專利名稱：促進(jìn)傷口愈合的白芨多糖水凝膠的制備及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一類醫(yī)用外科愈傷的多糖類水凝膠 及其制備方法。 二、背景技術(shù)治療皮膚創(chuàng)傷的基本目標(biāo)是加快創(chuàng)面的愈合速度，預(yù)防細(xì)菌感染，減輕出血、 炎癥反應(yīng)、傷口感染甚至潰瘍帶給患者的痛苦，防止創(chuàng)傷對(duì)生理機(jī)能的負(fù)面影響， 以及愈后傷口盡可能美觀。皮膚創(chuàng)傷愈合事件分為凝血期，炎癥期，細(xì)胞增殖期 以及組織重塑期，是一個(gè)牽涉到凝血、炎癥、血管重塑、上皮細(xì)胞增殖遷移以及 組織重塑等等諸多因素的復(fù)雜過程，愈傷的結(jié)果也是由這許多因素之間的平衡所 決定的Mehrdad Kokabi， Mohammad Sirousazar， Zuhair Muhammad Hass肌 PVA - clay nanocoraposite hydrogels for wound dressing. European Polymer Journal, 2007,43:773 - 781。在臨床上，常用醫(yī)用敷料覆蓋在創(chuàng)傷表面促進(jìn)愈合。醫(yī)用敷料分為傳統(tǒng)惰性 敷料、雙相作用性敷料以及生物活性敷料三大類。傳統(tǒng)惰性敷料包括合成纖維紗 布，塑料膜性不粘紗布和濕潤(rùn)性不粘紗布，屬于早期的愈傷敷料產(chǎn)品，僅僅具有 吸收分泌物以及覆蓋和支持傷口的作用，雖然制作簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜，可重復(fù)使用， 但是存在著無(wú)法保持創(chuàng)面濕潤(rùn)，換藥時(shí)易損傷新生組織并且引起疼痛，對(duì)創(chuàng)面愈 合無(wú)明顯促進(jìn)作用等等缺點(diǎn)。雙相作用性敷料包括半通透性膜，多氨基甲酸乙酯 泡沫以及明膠類水凝膠敷料。這些敷料具有更強(qiáng)的吸收創(chuàng)面中、高度滲液的功能， 并且相較于傳統(tǒng)惰性敷料，其保濕功能更好，優(yōu)勢(shì)在于可以用來(lái)造成促進(jìn)傷口愈 合的局部生理性濕潤(rùn)環(huán)境，但是，敷料本身并不具有促進(jìn)傷口愈合的功能Sedlarik KM， Vacik J， Wichterle 0. Modern dressings—hydrogels. Rozhl Chir, 1995,74:3-7。后來(lái)隨著科技的進(jìn)步，新型敷料被寄予具有生物功能的厚 望。理想的新型愈傷敷料必須具備以下特性(1)維持創(chuàng)面生理性濕潤(rùn)，防止傷 口干燥，(2)保護(hù)創(chuàng)面不受二次感染，(3)吸收創(chuàng)面分泌物，(4)減少創(chuàng)傷表面 壞疽的面積，(5)刺激生長(zhǎng)因子，(6)材料具有彈性，(7)良好的生物相容性Purna Sai K., Mary Babu. Collagen based dressings — a review. Burns, 2000,26:54-62。于是生物活性敷料應(yīng)運(yùn)而生。近年來(lái)，新型生物活性敷料以藻酸鹽類敷料，膠原類敷料和聚合類水膠體敷 料為主。藻酸鹽類敷料具有止血功能，具有良好的防水性和防感染作用，但是， 干燥或者硬痂類創(chuàng)面不宜使用Kneafsey B， Oshanghnessy M, Condon KC. The use of calcium alginate dressing in deep hand burns. Burns, 1996,22:40-43。膠原類敷料具有促進(jìn)血小板在創(chuàng)面聚集與黏附，以及作為細(xì)胞 外基質(zhì)促進(jìn)創(chuàng)面與正常組織之間形成橋聯(lián)的功能，應(yīng)用較為廣泛。而聚合物水膠 體屬于吸收高度分泌液的敷料，吸收滲液量可達(dá)到自身質(zhì)量的12倍以上，并且生 物相容性好，但是生物學(xué)功能不顯著。白發(fā)strj'az^ (Thunb.) Reichb. f.]，又名雙腎草、紫蘭、涼 姜，是蘭科白芨屬，多年生草本植物，其塊莖具有收斂止血、清熱利濕、消腫生 肌的功效凌一揆中藥學(xué)，北京科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社.2003第5版.。近年 來(lái)，本實(shí)驗(yàn)室通過離子交換層析與凝膠過濾層析得到白芨多糖提取物純品(BSP)孫劍濤，張峻峰，王春明，羅熠專利號(hào):CN200410065732. 5。該純品細(xì)胞水 平實(shí)驗(yàn)表明，具有促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)和促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖 的功能Chunming Wang， JiantaoSun， Junfeng Zhang, eta丄A polysaccharide isolated from the medicinal herb Bletilla striata induces endothelial cells proliferation and vascular endothelial growth factor expression in vitro. Biotechnology Letters, 2006,28:539-543。這些生物學(xué)功能是與白芨 促進(jìn)愈傷的傳統(tǒng)治療作用相符合的。在上述研究基礎(chǔ)上，我們將白芨多糖醛基化 制備成為白芨多糖水凝膠醫(yī)用敷料。白芨多糖水凝膠兼有白芨的生物學(xué)功能和水 凝膠的細(xì)胞外基質(zhì)環(huán)境作用。作為水凝膠，它具有良好的維持創(chuàng)面生理性濕潤(rùn)的 功能，可以吸收較自身質(zhì)量為4倍到30倍的創(chuàng)面滲液，并且和創(chuàng)面結(jié)合緊密，具 有良好的透氣性，其作為水凝膠特有的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)徹底防止細(xì)菌感染；同時(shí)， 它兼有白芨的生物學(xué)功能，消炎，消腫，剌激傷口附近細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因 子，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，有利于加速傷口愈合，并且生物相容性好，覆蓋 在傷口表面數(shù)天后自行降解，不會(huì)與創(chuàng)面粘連導(dǎo)致難以去除。正因?yàn)榘总付嗵撬?凝膠兼有白芨的生物學(xué)功能和水凝膠的細(xì)胞外基質(zhì)環(huán)境作用，使得它作為新型生 物活性敷料前景廣闊。 三、發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是公開一類醫(yī)用多糖類水凝膠，它包含醛基化的 白芨多糖和去離子純水，交聯(lián)劑是適量多胺類化合物，包括己二胺、殼聚糖和多 聚賴氨酸。本發(fā)明涉及白芨水凝膠的制備方法。本發(fā)明還涉及白芨水凝膠在皮膚創(chuàng)傷愈合中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的白芨多糖是由天然藥物白芨塊莖，通過離子交換層析與凝膠過 濾層析等步驟獲得的。具體見發(fā)明專利"一種顱內(nèi)動(dòng)脈瘤液體栓塞劑及其制備方 法"孫劍濤，張峻峰，王春明，羅熠，專利號(hào)CN200410065732.5。本發(fā)明的白芨水凝膠的制備，包括以下步驟1、 將白芨多糖溶于去離子純水中，加入適量高碘酸鈉，攪拌反應(yīng)過夜，經(jīng) 去離子水透析除去高碘酸鈉，得到醛基化的白芨多糖；2、 醛基化的白芨多糖與多胺類交聯(lián)劑的質(zhì)量比為20:1， 8:1， 4:1， 2:1, 1:1， 1:2，混合后加熱蒸發(fā)水溶劑，得到不同配比的白芨水凝膠。本發(fā)明涉及的白芨多糖水凝膠愈合皮膚創(chuàng)傷作用是通過建立小鼠皮膚創(chuàng)傷 模型，研究白芨多糖水凝膠在創(chuàng)傷愈合過程中消炎、消腫，以及加速創(chuàng)面愈合的 作用。本發(fā)明白芨多糖水凝膠的優(yōu)勢(shì)在于有效地抑制了創(chuàng)傷形成初期(2—3天) 的炎癥事件，降低了炎癥事件對(duì)創(chuàng)面以及創(chuàng)面周圍正常組織和細(xì)胞的損傷作用。 創(chuàng)面及其四周不紅不腫，結(jié)痂在皮膚表面，8天痂掉，傷口閉合迅速，比對(duì)照凡 士林紗布和碘氟紗布愈合時(shí)間縮短，并且整個(gè)過程沒有細(xì)菌感染；由于水凝膠吸 收滲液的作用，傷口表面沒有滲液存留影響愈合；由于水凝膠良好的透氣性，傷 口沒有受到缺氧環(huán)境的負(fù)面作用；由于白芨水凝膠是天然成分，覆蓋在傷口表面 數(shù)天后自行降解，所以不存在與創(chuàng)傷處粘連導(dǎo)致愈后難以去除的問題。本發(fā)明的 白芨多糖水凝膠滿足一款理想的皮膚愈傷水凝膠類敷料應(yīng)當(dāng)具備的條件，具有一 定的生物學(xué)活性，并且安全性高，使用方便。 四

圖la為不同配比白芨一殼聚糖水凝膠的實(shí)物圖。 圖lb為不同配比白芨一多聚賴氨酸水凝膠的實(shí)物圖。圖2為不同配比白芨多糖水凝膠的成膠分?jǐn)?shù)，白色柱狀是白芨一殼聚糖水凝膠組，斜框柱狀是白芨一多聚賴氨酸水凝膠組。圖3a為不同配比白芨多糖水凝膠的溶脹率，白色柱狀是白芨一殼聚糖水凝膠組， 斜框柱狀是白芨 一 多聚賴氨酸水凝膠組。 圖3b(l)為4:l配比的白芨一殼聚糖水凝膠溶脹前的實(shí)物圖。 圖3b(2)為4:1配比的白芨一殼聚糖水凝膠溶脹后的實(shí)物圖。 圖3c(l)為8:1配比的白芨一多聚賴氨酸水凝膠溶脹前的實(shí)物圖。 圖3c(2)為8:1配比的白芨一多聚賴氨酸水凝膠溶脹后的實(shí)物圖。 圖4為不同配比白芨多糖水凝膠的透氣性，白色柱狀圖白芨一殼聚糖水凝膠組， 斜框柱狀是白芨一多聚賴氨酸水凝膠組。圖5a為C57BL/6小鼠愈傷實(shí)驗(yàn)過程中，使用8:1配比的白芨-多聚賴氨酸水凝膠 覆蓋創(chuàng)面，各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面實(shí)物照。圖5b為C57BL/6小鼠愈傷實(shí)驗(yàn)過程中，使用凡士林紗布覆蓋創(chuàng)面，各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng) 面實(shí)物照。圖5c為C57BL/6小鼠愈傷實(shí)驗(yàn)過程中，使用碘氟紗布覆蓋創(chuàng)面，各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面 實(shí)物照。圖6為C57BL/6小鼠愈傷實(shí)驗(yàn)過程中，各組各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面面積積分，B是8:l配 比的白芨-多聚賴氨酸水凝膠組，O是凡士林紗布組，A是碘氟紗布組。 五具體實(shí)施方式
1、 水凝膠的制備(一)2g白芨多糖純品溶解在去離子純水中，加入0.3克-1.0克高碘酸鈉，攪拌均 勻，反應(yīng)24小時(shí)，經(jīng)去離子純水透析后得到醛基化的白芨多糖，4。C保存。按醛基化白芨多糖與交聯(lián)劑己二胺的質(zhì)量比為20:1或8:1或4:1或2:1或 1:1或1:2，混合后加熱蒸發(fā)水溶劑，得到不同配比的白芨一己二胺水凝膠，密 封放置在4°C冰箱保存。不同配比白芨 一 己二胺水凝膠均呈透明片層狀。在20:1 ， 8:1， 4:1, 2:1配比下，水凝膠脆易碎，機(jī)械強(qiáng)度較差。在1:1， 1:2配比下， 水凝膠具有一定的韌性和彈性，機(jī)械強(qiáng)度較好。2、 水凝膠的制備(二)醛基化白芨多糖合成過程同實(shí)施例1。1:1或1:2，混合后加熱蒸發(fā)水溶劑，得到不同配比的白芨一殼聚糖水凝膠，密 封放置在4。C冰箱保存。在20:1， 8:1配比下，水凝膠呈玻璃樣，透明片層狀， 較脆易碎，機(jī)械強(qiáng)度較差。在4:1， 2:1配比下，水凝膠呈有彈性的片層狀，機(jī) 械強(qiáng)度較好，有一定韌性。在l:l， l:2配比下，水凝膠呈果凍狀，彈性好，機(jī) 械強(qiáng)度好。不同配比白芨一殼聚糖水凝膠實(shí)物圖見圖la。3、 水凝膠的制備(三)醛基化白芨多糖合成過程同實(shí)施例1。按醛基化白芨多糖與交聯(lián)劑多聚賴氨酸的質(zhì)量比為20:1或8:1或4:1或2:1 或1:1或1:2，混合后加熱蒸發(fā)水溶劑，得到不同配比的白芨一多聚賴氨酸水凝 膠，密封放置在4。C冰箱保存?zhèn)溆谩Ｔ?0:1配比下，水凝膠呈玻璃樣，透明片 層狀，有一定韌性和機(jī)械強(qiáng)度。在8:1， 4:1， 2:1配比下，水凝膠呈果凍狀，彈 性好，機(jī)械強(qiáng)度好。在l:l， l:2配比下，水凝膠呈棕色不透明片層狀，沒有彈 性，易裂，機(jī)械強(qiáng)度中等。不同配比白芨一多聚賴氨酸水凝膠實(shí)物圖見圖lb。4、 水凝膠的成膠分?jǐn)?shù)性質(zhì)研究各配比白芨多糖水凝膠的成膠分?jǐn)?shù)按以下公式計(jì)算-成膠分?jǐn)?shù)=^ssssis^ x ioo%，表明原料中最后形成水凝膠的成 溶脹刖的質(zhì)量分的質(zhì)量占原料總質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。這個(gè)百分?jǐn)?shù)體現(xiàn)了水凝膠的交聯(lián)度。白芨_殼聚糖水凝膠和白芨一多聚賴氨酸水凝膠的成膠分?jǐn)?shù)，結(jié)果見圖2。如圖所示，白 芨一殼聚糖水凝膠和白芨一多聚賴氨酸水凝膠分別在4:1和8:1配比的時(shí)候，成 膠分?jǐn)?shù)達(dá)到最大，所得水凝膠交聯(lián)程度最好。5、 水凝膠的溶脹性質(zhì)研究各配比白犮多糖水凝膠的溶脹率按以下公式計(jì)算溶脹率=^mggg^，表明各配比白芨多糖水凝膠吸收水分的能溶脹刖的質(zhì)量力。白芨一殼聚糖水凝膠和白芨一多聚賴氨酸水凝膠的溶脹率，結(jié)果見圖3a; 白芨一殼聚糖水凝膠溶脹前后的實(shí)物圖見圖3b;白芨一多聚賴氨酸水凝膠溶脹 前后的實(shí)物圖見圖3c。如圖所示，白芨一多聚賴氨酸水凝膠吸收水分的能力隨著交聯(lián)劑多聚賴氨酸的質(zhì)量增加而提高，白芨一殼聚糖水凝膠吸收水分的能力則在8:1配比的時(shí)候達(dá)到最大。6、 水凝膠的微生物透過性研究將不同配比白芨多糖水凝膠制作成為直徑4 cm，厚2mm的薄層，放置到 TSA(胰蛋白大豆糖)表面，滅菌，然后將大腸桿菌以10Vml的濃度滴加到不同 配比白芨多糖水凝膠表面，每天觀察TSA上細(xì)菌的面積。各配比白芨多糖水凝 膠都具有完全防止細(xì)菌透過的性質(zhì)。7、 水凝膠的透氣性研究白芨多糖水凝膠的透氣性按以下公式計(jì)算透氣性=^SH，失f f f i ，表明當(dāng)涂抹在傷口上面的水凝膠厚0.4 蒸發(fā)時(shí)間x截面積mm的時(shí)候，水凝膠的透氣性能，結(jié)果見圖4。如圖所示，8:1配比的白芨一多聚 賴氨酸水凝膠和1:1配比的白芨一殼聚糖水凝膠，其透氣性分別為2539.7克/ 平方米/天和1814.5克/平方米/天。有文獻(xiàn)建議材料透氣性在1800 2500克/ 平方米/天范圍內(nèi)，既能夠保證創(chuàng)面處于濕潤(rùn)狀態(tài)，又不會(huì)因?yàn)樗诌^多而使得 組織浸泡變軟Queen D, Gaylor JDS, Evans JH， Courtney JM， Reid WH. The preclinical evaluation of the water vapour transmission rate through burn wound dressings. Biomaterials, 1987,8:367-371。8:1配比的白芨一多聚賴 氨酸水凝膠和1:1配比的白芨一殼聚糖水凝膠的透氣性適于保證創(chuàng)面處于合適 的濕潤(rùn)狀態(tài)。8、 白芨多糖水凝膠皮膚愈傷的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)(一)選取雄性C57BL/6小鼠72只，體重22 25g，隨機(jī)分為三組，分別為碘氟 紗布愈傷對(duì)照組，凡士林紗布愈傷對(duì)照組，8:1配比的白芨一多聚賴氨酸水凝膠 愈傷組。所有雄性C57BL/6小鼠均用氯胺酮進(jìn)行麻醉，麻醉后在背部被毛2cm X3cm，在被毛處制作直徑6mm的圓形皮膚切除創(chuàng)面兩處。各組小鼠分別用一 層碘氟紗布， 一層凡士林紗布，或者涂抹一層白芨一多聚賴氨酸水凝膠完全覆蓋 創(chuàng)面，再用兩層無(wú)菌紗布覆蓋在含藥紗布或者水凝膠上面，用膠布固定。每天給各組小鼠的創(chuàng)面拍照。用photoshop軟件對(duì)照片中創(chuàng)面面積進(jìn)行積分， 做出各組創(chuàng)面面積縮小的曲線。比較白芨一多聚賴氨酸凡士林紗布碘氟紗布水凝膠82天創(chuàng)面平整，圓形創(chuàng)面凹陷，圓形創(chuàng)面凹陷，不規(guī)則低炎癥有腫脹，炎癥創(chuàng)面四周紅腫，高炎癥5天癡下愈合結(jié)痂愈合結(jié)痂愈合沒有炎癥仍有炎癥'仍有炎癥8-11天痂掉，創(chuàng)面收口快有痂，創(chuàng)面收口慢有痂，創(chuàng)面收口慢12-13天創(chuàng)面全部平復(fù)14天創(chuàng)面平復(fù)創(chuàng)面平復(fù)各組各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面實(shí)物照見圖5。各組各時(shí)間點(diǎn)創(chuàng)面面積積分圖見圖6。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明使用8:1配比的白芨—多聚賴氨酸水凝膠，在愈傷過程初期(2 一3天)傷口平整，沒有持續(xù)紅腫的癥狀，維持了適宜的炎癥水平，并且之后迅 速消炎。相比之下，凡士林紗布組和碘氟紗布組，在愈傷過程初期傷口紅腫，炎 癥水平在第5天仍然保持在較高水平，直到7天以后才徹底消腫，影響了創(chuàng)面進(jìn) 入組織形成期進(jìn)行上皮重塑和組織再生。所以，8:1配比的白芨一多聚賴氨酸水 凝膠降低了持續(xù)炎癥事件對(duì)上皮重塑和組織再生的抑制作用，創(chuàng)面及其四周不紅 不腫，結(jié)痂主要在皮膚表面，8天痂掉，傷口閉合迅速，比對(duì)照凡士林紗布組和 碘氟紗布組愈合時(shí)間縮短。9、白芨多糖水凝膠皮膚愈傷的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)(二)C57BL/6小鼠皮膚創(chuàng)傷模型構(gòu)建同實(shí)施例4。按照實(shí)施例2所述方法配置1:1配比的白芨一殼聚糖水凝膠進(jìn)行C57BL/6 小鼠皮膚愈傷實(shí)驗(yàn)。愈傷過程中，第2天創(chuàng)面平整，圓形，炎癥低；第6天形成 痂下愈合，沒有炎癥；第9天到第10天痂掉，之后創(chuàng)面收口；第13天到第14 天，創(chuàng)面全部平復(fù)，愈合時(shí)間比對(duì)照凡士林紗布組和碘氟紗布組略提前。白芨一 殼聚糖水凝膠組的炎癥水平較為溫和，而對(duì)照凡士林紗布組和碘氟紗布組創(chuàng)面在 第5天仍然紅腫，直到7天以后才完全消腫。適宜水平的炎癥事件以及消炎作用， 使得1:1配比的白芨多糖水凝膠愈傷速度比對(duì)照組快。
權(quán)利要求
1. 醫(yī)用多糖類水凝膠，其特征為所述水凝膠由醛基化的白芨多糖、交聯(lián)劑己二胺或殼聚糖或多聚賴氨酸與去離子純水組成，聚合物的質(zhì)量百分比為3-25％，去離子純水的質(zhì)量百分比為75-97％。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述醫(yī)用多糖類水凝膠的制備方法，其特征是按以下步驟進(jìn) 行將白芨多糖溶于去離子純水中，加入0.3克-l.O克高碘酸鈉，攪拌反應(yīng)24 小時(shí)，用去離子純水透析后得到醛基化的白芨多糖，再按醛基化白芨多糖與交聯(lián) 劑己二胺的質(zhì)量比為20:1或8:1或4:1或2:1或hl或1:2，混合后加熱蒸發(fā) 水溶劑，得到不同配比的白芨一己二胺水凝膠。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述醫(yī)用多糖類水凝膠的制備方法，其特征是按以下步驟進(jìn) 行將白芨多糖溶于去離子純水中，加入0.3克-1.0克高碘酸鈉，攪拌反應(yīng)24 小時(shí)，用去離子純水透析后得到醛基化的白芨多糖，再按醛基化白芨多糖與交聯(lián) 劑殼聚糖的質(zhì)量比為20:1或8:1或4:1或2:1或1:1或1:2，混合后加熱蒸發(fā) 水溶劑，得到不同配比的白芨一殼聚糖水凝膠。
4、 根據(jù)權(quán)利要求.l所述醫(yī)用多糖類水凝膠的制備方法，其特征是按以下步驟進(jìn) 行將白芨多糖溶于去離子純水中，加入0.3克-1.0克高碘酸鈉，攪拌反應(yīng)24 小時(shí)，用去離子純水透析后得到醛基化的白芨多糖，再按醛基化白芨多糖與交聯(lián) 劑多聚賴氨酸的質(zhì)量比為20:1或8:1或4:1或2:1或1:1或1:2，混合后加熱 蒸發(fā)水溶劑，得到不同配比的白芨一多聚賴氨酸水凝膠。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述醫(yī)用多糖類水凝膠在制備治療外科愈傷藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開了一類醫(yī)用外科愈傷的多糖類水凝膠，所述水凝膠由醛基化的白芨多糖、交聯(lián)劑與去離子純水組成，聚合物的質(zhì)量百分比為3-25％。本發(fā)明水凝膠的特點(diǎn)是，具有良好的消炎作用，良好的透氣性，良好的保濕作用以及吸收創(chuàng)傷分泌物的功能，在動(dòng)物模型中顯著提高了創(chuàng)傷愈合的速度，作為一種理想的醫(yī)用外科愈傷藥具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61L15/16GK101249274SQ20081002467
公開日2008年8月27日 申請(qǐng)日期2008年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月1日
發(fā)明者刁華佳, 夏蘇華, 張峻峰, 熠 羅, 陳江寧 申請(qǐng)人:南京大學(xué)