專利名稱：：包含活性染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含活性染料和角蛋白結(jié)合多肽的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子、其在染發(fā)制品中的用途以及所述染發(fā)制品。本發(fā)明還涉及染發(fā)方法?，F(xiàn)有技術(shù)根據(jù)染發(fā)組合物(染發(fā)劑)耐退色性(colorresistance)情況的不同將其分成三類僅持續(xù)l-2次洗發(fā)的暫時(shí)性染發(fā)劑；需要在8-10次洗發(fā)后續(xù)染的半永久性染發(fā)劑；和不能洗掉的永久性染發(fā)劑。暫時(shí)性和半永久性染發(fā)劑稱作非氧化型染發(fā)劑。在這種情況下，染料本身定位在毛發(fā)的角蛋白上或透入毛發(fā)纖維。使用永久性染發(fā)劑，即迄今為止最廣泛應(yīng)用的染發(fā)劑，在用作氧化劑的過氧化氫的存在下，無色前體由于化學(xué)反應(yīng)而直接在毛發(fā)上或毛發(fā)中形成顏料。在這種情況下，毛發(fā)被完全徹底地染色，顏料不能被洗掉。這些染發(fā)劑稱作氧化型染發(fā)劑。永久性染發(fā)對洗發(fā)、光效應(yīng)和其它毛發(fā)處理方法極為耐受。它得到了最廣泛的應(yīng)用并且在染發(fā)劑的市場份額中約占80%。僅需要大約每個(gè)月因毛發(fā)生長而補(bǔ)染發(fā)根。使用該染色系統(tǒng)，經(jīng)本色中間體或前體的化學(xué)反應(yīng)，染料直接形成在毛發(fā)上和毛發(fā)中。此處在氨或單乙醇胺的存在下，通過過氧化氫而發(fā)生氧化反應(yīng)、偶聯(lián)過程以及縮合反應(yīng)。由此需要應(yīng)用過氧化氫作為氧化劑，因?yàn)樗粌H啟動染料形成，而且同時(shí)還破壞了毛發(fā)中的黑色素，從而引起漂白，有鑒于此，染色過程也稱作淡染。永久性染發(fā)劑原則上還包括所謂的自氧化染料，甚至空氣氧都能使之氧化。染發(fā)劑通常為水性溶液或乳劑的形式，優(yōu)選為增稠的水性溶液或乳劑，且除染料外還包含，例如脂肪醇和/或其它油組分、軟化劑和表面活性劑，且適宜的情況下還包含醇類。氧化型染發(fā)劑一般包括兩類組分，即(A)包含染料的染料載體物質(zhì)；和(B)氧化劑制品。在施用前即刻混合這些組分，然后施用于染色的纖維。常用的這類永久性或氧化型染發(fā)劑的施用形式為染發(fā)霜和染發(fā)膠。據(jù)研究，在工業(yè)化國家35%的女性和10%的男性定期染發(fā)。然而，化學(xué)染發(fā)劑長久以來一直存有爭議，因?yàn)榻】碉L(fēng)險(xiǎn)尚未排除。因此，每次染發(fā)的同時(shí)還發(fā)生毛發(fā)損傷。色素必須通過保護(hù)性(predective)鱗狀層摻入毛發(fā)的皮質(zhì)層。如上所述，染發(fā)劑包含兩類組分氧化劑和染色霜。存在于染發(fā)劑中的芳族胺特別是在目前受到了批評。認(rèn)為它們在染色過程中，通過頭部進(jìn)入體內(nèi)并在肝臟中分解。隨后在膀胱中，降解產(chǎn)物有時(shí)被轉(zhuǎn)化成致癌物質(zhì)。達(dá)特茅斯醫(yī)學(xué)院(DartmouthMedicalSchool)在"國際癌癥雜志(InternationalJournalofCancer)"(A.Andres:IntJCancer2004;109:581-586)中的近期研究發(fā)現(xiàn)染發(fā)與膀胱癌之間存在可能的相關(guān)性與不染發(fā)的女性相比，定期使用永久性染發(fā)劑的女性患膀胱癌的風(fēng)險(xiǎn)平均提高1.5國2.3倍。尚未在可接受性方面接受測試的永久性染發(fā)劑即將在歐盟(EU)禁用。目前，這可能影響半數(shù)所有的染發(fā)劑。本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供施用于皮膚或毛發(fā)，特別是染色皮膚、毛發(fā)或指甲的新型皮膚美容活性成分化合物及其生產(chǎn)方法。最好鑒定這樣的活性成分化合物，它們具有角蛋白結(jié)合特性并且還適合于生產(chǎn)化妝品組合物和/或染發(fā)劑。此外，本發(fā)明的目的在于鑒定能夠通過共價(jià)鍵與具有角蛋白結(jié)合特性的多肽偶聯(lián)的適宜化合物。特別地，本發(fā)明的目的在于提供染發(fā)、優(yōu)選可逆染色的創(chuàng)新性方法，其中對毛發(fā)的損傷盡可能減小。令人驚訝的是，這些目的可以如下所述通過使化學(xué)染料與角蛋白結(jié)合多肽偶聯(lián)實(shí)現(xiàn)。發(fā)明概述本發(fā)明的第一個(gè)實(shí)施方案涉及角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其包含(a)至少一種活性染料(i)和(b)至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，具體的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii)，它對人皮膚角蛋白、毛發(fā)角蛋白或指曱角蛋白具有結(jié)合親和力。優(yōu)選(b)中指定的角蛋白結(jié)合多肽(ii)包含(a)至少一種具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170中所示序列之一的多肽；或(b)與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40。/。同一性且能夠結(jié)合角蛋白的多肽。優(yōu)選本發(fā)明使用的角蛋白結(jié)合多肽(ii)由這樣的核酸分子編碼，所述核酸分子包含至少一種選自如下的核酸分子(a)編碼多肽的核酸分子，所述的多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列；(b)包含至少一種SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示序列的多核苷酸的核酸分子；(c)編碼SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列的多肽的核酸分子；(d)具有這樣的核酸序列的核酸分子，所述核酸序列對應(yīng)于至少一種SEQIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列；或?yàn)橥ㄟ^取代、缺失或插入從中衍生的核酸分子，其編碼的多肽與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能夠結(jié)合角蛋白；(e)編碼單克隆抗體識別的多肽的核酸分子，所述單克隆抗體抗如(a)至(c)中所示核酸分子編碼的多肽；(f)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，所述核酸分子在嚴(yán)格條件下與如(a)至(c)中所示的核酸分子雜交；(g)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，在嚴(yán)格雜交條件下，利用如(a)至(c)中所示的核酸分子或其包含至少15個(gè)核苷酸(nt)、優(yōu)選20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt的部分片段作為探針，能夠從DNA庫中分離所述核酸分子；(h)能夠通過序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻譯產(chǎn)生的核酸分子。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，具體的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含至少一種活性染料(i),所述活性染料(i)具有至少一個(gè)選自如下的活性固著點(diǎn)(a)在堿性條件下可活化的式l的基團(tuán)，(X)式l<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中—…表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵；X為吸電子基團(tuán)或?yàn)橥榛?O-烷基、氰基、羥基、卣素基團(tuán)或H，k為l、2或3,n為0或l，且B為基團(tuán)-CH=CH2或基團(tuán)-CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2Q或-NH-CBNCH2，其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)；和(b)式2的丙烯酰氨基固著點(diǎn)式2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中…-表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵；和(c)式3、4或5的化合物之一式3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>式4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>式5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中---表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵;V為氟或氯；UpU2彼此獨(dú)立為氟、氯或氫；且Q、Q2彼此獨(dú)立地為氯、氟、氰氨基(cyanamido)、羥基、(C廣C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巰基、(d-C6)-烷基巰基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基曱?；拎げ⒒蛲ㄊ?或7的基團(tuán)，R2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>R4其中I^為氫或(C廠C6)-烷基、磺基-(C廣C6)-烷基，或者未被取代或被(c,-C4)-烷基、(d-co-烷氧基、磺基、卣素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基；R"和R"彼此獨(dú)立地具有I^的含義之一，或?yàn)橥ㄊ?的基團(tuán)，式8或形成式-(CH2)j-的環(huán)系，其中j為4或5;或可選地為-(CH2)2-E-(CH2)r，其中E為氧、硫、磺基、-NR5-,其中R^(C廣C6)-烷基；W為亞苯基，其未被取代或被一個(gè)或兩個(gè)諸如(C廣C4)-烷基、(crc4)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代；或?yàn)?c,-C4)-亞烷基-亞芳基或(CrC6)-亞烷基，其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羰氨基(carbonamido)中斷；或?yàn)閬啽交?CONH-亞苯基，其未被取代或被(OC4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、羥基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或鹵素取代；或?yàn)閬嗇粱湮幢蝗〈虮灰粋€(gè)或兩個(gè)磺基取代；且Z為基團(tuán)-CH=CH2或基團(tuán)-CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2，其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)；R24、R25和R26為(d-C4)-烷基或(d-C0-羥基烷基；B-為陰離子的等效物，如硫酸氫鹽、硫酸鹽、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氫鹽、磷酸氫鹽、磷酸鹽、氫氧化物或乙酸鹽。在本發(fā)明更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含的活性染料含有式l的活性固著點(diǎn)，其中存在的至少一個(gè)基團(tuán)為基團(tuán)S03H。此外，本發(fā)明優(yōu)選涉及包含這樣的活性染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述活性染料含有式l的活性固著點(diǎn)，并且其中式1中的B為CHNCH2、基團(tuán)CH2-CH2-0-S03H或CH2-CH2CL。本發(fā)明優(yōu)選這樣的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中在堿性條件下可活化的式I的基團(tuán)與染料分子(D)通過基團(tuán)-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-S02-或-N(R)-鍵合，其中R為烷基。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，它們?yōu)榘x自如下染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子酞胥系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲月賞染料、二惡、秦染料、吖啶(actidine)染料、^p屯染料、聚曱炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基曱烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮(dibenzanthrone)染料和這些染料的金屬絡(luò)合物。本發(fā)明還優(yōu)選包含至少一種這樣的活性染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述活性染料包括選自如下基團(tuán)(l-l)至(l-43)的活性固著點(diǎn)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>,ls02-CH2-CH2-0-S03H<f~y~S02-CH2-CH2-CI^"^~S02-CH=CH2(1-7)(1-8)(1-9)HO，SHO,SHO,SHO,SH03S,S02-CH2-CH2-0-S03H(1-10)S02-CH2-CH2-0-S03H(1-13)S03HS02-CHrCH2-0-S03H(1-16)H03S,HO，SHO，SHO,SS02-CH2-CH2-CI(1-11)S02-CH=CH2(1-14)S。3HS。2-CH=CH2(1-17)S02-CH=CH2(1-12)H03S,S02-CH2-CH2-0-S03H(1-15)-SO,-CH,-CH，-O-SO,HH03S.、(1-18)CH，MeOCH,O-S02-CH2-CH2-0-S03H(1-19)OMeH03S,HOS02-CH2-CH2-0-S03H(1-20)-S。2-CH2-CH2-0-S03HHO~^))~S02-CH2-CH2-0-S03H(1-22)(1-23)S02-CH=CH2(1-21)。MeS02-CH2-CH2-0-S03H/O(1-25)HO,SHO，SHO~^^~S02-CH2-CH2-0-S03H(1-26)//\(1-24)H03S-0-CH2-CH2-S02\-S。3H(1-27)HO,SS02-CH2-CH2-0-S03HK^S02-CH2-CH2-0-S03H-S02-CH2-CH2-0-S03H(1-28)(1-29)(1-30)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中"n"為0-40的整數(shù)。本發(fā)明還提供上述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在皮膚染色劑、染發(fā)劑或修飾用化妝品中的應(yīng)用。此外，本發(fā)明涉及皮膚染色劑，指甲染色劑和/或染發(fā)劑，優(yōu)選染發(fā)劑，其包含至少一種本發(fā)明上述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。本發(fā)明還提供了使用包含(a)至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii)和(b)染料或活性染料(i)的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子染色毛發(fā)、皮膚或指曱的方法。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用本發(fā)明上述定義的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。上述染色毛發(fā)、皮膚或指曱的方法的特別優(yōu)選的實(shí)施方案為可逆的方法，其中通過置換反應(yīng)用(i)角蛋白結(jié)合多肽或(ii)含角蛋白的溶液處理而從毛發(fā)角蛋白，皮膚角蛋白或指甲角蛋白中置換角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子或用高含量去污劑(例如SDS)溶液從皮膚，毛發(fā)或指甲中除去角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。定義與表述"帶氨基官能團(tuán)的效應(yīng)分子"相關(guān)的"氨基官能團(tuán)"表示氨基能夠使所述帶氨基官能團(tuán)的分子與其它分子通過酰胺鍵共價(jià)連接。就本發(fā)明的目的而言，"氨基官能團(tuán)，，也指那些能夠通過化學(xué)方式轉(zhuǎn)化成氨基官能團(tuán)的基團(tuán)。本文的本發(fā)明效應(yīng)分子具有至少一個(gè)氨基官能團(tuán)。然而，還有可能使用具有兩個(gè)、三個(gè)或三個(gè)以上氨基官能團(tuán)和/或仲氨基的效應(yīng)分子。就本發(fā)明的目的而言，"抗體"為人和有頜脊推動物產(chǎn)生的抵抗抗原的蛋白質(zhì)(感染性病原體或?qū)C(jī)體而言外來的生物物質(zhì))。它們?yōu)楦叩日婧松锩庖呦到y(tǒng)的關(guān)鍵成分并且由白血球類即B細(xì)胞分泌。它們出現(xiàn)在血液或組織的胞外液中。"修飾用化妝品"表示并非主要用于護(hù)理，而是用于美容或改善皮膚、毛發(fā)和/或指甲和趾甲外觀的化妝品配件。這類配件為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知，并且包括，例如眼線筆(kohlpencil)、睫毛骨、眼影骨、熏色日霜(tinteddaycream)、脂粉、遮瑕膏、腮紅、唇膏、唇線筆、美容品、指曱油、啫哩膠(glamourgel)等。就本發(fā)明的目的而言，它們特別為適合于染色皮膚，指曱和/或毛發(fā)的組合物。"染發(fā)劑"為染色毛發(fā)的組合物或制品(i)。就本發(fā)明的目的而言，將"染發(fā)劑"分成直接顏料和真正染發(fā)顏料(turehaircolors)。就直接顏料而言，一次或多次洗發(fā)足以再次除去顏料(色澤)。染料僅位于毛發(fā)物質(zhì)的表面上，無化學(xué)反應(yīng)發(fā)生。就毛發(fā)自身而言，該方法無風(fēng)險(xiǎn)。真正(永久)染發(fā)顏料使用氧化染色(參見"現(xiàn)有技術(shù)"部分)。染發(fā)劑包含在化妝品相容性介質(zhì)中的合適的助劑和添加劑，它們?yōu)楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員熟知并且可以在化妝品手冊中找到，例如，Schrader，GrundlagenundRezepturenderKosmetika[化妝品lo5出和配制]，HtithigVerlag，Heidelberg,1989,ISBN3畫7785陽1491-1或Umbach，Kosmetik:Entwicklung,HerstdlungundAnwendungkosmetischerMittel[Cosmetics:development,manufacture和useofcosmeticcompositions],第二版增訂本，1995，GeorgThiemeVerlag，ISBN3137126029。就本發(fā)明的目的而言，"效應(yīng)分子"表示具有一定可預(yù)見效應(yīng)的分子，優(yōu)選改變顏色和/或護(hù)理效應(yīng)或?qū)τ谄つw、毛發(fā)或指甲的美容修飾效應(yīng)。優(yōu)選效應(yīng)分子為例如表3、5和6所示的染料。就本發(fā)明的目的而言，"角蛋白"表示由索樣蛋白質(zhì)復(fù)合物構(gòu)成的中間絲。中間絲由許多同型(單體)蛋白質(zhì)構(gòu)成，其自身平行排列從而形成管狀結(jié)構(gòu)。中間絲結(jié)合在一起成相對大的束(張力原纖維)。中間絲與微管(micredubules)和肌動蛋白絲形成細(xì)胞的細(xì)胞骨架。在5類中間絲之間存在差別酸性角蛋白與堿性角蛋白、結(jié)蛋白、神經(jīng)絲和核纖層蛋白。就本發(fā)明目的而言特別優(yōu)選上皮(覆蓋多細(xì)胞動物生物體的全部外體表的單層或多層細(xì)胞)中出現(xiàn)的酸性和堿性角蛋白。"角蛋白"(還稱作角質(zhì)物質(zhì)、硬蛋白)表示負(fù)責(zé)細(xì)胞穩(wěn)定性和形狀的蛋白質(zhì)。所述蛋白質(zhì)為哺乳動物皮膚、毛發(fā)和指曱的成分。角蛋白的強(qiáng)度通過纖維形成而得以增加各氨基酸鏈形成右手a-螺旋，并且這些螺旋中每三個(gè)形成左手超螺旋(=原纖絲)。11條原纖絲組合形成微纖絲-它們又依次組合成束并形成例如圍繞在毛發(fā)細(xì)胞周圍的大纖絲。"角蛋白結(jié)合多肽"表示具有結(jié)合角蛋白特性的多肽或蛋白質(zhì)。因此角蛋白結(jié)合多肽也是中間絲締合的蛋白質(zhì)。這些角蛋白結(jié)合多肽對角蛋白或包括角蛋白如原纖絲、微纖絲或大纖絲的宏觀結(jié)構(gòu)具有結(jié)合親和力。此外，角蛋白結(jié)合多肽應(yīng)理解為那些對哺乳動物皮膚、毛發(fā)和/或指甲或趾甲具有結(jié)合親和力的多肽。"角蛋白結(jié)合多肽"還為哺乳動物生物體內(nèi)具有與角蛋白、角蛋白纖維、皮膚或毛發(fā)結(jié)合相關(guān)的生物功能的多肽。角蛋白結(jié)合多肽同樣表示實(shí)際結(jié)合角蛋白、角蛋白纖維、皮膚、指甲或趾曱所必需的結(jié)合基序或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域?？梢栽趯?shí)施例8、9和10所述條件下測試角蛋白結(jié)合多肽(ii)與角蛋白的結(jié)合。角蛋白結(jié)合多肽為這樣的多肽，它們在上述定量角蛋白結(jié)合測試中具有橋粒斑蛋白(SEQIDNo.:2)、優(yōu)選橋粒斑蛋白角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域B(SEQIDNo.:4)的角蛋白結(jié)合能力的約10%、20%、30%、40%或50%，優(yōu)選50%、60%、70%、80%或卯％，特別優(yōu)選100%、125%、150%，極為伊乙選200%、300%或400%，最優(yōu)選500%、600%、700%或1000%或1000%以上。就連接分子與效應(yīng)分子或角蛋白結(jié)合蛋白的結(jié)合而言的"偶聯(lián)"表示所述分子的共價(jià)連接。應(yīng)在廣義上理解"化妝品相容介質(zhì)"并且它表示適合于生產(chǎn)化妝品或皮膚美容制品及其混合物的物質(zhì)。它們優(yōu)選為蛋白質(zhì)相容介質(zhì)。"化妝品相容性物質(zhì)"在接觸人和/或動物皮膚組織或毛發(fā)時(shí)，不會造成刺激或損傷并且不會與其它物質(zhì)不相容。此外，這些物質(zhì)具有輕度過敏反應(yīng)的可能性并且由國家注冊機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)應(yīng)用于化妝制品。這些物質(zhì)為本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知，并且可以在例如化妝品手冊中找到，例如Schrader,GrundlagenundRezepturenderKosmetika[4匕妝品基石出和酉己制],HtithigVerlag，Heidelberg,1989,ISBN3-7785-1491-1。"核酸，，或"核酸分子"表示單鏈或雙鏈形式的、有義或反義取向的脫氧核糖核苷酸、核糖核苷酸或其聚合物或雜合體。術(shù)語核酸或核酸分子可以用于描述基因、DNA、cDNA、mRNA、寡核苷酸或多核苷酸。"核酸序列"表示上述指定定義的核酸分子的脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸的連續(xù)和彼此連接的序列，正如可以使用可利用的DNA/RNA測序技術(shù)確定或縮寫表中，在代表核苷酸的字母或字符所示的。就本發(fā)明的目的而言，"多肽"表示由氨基酸分子構(gòu)成的大分子，其中氨基酸通過肽鍵線性連接在一起。多肽可以由幾個(gè)氨基酸(約10-100個(gè))構(gòu)成，而且還包括蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)一般由至少100個(gè)氨基酸構(gòu)成，而且可以包含數(shù)千個(gè)氨基酸。優(yōu)選多肽包含至少20、30、40或50,特別優(yōu)選至少60、70、80或90，才及為特別優(yōu)選至少IOO、125、150、175或200，最優(yōu)選至少200個(gè)以上氨基酸，就上限而言可能為數(shù)千個(gè)氨基酸。應(yīng)將兩種核酸序列之間的"同源性"或"同一性，，理解為表示整個(gè)序列長度范圍內(nèi)核酸序列的同一性，它通過借助于程序算法GAP(威斯康星軟件包10.0版，威斯康星大學(xué)遺傳計(jì)算機(jī)組(UniversityofWisconsin,GeneticsComputerGroup,GCG)，Madison，USA;Altschul等(1997)NucleicAcidsRes.25:3389ff)以下列參數(shù)設(shè)置進(jìn)行比較計(jì)算空位加權(quán)50長度加權(quán)3平均匹配10平均錯(cuò)配0作為舉例，基于核酸與SEQIDNO:1的序列具有至少80%同源性的序列應(yīng)理解為表示按照上述程序算法以上述參數(shù)設(shè)置與序列SEQIDNO:1比較時(shí)具有至少80%同源性的序列。兩多肽之間的同源性應(yīng)理解為表示整個(gè)序列長度范圍內(nèi)氨基^列的同一性，它通過借助于程序算法GAP(威斯康星軟件包10.0版，威斯康星大學(xué)遺傳計(jì)算機(jī)組(GCG)，Madison,USA)以下列參數(shù)設(shè)置進(jìn)行比較計(jì)算空位加權(quán)8長度加權(quán)2平均匹配2.912平均錯(cuò)配-2.003作為舉例，基于多肽與SEQIDNO:2的序列具有至少80°/。同源性的序列應(yīng)理解為表示按照上述程序算法以上述參數(shù)設(shè)置與序列SEQIDNO:2比較時(shí)具有至少80%同源性的序列。"雜交條件”在廣義上應(yīng)理解，表示依賴于應(yīng)用的嚴(yán)格或較低嚴(yán)格雜交條件。這類雜交條件特別描述于SambrookJ，F(xiàn)ritschEF，ManiatisT等的《分子克隆實(shí)驗(yàn)室指南》(MolecularCloning(ALaboratoryManual)),第二版，ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989，9.31曙9.57)或CurrentPredocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons,N.Y.(1989)，6.3.1-6.3.6。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會選擇能夠區(qū)分特異性雜交與非特異性雜交的雜交條件。例如，洗滌步驟期間的條件可以選自低嚴(yán)格條件(50。C約2xSSC)和高嚴(yán)格條件(50。C約0,2xSSC，優(yōu)選65'C)(20xSSC:0.3M檸檬酸鈉，3MNaCl，pH7.0)。此外，洗滌步驟期間的溫度可以從低嚴(yán)格條件下的室溫約22。C升至較高嚴(yán)格條件下的約65。C。鹽濃度和溫度兩種參數(shù)可以同時(shí)改變，或者單獨(dú)改變，而使另一參數(shù)在每種情況中恒定不變。雜交期間還有可能使用變性劑，例如像甲酰胺或SDS。在50%曱酰胺的存在下，優(yōu)選在42。C進(jìn)行雜交。某些用于雜交和洗滌步驟的例示性條件如下所示1.雜交條件可以選自例如下列條件a)4xSSC，65°C，b)6xSSC，45°C，c)6xSSC,100ing/ml變性片段化的魚精DNA，68°C，d)6xSSC，0.5。/。SDS，100照/ml變性鮭精DNA，68°C,e)6xSSC，0.5%SDS，100照/ml變性片段化鮭精DNA，50%甲酰胺，42°C，f)50%曱酰胺，4xSSC，42°C，或g)50%(vol/vol)曱酰胺，0.1%牛血清白蛋白，0.1%Ficoll,0.1%聚乙烯吡咯烷酮，50mM磷酸鈉緩沖液pH6.5,750mMNaCl，75mM檸檬酸鈉，42°C;或h)2x或4xSSC，50°C(低嚴(yán)格條件)，i)30-40%甲酰胺，2x或4xSSC，42。C(低嚴(yán)格條件)。500mN磷酸鈉緩沖液pH7.2，7%SDS(g/V),lmMEDTA，10照/ml單鏈DNA,0.5%BSA(g/V)(Church和Gilbert,Genomicsequencing.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81:1991.1984)。2.洗滌步驟可以選自例如下列條件a)0.015MNaCI/0.0015M檸檬酸鈉/0.1。/oSDS,50"C。b)0.1xSSC,65。C。c)O.lxSSC，0.5%SDS，68。C。d)O.lxSSC,0.5。/。SDS，50%甲酰胺，42°C。e)0.2xSSC，0.1%SDS，42。C。f)2xSSC，65'C(低嚴(yán)格條件)。在一個(gè)實(shí)施方案中，嚴(yán)格雜交條件如下選擇選擇包含甲酰胺、NaCl和PEG6000的雜交緩沖液。在雜交緩沖液中存在曱酰胺使雙鏈核酸分子不穩(wěn)定，其結(jié)果是可以使雜交溫度降至42'C而不會降低嚴(yán)格性條件。鹽在雜交緩沖液中的應(yīng)用增加雙鏈體的復(fù)性率或雜交效率。盡管PEG增加溶液的粘度，這對復(fù)性率具有負(fù)面效應(yīng)，但是作為溶液中此聚合物存在的結(jié)果，所得介質(zhì)中的探針濃度增加，這就提高了雜交率。緩沖液的組成如下表l:雜交緩沖液_雜交緩沖液_250mM磷酸鈉緩沖液pH7.21mMEDTA7%SDS(g/v)250mMNaCl10ing/mlssDNA5。/。聚乙二醇(PEG)600040%曱酰胺42。C進(jìn)行雜交過夜。使用2xSSC+0.1。/。SDS將濾膜在第二天早晨洗滌3次，每次約10分鐘。與表述"帶羥基官能團(tuán)的效應(yīng)分子"相關(guān)的"羥基官能團(tuán)"表示游離OH基團(tuán)或能夠使這些帶OH基團(tuán)的分子通過酯化反應(yīng)與其它分子共價(jià)連接的羥基。就本發(fā)明的目的而言，"羥基官能團(tuán)，，還為那些能夠以化學(xué)方式轉(zhuǎn)化成OH官能團(tuán)的基團(tuán)(例如，衍生物如甲氧基、乙氧基)。文中本發(fā)明的效應(yīng)分子具有至少一個(gè)羥基。然而，還有可能使用帶有兩個(gè)、三個(gè)或三個(gè)以上羥基的效應(yīng)分子。"偶聯(lián)官能團(tuán)"為可以進(jìn)入與效應(yīng)分子或角蛋白結(jié)合蛋白的官能團(tuán)的共價(jià)鍵的連接分子的官能團(tuán)?？商峒暗姆窍拗菩詫?shí)例為羥基、羧基、硫代基團(tuán)和氨基。"偶聯(lián)官能團(tuán)"和"固著點(diǎn)基團(tuán)"可作為同義詞使用。就本發(fā)明的目的而言，"活性染料，，表示包含至少一個(gè)可以通過共價(jià)鍵與角蛋白結(jié)合多肽偶聯(lián)的活性固著點(diǎn)的染料。就本發(fā)明的目的而言，"活性固著點(diǎn)"表示化學(xué)官能團(tuán)或基團(tuán)，通過它們活性染料分子的碳原子與磷原子與另一分子的羥基、氨基或巰基的氧、氮或硫原子之間形成共價(jià)鍵。"能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)Q"應(yīng)理解為在堿性條件下，即在pH為7或7以上，優(yōu)選7.5或7.5以上裂解的基團(tuán)，伴有乙烯基砜基團(tuán)的消除和形成。這類基團(tuán)的實(shí)例為鹵素，例如氯、溴或碘；還有-0-S03H、-S-S03H;二烷基氨基；季銨基團(tuán)，如三-d-CV烷基銨、芐基二-CrCV烷基銨或N-鍵合的吡啶；以及式R3S(0)2-、R4S(0)2-0-、R5c(0)-0-的基團(tuán)。此處的R3、!^和R5彼此獨(dú)立地為烷基、卣代烷基或任選取代的苯基，其中RS還可以為氫。優(yōu)選Q為基團(tuán)-0-(CO)CH3，特別是-0-S03H。就本發(fā)明的目的而言，"可逆染色，，表示使用可以反向進(jìn)行的本發(fā)明方法實(shí)現(xiàn)的皮膚角蛋白、毛發(fā)角蛋白或指曱角蛋白顏色的改變。就本發(fā)明的目的而言，"反向翻譯"表示將蛋白質(zhì)序列翻譯成編碼該蛋白質(zhì)的核酸序列。反向翻譯由此為將氨基酸解碼為與之相應(yīng)的核酸序列的過程。常用的方法基于各類由計(jì)算機(jī)輔助的序列對比生成的密碼子使用表。使用密碼子使用表有可能確定最常用于某些具體類型氨基酸的密碼子?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知且特別為該目的生成的計(jì)算機(jī)算法進(jìn)行蛋白質(zhì)反向翻譯(Andr6sMoreira和AlejandroMaass.TIP:Porteinbacktranslationaidedbygeneticalgorithms.Bioinformatics,20巻，13期,2148-2149頁(2004);GPesole，MAttimonelli和SLiuni.Abacktranslationmethodbasedoncodonusagestrategy.NucleicAcidsRes.1988年3月11日；16(5PtA):1715—1728)。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了包含(a)至少一種活性染料(i)和(b)至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii)的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，具體的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含至少一種對人皮膚角蛋白、毛發(fā)角蛋白或指曱角蛋白具有結(jié)合親和力的角蛋白結(jié)合多肽(ii)。例如，在橋粒斑蛋白、斑菲素蛋白(plakophilin)、橋粒斑珠蛋白(plakoglobin)、網(wǎng)蛋白(plectin)、周斑蛋白(periplakin)、包斑蛋白(envoplakin)、毛透明蛋白(trichohyalin)、表斑蛋白(epiplakin)或毛嚢蛋白質(zhì)的多肽序列中存在適合于本發(fā)明的角蛋白結(jié)合多肽。優(yōu)選(b)中定義的角蛋白結(jié)合多肽(ii)包含(a)至少一種具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列之一的多肽；或(b)與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%同一性并且能夠結(jié)合角蛋白的多肽。優(yōu)選具體的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含至少一種由核酸分子編碼的角蛋白結(jié)合多肽(ii)，所述核酸分子包含至少一種選自如下的核酸分子(a)編碼多肽的核酸分子，所述多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列；(b)包含至少一種SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示序列多核苷酸的核酸分子；(c)編碼SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列多肽的核酸分子；(d)具有這樣的核酸序列的核酸分子，所述核酸序列對應(yīng)于至少一種SE(JIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列；或?yàn)橥ㄟ^取代、缺失或插入從中4汙生的核酸分子，其編碼的多肽與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能夠結(jié)合角蛋白；(e)編碼單克隆抗體識別的多肽的核酸分子，所述單克隆抗體抗如(a)至(c)中所示核酸分子編碼的多肽；(f)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，所述核酸分子在嚴(yán)格條件下與如(a)至(c)中所示的核酸分子雜交；(g)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，在嚴(yán)格雜交條件下，利用如(a)至(c)中所示的核酸分子或其包含至少15nt、優(yōu)選20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt的部分片段作為探針，能夠從DNA庫中分離所述核酸分子；和(h)能夠通過序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻譯產(chǎn)生的核酸分子。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含作為角蛋白結(jié)合多肽的SEQIDNo.:2、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164或166所示序列的橋粒斑蛋白或其部分片段；和/或SEQIDNo.:18、20、26、28、32、34、36、168、170所示序列的斑菲素蛋白或其部分序列；和/或SEQIDNo.:50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70所示序列的橋粒斑珠蛋白或其部分序列；和/或SEQIDNo.:86所示序列的周斑蛋白;和/或SEQIDNo.:卯、92、94、96、98、102、104、105所示序列的包斑蛋白或其部分序列；和/或SEQIDNo.:138和140的序列。優(yōu)選的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域?yàn)樾蛄蠸EQIDNOs:4、6、8、10、12、14、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的橋粒斑蛋白多肽及其功能等同物。在本發(fā)明極為優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法使用序列SEQIDNo.:156、157、158、160、162、164、168和/或170所示的角蛋白結(jié)合多肽。在本發(fā)明最為優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用序列SEQIDNo.:168所示的角蛋白結(jié)合蛋白。毋庸多言，該蛋白質(zhì)可以與SEQIDNo.:168中存在的組氨酸固著點(diǎn)一起使用或不與之一起使用。因此，組氨酸固著點(diǎn)(或類似使用的純化/檢測系統(tǒng))也可以存在于C-末端。在所述角蛋白結(jié)合蛋白的實(shí)際應(yīng)用中(例如在化妝品中)，組氨酸固著點(diǎn)(或類似使用的純化/檢測系統(tǒng))不是必要的。由此優(yōu)選使用所述不含額外氨基酸序列的蛋白質(zhì)。本發(fā)明同樣包括具體披露的角蛋白結(jié)合多肽(ii)的"功能等同物"及其在本發(fā)明方法中的應(yīng)用。就本發(fā)明的目的而言，具體披露的角蛋白結(jié)合多肽(ii)的"功能等同物"或類似物為與之不同的多肽，它們也具有期望的生物活性，例如角蛋白結(jié)合。因此，例如，角蛋白結(jié)合多肽的"功能等同物"應(yīng)理解為表示這樣的多肽，在其他相當(dāng)條件下，在實(shí)施例所述的定量角蛋白結(jié)合測試中，它們具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170，優(yōu)選SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170，特別優(yōu)選166和168,最優(yōu)選168所示多肽角蛋白的結(jié)合能力的約10%、20%、30%、40%或50%，優(yōu)選50%、60%、70%、80%或90%，特別優(yōu)選100。/。、125%、150%，極為優(yōu)選200%、300%或400%，最優(yōu)選500%、600%、700%或1000%或1000%以上。本發(fā)明的"功能等同物"尤其應(yīng)理解為還表示突變蛋白質(zhì)，它們在上述氨基酸序列的至少一個(gè)序列位置上具有不同于具體所示的氨基酸，但是盡管如此，它們?nèi)匀痪哂猩鲜錾锘钚灾弧?功能等同物"由此包括可通過突變獲得的突變蛋白質(zhì)，其中定義的改變可以在任何序列位置上產(chǎn)生，只要它們產(chǎn)生具有本發(fā)明特性譜的突變蛋白質(zhì)即可。就本發(fā)明的目的而言，"突變"表示質(zhì)?；蛏矬w基因組中基因變體核酸序列的改變。例如，突變可以作為復(fù)制過程中錯(cuò)誤的結(jié)果產(chǎn)生或由誘變劑所致。雖然本領(lǐng)域技術(shù)人員已知大量生物、化學(xué)或物理誘變劑，但是生物體細(xì)胞基因組中的自發(fā)突變率極低。突變包括一個(gè)或多個(gè)核酸基團(tuán)的取代、插入、缺失。取代應(yīng)理解為表示獨(dú)立核酸堿基的替換，此處需要區(qū)分轉(zhuǎn)換(用嘌呤堿基取代嘌呤堿基或用嘧咬堿基取代嘧咬堿基)和顛換(用噤呤堿基取代嘧咬堿基(或反之亦然))。添加或插入應(yīng)理解為表示將額外的核酸基團(tuán)摻入DNA，這可能導(dǎo)致讀框移碼。由于這類讀框移碼，需要區(qū)分"同讀框"插入/添加與"異讀框"插入。就"同讀框"插入/添加而言，讀框得以保留，從而產(chǎn)生的多肽由于插入核酸編碼的氨基酸數(shù)目而擴(kuò)大。就"異讀框"插入/添加而言，原始讀框喪失，并且不再可能形成完整的功能性多肽。缺失用以描述一個(gè)或多個(gè)堿基對的喪失，同樣導(dǎo)致讀框的"同讀框"或"異讀框"移碼，以及與之相關(guān)的是否形成完整蛋白的結(jié)果。技術(shù)人員公知。例如，這類方法和謙變劑描述于A.M.vanHarten[(1998)，"Mutationbreeding:theoryandpracticalapplications",CambridgeUniversityPress,Cambridge,UK,EFriedberg,GWalker,WSiede或K.Sankaranarayanan，J.M.Gentile,LR.Ferguson[(2000)"PredocolsinMutagenesis"，ElsevierHealthSciences]。為了引入靶向突變，例如，可以使用常用的分子生物學(xué)方法和過程，諸如體外MutagenEse試劑盒、LAPCR體外誘變試劑盒(日本京都寶酒造林式會社(TakaraShuzo，Kyoto))或來自Stratagene的QuikChange⑧試劑盒或使用合適引物的PCR誘變。如上所述，存在大量化學(xué)/物理和生物誘變劑。下列誘變劑作為實(shí)例給出，但不限于此。可以按照化學(xué)誘變劑的作用機(jī)理對其進(jìn)行細(xì)分。因此，存在堿基類似物(例如5-溴尿嘧啶，2-氨基嘌呤)，單-和雙官能烷化劑(例如單官能烷化劑如曱基磺酸酯乙酯、硫酸二甲酯；或雙官能團(tuán)烷化劑如亞硫酸二氯乙酯、絲裂霉素、亞硝基胍類-二烷基亞硝胺、N-亞硝基胍衍生物)或嵌入物質(zhì)(例如吖啶、溴乙錠)。因此，例如，在本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子中，還有可能存在那些作為本發(fā)明多肽例如SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168和/或170所示多肽突變的結(jié)果而獲得的多肽。合適的M酸取代的實(shí)例如下表所示表4:合適的M酸取代原始基團(tuán)取代實(shí)例AlaSerArgLys<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>已知在SEQIDNO:2中，例如，2849位天然存在的絲氨酸可以,皮甘氨酸取代以避免該位置上的磷酸化(FontaoL,FavreB，RiouS，GeertsD，JauninF,SauratJH，GreenKJ，SoimenbergA，BoiradoriL.，Interactionofthebullouspemphigoidantigen1(BP230)anddesmoplakinwithintermediatefilamentsismediatedbydistinctsequcencewithintheirCOOHterminus.，MolBiolCell.2003年5月；14(5):1978-92.電子出版2003年1月26日)。在上述含義中，"功能等同物"也為所述多肽的"前體"和這些多肽的"功能衍生物"和"鹽"。在本文中"前體，，為具有或不具有期望生物活性的多肽的天然或合成前體。表達(dá)"鹽"應(yīng)理解為表示本發(fā)明蛋白質(zhì)分子的羧基鹽或氨基酸加成鹽。羧基鹽可以按照本身公知的方式制備并且包括無機(jī)鹽，例如鈉、鈣鹽、銨鹽、鐵鹽和鋅鹽；還有與有機(jī)堿成的鹽，例如胺如三乙胺、精氨酸、賴氨酸、哌啶等。本發(fā)明同樣提供了酸加成鹽，例如與無機(jī)酸如鹽酸或硫酸成的鹽；以及與有才幾酸如乙酸和草酸成的鹽。"功能等同物"自然也包括可從其它生物體中獲得的多肽和天然存在的變體(等位基因)。例如，通過序列比較，可確定同源序列區(qū)或保守區(qū)的區(qū)域。使用這些序列，可以使用生物信息學(xué)比較程序檢查DNA數(shù)據(jù)庫(例如基因組或cDNA數(shù)據(jù)庫)中的等同酶。公眾可利用的合適的計(jì)算機(jī)程序和數(shù)據(jù)庫為本領(lǐng)域技術(shù)人員充分了解。例如，可以使用計(jì)算機(jī)程序，諸如來自英孚美有P艮公司(InforMaxInc.)此外，"功能等同物"為這樣的融合蛋白，其具有上述多肽序列之一或由其衍生的功能等同物，并且具有至少一種功能與之不同的、呈N-或C-末端功能性連接的(即融合蛋白各部分不會相互造成實(shí)質(zhì)性的功能削弱)其他異源序列。這類異源序列的非限制性實(shí)例為，例如信號肽或酶。本發(fā)明包括的"功能等同物"為具體披露蛋白質(zhì)的同源物。它們與具體披露的氨基酸序列之一具有至少40%、45%或50%，優(yōu)選至少55%、60%、65%或70%，特別優(yōu)選至少75%、80%、85%、卯％、91%、92%、93%或94%，才及其優(yōu)選至少95%或96%的同源性，所述同源性4吏用定義部分拔^露的計(jì)算機(jī)程序和計(jì)算機(jī)算法計(jì)算。就可能的蛋白質(zhì)糖基化而言，本發(fā)明的"功能等同物"包括去糖基化或糖基化形式的上述蛋白質(zhì)類型，并且還包括可通過改變糖基化模式獲得的修飾形式。就可能的蛋白質(zhì)磷酸化而言，本發(fā)明的"功能等同物，，包括去磷酸化和磷酸化形式的上述蛋白質(zhì)類型，并且還包括可通過改變磷酸化模式獲得的修飾形式?？梢酝ㄟ^篩選突變體例如截短突變體的組合庫鑒定本發(fā)明多肽的同源物。例如，可以通過在核酸水平上的組合誘變，例如通過酶連接合成寡核苷酸的混合物產(chǎn)生蛋白質(zhì)變體庫。存在大量可以用于由簡并寡核苷酸序列產(chǎn)生可能的同源物庫的方法?？梢栽谧詣踊疍NA合成儀器中進(jìn)行簡并基因序列的化學(xué)合成，然后可以將合成的基因連入合適的表達(dá)載體。簡并基因集合的應(yīng)用使得能夠在一種混合物中提供所有編碼期望的可能蛋白質(zhì)序列集合的序列。用于合成簡并寡核苷酸的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知(例如Narang，S.A.(1983)Tetrahedron39:3;Itakura等(1984)Annu.Rev.Biochem.53:323;Itakura等(1984)Science198:1056;Ike等(1983)NucleicAcidsRes.11:477)。在現(xiàn)有技術(shù)中，已知用于篩選通過點(diǎn)突變或截短產(chǎn)生的組合庫基因產(chǎn)物和用于篩選具有選擇的特性的基因產(chǎn)物cDNA庫的大量技術(shù)。用于篩選欲進(jìn)行高通量分析的大基因庫的最常用的技術(shù)包括在可復(fù)制的表達(dá)載體中克隆基因庫，用所得載體庫轉(zhuǎn)化合適的細(xì)胞，并在檢測期望活性、利于分離載體的條件下表達(dá)組合基因，所述載體編碼其產(chǎn)物經(jīng)檢測的基因。遞歸整體誘變(recursiveensemblemutagenesis,REM),—種增力p庫中功能性突變體頻率的寺支術(shù)，可以與篩選測試組合使用以鑒定同源物(Arkin和Yourvan(1992)PNAS89:7811-7815;Delgrave等(1993)ProteinEngineering6(3):327陽331)。使用SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167和/或169，特別優(yōu)選165和167，最優(yōu)選167所示的核酸序列或其部分作為探針檢查其它生物體物理上可得的cDNA或基因組DNA文庫，為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的以其它方式鑒定同源物的方法。在本文中，^t生自SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169，特別優(yōu)選165和167，最優(yōu)選167所示核酸序列的探針長度為至少20bp,優(yōu)選至少50bp，特別優(yōu)選至少100bp，極為優(yōu)選至少200bp，最優(yōu)選至少400bp。探針長度還可以為l或l以上的千堿基對，例如lKb，1.5Kb或3Kb。為了檢查文庫，還有可能使用序列SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169，特別優(yōu)選165和167，最優(yōu)選167所示序列的互補(bǔ)DNA鏈序列之一或其20bp至幾千堿基長度的片段。使用的雜交條件如上所述。在本發(fā)明的方法中，還有可能使用這樣的DNA分子，在標(biāo)準(zhǔn)條件下，它們與SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169,特別優(yōu)選165和167，最優(yōu)選167所示的核酸分子雜交且編碼角蛋白結(jié)合多肽；它們與上述這些互補(bǔ)核酸分子或部分雜交并且作為完整序列編碼的多肽與SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所述的多肽具有相同特性。在本發(fā)明特別有利的實(shí)施方案中，角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含這樣的多肽作為角蛋白結(jié)合多肽(ii):所述多肽包含至少一種SEQIDNo.No.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的多肽序列，條件是所述多肽的角蛋白結(jié)合值按照實(shí)施例9或10的測試為SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示相應(yīng)多肽序列的至少10%、20%、30%、40%或50%，優(yōu)選60%、70%、80%或卯％,特別優(yōu)選100%。優(yōu)選使用的角蛋白結(jié)合多肽(ii)對期望生物體具有高特異性親和力。因此，為了在人染發(fā)中應(yīng)用，優(yōu)選使用那些對人毛發(fā)角蛋白具有特別高的親和力的角蛋白結(jié)合多肽(ii)。然而，還能夠使用一種以上與本發(fā)明的效應(yīng)分子(i)偶聯(lián)的角蛋白結(jié)合多肽(ii)，例如可以將對人皮膚角蛋白具有高結(jié)合親和力的角蛋白結(jié)合多肽(ii)與對人毛發(fā)角蛋白具有高親和力的其他角蛋白結(jié)合多肽(ii)組合，進(jìn)而與效應(yīng)分子組合。還有可能使用嵌合多肽，它們包含相同(也可以是不同)角蛋白結(jié)合多肽(ii)或其角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的兩個(gè)或多個(gè)拷貝。例如，由此能夠獲得特別有效的角蛋白結(jié)合。合適的角蛋白結(jié)合多肽(ii)是公知的。例如，包含角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的橋粒^蛋白和網(wǎng)蛋白(FontaoL，F(xiàn)avreB，RiouS，GeertsD，JauninF，SauratJH,GreenKJ，SonnenbergA，BorradoriL，Interactionofthebullouspemphigoidantigen1(BP230)anddesmoplakinwithintermediatefilamentsismediatedbydistinctsequencewithintheirCOOHterminus.，MolBiolCell.2003年5月；14(5):1978-92:2003年1月26日電子出版;HopkinsonSB，JonesJC.，TheN-terminusofthetransmembraneproteinBP180interactswiththeN-terminaldomainofBP230,therebymediatingkeratincytoskeletonanchoragetothecellsurfaceatthesiteofthehemidesmosome，MolBiolCell.2000年1月；ll(l):277-86)。優(yōu)選本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子用于發(fā)用化妝品，優(yōu)選染發(fā)。它們允許使用高濃度或長作用時(shí)間的護(hù)理性、保護(hù)性或變色性效應(yīng)分子。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用對人皮膚角蛋白、毛發(fā)角蛋白或指曱角蛋白具有結(jié)合親和力的角蛋白結(jié)合多肽。在本發(fā)明另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，具體的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含至少一種活性染料(i),其具有選自如下的至少一個(gè)活性固著點(diǎn)(a)在堿性條件下可活化的式l的基團(tuán)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>(X)式l其中…-表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵，X為吸電子基團(tuán)或?yàn)橥榛?O-烷基、氰基、羥基、卣素基團(tuán)或H，k為l、2或3，n為0或l，且B為基團(tuán)-CH=CH2或基團(tuán)-CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CENCH2，其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)；和(b)式2的丙烯酰氨基固著點(diǎn)，Br式20其中…束示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵；和(c)式3、4或5的化合物之一，式3式4式5其中…-表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵，V為氟或氯；U，、U2彼此獨(dú)立為氟、氯或氫；且Q!、Q2彼此獨(dú)立為氯、氟、氰氨基、羥基、(C廣C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巰基、(d-CO-烷基巰基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基甲酰基p比咬并或通式6或7的基團(tuán)，式6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>式7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>其中I^為氫或(d-C6)-烷基、磺基-(d-C6)-烷基，或者未被取代或?qū)て?d-C4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、磺基、卣素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基；113和114彼此獨(dú)立地具有112的含義之一，或?yàn)橥ㄊ?的基團(tuán)，式8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>或形成式-(CH2)r的環(huán)系，其中j為4或5;或可選地》-(CH2)2-E-(CH2)2-，其中E為氧、硫、磺基、-NRs-，其中R^(C廣C6)畫烷基；W為亞苯基，其未被取代或被l或2個(gè)諸如(d-C4)-烷基、(CVQ)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代；或?yàn)?d-C4)-亞烷基-亞芳基或(C2-C6)-亞烷基，其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羰氨基中斷；或?yàn)閬啽交?CONH-亞苯基，其未被取代或被(C廣C4)-烷基、(d-CO-烷氧基、羥基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或卣素取代；或?yàn)閬嗇粱湮幢蝗〈虮灰粋€(gè)或兩個(gè)磺基取代；且Z為基團(tuán)CH=CH2或基團(tuán)CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH=CH2,其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)；R24、R25和R26為(d-C4)-烷基或(d-C0-羥基烷基；B-為陰離子的等效物，如硫酸氫鹽、硫酸鹽、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氫鹽、磷酸氫鹽、磷酸鹽、氫氧化物或乙酸鹽。因此，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含至少一種活性染料(i)作為效應(yīng)分子的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述活性染料(i)具有至少一種在堿性條件下可活化的式l的基團(tuán)，(X)式l其中-…為與染料分子(D)連接的價(jià)鍵；X為吸電子基團(tuán)，k為l、2或3，n為0或l，且B為基團(tuán)CH=CH2或基團(tuán)CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH=CH2,其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)。在上下文中，表述烷基通常為具有l(wèi)-6個(gè)、優(yōu)選l-4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基(d-C6-或C廣Cr烷基)，如甲基、乙基、丙基、異丙基等。卣代烷基為如上所述的烷基，其中氫原子部分或全部被卣原子、特別是氟原子取代，如三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基等。烷氧基為如上所述通過氧原子鍵合的烷基。任選取代的苯基表示苯基可以具有一個(gè)或多個(gè)，例如l、2、3或4個(gè)取代基，它們選自例如囟素、烷基、烷氧基、硝基、氰基、COOH、S03H等。鹵素特別為氟、氯或溴。吸電子基團(tuán)X為對與之鍵合的芳族基團(tuán)發(fā)揮-M和/或-I作用的那些基團(tuán)。這些基團(tuán)包括例如氟或氯，CN，N02以及式-C(0)-Ri和S(0)2I^的基團(tuán)，其中Ri和I^彼此獨(dú)立地為OH、烷基、卣代烷基、烷氧基或任選取代的苯基。如果式l具有多個(gè)基團(tuán)(k〉1),那么基團(tuán)X可以相同或不同。優(yōu)選至少一種X基團(tuán)為羥基磺?；?S03H)。變量k優(yōu)選為l或2，即式l具有l(wèi)個(gè)或2個(gè)吸電子基團(tuán)X。優(yōu)選式l中的"n"為O,即式l衍生自苯。如果"n"為l,那么式l衍生自萘。在這些情況下，基團(tuán)S02-B可以位于與基團(tuán)X相同的苯環(huán)上。此外，本發(fā)明涉及包含活性染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述的活性染料包含式1的活性固著點(diǎn)并且其中式1中的B為CH=CH2，基團(tuán)CH2-CH2-OS03I^CH2-CH2-a。本發(fā)明優(yōu)選這樣的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中能夠在堿性條件下活化的式l的基團(tuán)通過基團(tuán)-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-SOr或一N(R)-與染料分子鍵合，其中R為烷基(如上文定義)。有利的是，本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子具有l(wèi)、2或3種，優(yōu)選1或2種上述活性染料。能夠在堿性條件下活化的式l的基團(tuán)可以(但不必需)為染料發(fā)色團(tuán)的成分。活性染料通常每個(gè)染料分子帶有一個(gè)或多個(gè)，例如1-10個(gè)，特別是2-8個(gè)賦予染料水溶性的官能團(tuán)。它們一般為陰離子或酸性官能團(tuán)，它們在弱酸性或堿性pH，一般在pH高于4的含水性介質(zhì)中離解成陰離子基團(tuán)。這類基團(tuán)的實(shí)例為羥基磺?；?-S03H)、羧基(COOH)和羥基磺酰氧基(-0-S03H)和這些基團(tuán)的陰離子。這些陰離子/酸性基團(tuán)可以與式l的基團(tuán)和/或染料分子的其它部分鍵合。如果這些基團(tuán)作為陰離子基團(tuán)存在于染料中，那么理所當(dāng)然地染料還包含中和所需的反離子。合適的反離子特別為堿金屬離子，特別是鈉、鉀和鋰離子以及銨離子，例如來源于單-、二-或三乙醇胺的銨離子。本發(fā)明特別優(yōu)選的主題為包含染料("D")的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述染料選自酞菁系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲膪染料、二唾、嗪染料、吖啶染料、卩占噸染料、聚甲炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基甲烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮染料以及這些染料的金屬絡(luò)合物。已知這類染料D部分地來自現(xiàn)有技術(shù)并且可以在例如專利申請WO94/18381、EP畫A356931、EP-A559617、EP曙A201868、DE國A19523245、DE畫A19731166、EP745640、EP-A889098、EP-A1097971、EP國A880098中找到，或類似地按照公知制備結(jié)構(gòu)類似染料的方法制備，例如文獻(xiàn)EP602562、EP-A597411、EP-A592105或DE4319674。為了制備包含式l的活性固著點(diǎn)的活性染料，一般使式lb的氨基化合物與具有親核可置換基團(tuán)的染料前體按照本身公知的方式反應(yīng)。親核可置換基團(tuán)的實(shí)例為鹵素，特別是氯或溴，其與芳族化合物(如鹵代三嗪基團(tuán))鍵合，或?yàn)殚|4戈磺?；蜇洞驶男问健Ｆ渲苽浞椒ㄒ阎獊碜员疚囊龅默F(xiàn)有技術(shù)并且可以類似地用于制備染料D。可選地，還可以首先使氨基化合物lb重氮化，然后與相應(yīng)的染料前體偶聯(lián)。在氨基化合物lb或其重氮鹽與染料前體反應(yīng)中獲得的反應(yīng)產(chǎn)物可以已經(jīng)為染料D或部分代表染料D的前體，其進(jìn)一步按照與公知方法類似的方式加工成染料D。式lb式lb所示的基團(tuán)對應(yīng)于式l中給出的定義。應(yīng)考慮到作為制備結(jié)果，染料可以包含無機(jī)鹽和增充劑。這類成分在下文還稱作非染色成分，含量一般不會超過60%重量，且通常占染料中染色和非染色成分重量的10%-50%。染料(D)的發(fā)色團(tuán)系統(tǒng)可以具有不同的結(jié)構(gòu)，無論它們是否為活性染料還是非活性染料。如下所示的發(fā)色團(tuán)(1至7)在每種情況中均為代表某些結(jié)構(gòu)類型的化合物。不應(yīng)將此列表理解為限制性的。本領(lǐng)域技術(shù)人員當(dāng)然理解原則上屬于這些類型物質(zhì)的所有染料能夠作為活性染料與角蛋白結(jié)合多肽直接鍵合或通過連接分子鍵合。染料可以為不含金屬的染料，而且可以為金屬絡(luò)合物，優(yōu)選過渡金屬絡(luò)合物，特別是元素周期表中VI-X族過渡金屬，特別是其中的Cu、Cr、Fe、M、Co和Mn。在這些金屬絡(luò)合物中過渡金屬與染料分子的摩爾比通常在2:1至1:2的范圍。通常，這些染料中金屬離子的絡(luò)合通過脫質(zhì)子化(depredonated)羥基、通過氨基、亞氨基、摻入芳族;r-電子系統(tǒng)的氮原子或通過偶氮基團(tuán)進(jìn)行。1.偶氮染料單-、雙-、三-、四-和聚偶氮染料取決于染料包含多少個(gè)偶氮橋(-N-N-)。與la、lb和lc中活性固著點(diǎn)的價(jià)鍵當(dāng)然也為偶氮橋。a)單偶氮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>b)雙偶氮ii3.三苯基二喻秦(Triphendioxazine)染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>4.酞菁染舉-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>5.苯并吡喃染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>6.二苯并蒽酮染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>7.曱月f染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>本發(fā)明還優(yōu)選包含活性染料(i)的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述活性染料包含選自下列基團(tuán)(l-l)至(l-43)的活性固著點(diǎn)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>特別優(yōu)選的活性染料包含至少一種式l的活性固著點(diǎn)，其中該基團(tuán)具有至少一種式(1-1)至(1-12)和(1-16)、(1-17)，優(yōu)選(l畫l)、(1-3)、(l國4)、(1-6)、(1-7)、(1-9)、(1-10)、(1-12)、(1-16)、(1-17)，更優(yōu)選(l畫l)、(l畫4)、(1-7)、(1-10)、(l-17)所示的基團(tuán)。在染料(D)與角蛋白結(jié)合多肽的反應(yīng)中，應(yīng)維持實(shí)際生理?xiàng)l件，否則多肽或蛋白質(zhì)解折疊，導(dǎo)致沉淀。這實(shí)質(zhì)上意味著不能使用純有機(jī)溶劑，并且應(yīng)選擇接近中性的pH。此外，重要的是偶聯(lián)的反應(yīng)溫度不超過45。C。因此，在理論上能夠使用可以在溫和條件下與角蛋白結(jié)合多肽的SH基團(tuán)反應(yīng)的所有活性染料。溫和條件應(yīng)理解為表示角蛋白結(jié)合多肽保持或不會不可逆地失去其物理和化學(xué)特性的溫度、pH和濃度范圍。合適的活性染料包含至少一種活性固著點(diǎn)，而且還可以包含兩種或多種活性固著點(diǎn)，其中它們可以對應(yīng)于不同類型的活性固著點(diǎn)。通常將包含乙烯基砜固著點(diǎn)(參見式l)的染料制備成硫酸酯化合物。硫酸酯化合物的活化(消除反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為活性乙烯基砜形式)在織物和皮革應(yīng)用的染色過程原位進(jìn)行，即在用前染料無需經(jīng)預(yù)消除反應(yīng)轉(zhuǎn)化為乙烯基砜。如果適用，也可以將染料分離為乙烯基砜并且僅在隨后與底物反應(yīng)。KBD)這一事實(shí)的結(jié)果，選擇接近中性的pH并且與染料偶聯(lián)的反應(yīng)溫度不應(yīng)超過45。C，染料必須經(jīng)預(yù)消除反應(yīng)轉(zhuǎn)化為活性乙烯基砜形式，之后才能與例如KBD偶聯(lián)。例如，與KBD的反應(yīng)可以在相同液體中經(jīng)消除反應(yīng)后直接進(jìn)行(不分離乙烯基砜形式的染料)，或者也可以分離染料。為了進(jìn)行活化，需要pH范圍5-14，特別是7-12,且溫度范圍0-8(TC，特別是15-50。C,優(yōu)選25-45'C。在活化后，確立pH5-9，特別是7-8的pH范圍以及20-50。C,特別是25-45。C的溫度范圍，其中染料快速(通常在幾分鐘內(nèi))與底物(在本案中與角蛋白結(jié)合多肽/KBD)反應(yīng)。硫酸酯轉(zhuǎn)化成乙烯砜的活化(消除反應(yīng))按照圖1中所示的方案進(jìn)行。在活化(消除反應(yīng))后，發(fā)生圖2中所示的反應(yīng)。具有丙烯氨基固著點(diǎn)(式2)的染料可以在不經(jīng)預(yù)消除反應(yīng)(活化)的情況下與例如KBD直接反應(yīng)。反應(yīng)條件對應(yīng)于活化乙烯基砜固著點(diǎn)選擇的條件。在此情況中，加成和取代均可以發(fā)生(J.Soc.DyersandColourist，1982，98，165畫175)(參見圖3)。染料與雜芳族固著點(diǎn)(式3、4、5)可以直接在不經(jīng)預(yù)消除反應(yīng)(活化)的情況下與例如KBD反應(yīng)(圖4)。反應(yīng)條件對應(yīng)于活化乙烯基砜固著點(diǎn)選擇的條件。本文使用的活性染料可以包含0-20%重量，通常0-10%重量，通常0-5%重量的非活性次要組分。不具有活性固著點(diǎn)的次要組分自然不與角蛋白結(jié)合多肽反應(yīng)?？梢栽诤铣苫蛉旧^程中將它們除去。一種選擇是對毛發(fā)施用與活性染料反應(yīng)的角蛋白結(jié)合多肽，并從毛發(fā)中洗掉未結(jié)合的染料級分。此外，例如，存在通過柱層析純化與活性染料反應(yīng)的角蛋白結(jié)合多肽的選擇。還有可能使角蛋白結(jié)合多肽與活性染料在"柱式反應(yīng)器"類型中進(jìn)行反應(yīng)。此處可以將角蛋白結(jié)合多肽偶聯(lián)至鎳親和柱，使染料與角蛋白結(jié)合多肽鍵合，然后直接洗掉與未固定的染料基團(tuán)。然后從柱上洗脫角蛋白結(jié)合多肽染料(角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子)。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含適合于化妝品目的并且照此批準(zhǔn)的染料。例如，在來自FarbstoffkommissionderDeutschenForschungsgemeinschaft德國研究學(xué)會染料委員會I的"KosmetischeFarbemittel"[化妝品染色劑,VerlagChemie，Weinheim出版，1984或自1991年以來的第三版完全修訂版公開文獻(xiàn)中列出了這類染料。料特另廿描述在下歹寸文獻(xiàn)中E.Sagarin，"Cosmetics，ScienceandTechnology",IntersciencePublishersInc.，NewYork(1957),503頁及其后的內(nèi)容；和H.Janistyn，"HandbuchderKosmetikaundRiechstoffe"[化妝品和香料手冊]，第3巻(1973)，388頁及其后的內(nèi)容；和K.Schrader，"GrundlagenundRezepturenderKosmetika"[化妝品基礎(chǔ)和配制，第二片反(1989)，782畫815頁。本發(fā)明還優(yōu)選這樣的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中活性染料(i)通過連接分子與角蛋白結(jié)合多肽(ii)間接偶聯(lián)。可以通過使用帶有至少兩個(gè)偶聯(lián)官能團(tuán)的連接分子將攜帶至少一個(gè)羥基、氨基或羧基官能團(tuán)的效應(yīng)分子(i)(例如選自上述活性染料)偶聯(lián)在上述角蛋白結(jié)合多肽(ii)上來制備這類角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，并且a)在第一偶聯(lián)步驟中，首先使效應(yīng)分子(i)與連接分子(iii)鍵合，和b)在另一偶聯(lián)步驟中，使來自(a)的反應(yīng)產(chǎn)物與角蛋白結(jié)合多肽(ii)通過連接分子(iii)上仍然游離的偶聯(lián)官能團(tuán)偶聯(lián)。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接分子(iii)帶有至少兩個(gè)不同的偶聯(lián)官能團(tuán)，極為特別優(yōu)選帶有馬來酰亞胺基團(tuán)的連接分子(iii)。所用的連接分子(Hi)特別優(yōu)選攜帶式9所示羧酸基團(tuán)的馬來酰亞胺，式9其中"n，，為0-40或0-20之間的整數(shù)，優(yōu)選0-15，特別優(yōu)選O-IO，極為特別優(yōu)選l-9，或2-8，或3-7,最優(yōu)選均為5。馬來酰亞胺基己酸的應(yīng)用是其中最為優(yōu)選的。此外，馬來酰亞胺基己酸氯化物的應(yīng)用是極為特別優(yōu)選的。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接分子(iii)帶有至少兩個(gè)不同的偶聯(lián)官能團(tuán)和額外的增加親水性的模塊。這種優(yōu)選的連接分子如式9b所示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>式9b其中"n"為0-40或0-20之間的整數(shù)，優(yōu)選0-15,特別優(yōu)選O-IO，極為特別優(yōu)選1-9,或2畫8，或3-7，且X為基團(tuán)O、S、N、CH2、-0-C=0、O-C畫O-、-NR、-NR-C=0、0=C-NR-，且R為H，C廣C,2支鏈或非支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基或環(huán)烷基；苯曱?；?；爺基；CVd。芳基，如苯基和萘基；雜芳基；優(yōu)選H、甲基和乙基；且"模塊"為乙二醇或具有2-40，優(yōu)選2-20，特別優(yōu)選2-10個(gè)重復(fù)單元的聚乙二醇基團(tuán)；或?yàn)榘被?，?yōu)選選自甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸；或?yàn)榫哂?-40,優(yōu)選2-20,特別優(yōu)選2-10個(gè)氨基酸的多肽，其中所述氨基酸優(yōu)選為極性氨基酸，特別優(yōu)選選自甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸；或?yàn)榫哂?-100，優(yōu)選2-80，特別優(yōu)選2-50，最優(yōu)選2-20個(gè)單體單元的聚丙烯酸基團(tuán)；或?yàn)榱嗽黾佑H脂性，"模塊"為具有2-40個(gè)碳的烷基；或具有2-40，優(yōu)選2-20,特別優(yōu)選2-10個(gè)重復(fù)單元的聚烯烴；或?yàn)榘被幔瑑?yōu)選選自甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸；或?yàn)榫哂?-40，優(yōu)選2-20，特別優(yōu)選2-10個(gè)氨基酸的多肽，其中所述氨基酸優(yōu)選選自非極性氨基酸，特別優(yōu)選自甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、曱硫氨酸；或?yàn)榫哂?-100，優(yōu)選2-80，特別優(yōu)選2-50，最優(yōu)選2-20個(gè)單體單元的聚酯、聚酰胺或聚氨酯。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接分子為式9c的分子，式9c其中鄰位、間位或?qū)ξ簧系腦為COOH或R-COOH，且R為d-d2直鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基；或環(huán)烷基，如Cs-d2環(huán)烷基，任選被一個(gè)或多個(gè)d-C4烷基取代；或定位于鄰位、間位或?qū)ξ坏姆蓟⑶Щ虮綍貂；鶈卧?；?yōu)選環(huán)己基、苯基和萘基。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，R還可以為式lb中所述的"模塊"。在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，使用式10所示的連接分子(iii),其中"n"為0-20之間的整數(shù)，優(yōu)選0-15,特別優(yōu)選1-10,極為特別優(yōu)選l-8，且Y為羥基或氨基。氨基可以為伯氨基或仲氨基。連接分子(iii)極為特別優(yōu)選馬來酰亞胺基烷醇。馬來酰亞胺基烷醇優(yōu)選馬來酰亞胺基乙醇，最優(yōu)選所有的馬來酰亞胺基戊醇。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，式10的連接分子(iii)具有至少兩個(gè)不同的偶聯(lián)官能團(tuán)和額外的增加親水性或親脂性的模塊。這種優(yōu)選的連接分子如式10b所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula>式10b其中"n"為0-40或0-20之間的整數(shù)，優(yōu)選0-15，特別優(yōu)選O-IO,極為特別優(yōu)選l-9，或2-8，或3畫7，且X為基團(tuán)O、S、N、CH2、-OOO、0=C-0-、-NR、-NR-C-O、O-C-NR-，且R為H、d-Cu支鏈或非支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基;或環(huán)烷基；苯曱?；?，節(jié)基；C6-d。芳基，如苯基和萘基；雜芳基；優(yōu)選H、甲基和乙基；且"模塊"為乙二醇或具有2-40，優(yōu)選2-20,特別優(yōu)選2-10個(gè)重復(fù)單元的聚乙二醇基團(tuán)；或氨基酸，優(yōu)選選自甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸；或具有2-40，優(yōu)選2-20，特別優(yōu)選2-10個(gè)氨基酸的多肽，其中所述氨基酸優(yōu)選為極性氨基酸，特別優(yōu)選選自甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸；或具有2-100,優(yōu)選2-80，特別優(yōu)選2-50，最優(yōu)選2-20個(gè)單體單元的聚丙烯酸基團(tuán)；或?yàn)榱嗽黾佑H脂性，"模塊，，為具有2-40個(gè)碳原子的烷基；或帶有2-40，優(yōu)選2-20，特別優(yōu)選2-10個(gè)重復(fù)單元的聚烯烴；或氨基酸，優(yōu)選選自甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸；或具有2-40，優(yōu)選2-20,特別優(yōu)選2-10個(gè)氨基酸的多肽，其中所述氨基酸優(yōu)選選自非極性氨基酸，特別優(yōu)選選自甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、曱硫氨酸；或具有2-100，優(yōu)選2-80,特別優(yōu)選2-50，最優(yōu)選2-20個(gè)單體單元的聚酯、聚酰胺或聚氨酯，且Y為來自羥基或氨基的官能團(tuán)。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，連接分子(iii)與效應(yīng)分子(i)(例如如上所述的活性染料)的偶聯(lián)為碳二亞胺、酸酐或?；?acidchloride)介導(dǎo)的酯化反應(yīng)或酰胺形成反應(yīng)，其中特別優(yōu)選連接分子(iii)的?；鹊膽?yīng)用。碳二亞胺、酸酐或?；冉閷?dǎo)的反應(yīng)意味著連接分子(iii)的羧基活化是連接分子(iii)與效應(yīng)分子(i)之間形成酯或酰胺所必需的。可提及的碳二亞胺優(yōu)選為二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、二異丙基碳二亞胺(DIC)、N，-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC),其中特別優(yōu)選二異丙基碳二亞胺或EDC。此外，有可能使用羰基二咪唑(CDI)進(jìn)行活化。這些酯化反應(yīng)在O.l-lOOmol。/o的N,N-二曱氨基吡P定(DMAP)，優(yōu)選0.5-10%，特別優(yōu)選1-6%的存在下進(jìn)行。可以通過使用碳二亞胺活化的化合物與胺反應(yīng)形成酰胺。任選可以在加成劑(additive),例如像N-羥基琥珀酰亞胺、五氟苯酚或N-羥基苯并三唑的存在下進(jìn)行酰胺形成反應(yīng)。這類加成劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知。如果獲得可通過這些加成劑可分離的活性酯，這些分離的活性酯與效應(yīng)分子的反應(yīng)還可按照本發(fā)明理解為碳二亞胺介導(dǎo)的酯化反應(yīng)。連接分子(iii)反應(yīng)得到酸酐通過如本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般方法進(jìn)行。優(yōu)選混合酸酐的應(yīng)用，例如通過與乙酐、新戊酸酐(pivaloylanhydride)、乙酰氯、新戊酰氯或氯甲酸酯反應(yīng)實(shí)現(xiàn)。特別優(yōu)選新戊酸酐和具有碳酸的酸酐。當(dāng)使用?；葧r(shí)，有利的是在叔堿如吡啶、三乙胺的存在下進(jìn)行酸酐形成反應(yīng)。優(yōu)選可以在上述連接分子(iii)活化之后，在堿的存在下進(jìn)行(a)中所述連接分子(iii)與效應(yīng)分子(i)的偶聯(lián)而得到酸酐。優(yōu)選提及的堿為芳族和叔烷基胺類，例如吡啶、三乙胺、三丁胺、三辛胺、乙基二異丙胺等。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所用的堿為三乙胺。為了使連接分子(iii)與?；确磻?yīng)，所用的氯化劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常用氯化劑，例如亞硫酰氯、三氯化磷、五氯化磷、草酰氯、碳酰氯或三氯氧化磷。極為特別優(yōu)選亞硫酰氯(SOCl2)的應(yīng)用。使用亞硫酰氯有可能例如將馬來酰亞胺基己酸轉(zhuǎn)化成?；?。在此處合適的溶劑為芳族和脂族烴，例如苯、曱苯、二曱苯類、己烷、庚烷等；卣代烴，例如二氯甲烷；醚，例如二乙醚、THF等；以及過量的氯化劑自身。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用曱苯?？梢允褂没虿皇褂么呋瘎┻M(jìn)行氯化反應(yīng)。DMF為特別優(yōu)選用于氯化反應(yīng)的催化劑。任選地，可以進(jìn)一步純化來自步驟(a)的反應(yīng)產(chǎn)物(下文稱作連接效應(yīng)分子(iv))以便分離可能的反應(yīng)產(chǎn)物異構(gòu)體。本文中可以使用純化化學(xué)物質(zhì)的所有常用方法，例如蒸餾、提純、結(jié)晶、提取和層析純化方法。優(yōu)選進(jìn)行柱層析。除上述活性染料外，還可以使其它染料通過連接分子與角蛋白結(jié)合多肽偶聯(lián)并用于本發(fā)明的方法。本文特別有利的染料為下表中給出的那些。顏色指數(shù)編號(CIN)摘自RoweColourIndex,第3版，SocietyofDyersandColourists,Bradford,<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>發(fā)明方法而言，使用通過連接分子偶聯(lián)的、包含表3中所示染料分子之一的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。上述染料還可以用作皮膚-或指甲-結(jié)合多肽序列(ii)的效應(yīng)分子(i)，以用于染色染色皮膚或指曱，如文身。特別適合使用包含熒光染料(例如表3中包括的熒光染料)的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，以便在施用于皮膚后實(shí)現(xiàn)更為健康的發(fā)光樣皮膚色度以及光學(xué)增亮皮膚("皮膚增白，，)。例如，使用的熒光色素描述在US6753002中。用于生產(chǎn)更健康皮膚色度的熒光染料描述在"FillingtheFluorescentPalette,Cosmetics&Toiletries，26-34,121,No.5，2006"中。例如，優(yōu)選來自DayGlo的熒光染料。此外，這些包含熒光染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子還可以用于增亮毛發(fā)并用于產(chǎn)生毛發(fā)上的特殊反射或閃光。這描述在例如"Hairlighteningbyfluorescentdyes,Cosmetics&Toiletries,56-57，120，No.7，2005"和其中引述的US2004/0258641說明書中。上述步驟(a)所產(chǎn)生的反應(yīng)產(chǎn)物與角蛋白結(jié)合多肽(ii)的結(jié)合通過連接分子上仍然游離的第二個(gè)固著基團(tuán)進(jìn)行。例如，這類固著基團(tuán)可以為巰基，通過它連接分子可以與角蛋白結(jié)合多肽(ii)的半胱氨酸基團(tuán)構(gòu)成二硫鍵。接精確匹配。此外，結(jié)果有可能使兩個(gè)或多個(gè)效應(yīng)分子與角蛋白結(jié)合多肽(ii)連接。所用的連接分子受欲偶聯(lián)官能團(tuán)的控制。適用的有例如通過硫氫基反應(yīng)性基團(tuán)鍵合角蛋白而與多肽(ii)偶聯(lián)的分子(例如馬來酰亞胺、吡啶二硫化物、a-卣代乙酖基、乙烯砜、磺化烷基砜(優(yōu)選磺化乙基砜))。優(yōu)選連接分子(iii)與角蛋白結(jié)合多肽(ii)的共價(jià)連接。例如，這可以通過角蛋白結(jié)合多肽(ii)的側(cè)鏈，特別是通過氨基官能團(tuán)、羥基官能團(tuán)、羧酸酯官能團(tuán)或巰基官能團(tuán)進(jìn)行。優(yōu)選通過一個(gè)或多個(gè)賴氨酸基團(tuán)的氨基官能團(tuán)、半胱氨酸基團(tuán)的一個(gè)或多個(gè)巰基、絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸基團(tuán)的一個(gè)或多個(gè)羥基、天冬氨酸或谷氨酸的一個(gè)或多個(gè)羧基或通過角蛋白結(jié)合多肽(ii)的N-末端或C-末端官能團(tuán)連接。除在角蛋白結(jié)合多肽(ii)的一級序列中出現(xiàn)的氨基酸官能團(tuán)外，還有可能向該序列中添加具有適當(dāng)官能團(tuán)的氨基酸(例如半胱氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、谷氨酸)或用這類氨基酸官能團(tuán)取代多肽序列的氨基酸。用于誘變或操縱核酸分子的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員充分公知。幾種選擇的方法如下所述。特別優(yōu)選利用所定義的本發(fā)明優(yōu)選的馬來酰亞胺基己酸制備的連接效應(yīng)分子(iv)的應(yīng)用。就這類連接效應(yīng)分子(iv)而言，存在于角蛋白結(jié)合多肽中的半胱氨酸基團(tuán)用于偶聯(lián)?？梢酝ㄟ^三種不同的測試監(jiān)測效應(yīng)分子偶聯(lián)的成功(i)Ellmaim測試，其中可以在效應(yīng)分子偶聯(lián)之前和之后測定蛋白質(zhì)中游離Cys-SH基團(tuán)的數(shù)量。在偶聯(lián)后游離SH基團(tuán)的大量減少表明反應(yīng)進(jìn)展良好(參見實(shí)施例ll)。(ii)活性測試，其中可以測量含有和不含偶聯(lián)效應(yīng)分子的KBD-B(SEQIDNO.:166)與毛發(fā)的結(jié)合。良好的反應(yīng)控制不應(yīng)降低KBD-效應(yīng)分子相對于非偶聯(lián)KBD-B(SEQIDNo.:166)的活性(參見實(shí)施例12)。(iii)由于染料成功偶聯(lián)在KBD-B(SEQIDNo.:166)上，毛發(fā)或皮膚的可見染色(參見實(shí)施例14)。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，發(fā)生效應(yīng)分子的結(jié)合，從而由于內(nèi)源性酶(例如酯酶、脂肪酶或葡萄糖苷酶)的作用，或隨時(shí)間推移環(huán)境條件(例如濕度、酸性pH)對皮膚的作用的結(jié)果，效應(yīng)分子能夠在"緩釋"或"控釋，，的意義上從角蛋白結(jié)合多肽(ii)中除去并釋放。角蛋白結(jié)合多肽(ii)由此可以用作施用系統(tǒng)，通過單次或重復(fù)施用該系統(tǒng)，可以實(shí)現(xiàn)皮膚上存在少量游離效應(yīng)分子。一般而言，本領(lǐng)域技術(shù)人員公知效應(yīng)分子可以從皮膚中其相應(yīng)衍生物，例如從生育酚醋酸酯、抗壞血酸棕櫚酸酯或抗壞血酸葡萄糖苷中釋放(例示性的文獻(xiàn)Redoul6s，D.等J.Invest.Dermatol.125，2005,270,BeijersbegenvanHenegouwen，G.M.J.等，J.Photochem.Photobiol.29,1995，45)。本發(fā)明另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，就本發(fā)明的方法而言，使用攜帶羧基、羥基或氨基的染料。本文所用的效應(yīng)分子可以具有一個(gè)或多個(gè)羧基、羥基或氨基。本發(fā)明還提供了上述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在適合于染色角蛋白纖維，優(yōu)選毛發(fā)、皮膚或指甲，特別優(yōu)選人毛發(fā)的化妝品組合物中的應(yīng)用。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的上述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子的應(yīng)用為適合于與化妝品合適的助劑和常用于染發(fā)劑的添加劑組合用于染發(fā)的組合物形式。這里，可以使用上述染料，優(yōu)選批準(zhǔn)用于化妝品目的的染料。這些染料通常的添加濃度占組合物總重的0.001-1重量百分比，優(yōu)選0.01-0.9%重量，特別優(yōu)選0.01-0.8%重量或0.01-0.7%重量，極為特別優(yōu)選0.01-0.6%重量或0.01-0.5%重量，最優(yōu)選0.01-0.4%重量或0.01-0.3°/。重量。在另一實(shí)施方案中，組合物可以包含占組合物總重1-10%重量，優(yōu)選2-8%重量，3-7%重量，4-6%重量濃度的本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。此外，這些組合物可以包含占組合物總重10-20%重量，優(yōu)選11-19%重量，12-18%重量，13-17%重量，14-16%重量濃度的本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。為了確保染發(fā)組合物的活性成分在施用后保留在毛發(fā)上一定時(shí)間并且不會進(jìn)入不期望的部位，如面部，組合物應(yīng)具有一定的最低粘度。通常通過使用增稠劑獲得這種粘度,這些增稠劑由此為大多數(shù)染發(fā)劑的另一組分。所用的增稠劑通常為交聯(lián)的聚丙烯酸(例如Carbopol)、羥乙基纖維素、蠟，特別是具有一定HLB值(親水親油平衡值)的非離子型表面活性劑、陰離子型、陽離子型或非離子型締合聚合物的混合物。兩性共聚物作為增稠劑在化妝品組合物中的應(yīng)用早已公知。如果聚合物既具有致陰離子/陰離子基團(tuán)，又具有致陽離子/陽離子基團(tuán)，那么它們稱作兩性或兩親的。具有足夠數(shù)量可離解基團(tuán)的兩性聚合物為水溶性的或水可分散的，并已經(jīng)在制藥和化妝品領(lǐng)域找到了多種應(yīng)用。合適的增稠劑或聚合物描述在專利申請WO00/039176、WO04/058837、EP-A-0982021、WO01/62809、WO05/004821、DE20207896Ul和WO02/000181中。為了建立某些特性，制品還可以額外包含基于硅化合物的調(diào)理物質(zhì)。合適的硅化合物例如為聚烷基硅氧烷、聚芳基硅氧烷、聚芳基烷基硅氧烷、聚醚硅氧烷、硅樹脂或聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基官能團(tuán)硅化合物，如氨基封端聚二曱基硅氧烷(CTFA)。拋射劑為常用于噴發(fā)劑或氣溶膠泡沫的拋射劑。優(yōu)選丙烷/丁烷混合物、戊烷、二曱醚、1，l-二氟乙烷(HFC-152a)、二氧化碳、氮或壓縮空氣?？梢允褂玫娜榛瘎槌Ｓ糜诿l(fā)泡沫的所有乳化劑。合適的乳化劑可以為非離子型、陽離子型或陰離子型或兩性的。非離子型乳化劑的實(shí)例(INCI命名法)為聚乙二醇月桂基醚(laureth)，例如聚乙二醇月桂基醚-4;鯨蠟醇聚醚，例如鯨蠟醇聚醚-1、聚乙二醇鯨蠟基醚；鯨蠟硬脂醇聚醚，例如鯨蠟硬脂醇聚醚-25;聚乙二醇脂肪酸甘油酯、羥基化卵磷脂、脂肪酸的乳?；ァ⑼榛厶瞧?。陽離子型乳化劑的實(shí)例為十六烷基二甲基-2-羥乙基磷酸二氫銨(cetyldimethyl-2-hydroxyethylammoniumdihydrogenphosphate)、十六烷基三甲基氯化銨(cetyltrimoniumchloride)、十六烷基三甲基溴化銨(cetyltrimoniumbromide)、椰油基三曱基甲基石危酸銨(cocotrimoniummethylsulfate)、季銨鹽-l至x(INCI)。例如，陰離子型乳化劑可以選自烷基硫酸鹽、烷基醚硫酸鹽、烷基磺酸鹽、烷基芳基磺酸鹽、烷基琥珀酸鹽、烷基磺基琥珀酸鹽、N-烷?；“彼猁}、?；；撬猁}、?；u乙基磺酸鹽、烷基磷酸鹽、烷基醚磷酸鹽、烷基醚羧酸鹽、a-烯烴磺酸鹽、特別是堿金屬和堿土金屬鹽、例如鈉、鉀、鎂、鈣和銨鹽以及三乙醇胺鹽。烷基醚磺酸鹽、烷基醚磷酸鹽和烷基醚羧酸鹽分子可以具有1-10個(gè)環(huán)氧乙烷或環(huán)氧丙烷單元，優(yōu)選l-3個(gè)環(huán)氧乙烷單元?？梢允褂玫哪z形成劑為常用于化妝品的所有凝膠形成劑。它們包括輕度交聯(lián)的聚丙烯酸，例如卡波姆(INCI);纖維素衍生物，例如羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、陽離子修飾的纖維素；多糖，例如黃原膠；辛酸/癸酸甘油三酯；丙烯酸鈉共聚物、聚季銨鹽-32(和)液體石蠟(INCI)，丙烯酸鈉共聚物(和)液體石蠟(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6，丙烯酰胺基丙基三甲基氯化銨/丙埽酰胺共聚物，硬脂醇聚醚-10烯丙基醚，丙烯酸酯共聚物、聚季銨鹽-37(和)液體石蠟(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6，聚季銨鹽-37(和)丙二醇二癸酸酯二辛酸西旨(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6，聚季銨鹽-7，聚季銨鹽-44。在香波制品中，可以使用常用于香波的所有陰離子型、中性、兩性或陽離子型表面活性劑。合適的陰離子型表面活性劑例如為烷基硫酸鹽、烷基醚硫酸鹽、烷基磺酸鹽、烷基芳基磺酸鹽、烷基琥珀酸鹽、烷基磺基琥珀酸鹽、N-烷?；“彼猁}、?；；撬猁}、?；u乙基磺酸鹽、烷基磷酸鹽、烷基醚磷酸鹽、烷基醚羧酸鹽、a-烯烴磺酸鹽、特別是堿金屬和堿土金屬鹽、例如鈉、鉀、鎂、鈣和銨鹽以及三乙醇胺鹽。烷基醚磺酸鹽、烷基醚磷酸鹽和烷基醚羧酸鹽分子可以具有1-10個(gè)環(huán)氧乙烷或環(huán)氧丙烷單元，優(yōu)選l-3個(gè)環(huán)氧乙烷單元。適用的有，例如十二烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸銨、十二烷基醚硫酸鈉、十二烷基醚橋u酸銨、月桂?；“彼徕c、油酰基琥珀酸鈉、月桂基磺基琥珀酸銨、十二烷基苯磺酸鈉、三乙醇胺十二烷基苯磺酸鹽。合適的兩性表面活性劑為，例如，烷基甜菜堿、烷基酰氨基丙基甜茱堿、烷基磺基甜茱堿、烷基甘氨酸鹽、烷基羧基甘氨酸鹽、烷基兩性乙酸鹽或-丙酸鹽、烷基兩性二乙酸鹽或-二丙酸鹽。例如，可以使用椰油基二甲基磺基丙基甜茱堿、月桂基甜菜堿、椰油基酰氨基丙基甜菜堿或椰油兩性丙酸鈉(sodiumcocamphopropionate)。合適的非離子型表面活性劑為，例如，在烷基鏈上具有6-20個(gè)碳原子的可以為直鏈或支鏈的脂族醇或烷基酚與環(huán)氧乙烷和/或環(huán)氧丙烷的反應(yīng)產(chǎn)物。烯化氧的含量約為6-60mol/mole醇。此外，烷基胺氧化物、單-或二烷基烷醇酰胺、聚乙二醇的脂肪酸酯、烷基聚糖苦或山梨聚糖醚酯是合適的。此外，香波制品可以包含常用的陽離子型表面活性劑，例如，季銨化合物，例如十六烷基三甲基氯化銨。在香波制品中，為了獲得某些效果，可以將常用的調(diào)理劑與本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子組合使用。它們包括，例如，INCI命名為聚季銨鹽的上述陽離子聚合物，特別是乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑錯(cuò)鹽的共聚物(LuviquatFC，Luviquat&commat，HM，LuviquatMS,LuviquatCare),使用硫酸二乙酯季銨化的、N-乙烯基吡咯烷酮/甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的共聚物(LuviquatDPQ11)，N-乙烯基己內(nèi)酰胺/N-乙烯^吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑錯(cuò)鹽的共聚物(LuviquatDHold),陽離子纖維素衍生物(聚季銨鹽-4和-10),丙蜂酰胺共聚物(聚季銨鹽-7)。此外，可以使用蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物且還有基于硅化合物的調(diào)理物質(zhì)，例如聚烷基硅氧烷、聚芳基硅氧烷、聚芳基烷基硅氧烷、聚醚硅氧烷或硅樹脂。其它合適的硅化合物為聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基官能團(tuán)硅化合物，如氨基封端聚二甲基硅氧烷(CTFA)。此外，可以使用陽離子瓜爾膠衍生物，諸如瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨(INCI)。美發(fā)或皮膚美容制品通常用于施用于皮膚(局部)或毛發(fā)上。局部用制品在本文應(yīng)理解為表示那些適合于將活性成分以精細(xì)分布的形式施用于皮膚或毛發(fā)的制品。例如，適用于該目的的有水性溶液和水醇溶液、噴霧劑、泡沫、泡沫氣霧劑、軟膏、水性凝膠、0/W或W/0型乳劑、微乳或化妝棒制品。按照本發(fā)明化妝品組合物的優(yōu)選實(shí)施方案，所述組合物包含栽體。優(yōu)選的載體為水、氣體、基于水的液體、油、凝膠、乳劑或微乳、分散體或其混合物。所述的載體表現(xiàn)出良好的皮膚相容性。具有特別優(yōu)點(diǎn)的局部用制品為水性凝膠、乳劑或微乳?？梢允褂玫娜榛瘎榉请x子表面活性劑、兩性離子表面活性劑、兩性表面活性劑或陰離子乳化劑。乳化劑可以存在于本發(fā)明組合物中的量占組合物的0.1-10%重量，優(yōu)選1-5%重量。例如，非離子表面活性劑可以為選自如下的至少一種表面活性劑2-30mol環(huán)氧乙烷和/或0-5mol環(huán)氧丙烷與具有8-22個(gè)碳原子的直鏈脂肪醇、具有12-22個(gè)碳原子的脂肪酸以及烷基具有8-15個(gè)碳原子的烷基酚的力口成產(chǎn)物；1-30mol環(huán)氧乙烷與甘油加成產(chǎn)物的dM8脂肪酸單酯和二酯；具有6-22個(gè)碳原子的飽和和不飽和脂肪酸的甘油單酯和二酯及山梨聚糖單酯和二酯及其環(huán)氧乙烷加成產(chǎn)物；烷基具有8-22個(gè)碳原子的烷基單糖苷和寡糖苷及其乙氧基化類似物；15-60mol環(huán)氧乙烷與蓖麻油和/或氬化蓖麻油的加成產(chǎn)物；多元醇且特別是聚甘油酯，例如聚甘油聚蓖麻油酸酯、聚甘油聚-12-羥基硬脂酸酯或聚甘油二聚酸酯(polyglycero1dimerate)。同樣合適的是來自這些物質(zhì)類別中的兩種或多種化合物的混合物；2-15mol環(huán)氧乙烷與荒麻油和/或氬化蓖麻油的加成產(chǎn)物；基于直鏈、支鏈、不飽和或飽和<:6/22脂肪酸、蓖麻油酸及12-羥基硬脂酸和甘油、聚甘油、季戊四醇、二季戊四醇、糖醇(例如山梨糖醇)、烷基糖苷(例如甲基糖苷、丁基糖苷、月桂基糖苷)和聚糖苷(例如纖維素)的偏酯；單-、二-和三烷基磷酸酯和單-，二-和/或三-PEG烷基砩酸酯類及其鹽；羊毛蠟醇；聚硅氧烷-聚烷基聚醚共聚物和相應(yīng)的衍生物；如在德國專利說明書1165574中的季戊四醇、脂肪酸、檸檬酸和脂肪醇的混合酯和/或具有6-22個(gè)碳原子的脂肪酸、曱基葡萄糖和多元醇，優(yōu)選甘油或聚甘油和聚亞烷基二醇的混合酯。此外，兩性離子表面活性劑可以用作乳化劑。兩性離子表面活性劑為用于指那些在分子中攜帶至少一個(gè)季銨基團(tuán)和至少一個(gè)羧酸酯基團(tuán)或磺酸酯基團(tuán)的表面活性化合物的術(shù)語。特別合適的兩性離子表面活性劑為所謂的甜菜堿，如N-烷基-N，N-二曱基銨甘氨酸鹽，例如椰油烷基二甲基銨甘氨酸鹽，N-酰氨基丙基-N，N-二甲基銨甘氨酸鹽，例如椰油酰氨基丙基二曱基銨甘氨酸鹽和2-烷基-3-羧基甲基-3-羥乙基咪唑啉，它們各在烷基或?；暇鶐в?-18個(gè)碳原子；以及椰油酰氨基乙基羥乙基羧甲基甘氨酸鹽。特別優(yōu)選已知CTFA命名為椰油酰胺基丙基甜菜堿的脂肪酸酰胺衍生物。同樣合適的乳化劑為兩性表面活性劑。兩性表面活性劑應(yīng)理解為表示除分子中的Cs，,8烷基或?；?，包含至少一個(gè)游離氨基和至少一個(gè)《0011-或-80311基團(tuán)并且能夠形成內(nèi)鹽的表面活性化合物。合適的兩性表面活性劑的實(shí)例為各在烷基上帶有8-18個(gè)碳原子的N-烷基甘氨酸、N-烷基丙酸、N-烷氨基丁酸、N-烷基亞氨基二丙酸、N-羥乙基-N-烷基酰氨基丙基甘氨酸、N-烷基牛磺酸、N-烷基肌氨酸、2-烷基氨基丙酸和烷基氨基乙酸。特別優(yōu)選的兩性表面活性劑為N-椰油烷氨基丙酸酯、椰油酰氨基乙氨基丙酸酯和(:12/18酰基肌氨酸。除兩性乳化劑外，季銨乳化劑也是合適的，其中特別優(yōu)選季銨型酯，優(yōu)選甲基季銨化二脂肪酸三乙醇胺酯鹽。此外，可以使用的陰離子乳化劑為烷基醚硫酸鹽、單酸甘油酯硫酸鹽、脂肪酸硫酸鹽、磺基琥珀酸鹽和/或醚羧酸。合適的油體為基于具有6-18,優(yōu)選8-10個(gè)碳原子的脂肪醇的格爾伯特(Guerbet)醇，直鏈(:6-0:22脂肪酸與直鏈(:6-(:22脂肪醇的酯；支鏈Q(jìng)-d3羧酸與直鏈C6-C22脂肪醇的酯；直鏈CVC22脂肪酸與支鏈醇，特別是2-乙基己醇的酯；直鏈和/或支鏈脂肪酸與多元醇(例如，丙二醇，二聚體二醇或三聚體三醇)和/或格爾伯特醇的酯；基于C6-do脂肪酸的甘油三酯；基于CVd8脂肪酸的液體單-/二-、三甘油酯混合物；C6-C22脂肪醇和/或格爾伯特醇與芳族羧酸，特別是苯甲酸的酯；Crd2二羧酸與具有l(wèi)-22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈醇或具有2-10個(gè)碳原子和2-6個(gè)羥基的多元醇的酯；植物油；支鏈伯醇；取代的環(huán)己烷，直鏈CVC22脂肪醇碳酸酯，格爾伯特醇碳酸酯；苯甲酸與直鏈和/或支鏈CVC22醇的酯(例如FinsolV^TN);二烷基醚；環(huán)氧化脂肪酸酯與多元醇、硅油和/或脂族或環(huán)烷烴的開環(huán)產(chǎn)物。可以使用的油體還有硅化合物，例如二甲基聚硅氧烷、曱基苯基聚硅氧烷、環(huán)狀硅化合物和氨基-、脂肪酸-、醇-、聚醚-、環(huán)氧-、氟-、烷基-和/或糖苷-修飾的硅化合物，它們于室溫可以為液體形式或樹脂形式。油體可以存在于本發(fā)明組合物的量占組合物的1-90%重量，優(yōu)選5-80%重量且特別是10-50%重量?？膳c本發(fā)明角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子一起使用的所示成分目錄當(dāng)然不應(yīng)視為窮盡或限制性的。這些成分可以單獨(dú)使用或彼此任意組合地使用。此外，本發(fā)明涉及適合于染色皮膚、指甲和/或毛發(fā)的組合物，優(yōu)選染發(fā)劑，它們包含至少一種上述本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。本發(fā)明還提供了使用本發(fā)明的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子染色毛發(fā)、皮膚和/或指曱的方法。在這種方法中，優(yōu)選使用包含至少一種上述角蛋白結(jié)合多肽(ii)和至少一種表3、5和6所示染料或活性染料的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。當(dāng)生產(chǎn)適合于染發(fā)的制品時(shí)，自然還可以將角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子與不同的染料彼此混合，以獲得特定的色調(diào)。例如，可以如下生產(chǎn)具有特定色調(diào)的制品(a)在角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子生產(chǎn)期間混合選擇的活性染料或染料，或(b)在生成染發(fā)劑時(shí)混合各角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。在本發(fā)明特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，使用這樣的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其包含(a)角蛋白結(jié)合多肽，其包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列之一，優(yōu)選SEQIDNO:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170,特別優(yōu)選166和168，最優(yōu)選168所示的序列；或?qū)?yīng)于這樣的多肽，所述多肽與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列，優(yōu)選SEQIDNO:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170，特別優(yōu)選166和168，最優(yōu)選168所示的序列具有至少40%、45%或50%，優(yōu)選至少55%、60%、65%或70%,特別優(yōu)選至少75%、80%、85%、卯％、91%、92%、93%或94%,極為特別優(yōu)選至少95%或96%的同一性，并且能夠結(jié)合角蛋白，(b)馬來酰亞胺基己酸或馬來酰亞胺基烷醇，優(yōu)選馬來酰亞胺基戊醇作為連接分子(iii)，和(c)選自表3所列的染料的效應(yīng)分子(i)，或(d)選自表6或7的活性染料。優(yōu)選通過將包含本發(fā)明角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子的制品以足以產(chǎn)生所需顏色改變的量和時(shí)間施用于需染色的毛發(fā)而染色毛發(fā)。在本文中可以在極短時(shí)間(幾分鐘)后或在至少半小時(shí)內(nèi)使用合適的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子實(shí)現(xiàn)良好的染色(參見實(shí)施例20)。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解染色所需的量和時(shí)間取決于需染色的毛發(fā)的長度和數(shù)量。在上述方法的特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，為一種可逆的染色方法，其中可以在置換反應(yīng)中從皮膚、毛發(fā)或指甲上除去角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。為此，例如，可以使用角蛋白沖洗，從而將角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子從其與角蛋白的既有價(jià)鍵中置換出來，并被沖洗用的角蛋白飽和?？蛇x地，還有可能使用高比例的去污劑(例如SDS)沖洗(參見實(shí)施例20)。序列SEQID序列NO.:類型序列描述1核酸智人(Homt^印i'e附)橋粒斑蛋白一登錄號NM一0044152蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—0044153核酸智人橋粒斑蛋白一登錄號NM一004415結(jié)構(gòu)域B4蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B5核酸智人橋粒斑蛋白—登錄號NM一004415結(jié)構(gòu)域B-16蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-17核酸智人橋粒斑蛋白—登錄號NMJ)04415結(jié)構(gòu)域B-28蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-29核酸智人橋粒斑蛋白—登錄號NM一004415結(jié)構(gòu)域C10蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM一004415結(jié)構(gòu)域C11核酸智人橋粒斑蛋白一登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域C-112蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白_登錄號~1\1—004415結(jié)構(gòu)域C-113核酸智人橋粒斑蛋白—登錄號NM_004415結(jié)構(gòu)域C-214蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域C-215核酸智人絲聚蛋白—登錄號CAI1959S16蛋白質(zhì)智人絲聚蛋白—登錄號CAI1959617核酸智人斑菲素蛋白l登錄號NMJ)01005337,轉(zhuǎn)錄變體la18蛋白質(zhì)智人斑菲素蛋白l登錄號NM一001005337,轉(zhuǎn)錄變體la19核酸智人斑菲素蛋白l登錄號NM一000299,轉(zhuǎn)錄變體lb20蛋白質(zhì)智人斑菲素蛋白l登錄號NM—000299,轉(zhuǎn)錄變體lb21核酸小家鼠(Mmswhwh/ks)斑菲素蛋白2登錄號NM—026163NM—02789422蛋白質(zhì)小家鼠斑菲素蛋白2登錄號NMJ)26163NM—02789523核酸小家鼠斑菲素蛋白l登錄號NM—01964524蛋白質(zhì)小家鼠斑菲素蛋白l登錄號NM一01964625核酸牛(JMtaHn^斑菲素蛋白l部分mRNA,登錄號XM—86834826蛋白質(zhì)牛斑菲素蛋白l部分mRNA,登錄號XM—86834927核酸家犬(CflM,X/iimi7/an'力，與斑菲素蛋白l同工型la類似，登錄號XM—85152828蛋白質(zhì)家犬，與斑菲素蛋白l同工型la類似，登錄號X1VL85152929核酸斑馬魚(Dflm》/w/0),與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—69583230蛋白質(zhì)斑馬魚，與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—69583331核酸褐家鼠(iaff"sm7rveg/ctw),與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—22266632蛋白質(zhì)褐家鼠，與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—22266733核酸黑猩猩(戶訓(xùn)的gto辦tey),與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—51409134蛋白質(zhì)黑猩猩，與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—51409235核酸紅原雞(Ga/ftwgfl/ftw),與斑菲素蛋白l類似，登錄號XM—41924036蛋白質(zhì)紅原雞，與斑菲素蛋白l類似，登錄號X1VL41924137核酸非洲爪蟾(Xe"印"s/aevis),與斑菲素蛋白4類似，登錄號BI39049638蛋白質(zhì)非洲爪蟾，與斑菲素蛋白4類似，登錄號BI3卯49739核酸智人橋粒斑蛋白，轉(zhuǎn)錄變體2，登錄號NMJ)0100884440蛋白質(zhì)智人橋粒斑蛋白，轉(zhuǎn)錄變體2，登錄號NM一00100884541核酸小家鼠橋粒斑蛋白，登錄號XM—62131442蛋白質(zhì)小家鼠橋粒斑蛋白，登錄號XM—62131543核酸褐家鼠，與橋粒斑蛋白同工型II類似，登錄號XM—22525944蛋白質(zhì)褐家鼠，與橋粒斑蛋白同工型II類似，登錄號XIV^22526045核酸黑猩猩橋粒斑蛋白，登錄號XM—51822746蛋白質(zhì)黑猩猩橋粒斑蛋白，登錄號XM—51822847核酸紅原雞，與橋粒斑蛋白類似，登錄號XM一41895748蛋白質(zhì)紅原雞，與橋粒斑蛋白類似，登錄號XM—41895849核酸智人連接橋粒斑珠蛋白(JUP),轉(zhuǎn)錄變體2，登錄號NM—02199150蛋白質(zhì)智人連接橋粒斑珠蛋白(JUP),轉(zhuǎn)錄變體2，登錄號NM—02199251核酸小家鼠，橋粒斑珠蛋白；Y-連環(huán)蛋白，登錄號NM—01059352蛋白質(zhì)小家鼠，橋粒斑珠蛋白；Y-連環(huán)蛋白，登錄號NM—01059453核酸褐家鼠y-連環(huán)蛋白(橋粒斑珠蛋白)，登錄號NMJ)3104754蛋白質(zhì)褐家鼠Y-連環(huán)蛋白(橋粒斑珠蛋白)，登錄號NMJ)3104855核酸斑馬魚犰狳(armadillo)蛋白質(zhì)家族；橋粒斑珠蛋白，登錄號NM—13117756蛋白質(zhì)斑馬魚犰狳蛋白質(zhì)家族；橋粒斑珠蛋白，登錄號NM一13117857核酸熱帶爪蟾(Xew叩HS^TO//cflfc)連接橋粒斑珠蛋白，登錄號BC06471758蛋白質(zhì)熱帶爪蟾連接橋粒斑珠蛋白，登錄號BC06471859核酸家犬，與連接橋粒斑珠蛋白同工型10類似，登錄號XM—85662560蛋白質(zhì)家犬，與連接橋粒斑珠蛋白同工型10類似，登錄號^_85662661核酸非洲爪蟾Jup蛋白，登錄號BC09411662蛋白質(zhì)非洲爪蟾Jup蛋白，登錄號BC09411763核酸牛連接橋粒斑珠蛋白，登錄號NM—00100402464蛋白質(zhì)牛連接橋粒斑珠蛋白，登錄號NMJ)0100402565核酸豬Cftw化ro/fl)橋粒斑珠蛋白，登錄號NM一21432366蛋白質(zhì)豬橋粒斑珠蛋白，登錄號NM—21432467核酸斑馬魚連接橋粒斑珠蛋白，登錄號BC05830568蛋白質(zhì)斑馬魚連接橋粒斑珠蛋白，登錄號BC05830669核酸釀酒酵母(5ViccAaTOmj;cescerevZw'ae),橋粒斑珠蛋白/犰狳/卩-連環(huán)蛋白，登錄號AF00526770蛋白質(zhì)釀酒酵母，橋粒斑珠蛋白/犰狳/p-連環(huán)蛋白，登錄號AF00526871核酸智人網(wǎng)蛋白l,中間絲結(jié)合蛋白，登錄號NM一20138072蛋白質(zhì)智人網(wǎng)蛋白l,中間絲結(jié)合蛋白，登錄號NM—20138173核酸小家鼠網(wǎng)蛋白l(Plecl),轉(zhuǎn)錄變體ll,mRNA,登錄號NM—201394XM74蛋白質(zhì)小家鼠網(wǎng)蛋白l(Plecl),轉(zhuǎn)錄變體ll,mRNA,登錄號NM—201394XM75核酸牛，與網(wǎng)蛋白l同工型l(LOC510991)類似，登錄號XM—58823276蛋白質(zhì)牛，與網(wǎng)蛋白l同工型l(LOC510991)類似，登錄號XM—58823377核酸家犬，與網(wǎng)蛋白l同工型類似，登錄號XM—53920478蛋白質(zhì)家犬，與網(wǎng)蛋白l同工型類似，登錄號XM—53920579核酸克氏錐蟲(7>y/m"osoTOicr"zi),網(wǎng)蛋白樣蛋白，登錄號XM—80984980蛋白質(zhì)克氏錐蟲，網(wǎng)蛋白樣蛋白，登錄號XM—80985081核酸褐家鼠網(wǎng)蛋白，登錄號X5960182蛋白質(zhì)褐家鼠網(wǎng)蛋白，登錄號X5960283核酸黑線倉鼠(0/ce加/wsgrisetw)網(wǎng)蛋白，登錄號AF26075384蛋白質(zhì)黑線倉鼠網(wǎng)蛋白，登錄號AF26075485核酸智人周斑蛋白，登錄號NMJ)0270586蛋白質(zhì)智人周斑蛋白，登錄號NM—00270687核酸88蛋白質(zhì)89核酸卯蛋白質(zhì)91核酸92蛋白質(zhì)93核酸94蛋白質(zhì)95核酸96蛋白質(zhì)97核酸98蛋白質(zhì)99核酸100蛋白質(zhì)101核酸102蛋白質(zhì)103核酸104蛋白質(zhì)105核酸106蛋白質(zhì)107核酸108蛋白質(zhì)109核酸110蛋白質(zhì)111核酸112蛋白質(zhì)113核酸小家鼠周斑蛋白，登錄號NM一008卯9XM一358卯5小家鼠周斑蛋白，登錄號NM—008卯9XM—358906智人包斑蛋白，登錄號NM—001988智人包斑蛋白，登錄號NM一001989小家鼠包斑蛋白，登錄號NM—025276XM—283024小家鼠包斑蛋白，登錄號NMJ)25276XM一283025牛，與包斑蛋白類似，登錄號X1VL587641牛，與包斑蛋白類似，登錄號XM—587642家犬，與包斑蛋白類似，登錄號XM一540443家犬，與包斑蛋白類似，登錄號XM540444斑馬魚，與包斑蛋白類似,登錄號XM一687958斑馬魚，與包斑蛋白類似,登錄號XM一687959褐家鼠,與包斑蛋白類似,db一xrefGenelD:303687褐家鼠，與包斑蛋白類似,db—xrefGenelD:303688黑猩猩,與包斑蛋白類似,登錄號XM—511692黑猩猩,與包斑蛋白類似,登錄號XM一511693人大皰性類天皰瘡抗原，登錄號M63618人大皰性類天皰瘡抗原，登錄號M63619小家鼠大皰性類天皰瘡抗原l(Bpagl),登錄號AF396877小家鼠大皰性類天皰癡抗原l(Bpagl),登錄號AF396878小家鼠毛透明蛋白樣l,登錄號NM—027762小家鼠毛透明蛋白樣l,登錄號NM一027763牛，與毛透明蛋白樣l類似，登錄號XM—597026牛，與毛透明蛋白樣l類似，登錄號XM一597027智人毛透明蛋白樣l,登錄號NM—001008536XM—060104智人毛透明蛋白樣l,登錄號NM一001008536XM—060105紫海膽(5YTO"gy/ocew^mw/HOT"ratos),與毛透明蛋白類似，登錄號XM—793822114蛋白質(zhì)紫海膽，與毛透明蛋白類似，登錄號XM一793823115核酸克氏錐蟲毛透明蛋白，推定，登錄號XM—809758116蛋白質(zhì)克氏錐蟲毛透明蛋白，推定，登錄號XM一809759117核酸藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(G!'flfrf/atonMa)ATCC50803,毛透明蛋白，登錄號X1VL765825118蛋白質(zhì)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲ATCC50803,毛透明蛋白，登錄號XM—765826119核酸煙曲霉(Asperg"/"s/"m/gfl加s)AG93,毛透明蛋白，登錄號XMJ748643120蛋白質(zhì)煙曲霉Af293，毛透明蛋白，登錄號XM—748644121核酸家兔(ac"m'c"/HS)毛透明蛋白，登錄號Z1卯92122蛋白質(zhì)家兔毛透明蛋白，登錄號Z1卯93123核酸黑猩猩，與毛透明蛋白類似，登錄號XM—526770124蛋白質(zhì)黑猩猩，與毛透明蛋白類似，登錄號XM一526771125核酸人毛透明蛋白(TRHY),登錄號L09190126蛋白質(zhì)人毛透明蛋白(TRHY),登錄號L09191127核酸小家鼠富含脯氨酸的小蛋白3，登錄號NMJ)11478128蛋白質(zhì)小家鼠富含脯氨酸的小蛋白3，登錄號NMJ)11479129核酸智人富含脯氨酸的小蛋白2B(SPRR2B),登錄號NMJ)01017418130蛋白質(zhì)智人富含脯氨酸的小蛋白2B(SPRR2B),登錄號NM—001017419131核酸小家鼠毛囊蛋白AHF,登錄號XM—485271132蛋白質(zhì)小家鼠毛嚢蛋白AHF,登錄號XM一485272133核酸智人表斑蛋白1(EPPK1),登錄號NM—031308XM—372063134蛋白質(zhì)智人表斑蛋白1(EPPK1),登錄號NM—031308XM—372064135核酸小家鼠表斑蛋白1,登錄號NM—144848NM—173025136蛋白質(zhì)小家鼠表斑蛋白1,登錄號NMJ44848NM_173026137核酸小家鼠結(jié)構(gòu)蛋白FBFl,登錄號AF241249138蛋白質(zhì)小家鼠結(jié)構(gòu)蛋白FBFl,登錄號AF241250139核酸變形鏈球菌(5^e/7tococcHS附Mta附)抗原I/II的spaP基因，登錄號X17390140蛋白質(zhì)變形鏈球菌抗原I/II的spaP基因，登錄號X17391141核酸PCR引物Bag43的序列142核酸PCR引物Bag44的序列143核酸PCR引物Bag53的序列144核酸PCR引物Bag51的序列145核酸通過PCR引物L(fēng)ib148(SEQIDNo.:147)和Libl49(SEQIDNo.:148)擴(kuò)增的DNA片段146蛋白質(zhì)核酸分子SEQIDNo.:145的翻譯產(chǎn)物147核酸PCR引物L(fēng)ibl48的序列148核酸PCR引物L(fēng)ibl49的序列149核酸通過PCR引物L(fēng)ibl49(SEQIDNO.:148)和Libl50(SEQIDNO.:151)擴(kuò)增的DNA片段150蛋白質(zhì)核酸分子SEQIDNo.:149的翻譯產(chǎn)物151核酸PCR引物L(fēng)ibl50的序列152核酸通過PCR引物L(fēng)ibl51(SEQIDNo.:156)和Libl52(SEQIDNo.:157)擴(kuò)增的DNA片段153蛋白質(zhì)核酸分子SEQIDNo.:152的翻譯產(chǎn)物154核酸PCR引物L(fēng)ibl51的序列155核酸PCR引物L(fēng)ibl52的序列156蛋白質(zhì)KBD-B一3智人橋粒斑蛋白一登錄號NM一004415結(jié)構(gòu)域B-3157蛋白質(zhì)KBD-B_4智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-4158蛋白質(zhì)KBD-B—5智人橋粒斑蛋白一登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-5159核酸KBD-B一6智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-5160蛋白質(zhì)KBD-B—6智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-5161核酸智人多毛蛋白(trichoplein),BC004285162蛋白質(zhì)智人多毛蛋白，BC004285智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415,與SEQIDNo.:IDl相比在2715、8000和8000位附163核酸近具有核酸交換智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415,與SEQIDNo.:ID2相比在卯5、2687和2688位具有164蛋白質(zhì)氨基酸交換165核酸KBD-B_7智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-7166蛋白質(zhì)KBD-B_7智人橋粒斑蛋白—登錄號NM—004415結(jié)構(gòu)域B-7167核酸具有N-末端組氨酸固著點(diǎn)的KBD-D,智人斑菲素蛋白la登錄號NM.1005337168蛋白質(zhì)具有N-末端組氨酸固著點(diǎn)的KBD-D,智人斑菲素蛋白la登錄號NP.001005337具有C-末端組氨酸固著點(diǎn)的KBD-D氨基酸l-273,169核酸智人斑菲素蛋白la登錄號NM.001005337具有C-末端組氨酸固著點(diǎn)的BD-D氨基酸l-273,170蛋白質(zhì)智人斑菲素蛋白la登錄號NP.001005337171核酸PCR引物HRe6的序列172核酸PCR引物HRe9的序列173核酸PCR引物HRe7的序列174核酸PCR引物HRe8的序列175核酸PCR引物HRe26的序列176核酸PCR引物HRe27的序列披露下列實(shí)施例的目的在于舉例說明本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。這些實(shí)施例不應(yīng)視為窮盡的或限制本發(fā)明的主題。在實(shí)驗(yàn)說明中，使用下列縮寫(2陽氨基畫2畫甲基丙醇)AMP，(攝氏度)。C，(乙二胺四乙酸)EDTA，(1,1-二氟乙烷)HFC152，(化妝品成分國際命名法)INCI,(毫升)ml，(分鐘)min，(油/水)0/W，(聚乙二醇)PEG-25，(對氨基苯曱酸)PABA，(百萬分率)ppm，(適量)q.s.，(乙烯基吡咯烷酮)VP，(7J《/油)W/0，(活性成分)AI，(聚乙烯吡咯烷酮)PVP,角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(KBD)，人橋粒斑蛋白角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域B(KBD-B)，人橋粒斑蛋白角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域C(KBD-C)。實(shí)施例l:表達(dá)栽體和生產(chǎn)菌林測試多種表達(dá)載體的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(KBD)表達(dá)。為此，使用多種啟動子(例如IPTG誘導(dǎo)型、鼠李糖誘導(dǎo)型、阿拉伯糖(arabindose)誘導(dǎo)型、甲醇誘導(dǎo)型、組成型啟動子等)。同樣測試其中KBD作為融合蛋白表達(dá)的構(gòu)建體(例如為與硫氧還蛋白或eGFP或YaaD[枯草芽孢桿菌(及s"&i'fc),SWISS-PROT:P37527，PDX1等的融合體)。文中使用多種表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)所述的KBD-B(角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域B，SEQIDNo.:4)和KBD-C(角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域C，SEQIDNo.:IO)以及這兩種結(jié)構(gòu)域的組合。提及的栽體構(gòu)建體并旨在限制權(quán)利要求。作為實(shí)例代表給出了IPTG誘導(dǎo)型載體pQE30-KBD-B(圖1)、曱醇誘導(dǎo)型載體pLib15(圖2)和pLib16(圖3)以及誘導(dǎo)型載pLib19(圖4)的載體圖譜。用于KBD-C的方法也可以與所述載體構(gòu)建和表達(dá)方法類似。為了表達(dá)KBD，使用多種生產(chǎn)宿主，例如，大腸桿菌(五."http://)菌林(參見實(shí)施例2;例如XL10-Gold[Stratagene公司，BL21-CodonPlus[Stratagene^^司等等)。然而，也使用其它細(xì)菌生產(chǎn)宿主，例如，巨大芽孢桿菌(5""7/"s柳""ten'w/w)或枯草芽孢桿菌。就巨大芽孢桿菌中的KBD表達(dá)而言，按照與Barg，H.，Malten，M.&Jahn，D.(2005)Peoteinandvitaminproductionin5a"7/"51膨gflte/7'w附.IniVfe幼o(hù)rf!s/"B/Cec/rw0/ogj;-Af/cn6iVi//Vodwcte必/Cnwi^J5/^尸附fl&Vw51(Barredo,J廣L.編輯，205-224)中類似的方式實(shí)施所述方法。所用的真菌生產(chǎn)菌株為巴斯德畢赤氏酵母(尸/c/i/a/7^to&)(參見實(shí)施例3;例如GS11S和KM71[均來自英駿公司(Invitrogen)]等等)和構(gòu)巢曲霉045/7ew/〃附mWw/""s)(參見實(shí)施例4;例如RMS011[Stringer,MA，Dean，RA,Sewall,TC，Timberlake，WE(1991)Rodletless，anew卻，7/附developmentalmutantinducedbydirectgeneactivation.GenesDev5:1161-1171和SRF200[Karos，M，F(xiàn)ischer，R(1999)MolecularcharacterizationofHymA，anevolutionarilyhighlyconservedandhighlyexpressedproteinof^s/7Cg/〃MS1附V/w/a肌MolGenetGenomics260:510-5211等等)。然而，還有可能使用其它真菌生產(chǎn)宿主，例如，黑曲霉(Js/^/^7/附"/ger)(與EP0635574Al和/或WO98/46772類似的KBD表達(dá))進(jìn)行KBD表達(dá)。實(shí)施例2:使用IPTG誘導(dǎo)型啟動子通過例如表達(dá)質(zhì)粒pQE30-KBD-B在大腸桿菌菌抹中表達(dá)KBD為了表達(dá)，使用多種生產(chǎn)宿主，例如，多種大腸桿菌菌林(例如XL10-Gold[Stratagene公司，BL21-CodonPlus[Stratagene公司等等)、巨大芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌等。本文所述的——作為實(shí)例的代表——是使用pQE30-KBD-B轉(zhuǎn)化的大腸桿菌克隆和表達(dá)KBD-B:pQE30-KBD-B的克隆-由人角化細(xì)胞的cDNA文庫(BD生物科學(xué)系統(tǒng)克隆技術(shù)y〉司(BDBioscience,Clontech)，人角化細(xì)胞cDNA，包皮，對數(shù)期原代培養(yǎng)物，載體Xgtll)制備k-MaxiDNA(DNA-XMaxi試劑盒，Qiagen公司)。使用下列寡核苷酸進(jìn)行PCR:Bag43(5，畫GGTCAGTTACGTGCAGCTGAAGG-3，)(SEQIDNo.:141)和Bag44(5，GCTGAGGCTGCCGGATCG畫3，)(SEQIDNo.:142)50piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩沖液XDNA(744ng/pl)dNTP混合物(10mM)寡Bag43(192ng/^d)寡Bag44(181ng/pl)Pfu超高保真聚合酶H205pi1pl(l:30稀釋液)0.5^10.5pi1pi41pi溫度程序2min-95。C「30sec-95°C30x乂30sec-梯度50C->60"C、2min30sec-72。C10min-72。C-在瓊脂糖凝膠上切下所得約1102bp大小的PCR產(chǎn)物并純化之,-使用純化的PCR產(chǎn)物作為模板，然后進(jìn)行二次PCR:所用的寡核苷酸Bag53:(5，-CGCGCCTCGAGCCACATACTGGTCTGC-3，)(SEQIDNo.:143)和Bag51(5，-GCTTAGCTGAGGCTGCCGGATCG-3，)(SEQIDNo.:144)50plPCR混合物10xPCR緩沖液TAQ:5jnl來自上述PCR的模板3.5pidNTP混合物(10mM)1pi寡Bag53(345ng/|nl)0.5|nl寡Bag51(157ng/|iil)0.5piTA聚合酶1piH2039pi溫度程序:2mill-95。C"30sec-95°C30x<30sec-58。CL3min-72°C10min-72。C-在瓊脂糖凝膠上切下所得約1073bp大小的PCR產(chǎn)物，純化并在下列載體中克隆pCR2.1-TOPO(英駿公司)。-然后轉(zhuǎn)化所得載體pCR2.1-TOPO+KBD-B(5027bp)，在大腸桿菌中擴(kuò)增，然后用XhoI和EcoRI切割，并在pBAD/HisA(英駿公司；同樣用XhoI和EcoRI切割)中克隆所得KBD-B片段。-再次用SacI和StuI切割新形成的pBAD/HisA+KBD-B(5171bp)，并在pQE30(Qiagen公司；用SacI和SmaI切割)中克隆所得KBD-B片段。利用所得的表達(dá)載體pQE30-KBD-B(4321bp;參見圖1)進(jìn)行下列KBD-B表達(dá)。大腸桿菌中的載體pQE30-KBD-B表達(dá)的KBD-B(SEQIDNo.:4)額外包括N-末端的氨基酸MRGSHHHHHHGSACEL和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS(SEQIDNo.:166)。大腸桿菌中pQE30-KBD-B表達(dá)的KBD-B-以pQE30-KBD-B轉(zhuǎn)化的大腸桿菌菌林(例如XL10-Gold[Stratagene公司])的平板或甘油培養(yǎng)物接種預(yù)培養(yǎng)物。根據(jù)主培養(yǎng)物大小的不同，在試管或小燒瓶中使用LB培養(yǎng)基進(jìn)行接種(約1:100)。畫根據(jù)所用的菌林使用抗生素(就pQE30-KBD-B而言使用氨節(jié)西林100jig/ml)。-在250rpm和37。C進(jìn)行孵育。-使用預(yù)培養(yǎng)物按照大約1:100接種主培養(yǎng)物，主培養(yǎng)物L(fēng)B培養(yǎng)基或合適的含有相應(yīng)抗生素的基本培養(yǎng)基。在250rpm和37'C孵育。-對高于0.5的OD(600mn)進(jìn)行l(wèi)mMIPTG誘導(dǎo)。-在誘導(dǎo)4小時(shí)后，離心除去細(xì)胞。在發(fā)酵罐中，方法類似，不過，有可能在高得多的OD單位下進(jìn)行誘導(dǎo)且由此顯著增加細(xì)胞和蛋白質(zhì)產(chǎn)率。實(shí)施例3:通過使用甲醇誘導(dǎo)型啟動子通過例如表達(dá)質(zhì)粒pLib15和pLib16(搖瓶)在巴斯德畢赤氏酵母菌抹中進(jìn)行KBD的胞內(nèi)和分泌表達(dá)為了進(jìn)行KBD表達(dá)，使用多種巴斯德畢赤氏酵母菌林，例如，GS115和KM71(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版；英駿生命技術(shù)公司(InvitrogenLifeTechnologies))。本文所述的是一一作為實(shí)例的代表一一使用pLibl5(胞內(nèi)表達(dá)載體，參見圖6)或pLib16(分泌表達(dá)載體，參見圖7)轉(zhuǎn)化的巴斯德畢赤氏酵母表達(dá)KBD-B。-為了構(gòu)建pLib15，通過PCR擴(kuò)增948bp大小的KBD-B編碼DNA片段(SEQIDNo,:145)，使用寡核苷酸Libl48(5，-GCTAAGGAATTCACCATGCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT-3，(SEQIDNo.:147))和Libl49(5,-GCTGGAGAATTCTCAGCTAATTAAGCTTGGCTGCA畫3，(SEQIDNo.:148))，以載體pQE30-KBD-B(實(shí)施例2，圖5)作為模板。此處在PCR產(chǎn)物的兩端引入EcoRI限制位點(diǎn)。-為了構(gòu)建pLib16，通過PCR擴(kuò)增942bp大小的KBD-B編碼DNA片段(SEQIDNo.:149)，4吏用寡核苷酸Libl49(5，-GCTGGAGAATTCTCAGCTAATTAAGCTTGGCTGCA-3，(SEQIDNo.:148))和Libl50(5，國GCTAAGGAATTCCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT-3，(SEQIDNo.:151))，以載體pQE30-KBD-B(實(shí)施例2，圖5)作為模板。此處在PCR產(chǎn)物的兩端引入EcoRI限制位點(diǎn)。-在具有如下組成的50nl反應(yīng)混合物中進(jìn)行PCR:1nl質(zhì)粒DNApQE30-KBD-B1pldNTP混合物(各10mM;艾本德股份公司(Eppendorf))5pi10xPCR緩沖液十MgCl2(羅氏(Roche))1nlLibl48或Lib1505，引物(相當(dāng)于50pmol)1jilLibl493，引物(相當(dāng)于50pmol)5UPwo聚合酶(羅氏(Roche))在下列循環(huán)條件下進(jìn)行PCR良應(yīng):步驟l:5分鐘，95。C(變性)步驟2:45秒，95。C步驟3:45秒，50。C(退火)步驟4:2分鐘，72'C(延伸)步驟2-4的30個(gè)循環(huán)步驟5:IO分鐘，72°C(延伸后)步驟6:4'C(停止)-用EcoRI消化使用寡核苷酸Libl48/Libl49擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物(SEQIDNo.:145)并連入EcoRI切割的載體pPIC3.5(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版，英駿公司)中。通過對連接產(chǎn)生的載體pLib15(圖6)進(jìn)行測序來檢驗(yàn)正確的KBD-B擴(kuò)增。-用EcoRI消化使用寡核苷酸Libl49/Libl50擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物(SEQIDNo.:149)并連入EcoRI切割的載體pPIC9(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版，英駿公司)中。通過對連接產(chǎn)生的載體pLibl6(圖7)進(jìn)行測序來檢驗(yàn)正確的KBD-B擴(kuò)增。-按照制造商的說明(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版，英駿公司)用環(huán)狀和StuI線性化的載體pLibl5和pLibl6轉(zhuǎn)化巴斯德畢赤氏酵母的電感受態(tài)細(xì)胞和球狀體。-通過PCR和Southern(DNA)印跡使用染色體DNA分析轉(zhuǎn)化體。-就預(yù)培養(yǎng)物而言，從平板或甘油培養(yǎng)物中接種表達(dá)KBD-B的巴斯德畢赤氏酵母轉(zhuǎn)化體。根據(jù)主培養(yǎng)物的大小，在試管或小燒瓶中使用MGY/BMG或BMGY培養(yǎng)基(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版，英駿公司)(約1:100)進(jìn)行接種。_培養(yǎng)物在250-300rpm和30X:孵育至OD6(Mr2-6。-室溫1500國3000xg5min收集細(xì)胞。-就主培養(yǎng)物而言，將收集的細(xì)胞沉淀以O(shè)D6。(Tl溶于含甲醇的MM、BMM或BMMY培養(yǎng)基(畢赤氏酵母表達(dá)試劑盒，M版，英駿公司)中，以誘導(dǎo)表達(dá)。-主培養(yǎng)物在250-300rpm和30。C孵育l-96小時(shí)。-每隔24小時(shí)添加100%甲醇至0.5%的甲醇終濃度而維持誘導(dǎo)。-就胞內(nèi)表達(dá)而言，在主培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞并通過Menton-Gaulin勻漿枳J皮碎。-就分泌表達(dá)而言，收集培養(yǎng)物上清液并且從中直接純化KBD-B。畫巴斯德畢赤氏酵母胞內(nèi)表達(dá)的KBD誦B(SEQIDNo.:145)(pLibl5)除多肽序列SEQIDNo.:4外，還額外包括N-末端的氨基酸MHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。-巴斯德畢赤氏酵母分泌表達(dá)的KBD-B(SEQIDNo.:149)(pLibl6)在加工前除多肽序列SEQIDNo.:4外，還額外包括N-末端的氨基酸VAVLPFSNST麗GLLFINTTIASIAAKEEGVSLEKREAEAYVEFHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。-由巴斯德畢赤氏酵母加工并分泌的KBD-B(SEQIDNo.:149)(pLibl6)除多肽序列SEQIDNo.:4外，還額外包括N-末端的氨基酸YVEFHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。實(shí)施例4:通過使用誘導(dǎo)型alcA啟動子通過例如表達(dá)質(zhì)粒pLib19(搖瓶)在構(gòu)巢曲霉菌4朱中表達(dá)KBD為了進(jìn)行表達(dá)，使用構(gòu)巢曲霉野生型菌抹，例如，RMS011或SRF200。本文描述的是一一作為實(shí)例的代表一一使用pLibl9(圖8)轉(zhuǎn)化的構(gòu)巢曲霉表達(dá)KBD-B。-為了構(gòu)建pLib19，通過PCR擴(kuò)增922bp大小的KBD-B編碼DNA片段(SEQIDNo.:152),使用寡核苷酸Libl51(5'畫CACCATGCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT國3，(SEQIDNo.:154))和Libl52(5，-GCTAATTAAGCTTGGCTGCA3，(SEQIDNo.:155))，以載體pQE30-KBD-B(實(shí)施例2，圖5)作為模板(使用上述PCR條件，其中PCR程序的退火溫度為與引物L(fēng)ibl51和Libl52的Tm值相適應(yīng)的53。C)。將PCR產(chǎn)物連入載體pENTR/D(pENTRTM定向TOPO⑧克隆試劑盒，E版，英駿公司)。通過測序檢驗(yàn)正確的KBD-B擴(kuò)增。-使用"GatewayLRclonaseTM酶混合物"(英駿公司)使KBD-B編碼DNA片段重組到栽體pMT-OvE(ToewsMW，WarmboldJ，KonzackS,RischitorP，VdthD,VienkenK,VinuesaC，WeiH,FischerR;EstablishmentofmRFPlasafluorescentmarkerin/15/7erg,7/附mV/"/fl朋andconstructionofexpressionvectorsforhigh-throughputproteintaggingusingrecombinationinvitro(GATEWAY).(2004)CurrGenet45:383-389)中。該過程產(chǎn)生載體pLibl9(圖8)。-使用環(huán)狀載體pLibl9轉(zhuǎn)化構(gòu)巢曲霉野生型菌抹的原生質(zhì)體(YeltonMM，HamerJE，TimberlakeWE;TransformationofA/wg,7/附wiV/w/a附byusingatrpCplasmid(1984)ProcNatlAcadSciUSA81:1479-1474)。通過PCR和Southern印跡，使用染色體DNA分析轉(zhuǎn)化體。畫為了預(yù)培養(yǎng)表達(dá)KBD-B的構(gòu)巢曲霉轉(zhuǎn)化體，在500ml燒瓶內(nèi)的100ml基本培養(yǎng)基(0.6。/0NaN03;0.152%KH2P04;0.052%KC1[pH6.5；0.8%葡萄糖；0.05%MgS04;1ml微量元素溶液[lg/1FeS04x7H20;8.8g/1ZnS04x7H20;0.4g/1CuS04x5H20;0.15gAMnS04x4H20;0.1g/1Na2B407x10H20;0.05g/l(NH4)6Mo7024x4H20；+菌林特異性補(bǔ)充劑)或100ml完全培養(yǎng)基(2。/。麥芽精；0，1%蛋白胨；2%葡萄糖；十菌林特異性補(bǔ)充劑)上接種106-107個(gè)孢子并在200-250rpm和37°C孵育16-24小時(shí)。-在預(yù)培養(yǎng)后，過濾收集真菌菌絲體，用蒸餾水洗滌，并轉(zhuǎn)入含有100-500ml新鮮基本培養(yǎng)基的燒瓶。在這種主培養(yǎng)基中，使用0.1%的果糖替代葡萄糖作為碳源。為了誘導(dǎo)KBD表達(dá)，另外向培養(yǎng)基中加入乙醇(1%終濃度)或甘油(50mM)或乙酸鈉(50mM)或乙胺或蘇氨酸。所述用于誘導(dǎo)表達(dá)的添加劑并非旨在限制權(quán)利要求。主培養(yǎng)物在200-250rpm和"'C再孵育5-48小時(shí)。_在培養(yǎng)結(jié)束后，于室溫以1500-3000xg5min收集真菌菌絲體，并通過Menton-Gaulin勻漿機(jī)破碎。-除多肽序列SEQIDNo.:4外，在構(gòu)巢曲霉中表達(dá)的KBD-B(SEQIDNo.:152)(pLibl9)還包括N-末端的氨基酸MHHHHHH和C-末端的氨基酸FPLVRVNCALGVIMVIAVSCVKLLSAHNSTQHTSRKHKV,實(shí)施例5:細(xì)胞破碎和包涵體純化(pQE30-KBD-B)可溶性表達(dá)的KBD可在細(xì)胞破碎(例如通過Menton-Gaulin勻漿機(jī))后直接使用，或通過層析純化(參見實(shí)施例6)。不溶性表達(dá)的KBD(例如在包涵體中)如下純化-離心發(fā)酵罐內(nèi)含物，將沉淀懸浮于pH=7.5的20mM磷酸鹽緩沖液中，并通過Menton-Gaulin勻漿機(jī)破碎。-再次離心破碎的細(xì)胞(15000g)，使用20mM磷酸鹽、500mMNaCl和8M尿素處理沉淀，隨后攪拌(溶解包涵體)。-將上清液的pH調(diào)整至7.5。-然后再次離心，將上清液進(jìn)樣到Ni螯合瓊脂糖凝膠柱上，并如實(shí)施例6所述進(jìn)行純化。實(shí)施例6:Ni螯合瓊脂糖凝膠柱上角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域B的純化KBD可以通過附著在Ni柱上的His標(biāo)簽進(jìn)行層析純化。柱材料高效Ni-瓊脂糖凝膠安瑪西亞生物科學(xué)(AmershamBiosciences)目錄號17-5268-02將材料填充入柱(例如直徑2.6cm,高1011)并用緩沖液八+4%緩沖液B(相當(dāng)于20mMn米唑)平衡。蛋白質(zhì)提取物(例如，參見細(xì)胞破碎和包涵體純化)以pH7.5經(jīng)超容量杯(Superloop)(AKTA系統(tǒng))(流速約5ml/min)進(jìn)樣到柱上。在上柱后，<吏用緩沖液A+20mM咪唑進(jìn)行洗滌。使用緩沖液B(溶于緩沖液A中的500mM咪唑)進(jìn)行洗脫。使用級分收集器收集級分的洗脫液。然后使洗脫液脫鹽(有利于待濃縮的樣品)。為此，用例如葡聚糖(Sephadex)G25介質(zhì)柱(安瑪西亞(Amersham))對洗脫液進(jìn)行脫鹽。然后，為了進(jìn)行濃縮，可以使用例如Amicon超濾裝置(攪拌的超濾池，密理博公司(Millipore))。緩沖液A:20mM磷酸二氫鈉500mMNaCl(若需要，還有可能使用更低NaCl濃度的緩沖液)8M尿素(若層析可溶性表達(dá)的"活性"KBD，則無需使用尿素；不用尿素時(shí)無需隨后的蛋白質(zhì)復(fù)性)pH=7.50緩沖液B:20mM磷酸二氫鈉500mMNaCl(若需要，還有可能使用更低NaCl濃度的緩沖液)8M尿素500mM咪哇pH=7.50實(shí)施例7:角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域B的復(fù)性不溶性表達(dá)的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(例如來自包涵體)可以如下復(fù)性并由此活化方法l:不連續(xù)透析將6.5mlCellyticIB(希格瑪(Sigma)，目錄號C5236)和5mMDTT加入到在8M尿素中的6.5mlKBD-B包涵體(Ni螯合柱洗脫液，HiTrap)中。然后將復(fù)性的溶液傾入透析管(型譜SpectraPorMWCO:12-14kD)。在4。C在116M尿素溶液中進(jìn)行約12小時(shí)透析，同時(shí)小心攪拌。加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此進(jìn)行9小時(shí)透析。隨后再添加250mlTris緩沖液(同上)并再透析12小時(shí)。然后再加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此進(jìn)行9小時(shí)透析。隨后再添加250mlTris緩沖液(同上)并再透析12小時(shí)。然后再加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此進(jìn)行9小時(shí)透析。然后將含透析液的透析管放入21:25mMTris+150mMNaClpH=7.50中。然后在4。C再進(jìn)行12小時(shí)透析。然后取出透析管內(nèi)含物。方法2:連續(xù)透析用10mlCellyticIB(希格瑪，目錄號C5236)和5mMDTT處理在8M尿素中的20mlKBD-B包涵體(Ni螯合柱洗脫液，HiTrap)。然后將溶液傾入透析室Slide-A-Lyzer透析盒PIERCE,MWCO:10kD.目錄號66830。然后在4'C在116M尿素溶液中進(jìn)行約l小時(shí)透析。然后在48小時(shí)期限內(nèi)，通過蠕動泵連續(xù)計(jì)量供給2l如下緩沖液25mMTris/HClpH=7.5。然后將含透析液的透析管加入到2l的終緩沖液中25mMTris+150mMNaClpH=7.50并在4。C進(jìn)行約12小時(shí)透析。然后取出透析管內(nèi)含物。實(shí)施例8:與皮膚的結(jié)合l(定性)研發(fā)了視覺定性試驗(yàn)以研究KBD是否結(jié)合皮膚。所用的溶液封閉溶液羅氏Western封閉試劑1921673(10x溶液)的TBS稀釋液。TBS:20mMTris;150mMNaClpH7.5TTBS:TBS+0.05%Tween20第一步為將皮膚的外角蛋白層轉(zhuǎn)移至穩(wěn)定的支持物上。為此，將透明膠帶牢固地施用于脫毛的人皮膚上并再次取下。所述試驗(yàn)可以直接在透明膠帶上進(jìn)行，或可以將粘附的角蛋白層通過再度粘附而轉(zhuǎn)移至載玻片上。如下證實(shí)結(jié)合-為了與多種試劑一起孵育，轉(zhuǎn)至Falcon管中；-適用的情況下添加乙醇以便脫脂，然后除去乙醇并干燥載玻片；-與封閉緩沖液于室溫一起孵育l小時(shí)；畫4吏用TTBS'冼'滌2x5min;國使用TBS洗滌1x5min;-與在TBS/0.05。/0Tween20中的待測KBD(與標(biāo)簽——例如His6、HA等偶聯(lián))或?qū)φ盏鞍踪|(zhì)于室溫一起孵育2-4小時(shí)；-除去上清液；-用TBS洗潦3次-與在TBS+0.01%封閉緩沖液中按照1:2000稀釋的單克隆抗聚組氨酸(或特異性KBD家兔)抗體于室溫一起孵育1小時(shí)；-用TTBS洗滌2x5min;-用TBS洗滌1x5min;-與在TBS+0.01。/。封閉緩沖液中按照l:5000稀釋的抗小鼠IgG堿性磷酸酶綴合物于室溫一起孵育1小時(shí)；-用TTBS洗滌2x5min;-用TBS洗滌lx5min;-添加磷酸酶底物(NBT-BCIP;勃林格殷格翰公司(Boehringer)MA1片/40ml7K,2.5min;反應(yīng)用水終止)；-用棵眼或使用顯微鏡對有色沉淀進(jìn)行視覺檢測。沉淀顯藍(lán)色表示KBD與皮膚結(jié)合。實(shí)施例9:與皮膚的結(jié)合2(定量)研發(fā)了定量試驗(yàn)，可以將KBD的毛發(fā)/皮膚結(jié)合強(qiáng)度與非特異性蛋白質(zhì)進(jìn)行比較。利用5mm木塞鉆孔器在無毛發(fā)的解凍干燥皮膚塊(人或豬)上鉆下切片(或就表面試驗(yàn)而言，將皮膚切片插入Falcon蓋中)。然后將皮膚樣品轉(zhuǎn)換成2-3mm厚度，以除去任何存在的組織。然后將皮膚樣品轉(zhuǎn)至Eppendorf管(蛋白質(zhì)低度結(jié)合)中，以進(jìn)行結(jié)合驗(yàn)證(參見圖9;可選地還可以使用來自歐萊雅(L，Oreal)的Episkin系統(tǒng)[重構(gòu)的人皮膚-用PBS/0.05。/oTween20洗滌2次；-添加溶于PBS的1ml1%BSA,并于室溫輕搖(900rpm)孵育l小時(shí)；-除去上清液；畫添加溶于含有0.05。/oTween20的PBS中的100照KBD;于室溫輕搖(900rpm)孵育2小時(shí)；-除去上清液；-用PBS/0.05。/oTween20洗滌3次；畫與lml單克隆小鼠抗標(biāo)簽(His6或HA或特異性KBD)抗體的過氧化物酶的綴合物(在含有0.05%Tween20的PBS中按照1:2000稀釋)[單克隆抗聚組氨酸過氧化物酶綴合物，在小鼠中生產(chǎn)，凍千粉，希格瑪于室溫輕搖(900rpm)孵育2-4小時(shí)；畫用PBS/0.05。/oTween20洗滌3次；-添加過氧化物酶底物(lml/Eppendorf管；組成參見下文)；-進(jìn)4亍反應(yīng)至顯藍(lán)色(約90秒)；-使用100pl2MH2S04終止反應(yīng)；-在405nm處測量吸收值。過氧化物酶底物(預(yù)先現(xiàn)配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO中的42mMTMB)+101111底物緩沖液(0.1]\1乙酸鈉，pH4.9)+14.7H2023%濃度實(shí)施例10:與毛發(fā)的結(jié)合(定量)為了還能夠證實(shí)KBD相對于其它蛋白質(zhì)而言與毛發(fā)的結(jié)合強(qiáng)度，研發(fā)了定量測定法(參見圖9)。在本試驗(yàn)中，首先將毛發(fā)與KBD—起孵育并洗掉過量的KBD。然后通過KBD的His標(biāo)簽偶聯(lián)抗體-過氧化物酶綴合物。再次洗掉未結(jié)合的抗體-過氧化物酶綴合物。結(jié)合的抗體-過氧化物酶綴合物[單克隆抗聚組氨酸過氧化物酶綴合物，在小鼠中生產(chǎn)，凍干粉，希格瑪可以將無色底物(TMB)轉(zhuǎn)化成有色產(chǎn)物，可以在405nm處通過光度測定法測量。光吸收強(qiáng)度表示結(jié)合的KBD或?qū)Ρ鹊鞍踪|(zhì)的量。例如，選擇的對比蛋白質(zhì)為來自枯草芽孢桿菌的YaaD，同樣具有一一本試驗(yàn)所必需的一一用于檢測的His標(biāo)簽。作為對His標(biāo)簽的替代，還可以使用與過氧化物酶綴合的其它非特異性抗體。將5mg毛發(fā)(人)切成長5mm的區(qū)段并轉(zhuǎn)移至Eppendorf管(蛋白質(zhì)低度結(jié)合)，以進(jìn)行結(jié)合驗(yàn)證-添加lml乙醇以進(jìn)行脫脂；-離心，除去乙醇并用1120洗滌毛發(fā)；-添加lml溶于PBS的lo/。BSA并于室溫輕搖孵育l小時(shí)；-離心，除去上清液；-添加處于lmlPBS/0.05%Tween20中的待測角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(與標(biāo)簽一一如His。HA等偶聯(lián))或?qū)φ盏鞍踪|(zhì)；在4。C輕搖孵育16小時(shí)(或于室溫至少2小時(shí))；-離心，除去上清液；-用PBS/0.05Q/oTween20洗滌3次；-與lml單克隆小鼠抗標(biāo)簽(His6或HA)抗體的過氧化物酶綴合物(在PBS/0.05%Tween20中按照1:2000稀釋)[單克隆抗聚組氨酸過氧化物酶綴合物，在小鼠中生產(chǎn)，凍千粉，希格瑪l于室溫輕搖孵育2-4小時(shí)；-用PBS/0.05o/oTween20洗滌3次；-添加過IU匕物酶底物(lml/Eppendorf管)；-進(jìn)行反應(yīng)直至顯藍(lán)色(約2分鐘)；-使用100pl2MH2S04終止反應(yīng)；-在405nm處測定光吸收。過氧化物酶底物(用前現(xiàn)配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+10ml底物緩沖液(O.lM乙酸鈉pH4.9)+14.7ilU112023%濃度BSA=牛血清白蛋白PBS=磷酸鹽緩沖溶液Tween20=聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯，n約為20TMB=3，5，3，，5，畫四曱基聯(lián)苯胺作為實(shí)例，毛發(fā)上KBD-B的結(jié)合試驗(yàn)證實(shí)了KBD-B(SEQIDNo.:166)與毛發(fā)的結(jié)合明顯優(yōu)于對比蛋白質(zhì)YaaD明顯較差的結(jié)合表4.:毛發(fā)定量KBD活性試驗(yàn)1)緩沖液；2)對比蛋白質(zhì)YaaD;3)變性KBD-B;4)復(fù)性KBD-B。該表顯示了405nm處測量的吸收值。<table>tableseeoriginaldocumentpage92</column></row><table>實(shí)施例ll:使用具有IPTG誘導(dǎo)型啟動子的表達(dá)質(zhì)粒pRee024(圖8)通過大腸桿菌菌林表達(dá)KBD-D(SEQIDNo.:167)為了進(jìn)行表達(dá)，使用大腸桿菌菌林XLIOGold[Stratagene公司。本文作為實(shí)例描述了KBD-D(SEQIDNo.:167)的克隆和隨后KBD-D蛋白質(zhì)(SEQIDNo.:168)在pRee024(圖8)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌中的表達(dá)pRee024的克隆-由人角化細(xì)胞cDNA文庫(BD生物科學(xué)系統(tǒng)克隆技術(shù)公司，人角化細(xì)胞cDNA，包皮，對數(shù)期原代培養(yǎng)物，載體kgtll)制備X-MaxiDNA(DNA-kMaxi試劑盒，Qiagen公司)。擴(kuò)增KBD-D基因的PCR分兩步進(jìn)行。首先獨(dú)立低擴(kuò)增5，端和3，端。這些片段為擴(kuò)增完整KBD-D基因的基質(zhì)。如下進(jìn)行擴(kuò)增5，端的PCR:引物具有如下序列HRe6:5，-ATGAACCACTCGCCGCTCAAGACCGCCTTG-3，(SEQIDNo.:171)HRe9:5，-CGTTCCCGGTTCTCCTCAGGAGGCTGACTG-3，(SEQIDNo.:172)100pIPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩沖液10pi入DNA(744ng/pl)1pi(1:IO稀釋)dNTP混合物(10mM)10HRe6(196ng/|iU)1^HRe9(201ng/pl)1jilPfu超高保真聚合酶1^雙蒸水76pi溫度程序2min95。C30sec95°C《30x30sec63。C1min30sec72°C訓(xùn)在瓊脂糖凝膠中檢測到約lkb大小的片段。純化反應(yīng)產(chǎn)物并在下面用作擴(kuò)增KBD-D基因的5，端模板。如下進(jìn)4于3，端擴(kuò)增的PCR:引物具有如下序列HRe7:5，國TTAGAATCGGGAGGTGAAGTTCCTGAGGCT-3，(SEQIDNo.:173)HRe8:5,-CACCACCAACAAGCTGGAGACCCGGAG-3，(SEQIDNo.:174)100piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩沖液10piiDNA(744ng>l)1jul(1:10稀釋)dNTP混合物(10mM)10HRe7(201ng/pl)1plHRe8(209ng/pl)1|tilPfu超高保真聚合酶1^雙蒸水76溫度程序2min95°C30sec95。C3030sec63°CL1min30sec72°C-在瓊脂糖凝膠中檢測到約1.2kb大小的片段。純化反應(yīng)產(chǎn)物并在下面用作擴(kuò)增KBD-D基因的3，端模板。-為了擴(kuò)增KBD-D基因，將5，端模板和3，端模板用作基質(zhì)。PCR如下進(jìn)行100piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩沖液10dNTP混合物(10mM)10jul雙蒸水75jil5，端模板1^tl3，端模板1piPfu超高保真聚合酶1^ilH2076pi溫度程序f60sec94。C10xt300sec72"C一在10個(gè)循環(huán)后，加入lpl引物HRe6(196照/ml)和HRe7(206jng/ml)和1jlUPfu超高保真聚合酶并按照如下溫度程序進(jìn)行反應(yīng)溫度程序2min95。C30sec95°C30x30sec63nL1min30sec72。C然后加入lplTaq聚合酶并將混合物在72'C孵育10分鐘。-在瓊脂糖凝膠上切下約2150bp大小的所得PCR產(chǎn)物，純化并在下列載體中克隆pCR2.1-TOPO(英駿)。-然后轉(zhuǎn)化所得載體pRee019(6112bp),在大腸桿菌中擴(kuò)增并通過測序檢驗(yàn)KBD-D基因。隨后將KBD-D基因克隆入表達(dá)載體。為此，使用載體pRee019作為模板再進(jìn)行PCR:所用的寡核苷酸HRe26:5-CTCGGTACCAACCACTCGCCGCTCAAGACCGCCTTGGCG-3，(SEQIDNo.:175)HRe27:5-ATTAAGCTTTTAGAATCGGGAGGTGAAGTTCCTGAGGCT畫3'(SEQIDNo.:176)100plPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩沖液10jUpRee019(25ng/|Lil)1jtldNTP混合物(10mM)10plHRe26(287ng/pl)1|nlHRe27(354ng/jd)1plPfll超高保真聚合酶1]Ld雙蒸水76pi溫度程序「2min95。C30sec95°C3030sec79。C、lmin30sec72。C-在瓊脂糖凝膠中檢測到約2.2kb大小的片段。純化反應(yīng)產(chǎn)物，然后使用限制性內(nèi)切核酸酶KpnI和HindIII切割；將所得片段克隆入表達(dá)載體。該步驟得到載體pRee024，隨后將其用于KBD-D表達(dá)。大腸桿菌中pRee024的KBD-D(SEQIDNo.:167)表達(dá)-由pRee024轉(zhuǎn)化的大腸桿菌菌林(例如TG10)的平板或甘油培養(yǎng)物接種預(yù)培養(yǎng)物。根據(jù)主培養(yǎng)物大小的不同，在試管或小燒瓶中使用LB培養(yǎng)基進(jìn)行接種(約I:IOO)。畫根據(jù)所用的菌林使用抗生素(就使用pRee024轉(zhuǎn)化的大腸桿菌TGIO而言使用氨千西林IOOpg/ml)。畫在250rpm和37。C進(jìn)行孵育。-主培養(yǎng)物按照約1:100接種預(yù)培養(yǎng)物，主培養(yǎng)物L(fēng)B培養(yǎng)基或含有相應(yīng)抗生素的合適的基本培養(yǎng)基。在250rpm和37'C孵育。-在高于l的ODs78nm時(shí)以lmMIPTG進(jìn)行誘導(dǎo)。然后使孵育溫度降至室溫(約加。C)。細(xì)胞在誘導(dǎo)后離心2小時(shí)(參見圖9)。實(shí)施例12:細(xì)胞破碎和包涵體純化(pRee024)不溶性表達(dá)的KBD-D(SEQIDNo.:168)(例如在包涵體中)如下純化將來自實(shí)施例2的細(xì)胞沉淀重懸于含有100mMNaClpH=7.5的20mM磷酸鹽緩沖液中，并通過超聲處理破碎。再次離心石皮碎的細(xì)胞(4。C，12000g，20分鐘)。棄去上清液。將沉淀溶于緩沖液A(10mMNaH2P04，2mMKH2P04，100mMNaCl，8M尿素，5mMDTT)中。然后再次離心混合物，并將上清液上樣到Ni螯合瓊脂糖凝膠柱上。在上樣后，使用緩沖液A和20mM咪唑進(jìn)行洗滌。使用緩沖液B(10mMNaH2P04，2mMKH2P04，100mMNaCl,8M尿素，5mMDTT,500mM咪唑)進(jìn)行柱洗脫。收集級分洗洗脫液，并通過SDS-PAGE分析。如實(shí)施例13所述復(fù)性含純化KBD-D的級分。實(shí)施例13:角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域D(SEQIDNo.:168)的復(fù)性不溶性表達(dá)的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域D(例如來自包涵體)可以通過透析復(fù)性并由此活化。方法如下將來自實(shí)施例12包含純化KBD-D的級分傾入透析管(MWCO12-14KD)。然后在118M尿素溶液中進(jìn)行透析約1小時(shí)。然后在12小時(shí)期限內(nèi)，通過蠕動泵連續(xù)計(jì)量提供21去離子水。然后取出透析管內(nèi)含物。將按照這種方式活化的KBD-D用于下列活性試驗(yàn)。實(shí)施例14:與皮膚的定性結(jié)合利用視覺定性試驗(yàn)來研究KBD-D(SEQIDNo.:168)是否結(jié)合皮膚。所用的溶液封閉溶液羅氏Western封閉試劑1921673(10x溶液)的TBS稀釋液TBS:20mMTris;150mMNaClpH7.5TTBS:TBS+0.05%Tween20第一步為將皮膚的外角蛋白層轉(zhuǎn)移至穩(wěn)定的支持物上。為此，將透明膠帶牢固地施用于脫毛的人皮膚上并再次取下。所述試驗(yàn)可以直接在透明膠帶上進(jìn)行，或可以將粘附的角蛋白層通過再度粘附而轉(zhuǎn)移至載玻片上。如下證實(shí)結(jié)合-為了與多種試劑一起孵育，轉(zhuǎn)至Falcon管中；-適用的情況下添加乙醇以便脫脂，然后除去乙醇并干燥載玻片；-與封閉緩沖液于室溫一起孵育l小時(shí)；-使用TTBS洗滌2x5min;-使用TBS洗滌lx5min;-與在TBS/0.05%Tween20中的測試KBD(與標(biāo)簽——例如His6、HA等偶聯(lián))或?qū)φ盏鞍踪|(zhì)于室溫一起孵育2-4小時(shí)；-除去上清液；-用TBS洗滌3次；陽與單克隆小鼠抗標(biāo)簽(His6或HA)抗體的過氧化物酶綴合物(在TBS+0.01%封閉中按照1:2000稀釋)[單克隆抗聚組氨酸過氧化物酶綴合物，在小鼠中生產(chǎn)，凍干粉，希格瑪I于室溫一起孵育1小時(shí)；-用TTBS洗滌2x5min;-用TBS洗滌lx5min;曙添加磷酸酶底物(NBT-BCIP;勃林格殷格翰公司MAl片"Oml水，2.5min;反應(yīng)用7片終止)；用棵眼或使用顯微鏡對有色沉淀進(jìn)行視覺檢測。在使用KBD-D處理的透明膠帶上可見藍(lán)色沉淀，其為抗聚組氨酸-AP綴合物與KBD-D相互作用的反應(yīng)。作為陰性對照，僅用緩沖液處理透明膠帶。此時(shí)未觀察到明顯藍(lán)色。這些結(jié)果表明KBD-D與透明膠帶上的皮膚角蛋白結(jié)合。實(shí)施例15:與皮膚和毛發(fā)的定量結(jié)合為了研究KBD-D(SEQIDNo.:168)與KBD-B(SEQIDNo.:166)相比與皮膚和毛發(fā)的結(jié)合強(qiáng)度，進(jìn)行定量試驗(yàn)。在本試驗(yàn)中，首先將毛發(fā)與KBD-B或KBD-D—起孵育并洗掉過量的KBD-B或KBD-D。然后通過KBD-B或KBD-D的His標(biāo)簽偶聯(lián)抗體-過氧化物酶綴合物。再次洗掉未結(jié)合的抗體-過氧化物酶綴合物。結(jié)合的抗體-過氧化物酶綴合物可以將無色底物(TMB)轉(zhuǎn)化成可以在405nm處通過光度法測量的有色產(chǎn)物。吸收強(qiáng)度表示結(jié)合的KBD-B或KBD-D的量。如下在微量滴定板中使用人角化細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合皮膚的試驗(yàn)。-使用PBS/0.05%Tween20洗滌2次；-添加溶于PBS的1mll%BSA，并于室溫輕搖(卯Orpm)孵育l小時(shí)；-除去上清液；-添加溶于含0.05%Tween20的PBS中的IOOpgKBD;于室溫輕搖(卯0rpm)孵育2小時(shí)；-除去上清液；-用PBS/0.05%Tween20洗滌3次；-與lml單克隆小鼠抗-標(biāo)簽-His6抗體于室輕搖(900rpm)孵育2-4小時(shí)-用PBS/0.05%Tween20洗滌3次；-添加過氧化物酶底物(lml/Eppendorf管；組成參見下文)；-進(jìn)行反應(yīng)直至顯藍(lán)色(約卯秒)；-使用100pl2MH2S04終止反應(yīng)；-在405nm處測量吸收值。過氧化物酶底物(預(yù)先現(xiàn)配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+101111底物緩沖液(0.1]\1乙酸鈉pH4.9)+14.7^1112023%濃度為了表征KBD-D與KBD-B相比的毛發(fā)結(jié)合，如下進(jìn)行結(jié)合測定將5mg毛發(fā)(人)切成5mm長的區(qū)段并且轉(zhuǎn)移至Eppendorf管(蛋白質(zhì)滴度結(jié)合)。-添加lml乙醇以進(jìn)行脫脂；-離心，除去乙醇并用1120洗滌毛發(fā)；畫離心，除去上清液；畫添加處于lmlPBS/0.05%Tween20中的待測角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域(與標(biāo)簽一一例如His。HA等偶聯(lián))；于室溫輕搖孵育2小時(shí)；-離心，除去上清液；-用PBS/0.05%Tween20洗滌3次；-與lml單克隆小鼠抗標(biāo)簽(His6或HA)抗體的過氧化物酶綴合物(在PBS/0.05%Tween20中按照1:2000稀釋)[單克隆抗聚組氨酸過氧化物酶綴合物，在小鼠中生產(chǎn)，凍干粉，希格瑪I于室溫輕搖孵育2-4小時(shí)；-用PBS/0.05%Tween20洗滌3次；-添加過氧化物酶底物(lml/Eppendorf管)；-進(jìn)行反應(yīng)直至顯藍(lán)色(卯秒)；-使用100jul2M112804終止反應(yīng)。-在405nm處測定吸收度。過氧化物酶底物(用前現(xiàn)配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+10ml底物緩沖液(O.lM乙酸鈉pH4.9)+14.7|^1112023%濃度BSA=牛血清白蛋白PBS=磷酸鹽緩沖溶液Tween20=聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯，n約為20TMB=3，5，3，，5，-四甲基聯(lián)苯胺表5a:KBD-D或KBD-B與皮膚的定量結(jié)合。所示的吸收值標(biāo)準(zhǔn)化為(皮膚或毛發(fā))表面吸收值角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_405nm處的吸收值KBD-D與皮膚3.69在10。/o濃度SDS處理后的KBD-D與皮膚3.15KBD-B與皮膚0.93在10。/。濃度SDS處理后的KBD-B與皮膚0.185表5b:KBD-D與毛發(fā)的定量結(jié)合。所示的吸收值標(biāo)準(zhǔn)化為表面吸收值。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_405nm處的吸收值KBD-D與毛發(fā)0.88在10。/。濃度SDS處理后的KBD-D與毛發(fā)0.62表5c:相對于未處理的KBD-D和KBD-B毛發(fā)或皮膚結(jié)合而言以。/。計(jì)的10。/。濃度SDS處理后的KBD-D和KBD-B與皮膚和毛發(fā)的定量結(jié)合以％計(jì)的10V。濃度SDS處理角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域^k_后的相對吸收損失_10。/。濃度SDS處理后的KBD-D與皮膚1510。/。濃度SDS處理后的KBD-B與皮膚8010。/。濃度SDS處理后的KBD-D與毛發(fā)3010。/o濃度SDS處理后的KBD-B與毛發(fā)86這些結(jié)果表明蛋白質(zhì)KBD-D能夠結(jié)合毛發(fā)，并且更強(qiáng)烈地結(jié)合皮膚(參見表5)。與KBD-B(SEQIDNo.:166)形成對照，KBD-D(SEQIDNo.:168)僅受高達(dá)10。/。濃度SDS溶液洗滌的較弱影響(參見表5a)。實(shí)施例16:偶聯(lián)成功測試(Ellmann試驗(yàn))通過三種不同試驗(yàn)監(jiān)測效應(yīng)分子偶聯(lián)的成功(i)Ellmann試驗(yàn)，能夠測定效應(yīng)分子偶聯(lián)前后蛋白質(zhì)中游離Cys-SH的數(shù)量。在本文中偶聯(lián)后游離SH基團(tuán)的數(shù)量明顯減少表明反應(yīng)進(jìn)行良好。(ii)活性試驗(yàn)，能夠測定含和不含偶聯(lián)的效應(yīng)分子的KBD-B(SEQIDNo.:166)與毛發(fā)的結(jié)合。良好的反應(yīng)控制與未偶聯(lián)KBD-B(SEQIDNo.:166)相比不應(yīng)降低KBD-效應(yīng)分子的活性(參見實(shí)施例17)。(m)由于染料與KBD-B(SEQIDNo.:166)成功偶聯(lián)所致的毛發(fā)或皮膚的可見染色(參見實(shí)施例20)。關(guān)于(iii):如下使用EHmann試驗(yàn)測試效應(yīng)分子偶聯(lián)的成功所需的物質(zhì)畫EHmann試劑5，5，隱二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(DTNB);溶于O.lM磷酸鈉緩沖液，4mg/lml畫0.1M磷酸鈉緩沖液pH8.0誦半胱氨酸溶液(26.3mg半胱氨酸鹽酸鹽一7K合物/100ml磷酸鈉緩沖液)。所述溶液在并且必須在用前現(xiàn)配。1.在每種情況中，用移液管將25jtl、50pl、100pl、150pl、200和250jU半胱氨酸溶液吸入試管(13x100mm)構(gòu)建校準(zhǔn)曲線。將測定的蛋白質(zhì)樣品傾入另外的試管(體積<=250jnl)。對于待測的KBD，分配的量至少為lmg/反應(yīng)混合物。就試管而言，隨之在每種情況下使用磷酸鈉緩沖液將總體積調(diào)至250pl。如果超過了250jil樣品體積(因必需的lmgKBD所致)，那么在下面第2點(diǎn)使用2.5ml磷酸鈉注滿時(shí)要考慮到這種情況。2.在每種情況下添加50plEllmann試劑和2.5ml磷酸鈉緩沖液?？焖倩旌喜⒂谑覝?RT)孵育15min。3.測量412nm處的吸收值。4.構(gòu)建校準(zhǔn)曲線，繪圖并讀出待測蛋白質(zhì)樣品的值。在與多種效應(yīng)分子偶聯(lián)反應(yīng)后評價(jià)EUmann試驗(yàn)，證實(shí)如果KBD-B:染料的混合比為1:2，則2/3的游離巰基都能夠與活化的活性染料(參見實(shí)施例19)或具有馬來酰亞胺基己酸連接分子的染料相偶聯(lián)。實(shí)施例17:KBD-B-染料的毛發(fā)結(jié)合活性為了測試KBD-B(SEQIDNo.:166)帶著偶聯(lián)的染料是否還可以結(jié)合毛發(fā)，進(jìn)行了定量結(jié)合測定(參見圖9):在本試驗(yàn)中，首先將毛發(fā)與KBD-B-染料一起孵育，并洗掉未結(jié)合的KBD-B-染料。然后通過KBD-B的His標(biāo)簽偶聯(lián)過氧化物酶。再次洗掉未結(jié)合的過氧化物酶。結(jié)合的過氧化物酶可以將無色底物(TMB)轉(zhuǎn)化成可以在405nm處通過光度測定法測量的有色產(chǎn)物。吸收強(qiáng)度表示鍵合的KBD-B-泛醇的量。作為對比樣品，選擇不含染料的KBD-B。就確切的操作方法而言，參見實(shí)施例IO。實(shí)施例18:活性染料存在下的乙烯基砜活性固著點(diǎn)的活化將0.075mol染料(14-264,參見表6)溶于800ml水，并添加25%重量濃度的NaOH溶液將pH調(diào)整至10.5。將反應(yīng)溶液于室溫?cái)嚢?5分鐘，在此過程中將pH保持在10.5，直到它保持穩(wěn)定不變。然后添加21。/。重量濃度的HC1溶液將pH調(diào)整至4.5，并減壓蒸發(fā)反應(yīng)混合物(參見圖IO)。實(shí)施例19:活性染料與KBD-B(SEQIDNo.:166)的偶聯(lián)在染料與KBD-B反應(yīng)的過程中，應(yīng)維持實(shí)際的生理?xiàng)l件，否則蛋白質(zhì)就解折疊而導(dǎo)致沉淀。這實(shí)質(zhì)上意味著不能使用純有機(jī)溶劑，并且應(yīng)選擇接近中性的pH。此外，重要的是偶聯(lián)的反應(yīng)溫度不超過45。C。關(guān)于活性染料的偶聯(lián)，利用的是KBD(SEQIDNo.:166)中的半胱氨酸。因此，KBD-B(SEQIDNo.:166)具有四個(gè)半胱氨酸。其中，兩個(gè)半胱氨酸位于結(jié)構(gòu)內(nèi)，對于效應(yīng)分子偶聯(lián)而言是不可及的(可根據(jù)晶體結(jié)構(gòu)識別)。接近N末端的兩個(gè)剩余的半胱氨酸(14和83位氨基酸；參見序列KBD-B(SEQIDNo.:166))是效應(yīng)分子偶聯(lián)可及的。能夠偶聯(lián)的活性染料與KBD-B(SEQIDNo.:166)通過半胱氨酸的兩個(gè)游離SH中的至少一個(gè)偶聯(lián)。因此KBD-B與活化染料之間的反應(yīng)理想地按照1:2的摩爾比進(jìn)行。實(shí)施例19a:活性染料與KBD-D(SEQIDNo.:168)的偶聯(lián)為了按照與KBD-B類似的方式偶聯(lián)活化染料，也可以利用KBD-D(SEQIDNo.:168)中的半胱氨酸。因此，KBD-D(SEQIDNo.:168)具有24個(gè)半胱氨酸。此外，可以通過定向誘變按照靼向方式引入能夠偶聯(lián)的半胱氨酸基團(tuán)。因此，染料與KBD-D(SEQIDNo.:168)的偶聯(lián)可以使用KBD-D按照與實(shí)施例19中所述方法以及實(shí)施例19b)中所述用于KBD-B的染料(14—1-14-366)類似的方式進(jìn)行(參見實(shí)施例65)。染料14_153、14—154、14-155、14—156、14—181、14_182、14—183、14—276和14—289已經(jīng)為乙烯基砜的形式，即它們無需活化(預(yù)消除反應(yīng))，而可以與KBD-D直接反應(yīng)(相當(dāng)于圖ll)。染料而用在實(shí)施例66-108的化妝品中實(shí)施例19b)KBD-B(SEQIDNo.:166)與如下染料的偶聯(lián)a)乙烯基砜染料(式l):KBD-B與活化染料之間的反應(yīng)按照1:2的摩爾比進(jìn)行，因?yàn)镵BD-B具有兩個(gè)用于效應(yīng)分子偶聯(lián)的游離半胱氨酸。選擇用以偶聯(lián)的乙烯基砜染料通常以硫酸酯的形式合成，且由此必須在與KBD-B反應(yīng)前活化成乙烯基砜形式，因?yàn)檫@類染料僅能以其乙烯基砜形式與親核基團(tuán)反應(yīng)?；罨磻?yīng)在堿性條件下進(jìn)行，于室溫將在水性溶液中的染料調(diào)整至pH112分鐘。然后在添加蛋白質(zhì)前，使用鹽酸將pH調(diào)整至7-8(另外參見實(shí)施例18)。將反應(yīng)溶液在30。C，pH7-8緩慢振搖30min。在此過程中，活化的乙烯基砜染料(例如14-264,參見表6)與KBD游離半胱氨酸的巰基反應(yīng)(參見圖2)?？梢园凑疹愃品绞绞瓜铝腥玖?14一1至14-291)與KBD反應(yīng)。染料14153、14154、14-155、14—156、14一181、14182、14—183、14_276和14289已經(jīng)為乙烯基砜形式，即它們無需活化(預(yù)消除反應(yīng))，而可以與KBD直接反應(yīng)(相當(dāng)于圖ll)。給出了相應(yīng)產(chǎn)物的顏色。表6<table>complextableseeoriginaldocumentpage105</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage106</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage107</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage108</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage109</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage110</column></row><table>14—32藍(lán)色1433OHOHN丄Ch^、.S^、夕N、/k/k呤一0/^義"ZYY■、OHOH藍(lán)色14—34藍(lán)色14—350、、八^ff0'6>=i[=\。<Ni>>NN《。、、q""^9jtO0:-s-0^^~吞《^"N—~\YnY,olb\=lK0卞00綠色14—36o在。、Z、CO"O3、、z&O藍(lán)色14—37。f°:):夸:藍(lán)色111<table>tableseeoriginaldocumentpage112</column></row><table>4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage114</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage115</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage116</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage117</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage118</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage119</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage120</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage121</column></row><table><image>imageseeoriginaldocumentpage122</image><table>tableseeoriginaldocumentpage123</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage124</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage125</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage126</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage127</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage128</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage129</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage130</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage131</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage132</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage133</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage134</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage135</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage136</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage137</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage140</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage141</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage142</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage143</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage144</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage145</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage146</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage147</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage148</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage149</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage150</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage151</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage152</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage153</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage154</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage155</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage156</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage157</column></row><table>b)式3、4、5的染料可選地，還可以使用在其活性固著點(diǎn)上具有可取代的鹵原子的染料(例如染料14_354，圖12)。這些染料能夠在無需活化的情況下與KBD-B的SH反應(yīng)。KBD與染料14—354之間的反應(yīng)按照1:2的摩爾比進(jìn)行，因?yàn)镵BD-B具有用于效應(yīng)分子偶聯(lián)的兩個(gè)游離半胱氨酸。將反應(yīng)溶液在30'C、<table>tableseeoriginaldocumentpage158</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage159</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage160</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage161</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage162</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage163</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage164</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage165</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage166</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage167</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage168</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage169</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage170</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage171</column></row><table>胱氨酸)，以侵使未反應(yīng)的染料失活。如果此處應(yīng)用的染料在合成后不經(jīng)純化，它們既包含活性組分又包含非活性副組分。不具有活性固著點(diǎn)或例如在實(shí)際KBD偶聯(lián)反應(yīng)后游離半胱氨酸鍵合其活性固著點(diǎn)上的副組分不與KBD-B分子反應(yīng)。在偶聯(lián)反應(yīng)后，或例如在染發(fā)過程中可以除去這類副組分。一種選擇在于，通過例如柱層析純化與染料反應(yīng)的KBD-B。還有可能在"柱反應(yīng)器"類型中進(jìn)行KBD-B與活性染料之間的反應(yīng)。在這方面，KBD-B可以與鎳親和柱偶聯(lián)，染料與KBD-B鍵合，而未固定的染料基團(tuán)可以直接洗掉。然后可以從柱中洗脫KBD-B-染料。另一個(gè)選擇在于在毛發(fā)上一起施用與染料反應(yīng)的KBD-B以及非活性副組分，并從毛發(fā)中洗掉未鍵合的染料級分。為此，例如，15%濃度的Tween20水溶液是適合用于洗滌的。實(shí)施例20.借助KBD-B-染料偶聯(lián)分子的染發(fā)首先使紅色活性染料14—264與KBD-B(SEQIDNo.:166)按照上述方法偶聯(lián)。為了證實(shí)KBD-B-染料偶聯(lián)分子與毛發(fā)的結(jié)合是由蛋白質(zhì)介導(dǎo)的，而非游離染料自身，相同的染料在每種情況下僅用半胱氨酸而非KBD-B處理。然后將KBD-B-14—264和14—264分別置于5mg毛發(fā)上，短暫孵育并使用15%濃度的Tween20溶液洗掉未結(jié)合的KBD-B-染料或純?nèi)玖?。結(jié)果清楚地表明與毛發(fā)的結(jié)合由KBD-B介導(dǎo)并發(fā)生對毛發(fā)的染色。另一方面，如果需要使毛發(fā)再次脫色，那么使用15%的SDS級分洗滌或使用含角蛋白的溶液處理是合適的。本發(fā)明的皮膚美容制品在下文予以說明，其包含根據(jù)實(shí)施例19制備的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子(與染料14_264偶聯(lián)的SEQIDNo.:ID166的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)。所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在下文實(shí)施例中稱作角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠理解表6和7中所述的所有其它染料可以與KBD按照實(shí)施例19、19a或19b偶聯(lián)并用于下述制品。實(shí)施例21:香波(不含角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料的基礎(chǔ)配方)<table>tableseeoriginaldocumentpage173</column></row><table>q.s.芳香油q.s.防腐劑1.25聚季銨鹽-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.檸檬酸1.00角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—26457.75軟化水B3.00PEG-150二硬脂i3曰變化形式2%A15.0010.005.005.00q.s.q.s.1.252.00q.s.5.0053.75成分(INCI)椰油酰胺丙基甜菜堿椰油兩性二乙酸二鈉聚山梨醇酯20癸基糖苷芳香油防腐劑聚季銨鹽-16聚乙二醇月桂基醚-3檸檬酸角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264軟化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯制備稱重A相組分并溶解。將pH調(diào)整至6-7。添加B相并加熱至約40'C?？焖倮鋮s至室溫，同時(shí)攪拌。實(shí)施例23:染發(fā)定型摩絲變化形式1%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基甲基硫酸銨(cocotrimoniummethosulfate)q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨曱基丙醇0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羥乙基纖維素10.00醇69.97軟化水1.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷變化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨甲基丙醇0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羥乙基纖維素10.00醇69.97軟化水0.5角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14264C10.00丙坑/丁坑制備混合A相組分。稱重B相并溶解而得到澄清溶液，然后攪拌入A相。與C相一起裝瓶。實(shí)施例24:染發(fā)定型摩絲變化形式1%A2.00q.s.成分(匿I)椰油基三曱基曱基硫酸銨芳香油B7.00聚季銨鹽-462.00聚季銨鹽-1178.87軟化水2.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14264C10.00丙坑/丁坑變化形式2%A2.00q.s.成分(INCI)椰油基三曱基曱基硫酸銨芳香油B7.00聚季銨鹽-462.00聚季銨鹽-1178.87軟化水1.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。稱重B相并溶解而得到澄清溶液，然后攪拌入A相。與C相一起裝瓶。實(shí)施例25:兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例22/變化形式1的0.5g染發(fā)香波處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g),并使染發(fā)香波在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從^f見覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例26:兩束白發(fā)用實(shí)施例22/變化形式1的0.5g染發(fā)香波處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g)，并使染發(fā)香波在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從3見覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例27兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例23/變化形式2的0.5g染發(fā)定型摩絲處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在笫5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例28:兩束白發(fā)用實(shí)施例23/變化形式2的0.5g染發(fā)定型摩絲處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g),并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例29:兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例24/變化形式1的0.5g染發(fā)定型摩絲處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g),并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。AM見覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例30:兩束白發(fā)用實(shí)施例23/變化形式1的0.5g染發(fā)定型摩絲處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例21的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例21的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例31:KBD在日用護(hù)理乳劑中的應(yīng)用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252，0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑69.8軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D0.2抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯，抗壞血酸鈉，生育酚，視黃醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氫氧化鈉<formula>formulaseeoriginaldocumentpage180</formula>制備分別將A和B相加熱至約80'C。將B相攪拌入A相并勻化。將C相攪拌入混合的A和B相并再次勻化。攪拌冷卻至約40°C，添加D相，使用E相調(diào)節(jié)pH至約6.5，勻化并攪拌冷卻至室溫。注意不使用保護(hù)氣體制備制品。必須在不透氧的包裝，例如鋁管中裝瓶。實(shí)施例32:KBD在保護(hù)性日霜中的應(yīng)用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑70.6軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D1.0抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇1.0含有約5。/。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氬氧化鈉AI5%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑66.6軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D1.0抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氫氧化鈉制備分別將A和B相加熱至約80°C。將B相攪拌入A相并勻化。將C相摻入混合的A和B相并再次勻化。攪拌冷卻至約40°C,添加D相,使用E相調(diào)節(jié)pH至約6.5，勻化并攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例33:KBD在潔面乳液中的應(yīng)用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯10.0辛酸/癸酸甘油三酯1.5環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷2.0PEG-40氫化蓖麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物C1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇q.s.防腐劑q.s.D3.00.50.52.04.00.11.060.7AI5%:%A腸訓(xùn)1.52.0B3.5C1.00.2q.s.q.s.D3.00.50.52.04.00.15.0芳香油聚季銨鹽-44椰油基三甲基曱基硫酸銨鯨蠟硬脂醇聚醚-25泛醇，丙二醇丙二醇EDTA二鈉含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_活性染料14—264的水性溶液軟化水成分(匿I)鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯辛^7癸酸甘油三酯環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷PEG-40氬化蓖麻油辛^/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物生育酚醋酸酯沒藥醇防腐劑芳香油聚季銨鹽-44椰油基三甲基曱基硫酸銨鯨蠟硬脂醇聚醚-25泛醇，丙二醇丙二醇EDTA二鈉含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液56.7軟化水制備溶解A相。將B相攪拌入A相。將C相摻入混合的A和B相。溶解D相，攪拌入混合的A、B和C相并勾化。之后攪拌15min。實(shí)施例34:KBD在日用護(hù)體噴霧劑中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羥基苯甲酰基己基苯曱酸酯1.0聚季銨鹽-443.0丙二醇2.0泛醇，丙二醇1.0環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己珪氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3沒藥醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液59.2醇AI5%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羥基苯甲?；夯郊姿狨?00680052113.X說明書第175/474頁1.0聚季銨鹽-443.0丙二醇2.0泛醇，丙二醇l，O環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液55.2醇制備稱重A相組分并溶解至澄清。實(shí)施例35:KBD在皮膚護(hù)膚凝膠中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氬化蓖麻油15.0醇0.1沒藥醇0.5生育酚醋酸酯q，s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液75.4軟化水C0.8三乙醇胺AI5%:%成分(匿I)A3.6PEG-40氬化蓖麻油15.0醇0.1沒藥醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液71.4軟化水C0.8三乙醇胺制備溶解A相至澄清。使B相溶脹并用C相中和。將A相攪拌入勻化的B相并勻化。實(shí)施例36:KBD在剃須后洗液中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0沒藥醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.1三乙醇胺63.5軟化水AI5%:%成分(匿I)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0沒藥醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.1三乙醇胺59.5軟化水制備混合A相組分。溶解B相，摻入A相并勻化。實(shí)施例37:KBD在日曬后洗液中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物15.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2沒藥醇1.0生育盼醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液63.2軟化水C0.2三乙醇胺AI5%'.%成分(匿I)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物15.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2沒藥醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液59.2軟化水C0.2三乙醇胺制備混合A相組分。將B相攪拌入A相并勻化。用C相中和并再次勻化。實(shí)施例38:KBD在防曬露中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A4,5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰雙苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鯨蠟硬脂醇異壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0異十六垸2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯3.0二氧化鈦，三曱氧基辛?；柰?trimethoxycaprylylsilane)C5.0甘油1.0鯨蠟硬脂醇硫酸酯鈉0.5黃原膠61.7軟化水D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液1.0苯氧基乙醇，對羥基苯曱酸甲酯，對羥基苯甲酸乙酯，對羥基苯曱酸丁酯，對羥基苯曱酸丙酯，對羥基苯曱酸異丁酯0.3沒藥醇AI5%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰雙苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3曱基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鯨蠟硬脂醇異壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0異十六烷2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯3.0二氧化鈦，三曱氧基辛?；柰镃5.0甘油1.0鯨蠟硬脂醇硫酸酯鈉0.5黃原膠57.7軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸曱酯，對羥基苯甲酸乙酯，對羥基苯甲酸丁酯，對羥基苯甲酸丙酯，對羥基苯甲酸異丁酯0.3沒藥醇制備分別將A和B相加熱至約80°C。將B相攪拌入A相并勻化。將C相加熱至約80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。攪拌冷卻至約40。C,添加D相并再次勻化。實(shí)施例39:KBD在防曬露中的應(yīng)用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-253.0三山裔精2.0鯨蠟硬脂醇2.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0甲氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三漆酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸異丙酯B5.0氧化鋅，三乙氧基辛?；曂?triethoxycaprylylsilane)C0.2黃原膠0.5丙烯酸羥乙酯/丙烯酰基二甲基?；撬徕c共聚物，角鯊?fù)?，聚山梨醇?00.25.00.560.9D1.00.51.00.2AI5%:%A2.02.03.02.02.05.01.01.07.0B5.0C0.20.50.25.00.5EDTA二鈉丙二醇泛醇軟化水含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_活性染料14—264的水性溶液苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸曱酯，對羥基苯曱酸丁酯，對羥基苯甲酸乙酯，對幾基苯甲酸丙酯，對羥基苯甲酸異丁酯生育酚醋酸酯沒藥醇成分(INCI)鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇鯨蠟硬脂醇聚醚-25三山脊精鯨蠟硬脂醇鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯甲氧基肉桂酸乙基己酯乙基己基三噪酮VP/二十碳烯共聚物肉豆蔻酸異丙酯氧化鋅，三乙氧基辛?；柰辄S原膠丙烯酸羥乙酯/丙烯酰基二甲基?；撬徕c共聚物，角鯊?fù)椋凵嚼娲减?0EDTA二鈉丙二醇泛醇56.9軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5苯氧基乙醇，對羥基苯曱酸甲酯，對羥基苯甲酸丁酯，對羥基苯曱酸乙酯，對羥基苯曱酸丙酯，對羥基苯曱酸異丁酯1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇制備加熱A相至約80°C，攪拌入B相并勻化3min。同沖羊力口熱C相至80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。冷卻至約40。C，攪拌入D相并再次勻化。實(shí)施例40:KBD在防曬露中的應(yīng)用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A3.5鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇1.5鯨蠟硬脂醇聚醚-257.5甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷0.5蜂蠟3.0鯨蠟硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化鈦，二氧化硅，聚甲基硅氧烷(Methicone),氧化鋁C3.0甘油0.2EDTA二鈉0.3黃原膠1.0癸基糖苷2.0泛醇，丙二醇56.3軟化水D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇q.s.芳香油q.s.防腐劑AI5%:%成分(INCI)A3.5鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇1.5鯨蠟硬脂醇聚醚-257.5曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0環(huán)戊珪氧烷，環(huán)己硅氧烷0.5蜂蠟3.0鯨蠟硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化鈦，二氧化硅，聚甲基硅氧烷，氧化鋁C3.0甘油0.2EDTA二鈉0.3黃原膠1.0癸基糖苷2.0泛醇，丙二醇52.3軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇q.s.芳香油q.s.防腐劑制備加熱A相至約80'C,攪拌入B相并勻化3min。同樣加熱C相至80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。冷卻至約40。C，攪拌入D相并再次勻化。實(shí)施例41:KBD在足用香脂中的應(yīng)用AI1%:%成分(匿I)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-255.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯4.0鯨蠟醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》廣物油0.2薄荷醇0.5樟腦B69.3軟化水q.s.防腐劑C1.0沒藥醇1.0生育酚醋酸酯D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液5.0金縷梅提取物(witchhazelextract)AI5%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-255.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯4.0鯨蠟醇4.0硬脂酸甘油酯5.0礦物油0.2薄荷醇0.5樟腦B65.3軟化水q.s.防腐劑C1.0沒藥醇1.0生育酚醋酸酯D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液5.0金縷梅提取物制備分別將A和B相的組分加熱至約80。C。將B相攪拌入A相并勻化。攪拌冷卻至約4CTC，添加C和D相之后快速勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例42:KBD在含有沒藥醇的W/O乳劑中的應(yīng)用%:%成分(INCI)6.0PEG-7氫化蓖麻油8.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯15.0》廣物油0.3硬脂酸鎂0.3硬脂酸鋁2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物5.0甘油0.7硫酸鎂55.6軟化水C1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6沒藥醇AI5%:%成分(匿I)A6.0PEG-7氬化蓖麻油8.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯15.0,廣物油0.3硬脂酸鎂0.3硬脂酸鋁2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸鎂51.6軟化水C5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6沒藥醇制備分別將A和B相的組分加熱至約85°C。將B相攪拌入A相并勻化。攪拌冷卻至約40'C，添加C相并再次快速勻化。攪拌冷卻至室溫。本專利角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的制品目錄一一護(hù)發(fā)用品實(shí)施例43:含有定型劑的泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.5聚二甲基硅氧烷共聚醇q.s.芳香油10.0醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液68.1軟化水10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A10.0PVP/VA共聚物0.2羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.5聚二曱基硅氧烷共聚醇q.s，芳香油10.0醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液64.1軟化水B10.0丙烷/丁烷制備一起稱重A相組分，攪拌至全部物質(zhì)溶解并與B相一起裝瓶。實(shí)施例44:染發(fā)泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-40.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐劑91.5軟化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-40.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s,芳香油q.s.防腐劑87.5軟化水B6.0丙烷/丁烷制備一起稱重A相組分，攪拌至全部物質(zhì)溶解而得到澄清溶液，并與B相一起裝瓶。實(shí)施例45:染發(fā)泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-110.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐劑91.5軟化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A1.0聚季銨鹽-110.5羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐劑87.5軟化水B6.0丙烷/丁烷制備一起稱重A相組分，攪拌至全部物質(zhì)溶解而得到澄清溶液，并與B相一起裝瓶。實(shí)施例46:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B77.3軟化水10.0聚季銨鹽-281.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA<table>tableseeoriginaldocumentpage200</column></row><table>制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。與C相裝一起瓶。實(shí)施例47:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基曱基硫酸銨q.s.芳香油B78.5軟化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C腦HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B74.5軟化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C10.0HFC152A制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。與C相一起裝瓶。實(shí)施例48:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2,0椰油基三曱基曱基硫酸銨q.s.芳香油B7.70聚季銨鹽-441.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液q.s.防腐劑79.3軟化水C10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B7.70聚季銨鹽-445.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.防腐劑75.3軟化水C10.0丙烷/丁烷制備混合A相組分。溶解B相的組分至澄清，然后將B相攪拌入A相。將pH調(diào)節(jié)至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例49:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基曱基硫酸銨q.s.芳香油B72.32軟化水2.00VP/丙烯酸酯/曱基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP1.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基珪氧烷，西曲氯銨(cetrimoniumchloride)，十三烷醇聚醚-12(trideceth-12)15.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B68.32軟化水2.00VP/丙烯酸酉旨7甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP5.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域活性染料14_26的水溶液40.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶脹，然后將pH調(diào)節(jié)至6-7。與D相一起裝瓶。實(shí)施例50:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(匿I)A2.00西曲氯銨q.s.芳香油B67.85軟化水7.00聚季銨鹽-461.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00西曲氯銨q.s.芳香油B63.85軟化水7.00聚季銨鹽-465.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶脹，然后將pH調(diào)節(jié)至6-7。與D相一起裝瓶。實(shí)施例51:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(匿I)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油85.5軟化水B7.0聚苯乙烯磺酸鈉1.0含有約5。/。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴按(cetrimoniumbromide)q.s.防腐劑%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油81.5軟化水B7.0聚苯乙烯磺酸鈉5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑206C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。將B相稱入A相并溶解至澄清。將pH調(diào)節(jié)至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例52:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油92.0軟化水B0.5聚季銨鹽-101.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油88.0軟化水B0.5聚季銨鹽-105.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。將B相稱入A相并溶解至澄清。將pH調(diào)節(jié)至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例53:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油82.5軟化水B10.0聚季銨鹽-161.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油78.5軟化水B10.0聚季銨鹽-165.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域活性染料14—26的水溶液40.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。將B相稱入A相并溶解至澄清。將pH調(diào)節(jié)至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例54:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基曱基硫酸銨q.s.芳香油B84.0軟化水2.0殼聚糖1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B80.0軟化水2.0殼聚糖5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152A制備增溶A相。依次添加B相的組分并溶解。與C相一起裝瓶。實(shí)施例55:護(hù)理香波AI1%%成分(INCI)A30.0十二烷基橋u酸鈉6.0椰5由兩'l"生乙酸4內(nèi)(SodiumCocoamphoacetate)6.0椰油酰胺丙基甜菜堿3.0十二烷基硫酸鈉，二硬脂酸乙二醇酯，椰油酰胺MEA,聚乙二醇月桂基醚-101.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季銨鹽-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.0氯化鈉43.3軟化水Bq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A30.0十二烷基硫酸鈉6.0椰油兩性乙酸鈉6.0椰油酰胺丙基甜菜堿3.0十二烷基石克酸鈉，二》更脂酸乙二醇酯，椰油酰胺MEA，聚乙二醇月桂基醚-105.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域活性染料14—264的水性溶液7.7聚季銨鹽-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.0氯化鈉39.3軟化水Bq.s.檸檬酸制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸將pH調(diào)節(jié)至6-7。實(shí)施例56:淋浴凝膠AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸鈉5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜堿1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐劑2.0氯化鈉46.0軟化水Bq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸鈉5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜堿5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐劑2.0氯化鈉42.0軟化水Bq.s.檸檬酸制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸將pH調(diào)節(jié)至6-7。實(shí)施例57:香波AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸鈉5.0C12-15鏈烷醇聚醚(Pareth)-15磺酸鈉5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇(Phytantriol)44.6軟化水1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.3聚季銨鹽-101.0泛醇q.s.防腐劑1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化鈉AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸鈉5.0C12-15鏈烷醇聚醚-15磺酸鈉5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇40.6軟化水5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.3聚季銨鹽-101.0泛醇q.s.防腐劑1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化鈉制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸將pH調(diào)節(jié)至6-7。實(shí)施例58:染發(fā)香波AI1%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_活性染料14—264的水性溶液0.15瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨2.00聚乙二醇月桂基醚-358.00軟化水q.s.檸檬酸B3.00PEG-150二石更脂酸酯AI5%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑5.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.15瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨2.00聚乙二醇月桂基醚-354.00軟化水q.s.檸檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯制備稱重A相組分并溶解。將pH調(diào)節(jié)至6-7。添加B相并加熱至約40'C。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例59:潤膚護(hù)體膏霜AI1%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇3.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二甲基硅氧烷4.0鯨蠟硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0》廣物油4.0西蒙得木(霍霍巴)(SimmondsiaChinensis(Jojoba))種子油3.0礦物油，羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸鎂鋁q.s防腐劑65.5軟化水Cq.s.芳香油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14264的水性溶液Dq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0鯨蠟^J旨醇聚醚-6，十八烷醇3.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鯨蠟硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0》廣物油4.0西蒙得木(霍霍巴)種子油3.0礦物油，羊毛脂醇B5.01.00.5q.s61.5丙二醇泛醇硅酸鎂鋁防腐劑軟化水Cq.s.芳香油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.檸檬酸制備分別加熱A和B相至約80。C。短暫預(yù)勻化B相，然后將B相攪拌入A相并再次勻化。冷卻至約40'C,添加C相并再次充分勻化。用擰檬酸將pH調(diào)節(jié)至6-7。實(shí)施例60:潤膚護(hù)體膏霜AI1%%成分(INCI)A6.0PEG-7氬化荒麻油10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯7.0,廣物油0.5乳木果油(SheaButter)(牛油樹(ButyrospermumParkii))0.5硬脂酸鋁0.5硬脂酸鎂0.2沒藥醇0.7季銨鹽-18水輝石(Quaternium-18-Hectorite)B5.0二丙二醇0.7硫酸鎂q.s.防腐劑62.9軟化水Cq.s.芳香油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液AI5%%成分(INCI)A6.0PEG-7氫化蓖麻油10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯7.0^戶物油0.5乳木果油(牛油樹)0.5硬脂酸鋁0.5硬脂酸鎂0.2沒藥醇0.7季銨鹽-18水輝石B5.0二丙二醇0.7硫酸鎂q.s.防腐劑58.9軟化水Cq.s.芳香油5.0含有約的水溶液5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264制備分別加熱A和B相至約80'C。將B相攪拌入A相并勻化。攪拌冷卻至約40。C，添加C相并再次勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例61:液體化妝品——OAV型AI1%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鯨蠟醇8.0礦物油7.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二曱基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐劑61.9軟化水C0.1沒藥醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891,二氧化鈦1.1氧化鐵AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鯨蠟醇8.0》廣物油7.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二甲基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐劑57.9軟化水C0.1沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.I.77891，二氧化鈦1.1氧化鐵制備分別加熱A和B相至約80°C。將B相攪拌入A相并勻化。攪拌冷卻至約40'C，添加C和D相并再次充分勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例62:將所示的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264作為約5%重量濃度的水性溶液使用。下列數(shù)據(jù)為重量份。透明染發(fā)香波<table>tableseeoriginaldocumentpage220</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage221</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage222</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage223</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage224</column></row><table>調(diào)節(jié)pH至6.0具有染發(fā)膨脹作用的透明調(diào)理香波<table>tableseeoriginaldocumentpage224</column></row><table>調(diào)節(jié)pH至6.0熏發(fā)膠霜<table>tableseeoriginaldocumentpage225</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage226</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage227</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage228</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage229</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage230</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage231</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage232</column></row><table>棒狀物<table>tableseeoriginaldocumentpage232</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage233</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage234</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage235</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage236</column></row><table>皮膚或毛發(fā)熏色膠霜<table>complextableseeoriginaldocumentpage236</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage237</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage238</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage239</column></row><table>具有熏黑效果的自助美黑水分散體<table>tableseeoriginaldocumentpage240</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage241</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage242</column></row><table>wo乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage242</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage243</column></row><table>固體穩(wěn)定的乳劑(Pickeriiig乳液)<table>tableseeoriginaldocumentpage243</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage244</column></row><table>棒狀物<table>tableseeoriginaldocumentpage245</column></row><table>自助美黑PIT乳劑<table>tableseeoriginaldocumentpage246</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage247</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage248</column></row><table>實(shí)施例63:在下列制品中，描述了包含至少一種無機(jī)色素，優(yōu)選氧化鋅和/或氧化鈦，UvinulAPlus和其他UV-A和UV-B有才幾過濾劑的組合的美容防曬霜制品。本文的無機(jī)色素可以以包衣形式存在，即對它們進(jìn)行表面處理。例如，這種表面處理可以通過本身公知的方法，如DE-A-3314742中所述的方法為色素提供疏水薄層。按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方式制備下述制品。下文描述了本發(fā)明的皮膚美容制品，它包含按照實(shí)施例19制備的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子(與染料14—264偶聯(lián)的SEQIDNo.:ID166的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)。所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在下文的實(shí)施例中稱作角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264。對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，理所當(dāng)然地，可以使表6和7中所述的所有其它染料與KBD按照實(shí)施例19、19a或19b偶聯(lián)并用于下述制品。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的含量是指100%的活性成分。本發(fā)明的活性成分可以以純的形式或作為水性溶液〗吏用。就水性溶液而言，在特定制品中的軟化水含量必須予以調(diào)適。<table>tableseeoriginaldocumentpage248</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage249</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage250</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage251</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage251</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage252</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage253</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage254</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage255</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage256</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage257</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage258</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage259</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage260</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage261</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage262</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage263</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage264</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage265</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage265</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage266</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage267</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage268</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage269</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage270</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage271</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage272</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage273</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage274</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage275</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage276</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage277</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage278</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage279</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage280</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage281</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage282</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage283</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage284</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage285</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage286</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage287</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage288</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage289</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage290</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage291</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage292</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage293</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage294</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage295</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage296</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage297</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage298</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage299</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage300</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage301</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage302</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage303</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage304</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage305</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage306</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage307</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage308</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage309</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage310</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage311</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage312</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage313</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage314</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage315</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage316</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage317</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage318</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage319</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage320</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage321</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage322</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage323</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage324</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage325</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage326</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage327</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage328</column></row><table>首先使紅色活性染料14—264與KBD-D(SEQIDNo.:168)按照上述方法偶聯(lián)(實(shí)施例19)。為了證實(shí)KBD-D-染料偶聯(lián)fenzi與毛發(fā)的結(jié)合由蛋白質(zhì)介導(dǎo)，而非游離染料自身，相同的染料在每種情況下僅用半胱氨酸而非KBD-D處理。然后將KBD-D-14_264和14—264分別置于5mg毛發(fā)上，短暫孵育并使用15%濃度的Tween20溶液洗掉未結(jié)合的KBD-B-染料或純?nèi)玖稀＝Y(jié)果清楚地表明與毛發(fā)結(jié)合由KBD-D介導(dǎo)并發(fā)生對毛發(fā)的染色。另一方面，如果需要使毛發(fā)再次脫色，那么使用15%的SDS級分洗滌或使用含角蛋白的溶液處理是合適的。下文描述了本發(fā)明的皮膚化妝品，它包含按照實(shí)施例20制備的的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子(與染料14—264偶聯(lián)的SEQIDNo.:ID168的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)。所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在下文的實(shí)施例中稱作角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264。對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，理所當(dāng)然地，可以使表6和7中所述的所有其它染料與KBD按照實(shí)施例21偶聯(lián)并用于下述制品。實(shí)施例66:香波(不含角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域-活性染料的基礎(chǔ)配方)%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.25聚季銨鹽-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.檸檬酸57.75軟化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯制備稱重A相組分并溶解。調(diào)節(jié)pH至6-7。添加B相并加熱至約50°C。攪拌冷卻至室溫。下文實(shí)施例中角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264KBD-D(SEQIDNo.:168)的含量是指100%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264。本發(fā)明的活性成分可以以純的形式或作為水性溶液^f吏用。就水性溶液而言，在相應(yīng)制品中的軟化水含量必須予以調(diào)適。實(shí)施例67:染發(fā)香波變化形式1%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.25聚季銨鹽-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.檸檬酸1.00角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_26457.75軟化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯變化形式2%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜堿<formula>formulaseeoriginaldocumentpage331</formula>69.97軟化水1.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264C10.00丙烷/丁烷變化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨甲基丙醇0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羥乙基纖維素10.00醇69.97軟化水0.5角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。稱重B相并溶解至得到澄清溶液，然后攪拌入A相。與C相一起裝瓶。實(shí)施例69:染發(fā)定型摩絲變化形式1%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B7.00聚季銨鹽-462.00聚季銨鹽-1178.87IU匕水2.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷變化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基曱基硫酸銨q.s.芳香油B7.00聚季銨鹽-462.00聚季銨鹽-1178.87軟化水1.0角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。稱重B相并溶解至得到澄清溶液，然后攪拌入A相。與C相一起裝瓶。實(shí)施例70:兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例67/變化形式1的0.5g染發(fā)香波處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g)，并使染發(fā)香波在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例71:兩束白發(fā)用實(shí)施例67/變化形式1的0.5g染發(fā)香波處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g)，并使染發(fā)香波在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例72兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例68/變化形式2的0.5g染發(fā)定型摩絲處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例73:兩束白發(fā)用實(shí)施例68/變化形式2的0.5g染發(fā)定型摩絲處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并千燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例74:兩束未漂白的金發(fā)用實(shí)施例69/變化形式l的0.5g染發(fā)定型摩絲處理歐洲人天然的顏色9/0的金發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并干燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到金發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例75:兩束白發(fā)用實(shí)施例69/變化形式1的0.5g染發(fā)定型摩絲處理選擇的歐洲人天然的白發(fā)(2g)，并使染發(fā)定型摩絲在毛發(fā)上留置15min。然后用水洗滌發(fā)束，使用實(shí)施例66的香波清潔，并千燥。毛發(fā)完全呈紅色。不能再察覺到白發(fā)。一束留作對比。然后用實(shí)施例66的香波將第二束發(fā)洗滌5次并干燥。在第5次洗滌后，將發(fā)束與留存的樣品進(jìn)行比較。洗滌5次的發(fā)束仍然完全呈紅色。兩發(fā)束具有相同的紅色色度。從視覺上來看，未能觀察到顏色深度上存在差異。實(shí)施例76:KBD在日用護(hù)理用乳劑中的應(yīng)用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑69.8軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D0.2抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯，抗壞血酸鈉，生育酚.視黃醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氫氧化鈉AI5%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二曱基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑65.8軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D0.2抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯，抗壞血酸鈉，生育酚，視黃醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氫氧4匕鈉制備分別加熱A和B相至約80'C。將B相攪拌入A相并勻化。將C相摻入入混合的A和B相并勻化。攪拌冷卻至約40。C，添加D相，使用E相調(diào)節(jié)pH至約6.5，勻化并攪拌冷卻至室溫。注意不使用保護(hù)氣體制備制品。必須在不透氧的包裝，例如鋁管中裝瓶。實(shí)施例77:KBD在保護(hù)性日霜中的應(yīng)用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二曱基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑70.6軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D1.0抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氫氧化鈉AI5%:%成分(INCI)A1.7鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇0.7鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鯨蠟硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二鈉1.0泛醇q.s.防腐劑66.6軟化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D1.0抗壞血酸磷酸鈉1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氫氧化鈉制備分別將A和B相加熱至約80°C。將B相攪拌入A相并勻化。將C相摻入入混合的A和B相并勻化。攪拌冷卻至約40'C，添加D相，使用E相調(diào)節(jié)pH至約6.5并勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例78:KBD在清面乳液中的應(yīng)用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯10.0辛酸/癸酸甘油三酯1.5環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷2.0PEG-40氬化茺麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物C1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇q.s.防腐劑q.s.芳香油D3.0聚季銨鹽-440.5椰油基三曱基曱基硫酸銨0.5鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0泛醇，丙二醇4.0丙二醇0.1EDTA二鈉1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液60.7軟4匕水AI5%:%成分(INCI)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯10.0辛^/癸酸甘油三酯1.5環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷2.0PEG-40氫化茺麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯.丙烯酸鈉共聚物C1.0生育酚醋酸酯0,2沒藥醇q.s.防腐劑q.s.芳香油D3.0聚季銨鹽-440.5椰油基三甲基甲基硫酸銨0.5鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0泛醇，丙二醇4.0丙二醇0.1EDTA二鈉5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液56.7軟化水制備溶解A相。將B相攪拌入A相。將C相摻入混合的A和B相。溶解D相，攪拌入混合的A、B和C相并勻化。此后攪拌15min。實(shí)施例79:KBD在日用護(hù)體噴霧劑中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羥基苯甲?；夯郊姿狨?.0聚季銨鹽-443.0丙二醇2.0泛醇，丙二醇1.0環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯曱酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3沒藥醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液59.2醇AI5%:%成分(INCI)A3.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羥基苯甲?；夯郊姿狨?.0聚季銨鹽-443.0丙二醇2.0泛醇，丙二醇1.0環(huán)戊石圭氧烷，環(huán)己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液55.2醇制備稱重A相組分并溶解至澄清。實(shí)施例80:KBD在護(hù)膚凝膠中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氫化蓖麻油15.0醇0.1沒藥醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液75.4軟化水C0.8三乙醇胺AI5%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氬化蕘麻油15.0醇0.1沒藥醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液71.4軟化水C0.8三乙醇胺制備溶解A相至澄清。使B相溶脹并使用C相中和。將A相攪拌入勻化的B相并勻化。實(shí)施例81:KBD剃須后洗液中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0沒藥醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.1三乙醇胺63.5軟化水AI5%:%成分(匿I)A10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0沒藥醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物1.0泛醇3.0甘油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.1三乙醇胺59.5軟化水制備混合A相組分。溶解B相，摻入A相并勻化。實(shí)施例82:KBD在日曬后用洗液中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物15.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2沒藥醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液63.2軟化水C0.2三乙醇胺AI5%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交聯(lián)聚合物15.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2沒藥醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液59.2軟化水C0.2三乙醇胺制備混合A相組分。將B相攪拌入A相，同時(shí)勻化。使用C相中和并再次勻化。實(shí)施例83:KBD在防曬露中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰雙苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鯨蠟硬脂醇異壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0異十六烷2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯3.0二氧化鈦，三甲氧基辛?；柰镃5.0甘油1.0鯨蠟硬脂醇硫酸酯鈉0.5黃原膠61.7軟化水D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸甲酯，對羥基苯甲酸乙酯，對羥基苯甲酸丁酯，對羥基苯曱酸丙酯，對羥基苯甲酸異丁酯0.3沒藥醇AI5%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰雙苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯0.5生育盼醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鯨蠟硬脂醇異壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0異十六烷2.5二-C12-13烷基蘋果酸酯3.0二氧化鈦，三曱氧基辛酰基硅烷C5,0甘油1.0鯨蠟硬脂醇硫酸酯鈉0.5黃原膠57.7軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸曱酯，對羥基苯甲酸乙酯，對羥基苯曱酸丁酯，對羥基苯甲酸丙酯，對羥基苯曱酸異丁酯0.3沒藥醇制備分別將A和B相的組分加熱至約80X:。將B相攪拌入A相并勻化。加熱C相至約80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。攪拌冷卻至約40。C,加入D相并再次勻化。實(shí)施例84:KBD在防曬露中的應(yīng)用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-253.0三山脊精2.0鯨蠟硬脂醇2.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0甲氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三溱酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸異丙酯B5.0氧化鋅，三乙氧基辛?；柰镃0.2黃原膠0.5丙烯酸羥乙酯/丙烯酰基二甲基?；撬徕c共聚物，角鯊?fù)?，聚山梨醇?00.2EDTA二鈉5.0丙二醇0.5泛醇60.9軟化水D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_活性染料14一264的水性溶液0.5苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸甲酯，對羥基苯曱酸丁酯，對羥基苯曱酸乙酯，對羥基苯曱酸丙酯，對羥基苯甲酸異丙酯1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇AI5%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-253.0三山脊精2.0鯨蠟硬脂醇2.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0曱氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三溱酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸異丙酯B5.0氧化鋅，三乙氧基辛?；柰镃0.2黃原膠0.5丙烯酸羥乙酯/丙烯酰基二曱基?；撬徕c共聚物，角鯊?fù)?，聚山梨醇?00.2EDTA二鈉5.0丙二醇0.5泛醇56.9軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5苯氧基乙醇，對羥基苯甲酸曱酯，對羥基苯甲酸丁酯，對羥基苯甲酸乙酯，對羥基苯甲酸丙酯，對羥基苯甲酸異丙酯1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇制備加熱A相至約80。C，攪拌B相并勻化3min。同樣加熱C相至80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。冷卻至約40C攪拌加入D相并再次勻化。實(shí)施例85:KBD在防曬露中的應(yīng)用——OAV型\AI1%:%A3.51.57.52.00.53.010.0B5.0C3.00.20.31.02.056.3D1.01.00.2q.s.q.s.AI5%:%A3.51.57.52.0成分(INCI)鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇鯨蠟硬脂醇聚醚-25曱氧基肉桂酸乙基己酯環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷蜂蠟鯨蠟硬脂醇辛酸/癸酸甘油三酯二氧化鈦，二氧化硅，聚甲基硅氧烷，氧化鋁甘油EDTA二鈉黃原膠癸基糖苷泛醇，丙二醇軟化氷含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液生育酚醋酸酯沒藥醇芳香油防腐劑成分(INCI)鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇鯨蠟硬脂醇聚醚-25曱氧基肉桂酸乙基己酯環(huán)戊硅氧烷，環(huán)己硅氧烷0.5蜂蠟3.0鯨蠟硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化鈦，二氧化硅，聚甲基硅氧烷，氧化鋁C3.0甘油0.2EDTA二鈉0.3黃原膠1.0癸基糖苷2.0泛醇，丙二醇52.3軟化水D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2沒藥醇q.s.芳香油q.s.防腐劑制備加熱A相至約80'C，攪拌B相并勻化3min。同樣加熱C相至80。C并攪拌入混合的A和B相，同時(shí)勻化。冷卻至約40。C，攪拌加入D相并再次勻化。實(shí)施例86:KBD在足用香脂中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-255.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯4.0鯨蠟硬脂醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》廣物油0.2薄荷醇0.5樟腦B69.3軟化水q.s.防腐劑C1.0沒藥醇1.0生育酚醋酸酯D1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域_活性染料14—264的水性溶液5.0金縷梅提取物AI5%:%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-255.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯4.0鯨蠟硬脂醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》廣物油0.2薄荷醇0.5樟腦B65.3軟化水q.s.防腐劑C1.0沒藥醇1.0生育酚醋酸酯D5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液5.0金縷梅提取物制備分別加熱A和B相的組分至約80'C。將B相攪拌入A相，同時(shí)勻化。攪拌冷卻至約40'C，加入C和D相之后短暫勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例87:KBD在含有沒藥醇的W/O乳劑中的應(yīng)用AI1%:%成分(INCI)A6.0PEG-7氬化蓖麻油8.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯15.0礦物油0.3硬脂酸鎂0.3硬脂酸鋁2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸鎂55.6軟化水C1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6沒藥醇AI5%:%成分(INCI)A6.0PEG-7氫化蓖麻油8.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯15.0》廣物油0.3硬脂酸鎂0.3硬脂酸鋁2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸鎂51.6軟化水C5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6沒藥醇制備分別加熱A和B相至約80。C。將B相攪拌入A相并勻化。攪拌冷卻至約40'C,加入C和D相并再次短暫勻化。攪拌冷卻至室溫。本專利角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域制品的目錄一一護(hù)發(fā)實(shí)施例88:具有定型劑的泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.5聚二甲基硅氧烷共聚醇q.s.芳香油10.0醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液68.1軟化水10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.5聚二曱基硅氧烷共聚醇q,s.芳香油10.0醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液64.1軟化水B10.0丙烷/丁烷制備共同稱重A相組分，攪拌至所有物質(zhì)溶解并與B相一起裝瓶。實(shí)施例89:染發(fā)泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-40.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s，防腐劑91.5軟化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-40.5羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐劑87.5軟化水B6.0丙烷/丁烷制備共同稱重A相組分，攪拌至每種物質(zhì)溶解而得到澄清溶液并與B相一起裝瓶。實(shí)施例卯染發(fā)泡沫調(diào)理劑AI1%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-110.5羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐劑91.5軟化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季銨鹽-110.5羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q,s.防腐劑87.5軟化水B6.0丙烷/丁烷制備共同稱重A相組分，攪拌至每種物質(zhì)溶解而得到澄清溶液并與B相一起裝瓶。實(shí)施例91:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B77.3軟化水10.0聚季銨鹽-281.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B73.3軟化水10.0聚季銨鹽-285.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C10.0HFC152A制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。與C相一起裝瓶。實(shí)施例92:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(匿I)A2.0椰油基三甲基曱基硫酸銨q.s.芳香油B78.5軟化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C10.0HFC152AAI5%%成分(匿I)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B74.5軟化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羥乙基纖維素C10.0HFC152A制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。與C相一起裝瓶。實(shí)施例93:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B7.70聚季銨鹽-441.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液q.s.防腐劑79.3軟化水C10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B7.70聚季銨鹽-445.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液q.s.防腐劑75,3軟化水C10.0丙烷/丁烷制備混合A相組分。溶解B相的組分至澄清，然后將B相攪拌入A相。調(diào)節(jié)pH至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例94:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基曱基硫酸銨q.s.芳香油B7232軟化水2.00VP/丙烯酸酯/甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP1.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮畫40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20鋒乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸銨q.s.芳香油B68.32軟化水2.00VP/丙烯酸酯/甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP5.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二曱基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶脹，然后調(diào)節(jié)pH至6-7。與D相一起裝瓶。實(shí)施例95:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00西曲氯銨q.s.芳香油B67.85軟化水7.00聚季銨鹽-461.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二曱基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素I)6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00西曲氯銨q.s.芳香油B63.85軟化水7.00聚季銨鹽-465.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.20鯨蠟硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷，西曲氯銨，十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羥乙基纖維素D6.00丙烷/丁烷制備混合A相組分。依次添加B相的組分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶脹，然后調(diào)節(jié)pH至6-7。與D相一起裝瓶。實(shí)施例96:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬化蓖麻油q.s.芳香油85.5軟化水B7.0聚苯乙烯磺酸鈉1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氫化蓖麻油q.s.芳香油81.5軟化水B7.0聚苯乙烯磺酸鈉5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。稱重B相入A相并溶解至澄清。調(diào)節(jié)pH至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例97:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬化蓖麻油q.s.芳香油92.0軟化水B0.5聚季銨鹽-101.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬化蓖麻油q.s.芳香油88.0軟化水B0.5聚季銨鹽-105.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。稱重B相入A相并溶解至澄清。調(diào)節(jié)pH至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例98:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬4匕蓖麻油q.s.芳香油82.5軟化水B10.0聚季銨鹽-161.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5羥基乙基十六烷基二曱基磷酸銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬化蓖麻油q.s.芳香油78.5軟化水B10.0聚季銨鹽-165.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.5羥基乙基十六烷基二甲基磷酸銨q.s.防腐劑C6.0丙烷/丁烷制備增溶A相。稱重B相入A相并溶解至澄清。調(diào)節(jié)pH至6-7，與C相一起裝瓶。實(shí)施例99:染發(fā)定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B84.0軟化水2.0殼聚糖1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸銨q.s.芳香油B80.0軟化水2.0殼聚糖5.0含有約5。/。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蠟硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC訓(xùn)HFC152A制備混合A相組分。依次加入B相的組分并溶解。與C相一起裝瓶。實(shí)施例100:護(hù)理香波AI1%%成分(INCI)A30.0十二烷基硫酸鈉6.0椰油兩性乙酸鈉6.0椰油酰胺丙基甜菜堿3.0十二烷基石克酸鈉，二石更脂酸乙二醇酯，椰油酰胺MEA，聚乙二醇月桂基醚-101.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季銨鹽-442.0氨基封端的聚二曱基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.0氯化鈉43.3軟化水Bq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A30.0十二烷基石克酸鈉6.0椰油兩4生乙酸鈉6.0椰油酰胺丙基甜菜堿3.0十二烷基硫酸鈉，二硬脂酸乙二醇酯，椰油酰胺MEA，聚乙二醇月桂基醚-105.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季銨鹽-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.0氯化鈉39.3軟化水Bq.s.檸檬酸制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6-7。實(shí)施例101:淋浴凝膠AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸鈉5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜堿1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐劑2.0氯化鈉46.0軟化水Bq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸鈉5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜堿5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐劑2.0氯化鈉42.0軟化水Bq.s.檸檬酸制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6-7。實(shí)施例102:香波AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸鈉5.0C12-15鏈烷醇聚醚-15磺酸鈉5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇44.6軟化水1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液0.3聚季銨鹽-101.0泛醇q.s.防腐劑1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化鈉AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸鈉5.0C12-15鏈烷醇聚醚-15磺酸鈉5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇40.6軟化水5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液0.3聚季銨鹽-101.0泛醇q.s.防腐劑1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化鈉制備混合A相組分并溶解。用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6-7。實(shí)施例103:染發(fā)香波AI1%%成分(匿I)A15.00椰油酰胺丙基甜茱堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑1.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.15瓜爾膠羥丙基三曱基氯化銨2.00聚乙二醇月桂基醚-358.00軟化水q.s.檸檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯AI5%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜茱堿10.00椰油兩性二乙酸二鈉5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐劑5.00含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液0.15瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨2.00聚乙二醇月桂基醚-354.00軟化水q.s.檸檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯制備稱重A相中的組分并溶解。調(diào)節(jié)pH至6-7。加入B相并加熱至約40。C。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例104:潤膚護(hù)體膏霜AI1%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇3.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鯨蠟硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0;戶物油4.0西蒙得木(霍霍巴)種子油3.0礦物油，羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸鎂鋁q.s防腐劑65.5軟化水Cq.s.芳香油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.檸檬酸AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-252.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇3.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鯨蠟硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0;戶物油4.0西蒙得木(霍霍巴)種子油3.0礦物油，羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸鎂鋁q.s防腐劑61.5軟化水Cq.s.芳香油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.檸檬酸制備分別加熱A和B相至約80'C。短暫預(yù)勻化B相，然后將B相攪拌入A相并再次勻化。冷卻至約40'C,加入C相并再次充分勻化。用檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6-7。實(shí)施例105:潤膚護(hù)體膏霜AI1%%成分(INCI)A6.0PEG-7氫化蓖麻油10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯7.0》廣物油0.5乳木果油(牛油樹)0.5硬脂酸鋁0.5硬脂酸鎂0.2沒藥醇0.7季銨鹽-18水輝石B5.0二丙二醇0.7硫酸鎂q.s.防腐劑62.9軟化水Cq.s.芳香油1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液AI5%%成分(INCI)A6.0PEG-7氫化蓖麻油10.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸異丙酯7.0》戶物油0.5乳木果油(牛油樹)0.5硬脂酸鋁0.5硬脂酸鎂0.2沒藥醇0.7季銨鹽-18水輝石B5.0二丙二醇0.7硫酸鎂q.s.防腐劑58.9軟化水Cq，s.芳香油5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14—264的水性溶液制備分別加熱A和B相至約80。C。將B相攪拌入A相并勻化。冷卻至約40。C,同時(shí)攪拌。攪拌冷卻至約40。C，加入C相并再次勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例106:液體化妝品——OAV型AI1%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6，十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯l，O鯨蠟醇8.0,廣物油7.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二曱基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐劑61.9軟化水C0.1沒藥醇1.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891,二氧化鈥1.1氧化鐵AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鯨蠟硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鯨蠟醇8,0礦物油7.0鯨蠟硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二甲基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐劑57.9軟化水C0.1沒藥醇5.0含有約5%角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891，二氧化鈦1.1氧化鐵制備分別加熱A和B相至約80°C。將B相攪拌入A相并勻化。冷卻至約40。C,同時(shí)攪拌。攪拌冷卻至約40'C，加入C和D相并再次充分勻化。攪拌冷卻至室溫。實(shí)施例107:下文描述了本發(fā)明的皮膚化妝品，它包含按照實(shí)施例19制備的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子(與染料14—264偶聯(lián)的SEQIDNo.:ID168的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)。所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在下文的實(shí)施例中稱作角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域—活性染料14—264。對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，理所當(dāng)然地，可以使表6和7中所述的所有其它染料與KBD按照實(shí)施例19、19a和19b偶聯(lián)并用于下述制品。將所示的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14一264KBD-D(SEQIDNo.:168)作為約5%重量濃度的水性溶液使用。下列數(shù)據(jù)為重量份透明染發(fā)香波<table>tableseeoriginaldocumentpage377</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage378</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage379</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage380</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage381</column></row><table>調(diào)節(jié)pH至6.0熏發(fā)膠霜<table>tableseeoriginaldocumentpage381</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage382</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage383</column></row><table>ow防曬制品<table>tableseeoriginaldocumentpage383</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage384</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage385</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage386</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage387</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage388</column></row><table>棒狀物<table>tableseeoriginaldocumentpage389</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage390</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage391</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage392</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage393</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage394</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage395</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage396</column></row><table>具有熏色效果的自助美黑水分散體<table>tableseeoriginaldocumentpage396</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage397</column></row><table>日曬后用水分散體<table>tableseeoriginaldocumentpage397</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage398</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage399</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage400</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage401</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage402</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage403</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage404</column></row><table>實(shí)施例108:在下列制品中，描述了包含至少一種無機(jī)色素，優(yōu)選氧化鋅和/或氧化鈦，UvinulAPlus和其他UV-A和UV-B有機(jī)過濾劑的組合的美容防曬制品。本文的無機(jī)色素可以以包衣形式存在，即對它們進(jìn)行表面處理。例如，這種表面處理可以通過本身公知的方法，如DE-A-3314742中所述的方法為色素提供疏水薄層。按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)方式制備下述制品。下文描述了本發(fā)明的皮膚美容制品，它包含按照實(shí)施例19制備的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子(與染料14—264偶聯(lián)的SEQIDNo.:ID168的角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域)。所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在下文的實(shí)施例中稱作角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料l4—264。對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，理所當(dāng)然地，可以使表6和7中所述的所有其它染料與KBD按照實(shí)施例19、19a或19b偶聯(lián)并用于下述制品。角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_264KBD-D(SEQIDNo.:168)的含量是指100%的活性成分。本發(fā)明的活性成分可以以純的形式或作為水性溶液使用。就水性溶液而言，在特定制品中的軟化水含量必須予以調(diào)適。<table>tableseeoriginaldocumentpage405</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage406</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage407</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage408</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage409</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage410</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage411</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage412</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage413</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage414</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage415</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage416</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage417</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage418</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage419</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage420</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage421</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage422</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage423</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage424</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage425</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage426</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage427</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage428</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage429</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage430</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage431</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage432</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage433</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage435</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage436</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage437</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage438</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage439</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage440</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage441</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage442</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage443</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage444</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage445</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage446</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage447</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage448</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage449</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage450</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage451</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage452</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage453</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage454</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage455</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage456</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage457</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage458</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage459</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage460</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage461</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage462</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage463</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage464</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage465</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage466</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage467</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage468</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage469</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage470</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage471</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage472</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage473</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage474</column></row><table>200680052113.X說明書第465/474頁2.00UvinulAPlus二乙氨基羥基苯甲?；夯郊姿狨?.00UvinulN539T氰雙笨丙烯酸辛酯3.00Z-COTEMAX氧化鋅，二苯基癸?；蹠趸柩跬?.00AbilB8843PEG-14聚二曱基硅氧烷3.60LanetteO鯨蠟硬脂醇4.00UvinulMC80曱氧基肉桂酸乙基己酯2.00CetiolB己二酸二丁酯B4.00甘油87%甘油0.20EdetaBDEDTA二鈉71.00軟化水泛醇C楊LuvigelEM辛酸/癸酸甘油三酯，丙烯酸鈉共聚物D1.00維生素E醋酸酯生育酚醋酸酯1.00角蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域一活性染料14_2640.20外消旋沒藥醇沒藥醇q.s,防腐劑<table>tableseeoriginaldocumentpage475</column></row><table>A7.50UvinulMC80甲氧基肉桂酸乙基己酯5.00UvinulN539T氰雙苯丙烯酸辛酯3.00EmulgadePL68/50鯨蠟硬脂基糖苷，鯨蠟硬脂醇2.00Dracorin100SE硬脂酸甘油酯，PEG-100硬脂酸酯1.00Fitoderm角鯊?fù)?.50CremophorWO7PEG-7氫化蓖麻油0.50CremophorPS20聚山梨醇酯202.00DryFloPure辛烯基琥珀酸淀粉鋁B5.00Z-COTEMAX氧化鋅，二苯基癸?；奂谆柩跬?.03Sicomet藍(lán)色P77007C.I.77007，群青475<table>tableseeoriginaldocumentpage476</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage477</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage478</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage479</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage480</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage481</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage482</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage483</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage484</column></row><table>權(quán)利要求1.角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，包含(a)至少一種活性染料(i)；和(b)至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii)。2.權(quán)利要求l所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中所述角蛋白結(jié)合多肽(ii)對人毛發(fā)角蛋白，指曱角蛋白或皮膚角蛋白具有結(jié)合親和力。3.權(quán)利要求l-2中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中所用的角蛋白結(jié)合多肽(ii):(a)包含至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列；或(b)對應(yīng)于這樣的多肽，所述多肽與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能夠結(jié)合角蛋白。4.權(quán)利要求l-3中任一項(xiàng)所迷的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中所用的角蛋白結(jié)合多肽(ii)由這樣的核酸分子編碼，所迷核酸分子包含至少一種選自如下的核酸分子(a)編碼多肽的核酸分子，所述多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列;(b)包含至少一種SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示多核普酸的核酸分子;(c)編碼SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列的多肽的核酸分子；(d)具有這樣的核酸序列的核酸分子，所述核酸序列對應(yīng)于至少一種SEQIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列；或?yàn)橥ㄟ^取代、缺失或插入從中衍生的核酸分子，其編碼的多肽與至少一種SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能夠結(jié)合角蛋白；(e)編碼單克隆抗體識別的多肽的核酸分子，所述單克隆抗體抗如(a)至(c)中所示核酸分子編碼的多肽；(f)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，所述核酸分子在嚴(yán)格條件下與如(a)至(c)中所示的核酸分子雜交；(g)編碼角蛋白結(jié)合蛋白的核酸分子，在嚴(yán)格雜交條件下，利用如(a)月b夠從DNA庫中分離所述核酸分子；和h)能夠通過序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻譯產(chǎn)生的核酸分子。5.權(quán)利要求l-4中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中所述活性染料(i)具有至少一種選自如下的活性固著點(diǎn)(a)在堿性條件下可活化的式l的基團(tuán)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>式l其中表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵，X為吸電子基團(tuán)或烷基、-O-烷基、氰基、羥基、卣素基團(tuán)或H，k為l、2或3，n為0或l，且B為基團(tuán)CH=CH2或基團(tuán)CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2，其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)，(b)式2的丙烯酰氨基固著點(diǎn)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中一一表示與染料分子D連接的價(jià)鍵；和(c)式3、4或5的化合物之一其中…—表示與染料分子(D)連接的價(jià)鍵，V為氟或氯；U,、U2彼此獨(dú)立地為氟、氯或氫；且Q,、Q2彼此獨(dú)立地為氯、氟、氰氨基、羥基、(d-C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巰基、(d-C6)-烷基巰基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基曱酰基吡啶并或通式6或7的基團(tuán)R2式6—N、W—SO,Z式7R3一NR4其中R^為氫或(d-C6)-烷基、磺基-(d-C6)-烷基，或者未被取代或被(d-C4)-烷基、(C,-C4)-烷氧基、磺基、自素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基；113和114彼此獨(dú)立地具有112的含義之一，或?yàn)橥ㄊ?的基團(tuán)，R24/R25N+—R26式8V或形成式-(CH2)r的環(huán)系，其中j為4或5;或可選地為-(CH2)2-E-(CH2)2-，其中E為氧、硫、磺基、-NR5-，其中R^(C廣C6)-烷基;W為亞苯基，其未蜂皮取代或被l或2個(gè)諸如(C,-C4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代；或?yàn)?d-C4)-亞烷基-亞芳基或(C2-C6)-亞烷基，其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羧氨基中斷；或?yàn)閬啽交?CONH-亞苯基，其未被取代或被(d-C4)-烷基、(C廠C4)-烷氧基、羥基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或g素取代；或?yàn)閬嗇粱湮幢蝗〈虮灰粋€(gè)或兩個(gè)磺基取代；Z為基團(tuán)CH=CH2或基團(tuán)CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2，其中Q為能夠在堿性條件下裂解的基團(tuán)；R24、R25和R26為(d-C4)-烷基或(CrC4)-羥基烷基；且B-為陰離子的等效物，如硫酸氫鹽、硫酸鹽、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氫鹽、躊酸氫鹽、磷酸鹽、氫氧化物或乙酸鹽。6.權(quán)利要求5所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中式1中至少一個(gè)X基團(tuán)為基團(tuán)S03H。7.權(quán)利要求4-6中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中式1中的B為-CH:CH2、基團(tuán)-CH2-CH2-0-S03H，i^》CH2-CH2Cl。8.權(quán)利要求4-7中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中式l的可活化基團(tuán)與染料分子(D)通過基團(tuán)-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-S(V或-N(R)-鍵合，其中R為烷基。9.權(quán)利要求8所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中染料(D)選自酞菁系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲膽染料、二噁嗪染料、吖啶染料、^噸染料、聚甲炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基甲烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮染料以及這些染料的金屬絡(luò)合物。10.權(quán)利要求4-9中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中式l中的"n"為0。11.權(quán)利要求5-10中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，包含至少一種這樣的活性染料，其中式l-5的活性固著點(diǎn)選自下列基團(tuán)(l-l)至(l-43):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>12.權(quán)利要求l-ll中任一項(xiàng)所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中所述的活性染料(i)與所述的角蛋白結(jié)合多肽(ii)通過連接分子間接偶聯(lián)。13.權(quán)利要求12所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，其中使用式9或10的連接分子(iii)，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>式9其中"n"為0-40的整數(shù)。14.權(quán)利要求1-13所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子在染發(fā)劑中的用途用。15.染發(fā)劑，包含權(quán)利要求1-13所述的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。16.使用至少一種角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子染色毛發(fā)或皮膚的方法，所述角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子包含(a)至少一種角蛋白結(jié)合多肽(ii);和(b)活性染料(i)或染料。17.權(quán)利要求16所述的方法，其中使用至少一種權(quán)利要求1-13中定義的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子。18.權(quán)利要求16-17所述的方法，其中所述的染色是可逆的，其中通過置換反應(yīng)用溶液處理而從皮膚或毛發(fā)中除去角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子，所述溶液包含i.角蛋白結(jié)合多肽類，或ii.皮膚或毛發(fā)角蛋白，或iii.去污劑。全文摘要本發(fā)明涉及包含活性染料和角蛋白結(jié)合多肽的角蛋白結(jié)合效應(yīng)分子及其在染發(fā)制品中的用途。本發(fā)明還涉及染發(fā)方法。文檔編號A61K8/64GK101370822SQ200680052113公開日2009年2月18日申請日期2006年11月23日優(yōu)先權(quán)日2005年12月1日發(fā)明者A·普托克,B·利布曼,H·巴爾格,H·里恩茨,L·索莫吉,M·弗爾克特申請人:巴斯夫歐洲公司