專利名稱：：一類新型的鉑(Ⅱ)配合物及其抗腫瘤活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一類以3-氮雜-1，l-環(huán)丁二酸根及其衍生物為配體的新型鉬(II)配合物及其制備方法，以及所述鉑(n)配合物中一些典型化合物的體外抗腫瘤活性。二-技術(shù)背景二順鉑是全球廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物之一，但是由于在臨床應(yīng)用中存在著一些缺陷，例如較嚴(yán)重的毒副作用、抗腫瘤譜窄、水溶性較差和交叉耐藥性等，因而促使人們?cè)O(shè)計(jì)和研究新的具有更高活性和低毒性的鉑類抗癌藥物。最近十幾年來(lái)，基于對(duì)鉑抗腫瘤藥物耐藥機(jī)理的深入研究，人們合成了大量的新型鉑類配合物，如含有生物活性基團(tuán)的鉬(n)配合物，具有空間位阻的鉑(n)配合物，含硫原子配位的鉑(n)配合物，多核鉑(n)配合物和具有口服活性的鉬(iv)類配合物等。這些具有新型結(jié)構(gòu)的鉑類化合物突破了順鉑類經(jīng)典構(gòu)效關(guān)系的框架，為合成新的鉑類抗腫瘤藥物拓展了渠道。由于可能的抗腫瘤機(jī)理不同于經(jīng)典的順鉑類藥物，對(duì)具有新型結(jié)構(gòu)的抗腫瘤鉑化合物的研究可望得到高效、低毒、水溶性好、選擇性高、與順鉑無(wú)交叉耐藥的候選藥物。三.
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明以兼具水溶性和脂溶性的3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸根及其衍生物作為配體與金屬鉑(II)離子配位，設(shè)計(jì)與合成了一系列具有新型結(jié)構(gòu)的鉑(II)配合物，目的在于使其滿足抗腫瘤藥物所具有的低毒、水溶性好和有效的抗腫瘤活性，用于治療人體腫瘤。本發(fā)明披露了一類具有新型結(jié)構(gòu)的鉑(n)配合物，其特征是以3-氮雜-i,i-環(huán)丁二酸根及其衍生物為配體，二價(jià)金屬鉑離子與3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸根配體中的叔胺氮原子和其中一個(gè)羧酸根中的氧原子配位成鍵，這類鉑(ii)配合物的結(jié)構(gòu)用式a)表示，，其中R!和R2可以相同或不相同，分別是氫原子、C!-8鏈狀垸基或C3-6環(huán)狀垸基，或通過(guò)Cw垸基鏈連接起來(lái)構(gòu)成的鏈狀二胺，或通過(guò)C3-6環(huán)狀烷基連接起來(lái)構(gòu)成的1,2-位環(huán)狀二胺；當(dāng)R!和R2通過(guò)Cw垸基鏈連接起來(lái)構(gòu)成有立體異構(gòu)的鏈狀二胺時(shí)，這些立體異構(gòu)體可以是光學(xué)異構(gòu)體的左旋體、右旋體或混旋體；當(dāng)R4和R2通過(guò)C^環(huán)狀垸基連接起來(lái)構(gòu)成有立體異構(gòu)的1，2-位環(huán)狀二胺時(shí)，這些立體異構(gòu)體可以是幾何異構(gòu)的順式、反式或順?lè)椿旌衔铮部梢允枪鈱W(xué)異構(gòu)體的左旋體、右旋體或混旋體；R3可以是氫原子、烷基、環(huán)狀烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；當(dāng)R3含有取代的芳香基時(shí)，取代基可以在任意位置，可以為單個(gè)或多個(gè)取代基團(tuán)。作為進(jìn)一步的說(shuō)明當(dāng)式(1)中R！和R2同時(shí)為氫原子時(shí)，式(1)所示的配合物可由式(la)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(la)其中，R3同式(l)所定義；當(dāng)式(l)中I^為氫原子或Ci-8鏈狀垸基，R2為C3-6環(huán)狀垸基時(shí)，式(l)所示的配合物可由式(lb)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(lb)其中，Ri為氫原子或C^鏈狀烷基，m=2-5，R3同式(l)所定義；當(dāng)式(l)中R,和R2通過(guò)CM烷基鏈連接起來(lái)構(gòu)成鏈狀二胺時(shí)，式(l)所示的配合物可由式(lc)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，n=2-4，R3同式(l)所定義；當(dāng)式(l)中R!和R2通過(guò)C3-6環(huán)狀烷基連接起來(lái)構(gòu)成1,2-位環(huán)狀二胺時(shí)，式(l)所示的配合物可由式(ld)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(ld)其中，p=l-4，R3同式(l)所定義。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供式(i)所示的鉑(n)配合物的制備方法。在這些鈾(n)配合物的合成中，它們首先是由二價(jià)鉑的四鹵合鉑酸鹽與相應(yīng)的胺(氨)配位作用得到含胺(氨)配位和鹵素離子配位的鉑(II)配合物，由式(2)表示，'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(2)Hal其中，Hal代表C1—、Br-或r鹵素離子，R！和R2同式(l)中對(duì)R！和R2的定義；然后在避光條件下，于水溶液中通過(guò)銀離子除去式(2)中的鹵素離子，再與式(3)所示的3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸或其衍生物的堿金屬鹽反應(yīng)，生成式(l)所示結(jié)構(gòu)的配合物；或者在避光條件下，于水溶液中通過(guò)式(4)所示的3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸或其衍生物的銀鹽除去式(2)中的鹵素離子，反應(yīng)生成式(1)所示結(jié)構(gòu)的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(4)如Na+、K+等;R3同式(l)所定義；式(3)式(3)中，M為一價(jià)的堿金屬陽(yáng)離子，式(4)中，R3同式(l)所定義。本發(fā)明的鉑(II)配合物除使用紅外光譜、核磁氫譜、質(zhì)譜和元素分析證實(shí)外，一些典型化合物的結(jié)構(gòu)還經(jīng)X-射線單晶衍射技術(shù)確定。相關(guān)化合物的分子結(jié)構(gòu)見(jiàn)說(shuō)明書附圖1和圖2。本發(fā)明還有一個(gè)目的是公開式(1)所示鉑(II)配合物中一些典型化合物對(duì)人體肺癌細(xì)胞A549、人體肝癌細(xì)胞Bel7402和人體乳腺癌細(xì)胞MCF-7的體外抑制作用。相關(guān)化合物與陽(yáng)性對(duì)照物對(duì)不同癌細(xì)胞的抑制作用見(jiàn)說(shuō)明書附圖3、圖4和圖5。四.圖1是[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)(化合物IO)的分子結(jié)構(gòu)；圖2是(N-芐基-3-氮雜-1，l-環(huán)丁二酸根)(7尺2i-環(huán)己二胺)合鉑(II)(化合物13)的分子結(jié)構(gòu)；圖3是化合物4、5、6、7、10、11和12對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的生長(zhǎng)抑制作用(細(xì)胞被化合物處理18小時(shí)后用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡數(shù)量)；圖4是化合物4、5、6、7、10、11和12對(duì)人肝癌細(xì)胞Bel-7402的生長(zhǎng)抑制作用(細(xì)胞被化合物處理18小時(shí)后用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡數(shù)量)；圖5是化合物4、5、6、7、10、11和12對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長(zhǎng)抑制作用(細(xì)胞被化合物處理18小時(shí)后用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡數(shù)量)。五.具體實(shí)施例本發(fā)明由下述實(shí)施例得到進(jìn)一步的說(shuō)明，但這些說(shuō)明并不是限制本發(fā)明。實(shí)施例1.(N-異丙基-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根)二氨合鉑(II)的制備將二碘二氨合鈿(II)(0.97g，2.0mmo1)和硝酸銀(0.68g，4.0mmo1)混合，加入lOOmL水，在40'C避光下攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。將配好的N-異丙基-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸鈉(0.46g，2.0mmol)的水溶液(50mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾。然后將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩5mL水時(shí)，有黃色固體出現(xiàn)，冷卻放置5h，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得到淡黃色固體0.32g(產(chǎn)率38%)。IR(KBr):3407br，3245s,2979m，2640m,2473w,1615s,1385s,1082m,997m，862m，789m;iH-NMR(D20/TMS):S0.92-1.18(m,6H)，3.19-3.21(m，1H)，4.00-4.02(m，2H),4.19-4.28(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=415.3(100%)。實(shí)施例2.(N-正丁基-3-氮雜-1，l-環(huán)丁二酸根)二氨合鉑(II)的制備(2)使用N-正丁基-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸鈉代替N-異丙基-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例1所述方法得到淡黃色固體，產(chǎn)率29%。IR(KBr):3430s,3261s,2963m,2876m，1616s,1385s，839m;^-NMR(D20/TMS):S0.78-0.83(m,3H),U9-1.47(m,4H)，2.59-3.24(m,2H)，3.91-4.4(m,4H);ESI-MSm/z:〖M+H]+=429.3(100%)。實(shí)施例3.(N-芐基-3-氮雜-i，l-環(huán)丁二酸根)乙二胺合鉑(n)的制備(3)將二碘乙二胺合銷(II)(1.45g，3.0mmoL)和硝酸銀(1.02g，6.0mmo1)混合，加入100mL水，在40'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。將配好的N-芐基-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸鈉(0.84g，3.0mmo1)的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾。然后將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩10mL水時(shí)，有白色固體出現(xiàn)，冷卻放置3h，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得到白色微晶0.57g(產(chǎn)率39%)。IR(KBr):3372br,3169s，3075m,2967m,2884w,1646s,1578s，1456m，1409m，1361s，1289m,1187m，890w，850w,770m;iH隱NMR(D20/TMS):52.47-2.69(m,4H),3.80-4.15(m,4H)，4.21-4.41(m，2H)，7.41,7.60(m，5H);ESI-MSm/z:[M+H]+=486.3(100%)。實(shí)施例4.(N-芐基-3-氮雜-1,1-環(huán)丁酸根)，氨合鉑(II)的制備使用N-芐基-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸鈉代替N-異丙基-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例l所述方法得到白色固體，產(chǎn)率63%。IR(KBr):3411br，3226s,3103m,2886w,1650s,1453m,1407s，1357s,880w,774m,741m;!H隱NMR(D20/TMS):53.87-3.91(m,4H),4.35-4.37(m,2H)，7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38.7.39(m，1H)，7.48-7.50(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%)。實(shí)施例5.[N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸根]*二氨合鉑(11)的制備將二碘二氨合鉬(II)(0.48g，l.OmmoL)和硝酸銀(0.34g,2.0mmoL)混合，加入100mL水，在35'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。將配好的N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸鈉(0.31g，l.Ommol)的水溶液U00mL)加入到上述澄清液中，在40。C下避光攪拌反應(yīng)36h,過(guò)濾。然后將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩10mL水時(shí)，有白色固體出現(xiàn)，冷卻放置3h，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得到白色固體0.I5g(產(chǎn)率30%)。IR(KBr):3449br，3346m，3220m,3097m，2884m，1661s,1635m,1585m,1471s,1442m,1358s,884w,774m,750m;!H-NMR(D20/TMS):S3.96-4.01(m，4H),4.15-4.17(m，2H),7.35-7.45(m，3H),7.7,7.71(m,1H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=480.9(100%)，[M+H]+=497(30%)。實(shí)施例6.[N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>(6)使用N-(3-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例5所述方法得到白色固體，產(chǎn)率56%。IR(KBr):3440br，3246m,3109m,1626m,1626m,1597s,1575s,1445m，1362s,883w,793m，735m;^隱NMR(D20/TMS):S3.95-4.00(m，4H)，4.46-4.64(m,2H)，7.35(m,3H)，7.45(m，1H);ESI隱MSm/z:[M+H〗+-496.9(100%),[M-NH3+H]+=480.6(60%)，[M+Na〗+=519.1(50%)。實(shí)施例7.[N_(4-氯芐基)-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備CI使用N-(4-氯芐基)-3-氮雜-1,l-環(huán)丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例5所述方法得到白色固體，產(chǎn)率56%。IR(KBr):3495br，3233m，3104m，1645s，1615s，1574w，1557m，1495m，1437w,1361s，880m,836m，777m;!H-NMR(D20/TMS):S3.92-3.98(m,4H),4.41-4.43(m，2H),7.25-7.38(m，2H)，7.93-7.94(m，2H);ESI陽(yáng)MSm/z:[M-NH3+H]+=479.9(100%)。實(shí)施例8.〔N-(2-氟芐基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸根]*二氨合鉑(11)的制備使用N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,卜環(huán)丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例5所述方法得到白色固體，產(chǎn)率52%。IR(KBr):3431br,3239s，3105m，2886w,1636s，1492m，1455s，1359s，854w,771m,744m;!H-NMR(D20/TMS):S3.87-3.91(m，4H),4.35-4.37(m，2H),7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38陽(yáng)7.39(m，1H),7.48-7.50(tn,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%),[M-NH3+H]+=463.8(55%)。實(shí)施例9.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,卜環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>將二碘二氨合鉬(II)U.94g，4.0mmoD和硝酸銀(1.36g,8.0rnmo1)混合，加入100mL水，在30'C下避光攪拌反應(yīng)30h，過(guò)濾得澄清液。將配好的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸鈉(1.19g，4.0mmoD的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在4(TC下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾。然后將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩35mL水時(shí)，冷卻放置lh，有白色固體出現(xiàn)，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得到白色固體0.58g(產(chǎn)率30%)。IR(KBr):3425br，3252s,3107m，2882w，1654s,1654s，1591s，1490m，1450w，1365s,864w，778w，742m;!H-NMR(D20/TMS):S3.95-3.99(m，4H)，4.45-4.46(m，2H)，7.05-7.08(m，1H)，7.17-7,22(m，2H),7.34-7.38(m，1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.8(100°/。)，[M-NH3+H]+=463.3(60%)。實(shí)施例10.[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>使用N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸鈉代替N-(2-氯芐基)-3-氮雜-l，卜環(huán)丁二酸鈉，按實(shí)施例5所述方法得到白色固體，產(chǎn)率47%。IR(KBr):3516br，3208s,3104m，2884w,1648s，1618s,1598m，1566m,1512s,1365s，882m,779m:766m;!H-NMR(D20/TMS):S3.88-3.94(m，4H)，4.36-4.38(m,2H),7.08-7.11(m,2H),7.37-7.38(m:2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=463.9(100%),[M+H]+=481.1(55%)。實(shí)施例11.[N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1，l-環(huán)丁二酸根]二氨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(11)將二碘二氨合鉑(II)(0.97g,2.0mmol)和新制的N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸銀(0.93g，2.0mmo1)混合，加水500mL，在50'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩10mL水時(shí)，有白色固體出現(xiàn)，冷卻放置3h，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得到白色固體0.52g(產(chǎn)率55%)。IR(KBr):3444br，3210s,3099m，2885w,1653s,1585w，1567m，1515w,1450w，1359s,883w,810m:771m;^-NMR(D20/TMS):53.87-3.97(m，4H)，4.32-4.70(m，2H)，7.21-7.22(m,2H)，7.26-7.27(m，2H);ESI掘m/z:[M+H]+=477.0(100%)。實(shí)施例12.[N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1，l-環(huán)丁二酸根]二氨合鈾(ll)的制備(12)使用N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀代替N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸銀，按實(shí)施例ll所述方法得到白色固體，產(chǎn)率57%。IR(KBr):3420br,3254s,3106m,2882w,1659s，1611s,1558w，1516s，1364s,860m,770w,735m;!H-NMR(D20/TMS):S3.73-3.94(m,4H)，4.36陽(yáng)4.39(m，2H),6.96-6.97(m，2H),7.30墨7.31(m,2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=475.9(100%),[M+H]+=491.9(60%)。實(shí)施例13.(N-芐基-3-氮雜-1,l-環(huán)丁二酸根)(/尺M(jìn)-環(huán)己二胺)合鉑(II)的制備H2(13)將二氯.(/尺2i-環(huán)己二胺)合鉑(n)(0.95g,2.5mmo1)和新制的N-芐基-3_氮雜-1，1-環(huán)丁二酸銀(1.12g，2.5mmo1)混合，加水600mL，在5(TC下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,約剩5mL水時(shí)出現(xiàn)白色微晶，冷卻放置，過(guò)濾后得白色晶體0.56g(產(chǎn)率41%)。IR(KBr):3424br，3208m,3101m，2937m，2861w,1606s,1497w，1452m，1354s，848w，769w;iH-NMR(D20/TMS):S1.06-1.19(m，4H)，1.49(m,2H),1.87-189(m,1H),1.97-1.99(m,1H),2.33-2.35(m，2H)，3.90-4.05(m，4H)，4.32-4.34(m，2H)，7.35-7.44(m，4H);ESI-MSm/z:[M+H〗+=543.2(100%)。實(shí)施例14.[N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸根]OS,2S-環(huán)己二胺)合鈾(II)的制備Cl、H2(14)將二氯'Os;2S-環(huán)己二胺)合鉑(II)(l.OOg，2.6mmo1)和新制的N-(3-氯芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀(1.27g，2.6mmo1)混合，加水600mL，在50。C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,約剩10mL水時(shí)出現(xiàn)白色固體。冷卻放置，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得白色固體0.64g(產(chǎn)率42%)。IR(KBr):3421br,3194m，3053m，2839m，1634s，1596s，1492m,1447m,1356s，857m，812m;'H-NMR(D20/TMS):S0.99-1.13(m,4H),1.18-1.21(m,2H)，1.88-1.90(m,1H)，1.94-1.99(m,1H)，2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.04(m，4H)，4.29-4.35(m,2H)，7.30-7.32(m,1H)，7.36陽(yáng)7.44(m,3H);ESI-MSm/z:[M+H]+=577.2(100%),[M+Na]+=600.1(50%)。實(shí)施例15.[N-(4-氯芐基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸根](反式-1，2-環(huán)己二胺)合鉑(II)的制備ClH2(15)將二氯*(反式-1,2-環(huán)己二胺)合鉑(II)(0.88g,2.3mmo1)和新制的N-(4-氯芐基)-3-氮雜-l,1-環(huán)丁二酸銀(1.12g,2.3mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,約剩10mL水時(shí)出現(xiàn)白色固體。冷卻放置，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得白色固體0.60g(產(chǎn)率45%)。IR(KBr):3424br，3196m，3063m，2839m，2862w,1638s，1598s，1492m,1446m，1355s，857m,812m,727w;'H-NMR(D20/TMS):S1.04-1.20(m，4H)，L49(m,2H),1.88-1.96(m,1H)，1.984國(guó)1.99(m，1H),2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.02(m,4H)，4.29-4.31(m，2H),7.33-7.35(m，2H),7.43-7.44(m，2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=578.1(100%)。實(shí)施例16.[N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,l-環(huán)丁二酸根]U凡2R-環(huán)己二肢)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(16)將二氯*環(huán)己二胺)合鉑(II)(1.13g，3.0mmo1)和新制的N-(2-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀(1.39g,3.0mmo1)混合，加水600mL，在50'G下避光攪拌反應(yīng)24h,過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,約剩10mL水時(shí)出現(xiàn)白色固體，冷卻放置，過(guò)濾后固體真空干燥，用水重結(jié)晶得白色固體0.76g(產(chǎn)率56%)。IR(KBr):3400br,3170m，3066m，2951m，2868w,1636s,1586w,1489m,1451m，1391w,1356s,764m，743m,711m;'H-NMR(D20/TMS):S1.09-1.24(m，4H)，1.50-1.52(m，2H)，1.94-1.96(m,1H),1.98-2.01(m,1H),2.37-2.39(m,2H)，3.85-4.06(m，4H),4.29-4.30(m，2H)，7.18-7.26(m,2H),7.41-7.46(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.1(100%),[M+Na]+=583.0(95%)。實(shí)施例17.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-l,l-環(huán)丁二酸根]US,2S-環(huán)己二膨合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(17)將二氯.(仏2S-環(huán)己二胺)合鉑(n)(1.21g,3.2mmo1)和新制的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀(1.49g，3.2mmo1)混合，加水600mL，在40'C下避光攪拌反應(yīng)30h,過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩10mL水時(shí)出現(xiàn)白色微晶，冷卻放置，過(guò)濾后得白色微晶0.79g(產(chǎn)率44%)。IR(KBr):3417br，3178m,3058m,2941m,2864w,1636s，1590s，1490m，1448m，1406w，1365s，768m，732m;iH陽(yáng)NMR(D20/TMS):51.04-1.20(m,4H),1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96誦1.99(m,1H)2.34-2.36(m,2H)，3.25-4.06(m，4H)，4.34陽(yáng)4.35(m,2H)，7.13-7.20(m，3H)，7.41-7.45(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.2(100%),[M+Na]+=583.1(35%)。實(shí)施例18.[N-(4-氟芐基)-3-氮雜-l,卜環(huán)丁二酸根](反式-1，2--環(huán)己二胺)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(18)將二氯(反式-l，2-環(huán)己二胺)合鉑(H)(1.90g，5.0mmo1)和新制的N-(4-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀(1.54g,5.0mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光攪拌反應(yīng)36h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，約剩10mL水時(shí)出現(xiàn)白色微晶,冷卻放置，過(guò)濾后得白色微晶0.82g(產(chǎn)率30%)。IR(KBr):3423br，3204m,3105m,2939m，2862w,1602s，1510s,1448m，1356s，864w，829w，706w;!H-NMR(D2。/TMS):S1.07-1.20(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-2.08(m，1H)，2.24-2.29(m,1H)2.35-2.37(m，2H),3.82-4.15(m，4H),4.22-4.33(m,2H)，7.11-7.17(m,2H),7.35-7.40(m,2H);ESI-MSm/z:[M+Na〗+=583.1(100%)。實(shí)施例19.[N-(4-甲基節(jié)基)-3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸根](iiUi-環(huán)己二胺)合鉑(II)的制備<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(19)使用N-(4-甲基芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀代替N-(2-氟芐基)_3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀，按實(shí)施例16方法得到白色固體，產(chǎn)率41%。IR(KBr):3423br,3202m,3066m，2940m，2863m，1646s,1591s，1516w，1447m,1407m，1371s,858m，817w，736w;^-麗R(D2。/TMS):51.06-1,19(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96-1.99(m,1H)，2.35-2.37(m,2H)，3.78-3.83(m,4H)，4.25誦4.26(m，2H),7.00-7.31(m,4H);ESI-MSm/z:[M+H]+=557.2(100%)，[M+Na]+=579.0(55%)實(shí)施例20.[N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸根j環(huán)己二胺〗合鉑(II)的制備H2(20)將二氯U及,2及-環(huán)己二胺)合鉑(II)(1.52g，4.0mmoD和新制的N-(4-甲氧基芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸銀(1.98g，4.0mmo1)混合，加水700mL，在40'C下避光攪拌反應(yīng)24h，過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除水，蒸干得白色固體，用水重結(jié)晶得到白色固體0.72g(產(chǎn)率31%)。IR(KBr):3365s，3125m，3058m，2940m，2863w，1637s,1609s,1514s，1456w,1409w，1374m,824m,708w;'H-NMR(D20/TMS):S1.08-1.21(m，4H),1.50(m，2H)，1.91-1.94(m，1H)，1.98-2.01(m,1H),2.35-2.37(m，2H),3.78-3.83(m，4H),4.25-4.26(m，2H),7.00陽(yáng)7.02(m,2H),7.30-7.32(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=573.2(100%),[M+Na]+=595.1(35%)。實(shí)施例21.[N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1,1-環(huán)丁二酸根]氨環(huán)己胺合鉑(II)的制備(21)將二氯一氨環(huán)己胺合鉑(II)U.08g，2.8mmo1)和新制的N-(3-氟芐基)-3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸銀(1.32g，2.8mmo1)混合，加水700mL，在50'C下避光攪拌反應(yīng)24h,過(guò)濾得澄清液。然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除水，蒸干得淡黃色固體，用水重結(jié)晶得到淡黃色固體0.65g(產(chǎn)率41%)。IR(KBr):3424br,3196s,3062m，2932m，2856m,11615,1489m,1449m,1357s,1184m,1055m，790w，768w;iH隱NMR(D20/TMS):S1.08-1.26(m,5H)，1.54墨1.70(m，3H)，2.27(m，2H)，2.61(m，1H)，3,80-4.27(m,4H),4.32-4.52(m,2H)，7.15-7.24(m，3H)，7.28-7.30(m,1H);ESI墨MSm/z:[M+H]+=563.3(100%)。實(shí)施例22.典型化合物的晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定將化合物10和化合物13的飽和水溶液室溫放置數(shù)天，得到無(wú)色透明單晶體。使用Bruker公司SMART4KCCDX-射線衍射儀在293(2)K下進(jìn)行結(jié)構(gòu)測(cè)定。采用經(jīng)石墨單色器單色化的MoKaa=0.71073A)射線，掃描方式co-2e。利用SAINT程序收集數(shù)據(jù)，晶胞和數(shù)據(jù)還原經(jīng)SAINT軟件完成，采用直接法解出結(jié)構(gòu)，利用SHELX-97程序包對(duì)全部非氫原子坐標(biāo)用基于FS的全矩陣最小二乘法進(jìn)行修正，氫原子經(jīng)理論加氫完成。化合物10的分子結(jié)構(gòu)示于說(shuō)明書附圖1，晶體和結(jié)構(gòu)修正數(shù)據(jù)見(jiàn)表la，主要鍵長(zhǎng)和鍵角數(shù)據(jù)列于表lb?；衔?3的分子結(jié)構(gòu)示于說(shuō)明書附圖2，晶體和結(jié)構(gòu)修正數(shù)據(jù)見(jiàn)表2a，主要鍵長(zhǎng)和鍵角數(shù)據(jù)列于表2b。表la.化合物10的晶體和結(jié)構(gòu)修正數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表lb.化合物10的主要鍵長(zhǎng)和鍵角數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表2b.化合物13的主要鍵長(zhǎng)和鍵角數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實(shí)施例23.典型化合物的體外抗腫瘤活性對(duì)--些典型化合物做了體外抗腫瘤活性測(cè)定，被篩選的癌細(xì)胞包括人體肺癌細(xì)胞A549、人體肝癌細(xì)胞Bel-7402和人體乳腺癌細(xì)胞MCF-7，所用的陽(yáng)性對(duì)照物為順鉑、卡鉑和奧沙利鉑。具體的實(shí)驗(yàn)方法如下實(shí)驗(yàn)方法AnnexinV和PI法檢測(cè)早期凋亡1、養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞(A546、MCF-7)，接種于24孔板(Costar)，8XIOV孔,用含10%的小牛血清(PAA)和青霉素、鏈霉素(Amresco)的DMEM培養(yǎng)基(GibcoBRL),在37r5%C02細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁；2、用不同濃度的不同鉑化合物處理；3、處理后繼續(xù)培養(yǎng)18h,以未處理的細(xì)胞作陰性對(duì)照；4、將上清轉(zhuǎn)移入離心管(其中含脫落的凋亡細(xì)胞)，與胰酶消化的細(xì)胞合并，離心收集細(xì)胞，2000rpm(約375g)，離心5min:5、用IOOuLbindingbuffer復(fù)懸細(xì)胞，加入2.5uLA騰xinV-FITC(晶美)；混勻，并且室溫避光作用IOmin;6、PBS洗細(xì)胞1次，4°C，2000rpm(約375g)，5min;7、用100uLbindingbuffer復(fù)懸細(xì)胞；加入5uL25ug/ml的PI(晶美)應(yīng)用液(用PBS配制)，避光作用5min，加入400uLPBS;8、用流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司FACSCalibur型)進(jìn)行分析，激發(fā)波長(zhǎng)為488nm,每個(gè)樣本均獲取10000個(gè)細(xì)胞。一些典型化合物和相應(yīng)的陽(yáng)性對(duì)照物對(duì)不同癌細(xì)胞的抑制作用見(jiàn)說(shuō)明書附圖3、圖4和圖權(quán)利要求1、一類具有新型結(jié)構(gòu)的鉑(II)配合物，其特征是以3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根及其衍生物為配體，二價(jià)金屬鉑離子與3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根配體中的叔胺氮原子和其中一個(gè)羧酸根中的氧原子配位成鍵，其結(jié)構(gòu)用式(1)表示，式(1)其中，R1和R2可以相同或不相同，分別是氫原子、C1-8鏈狀烷基或C3-6環(huán)狀烷基，或通過(guò)C2-4烷基鏈連接起來(lái)構(gòu)成的鏈狀二胺，或通過(guò)C3-6環(huán)狀烷基連接起來(lái)構(gòu)成的1，2-位環(huán)狀二胺；當(dāng)R1和R2通過(guò)C2-4烷基鏈連接起來(lái)構(gòu)成有立體異構(gòu)的鏈狀二胺時(shí)，這些立體異構(gòu)體可以是光學(xué)異構(gòu)體的左旋體、右旋體或混旋體；當(dāng)R1和R2通過(guò)C3-6環(huán)狀烷基連接起來(lái)構(gòu)成有立體異構(gòu)的1，2-位環(huán)狀二胺時(shí)，這些立體異構(gòu)體可以是幾何異構(gòu)的順式、反式或順?lè)椿旌衔?，也可以是光學(xué)異構(gòu)體的左旋體、右旋體或混旋體；R3可以是氫原子、烷基、環(huán)狀烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；當(dāng)R3為取代的芳香基時(shí)，取代基可以在任意位置，可以為單個(gè)或多個(gè)取代基團(tuán)。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述鉑(II)配合物的制備方法，其特征在于將式(2)代表的二鹵素離子二胺(氨)配位的鉑(II)配合物，在避光條件下，于水溶液中通過(guò)銀離子除去式(2)中的鹵素離子，再與式(3)所示的3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸或其衍生物的堿金屬鹽反應(yīng)，生成式(l)所示結(jié)構(gòu)的配合物；或者在避光條件下，于水溶液中通過(guò)式(4)所示的3-氮雜-l，l-環(huán)丁二酸或其衍生物的銀鹽除去式(2)中的鹵素離子，反應(yīng)生成式(1)所示結(jié)構(gòu)的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(2)式(2)中，Hal代表Cr、Br—或r鹵素離子，R,和R2同權(quán)利要求1中式(l)所定義:COOMCOOAg<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(3)式(4)式(3)中，M為一價(jià)的堿金屬陽(yáng)離子，如Na+、K+等；R3同權(quán)利要求l中式(l)所定義；式(4)中，R3同權(quán)利要求1中式(l)所定義。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的鉑(II)配合物和根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法獲得的鉑(II)配合物的抗腫瘤活性，其特征在于這一類鉑(II)配合物對(duì)人肺癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞的有效抑制作用。全文摘要本發(fā)明披露了一類3-氮雜-1，1-環(huán)丁二酸根及其衍生物為配體的新型鉑(II)配合物及其典型化合物的抗腫瘤活性。文檔編號(hào)A61K31/555GK101381380SQ20081015586公開日2009年3月11日申請(qǐng)日期2008年10月17日優(yōu)先權(quán)日2008年10月17日發(fā)明者霞劉,茍少華申請(qǐng)人:東南大學(xué)