵蓋介于所列出值之間的所有值和范圍。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物引起活體內腫瘤生長的抑制。舉例來說，在一些實施例中，式(I)或(II)化合物在合適癌細胞異種移植模型中引起腫瘤生長的顯著抑制。在某些實施例中，在合適癌細胞異種移植模型中，式(I)或(II)化合物在經處理動物中引起與對照動物相比＞50％的腫瘤生長抑制(即，“經處理”腫瘤尺寸＜50％“對照”腫瘤尺寸；或T/C值＜50％)。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物具有＜70％的T/C值。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物具有＜65％、＜60％或＜55％的T/C值。本發(fā)明欲涵蓋介于所列出值之間的所有值和范圍。
測試包括F152(天然產物)的例示性化合物在MDA-MB-435和其它癌細胞系中的生長抑制活性。數種化合物顯示具有顯著癌細胞生長抑制活性(例如以nM IC50值計)?；诟鞣N相關檢定中的生物學表征(參看實例和附圖)，相信某些式(I)或(II)化合物展現有效細胞生長抑制，尤其針對B-RAF突變型細胞；具有多激酶抑制特征，包括MEK1、MEKK1、Src激酶家族酪氨酸激酶、TrkB、FLT-3和Bcr-Abl；在多種腫瘤異種移植物(包括“主要腫瘤類型”)中具有有效活體內抗腫瘤活性而無顯著體重損失；在個體中在Q4D和/或Q7D靜脈內給藥中具有突出功效；具有功效優(yōu)于組合療法中的所屬領域中已知的某些MEK1抑制劑的跡象；能夠穿透血腦屏障，此使化合物潛在適用于治療/預防腦瘤；潛在適用于以特定癌癥的可能生物標志為基礎的靶向療法。
在一些實施例中，式(I)或(II)化合物為基于天然產物的多激酶抑制劑，其對包括Src家族(Src、Lyn、Fyn、Lck、Yes)的癌癥相關激酶、通過MEKK1抑制對NF-κB路徑、TrkB、Bcr-Abl、FLT-3和KDR，以及B-RAF突變型癌細胞高度有效。在臨床上此獨特特征可向式(I)或(II)化合物提供競爭優(yōu)勢，例如對非分裂細胞具有低程度的細胞毒性，且因此提供潛在良好治療范圍。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物在具有另一抗癌劑的組合療法中展現協同作用。在某些例示性實施例中，式(I)或(II)化合物在具有SN-38(CPT-11的活性代謝物)的組合療法中展現協同作用。在一些實施例中，式(I)或(II)化合物當與另一抗癌劑(例如SN-38，CPT-11的活性代謝物-例如參看實例9)組合使用時，更有效殺死腫瘤細胞。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物對NF-κB展現抑制活性。因此，其適用于治療和/或預防與NF-κB活性有關的癌癥。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物適用于治療和/或預防血液科惡性疾病，諸如多發(fā)性骨髓瘤和/或B細胞淋巴瘤。在一些實施例中，式(I)或(II)化合物對于經NF-κB活化對慣用化學療法展示抗性的癌癥患者有益。
根據本發(fā)明，可在所屬領域中已知的任一可用檢定中檢定本發(fā)明化合物，以鑒別具有例如MEK1抑制活性、蛋白激酶抑制活性、NF-κB活化抑制活性和癌細胞生長抑制活性的化合物。舉例來說，檢定可為細胞或非細胞、活體內或活體外、高或低通量格式檢定，等。
劑量和投與模式 應了解，根據本發(fā)明的方法，化合物和組合物可使用有效治療癌癥的任何量和任何投與途徑投與。因此，如本文所用的表述“有效量”指的是藥劑抑制腫瘤細胞生長的足夠量，或指的是降低癌癥作用的足夠量。所需要的確切量將視個體的物種、年齡和一般狀況、疾病嚴重程度、特定抗癌劑、其投與模式等而隨個體變化。式(I)或(II)化合物優(yōu)選調配成容易投與且劑量均勻的單位劑型。如本文所用的表述“單位劑型”指的是適于待治療患者的治療劑的物理不連續(xù)單元。然而應理解，式(I)或(II)化合物和組合物的總每日用量將由主治醫(yī)師在正確醫(yī)學判斷范疇內決定。用于任何特定患者或生物體的特定治療有效劑量水準將視多種因素而定，包括所治療病癥和病癥嚴重程度；所采用特定化合物的活性；所采用特定組合物；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；所采用特定化合物的投與時間、投與途徑和排泄速率；治療持續(xù)時間；與所采用特定化合物組合或同時使用的藥物；和醫(yī)藥技術中熟知的類似因素(例如參看顧德曼(Goodman)和吉爾曼(Gilman)，“治療劑的藥理學基礎(The Pharmacological Basis ofTherapeutics)”，第10版，A.吉爾曼(A.Gilman)、J.哈德曼(J.Hardman)和L.利姆伯德(L.Limbird)編，麥格羅-希爾出版公司(McGraw-Hill Press)，155-173，2001，其全部內容以引用的方式并入本文中)。
在某些實施例中，全身性投與化合物或組合物。如本文所用，“全身性投與”指的是式(I)或(II)化合物可借以變得全身可用的任何方式。舉例來說，全身性投與涵蓋經腸(例如經口和經直腸)和非經腸投與方法。在某些實施例中，全身性投與涵蓋靜脈內投與、腹膜內投與、肌肉內投與、冠狀動脈內投與、動脈內投與(例如投與至頸動脈中)、皮內投與、皮下投與、經皮傳遞、氣管內投與、皮下投與、關節(jié)內投與、心室內投與、吸入(例如氣溶膠)、腦內、經鼻、naval、經口、眼內、肺部投與、導管注入、栓劑和直接注射至組織，或全身性吸收的局部或粘膜投與。粘膜投與包括例如通過吸入、滴鼻劑、滴眼劑等向呼吸道投與；肛門或陰道途徑投與，例如通過栓劑；等。在某些例示性實施例中，式(I)或(II)組合物是經靜脈內投與。
應了解，本發(fā)明化合物可以劑型、調配物或例如含有醫(yī)藥學上可接受的慣用無毒載劑和佐劑的合適傳遞裝置或植入物全身性投與，使得化合物效用最佳化。舉例來說，本發(fā)明化合物可與適當賦形劑一起調配成醫(yī)藥組合物，其在向個體投與組合物后以受控方式全身性釋放活性物質?；蛘呋蛄硗?，可使化合物劑型設計最佳化，從而增加化合物的投與后效用。上述策略(即劑型設計和藥物輸入的速率控制)在單獨或組合使用時可導致化合物效用顯著增加，且視為本發(fā)明的一部分。
此外，在以適當醫(yī)藥學上可接受的載劑以所要劑量調配后，本發(fā)明醫(yī)藥組合物可通過經口、經直腸、非經腸、腦池內、陰道內、腹膜內、局部(以散劑、軟膏、乳膏或滴劑形式)、經頰(以經口或經鼻噴霧形式)等方式向人類和其它動物投與。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物可以每天每公斤個體體重約0.001mg至約50mg、約0.01mg至約25mg或約0.1mg至約10mg的劑量水準每天一次或多次投與，從而獲得所要治療作用。還應了解，可向個體投與小于0.001mg/kg或大于50mg/kg(例如50-100mg/kg)的劑量。在某些實施例中，化合物是經口或非經腸投與。在某些實施例中，通過每周間歇給藥1至3次進行投與。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物可以約1-500mg/m2；例如約5-400mg/m2；約10-250mg/m2的劑量水準每周一次或多次投與，從而獲得所要治療效果。本發(fā)明也涵蓋介于所列出范圍之間的特定范圍和值。
在某些實施例中，式(I)或(II)化合物可每周靜脈內投與1至3次。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物可每周靜脈內投與1次。在某些實施例中，式(I)或(II)化合物可每周靜脈內投與2次。
式(I)或(II)化合物的投與可經特定時間段連續(xù)、間歇或快速投與。舉例來說，在一個實施例中，調配式(I)或(II)化合物以供靜脈內使用且可以緩慢注射形式向患者投與，例如經約30分鐘至約3小時。在另一實施例中，調配式(I)或(II)化合物以供靜脈內使用且可以快速注射形式向患者投與，也稱為IV(靜脈內)推注。在另一實施例中，調配式(I)或(II)化合物以供靜脈內使用且可以任何數目的不連續(xù)注射形式向患者投與，所述注射間隔可能相等或不相等的時間段。
用于經口投與的液體劑型包括(但不限于)醫(yī)藥學上可接受的乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除了活性化合物之外，液體劑型還可含有所屬領域中常用的惰性稀釋劑，諸如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(具體來說，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨糖醇的脂肪酸酯，和其混合物。除了惰性稀釋劑之外，經口組合物還可包括佐劑，諸如濕潤劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調味劑和芳香劑。
可使用合適分散劑或濕潤劑和懸浮劑，根據已知技術調配可注射制劑，例如無菌可注射水性或油性懸浮液。無菌可注射制劑還可為無毒非經腸可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、懸浮液或乳液，例如1，3-丁二醇中的溶液。可采用的可接受媒劑和溶劑是水、林格氏溶液、U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發(fā)性油慣常用作溶劑或懸浮介質。為此目的，可采用任何溫和不揮發(fā)性油，包括合成單酸甘油酯或二酸甘油酯。此外，可注射制劑中使用脂肪酸，諸如油酸。
可注射調配物可例如通過經阻菌過濾器過濾或通過納入殺菌劑經滅菌而呈無菌固體組合物形式，所述無菌固體組合物可在使用前溶解或分散于無菌水或其它無菌可注射介質中。
通常希望減緩藥物自皮下或肌肉內注射的吸收以延長藥物作用。此可通過使用液體懸浮液或水溶性差的結晶或無定形材料實現。藥物吸收速率因而視其溶解速率而定，溶解速率又可視晶體尺寸和結晶形式而定?；蛘?，通過將藥物溶解或懸浮于油性媒劑中來實現非經腸投與的藥物形式的延遲吸收?？赏ㄟ^在生物可降解聚合物(諸如聚交酯-聚乙交酯)中形成藥物的微膠囊基質來制造可注射儲積形式。視藥物/聚合物比率和所采用顆粒聚合物的種類而定，可控制藥物釋放速率。其它生物可降解聚合物的實例包括(聚(原酸酯)和聚(酐)。還通過將藥物截留在與身體組織相容的脂質體或微乳液中來制備儲積式可注射調配物。
用于直腸或陰道投與的組合物優(yōu)選是栓劑，其通過混合本發(fā)明化合物與合適無刺激性賦形劑或載劑(諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟)來制備，所述無刺激性賦形劑或載劑在環(huán)境溫度下是固體，但在體溫下是液體，且因此在直腸或陰道腔中熔融并釋放活性化合物。
用于經口投與的固體劑型包括膠囊、藥片、丸劑、散劑和顆粒劑。在所述固體劑型中，活性化合物與至少一種醫(yī)藥學上可接受的惰性賦形劑或載劑(諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣)和/或a)填充劑或增充劑，諸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合劑，諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹膠，c)保濕劑，諸如甘油，d)崩解劑，諸如瓊脂--瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉，e)溶解延遲劑，諸如石蠟，f)吸收促進劑，諸如季銨化合物，g)濕潤劑，諸如棕櫚醇和單硬脂酸甘油酯，h)吸收劑，諸如高嶺土和膨潤粘土，和i)潤滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉和其混合物混合。在膠囊、藥片和丸劑的情況下，劑型還可包含緩沖劑。
相似類型的固體組合物還可用作軟填充和硬填充明膠膠囊的填充劑，所述膠囊使用諸如乳糖(lactose或milk sugar)等賦形劑以及高分子量聚乙二醇等?？梢园潞屯鈿ぶ苽渌幤?、糖衣藥丸、膠囊、丸劑和顆粒劑的固體劑型，諸如腸溶包衣和醫(yī)藥調配技術中熟知的其它包衣。其可任選地含有遮光劑且還可具有僅在腸道的某一部分或優(yōu)先在腸道的某一部分任選地以延遲方式釋放活性成份的組成?？墒褂玫那度虢M合物的實例包括聚合物質和蠟。相似類型的固體組合物還可用作軟填充和硬填充明膠膠囊的填充劑，所述膠囊使用諸如乳糖(lactose或milk sugar)的賦形劑以及高分子量聚乙二醇等。
活性化合物還可為具有一種或多種如上文所述的賦形劑的微囊化形式?？梢园潞屯鈿ぶ苽渌幤⑻且滤幫?、膠囊、丸劑和顆粒劑的固體劑型，諸如腸溶包衣、釋放控制包衣和醫(yī)藥調配技術中熟知的其它包衣。在所述固體劑型中，活性化合物可與至少一種惰性稀釋劑(諸如蔗糖、乳糖和淀粉)混雜。如正常實踐中，所述劑型還可包含除惰性稀釋劑之外的其它物質，例如壓片潤滑劑和其它壓片助劑，諸如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠囊、藥片和丸劑的情況下，劑型還可包含緩沖劑。其可任選地含有遮光劑且還可具有僅在腸道的某一部分或優(yōu)先在腸道的某一部分任選地以延遲方式釋放活性成份的組成?？墒褂玫那度虢M合物的實例包括聚合物質和蠟。
本發(fā)明涵蓋本發(fā)明化合物的醫(yī)藥學上可接受的局部調配物。如本文所用的術語“醫(yī)藥學上可接受的局部調配物”意謂醫(yī)藥學上可接受用于通過向表皮施用調配物來皮內投與式(I)或(II)化合物的任何調配物。在本發(fā)明的某些實施例中，局部調配物包含載劑系統(tǒng)。醫(yī)藥學上有效的載劑包括(但不限于)溶劑(例如醇、多元醇、水)、乳膏、洗劑、軟膏、油、石膏、脂質體、散劑、乳液、微乳液和緩沖溶液(例如低滲或緩沖生理食鹽水)或所屬領域中已知用于局部投與醫(yī)藥品的任何其它載劑。所屬領域中權威的參考文獻提供業(yè)內已知載劑的更完全清單，例如雷明登氏制藥科學(Remington′sPharmaceutical Sciences)，第16版，1980和第17版，1985，都由馬克出版公司(MackPublishing Co.)，賓夕法尼亞州伊斯頓(Easton，Pa.)出版，其揭示內容以全文引用的方式并入本文中。在某些其它實施例中，本發(fā)明的局部調配物可包含賦形劑。所屬領域中已知的任何醫(yī)藥學上可接受的賦形劑都可用于制備本發(fā)明醫(yī)藥學上可接受的局部調配物?？杉{入本發(fā)明局部調配物中的賦形劑的實例包括(但不限于)防腐劑、抗氧化劑、保濕劑、潤膚劑、緩沖劑、增溶劑、其它穿透劑、護膚劑、表面活性劑和推進劑，和/或與本發(fā)明化合物組合使用的其它治療劑。合適防腐劑包括(但不限于)醇、季胺、有機酸、對羥基苯甲酸酯和酚。合適抗氧化劑包括(但不限于)抗壞血酸和其酯、亞硫酸氫鈉、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基苯甲醚、生育酚和螯合劑，如EDTA和檸檬酸。合適保濕劑包括(但不限于)甘油、山梨糖醇、聚乙二醇、尿素和丙二醇。用于本發(fā)明的合適緩沖劑包括(但不限于)檸檬酸、鹽酸和乳酸緩沖劑。合適增溶劑包括(但不限于)氯化季銨、環(huán)糊精、苯甲酸苯甲酯、卵磷脂和聚山梨醇酯?？捎糜诒景l(fā)明局部調配物中的合適護膚劑包括(但不限于)維生素E油、尿囊素(allatoin)、二甲聚硅氧烷、甘油、礦脂和氧化鋅。
在某些實施例中，本發(fā)明醫(yī)藥學上的局部調配物包含至少一種式(I)或(II)化合物和穿透增強劑。局部調配物的選擇將視數種因素而定，包括待治療病況、本發(fā)明化合物和所存在其它賦形劑的物理化學特征、其在調配物中的穩(wěn)定性、可用制造設備和成本約束。如本文所用的術語“穿透增強劑”意謂能夠傳輸藥理學活性化合物穿過角質層并進入表皮或真皮中的藥劑，優(yōu)選極少或無全身性吸收。已評估多種化合物增強藥物穿過皮膚的穿透速率的效用。例如參看經皮穿透增強劑(Percutaneous Penetration Enhancers)，麥巴克H.I.(Maibach H.I.)和史密斯H.E.(Smith H.E.)(編)，CRC出版公司(CRCPress，Inc.)，佛羅里達州伯克萊屯(Boca Raton，Fla.)(1995)，其調查各種皮膚穿透增強劑的使用和測試，和布郁克提米克(Buyuktimkin)等人，經皮和局部藥物傳遞系統(tǒng)中經皮藥物穿透增強的化學方式(Chemical Means of Transdermal Drug PermeationEnhancement in Transdermal and Topical Drug Delivery Systems)，高詩T.K.(Gosh T.K.)、皮菲斯特W.R.(Pfister W.R.)、亞米S.I.(Yum S.I.)(編)，國際藥物出版公司(Interpharm Press Inc.)，伊利諾伊州布法羅市(Buffalo Grove，I11.)(1997)。在某些例示性實施例中，用于本發(fā)明的穿透劑包括(但不限于)三酸甘油酯(例如大豆油)、蘆薈組合物(例如真蘆薈膠(aloe-vera gel))、乙醇、異丙醇、辛基苯基聚乙二醇、油酸、聚乙二醇400、丙二醇、N-癸基甲基亞砜、脂肪酸酯(例如十四烷酸異丙酯、月桂酸甲酯、單油酸甘油酯和丙二醇單油酸酯)和N-甲基吡咯烷酮。
在某些實施例中，組合物可呈軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、散劑、溶液、噴霧、吸入劑或貼片形式。在某些例示性實施例中，本發(fā)明組合物的調配物為乳膏，其可另外含有飽和或不飽和脂肪酸，諸如硬脂酸、棕櫚酸、油酸、棕櫚基-油酸、十六醇或油醇，尤其優(yōu)選硬脂酸。本發(fā)明的乳膏還可含有非離子型表面活性劑，例如聚氧-40-硬脂酸酯。在某些實施例中，在無菌條件下使活性化合物與醫(yī)藥學上可接受的載劑和可能需要的任何所需防腐劑或緩沖劑混雜。眼科調配物、滴耳劑和滴眼劑也涵蓋于本發(fā)明范疇內。此外，本發(fā)明涵蓋皮膚貼片的用途，其具有提供化合物至身體的控制傳遞的額外益處。通過將化合物溶解或分散于適當介質中來制備所述劑型。如上文所述，穿透增強劑也可用于增加化合物穿過皮膚的通量?？赏ㄟ^提供速率控制膜或通過將化合物分散于聚合物基質或凝膠中來控制速率。
在某些例示性實施例中，貼片中含有本發(fā)明的醫(yī)藥學上可接受的局部調配物，所述貼片靠近待處理皮膚區(qū)域施用。如本文所用的“貼片”包含至少一種局部調配物和覆蓋層，使得貼片可安置于皮膚區(qū)域上?？山Y合本發(fā)明組合物和方法使用所屬領域中已知的任何貼片。
在某些例示性實施例中，本發(fā)明化合物可用作支架的涂層?？稍诶鏦O 05/023792中找到以此職能使用式(I)或(II)化合物的指南。
共投與 還應了解式(I)或(II)化合物和醫(yī)藥組合物可以組合療法調配和采用，也就是說化合物和醫(yī)藥組合物可與一或多種其它所要治療劑或醫(yī)學程序一起調配或在一或多種其它所要治療劑或醫(yī)學程序的同時、之前或之后投與。組合方案中采用的療法(治療劑或程序)的特定組合將考慮所要治療劑和/或程序與待達成的所要治療效果的相容性。還應了解，所采用療法可對同一病癥達成所要效果(舉例來說，本發(fā)明化合物可與另一抗癌劑同時投與)，或可達成不同效果(例如控制任何不良效應)。
舉例來說，可與本發(fā)明式(I)或(II)化合物組合使用的其它療法或抗癌劑包括手術、放射療法(僅舉例來說，γ-照射、中子束照射療法、電子束照射療法、質子療法、短程放射治療和全身性放射性同位素等)、內分泌療法、生物反應改性劑(干擾素、白細胞介素和腫瘤壞死因子(TNF)等)、高溫和低溫療法、減弱任何不良效應的藥劑(例如止吐劑)和其它批準化學治療藥物，包括(但不限于)烷基化藥物(氮芥(mechlorethamine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide)、美法侖(Melphalan)、異環(huán)磷酰胺(Ifosfamide))、抗代謝物(甲胺喋呤(Methotrexate))、嘌呤拮抗劑和嘧啶拮抗劑(6-巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷(Cytarabile)、吉西他濱(Gemcitabine))、紡綞體抑制劑(長春花堿(Vinblastine)、長春新堿(Vincristine)、長春瑞濱(Vinorelbine)、紫杉醇(Paclitaxel))、鬼臼霉素(podophyllotoxins)(依托泊苷(Etoposide)、依立替康(Irinotecan)、拓撲替康(Topotecan))、抗生素(阿霉素(Doxorubicin)、博萊霉素(Bleomycin)、絲裂霉素(Mitomycin))、亞硝基脲(nitrosourea)(卡氮芥(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine))、無機離子(順鉑(Cisplatin)、卡鉑(Carboplatin))、酶(天冬酰胺酶)和激素(他莫西芬(Tamoxifen)、亮丙瑞林(Leuprolide)、氟他米特(Flutamide)和甲地孕酮(Megestrol))等?？膳c式(I)或(II)化合物或組合物組合使用的其它抗癌劑包括治療性抗體或抗體片段，諸如人類、人化、嵌合和/或單鏈抗體或抗體片段(例如Fv、Fab、Fab′、F(ab′)2、dAb)等(例如曲妥珠單抗(Trastuzumab)、貝伐單抗(Bevacizumab)、西妥昔單抗(Cetuximab)、利妥昔單抗(Rituximab))。更新癌癥療法的更全面論述參看默克手冊(The Merck Manual)，第17版1999，其全部內容以引用的方式并入本文中。還參看美國國家癌癥研究所(National Cancer Institute，CNI)網站(www.nci.nih.gov)和食品和藥品管理局(FDA)網站的FDA批準腫瘤學藥物清單(www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe-參看附錄A)。
在某些實施例中，包含式(I)或(II)化合物的醫(yī)藥組合物進一步包含一種或多種其它治療活性成份(例如化學治療劑和/或緩解劑)。出于本發(fā)明的目的，術語“緩解”指的是關注疾病癥狀和/或治療方案副作用減輕，而非治愈的治療。舉例來說，緩解治療涵蓋止痛藥、止吐藥和抗惡心藥。此外，化學療法、放射療法和手術都可以緩解方式使用(即，減輕癥狀而不治愈；例如使腫瘤縮小和減輕壓力、出血、疼痛和其它癌癥癥狀)。
治療試劑盒 在一些方面中，本發(fā)明提供實施本發(fā)明方法的試劑盒。一般來說，醫(yī)藥包裝或試劑盒包含式(I)或(II)醫(yī)藥組合物的一種或多種成份。舉例來說，試劑盒可包括(完全或部分)填充有式(I)或(II)化合物或組合物的一個或多個容器。所述試劑盒適于例如傳遞固體經口形式，諸如藥片或膠囊。在一些實施例中，試劑盒包括多個單位劑量，且還可包括寫有達到其預定用途的所需劑量的卡片。必要時，可提供例如數字、字母或其它標記或日程插頁形式的記憶輔助物，指出治療時程中可投與劑量的日期。或者，可包括呈與醫(yī)藥組合物劑量類似或不同形式的安慰劑劑量或鈣膳食補充劑，以提供每日攝取劑量的試劑盒。在一些實施例中，試劑盒包括使用試劑盒的其它組份的說明書或用法指南。在一些實施例中，試劑盒包含包括式(I)或(II)化合物的組合物和第二治療劑，以及共投與兩種藥劑的說明書。所述容器可任選地結合有由管理醫(yī)藥品的制造、使用或銷售的政府機關規(guī)定形式的注意事項，所述注意事項反映用于人類投與的制造、使用或銷售機關的批準。
等效物 所屬領域的技術人員僅使用常規(guī)實驗即可了解或能夠確定本文所述本發(fā)明的特定實施例的許多等效物。所述等效物欲均由下文權利要求書所涵蓋。
法律參并 本申請案全文引用的所有參考文獻、專利和專利申請案的內容均以引用的方式并入本文中。
例證 通過說明借以制備或使用這些化合物的一些方法的實例，可進一步理解本發(fā)明化合物和其制備。然而，應了解，這些實例不限制本發(fā)明。認為目前已知或將另外開發(fā)的本發(fā)明的變體在如本文所述和如下文所主張的本發(fā)明范疇內。
本文所列方案僅說明可借以合成本發(fā)明化合物的一些方法，且應理解可對這些方案作出各種修改。
實例1合成化合物 一般反應程序 除非明確說明，否則使用磁力驅動攪拌棒攪拌反應混合物。惰性氛圍一般指的是干燥氬氣或干燥氮氣。通過對反應混合物的合適樣本進行薄層色譜法、質子核磁共振(NMR)或高壓液相色譜(HPLC)來監(jiān)測反應。
常見縮寫包括m-CPBA間氯過苯甲酸；DDQ2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌；DEAD偶氮二甲酸二乙酯；DIBAL-H氫化二異丁基鋁；DMAPN，N-二甲基氨基吡啶；DMFN，N-二甲基甲酰胺；HMPA六甲基磷酰胺；LDA二異丙基胺化鋰；LiHMDS雙(三甲基硅烷基)胺化鋰；PCC氯鉻酸吡錠；TBAF氟化四丁基銨；THF四氫呋喃；CH2Cl2或DCM二氯甲烷；MPM對甲氧基苯甲基；Boc氨基甲酸叔丁基氧基酯；TfOH三氟甲烷磺酸；Tf2O三氟甲烷磺酸酐；TFA三氟乙酸；和TFAA三氟乙酸酐。
合成常見起始物質 化合物003
在40℃下，在攪拌下向三羥基苯甲酸(120g)于350mL丙酮中的溶液中添加500mL TFA(三氟乙酸)。在40℃下1小時后，添加300mL TFAA(三氟乙酸酐)。加熱混合物3天。在低真空下，在50℃下蒸餾混合物移除溶劑。接著以4L CH2Cl2稀釋粗產物，以水、飽和NaHCO3洗滌，干燥且濃縮獲得85g半純固體001。使固體在EtOH(1g/2mL)中結晶獲得20g純晶體。接著通過硅膠用CH2Cl2至5％MeOH/CH2Cl2純化母液再獲得55g產物001。

在0℃下，在3小時內向001(50g，238mmol)于156mL吡啶中的溶液中添加Tf2O(100mL，595mmol，2.5當量)。接著，使其升溫至室溫且攪拌2小時。以水稀釋反應混合物。過濾混合物，且以水洗滌過濾器上的固體，在真空下干燥獲得100g固體002。

在150mL甲苯中混合二(三氟甲磺酸)酯002(45.35g)、BocNH2(17.22g)、Pd2(dba)3(4.38g)和Pt-Bu3(4.38g)。向此混合物中添加三乙胺(26.92mL)且在80℃下在惰性氛圍下加熱反應物4小時。冷卻粗反應混合物且經硅藻土墊過濾。濃縮濾液且經硅膠用己烷/EtOAc，9∶1、4∶1純化獲得28.3g所要產物(化合物003)。
合成常見中間體 如流程1中所說明合成中間體009和010。

流程1 化合物004 將DMPU(42ml)中的化合物003(18.6g，42.1mmol)冷卻至0℃。使用注射泵緩慢添加雙(三甲基硅烷)胺化鋰于THF中的溶液(1.0M，47ml，47mmol)，保持內部溫度低于5℃。所得暗紅-棕色溶液在0℃下再攪拌1小時20分鐘。通過套管經10分鐘添加TBSO-碘乙烷(16.0g，55.9mmol)，同時保持內部溫度低于3℃。在0℃下再攪拌反應混合物10分鐘，且隨后在室溫下攪拌整夜。以飽和碳酸氫鈉(30ml)中止反應，且在減壓下移除溶劑。通過急驟色譜法以5％EtOAc/己烷洗提純化殘余物，獲得18.5g(74％)所要純產物(化合物004)。1H-NMR(400MHz，C6D6)δ7.20(d，J＝2.0Hz，1H)，3.59(t，J＝5.2Hz，2H)，3.41(d，J＝5.2Hz，2H)，1.29(s，9H)，1.18(s，6H)，0.82(s，9H)，-0.07(s，6H)；MS m/e(M+23)＝622。
化合物006 向005(13.0g，33.4mmol)和004(18.6g，31.0mmol)中添加N-甲基吡咯烷酮(30mL)、二環(huán)己基甲胺(8ml，37.4mmol)和Pd2(DBA)3(8.51g，9.29mmol)。在100℃下加熱混合物2.5小時，且接著在110℃下加熱10小時。接著在減壓下加熱移除溶劑。通過急驟色譜以10-17％EtOAc/己烷梯度溶劑洗提純化殘余物，獲得24.7g(90％)化合物006。1H-NMR(400MHz，C6D6)δ8.10(d，J＝16.0Hz，1H)，7.45(d，J＝2.0Hz，1H)，7.30(d，J＝8.8Hz，2H)，7.05(d，J＝2.0Hz，1H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，6.57-6.49(m，1H)，5.62-5.48(m，2H)，4.6(d，1H)，4.48(m，1H)，4.38-4.32(m，1H)，4.22(d，1H)，4.17-4.13(m，1H)，3.68(m，2H)，3.58(m，2H)，3.49-3.45(m，1H)，3.34(s，3H)，2.85-2.77(m，1H)，2.73-2.67(m，1H)，2.63-2.56(m，1H)，1.44(s，3H)，1.37(s，9H)，1.24(s，6H)，1.20(s，3H)，1.13(d，J＝6.0Hz，3H)，1.03(d，J＝6.8Hz，3H)，0.88(s，9H)，-0.02(s，6H)；MS m/e(M+23)＝862。
化合物007 在室溫下，經1.5小時的時段，通過注射泵沿壁向THF(1.48L)中的006(12.0g，14.3mmol)中緩慢添加甲苯(0.5M，30mL，6.0mmol)中的雙(三甲基硅烷)胺化鉀。以氯化銨水溶液(800ml)中止反應。分離各層，且有機層以MTBE(3×400mL)反萃取三次，且以乙酸乙酯(3×400mL)反萃取3次。經合并萃取物以硫酸鈉干燥且濃縮。通過急驟色譜以5％接著10％EtOAc/己烷洗提純化殘余物獲得5.99g(54％)化合物007和2.32g(19％)回收的起始物質006。007的1H-NMR(400MHz，C6D6)δ7.29(d，J＝2.4Hz，1H)，7.19(d，J＝15.6Hz，1H)，7.14(d，J＝2.4Hz，1H)，6.93(d，J＝8.4Hz，1H)，6.78(d，J＝8.4Hz，1H)，5.93-5.86(m，1H)，5.67(dd，J＝8.8和9.2Hz，1H)，5.46(dd，J＝10.4和8.8Hz，1H)，5.22(dd，J＝9.6和10.4Hz，1H)，4.88-4.82(m，1H)，4.42-4.36(m，1H)，4.25-4.19(m，2H)，3.80-3.76(m，1H)，3.72-3.60(m，4H)，3.29(s，3H)，3.11-3.02(m，1H)，2.83-2.74(m，1H)，2.64-2.57(m，1H)，1.42(s，3H)，1.35(s，9H)，1.23(s，3H)，1.04(d，J＝6.4Hz，3H)，0.90(s，9H)，0.77(d，J＝7.2Hz，3H)，0.01(s，6H)；MS m/e(M+23)＝804。
化合物008 向在0℃(冰/水浴)下冷卻的THF中的007(5.94g，7.60mmol)中添加DBU(4.9mL，33mmol)，接著沿壁逐份添加甲氧基甲基氯(2.3mL，30.3mmol)。攪拌3小時后，反應混合物以氯化銨水溶液、水和鹽水洗滌3次。水層以MTBE反萃取3次。經合并萃取物以硫酸鈉干燥，且濃縮獲得6.27g(99％)白色泡沫體狀粗產物，對其進行清潔且直接用于下一脫甲硅基反應。通過制備型TLC(以30％EtOAc/己烷洗提)純化少量粗產物，驗證所要產物008。1H-NMR(400MHz，C6D6)δ7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.16(br s，Hz，1H)，7.06(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，2H)，6.82(d，J＝18.0Hz，1H)，6.49-6.41(m，1H)，5.52-5.46(m，2H)，5.33(dd，J＝10.4和10Hz，1H)，4.98(dd，J＝8.8和8.8Hz，1H)，4.82(s，2H)，4.74(d，J＝10.8Hz，1H)，4.58(d，J＝11.2Hz，1H)，4.37(dd，J＝6.4和6.4Hz，1H)，4.17(dd，J＝9.6和7.2Hz，1H)，3.75-3.63(m，4H)，3.26(s，3H)，3.23-3.16(m，1H)，3.09(s，3H)，2.67-2.59(m，2H)，1.35(s，9H)，1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.27(s，3H)，1.11(s，3H)，0.95(d，J＝6.4Hz，3H)，0.90(s，9H)，0.01(s，3H)，0.00(s，3H)；MS m/e(M+23)＝848。
化合物009 在1L圓底燒瓶中將化合物008(6.27g)溶解于THF(230ml)中且冷卻至0℃。通過注射泵經26分鐘向其中添加緩沖TBAF(THF中的1.0M TBAF和0.5M咪唑/HCl，15.2ml)。添加完成后，在室溫下攪拌混合物12小時。反應混合物以碳酸氫鹽飽和水溶液、水和鹽水相繼洗滌。水相以MTBE萃取。經合并有機萃取物以硫酸鈉干燥且通過色譜純化獲得5.08g(94％)呈無色油狀的009。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-6.85(m，6H)，6.78(d，J＝16.0Hz，1H)，6.43(m，1H)，5.52-5.46(m，2H)，5.33(dd，J＝10.4和10.0Hz，1H)，4.96(t，J＝10.0Hz，1H)，4.75(s，2H)，5.25(d，J＝11.2Hz，1H)，4.57(d，J＝11.2Hz，1H)，4.37(dd，J＝6.4和6.4Hz，1H)，4.20-4.15(m，1H)，3.56-3.40(m，4H)，3.25(s，3H)，3.22-3.16(m，1H)，3.07(s，3H)，2.66-2.50(m，2H)，1.30(d，J＝7.2Hz，3H)，1.29(s，9H)，1.27(s，3H)，1.11(s，3H)，0.94(d，J＝6.8Hz，3H)；MS，m/e(m+23)＝734。分離出113mg(2％)副產物化合物023，且用于合成化合物024。
化合物010 向圓底燒瓶中添加009(500mg，0.702mmol)和二氯甲烷(14.0mL)，且使混合物冷卻至0℃。添加三乙胺(0.29mL，2.10mmol)，接著緩慢添加甲烷磺酰氯(0.082mL，1.00mmol)。2小時后，TLC和MS檢驗表明反應完全，清潔且觀測到所要產物。反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉溶液中，且以DCM萃取3次。合并萃取物，且經硫酸鈉干燥，濃縮且接著與甲苯共沸。合理清潔無色油狀粗產物010，且一般在下一反應步驟中使其未經純化即直接遭遇親核物質。產量555mg(100％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.38-6.90(m，6H)，6.83(d，J＝16.4Hz，1H)，6.53(m，1H)，5.57-5.50(m，2H)，5.38(dd，J＝10.0和10.4Hz，1H)，5.00(t，J＝8.8Hz，1H)，4.88(AB，2H)，4.78(d，J＝11.2Hz，1H)，4.61(d，J＝11.2Hz，1H)，4.42(dd，J＝6.8和6.4Hz，1H)，4.24-4.20(m，1H)，4.02(t，J＝5.6Hz，2H)，3.51(t，J＝5.6Hz，2H)，3.30(s，3H)，3.25-3.21(m，1H)，3.12(s，3H)，2.70-2.53(m，2H)，2.20(s，3H)，1.38-1.33(s與d重疊，12H)，1.33(s，3H)，1.16(s，3H)，0.98(d，J＝6.8Hz，3H)；MS，m/e(M+23＝812)。
合成所選化合物 化合物011
向如上文所述制備的010(554mg，0.702mmol)中添加DMF(5.44mL)和咪唑鈉衍生物(1.26g，14.0mmol)。在室溫下攪拌混合物整夜。TLC檢驗表明反應完全。在減壓下移除溶劑，且使殘余物在二氯甲烷(DCM)與碳酸氫鹽水溶液之間分配。以DCM(3×100ml)萃取混合物，且經合并有機萃取物經硫酸鈉干燥且濃縮。通過急驟色譜以10-50％EtOAc/己烷梯度和0-7％MeOH/DCM洗提純化殘余物，獲得531mg(100％)呈白色泡沫體狀的011。
接著使化合物011經受DDQ、戴斯-馬丁氧化(Dess-Martin oxidation)相繼處理，獲得化合物012，且與下文化合物091的合成類似，經TFA/水和TfOH/水處理，獲得呈白色粉末狀的類似物013。產量41mg(55％)。1H NMR(400MHz，10％CD3OD/CDCl3)δ1.07(d，3H，J＝8Hz)，1.29(d，3H，J＝8Hz)，1.97(m，1H)，2.06(m，1H)，3.42(m，3H，J＝4Hz)，3.85(br s，2H)，3.93(m，1H)，4.05(t，2H，8Hz)，4.39(d，1H J＝3Hz)，4.78(m，1H，J＝3Hz)，5.82(m，1H，3Hz)，5.89(d，1H，J＝3Hz)，5.92(d，1H，J＝3Hz)，6.02(dd，1H，J＝12Hz)，6.13(d，1H，J＝12Hz)，6.73(d，1H，J＝16Hz)，6.88(d，1H，J＝16Hz)，7.38(s，1H)。MS m/e(m+1)456(5％)，(m+23)478(100％)。
化合物014
根據與化合物013的合成相同的程序，但使用N-甲基哌啶代替咪唑鈉，自化合物010合成化合物014。產量18mg(30％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.15(d，2H，J＝6Hz)，1.36(d，2H，J＝6Hz)，1.45(t，2H，J＝6Hz)，1.97(s，1H)，2.08(m，1H)，2.70(t，2H，J＝6Hz)，2.79(s，3H)3.30(m，2H)，3.48(m，2H)，4.05(m，1H)，4.48(d，1H，J＝4Hz)，5.95(m，2H)，6.12(dd，2H，J＝8Hz)，6.32(d，1H，J＝8Hz)，6.88(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+1)488(100％)。
化合物015
根據與化合物013的合成相同的程序，但使用嗎啉代替咪唑鈉，自化合物010合成化合物015。產物為白色粉末，產量80mg(76％)。1H NMR(400MHz，C6D6)δ0.78(d，3H，J＝8Hz)，0.93(t，3H，J＝8Hz)，1.00(d，3H，J＝8Hz)，1.94(m，6H)，2.13(m，2H)，2.61(q，2H，J＝4Hz)，3.46(t，4H，J＝4Hz)，3.94(m，1H)，4.30(d，1H，J＝3Hz)，4.66(m，2H)，5.41(t，1H，J＝8Hz)，5.55(d，1H，J＝12Hz)，5.97(m，1H)，6.02(d，1H，J＝4Hz)，6.22(d，1H，J＝3Hz)，6.94(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+1)475(100％)，(m+23)497(9％)。
化合物016
根據與化合物013的合成相同的程序，但使用吡咯烷代替咪唑鈉，自化合物010合成化合物016。產量14.6mg(47％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.14(d，3H，J＝3Hz)，1.27(s，2H)，1.34(d，3H，J＝3Hz)，1.85，(m，4H，J＝3Hz)，2.08(m，2H)，2.72(m，4H)，2.79(t，2H，J＝8Hz)，3.31(t，2H，J＝8Hz)，3.46(m，1H)，4.04(m，1H)，4.48(d，1H，3Hz)，5.95(m，1H)5.97(d，1H，J＝4Hz)，6.09(d，1H，J＝12Hz)，6.14(d，1H，J＝4Hz)，6.30(d，1H，J＝12Hz)，6.87(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+1)459(100)。
化合物018和019
根據與化合物013的合成相同的程序，但使用2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲胺代替咪唑鈉，自化合物010制備化合物017。017經受DDQ、PCC和TFA相繼處理，獲得化合物018。產量32mg。MS m/e(m+1)579。
接著以與化合物013的合成相同的方式以TfOH處理化合物018，獲得化合物019(9.2mg，23％)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ1.16(d，3H，J＝6.73Hz)，1.36(d，3H，J＝6Hz)，2.09(m，2H)，2.65(s，1H)，3.07(m，1H)，3.23(m，2H)，3.30(m，2H)，3.40(m，4H)，3.54(m，1H)，3.9(m，2H)，4.04(m，2H)，4.48(d，1H，J＝2.4Hz)，5.58(m，1H)，6.06(d，1H，J＝2.4Hz)，6.12(m，2H)，6.19(d，1H，J＝2.4Hz)，6.32(d，2H，J＝11.5Hz)，6.9(d，1H，J＝16Hz)。MS，m/e(m+23)479(100％)。
化合物022
根據與017的合成相同的程序，但使用2-TBSO-乙胺代替2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲胺，自化合物010制備化合物020。接著使化合物020經受Boc2O、DDQ和PCC相繼處理，獲得021，其隨后以與019的合成程序相同的方式以TFA和TfOH處理。在逆相HPLC純化后，獲得呈TFA鹽形式的化合物022(5.2mg)。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ1.18(d，3H，J＝6.75Hz)，1.41(d，3H，J＝6.15Hz)，2.1(m，2H)，2.65(s，1H)，3.15(t，2H，J＝5.25Hz)，3.22(t，2H，J＝6.75Hz)，3.50(m，2H)，3.56(m，2H)，3.63(m，2H)，3.77(m，2H)，3.91(s，1H)，4.02(m，1H)，4.49(t，1H，J＝2.4Hz)，4.93(m，1H)，6.01(m，1H)，6.13(m，2H)，6.23(s，1H)，6.32(d，1H，J＝11.5Hz)，6.92(d，1H，J＝15.85Hz)。MS，m/e(m+1)445(100)。
化合物024
在009合成期間，獲得副產物形式的化合物023(113mg)?；衔?23接著經受與化合物013的合成相同的過程，獲得類似化合物024。產量16.8mg(經3個步驟為30％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ7.18(d，J＝2.4Hz，1H)，7.05(d，J＝2.4Hz，1H)，6.96(d，J＝15.2Hz，1H)，6.34(d，J＝11.2Hz，1H)，6.17(d，J＝10.4Hz，1H)，6.10(m，1H)，5.05-4.94(m，1H)，4.50-4.46(m，3H)，4.10-4.05(m，3H)，3.56-3.49(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)，1.17(d，J＝6.4Hz，3H)；MS，m/e(M+23)＝454，(M-1)＝430。
化合物025
向化合物010(220mg，0.28mmol)中添加甲醇中的氨溶液(2M，100ml)和濃氨水溶液(22ml)。在室溫下攪拌混合物整夜。將反應混合物倒入至碳酸氫鹽飽和溶液(500ml)中，且以DCM萃取四次，且以乙酸乙酯萃取1次。濃縮經合并萃取物，且通過色譜純化殘余物獲得100mg脲化合物(60％)。
脲化合物接著經受與化合物013的合成相同的過程，但應用PCC氧化代替戴斯-馬丁氧化。以91％產率(49mg)獲得化合物025。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ1.14(d，3H，J＝8Hz)，1.38(d，3H，J＝6Hz)，2.07(m，2H)，2.17(m，2H)，2.82(s，2H)，3.18(s，1H)，3.60(m，1H)，4.02(m，2H)，4.07(m，2H)，4.52(m，2H)，4.95(m，1H)，5.33(s，1H)，6.12(m，2H)，6.25(d，1H，J＝12Hz)，6.89(s，1H)，6.93(d，1H，J＝3Hz)，7.25(d，1H，J＝3Hz)。MS，m/e(m+23)453(100％)。
化合物029
自008合成化合物029?；衔?08經受DDQ、戴斯-馬丁氧化相繼處理，獲得027。類似于013的合成，027接著以TFA/水和TfOH/水處理，獲得呈白色粉末狀的類似物029。產量40.1mg(45％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.16(d，3H，J＝8Hz)，1.20(d，1H，J＝4Hz)，1.12(s，1H)，1.25(t，8H，J＝8Hz)，1.39(d，3H，J＝8Hz)，2.04(s，8H)，3.31(t，2H，J＝4Hz)，3.54(m，1H)，3.82(t，2H，4Hz)，3.91(m，1H)，4.04(m，1H)，4.48(s，1H)，4.86(m，1H)，5.30(s，1H)，5.94(m 1H)，6.03(d，1H，J＝4Hz)，6.09(d，1H，J＝4Hz)，6.16(q，2H，J＝8Hz).6.83(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+23)428(100％)。
化合物034
在無水乙腈(1.581mL，0.03027mol)中混合化合物009(310.0mg，0.0004355mol)、氧化銀(I)(202mg，0.000871mol)和碘甲烷(542.2μl，0.008710mol)，且在密封試管中用微波加熱混合物5分鐘時間間隔。TLC(5％MeOH/DCM)顯示反應完全。經硅藻土545過濾反應混合物，且通過色譜純化殘余物12g Redi-Sep填充硅膠柱，使用0-5％丙酮/DCM，導致不完全分離，必需使用5％丙酮/DCM以2mm制備型板X2再純化。重復此過程，自所要產物移除所有副產物。EtOAc/己烷共溶劑幫助自所要產物030移除所有雜質。產量160mg(51％)。接著，根據與013的合成相同的程序，獲得化合物034。產量25mg(47％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.17(d，3H，J＝8Hz)，1.26(t，1H，J＝8Hz)，1.40(d，3H，J＝8Hz)，2.05(s，1H)，2.14(m，2H)，2.62(d，1H，J＝3Hz)3.31(t，2H，J＝3Hz)，3.38(s，3H)，3.58(t，3H，J＝4Hz)，3.86(d，1H，J＝4Hz)，4.01(s，1H)，4.12(q，1H，J＝4Hz)，4.49(m，1H)4.53(br s，1H)，4.88(m 1H)，5.94(m，1H)，6.03(d，1H，J＝4Hz)，6.09(d，1H，J＝4Hz)，6.17(m 2H)，6.84(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+1)420(30％)，(m+23)442(100％)。
化合物041
009(26.9mg，0.0378mmol)和三苯膦(16.8mg，0.0642mmol)溶解于甲苯(0.40mL，3.78mmol)中。同時一次性添加碘甲烷(3.06μl，0.049mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(6.54μl，0.0416mmol)。攪拌反應混合物1.5小時，且通過TCL以15分鐘時間間隔監(jiān)測。攪拌反應物整夜。第二天早晨，TLC(50％EtOAc/己烷)顯示產物與起始物質的1∶1混合物，此通過MS確認。再添加三苯膦(16.8mg，0.0642mmol)，隨后同時添加碘甲烷(3.06μl，0.0491mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(6.54μl，0.0416mmol)。以10分鐘時間間隔監(jiān)測反應，且仍顯示大量起始物質。再添加三苯膦(16.8mg，0.0642mmol)，隨后同時添加碘甲烷(3.06μl，0.0491mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(6.54μl，0.0416mmol)。通過TLC以10分鐘時間間隔監(jiān)測反應，且顯示反應完全。進行水性處理且以MTBE萃取。有機萃取物經硫酸鈉干燥且濃縮。殘余物裝載至4g Redi-sep柱上，且以10％乙醇/己烷洗提。通過TLC、MS和NMR確認，分離出澄清油狀的化合物035。產量31mg(100％) 使用與化合物013的合成所用相同的程序，向035添加氨基-聚醚部分，產生化合物036。通過NMR、MS和TLC驗證產物結構。產量150.2mg(61％)。
在氮氣氛圍下，向烘干圓底燒瓶中添加036(174.5mg，0.0002036mol)，隨后添加四氫呋喃(1.651mL，20.36mmol)和二碳酸二叔丁酯(222.2mg，1.018mmol)和4-二甲基氨基吡啶(4.97mg，0.0407mmol)。攪拌反應物1小時，且通過TLC和MS測得反應完全。反應混合物以水稀釋，且以MTBE萃取，經硫酸鈉干燥且濃縮。用red-sep柱以0-5％MeOH/DCM洗提純化殘余物(化合物037)。產量162.3mg(83％)。
對化合物037進行與化合物013的合成所用相同的程序，從而獲得最終聚醚產物041。產量43.2mg(80％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.15(d，3H，J＝7Hz)，1.37(d，3H，J＝7Hz)，2.05(s，1H)，2.07(m，2H)，3.05(t，2H，J＝3Hz)，3.08(t，2H，J＝3Hz)，3.36(s，3H)，3.38(m，2H)，3.54(m，2H)，3.64(m，8H)，3.69(m，2H)，4.03(s，1H)，4.18(q，1H，J＝7.1Hz)，4.47(d，1H，J＝3Hz)，4.84(m，1H)，5.40(s，1H)，5.99(m，1H)，6.00(d，1H，J＝3Hz)，6.12(m，4H)，6.79(d，1H，J＝16Hz)。MS m/e(m+1)551(100％)，(m+23)573(10％)。
化合物042
向250ml圓底燒瓶中添加二氯甲烷(4ml)和二氯甲烷中的乙二酰氯溶液(2.0M，2.1ml)。使溶液冷卻至-78℃且添加DMSO。攪拌5分鐘后，添加二氯甲烷中的009(0.05M，55ml，2.75mmol)。再攪拌30分鐘后，添加三乙胺(2.3ml)且使反應混合物經45分鐘升溫至0℃。將混合物倒入至碳酸氫鈉飽和水溶液中。分離各層，且水層使用二氯甲烷反萃取3次。經合并有機萃取物以硫酸鈉干燥且濃縮。
在200ml圓底燒瓶中混合上述粗醛產物(1.95g)與叔丁醇(52ml)。經注射器和針向其中添加2-甲基-2-丁烯、亞氯酸鈉(2.5g)、磷酸氫鉀(1.8g)和水(25ml)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。添加硫代硫酸鈉水溶液(150ml)和乙酸乙酯(150ml)，且攪拌混合物1小時。分離各層，且使水層冷卻至0℃，使用1N HCl酸化至約3的pH值，且使用乙酸乙酯反萃取3次。經合并有機萃取物以蒸餾水洗滌3次，以硫酸鈉干燥且濃縮，經2個步驟獲得1.8g(90％)。如上文流程中所示，自042合成四種類似物。
化合物045
向10ml圓底燒瓶中添加化合物042(316mg)、二甲銨-OOBt鹽(370mg)、HBTU(672mg)、三乙胺(0.43ml)和二氯甲烷(3ml)且在室溫下攪拌混合物整夜。反應混合物倒入碳酸氫鈉飽和水溶液中，且使用二氯甲烷萃取3次。以硫酸鈉干燥經合并萃取物，且通過Biotage色譜純化獲得320mg(98％)043。化合物043接著經受與化合物013的合成相同的程序，獲得化合物045。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ6.88(d，J＝15.2Hz，1H)，6.32(d，J＝11.6Hz，1H)，6.19(d，J＝2.4Hz，1H)，6.12(dd，J＝11.6和10.0Hz，1H)，6.02-5.95(m，1H)，5.96(d，J＝2.4Hz，1H)，4.48(d，J＝2.0Hz，1H)，4.06-4.03(m，1H)，3.99(s，2H)，3.50-3.43(m，1H)，3.07(s，3H)，2.97(s，3H)，2.16-2.02(m，2H)，1.36(d，J＝6.4Hz，3H)，1.15(d，J＝7.2Hz，3H)；MS m/e(M+23)＝469。
化合物046
化合物046的合成與合成045相同，但使用甲基銨-OOBt鹽代替二甲基銨-OOBt。MS m/e(M+23)＝455。
化合物047
化合物047的合成與045的合成相同，但使用銨-OOBt鹽代替二甲基銨-OOBt，且使用氯鉻酸吡錠(PCC)代替戴斯-馬丁試劑。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ6.89(d，J＝15.2Hz，1H)，6.31(d，J＝11.2Hz，1H)，6.16(d，J＝2.4Hz，1H)，6.12(dd，J＝11.2和9.6Hz，1H)，6.02-5.94(m，1H)，5.92(d，J＝2.4Hz，1H)，4.48(d，J＝2.0Hz，1H)，4.06-4.03(m，1H)，3.77(s，2H)，3.50-3.43(m，1H)，2.16-2.02(m，2H)，1.35(d，J＝6.0Hz，3H)，1.15(d，J＝7.2Hz，3H)；MS m/e(M+23)＝441。
化合物048
化合物042經受與化合物013的合成相同的程序，獲得8.5mg(58％)化合物048。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ1.16(d，3H，J＝6.75Hz)，1.36(d，3H，J＝5.86Hz)，2.0(s，2H)，2.10(m，2H)，3.3(m，1H)，3.47(m，1H)，3.64(s，1H)，3.87(s，2H)，4.05(m，1H)，4.09(d，1H，J＝7Hz)，4.12(m，1H)，4.48(d，1H，J＝2.40Hz)，5.91(d，1H，J＝2.40Hz)，5.97(m，1H)，6.10(m，1H)，6.12(m，1H)，6.16(d，1H，J＝3Hz)，6.32(d，1H，J＝12Hz)，6.89(d，1H，J＝15.5Hz)。MS m/e(m-1)418(100％)。
化合物054
化合物009(200mg，0.00028mol)溶解于二氯甲烷(1.44mL，0.0225mol)中。添加二烯丙基二異丙基亞磷酰胺(172mg，0.000702mol)和三氟乙酸吡錠(136mg，0.000702mol)。在20-25℃下攪拌反應混合物。使反應物冷卻至約0-5℃，且添加水中的30％H2O2(3∶7，H2O2∶水，0.14mL)。15分鐘后，TLC(MTBE)顯示中間體消失。向反應物中添加水(1.98mL，0.1101mol)，且產物以MTBE萃取3次。干燥有機相，且接著在旋轉蒸發(fā)器(rotavap)上濃縮成粗無色膜。用4g redi-sep柱以0-10％丙酮/DCM洗提純化產物(化合物049)。產量242mg(99％)。049的DDQ脫除保護基與化合物013的合成中相同，獲得201mg(97％)化合物050。
在氮氣氛圍下，向圓底燒瓶中添加溶解于四氫呋喃(4mL)中的化合物050(100.5mg，0.134mmol)，隨后添加四(三苯膦)鈀(0)(31mg，0.027mmol)、硅烷、苯基膦(99.0μL，0.000802mol)和三苯基膦(42mg，0.00016mol)。攪拌混合物60分鐘，且以15分鐘時間間隔監(jiān)測反應物，直至TLC(1∶1Maigic)顯示反應完全。在真空下移除溶劑。殘余物溶解于2∶3∶1溶劑系統(tǒng)中，且裝載至1″直徑柱中的DEAE樹脂上。以2∶3∶1溶劑系統(tǒng)沖洗樹脂，移除所有催化劑和非極性材料。在濾液變澄清后，使用0.04M乙酸銨繼續(xù)洗滌樹脂，且洗提產物(化合物051)。乙酸銨濃度升至0.1M，從而自樹脂分離剩余產物。收集含有產物的部分，且濃縮成殘余物；燒瓶置于高度真空下，且加熱至40℃以移除所有痕量乙酸銨。產量94.3mg(100％)。
合成化合物054的剩余程序與類似物化合物013類似，但如上文關于化合物051所示，以DEAE樹脂完成054的處理和純化。1H-NMR、31P-NMR和MS驗證結構。產物054呈游離形式。產量7.0mg(30％)；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ1.15(d，3H，J＝6.75Hz)，1.36(d，3H，J＝5.9Hz)，2.10(m，2H)，3.3(m，2H)，3.45(m，1H)，4.01(q，2H，J＝6Hz)，4.06(m，2H)，4.48(d，1H，J＝3Hz)，5.93(d，1H，J＝3Hz)，5.98(m，1H)，)，6.12(m，1H)，6.18(d，1H，J＝3Hz)，6.32(s，1H，J＝12Hz)，6.87(s，1H，J＝16Hz)。31P NMR(400MHz，CD3OD)δ2.60(s，IP)。MS m/e(m-1)484 化合物065
如上文所示，以與化合物006的合成類似的方式合成化合物055。在室溫下向055(5.3g，7.95mmol)和2，6-二甲基吡啶(2.3ml，19.87mmol)的溶液中逐滴添加TBSOTf(2.19ml，9.54mmol)。反應混合物以碳酸氫鈉水溶液中止，且以乙酸乙酯萃取水相。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的5-10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得5.26g所要產物(化合物056)。
在室溫下向甲醇(100ml)中的056(5.26g，6.73mmol)中添加K2CO3(1.86g)。攪拌反應混合物2小時，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得2.48g所要產物057。
在0℃下，向二氯甲烷(20ml)中的057(2.48g，3.56mmol)和吡啶(0.86ml)中逐滴添加Tf2O(0.72ml)。使反應混合物升溫至室溫，且攪拌2小時。以NaHCO3水溶液中止反應。以乙酸乙酯萃取水層，且以MgSO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的5-10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得2.77g所要產物058。

將化合物058(1.74g，2.1mmol)、化合物059(0.62g)和(外消旋)-BINAP(196.1mg)稱量至100ml圓底反應燒瓶中且以甲苯共沸干燥。在干燥箱中將Pd(OAc)2(47.1mg)和Cs2CO3(821.1mg)稱量至反應燒瓶中。自干燥箱移出燒瓶，且添加經脫氣甲苯(20ml)。將反應混合物加熱至80℃歷時15小時，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的5-10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得1.64g所要產物060。
通過將咪唑HCl(659.0mg)溶解于TBAF(THF中1.0M，12.6ml)中來制備經緩沖TBAF。將060(1.67g)于經緩沖TBAF中的溶液加熱至60℃且攪拌60小時。用NH4Cl水溶液中止反應。以乙醚萃取水相。合并有機物，且以Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10-30％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得0.80g所要產物061。
在0℃下，向t-BuOK(1.31ml，THF中1.0M)于THF(9ml)中的溶液中緩慢添加THF(3ml)中的化合物061(710mg，0.87mmol)，且接著以2ml THF沖洗。完成起始物質的添加后，在0℃下添加THF(2ml)中的TBSCl(138.7mg)。在20分鐘內中止反應，且以AcOEt萃取水相。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得401.3mg所要產物(化合物062)。
向二氯甲烷和水(10ml，4∶1混合物)中的062(401.3mg，0.46mmol)中添加DDQ(128.0mg)，且在室溫下攪拌2小時。以Na2SO3和NaHCO3水溶液中止反應。以AcOEt萃取水性材料。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得335.4mg所要產物063。
在室溫下，向二氯甲烷(8ml)中的063(335.4mg，0.45mmol)和吡啶(54.4μl)中添加戴斯-馬丁高碘烷(259.2mg)。攪拌反應混合物1小時，且以NaHCO3水溶液中止。以AcOEt萃取水性材料。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得232.5mg所要產物064。
在0℃下，向甲苯/水(1ml/0.035ml)中的064(47.1mg，0.063mmol)中添加CF3SO3H(16.8μl)。攪拌反應混合物1.5小時，且升溫至室溫。再添加TfOH(16.8μl)，且在5分鐘內以NaHCO3飽和水溶液中止反應。以AcOEt萃取水相。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以二氯甲烷中的10％甲醇洗提純化殘余物，獲得7.4mg所要產物065。1HNMR(CD3OD)6.92，(d，J＝15.6Hz，1H)，6.36，(s，1H)，6.35(s，1H)，6.34(d，J＝11.6Hz，1H)，6.32(d，J＝15.2Hz)，6.13(dd，J＝11.6，10.0Hz，1H)，6.04-5.96(m，1H)，4.96-4.86(m，1H)，4.48(d，J＝2.0Hz，1H).4.08-4.02(m，1H)，3.95-3.87(m，2H)，3.86-3.79(m，1H)，3.64-3.53(m，2H)，3.52-3.43(m，1H)，2.18-2.02(m，2H)，1.38(d，J＝6.4Hz，3H)，1.16(d，J＝7.2Hz.3H)。
化合物069
向圓底燒瓶中添加057(2.331g，0.003345mol)、三苯膦(1.14g，0.00435mol)和四氫呋喃(13.6mL，0.167mol)。在氮氣氛圍下，使混合物冷卻至0℃。添加咪唑乙醇部分(0.450g，0.00401mol)，隨后添加偶氮二甲酸二乙酯(0.685mL，0.00435mol)。在攪拌下使反應物緩慢升溫至室溫。TLC測試揭示濃產物點以及一些未反應起始物質。使反應物冷卻至0℃，且再添加0.2當量胺、三苯膦和DEAD。移除冰浴，且使反應物升溫至室溫。30分鐘后，TLC顯示反應完全，且所有起始物質都被消耗。在高度真空下移除所有溶劑。將殘余物溶解于MTBE中，使混合物在冰浴中冷卻，且濾出一些磷酸三苯酯。以40g柱使用0-5％MeOH/DCM純化殘余物。合并含有化合物066的產物部分，且濃縮成殘余物。產量3.65g(100％)。
使用具有咪唑鹽酸鹽的經緩沖TBAF移除TBS保護基，化合物067的總產量為約2.0g(90％)。
使用與化合物007的合成中所用相同的程序，自067制備化合物068。合并所有批次，總產量為467mg(50％)。
中間體化合物068以DDQ脫除保護基，接著以戴斯-馬丁試劑氧化，且以TfOH脫除保護基，獲得產物(化合物069)(100mg)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)d 1.19(d，J＝7.2Hz，3H)，1.43(d，J＝6.0Hz，3H)，2.10-2.25(m，2H)，3.58-3.65(m，1H)，4.00-4.03(m，1H)，4.22(t，J＝5.2Hz，2H)，4.34(t，J＝5.2Hz，2H)，4.50(d，J＝2.4，1H)，4.88-4.95(m，1H)，5.96-6.03(m，1H)，6.14(dd，J＝9.6，11.2Hz，1H)，6.22(d，J＝11.6，1H)，6.33(d，J＝2.4Hz，1H)，6.37(d，J＝2.8Hz)，6.86(d，J＝15.6Hz，1H)，7.03(s，1H)，7.08(s，1H)，12.17(s，1H)。
化合物076
將如上文合成的化合物058(459.7mg，0.55mmol)、化合物070(104.6mg)和(外消旋)-BINAP(51.8mg)稱量至25ml圓底反應燒瓶中且以甲苯共沸干燥。在干燥箱中將Pd(OAc)2(12.4mg)和Cs2CO3(216.8mg)稱量至反應燒瓶中。自干燥箱移出燒瓶，且添加經脫氣甲苯(3ml)。將反應混合物加熱至80℃歷時60小時，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的5-10％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得247.5mg所要產物(化合物071)。
通過將咪唑HCl(108.3mg)溶解于TBAF(THF中1.0M，2.1ml)中來制備經緩沖TBAF。將071(247.5mg，0.3mmol)于經緩沖TBAF中的溶液加熱至60℃且攪拌36小時。用NH4Cl水溶液中止反應。以乙醚萃取水性材料。合并有機物，且以Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過SiO2急驟柱色譜以己烷中的10-20％乙酸乙酯洗提純化殘余物，獲得116.6mg所要產物(化合物072)。
在0℃下向t-BuOK(0.24ml，THF中1.0M)于THF(2ml)中的溶液中緩慢添加THF(1ml)中的072(116.6mg，0.16mmol)，且以2ml THF沖洗。完成起始物質的添加后，在0℃下添加THF(2ml)中的TBSCl(25.6mg)。在20分鐘內中止反應，且以AcOEt萃取水性材料。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過以己烷中的30％乙酸乙酯顯色的pTLC純化殘余物，獲得40.0mg所要產物(化合物073)。

向二氯甲烷和水(2ml，4∶1混合物)中的化合物073(40.0mg，0.051mmol)中添加DDQ(14.2mg)，且在室溫下攪拌整夜。以Na2SO3和NaHCO3水溶液中止反應。以AcOEt萃取水相。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過以己烷中的20％乙酸乙酯顯色的pTLC純化殘余物，獲得25.0mg所要產物(化合物074)。
在室溫下，向二氯甲烷(2ml)中的化合物074(25.0mg，0.038mmol)和吡啶(6.1μl)中添加戴斯-馬丁高碘烷(31.0mg)。攪拌反應混合物5小時，且以NaHCO3水溶液中止。以AcOEt萃取水相。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過以己烷中的30％乙酸乙酯顯色的pTLC純化殘余物，獲得24.0mg所要產物(化合物075)。
在0℃下，向甲苯/水(1ml/0.035ml)中的化合物075(24.0mg，0.037mmol)中添加CF3SO3H(19.4μl)。攪拌反應混合物10分鐘，且升溫至室溫。在1小時內，以NaHCO3飽和水溶液中止反應。以AcOEt萃取水性材料。合并有機物，且經Na2SO4干燥。過濾經干燥溶液，且在真空中濃縮。通過以二氯甲烷中的10％甲醇顯色的pTLC純化殘余物，獲得2.4mg所要產物(化合物076)。1HNMR(CDCl3)6.86(d，J＝15.2Hz，1H)，6.29(d，J＝2.8Hz，1H)，6.26-6.12(m，3H)，5.99-5.90(m，1H)，4.94-4.84(m，1H)，4.56-4.46(m，2H)，4.06-3.98(m，1H)，3.84(d，J＝5.6Hz，1H)，3.65-3.54(m，1H)，2.50-2.42(m，2H)，2.24-2.08(m，2H)，1.42(d，J＝6.0Hz，3H)，1.26(t，J＝7.2Hz，1H)，1.18(d，J＝6.8Hz，3H)，0.82-0.76(m，2H)，0.56-0.51(m，2H)。
化合物081
在0℃下，向化合物077a、Ph3P和2-TMS-乙醇于甲苯中的溶液中添加DEAD。在室溫下攪拌混合物1小時，隨后以NaHCO3水溶液中止反應。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，獲得077b。
在0℃下，向077b(2.1g，7.4mmol)和DBU(7.1mL，48mmol)于10mL CH2Cl2中的溶液中添加MOM-Cl(2.8mL，37mmol)。在室溫下攪拌混合物15分鐘，隨后以NaHCO3洗滌有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，自硅膠塞以74％產率獲得化合物078(1.8g，5.5mmol)。
在-5℃下，向二異丙胺于THF中的攪拌溶液中逐滴引入己烷中的2.5M n-BuLi。在0℃下攪拌溶液30分鐘，隨后使其冷卻至-78℃。向冷LDA中緩慢添加THF中的化合物078，使得內部溫度保持低于-78℃。在-78℃下攪拌混合物45分鐘，且接著緩慢添加THF中的(PhSe)2，使得內部溫度保持低于-60℃。攪拌反應混合物40分鐘，隨后在-78℃下以NH4Cl水溶液中止反應。在室溫下向混合物中添加EtOAc。分離后，干燥(Na2SO4)有機層且濃縮。使用甲苯中的5％EtOAc自硅膠柱洗提079。

向EtOH中的079中添加2.5N NaOH。使混合物回流12小時，隨后將其酸化，且以EtOAc萃取。干燥(Na2SO4)有機相且濃縮獲得固體080。在0℃下，向080、Ph3P和2-TMS-乙醇于甲苯中的溶液中添加DEAD。在室溫下攪拌混合物1小時，隨后以NaHCO3中止反應。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，獲得化合物081。
化合物087
向化合物081和082于10∶1THF-HMPA中的冷(-78℃)溶液中逐滴引入THF中的LiHMDS。在添加期間，保持內部溫度低于-70℃。在-78℃下攪拌混合物約30分鐘，隨后以NH4Cl水溶液中止反應且以EtOAc稀釋。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化以82％產率獲得083(1.9g，1.6mmol)。
向083于CH2Cl2中的冷(0℃)溶液中分三份添加m-CPBA(1.0g，4.2mmol)。在0℃下攪拌混合物1小時，隨后添加Et3N。在室溫下攪拌反應混合物1小時后，以Na2S2O3水溶液中止反應且以NaHCO3水溶液稀釋。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，獲得化合物084。
在以0.33摩爾當量咪唑·HCl緩沖的TBAF溶液中引入084于THF中的溶液。在50℃下攪拌混合物12小時，隨后以Et2O稀釋，且以NH4Cl水溶液洗滌。干燥(Na2SO4)有機相，且濃縮獲得粗085，將其溶解于CH2Cl2中，且逐滴添加至碘化2-氯-1-甲基吡錠和n-Bu3N于CH2Cl2中的回流混合物中。使混合物回流2小時，隨后以Et2O稀釋且以0.05N HCl、H2O和NaHCO3洗滌。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，獲得化合物086。
向086(0.87g，1.3mmol)于7mL THF中的溶液中引入THF中的TBAF(7.0mL，7.0mmol)。在室溫下攪拌混合物4小時，隨后以Et2O稀釋，且以鹽水洗滌。干燥(Na2SO4)有機相，濃縮且通過硅膠色譜純化，以經3個步驟58％的產率獲得化合物087(0.43g，0.78mmol)。
化合物091
在0℃下，向087(0.95g，1.7mmol)和Et3N(0.58ML，4.2mmol)于20ML CH2Cl2中的溶液中添加Tf2O(0.42ML，2.5mmol)。攪拌混合物10分鐘，隨后添加NaHCO3水溶液。水層以CH2Cl2萃取2次。濃縮有機相且使其通過短硅膠塞(20％EtOAc/己烷)。
在干燥箱中向如此獲得的三氟甲磺酸酯中添加Pd(OAc)2(19mg，0.08mmol)、BINAP(64mg，0.10mmol)和Cs2CO3(0.66g，2.0mmol)。在氮氣下添加二苯甲酮亞胺(0.32ML，1.9mmol)和30mL甲苯，隨后在90℃下加熱混合物14小時。接著以EtOAc和鹽水稀釋混合物。干燥(Na2SO4)有機層且濃縮。
所得粗材料溶解于8mLMeOH和5mLTHF中，隨后在室溫下添加NaOAc(0.56g，6.8mmol)和NH2OH·HCl(0.24g，3.4mmol)。50分鐘后，添加EtOAc和鹽水。干燥(Na2SO4)有機層，濃縮且以硅膠(30EtOAc/己烷)純化，產生結晶化合物088(0.88g，1.6mmol)。
在-55℃至-50℃下，向088(0.88g，1.6mmol)于16mL THF中的溶液中緩慢添加LiHMDS(THF中1N，8.0mmol)。在-45℃下攪拌混合物5分鐘，隨后添加BOC2O(0.38mL，1.8mmol)。在-40℃下攪拌混合物30分鐘后，添加MeI(0.60mL，9.6mmol)。10分鐘后，使混合物升溫至室溫歷時2小時。使混合物冷卻至-35℃，且添加72mL 1NNaOH和48mL EtOH。在45℃下加熱12小時后，以100mL水和150mL CH2Cl2稀釋混合物。水層以50mL CH2Cl2萃取2次。濃縮有機層且通過硅膠色譜(30％EtOAc/己烷)純化，獲得無色凝膠089(0.58g，1.0mmol)。
在室溫下攪拌化合物089(0.40g，0.71mmol)、PCC(0.46g，2.1mmol)、4A分子篩(0.50g)和硅藻土(0.50g)于8ML CH2Cl2中的懸浮液2.5小時，隨后添加Et3N(0.29ML，2.1mmol)。5分鐘后，添加30mL Et2O，且過濾混合物。濃縮濾液，且使其通過短硅膠塞(75％EtOAc/己烷)，獲得無色結晶090(0.35g，0.63mmol)。
在-35℃下，向化合物090(0.35g，0.63mmol)于CH2Cl2中的溶液中緩慢添加TFA(5％水，6ML)。在-20℃下攪拌混合物1小時，隨后添加NaHCO3飽和水溶液(PH約8)和CH2Cl2。水層以CH2Cl2萃取2次。干燥(Na2SO4)有機層，濃縮且通過硅膠色譜(75％EtOAc/己烷)純化，以經8個步驟25％的總產率獲得化合物091(124mg，0.33mmol)。NMR1H-NMR δ(苯-d6)0.80(d，J＝6.8Hz，3H，C4-CH3)，1.02(d，J＝6.0Hz，3H，C3-CH3)，2.07(d，J＝5.1Hz，3H，NCH3)，2.11(m，2H，10-CH2)，2.26(d，J＝11.3Hz，1H，C9-OH)，3.06(m，1H，NH)，3.44(m，1H，4-CH)，3.82(d，J＝5.1Hz，1H，C8-OH)，3.89(ddt，J1＝11.3Hz，J2＝2.8Hz，J3＝7.0Hz，1H，9-CH)，4.22(dd，J1＝2.6Hz，J2＝5.1Hz，1H，8-CH)，4.67(dq，J1＝6.0Hz，J2＝10.4Hz，1H，3-CH)，5.40(dd，J1＝9.6Hz，J2＝11.3Hz，1H，5-CH)，5.48(d，J＝11.3Hz，1H，6-CH)，5.85(d，J＝2.3Hz，1H，芳香族CH)，6.00(dt，J1＝15.2Hz，J2＝7.5Hz，1H，11-CH)，6.13(d，J＝2.3Hz，1H，芳香族CH)，6.98(d，J＝15.4Hz，1H，12-CH)，13.03(s，1H，酚)。MS398(M+Na，100％)。
化合物092
向化合物091(16mg)于CH3CN中的溶液中添加DMAP(20mg)。接著在60℃下攪拌溶液3小時，且接著在室溫下攪拌12小時。用硅膠純化粗混合物，且以60％EtOAc/己烷洗提所要產物092(13mg)。1HNMR(苯-d6)6.79(2H，dd，J1＝16.0Hz，J2＝5.95Hz)；6.09(1H，d，J＝2.3Hz)；5.92(1H，dd，J1＝16.0Hz，J2＝1.4Hz)；5.82(1H，m)；5.81(1H，d，J＝2.3Hz)；4.98(1H，m)；4.42(1H，m)；3.97(1H，m)；3.80(1H，d，J＝5.7Hz)；3.04(1H，m)；2.37(2H，m)；2.04(3H，d，J＝5.7Hz)；2.04(1H，m)；1.67(1H，m)；0.86(3H，d，J＝7.1Hz)；0.56(3H，d，J＝7.1Hz)。應注意，2個烯酮烯烴氫的偶合常數由091中的11Hz變?yōu)?92中的16Hz。
化合物106
向093(165.9g，265mmol)于2.65L己烷中的溶液中添加喹啉(2.65mL)和林德拉催化劑(Lindlar catalyst)(28.2g，13.3mmol，0.05當量)?；旌衔镌谡婵障轮貜兔摎?，且再裝入氮氣(3×)和氫氣(3×)。氫化器的氫氣攝入設定為0.114mol，且通過MS/1HNMR監(jiān)測反應。反應進行整夜后，過濾懸浮液，且再裝入催化劑和氫氣。3天后，經硅藻土過濾反應物。濃縮濾液，且用硅膠純化獲得104g呈油狀的094。
在0℃下，以注射泵經2小時向094(67.4g，107mmol)的溶液中緩慢添加MPMCl(21.9mL，161mmol，1.5當量)和NaHMDS于THF中的1M溶液(140mL，140mmol，1.3當量)。在0℃下攪拌混合物1.5小時后，在0℃下以飽和NH4Cl中止反應且升溫至室溫?；旌衔镆訣tOAc萃取3次，且萃取物以水和鹽水洗滌，且接著干燥且濃縮。用硅膠純化粗產物，定量獲得095。
將095(119.6g，160mmol)溶解于甲醇中的10％NaOH(3.2L，v/v)與3.5mL水的混合物中。在45℃下加熱反應物48小時。冷卻后，以9L CH2Cl2稀釋，以水洗滌2次，以飽和NH4Cl洗滌1次，且以鹽水洗滌1次，且接著干燥且濃縮。用硅膠以10％-25-35％EtOAc/己烷純化粗產物獲得096(78g，96％產率)。

向(COCl)2(25mL，295mmol，2當量)于CH2Cl2(870mL)中的溶液中緩慢添加DMSO(41.85mL，590mmol，4當量)。在-78℃下攪拌30分鐘后，經45分鐘添加096(75g，147.4mmol)于CH2Cl2(160mL)中的溶液。在-78℃下攪拌混合物45分鐘后，在相同溫度下添加Et3N(82.2mL，590mmol，4當量)。再攪拌反應物30分鐘后，使其溫至0℃歷時1.5小時。以750mL飽和NH4Cl中止反應，且以EtOAc萃取3次。干燥萃取物且濃縮。以2.5L EtOAc/己烷1∶1溶液再懸浮粗產物，以水洗滌3次且以鹽水洗滌1次，且接著干燥且濃縮。粗產物097直接用于下一步驟中。
在0℃下，向Ph3PCH3Br(115.8mL，324.3mmol，2.2當量)于THF(870mL)和DMSO(433.6mL)的混合物中的懸浮液中添加n-BuLi(184.3mL 1.6M溶液，294.8mmol，2當量)。攪拌1小時后，在0℃下添加097的溶液(175mLTHF中74.7g，147.4mmol)。30分鐘后，使其升溫至室溫。2小時后，以1.1L飽和NHCl4中止反應，且以EtOAc萃取3次。以水和鹽水洗滌萃取物，且接著干燥且濃縮。用硅膠以5-10％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得66.5g呈油狀的098(89％產率)。
在干燥箱中向098(2.5g，4.95mmol)和三氟甲磺酸酯003(2.7g，6.4mmol，1.3當量)的混合物中添加Pd2(dba)3(1.36g，1.48mmol，0.3當量)。自干燥箱移出混合物后，將其懸浮于8.3mL二惡烷中，且添加N-甲基N-二環(huán)己胺(2.1mL，9.9mmol，2當量)。在劇烈攪拌下，在100℃下加熱反應物12小時。冷卻后，添加6g硅藻土且以EtOAc稀釋。經硅藻土塞過濾混合物且以EtOAc沖洗。濃縮濾液。用硅膠以10-20％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得3g純099(76％產率)。

在0℃下，向099(46.3g，58.16mmol)于DMPU(291mL)中的溶液中添加LiHMDS(116mL THF中的1M溶液，116.3mmol，2當量)。在相同溫度下攪拌混合物40分鐘后，添加EtI(27.9mL，349mmol，6當量)。5分鐘后，使混合物升溫至室溫。攪拌混合物3小時后，在0℃下以1L飽和NHCl4中止反應。以MTBE/己烷(1∶1)萃取混合物。以鹽水洗滌萃取物，且接著干燥且濃縮。用硅膠以15-20％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得40g所要產物100(84％產率)。
向100(48g，58.2mmol)的230mL溶液中添加TBAF(407mL 1M溶液，407mmol，7當量)和咪唑.HCl(21.3g，203.9mmol，3.5當量)的溶液。在60℃下加熱反應物72小時。使混合物冷卻至室溫后，以飽和NH4Cl中止反應且以乙醚萃取3次。以水和鹽水洗滌有機層，且接著干燥且濃縮。用硅膠以20-30％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得31.4g(76％產率)101。
通過注射泵經120分鐘向101(20.3g，28.6g)于3L THF中的溶液中緩慢添加0.5M KHMDS溶液(60mL，30mmol，1.05當量)。攪拌混合物5分鐘后，以1.5L飽和NH4Cl中止反應。以乙醚萃取混合物3次。以鹽水洗滌萃取物，且接著干燥且濃縮。用硅膠以10-20％-50％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得14.2g 102(76％產率)。

向102(19g，29.15mmol)于DMF(194mL)中的溶液中添加咪唑(4g，58.3mmol，2當量)和TBSCl(5.27g，35mmol，1.2當量)。攪拌混合物整夜后，以NaHCO3飽和溶液和水中止反應。以AcOEt萃取混合物。以水和鹽水洗滌有機層，且接著干燥且濃縮。用硅膠柱純化粗產物，獲得22g(99％產率)103。
在0℃下，向103(22g，28.7mmol)于CH2Cl2(230mL)與H2O(57.4mL)的混合物中的溶液中添加DDQ(9.78g，43mmol，1.5當量)。攪拌混合物2小時后，以1L NaHCO3飽和水溶液和10％Na2S2O3水溶液的1∶1混合物中止反應。以乙醚萃取混合物3次。以鹽水洗滌萃取物，且接著干燥且濃縮。用硅膠純化粗產物，獲得18.1g 104。
向104(18g，27.9mmol)于279mL CH2Cl2中的溶液中添加干燥

分子篩(18g)和PCC(18g)。攪拌混合物90分鐘后，以Et3N(19.45mL)中止反應。經硅藻土塞過濾反應混合物，且塞子以己烷中的75％EtOAc(900mL)沖洗。濃縮濾液。用硅膠柱以10-15-20％EtOAc/己烷純化粗產物，獲得14.6g(81％)105。
在2L燒瓶中，將105(8.5g，13.2mmol)溶解于CH2Cl2(82.5mL)中，且使混合物冷卻至0℃。緩慢添加5％H2O/TFA(4.1/78.1mL)溶液(約30分鐘)，且在0℃下攪拌混合物14.5小時。通過TLC監(jiān)測反應。在0℃下以CH2Cl2稀釋反應混合物。接著以NaHCO3于水(相較于TFA為約1.2當量)中的溶液中止反應。使反應物冷卻至室溫，且以CH2Cl2萃取3次，經Na2SO4干燥。接著過濾溶液且濃縮。硅膠色譜(50-60-75％EtOAc/己烷)獲得1064.8g，93％產率。NMR1H-NMRδ(苯-d6)0.65(t，J＝7.2Hz，3H，NCH2CH3，0.81(d，J＝7.0Hz，3H，C4-CH3)，1.03(d，J＝6.0Hz，3H，C3-CH3)，2.12(m，2H，10-CH2)，2.35(d，J＝10.9Hz，1H，C9-OH)，2.52(dt，J1＝5.3Hz，J2＝7.2Hz，2H，NCH2CH3)，3.22(t，J＝5.1Hz，1H，NH)，3.44(m，1H，4-CH)，3.89(m，2H，9-CH和C8-OH)，4.24(dd，J1＝2.4Hz，J2＝4.8Hz，1H，8-CH)，4.67(dq，J1＝6.0Hz，J2＝10.4Hz，1H，3-CH)，5.40(dd，J1＝9.7Hz，J2＝11.4Hz，1H，5-CH)，5.49(d，J＝11.5Hz，1H，6-CH)，5.84(d，J＝2.3Hz，1H，芳香族CH)，6.01(m，1H，11-CH)，6.17(d，J＝2.5Hz，1H，芳香族CH)，6.97(d，J＝15.2Hz，1H，12-CH)，13.05(s，1H，酚)。
化合物114
在0至-5℃下向003(2.914g，6.60mmol)于1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(20.0mL，0.166mol)中的溶液中添加雙(三甲基硅烷)胺化鋰(8.0mL，THF中1.0M)。在零下溫度(cold)下攪拌反應混合物30分鐘后，向溶液中添加3-碘-1-丙烯(0.74mL，7.9mmol)。使所得溶液升溫至室溫，且攪拌4小時。以乙醚稀釋反應混合物，添加10.0ml 1.0N HCl，以乙醚萃取。以飽和碳酸氫鹽(30mL)和鹽水(20mL)洗滌經合并乙醚溶液，且以MgSO4干燥。以10、15％EtOAc/己烷色譜純化，獲得呈白色固體狀的化合物107(2.4g，75％)。
在室溫下，向化合物107于t-BuOH∶THF∶水(100.0mL，t-BuOH∶THF∶水＝10∶3∶1)中的溶液中添加N-甲基嗎啉N-氧化物(0.79g，6.7mmol)和四氧化鋨(1.70g，0.167mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時后，緩慢進行反應。向反應混合物中再添加四氧化鋨(4.71g，0.463mmol)。在室溫下攪拌反應混合物整夜。以EtOAc(250mL)稀釋反應混合物，且添加硫代硫酸鈉(10％，150mL)。以EtOAc(2×250ml)萃取反應混合物的水相，干燥且濃縮。蒸發(fā)溶劑，獲得化合物108(1.8g，70％)。
向108于丙酮(20mL)中的溶液中添加2，2-二甲氧基丙烷(2.0mL，0.016mol)和PTS(110mg)。在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。接著以EtOAc(50mL)稀釋反應混合物，以5％NaOH(40mL)洗滌。以EtOAc(3×50mL)萃取水相。濃縮經合并有機溶劑。色譜純化(20-30％EtOAc/己烷)獲得呈油狀的化合物109(1.63g，84％)。

向10ml燒瓶中添加化合物005(0.9624g，0.002464mol)和109(1.45g，0.00261mol)，在高度真空下干燥混合物。向混合物中添加三(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(0.677g，0.000739mol)，且添加N-甲基吡咯烷酮(2.50mL，0.0259mol)和N-環(huán)己基-N-甲基-環(huán)己胺(1.06mL，0.00493mol)。在80℃下攪拌反應混合物整夜。使反應物冷卻至室溫，且以TBME稀釋。以1N HCl、鹽水洗滌有機溶液，且在減壓下濃縮。色譜純化(20％EtOAc/己烷)獲得化合物110(1.73g，88％)。
在0℃下，通過注射泵向50mL圓底燒瓶中的1.0M叔丁醇鉀(3.2mL，3.2mmol)于THF(10.0mL)中的溶液中添加化合物110(1.72g，2.16mmol)于THF(5.0mL)中的溶液。在添加化合物110后將反應混合物攪拌10分鐘，且在0℃下以THF(5.0mL)中的叔丁基二甲基硅烷基氯(490mg，0.0032mol)中止。以水稀釋反應混合物，且以EtOAc萃取。色譜純化(20％EtOAc/己烷)獲得化合物111(0.64g，35％)。
在0℃下，向111(0.65g，0.00076mol)于DCM(8.0mL)中的溶液中添加水(2.0mL)和2，3-二氯-5，6-二氰基氫醌(0.245g，0.00106mol)。在室溫下攪拌反應混合物3小時。在檢驗TLC(30％EtOAc/己烷)后，以飽和碳酸氫鹽中的硫代硫酸鈉中止反應。以TBME萃取反應混合物，干燥且濃縮。色譜純化(20％-40％EtOAc/己烷)獲得化合物112(0.557g，100％)。

在0℃下，向化合物112(111.2mg，0.0001519mol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加吡啶(18μl，0.00023mol)和戴斯-馬丁高碘烷(0.077g，0.00018mol)。在0℃下攪拌反應混合物30分鐘，TLC仍檢測到一些起始物質。接著使反應混合物升溫至室溫，且攪拌30分鐘。接著以30％EtOAc/己烷稀釋反應混合物，經硅塞過濾所得溶液，且以30％EtOAc/己烷洗滌。色譜純化(30％EtOAc/己烷)獲得化合物113(103.8mg，94％)。
在0℃下，向113(101.5mg，0.0001390mol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加水(20μL)和三氟甲烷磺酸(61.5μl，0.000695mol)。在0℃下攪拌反應混合物20分鐘，且使其升溫至室溫，且再攪拌30分鐘。以飽和碳酸氫鈉中止反應混合物，且以DCM萃取。色譜純化(5％MeOH/DCM)獲得化合物114(42.0mg，69.4％)。
1HNMR(CD3OD)6.86(d，J＝15.6Hz，1H)，6.30(d，J＝11.6Hz，1H)，6.10-6.18(m，2H)，5.93-6.00(m，2H)，4.47(d，J＝2.0Hz 1H)，4.04(t，J＝2.8Hz，1H)，3.78(m，1H)，3.55(m，2H)，3.43(m，1H)，3.30(m，3H)，3.08(m，1H)，2.08(m，2H)，1.35(d，J＝5.6Hz，3H)，1.14(d，J＝7.2Hz，3H)。觀測到質量457.95。
化合物122
在0℃下，向003(176mg，0.399mmol)于DCM(3.0mL)中的溶液中添加三乙基硅烷(510μl，0.0032mol)和三氟乙酸(75μl，0.97mmol)。在0℃下攪拌反應混合物1小時，在檢驗TLC(30％EtOAc/己烷)后仍存在許多起始物質。使反應混合物升溫至室溫，且在環(huán)境溫度下攪拌整夜。通過檢驗TLC發(fā)現沒有太大進展。在0℃下，向反應混合物中再添加TFA(1.0mL)。在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。通過TLC發(fā)現不存在起始物質。將反應混合物倒入至飽和碳酸氫鹽中，以EtOAc(3×20mL)萃取。干燥經合并有機層且過濾。濃縮混合物且用制備型TLC(30％EtOAc/己烷)純化獲得化合物115(0.107g，79％)。
在室溫下，向哌啶-1-甲酸N-叔丁氧羰基酯(448.1mg，0.002101mol)、化合物115(348.0mg，0.001020mol)和乙酸(1300μl，0.023mol)于THF(10.0mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氫化鈉(0.57g，0.0027mol)。在室溫下攪拌反應混合物5小時。隨后在不進行水性處理的情況下濃縮反應混合物。使用制備型TLC(35％EtOAc/己烷)純化獲得化合物116(0.4164g，76％)。
向化合物116(31.0mg，0.0000576mol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(0.0251g，0.000115mol)。向反應混合物中添加4-二甲基氨基吡啶(0.00703g，0.0000576mol)和三乙胺(8.02μl，0.0000576mol)。接著在環(huán)境溫度下攪拌反應混合物整夜。制備型TLC純化(30％EtOAc/己烷)獲得化合物117(16.4mg，45％)。

在反應燒瓶中合并化合物117(0.3916g，0.0006132mol)和005(0.2422g，0.0006202mol)，且在高度真空下干燥。在干燥箱中向上述混合物中添加三(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(0.17g，0.00019mol)。向反應燒瓶中添加N-甲基吡咯烷酮(2.0mL，0.021mol)和環(huán)己胺、N-環(huán)己基-N-甲基-(268μl，0.00125mol)。在80℃下在油浴中攪拌反應混合物20小時。以MTBE稀釋混合物，且以1.0M鹽酸洗滌。以MTBE萃取水相且濃縮。色譜純化(20-40％EtOAc/己烷)獲得化合物118(0.373g，69％)。
在0℃下，經5分鐘向四氫呋喃中的叔丁醇鉀(0.716mL，1.00M)于四氫呋喃(7.20mL，0.0888mol)中的溶液中添加THF(7.2mL)中的化合物118(0.37g，0.00042mol)。在攪拌反應混合物10分鐘后，未觀測到起始物質(TLC，30％EtOAc/己烷)。在0℃下，以THF(1.0mL)中的叔丁基二甲基硅烷基氯(0.108g，0.000716mol)中止反應，且攪拌10分鐘。色譜純化(20％EtOAc/己烷)獲得化合物119(0.182g，46％)。
在0℃下，向化合物119(181.6mg，0.0001942mol)于DCM(8.0mL)中的溶液中添加水(2.0mL)和二氯二氰基醌(57.3mg，0.000252mol)。接著使反應混合物升溫至環(huán)境溫度，且攪拌3小時。在檢測(TLC，30％EtOAc/己烷)不到起始物質后，以1∶110％硫代硫酸鈉/飽和碳酸氫鹽中止反應。以TBME萃取水相。色譜純化(20％-40％EtOAc/己烷)獲得化合物120(0.1461g，92％)。

在0℃下，向化合物120(146.1mg，0.179mmol)于DCM(1.0mL)中的溶液中添加吡啶和戴斯-馬丁高碘烷(0.099g，0.23mmol)。在0℃下攪拌反應混合物30分鐘，TLC仍檢測到一些起始物質。接著使反應混合物升溫至室溫，且在環(huán)境溫度下攪拌直至消耗掉所有起始物質。接著以30％EtOAc/己烷稀釋反應混合物，經硅塞過濾所得溶液，且以30％EtOAc/己烷洗滌。色譜純化(30％EtOAc/己烷)獲得化合物121(107.4mg，74％)。
在0℃下，向化合物121(107.4mg，0.0001321mol)于二氯甲烷(1.50mL，0.0234mol)中的溶液中添加水(22.4μl，0.00124mol)和三氟甲烷磺酸(55.0μl，0.000622mol)。在0℃下攪拌反應混合物90分鐘。仍有一些起始物質未消耗掉(TLC，10％NH4OH/EtOH)。在室溫下再攪拌反應混合物30分鐘，且以20ml TBME稀釋。向反應混合物中添加飽和碳酸氫鈉，以EtOAc(3×20mL)萃取，以EtOAc(3×20mL)進一步萃取水相。以硫酸鈉干燥經合并有機溶劑，且過濾。將粗材料裝載至制備型TLC上，且以10％NH4OH/EtOH(Rf0.1)洗提。收集所要帶，且以10％NH4OH/EtOH沖洗獲得化合物122(46.8mg，77％)。1HNMR(CD3OD)6.85(d，J＝15.2Hz，1H)，6.29(d，J＝12.0Hz，1H)，6.08-6.11(m，2H)，5.91-5.98(m，2H)，4.47(d，J＝2.4Hz，1H)，4.04(m，1H)，3.46(m，1H)，3.02(d，J＝12.0Hz，2H)，2.97(d，J＝6.4Hz，2H)，2.56(m，2H)，2.09(m，2H)，1.71(m，4H)，1.34(d，J＝6.0Hz，3H)，1.22，(m，2H)，1，14(d，J＝6.8Hz，3H)。
化合物127
在0℃下，向化合物123(以與化合物064類似的方式制備)(195.2mg，0.0002617mol)中添加乙酸/水溶液(4.0mL，乙酸∶水＝4∶1)。反應混合物在0℃下保持30分鐘，且接著升溫至環(huán)境溫度。在環(huán)境溫度下攪拌整夜后，以碳酸氫鈉稀釋反應混合物，且以EtOAc萃取。制備型TLC(75％EtOAc/己烷)獲得化合物124(0.1686g，91％)。
向化合物124(168.6mg，0.0002388mol)于甲苯(3.0mL，0.028mol)和DCM(1.0mL)中的溶液中添加四乙酸鉛(0.127g，0.000287mol)。在環(huán)境溫度下攪拌反應混合物20至30分鐘，且經硅藻土過濾。以DCM洗滌硅藻土。制備型TLC(50％EtOAc/己烷)獲得化合物125(106.1mg，66％)。
在環(huán)境溫度下，向化合物125(106.0mg，0.0001573mol)于四氫呋喃(0.50mL，0.0062mol)、叔丁醇(1.50mL，0.0157mol)、2-甲基丁-2-烯(0.50mL，0.0047mol)中的溶液中添加亞氯酸鈉(88.9mg，0.000786mol)和磷酸二氫鉀(100mg，0.0007mol)于0.6ml水中的溶液。在環(huán)境溫度下攪拌反應混合物2小時，且濃縮。以水稀釋殘余物，以稀HCl酸化至pH2。以EtOAc萃取水相。制備型TLC獲得化合物126(66.1mg，61％)。
在0℃下，向化合物126(32.5mg，0.0471mmol)于二氯甲烷(1.0mL，0.016mol)和水(1.7μl，0.094mmol)中的溶液中添加三氟甲烷磺酸(17μl，0.00019mol)。在0℃下攪拌反應混合物60分鐘，且在環(huán)境溫度下攪拌60分鐘。以飽和碳酸氫鈉中止反應混合物。以DCM(2×20mL1)萃取水相。DCM溶液的TLC中未顯示所要產物。接著將水相酸化至pH 3，且以EtOAc(3×10mL)萃取。制備型TLC獲得化合物127(10.2mg，50％)。
化合物137
在-78℃下，向化合物098(1.0g，1.98mmol)于MeOH/CH2Cl2(5ml/5ml)中的溶液中以O3鼓泡。7分鐘后，以N2鼓泡10分鐘，且添加2移液管的Me2S。使反應混合物升溫至室溫，且通過蒸發(fā)移除溶劑。硅膠色譜純化獲得化合物128(735mg，73％)。
在0℃下，向含有10ml CH2Cl2中的CBr4(969mg，2.90mmol)和PPh3(15.2g 5.80mmol)的反應燒瓶中添加化合物128(734mg，1.45mmol)和Et3N(202μl，1.45mmol)于5ml CH2Cl2中的溶液。移除冰浴，且在室溫下攪拌反應混合物1小時。以己烷滴定后，通過硅膠色譜純化獲得化合物129(557g，58％)。
在-78℃下，向化合物129(557mg，0.84mmol)于THF(5ml)中的溶液中添加n-BuLi(840μl，己烷中2.5M)。1小時后，以NH4Cl飽和水溶液中止反應。以MTBE萃取水層。硅膠色譜純化獲得化合物130(360mg，85％)。

在室溫下，向化合物130(358mg，0.71mmol)于THF(5ml)中的溶液中添加TBAF(1.1ml，THF中1.0M)。在50℃下加熱反應混合物4小時。接著以MTBE稀釋混合物，以水和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物131(277mg，100％)。
在室溫下，向化合物131(263.8mg，0.678mmol)和化合物132(637.4mg，1.356mmol)于苯(1.8ml)和Et2NH(1.2ml)中的溶液中添加Pd(PPh3)4(39.2mg，0.034mmol)和CuI(12.9mg，0.068mmol)。攪拌反應混合物5小時。接著以MTBE稀釋混合物，以飽和NH4Cl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物133(251.5mg，52％)。

在0℃下，以0.1ml/min的速率向t-BuOK(565μl，THF中1.0M)于THF(13.0ml)中的溶液中添加化合物133(200.0mg，0.28mmol)于THF(8.0ml)中的溶液。1小時后，添加TBSCl(169mg，0.56mmol)。5分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應混合物，以水稀釋且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物134(175.4mg，82％)。
在室溫下，向化合物134(200.0mg，0.28mmol)于DCM(4.0ml)和水(1.0ml)中的溶液中添加DDQ(96.2mg，0.42mmol)。2小時后，以NaHCO3飽和水溶液中的10％Na2S2O3中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物135(133.1mg，74％)。
在室溫下，向化合物135(133.0mg，0.207mmol)于DCM(3.0ml)中的溶液中添加吡啶(42.0μl，0.518mmol)和戴斯-馬丁試劑(175.0mg，0.414mmol)。1小時后，以NaHCO3飽和水溶液中的10％Na2S2O3中止反應，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物136(114.8mg，86％)。
在0℃下，向化合物136(113.0mg，0.176mmol)于DCM(2.0ml)中的溶液中添加水(19.0μl，1.056mmol)和TfOH(46.0μl，0.528mmol)。使反應物升溫至室溫。30分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物137(46.4mg，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.20(d，J＝6.8Hz，3H)，1.25(t，J＝6.8，3H)，1.38(d，J＝6.0，3H)，2.47-2.48(m，2H)，2.85(d，J＝11.2Hz)，3.70-3.21(m，2H)，3.41-3.45(m，1H)，3.95(d，J＝5.2，1H)，4.00-4.40(m，1H)，4.27-4.33(m，1H)，4.54-4.56(m，1H)，4.93-5.00(m，1H)，6.04(d，J＝2.4，1H)，6.23-6.32(m，3H)，12.10(s，1H)。
化合物144
在室溫下，向化合物130(475mg，0.944mmol)和化合物138(558mg，1.227mmol)于苯(2.2ml)和Et2NH(1.5ml)中的溶液中添加Pd(PPh3)4(55mg，0.0472mmol)和CuI(18mg，0.0944mmol)。攪拌反應混合物3小時。接著以MTBE稀釋反應混合物，以飽和NH4Cl、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物139(485mg，56％)。
在室溫下，向化合物139(485mg，0.60mmol)于THF(5.0ml)中的溶液中添加經緩沖TBAF(3.6ml，以咪唑/HCl緩沖的0.5N)。在50℃下加熱反應混合物60小時。接著以MTBE稀釋反應混合物，且以水和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物140(280.8mg，67％)。
在0℃下，向t-BuOK(720μl，THF中1.0M)于THF(13.5ml)中的溶液中添加化合物140(250mg，0.36mmol)于THF(13.5ml)中的溶液。2小時后，添加TBSCl(217mg，1.44mmol)。5分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應混合物，以水稀釋且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物141(155mg，52％)。

在室溫下，向化合物141(153mg，0.204mmol)于DCM(4.0ml)和水(1.0ml)中的溶液中添加DDQ(69.5mg，0.306mmol)。2.5小時后，以飽和NaHCO3中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物142(124.0mg，96％)。
在室溫下，向化合物142(124.0mg，0.197mmol)于DCM(5.0ml)中的溶液中添加吡啶(40.0μl，0.492mmol)和戴斯-馬丁試劑(167.0mg，0.394mmol)。1小時后，以NaHCO3飽和水溶液中的10％Na2S2O3中止反應，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物143(122.8mg，99％)。
在0℃下，向化合物143(54.5mg，0.087mmol)于DCM(2.0ml)中的溶液中添加水(9.4μl，0.522mmol)和TfOH(23.0μl，0.261mmol)。使反應物升溫至室溫。30分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物144(30.0mg，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.20(d，J＝6.8Hz，3H)，1.38(d，J＝6.0Hz，3H)，2.47-2.48(m，2H)，2.85(d，J＝5.2Hz，3H)，3.40-3.50(m，1H)，3.94(d，J＝5.2)，4.12-4.19(m，1H)，4.28-4.33(m，1H)，4.54-4.56(m，1H)，4.93-5.00(m，1H)，6.05(d，J＝2.4Hz，1H)，6.30(s，1H)，6.33(m，2H)，12.11(s，1H)。
化合物155
在0℃下，向005(2.46g，4.87mmol)于MeOH(40ml)中的溶液中添加對甲苯磺酸(1.02g，5.36mmol)。使反應物升溫至室溫且攪拌18小時。接著以飽和NaHCO3中止反應混合物，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物145(1.42g，64％)。
在0℃下，向化合物145(1.53g，4.37mmol)于DCM中的溶液中添加Et3N(1.83ml，13.11mmol)和TBSOTf(2.10ml，9.18mmol)。使反應物升溫至室溫且攪拌35分鐘。接著以飽和NaHCO3中止反應混合物，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物146(1.18g，41％)。
在室溫下，向化合物146(1.09g，1.88mmol)于DCM(10.0ml)中的溶液中添加吡啶(303μl，3.76mmol)和戴斯-馬丁試劑(1.20g，2.82mmol)。5小時后，以NaHCO3飽和水溶液中的10％Na2S2O3中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得呈粗產物形式的化合物147。

在0℃下，向化合物147于MeOH(15.0ml)中的溶液中添加NaBH4(142mg，3.76mmol)。10分鐘后，以飽和NH4Cl中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物148(714mg，自1006-216B為66％)。
在室溫下，向化合物148(710mg，1.23mmol)于THF(10ml)中的溶液中添加TBAF(3.7ml，THF中1.0M)。在50℃下加熱反應混合物17小時。接著以MTBE稀釋反應混合物，以飽和NaHCO3和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物149(419mg，97％)。
在室溫下，向化合物149(400mg，1.14mmol)于丙酮(10ml)中的溶液中添加2，2-二甲氧基丙烷(419μl，3.42mmol)和PTSA(100mg)。20分鐘后，以MTBE稀釋，以飽和NaHCO3和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物150(450mg，95％)。

在室溫下，向化合物150(384mg，0.98mmol)和化合物138(582mg，1.27mmol)于NMP(2.0ml)中的溶液中添加Pd2(DBA)3(90.0mg，0.098mmol)和Cy2NMe(272μl，1.27mmol)。在80℃下加熱反應混合物24小時。接著以MTBE稀釋反應混合物，經硅藻土過濾，以1.0N HCl水溶液和鹽水洗滌。硅膠色譜純化獲得化合物151(441.3mg，65％)。
在0℃下，向t-BuOK(884μl，THF中1.0M)于THF(15.0ml)中的溶液中添加化合物151(410mg，0.59mmol)于THF(5.0ml)中的溶液。30分鐘后，添加TBSCl(178mg，1.18mmol)。10分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應混合物，以水稀釋且以EtOAc萃取。硅膠色譜純化獲得化合物152(170.1mg，34％)。
在室溫下，向化合物152(170mg，0.226mmol)于DCM(4.0ml)和水(1.0ml)中的溶液中添加DDQ(77.0mg，0.339mmol)。2.5小時后，以飽和NaHCO3中的10％Na2S2O3中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物153(122.6mg，86％)。

在室溫下，向化合物153(61.0mg，0.097mmol)于DCM(2.5ml)中的溶液中添加吡啶(19.6μl，0.243mmol)和戴斯-馬丁試劑(82.0mg，0.194mmol)。1小時后，以NaHCO3飽和水溶液中的10％Na2S2O3中止反應，且以MTBE萃取。硅膠色譜純化獲得化合物154(46.1mg，76％)。
在0℃下，向化合物154(41.8mg，0.066mmol)于DCM(2.0ml)中的溶液中添加水(7.1μl，0.396mmol)和TfOH(17.6μl，0.198mmol)。使反應物升溫至室溫。30分鐘后，以飽和NaHCO3中止反應，且以DCM萃取。硅膠色譜純化獲得化合物155(11.1mg，45％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.64(d，J＝6.80，3H)，0.93(d，J＝6.0，3H)，2.06(d，J＝3.6Hz，3H)，2.37-2.44(m，1H)，2.54-2.64(m，1H)，2.79(br，1H)，3.05-3.22(m，2H)，3.81-3.91(m，1H)，4.18-4.33(m，1H)，4.60-4.71(m，1H)，5.33(t，J＝11.6Hz，1H)，5.86(d，J＝2.8Hz，1H)，5.91-6.03(m，1H)，6.04(d，J＝11.6Hz，1H)，6.11(d，J＝2.0Hz，1H)，7.00(d，J＝15.6Hz，1H)，12.86(s，1H)。
化合物156
將化合物106(1重量)溶解于TFA(3體積，15當量)中且在室溫下攪拌。通過TLC監(jiān)測反應進展。攪拌48小時后，以DCM(20體積)稀釋反應混合物，以NaHCO3飽和水溶液和鹽水洗滌。濃縮有機層且通過急驟色譜純化獲得呈白色固體狀的156(48.3％產率)(NMR數據如下)。還觀測到化合物106(9.1％回收率)。1HNMR(C6D6)δ＝6.83(d，1H)，6.12(s，1H)，5.81(dt，1H)，5.70(s，1H)，5.55(d，1H)，5.40(dd，1H)，5.12(s，1H)，4.61(m，1H)，4.19(s，1H)，3.86(d，1H)，3.26(q，1H)，3.15(br s，1H)，2.48(q，2H)，2.30-2.35(m，1H)，2.12(q，1H)，0.99(d，3H)，0.75(d，3H)，0.60(t，3H)，-2.00(s，1H)。
化合物157
將化合物106溶解于1，4-二惡烷(11體積)中，且在N2氛圍下緩慢添加nBu3P(1.2當量)。在室溫下攪拌反應混合物，且通過TLC和HPLC追蹤反應進展。在室溫下攪拌23小時后，以TBME(100體積)稀釋反應混合物，以水(2×10體積)和鹽水(10體積)洗滌。以TBME(50體積)反萃取水層。經Na2SO4干燥經合并的有機層且濃縮。通過急驟色譜純化殘余物，獲得呈白色固體狀的157(58.5％)。MS(ES+)M+Na+＝412.1，M+H+＝390.1；MS(ES-)M-H+＝388.0；1HNMR(C6D6)δ＝6.78-6.84(m，2H)，6.13(d，1H)，5.95(d，1H)，5.86(m，1H)，5.83(d，1H)，4.97-5.02(m，1H)，4.47(br s，1H)，4.02(br s，1H)，3.93(br s，1H)，3.26(t，1H)，2.64(br s，1H)，2.52(m，2H)，2.39-2.43(m，1H)，2.04-2.11(m，1H)，1.68(m，1H)，0.88(d，3H)，0.64(t，3H)，0.58(d，3H)，-2.38(s，1H)。
化合物158
在0℃下，將起始物質(159)(100.0mg，0.13mmol)溶解于1.0ml甲醇中。添加對甲苯磺酸(49.4mg，0.28mmol)。在0℃下攪拌反應混合物25分鐘，接著在室溫下攪拌整夜。以碳酸氫鈉飽和水溶液中止反應，且以乙酸乙酯萃取。硅膠柱純化后，以84％的產率獲得160?？赏ㄟ^分離094的外消旋混合物(參看106的制備)且根據制備103的步驟獲得手性起始物質(159)。

通過硅膠色譜(使用己烷/乙酸乙酯的12∶1混合物作為洗提劑)分離094的兩種立體異構體(位置7)。通過NMR光譜進行立體化學的鑒別。發(fā)現較小極性的異構體在位置7處具有“R”立體化學，而較大極性的異構體具有“S”立體化學。使用“R”異構體094-(7R)，以自094制備103所用相同的合成途徑制備159(參見實例化合物106供參考)。

在0℃下，將化合物160(46.0mg，0.063mmol)溶解于2.0ml二氯甲烷中。分別添加吡啶(51.0μl，0.63mmol)和碳酰氯(167.0μl，0.32mmol)。在0℃下攪拌反應混合物15分鐘，以碳酸氫鈉飽和溶液中止反應，且以甲基叔丁基醚萃取。用硅膠制備型板純化后，以定量產量獲得161。

將化合物161(47.4mg，0.063mmol)溶解于2.0ml二氯甲烷和0.5ml水的混合物中。添加2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(31.5mg，0.14mmol)。在室溫下攪拌2小時后，以碳酸氫鈉飽和溶液中的10％硫代硫酸鈉中止反應混合物，且以甲基叔丁基醚萃取。用硅膠制備型板純化后，以69％產率獲得162。

將化合物162(27.6mg，0.044mmol)溶解于二氯甲烷中。分別添加吡啶(8.9μl，0.11mmol)和戴斯-馬丁試劑(37.0mg，0.088mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1.5小時。以碳酸氫鈉飽和水溶液中的10％硫代硫酸鈉中止反應，且以甲基叔丁基醚萃取。硅膠柱純化后，以100％的產率獲得163。

將化合物163(27.7mg，0.044mmol)溶解于1.0ml二氯甲烷中。在0℃下添加三氟甲磺酸(11.6μl，0.13mmol)和水(4.8μl，0.26mmol)。在室溫下攪拌1小時后，以碳酸氫鈉飽和溶液中止反應混合物，且以二氯甲烷萃取。硅膠柱純化后，以89％的產率獲得158。1H NMR(CDCl3)δ12.10(s，1H)，7.08(dd，J＝15.2，2.4Hz，1H)，6.11(m，2H)，6.03(dd，J＝13.2，2.4Hz，2H)，5.53(m，1H)，5.14(d，J＝8.4Hz，1H)，5.04(m，1H)，4.94(m，1H)，4.11(s，1H)，3.92(m，1H)，3.19(dd，J＝21.6，7.2Hz，2H)，2.86(m，1H)，2.75(m，1H)，1.45(d，J＝6.0Hz，3H)，1.26(t，J＝7.2，3H)，1.14(d，J＝6.8Hz，3H)。
實例2-12生物檢定 隨機選擇一組30種式(I)或(II)化合物，且測試各化合物在MDA-MB-435和HT-29癌細胞系中的生長抑制活性。發(fā)現數種化合物具有顯著癌細胞生長抑制活性(例如nM IC50值)。選擇兩種化合物(本文稱為化合物091和106)進行進一步研究，以進一步評估和表征此類化合物(亦即F152類似物)的生物學特性。應理解對于生物檢定(例如基于細胞的檢定)，給出的結果可為一組以上數據的例示。在某些情況下，例如在某些活體外檢定中，平均值和標準偏差為所獲得數據的代表。在其它情況下，例如在某些活體內檢定中，從數個實質上相似的數據組(例如自使用多種劑量的相同檢定獲得的數據組，等)中選出單個代表性數據組。通常以與人類劑量臨床研究中所用檢定條件最相似的檢定條件為基礎選擇代表性數據組。熟練技術人員將理解，不同檢定條件(例如不同劑量或給藥時程)可能會產生不同結果。
實例2 進行生物化學MEK1檢定，研究式(I)或(II)化合物(例如化合物029、091、106和114)是否為MEK1抑制劑。使用ELISA檢定評估化合物的生物化學MEK1抑制作用。所有檢定都以96孔格式進行。使用經ERK2(MEK1的底物蛋白)涂布的培養(yǎng)盤進行生物化學MEK1檢定。在40μL的最終體積中，在不存在或存在測試化合物的情況下，與50mmol/L HEPES、20mmol/L MgCl2、4mmol/L MnCl2和0.5mmol/L Na3VO4一起培育MEK1(25ng)。通過添加1μmol/L ATP啟始反應。在30℃下培育40分鐘后，丟棄反應混合物，且培養(yǎng)盤接著以0.05％Tween20/PBS洗滌4次。各孔在室溫下以100μL1∶4000倍稀釋的磷酸-ERK1/2單克隆抗體(馬薩諸塞州細胞信號公司(Cell Signaling，MA))培育1.5小時。接著丟棄抗體，且培養(yǎng)盤以0.05％Tween20/PBS洗滌6次。最終，添加100μL 1∶2000倍稀釋的HRP結合抗小鼠IgG抗體(馬薩諸塞州細胞信號公司)。培育90分鐘后，丟棄此抗體，且培養(yǎng)盤以0.05％Tween20/PBS洗滌8次。接著通過過氧化物酶反應觀測磷酸化ERK2，且在450nm下讀取。圖2A為描繪MEK1檢定結果的表。
實驗確認化合物091和106為具有低nM活性的有效MEK1抑制劑(參看圖2A)。化合物091顯示在低濃度ATP下具有更有效MEK1抑制活性，表明與MEK1的結合模式為ATP競爭性模式。
實例3 進行研究，研究化合物對各種癌癥相關性激酶的活體外特異性。對一組95種癌癥相關性激酶在0.1μM和1μM濃度下測試化合物091和106，所述激酶包括Abl(h)、Abl(T315I)(h)、ALK(h)、AMPK(r)、Arg(m)、Aurora-A(h)、Axl(h)、Blk(m)、Bmx(h)、BTK(h)、CaMKII(r)、CaMKIV(h)、CDK1/細胞周期素B(h)、CDK2/細胞周期素A(h)、CDK2/細胞周期素E(h)、CDK3/細胞周期素E(h)、CDK5/p35(h)、CDK6/細胞周期素D3(h)、CDK7/細胞周期素H/MATl(h)、CHK1(h)、CHK2(h)、CK1δ(h)、CK2(h)、c-RAF(h)、CSK(h)、cSRC(h)、EGFR(h)、EphB2(h)、EphB4(h)、Fes(h)、FGFR3(h)、Flt3(h)、Fms(h)、Fyn(h)、GSK3α(h)、GSK3β(h)、IGF-1R(h)、IKKα(h)、IKKβ(h)、IR(h)、JNK1α1(h)、JNK2α2(h)、JNK3(h)、Lck(h)、Lyn(h)、MAPK1(h)、MAPK2(h)、MAPKAP-K2(h)、MEK1(h)、Met(h)、MKK4(m)、MKK6(h)、MKK7β(h)、MSK1(h)、MST2(h)、NEK2(h)、p70S6K(h)、PAK2(h)、PAR-1Bα(h)、PDGFRα(h)、PDGFRβ(h)、PDK1(h)、PKA(h)、PKBα(h)、PKBβ(h)、PKBγ(h)、PKCα(h)、PKCβII(h)、PKCγ(h)、PKCδ(h)、PKCε(h)、PKCη(h)、PKCτ(h)、PKCμ(h)、PKCθ(h)、PKCξ(h)、PKD2(h)、PRAK(h)、PRK2(h)、ROCK-II(r)、ROCK-II(h)、Ros(h)、Rsk1(h)、Rsk2(h)、Rsk3(h)、SAPK2a(h)、SAPK2b(h)、SAPK3(h)、SAPK4(h)、SGK(h)、Syk(h)、Tie2(h)、TrkB(h)、Yes(h)和ZAP-70(h)(圖2B)。
在25μL的最終反應體積中，以適當緩沖液培育各人類酶。通過添加具有[γ33P-ATP]的MgATP混合物啟始反應。在室溫下培育40分鐘后，通過添加5μL磷酸溶液中止反應。所有檢定都在10μM的ATP濃度下進行。
在P30過濾墊上點樣10μL反應物，且在磷酸溶液中洗滌3次歷時5分鐘。接著通過閃爍計數測定轉移至底物肽的33P。結果表示為對照培育中轉移至底物肽的33P的百分比。認為在0.1μM化合物濃度下具有＞50％抑制的激酶(1)和濃度-抑制反應介于0.1μM和1μM之間的(2)是化合物的目標激酶。
除了強MEK1抑制之外，化合物在0.1μM濃度下還抑制Src酪氨酸激酶家族的成員(Lyn、Fyn、Lck、Yes、c-Src)、FLT-3和TrkB激酶活性。此外，如缺乏對大量絲氨酸/蘇氨酸激酶的抑制所表明，化合物看似對酪氨酸激酶具有高度選擇性。
此外，確認化合物在全部濃度范圍內對這些激酶中的6種具有抑制活性。研究三種細胞質Src家族激酶c-Src、Fyn和Lyn。還研究了細胞質Abl激酶和兩種受體酪氨酸激酶Flt3和TrkB。在所有反應種都使用10μM的標準ATP濃度。對所有實驗都進行重復測量。如圖2B中所見，六種激酶顯示對化合物091具有低于214nM的IC50。TrkB和Src家族成員為對化合物091抑制最敏感的酶。
實例4 例示性化合物的活體外抗癌活性。在實體腫瘤細胞系中廣泛測試化合物091和106(圖3中顯示對化合物091的18個細胞系和對化合物106的20個細胞系進行測試)。所有細胞系都引入至96孔培養(yǎng)盤中，且在不存在化合物091或化合物106或持續(xù)存在0.3-10000nM化合物091或化合物106的情況下生長96小時。使用CellTiter-

發(fā)光細胞生活力檢定(普洛麥格(Promega))或亞甲基藍檢定評估細胞生長。測定IC50值，其為和未經處理細胞群相比將細胞生長抑制50％的物質濃度。
如圖3所示，具有B-RAF V600E突變的細胞系在低nM或次μM濃度范圍內對化合物091和106極敏感。
實例5 Colo205人類結腸癌異種移植物中的活體內抗腫瘤活性(圖4)。進行研究，以研究化合物091和106在人類Colo205 BRAF突變型結腸癌異種移植物中的抗癌活性。在雌性無胸腺小鼠中以皮下植入的Colo205人類結腸癌異種移植物評估化合物。
將具有B-RAF(V600E)突變的人類結腸癌細胞系Colo205皮下移植至雌性裸小鼠中。實驗由處理第1天時每組6只小鼠組成。靜脈內投與化合物達兩輪，其中每輪每周5次每日注射(qld×5)，各輪之間有2天的休息期。以每10g體重0.1mL的媒劑體積投與化合物091。
每日監(jiān)測小鼠的一般健康狀況。在處理第一天開始，每周兩次記錄腫瘤尺寸和體重。使用等式(l×w2)/2計算腫瘤重量，其中l(wèi)和w指的是每次測量時收集的較大和較小尺寸。當平均腫瘤體積達到140mm3時，向小鼠(6只/組)投與媒劑(十六醇聚氧乙烯醚∶乙醇∶5％葡萄糖；1∶1∶8)或測試化合物(30mg/kg)。
如自圖4可見，化合物091在COLO205 BRAF突變型結腸癌異種移植物中產生約70％腫瘤退化。在使用不同給藥時程的類似研究中，化合物106從處理第一天開始在COLO205BRAF突變型結腸癌異種移植物中引起70％腫瘤退化。
實例6 BxPC-3人類胰腺癌異種移植物中的活體內抗腫瘤活性(圖5)。進行研究，以研究化合物091在人類BxPC-3胰腺癌異種移植物中的抗癌活性。在雌性無胸腺小鼠中以皮下植入的BxPC-3人類胰腺癌異種移植物評估化合物。
將人類胰腺癌細胞系BxPC-3-T1(在B-RAF和Ras基因上無突變)皮下移植至雌性裸小鼠中。實驗由處理第1天時每組8只小鼠組成。靜脈內投與化合物達兩輪，其中每輪每周5次每日注射(qld×5)，各輪之間有2天的休息期。以每10g體重0.1mL的媒劑體積投與化合物。
每日監(jiān)測小鼠的一般健康狀況。在處理第一天開始，每周兩次記錄腫瘤尺寸和體重。使用等式(l×w2)/2計算腫瘤重量，其中l(wèi)和w指的是每次測量時收集的較大和較小尺寸。當平均腫瘤體積達到130mm3時，向小鼠(8只/組)投與媒劑(十六醇聚氧乙烯醚∶乙醇∶5％葡萄糖；1∶1∶8)或測試化合物(15、30mg/kg)。
如圖5中可見，30mg/kg化合物091產生50％腫瘤退化。
實例7 LOX人類黑素瘤異種移植物中的活體內抗腫瘤活性(圖6)。進行研究，以研究化合物091和106在人類LOX BRAF突變型黑素瘤異種移植物中的抗癌活性。在雌性無胸腺小鼠中以皮下植入的LOX人類黑素瘤異種移植物評估化合物。
將具有B-RAF(V600E)突變的人類黑素瘤細胞系LOX皮下移植至雌性裸小鼠中。實驗由處理第1天時每組8只小鼠組成。靜脈內獨立投與化合物達兩輪，其中每輪每周5次每日注射(qld×5)，各輪之間有2天的休息期。以每10g體重0.1mL的媒劑體積投與化合物。
每日監(jiān)測小鼠的一般健康狀況。在處理第一天開始，每周兩次記錄腫瘤尺寸和體重。使用等式(l×w2)/2計算腫瘤重量，其中l(wèi)和w指的是每次測量時收集的較大和較小尺寸。當平均腫瘤體積達到128mm3時，向小鼠(8只/組)投與媒劑(十六醇聚氧乙烯醚∶乙醇∶5％葡萄糖；1∶1∶8)或一種測試化合物(10、20、30或40mg/kg)。
如圖6中可見，10mg/kg化合物091在前3周產生100％腫瘤退化?；衔?91還在所有小鼠中在20、30、40mg/kg的劑量下產生100％腫瘤退化。投與091的小鼠在研究結束時無腫瘤。此外，在三種劑量(每次給藥10、20和40mg/kg)下投與化合物106引起統(tǒng)計學上顯著的抗癌活性。在研究結束時，10mg/kg 106使8只小鼠中的5只無腫瘤，且20mg/kg或40mg/kg都使8只小鼠中的8只無腫瘤。
實例8 對B細胞驅使的血液科惡性癌細胞生長/非霍奇金氏淋巴瘤的抑制(圖7)。進行研究，以研究化合物091和106在一組人類血液科癌細胞系中的活體外抗癌活性。在呈現數種不同類型的血液科惡性癌癥的7種人類癌細胞系中評估化合物091和106的抗增殖活性。將經培養(yǎng)人類癌細胞置于96孔培養(yǎng)盤中，且在不存在測試化合物或持續(xù)存在0.3-1000nM測試化合物的情況下生長96小時。使用MTT檢定評估細胞生長。測定IC50值，其為和未經處理細胞群相比將細胞生長抑制50％的物質濃度。
如圖7中表明，來源于B細胞非霍奇金氏淋巴瘤的兩種細胞系對化合物091敏感，且來源于白血病或B細胞所述非霍奇金氏淋巴瘤的細胞系對化合物106敏感。
實例9 CPT-11(SN-38)在PANC-1胰腺癌細胞中抗癌活性的增強(圖8)。熟知SN-38(CPT-11的活性代謝物)會增強NF-κB活性，此導致化學抗性。為了測定與SN-38組合的化合物091或106是否將因MEKK1抑制而增強化學療法的抗癌活性，對PANC-1人類胰腺癌細胞進行檢驗。
應注意，1μM單獨的化合物091或化合物106不會影響單獨實驗中的PANC-1癌細胞生長(數據未顯示)。在PANC-1胰腺癌細胞中評估與化合物091或106組合的SN-38的抗增殖作用。將經培養(yǎng)人類癌細胞置于96孔培養(yǎng)盤中，且在具有或不具有1μM測試化合物的情況下，在不存在SN-38或持續(xù)存在0.03-1000nM SN-38的情況下生長96小時。使用CellTiter-

發(fā)光細胞生活力檢定(普洛麥格)評估細胞生長。測定IC50值，其為和未經處理細胞群相比將細胞生長抑制50％的物質濃度。
單獨SN-38抑制細胞生長的IC50值為82.5nM。1μM化合物091和化合物106都增強組合情形中SN-38的細胞毒性(例如IC50值為16.2nM)?；衔?91和106在兩個獨立實驗中在此細胞系中都增強CPT-11(SN-38)的抗癌活性。這些結果表明化合物091和106會阻斷化學療法誘發(fā)的NF-κB活化，提高化學敏感性，不過這些實驗仍在進行?；衔?91和106可增強組合情形中的抗癌活性。
實例10 化合物091穿透血腦屏障(BBB)(圖9)。如腦/血漿AUC0-t比為3.170所測量，化合物091大量穿透至腦組織中。這些資料表明化合物091可通過抑制如本文所示的激酶組合(例如抑制MEK和TrkB和/或其它激酶)適用于治療CNS腫瘤(包括神經膠質瘤)。
實例11 對Flt-3受體酪氨酸激酶(FLT3)磷酸化的抑制(圖10)。進行研究，以研究化合物106活體外抑制FLT3-突變型(AML)細胞系中Flt-3受體磷酸化的能力。將具有Flt-3活化突變的MV-4-11人類急性骨髓白血病(AML)細胞(目錄號CRL-9591，ATCC，馬里蘭州洛克維爾(Rockville，MD))涂鋪于25mm3燒瓶中且培育1天。接著，向各燒瓶中添加濃度為0.1nmol/L-300nmol/L的化合物106(或培養(yǎng)基)且培養(yǎng)24小時。對照盤僅接受培養(yǎng)基。使用冰冷溶解緩沖液制備細胞溶解物。
為了檢測磷酸-Flt-3蛋白，使MV-4-11細胞溶解物在還原條件下經受SDS-PAGE，且以針對磷酸-Flt-3抗體的抗體(目錄號3464，細胞信號科技公司(Cell SignalingTechnology)，馬薩諸塞州丹弗斯(Danvers，MA))作免疫印跡。以二級IRDye抗體(LI-COR，Inc.，內布拉斯加州林肯(Lincoln，NE))探測西方印跡。使用奧地賽紅外成像系統(tǒng)(Odyssey infrared imaging system)(LI-COR，Inc.，內布拉斯加州林肯)觀測印跡蛋白。使用抗肌動蛋白抗體(目錄號sc-8432，圣克魯斯生物技術公司(Santa CruzBiotechnologies，Inc.)，加利福利亞州圣克魯斯(Santa Cruz，CA))作為裝載對照。
MV-4-11細胞顯示在無化合物106存在的情況下Flt-3受體的組成性磷酸化。在MV-4-11細胞系中，磷酸-Flt-3的蛋白含量因化合物106而以濃度依賴性方式降低。10nmol/L化合物106完全抑制Flt-3受體的組成性磷酸化，表明化合物106是全細胞中Flt-3受體酪氨酸激酶的有效抑制劑。
實例12 對FLT3突變型細胞系的活體外細胞增殖的抑制(圖11)。進行研究，以研究化合物106在FLT-3突變型(AML)細胞系中的活體外抗癌活性。在細胞增殖檢定中使用MV-4-11AML細胞測定化合物106的抗增殖作用。
將具有Flt-3活化突變的MV-4-11人類急性骨髓白血病(AML)細胞涂鋪于96孔培養(yǎng)盤中，且在不存在化合物106或持續(xù)存在0.03-1,000nmol/L化合物106的情況下生長96小時。使用CellTiter-

發(fā)光細胞生活力檢定(普洛麥格，威斯康星州麥迪遜(Madison，WI))評估細胞生長。在EnVision 2102多標簽計數器(Multilabel Counter)(帕金-埃爾默/華萊士(Perkin-Elmer/Wallac)，馬薩諸塞州沃爾瑟姆(Waltham，MA))上讀取發(fā)光。使用軟件Graphpad Prism(第4版，加利福利亞州圣地亞哥(San Diego，CA))測定IC50值。未經處理對照組的原始值代表4孔的平均值。
具有Flt-3受體酪氨酸激酶活化突變的MV-4-11細胞在低nmol/L濃度范圍內對化合物106敏感?；衔?06顯示針對FLT-3突變型人類癌細胞的抗增殖活性，其中IC50值在低nmol/L范圍內。
權利要求
1.一種治療有需要個體中的SrcTK/MEK相關癌癥的方法，其包含向所述個體投與包含有效治療所述SrcTK/MEK相關癌癥量的SrcTK/MEK抑制劑的組合物。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將Src酪氨酸激酶家族中至少一個成員的活性抑制至少約75％。
3.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將所述Src酪氨酸激酶家族中至少五個成員的活性抑制至少約50％。
4.根據權利要求3所述的方法，其中所述Src酪氨酸激酶家族的成員包括cSrc、Fyn、Lyn、Lck和Yes。
5.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將MEK1的活性抑制至少約50％。
6.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑是式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
7.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK相關癌癥是選自由慢性骨髓白血病和結腸直腸癌組成的群組的癌癥。
8.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述癌癥對甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)具有抗性。
9.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑還抑制Bcl-Abl的活性，且所述SrcTK/MEK相關癌癥是白血病。
10.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述SrcTK/MEK抑制劑還抑制TrkB的活性。
11.一種治療有需要個體中的TrkB/MEK相關癌癥的方法，其包含向所述個體投與包含有效治療所述TrkB/MEK相關癌癥量的TrkB/MEK抑制劑的組合物。
12.根據權利要求11所述的方法，其中所述TrkB/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將TrkB的活性抑制至少約75％。
13.根據權利要求11至12中任一權利要求所述的方法，其中所述TrkB/MEK抑制劑在約0.1μM的濃度下將MEK1的活性抑制至少約55％。
14.根據權利要求11至13中任一權利要求所述的方法，其中所述TrkB/MEK抑制劑是式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組中的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
15.根據權利要求10至14中任一權利要求所述的方法，其中所述TrkB/MEK相關癌癥是選自由胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤和視網膜母細胞瘤組成的群組的癌癥。
16.根據權利要求10至15中任一權利要求所述的方法，其中所述TrkB/MEK抑制劑還抑制Src酪氨酸激酶家族至少一個成員的活性。
17.一種抑制有需要個體中的轉移過程的方法，其包含向所述個體投與組合物，所述組合物包含有效抑制所述轉移過程量的式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
18.一種治療有需要個體中的B-RAF突變型癌癥的方法，其包含向所述個體投與組合物，所述組合物包含有效治療所述B-RAF突變型癌癥量的至少一種式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
19.根據權利要求18所述的方法，其中所述B-RAF突變型癌癥是B-RAF V600E突變型癌癥。
20.根據權利要求18至19中任一權利要求所述的方法，其中所述B-RAF突變型癌癥是選自由卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌和黑素瘤組成的群組的癌癥。
21.一種治療有需要個體中的FLT3突變型癌癥的方法，其包含向所述個體投與組合物，所述組合物包含有效治療所述FLT3突變型癌癥量的至少一種式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
22.根據權利要求21所述的方法，其中所述FLT3突變型癌癥是FLT3 D835Y、FLT3Y842C、FLT3 K663Q或FLT3 V592A突變型癌癥。
23.根據權利要求21至22中任一權利要求所述的方法，其中所述FLT3突變型癌癥是白血病。
24.一種治療有需要個體中的中樞神經系統(tǒng)腫瘤的方法，其包含向所述個體投與組合物，所述組合物包含有效治療所述腫瘤量的式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯；其中所述式(I)化合物能夠穿透血腦屏障。
25.根據權利要求24所述的方法，其中以動物腦中所述式(I)化合物的量與血漿中所述式(I)化合物的量的比率計，至少約20％的所述式(I)化合物穿透所述血腦屏障。
26.根據權利要求24所述的方法，其中以動物腦中所述式(I)化合物的量與血漿中所述式(I)化合物的量的比率計，至少約50％的所述式(I)化合物穿透所述血腦屏障。
27.根據權利要求24至26中任一權利要求中所述的方法，其中所述中樞神經系統(tǒng)腫瘤是選自由腦瘤、神經膠質瘤和神經母細胞瘤組成的群組的腫瘤。
28.一種治療有需要個體中的至少一種選自由以下組成的群組的癌癥的方法慢性骨髓白血病、胰腺癌、神經癌、神經膠質瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤、卵巢癌、甲狀腺癌、結腸直腸癌和黑素瘤，其包含向所述個體投與組合物，所述組合物包含有效治療所述癌癥量的式(I)化合物
其中
R1是H
R2是選自由H和三氟甲基羰基組成的群組的部分；或R1和R2與核心結構一起形成式(a)雜環(huán)二基部分
R3是選自由-ORa和-NRbRc組成的群組的部分；
Ra是任選地經咪唑基取代的C1-4烷基；
Rb是選自由C1-4烷基和C1-4烷氧基組成的群組的部分，其中Rb經0、1或2個各自獨立地選自由以下組成的群組的基團取代-OCH3、-C(O)OH、-C(O)NR′R″、-NH(C1-3烷基)、其中n為2-4的-NH(CH2CH2O)nCH3、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、哌啶基、N-甲基哌啶基、N-嗎啉基、咪唑基、吡咯烷基、-OPO3H2和羥基；其中所述-NH(C1-3烷基)經0、1或2個羥基部分取代，且其中R′和R″各自獨立地選自-H或-CH3；且
Rc是H，或Rb和Rc與其所連接的氮一起形成選自由式(b)和式(c)組成的群組的雜環(huán)基部分
或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
29.根據權利要求6至10或14至28中任一權利要求所述的方法，其中
表示雙鍵。
30.根據權利要求6至10或14至28中任一權利要求所述的方法，其中R3是-NRbRc，且其中Rc是H且Rb是未經取代的C1-4烷基。
31.根據權利要求6至10或14至28中任一權利要求所述的方法，其中Rc是H且Rb是甲基或乙基。
32.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述化合物是至少一種選自由以下組成的群組的化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
33.根據權利要求6至10或14至28中任一權利要求所述的方法，其中所述式(I)化合物是式(II)化合物
其中
R3是-NHRb，且Rb是經0、1或2個羥基部分取代的C1-C3烷基；或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯。
34.根據權利要求33所述的方法，其中R3是未經取代的C1-3烷基氨基。
35.根據權利要求34所述的方法，其中R3是選自由甲基氨基和乙基氨基組成的群組的基團。
36.根據權利要求33所述的方法，其中R3是選自由2-羥基乙基氨基和2，3-二羥基丙基氨基組成的群組的基團。
37.根據權利要求33所述的方法，其中所述化合物是至少一種選自由以下各物組成的群組的化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
38.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中所述方法進一步包含投與第二化學治療藥物。
39.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中包含式(I)化合物的所述組合物是經靜脈內投與。
40.根據前述權利要求中任一權利要求所述的方法，其中包含式(I)化合物的所述組合物是以每公斤體重約0.10毫克至每公斤體重約25毫克之間的劑量投與。
41.一種化合物，其選自以下所列的化合物
和其醫(yī)藥學上可接受的鹽和酯。
全文摘要
本發(fā)明提供治療特定癌癥的化合物、醫(yī)藥組合物和方法。所述組合物一般可包含式(I)化合物，其中R1-R3如本文中所定義，或其醫(yī)藥學上可接受的鹽或酯；和醫(yī)藥學上可接受的載劑。
文檔編號A61P35/00GK101778627SQ200880023760
公開日2010年7月14日 申請日期2008年7月25日 優(yōu)先權日2007年7月25日
發(fā)明者謝爾蓋·阿古爾尼克, 布魯斯·德科斯塔, 杜紅, 江逸民, 李祥逸, 野本見一, 約翰(元)·王, 張慧明 申請人:衛(wèi)材R&D管理株式會社