專利名稱：用于治療癌癥的meleimide衍生物、藥物組合物以及方法
相關(guān)申請的交叉引用
本申請要求2005年2月9日提交的第60/650,951號美國臨時申請的優(yōu)先權(quán)，該申請全文并入此處作為參考。
背景技術(shù)：
癌癥在美國是第二大死因，僅次于心臟病(Cancer Facts and Figures 2004，American Cancer Society，Inc.)。盡管隨著癌癥診斷和治療技術(shù)的最新發(fā)展，手術(shù)治療和放射治療可能治愈早期確診的癌癥，但是現(xiàn)在對腫瘤轉(zhuǎn)移性疾病的藥物療法大多只起到緩和作用并很少能實現(xiàn)長期治愈。甚至在最新的化學療法進入市場后，仍然需要在治療耐藥性腫瘤中能夠有效地以單一療法或與現(xiàn)有藥物結(jié)合作為一線治療、及二線和三線治療的新藥。
癌細胞被定義為異源的(heterogeneous)。例如，在單一組織或細胞類型中，多種突變“機制”可能導致癌癥的發(fā)生。同樣地，從源自不同個體的相同組織和相同類型的腫瘤中得到的癌細胞之間的異源性(heterogeneity)是經(jīng)常存在的。經(jīng)常觀察到的與某些癌癥相關(guān)的突變“機制”可能隨組織類型的不同而不同(例如，經(jīng)常觀察到的導致結(jié)腸癌的突變“機制”可能與經(jīng)常觀察到的導致白血病的突變“機制”不同)。因此，預(yù)測某種特定癌癥是否會對特定的化學治療藥物響應(yīng)通常是困難的(CancerMedicine，5th Edition，Bast等eds.，B.C.Decker Inc.，Hamilton，Ontario)。
乳腺癌是女性中最常見的非皮膚癌癥，并且是女性第二大癌癥死因，僅次于肺癌(Cancer Facts and Figures 2004，American Cancer Society，Inc.)?，F(xiàn)在對乳腺癌的治療選擇包括外科手術(shù)、放射療法、以及使用藥物如他莫昔芬、芳香酶抑制劑、HERCEPTIN(曲妥珠單抗(trastuzumab))、TAXOL(紫杉醇)、環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤、多柔比星(阿霉素)、以及5-氟脲嘧啶的化學療法/激素治療。盡管癌癥的檢測和治療都有改善，但乳腺癌發(fā)病率自1980年以來持續(xù)增加。在2004年，預(yù)計女性新增約215000乳腺癌病例，預(yù)計男性新增約1450乳腺癌病例。(同前)。因此，需要用于治療乳腺癌的新化合物和方法。
調(diào)節(jié)正常細胞的生長和分化的細胞信號途徑的組成部分一旦失調(diào)，會導致細胞增生性疾病和癌癥。細胞信號傳導蛋白的突變可能導致該蛋白以不合適的水平或在細胞周期中不合適的時間表達或激活，這又可能導致不受控的細胞生長或細胞-細胞連接(attachment)特性的改變。例如，已發(fā)現(xiàn)由于突變、基因重組、基因擴增、以及受體和配基的過表達導致的受體酪氨酸激酶失調(diào)與人類癌癥的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。
c-Met受體酪氨酸激酶是已知唯一的也被稱為散射因子(scatter factor)的肝細胞生長因子(HGF)的高親和性受體。將HGF與c-Met細胞外配體結(jié)合區(qū)域結(jié)合導致受體多聚化和在c-Met細胞內(nèi)部的多種酪氨酸殘基的磷酸化。c-Met激活導致銜接蛋白(adaptor protein)如Gab-1、Grb-2、Shc、以及c-Cbl的結(jié)合和磷酸化，并且隨后的信號轉(zhuǎn)導蛋白如PI3K、PLC-γ、多種STAT、ERP1和2、以及FAK)的激活。c-Met和HGF在許多組織中表達，并且它們的表達一般主要分別限定在上皮來源的細胞和間質(zhì)來源的細胞中。c-Met和HGF在人類腫瘤中為失調(diào)的，并且在疾病發(fā)展和轉(zhuǎn)移期間導致細胞生長失調(diào)、腫瘤細胞傳播、以及腫瘤侵襲(例如見，Journal of ClinicalInvestigation 109863-867(2002)以及Cancer Cell pp 5-6July 2004)。相對于周圍組織，c-Met和HGF在許多腫瘤中高度表達，并且其表達與較差的病人預(yù)后相關(guān)(例如見，Journal of Cellular Biochemistry 86665-677(2002)；Int.J.Cancer(Pred.Oncol.)74301-309(1997)、Clinical Cancer Research 91480-1488(2003)、以及Cancer Research62589-596(2002))。無意于被任何理論所限定，c-Met和HGF可能防止有DNA損害劑誘發(fā)的腫瘤細胞死亡，并可能導致腫瘤的化學抗性和抗輻射性。無意于被任何理論所限定，c-Met抑制劑可在增生性疾病包括乳腺癌的治療中用作治療劑。(例如見，Cancer and Metastasis Reviews 22309-325(2003))。
并非認為本文中所引用的參考資料是所要求保護的本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了式IVa、IVb、Va或Vb的吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物以及制備式IVa、IVb、Va和Vb的化合物的方法，

其中， R1、R2和R3各自獨立地選自由氫、F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、和-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基組成的組中； R4獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-CH2R7組成的組中； R5、R6獨立地選自由氫、以及-(C1-C6)烷基組成的組中； R7獨立地選自由-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基)、-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2、羧酸基、氨基羧酸基和肽組成的組中； Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基組成的組中； X選自由-(CH2)-、-(NR8)-、S、和O組成的組中； R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、和-O-(C1-C6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-C6)烷基和-C(＝O)-O-(C1-C6)取代的烷基組成的組中； Y選自由-(CH2)-或鍵組成的組中； 其中所述的芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基可被一個或多個取代基取代，該取代基獨立地選自由F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、以及-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基；以及 m為1或2。
在一個實施方式中，R4為-CH2R7，而R7為-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、羧酸基、氨基羧酸基或肽。
在一個實施方式中，X選自由-(NR8)-、S、以及O所組成的組中。
在一個實施方式中，m為2。
在一個優(yōu)選實施方式中，吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物選自由(+)-順式-3-(5，6-二氫-4H-二吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(-)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、和(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮組成的組中。在另一個優(yōu)選實施方式中，化合物是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
本發(fā)明也提供式IIIa所示的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物及它們的合成方法。

其中 R1、R2和R3各自獨立地選自由氫、F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、和-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基組成的組中； R4獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-CH2R7組成的組中； R5、R6獨立地選自由氫、和-(C1-C6)烷基組成的組中； R7獨立地選自由-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基)、-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2、羧酸基、氨基羧酸基或肽組成的組中； Q選自由芳基、雜環(huán)基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基組成的組中；條件是當R4是氫、(C3-C4)環(huán)烷基、或(C1-C4)烷基時，Q不是3-吲哚基或取代的3-吲哚基； X選自由-(CH2)-、-(NR8)-、S、和O組成的組中； R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-C6)烷基和-C(＝O)-O-(C1-C6)取代的烷基組成的組中； Y選自由-(CH2)-或鍵組成的組中； 其中所述的芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基可被一個或多個取代基取代，該取代基獨立地選自由F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、以及-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基組成的組中；以及 m是1或2。
本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包含一種或多種式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，以及一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，其包含式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，以及一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑。
本發(fā)明提供了治療細胞增生性疾病的方法，所述方法包括將治療有效量的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，或其藥物學可接受的鹽，或其前藥、代謝物、類似物、或衍生物與藥物學可接受的載體結(jié)合對有此需要的對象給藥，其中所述的細胞增生性疾病得到治療。
在一個實施方式中，該細胞增生性疾病為癌癥。
在一個優(yōu)選實施方式中，該化合物選自由(+)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(-)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、和(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮；或其藥物學可接受的鹽、或其前藥、代謝物、類似物、或衍生物。
本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)c-Met活性的方法，其包括將有效量的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，或其藥物學可接受的鹽，或其前藥、代謝物、類似物、或衍生物與細胞接觸，其中所述的接觸導致了上述c-Met活性的調(diào)節(jié)。
在一個實施方式中，這種調(diào)節(jié)為抑制。
在一個實施方式中，該化合物調(diào)節(jié)c-Met活性的同時，不顯著調(diào)節(jié)蛋白激酶C的活性。
本發(fā)明還提供了一種選擇性地抑制c-Met活性，同時不抑制蛋白激酶C的活性的方法，該方法包括將有效量的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，或其藥物學可接受的鹽，或其前藥、代謝物、類似物、或衍生物與細胞接觸，其中所述的接觸導致了上述選擇性地抑制c-Met活性，而不抑制蛋白激酶C的活性。
本發(fā)明還提供了一種選擇性地在癌前細胞或癌細胞中誘導細胞死亡的方法，該方法包括將有效量的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物，或其藥物學可接受的鹽，或其前藥、代謝物、類似物、或衍生物與細胞接觸，其中所述的接觸導致了上述選擇性地在癌前細胞和癌細胞中誘導細胞死亡。
本發(fā)明進一步提供了一種治療癌癥的方法，其包括選擇性地調(diào)節(jié)c-Met的活性，(or both)同時不顯著調(diào)節(jié)蛋白激酶C的活性。
本發(fā)明進一步提供了一種篩選治療癌癥的候選化合物的方法，其包括將候選化合物與細胞接觸，測量c-Met活性，測量蛋白激酶C的活性，并選擇能夠選擇性地抑制c-Met活性，同時不顯著抑制蛋白激酶C的活性的候選化合物，其中上述的能夠選擇性地抑制c-Met活性，同時不顯著抑制蛋白激酶C的活性的候選合物為治療癌癥的候選化合物。在一個實施方式中，該蛋白激酶C的活性在體外測量。
本發(fā)明的其他特點和優(yōu)勢在本文中其它描述包括不同的實施例中體現(xiàn)出來。所提供的實施例說明了可用于實施本發(fā)明的不同的組分和方法。這些實施例不限制所要求保護的發(fā)明?；诒竟_，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定并使用其他可用于實施本發(fā)明的不同的組分和方法。



圖1表示的是(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的化學結(jié)構(gòu)。
圖2表示的是(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對MDA-MB-231或Paca-2細胞在體外存活的影響。
圖3表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對MDA-MB-231細胞在體外存活的影響。
圖4表示的是(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對蛋白激酶C在體外的活性影響。
圖5表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對c-Met磷酸化和ERK1/2磷酸化的抑制作用。
圖6表示的是以160mg/kg單獨給藥，(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對異種移植在無胸腺的母裸鼠中的MDA-MB-23人類乳腺癌腫瘤生長的影響。
圖7表示的是以80mg/kg單獨給藥，(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對異種移植在無胸腺的母裸鼠中的MDA-MB-23人類乳腺癌腫瘤生長的影響。
圖8表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮誘導癌細胞凋亡的影響。
圖9表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮抑制轉(zhuǎn)移的癌細胞侵襲的影響。
圖10表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對乳腺癌異種移植模型的影響。
圖11表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對結(jié)腸癌異種移植模型的影響。
圖12表示的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對胰腺癌異種移植模型的影響。

具體實施例方式 1.吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮和吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮 本發(fā)明提供了式III和IIIa的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物及其合成。

其中 R1、R2和R3各自獨立地選自由氫、F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、和-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基組成的組中； R4獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-CH2R7組成的組中； R5、R6獨立地選自由氫、以及-(C1-C6)烷基組成的組中； R7獨立地選自由-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基)、-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2、羧酸基、氨基羧酸基或肽組成的組中； Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基組成的組中； X選自由-(CH2)-、-(NR8)-、S、和O組成的組中； R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、和-O-(C1-C6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-C6)烷基和-C(＝O)-O-(C1-C6)取代的烷基組成的組中； Y選自由-(CH2)-或鍵組成的組中； 其中所述的芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基可被一個或多個取代基取代，該取代基獨立地選自由F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、以及-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基；以及 m為1或2。
對于式IIIa的化合物，Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基組成的組中，條件是若R4為氫、(C3-C4)環(huán)烷基、或(C1-C4)烷基時，Q不是3-吲哚基或取代的3-吲哚基。
本發(fā)明還提供了式IVa、IVb、Va或Vb的吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物以及制備這些式IVa、IVb、Va或Vb的化合物的方法。

其中 R1、R2和R3各自獨立地選自由氫、F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、和-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基組成的組中； R4獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-CH2R7組成的組中； R5、R6獨立地選自由氫、以及-(C1-C6)烷基組成的組中； R7獨立地選自由-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基)、-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2、羧酸基、氨基羧酸基和肽組成的組中； Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基組成的組中； X選自由-(CH2)-、-(NR8)-、S和O組成的組中； R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、和-O-(C1-C6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-C6)烷基和-C(＝O)-O-(C1-C6)取代的烷基組成的組中； Y選自由-(CH2)-或鍵組成的組中； 其中所述的芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基可被一個或多個取代基取代，該取代基獨立地選自由F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、以及-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基；以及 m為1或2。
1.1定義 術(shù)語“烷基”指的是含碳和氫的飽和的基團。烷基基團可以是直鏈的或支鏈的。示例性的烷基基團包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、己基、叔丁基、仲丁基等等。烷基組可以范圍來表示，例如，(C1-C6)烷基是指在直鏈或支鏈烷基主鏈上含有1到6個碳原子的烷基。取代的或未被取代的烷基組可以獨立地為(C1-C5)烷基、(C1-C6)烷基、(C1-C10)烷基、(C3-C10)烷基、或(C5-C10)烷基。除非特別說明，術(shù)語“烷基”不包括“環(huán)烷基”。
“環(huán)烷基”指的是在“環(huán)部分”有所示數(shù)目碳原子的環(huán)狀的烷基，其中“環(huán)部分”可以由一個或多個或者是稠合的、螺環(huán)的或者是橋環(huán)結(jié)構(gòu)的環(huán)結(jié)構(gòu)組成。例如，C3至C6環(huán)烷基(例如，(C3-C6)環(huán)烷基)是在環(huán)中有3至6個碳原子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。當沒有給出范圍時，則環(huán)烷基在環(huán)部分有3至9個碳原子((C3-C9)環(huán)烷基)。示例性的環(huán)烷基包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基以及金剛烷基。優(yōu)選的環(huán)烷基在環(huán)結(jié)構(gòu)中有3、4、5、6、7、8、9或3至9個碳原子。
術(shù)語取代的烷基和取代的環(huán)烷基指的是上述定義的烷基和環(huán)烷基，其被一個或多個獨立地選自由氟、芳基、雜芳基、-O-(C1-C6)烷基、以及-NR5R6所組成的組中的取代基取代，其中R5和R6獨立地選自由氫以及-(C1-C6)烷基所組成的組中。
術(shù)語“芳基”指的是具有1、2或3個芳香環(huán)的芳香碳環(huán)基。示例性的芳基包括但不限于苯基、萘基等等。芳基包括與一個或多個另外的4至9元的非芳香碳環(huán)或雜環(huán)稠合的1、2或3個芳香環(huán)結(jié)構(gòu)。稠合芳基的實例包括苯并環(huán)丁基、茚滿基、四氫亞萘基(tetrahydronapthylenyl)、1，2，3，4-四氫菲基、四氫蒽基、1，4-二氫-1，4-亞甲基萘基、苯并二氧雜戊環(huán)基(benzodioxolyl)。
術(shù)語“雜芳基”指的是具有1、2或3個芳香環(huán)的雜芳香基(雜芳基)，且該芳香環(huán)上含有1-4個雜原子(例如氮、硫或氧)。雜芳基包括1、2或3個含有1-4個雜原子的芳香環(huán)結(jié)構(gòu)，該芳香環(huán)結(jié)構(gòu)與一個或多個其它4-9元的非芳香環(huán)稠和。芳香環(huán)上含有單一類型雜原子的雜芳基按照其所含有的雜原子類型表示，因此含氮雜芳基、含氧雜芳基和含硫雜芳基指的是分別含有一個或多個氮原子、氧原子或硫原子的雜芳香基。示例性的雜芳基包括但不限于吡啶基、嘧啶基、三唑基、喹啉基、喹唑啉基、噻唑基、苯并[b]噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲哚基等等。
術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”指的是飽和的或不飽和的、穩(wěn)定的非芳香環(huán)結(jié)構(gòu)，其可以稠和、螺環(huán)或橋環(huán)形式形成另外的環(huán)。每個雜環(huán)由一個或多個碳原子和1至4個選自由氮、氧和硫組成的組中的雜原子組成?！半s環(huán)基”或“雜環(huán)”包括穩(wěn)定的非芳香性的3-7元單環(huán)雜環(huán)環(huán)結(jié)構(gòu)和8-11元雙環(huán)雜環(huán)環(huán)結(jié)構(gòu)。雜環(huán)基可以結(jié)合在任何能獲得穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的內(nèi)環(huán)碳或氮原子上。優(yōu)選的雜環(huán)包括3-7元單環(huán)雜環(huán)(更優(yōu)選5-7元單環(huán)雜環(huán))和8-10元雙環(huán)雜環(huán)。這種基團的實例包括哌啶基、哌嗪基、吡喃基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、氧代哌啶基(oxopiperidinyl)、氧代吡咯烷基、氧代氮雜罩基、氮雜基、異噁唑基(isoxozolyl)、四氫吡喃基、四氫呋喃基、間二氧雜環(huán)戊烯基(dioxolyl)、二氧雜環(huán)己烯(dioxinyl)、氧雜硫醇基(oxathiolyl)、二硫酚基、環(huán)丁砜基、二氧雜環(huán)己烷基、二氧雜環(huán)戊烷基、四氫呋喃并二氫呋喃基(tetahydrofurodihydrofuranyl)、四氫吡喃并二氫呋喃基、二氫吡喃基、四氫呋喃并呋喃基(tetrahydrofurofuranyl)、四氫吡喃并呋喃基、奎寧環(huán)基(1-氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷基)和莨菪烷基(8-甲基-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷基)。
對于取代基Q，術(shù)語“取代的3-吲哚基”指的是3-吲哚基被一個或多個選自由F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)和-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基組成的組中的取代基取代；其中R5、R6獨立地選自由氫和-(C1-C6)烷基組成的組中。
對于取代基R7，術(shù)語“羧酸基”指的是-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基、-O-C(＝O)-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-雜芳基、-O-C(＝O)-雜環(huán)、-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-芳基、-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-雜芳基或-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-雜環(huán)形式的基團?！棒人峄敝邪?O-C(＝O)-(C1-C6)烷基、-O-C(＝O)-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-雜芳基、-O-C(＝O)-雜環(huán)、-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-芳基、-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-雜芳基、或-O-C(＝O)-(C1-C6)烷基-雜環(huán)形式的基團，所述基團被一個或多個獨立地選自由F、Cl、Br、I、-OH、-SH、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-S-(C1-C6)烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基、-NH-C(＝NH)-NH2(即、胍基(guanido))、-COOH和-C(＝O)-NR5R6組成的組中的取代基取代，其中R5和R6獨立地選自由氫和-(C1-C6)烷基組成的組中。此外，對于取代基R7，術(shù)語“氨基羧酸基”指的是羧酸基，包括被一個或多個如上所述的取代基取代的羧酸基，其與一個或多個獨立地選擇的-NR5R6形式的氨基相連，其中R5和R6獨立地選自由氫和-(C1-C6)烷基組成的組中。
在本發(fā)明的一個實施方式中，R7是α氨基酸或亞氨基酸，包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸或其立體異構(gòu)體或外消旋混合物。在本發(fā)明另一個實施方式中，R7是α氨基酸或亞氨基酸，其選自由L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-纈氨酸組成的組中。
對于取代基R7，術(shù)語“肽”指的是二肽、三肽、四肽或五肽，它們在水解時分別釋放出二個、三個、四個或五個氨基酸或亞氨基酸(例如脯氨酸)。對于R7，肽通過酯鍵連接到分子剩余部分上。在一個實施方式中，肽R7由α氨基酸或亞氨基酸組成，包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸或它們的立體異構(gòu)體或外消旋混合物；并且在更優(yōu)選形式的該實施方式中，與側(cè)鏈羧基相反，涉及所述酯鍵的羧基是肽的羧基末端COOH基。在本發(fā)明另一個實施方式中，R7是α氨基酸或亞氨基酸，其選自由L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、以及L-纈氨酸組成的組中；并且在更優(yōu)選形式的該優(yōu)選實施方式中，與側(cè)鏈羧基相反，涉及所述酯鍵的羧基是肽的羧基末端COOH基。
1.2.優(yōu)選的化合物 包括在優(yōu)選實施方式中的是式III、IVa、IVb、Va或Vb化合物，其中Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基和-S-雜芳基組成的組中，條件是Q不是3-吲哚基或取代的3-吲哚基。在其它優(yōu)選實施方式中，Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基和-S-雜芳基組成的組中，條件是當R4是氫、環(huán)烷基或烷基時，Q不是3-吲哚基或取代的3-吲哚基。在其它優(yōu)選實施方式中，Q選自由芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基和-S-雜芳基組成的組中，條件是當R4是氫、(C3-C4)環(huán)烷基或(C1-C4)烷基時，Q不是3-吲哚基或取代的3-吲哚基。在另一優(yōu)選實施方式中，Q是3-吲哚基或取代的3-吲哚基，條件是R4不是氫、環(huán)烷基或烷基。在另一優(yōu)選實施方式中，Q是3-吲哚基或取代的3-吲哚基，條件是R4不是氫、(C3-C4)環(huán)烷基或(C1-C4)烷基。
其它優(yōu)選實施方式包括其中R4是-CH2R7的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物。這些化合物可用作相應(yīng)的其中R4是H的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物的前藥形式。所述前藥形式通過水解斷裂釋放出其中R4是H的相應(yīng)化合物。水解可通過酶或非酶路徑發(fā)生，并產(chǎn)生相應(yīng)的羥基亞甲基衍生物，該羥基亞甲基衍生物隨后在水解時釋放出其中R4是H的化合物。在一個這樣的優(yōu)選實施方式中，R4是-CH2R7，其中R7是-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)或-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2。在一個其中R7是-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2的實施方式中，獨立地選擇烷基。在另一個優(yōu)選實施方式中，R4是-CH2R7，其中R7是羧酸基或氨基羧酸基。在另一個優(yōu)選實施方式中，R7是肽；在更優(yōu)選的實施方式中，肽通過由肽鏈羧基末端的COOH反應(yīng)形成的酯鍵連接至化合物的剩余部分。在其它其中R4是-CH2R7并且R7是肽的式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb化合物的優(yōu)選的單獨的和獨立的實施方式中，所述肽可以是二肽、三肽、四肽或五肽。R7官能團的肽的優(yōu)選的氨基酸成分如上文所述。
式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物的實施方式包括那些其中X選自由-(NR8)-、S和O組成的組中，其中R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基和-O-(C1-C6)烷基組成的組中。式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物的其它實施方式包括那些其中X是-CH2-的化合物。在式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物的其它實施方式中，X是硫(S)。在式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物的其它實施方式中，X是-(NR8)-，其中R8獨立地選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基和-O-(C1-C6)烷基組成的組中。
本發(fā)明其它優(yōu)選實施方式包括式IIIa化合物，其中Q是雜芳基或任選地取代的雜芳基。在四個獨立的可選擇的優(yōu)選的式IIIa化合物的實施方式中，Q是任選地取代的單環(huán)雜芳基、任選地取代的雙環(huán)雜芳基，任選地取代的雙環(huán)雜芳基，條件是該雙環(huán)雜芳基不是吲哚基或取代的吲哚基，或任選地取代的三環(huán)雜芳基。任選的取代基，如果存在，獨立地選自那些對于芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基和-S-雜芳基所述的。
包括在本發(fā)明優(yōu)選實施方式中的是式IVa、IVb、Va或Vb的化合物，其中Q是雜芳基或任選地取代的雜芳基。在四個獨立的可選擇的優(yōu)選的式IVa、IVb、Va或Vb的化合物的實施方式中，Q是任選地取代的單環(huán)雜芳基、任選地取代的雙環(huán)雜芳基，任選地取代的雙環(huán)雜芳基，條件是該雙環(huán)雜芳基不是吲哚基，或任選地取代的三環(huán)雜芳基。在更優(yōu)選的實施方式中，Q是任選地取代的含氮雜芳基。在相關(guān)的實施方式中，Q是任選地取代的吲哚基。任選的取代基，如果存在，獨立地選自那些對于芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基和-S-雜芳基所述的。
本發(fā)明優(yōu)選實施方式包括式IVa和IVb化合物的混合物，包括外消旋混合物。在另一個優(yōu)選實施方式中，IVa和IVb的化合物是分開的對映體(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。在該實施方式中，以1，2，3，4-四氫喹啉和吲哚-3-乙酰胺為起始原料制備混合物形式的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮制品。正如實施例1步驟1-5描述的，1，2，3，4-四氫喹啉轉(zhuǎn)化為5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1基)乙醛酸甲酯。正如實施例1步驟6描述的，5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1基)乙醛酸甲酯與吲哚-3-乙酰胺反應(yīng)生成3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。如實施例2所述使用步驟B，通過催化氫化作用制備(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮混合物。
本發(fā)明優(yōu)選實施方式也包括式Va和Vb化合物的混合物，包括外消旋混合物。在另一個優(yōu)選實施方式中，Va和Vb所示化合物是分開的對映體(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。在該實施方式中，正如上面所描述的，通過首先制備(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮制備所述化合物的混合物。然后如實施例3所述，用叔丁醇鉀在叔丁醇中的混合物處理順式化合物的混合物，得到(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮混合物。
本發(fā)明化合物的混合物或者純的形式或基本純的形式的所有立體異構(gòu)體均涵蓋在本發(fā)明范圍內(nèi)，包括外消旋混合物的結(jié)晶形式和單個異構(gòu)體的結(jié)晶形式。根據(jù)本發(fā)明的化合物定義涵蓋所有可能的立體異構(gòu)體(例如每個非對稱中心的R和S構(gòu)型)和它們的混合物。特別包含外消旋形式和被分離的具有確定活性的光學異構(gòu)體。外消旋形式可通過物理方法拆分，例如，分步結(jié)晶、非對映衍生物分離或結(jié)晶，通過手性色譜法或超臨界流體色譜法分離。可采用傳統(tǒng)方法從外消旋化合物中獲得單個光學異構(gòu)體，例如，與光學活性酸成鹽隨后結(jié)晶。此外，除非另有說明，所有的幾何異構(gòu)體如雙鍵處的E-和Z-構(gòu)型在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明的某些化合物可以以互變異構(gòu)形式存在。除非另有說明，應(yīng)認為所述化合物的所有互變異構(gòu)形式在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明還包括類似物或衍生物的一種或多種區(qū)域異構(gòu)混合物。
這里使用的術(shù)語“鹽”是藥物學可接受的鹽，可包括酸加成鹽，包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、烷基磺酸鹽、芳基磺酸鹽、醋酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽和酒石酸鹽；堿金屬陽離子例如Na+、K+、Li+，堿土金屬鹽例如Mg或Ca，或有機胺鹽。
這里使用的術(shù)語“代謝物”指的是本發(fā)明化合物，或其藥物學可接受的鹽、類似物或衍生物的代謝產(chǎn)物，其在體內(nèi)表現(xiàn)出與本發(fā)明所述化合物相似的活性。
這里使用的術(shù)語“前藥”指的是本發(fā)明化合物共價連接至一個或多個前部分(pro-moieties)，例如氨基酸部分(moiety)或其它水增溶部分。本發(fā)明化合物可通過水解、氧化和/或酶促的釋放機理從前部分釋放。在一個實施方式中，本發(fā)明前藥組合物展示了附加的優(yōu)點即增加的水溶解性、更高的穩(wěn)定性和提高的藥物動力學特性。所述前部分可被選擇來獲得所需的前藥特征。例如，可基于溶解度、穩(wěn)定性、生物利用度、和/或體內(nèi)傳遞或吸收選擇R4中的前部分如氨基酸部分或其它水增溶部分例如磷酸鹽。
2.吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮和吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮的合成 制備有機分子和包括使用保護基的官能團轉(zhuǎn)化和處理的標準合成方法和步驟能從相關(guān)的科學文獻或該領(lǐng)域標準參考書中獲得。盡管不限于任何一種或若干種來源，公認的有機合成的參考書包括Smith，M.B.；March，J.March’s Advanced OrganicChemistryReactions，Mechanisms and Structure，5th ed.；John Wiley & SonsNew York，2001和Greene，T.W.；Wuts，P.G.M.Protective Groups in Organic Synthesis，3rd；JohnWiley & SonsNew York，1999。以下對合成方法的描述用于說明而不是限制本發(fā)明化合物制備的一般步驟。
2.1其中R4是氫的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮和吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮的一般合成步驟 本發(fā)明提供式IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物。如路線1所示，式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示化合物可通過一系列反應(yīng)制備，這些反應(yīng)始于式I所示的5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1基)乙醛酸甲酯與式II的酰胺生成式III所示的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮包括式IIIa的化合物的反應(yīng)，其中R4是氫。
路線1
2.1.1.其中R4是氫的式III所示的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的合成 用于生成其中R4是氫的式III所示的化合物，包括式IIIa所示的化合物的式I的酯和式II化合物的縮合反應(yīng)可在堿的存在下在任何合適的無水極性非質(zhì)子溶劑中進行，包括但不限于四氫呋喃(THF)、四氫吡喃、乙醚等等。對于該反應(yīng)，合適的式I的酯包括但不限于烷基酯其中R9是(C1-C4)烷基的烷基酯，優(yōu)選的酯包括甲基和乙基酯。用于該反應(yīng)的合適的堿包括低分子量烷基醇的堿金屬鹽，包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇和叔丁醇的堿金屬鹽。優(yōu)選的低分子量烷基醇的堿金屬鹽包括鈉和鉀鹽，優(yōu)選的堿是叔丁醇鉀(tBuOK)。典型地，所述反應(yīng)在0℃條件下進行2個小時，然而，時間和溫度的改變依賴于式I和式II化合物上存在的特定取代基和所使用的溶劑。反應(yīng)溫度在-78℃至37℃之間變化，并且優(yōu)選為-35℃至25℃，或者更優(yōu)選為-15℃至10℃。反應(yīng)時間通常隨著所使用的溫度相反地變化，可使用的合適的時間為約15分鐘至24小時，更優(yōu)選30分鐘至12小時，并且更優(yōu)選1至6小時。
2.1.2.其中R4是氫的式IVa、IVb、Va和Vb的化合物的制備 其中R4是氫的式III和IIIa的化合物的還原生成相應(yīng)的式IVa、IVb、Va或Vb所示的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，該反應(yīng)可采用許多方法進行，包括但不限于采用鋅-汞還原(步驟A)、催化氫化(步驟B)和采用鎂在甲醇中的溶液還原(步驟C)。如路線1所示，依賴于所選的還原反應(yīng)和條件，反應(yīng)將主要生成式IVa和IVb所示的化合物，或主要生成式Va和Vb所示的化合物，或者式IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的混合物。
式IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的混合物可通過采用鋅-汞還原劑直接還原式III或IIIa所示的化合物來制備。反應(yīng)通常采用通過將鋅粉與HgCl2去離子水混合，隨后用HCl酸化制備的新鮮的還原劑進行。干燥后，固體還原劑(鋅-汞)適于如實施例2步驟A所述，在干燥的HCl氣氛下在回流的無水乙醇中還原式III或IIIa所示的化合物，用于3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的還原。
可選擇的制備吡咯烷-2，5-二酮的方法是催化氫化，生成主要由式IVa和IVb所示的(±)-順式吡咯烷-2，5-二酮組成的混合物。催化氫化式III或IIIa所示的化合物可以在無水乙醇中在貴金屬催化劑及1個大氣壓氫氣的條件下反應(yīng)48小時。許多低分子量烷基醇可以被用來實施還原，包括正丙醇、異丙醇、乙醇或甲醇。優(yōu)選的醇是甲醇或乙醇，并且最優(yōu)選的是甲醇。負載于炭上的貴金屬催化劑(例如鉑、鈀、銠、釕等)優(yōu)選用于還原III或IIIa所示的化合物。在更優(yōu)選的實施方式中，貴金屬催化劑是活性炭上的鈀。盡管在室溫(25℃)及1個大氣壓氫氣的條件下反應(yīng)12-48小時還原式III或IIIa所示化合物通常適于制備吡咯烷-2，5-二酮，但氫氣的壓力、反應(yīng)時間和反應(yīng)溫度可以改變。催化氫化3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮在實施例2，步驟B中描述。
可在無水醇中用金屬還原劑還原式III或IIIa所示的吡咯-2，5-二酮生成式Va和Vb化合物的混合物。優(yōu)選的金屬包括鈉、鈣和鎂，鎂是較優(yōu)選的金屬還原劑。通常通過在含有鎂屑的醇中回流式III或式IIIa所示的化合物在氮氣惰性氣氛下反應(yīng)30分鐘至2小時，所述醇選自由甲醇、乙醇、正丙醇和異丙醇組成的組中。在優(yōu)選的實施方式中，如實施例2步驟C所述，該反應(yīng)在甲醇中進行了約40分鐘，以用于制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
含有以順式構(gòu)型存在的吡咯烷環(huán)取代基的式IVa和/或IVb所示的化合物可轉(zhuǎn)化為其中取代基是反式構(gòu)型的Va和Vb化合物的混合物，或者在極性質(zhì)子溶劑中用堿處理轉(zhuǎn)化為式IVa、IVb、Va和Vb所有四種異構(gòu)體的混合物。通常反應(yīng)使用在醇溶劑中的(C1-C4)烷基醇的堿金屬鹽(例如在甲醇中的甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇中的乙醇鈉或乙醇鉀、叔丁醇中的叔丁醇鈉或叔丁醇鉀)，叔丁醇中的叔丁醇鉀是優(yōu)選的堿金屬鹽和溶劑的混合物。反應(yīng)通常在從0℃至反應(yīng)混合物的回流溫度下進行4至48小時。在較優(yōu)選的實施方式中，反應(yīng)在從室溫(25℃)至混合物的回流溫度下進行8至24小時，并且在更優(yōu)選的實施方式中，反應(yīng)在約50℃下、在于叔丁醇內(nèi)的叔丁醇鉀混合物中進行約16小時。反應(yīng)時間短和低溫有助于生成仍含式IVa和/或IVb所示化合物的混合物。
2.1.3.將芳基或雜芳基取代基引入式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物 將另外的取代的和未取代的芳基或雜芳基取代基引入式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的芳香環(huán)上可通過將取代的或未取代的芳基或雜芳基硼酸與式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物上的芳香鹵素取代基反應(yīng)而實現(xiàn)。反應(yīng)通常是通過在四(三苯基膦)鈀的存在下，在由5份甲苯、5份乙醇、1份飽和的NaHCO3和2份水組成的溶劑混合物中以及在氮氣氛下，將帶有芳基或雜芳基溴化物或碘化物、更優(yōu)選芳基溴化物或雜芳基溴化物的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物與芳基或雜芳基硼酸的混合物加熱到100℃反應(yīng)5小時而實施。冷卻到室溫后，混合物用乙酸乙酯萃取并且濃縮。將殘余物用硅膠色譜法提純。在一個優(yōu)選實施方式中，式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的鹵代化合物在芳基或雜芳基Q官能團上帶有鹵素，導致將由硼酸提供的取代的芳基或雜芳基引入到Q取代基上。在一個更優(yōu)選的實施方式中，Q官能團是溴化的芳香或雜芳香Q官能團。在另一個更優(yōu)選的實施方式中，與硼酸反應(yīng)的鹵代的Q官能團是鹵代的3-吲哚基。實施例31-34描述了使用溴化的Q官能團將取代的和未取代的芳香基團引入式Va和Vb所示化合物中，其中Q是溴化的3-吲哚基。
包括2-噻吩基硼酸、3-噻吩基硼酸和2-萘基硼酸的芳香和雜芳香硼酸可從許多種商業(yè)來源獲得，包括Sigma-Aldrich(St.Louis，MO)?？蛇x擇地，芳香的和雜芳香的硼酸可由相應(yīng)的芳基或雜芳基溴化物通過與硼酸三異丙基酯在正丁基鋰存在下反應(yīng)并隨后用HCl水溶液驟冷來制備(參例如見W.Li，等，J.Organic Chem.675394-97(2002)以及C.M.Marson，等，Tetrahedron 594377-81(2003)。
2.1.4.其中R4是-CH2R7的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb化合物的制備 其中R4是氫的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb的化合物可轉(zhuǎn)化為其中R4是-CH2R7的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示化合物。如路線2中顯示的部分結(jié)構(gòu)所示，所述轉(zhuǎn)變自制備化合物的羥基亞甲基衍生物起始。

III(包括IIIa) 羥基亞甲基衍生物
IVa，IVb，Va，或Vb 其中R4是H 羥基亞甲基衍生物的制備可通過在四氫呋喃(THF)中將R4是氫的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示化合物與甲醛水溶液反應(yīng)實現(xiàn)。通常的反應(yīng)是采用等體積的THF和37％甲醛水溶液，并在室溫下攪拌反應(yīng)14-16小時。反應(yīng)時間可在1-48小時內(nèi)變化，溫度可在0℃至50℃內(nèi)變化，或者更優(yōu)選在10℃至37℃內(nèi)變化。反應(yīng)完成后將其在水和有機溶劑(通常是乙酸乙酯)之間分配。有機層用硫酸鈉干燥、濃縮，如果必要采用硅膠色譜法以獲得羥基亞甲基產(chǎn)品。3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的羥基亞甲基衍生物3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備在實施例56步驟1中描述。
R4是-CH2R7、并且R7是磷酸酯(-O-P(＝O)(OH)2)、單烷基磷酸酯(例如-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基))、雙烷基磷酸酯(例如-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2)單芐基磷酸酯(-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基))、或雙芐基磷酸酯(-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2)的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb的化合物可由所需的羥基亞甲基衍生物和合適地取代的磷酸通過任何適合在磷酸化合物與羥基亞甲基衍生物之間形成磷酸酯鍵的反應(yīng)來制備。在一種優(yōu)選的方法中，磷酸酯的形成是通過式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示化合物的羥基亞甲基衍生物與經(jīng)合適地保護的氨基磷酸酯反應(yīng)隨后脫保護形成的。與所需的氨基磷酸酯的反應(yīng)通常是在無水THF中室溫下進行的。加入氨基磷酸酯后，將反應(yīng)用四唑(3％的乙腈溶液)處理并攪拌5分鐘至1小時，然后將反應(yīng)冷卻到-78℃。將冷卻的反應(yīng)用間氯過苯甲酸處理，并且在-78℃攪拌5分鐘后，將反應(yīng)加熱到室溫并且再攪拌5分鐘。除去溶劑后，采用乙酸乙酯己烷通過硅膠快速色譜法純化產(chǎn)品。保護基通過合適的脫保護反應(yīng)除去。當所使用的氨基磷酸酯是二芐基氨基磷酸酯時，芐基保護基可通過在室溫、1個大氣壓氫氣下，于Pd/C上氫化化合物除去。從3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮制備磷酸單-[3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲基)酯在實施例56步驟2-3中描述。
其中R7是羧酸基或氨基羧酸基的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物可在適合酯鍵形成的條件下將所需的羥基亞甲基衍生物與羧酸或氨基羧酸(氨基酸)偶聯(lián)來制備。許多種脫水劑，包括DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)、HBTU(O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基六氟磷酸脲陽離子)或BOP((苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)六氟磷酸鱗陽離子)可用于促使酯鍵的形成。在優(yōu)選的實施方式中，反應(yīng)在室溫條件下在無水THF中在HBTU和DIEPA(N，N-二異丙基乙胺)的存在下進行10小時至24小時。在脫水反應(yīng)完成后，在減壓下除去溶劑，將化合物收集在有機溶劑(例如乙酸乙酯)中并用水洗。干燥有機層并且需要時用硅膠色譜法純化殘余物。
當R7是氨基羧酸基時，引入氨基羧酸基的起始原料必須含有經(jīng)合適地保護的胺。許多種合適的胺保護基可有利地使用，包括苯甲氧甲酰基保護的(carbobenzyloxy-protected)胺(例如所述反應(yīng)可采用N-苯甲氧甲?；拾彼峄騈-苯甲氧甲?；匪岬?。隨后的脫保護將會生成游離的產(chǎn)物。當使用的保護基是苯甲氧甲?；鶗r，脫保護可通過在室溫、鈀炭(Pd/C)存在下和1個大氣壓氫氣下用在乙酸乙酯中的HCl(4M)處理懸浮在甲醇中的胺保護的產(chǎn)品1-3小時而獲得。實施例58-60描述了其中R7是羧酸基或氨基羧酸基的化合物的制備。
其中R7是肽的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物可通過將所需的羥基亞甲基衍生物與帶有游離羧酸基的肽偶聯(lián)以生成酯鍵來制備。肽的羧基官能團和羥基亞甲基在酯鍵內(nèi)的連接可使用合適地保護的肽進行，其帶有例如由常規(guī)的N-保護基保護的游離胺基。適于形成酯鍵的條件包括那些使用脫水劑，例如那些在描述其中R4是-CH2R7并且R7是羧酸基、或氨基羧酸基的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物的制備時所述的。
2.1.5.其中R4是-(C1-C6)烷基的式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的制備 其中R4是-(C1-C6)烷基的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物可通過將所需的其中R4是氫的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb化合物與(C1-C6)烷基鹵化物在室溫下在合適的堿的存在下反應(yīng)來制備，其中鹵素優(yōu)選Cl、Br或I。合適的堿包括有機堿例如叔丁醇鉀、甲醇鈉和無機堿例如KOH、NaOH和K2CO3。合適的溶劑包括極性非質(zhì)子溶劑例如DMSO、THF、二氧雜環(huán)己烷或其它醚或DMF。在另一個可選擇的實施方式中，將其中R4是氫的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物與無機或有機堿反應(yīng)生成式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb化合物的共軛堿，并隨后將該共軛堿與烷基鹵化物反應(yīng)。當烷基被引入到式III或IIIa化合物時，所得烷基化的化合物可通過采用在I(b)(1)部分描述的還原步驟被還原成式IVa和IVb、Va和Vb的化合物或式IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的混合物。實施例61描述了使用碘甲烷作為烷基化劑來制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮，并且將其通過催化氫化還原生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯烷-2，5-二酮。
其中R4是-(C1-C6)烷基的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物可通過將所需的其中R4是氫的式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb所示的化合物與(C1-C6)烷基醇在diethylzodicarboxylate(DEAD)和三苯基膦存在下反應(yīng)來制備。(參例如見Mitsunobu，O.；Wade，M.；Sano，T.J.Am Chem.Soc.94694(1972)；Hughes，D.L.，Organic Reactions，42；335-656(1992))。該反應(yīng)可在許多種溶劑中進行，包括四氫呋喃(THF)、二氯甲烷、氯仿、乙腈和苯，優(yōu)選的溶劑是THF。
2.1.6.式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb所示的化合物的分離 當需要分離具有式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb結(jié)構(gòu)的單獨的產(chǎn)物時，可將所述產(chǎn)物通過色譜法在一種或多種色譜介質(zhì)中分離。色譜法可在制備規(guī)?；蚍治鲆?guī)模下進行，以鑒定樣品中的產(chǎn)物并測定其純度。盡管任何合適的色譜介質(zhì)包括但不限于二氧化硅、反相、離子交換、手性色譜介質(zhì)或其任意組合，均可有利地用于分離，但是特定色譜介質(zhì)對于分離具有式III、IIIa、IVa、IVb、Va和Vb結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物的分離的適應(yīng)性將依賴于存在于所述化合物中的取代基。在某些優(yōu)選的實施方式中，色譜分離采用HPLC來進行。在其他優(yōu)選的實施方式中，分離采用超臨界流體色譜法來實施。當采用超臨界流體色譜法時，CO2或CO2與其它溶劑包括乙腈(CAN)、甲醇、乙醇、異丙醇或己烷是優(yōu)選的流動相，最優(yōu)選是CO2與甲醇的混合物。許多種可在超臨界流體色譜法中使用的色譜介質(zhì)(固定相)包括但不限于ChiralCel OA、OB、OD、或OJ；ChiralPak AD或AS；Cyclobond I、II或III；和Chirobiotic T、V、和R介質(zhì)。
在更優(yōu)選的實施方式中，當產(chǎn)物是式IVa、IVb、Va或Vb的單獨的異構(gòu)體時，含有二種或更多種異構(gòu)體形式的混合物可采用超臨界流體色譜法在手性介質(zhì)中被分離。在一個更優(yōu)選的實施方式中，分離是在CHIRALPAKAD(Daicel(U.S.A.)Inc.FortLee，NJ)上進行的。在該實施方式中，將在甲醇和乙腈的混合物或在乙腈中的產(chǎn)物施用到AD柱上，并且隨后用在CO2(65％)中的35％的甲醇洗脫。3(R)，4(S)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和3(S)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在CHIRALPAKAD柱上的分離在實施例4中描述。(+)反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(-)反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的分離在實施例5中描述。
式III、IIIa、IVa、IVb、Va或Vb化合物的個別外消旋形式也可采用物理方法分離，例如，分步結(jié)晶或非對映異構(gòu)體衍生物的結(jié)晶。此外，個別光學異構(gòu)體可自外消旋混合物通過常規(guī)方法如與光學活性酸成鹽，然后在合適時通過結(jié)晶獲得。
2.2.其中Y是鍵的式I和II化合物的制備 在合成式III和IIIa的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮時所使用的式I和II所示的化合物可通過購買或通過如下所述的各種合成途徑獲得。
2.2.1其中Y是鍵的式I化合物的制備 式I化合物可由相應(yīng)的式A化合物制備，其中X選自由-(CH2)-、-(NR8)-、S和O組成的組中，R8選自由氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、和-O-(C1-C6)烷基，并且m是1或2。式A的示例性化合物包括1，2，3，4-四氫喹啉、1，2，3，4-四氫-喹喔啉、3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪、3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噻嗪、2，3，4，5-四氫-1H-苯并[b]氮雜、2，3，4，5-四氫-1H-苯并[b][1，4]二氮雜、6，7，8，9-四氫-5-氧雜-9-氮雜-苯并環(huán)庚烯、或2，3，4，5-四氫-苯并[b][1，4]硫氮雜(thiazepine)。所述制備以式A化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式B所示的3-取代的-2-氧代丙酸乙酯。式B的乙酯環(huán)化形成式C所示的化合物，再轉(zhuǎn)化為游離酸C，再脫去羧基生成所需的三環(huán)產(chǎn)物E。隨后三環(huán)產(chǎn)物E與草酰氯反應(yīng)并在醇堿中純化(work-up)生成相應(yīng)的式I化合物。路線3說明了由式A化合物起始的反應(yīng)序列，并且在實施1步驟1-5中對從1，2，3，4-四氫喹啉和溴乙基丙酮酸酯(3-溴-丙酮酸乙酯)制備式I的5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)乙醛酸甲酯加以了進一步說明。
從式A化合物通過路線3的反應(yīng)序列轉(zhuǎn)化為式I化合物的某些合適的條件在這里描述。式A化合物可通過在室溫下在無水醚如THF中用溴乙基丙酮酸酯處理24小時轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式B的3-取代的-2-氧代丙酸乙酯。在約125℃下，用在2-甲氧基乙醇中的無水MgCl2處理式B的3-取代的-2-氧代丙酸乙酯30分鐘至2小時，優(yōu)選1小時，生成相應(yīng)的式C的三環(huán)羧酸酯。然后通過在堿水溶液中水解將該化合物轉(zhuǎn)化為式D的游離酸。在優(yōu)選實施方式中，該反應(yīng)在堿包括但不限于NaOH或KOH的水溶液中在作為助溶劑的醇的存在下進行。優(yōu)選的醇助溶劑包括甲醇、乙醇、正丙醇和異丙醇，乙醇是更優(yōu)選的助溶劑。盡管反應(yīng)時間和溫度可根據(jù)需要而改變，但反應(yīng)通常通過將混合物加熱回流2小時進行。式D化合物的氧化脫羧作用可通過各種適于芳香酸脫羧的程序進行。在優(yōu)選的實施方式中，式D化合物的脫羧作用可通過將所述游離酸與亞鉻酸銅(CuO-Cr2O3)一同在喹諾酮中加熱約2小時生成式E的脫羧產(chǎn)物。式E化合物轉(zhuǎn)化為式I化合物可通過與草酰氯反應(yīng)，然后用無水醇和醇的堿金屬鹽(優(yōu)選甲醇鈉或乙醇鈉)的混合物處理實現(xiàn)。草酰氯與式E化合物的反應(yīng)通常在無水極性非質(zhì)子溶劑包括醚中在約-78℃至約10℃的溫度下進行。在優(yōu)選實施方式中，該反應(yīng)采用醚作為溶劑在約-25℃至約5℃的溫度下進行。在更優(yōu)選的實施方式中，該反應(yīng)在0℃下進行。用于進行該反應(yīng)的優(yōu)選的溶劑包括但不限于四氫呋喃(THF)、四氫吡喃、二乙醚等等。

2.2.2式II化合物的制備 式II化合物是取代的乙酰胺，其可通過購買或用市售的起始原料來制備。市售的乙酰胺包括吲哚-3-乙酰胺、2-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰胺、2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)乙酰胺、2-(4-羥基-1H-吲哚-3-基)乙酰胺、2-苯基乙酰胺、2-(4-甲基苯基)乙酰胺、4-羥基苯基乙酰胺、4-羥基苯基乙酰胺、N-環(huán)戊基-2-(4-羥基-2-氧代-1，2-二氫-3-喹啉基)乙酰胺、2-苯氧基乙酰胺、2-(2-甲基苯氧基)乙酰胺、2-(4-氟代苯氧基)乙酰胺、2-(4-吡啶基)乙酰胺和24(4-氯苯基)硫烷基]乙酰胺可通過多種來源獲得，包括SigmaAldrich Chemical Co.，St.Louis Mo。式II化合物也可通過將游離酸轉(zhuǎn)化為其酰氯然后與氨反應(yīng)而由它的相應(yīng)的游離酸制備。
2.3.制備吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮的其它途徑 除了上面所描述的那些制備吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮的途徑以外，其他制備作為(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的實例的化合物的途徑在實施例62-64中描述。
3.治療方法 本文中所使用的“對象”可以是任何一種哺乳動物，例如人、靈長類動物、大鼠、小鼠、狗、貓、牛、馬、豬、綿羊、山羊、駱駝。在一個優(yōu)選的方面，所述對象為人類。
本文中所使用的“有此需要的對象”為患細胞增生性疾病的對象，或相對于普通人群，患細胞增生性疾病的危險增加的對象。一方面，有此需要的對象有癌前期病癥。在優(yōu)選的方面，有此需要的對象患有癌癥。
本文中所使用的術(shù)語“細胞增生性疾病”是指在這些病變中，細胞不受控的或異常的生長(或二者皆有)可以導致不希望的病變或疾病發(fā)生，其中的疾病可以是也可以不是癌癥。在一方面，細胞增生性疾病包括非癌癥病變，例如類風濕性關(guān)節(jié)炎；炎癥；自身免疫疾?。涣馨徒M織增生病變；肢端肥大癥；類風濕性脊椎炎；骨關(guān)節(jié)炎；痛風，其它關(guān)節(jié)炎病變；膿毒癥；敗血癥性休克；內(nèi)毒素性休克；革蘭氏陰性膿毒癥；中毒性休克綜合征；哮喘；成人呼吸窘迫綜合征；肺慢性阻塞性疾病；慢性肺炎；炎癥性腸疾病；克羅恩氏病；牛皮癬；濕疹；潰瘍性結(jié)腸炎；胰囊性纖維化；肝纖維化；急性和慢性腎疾??；腸易激綜合征；pyresis；再狹窄；腦型瘧；中風及缺血性損傷；神經(jīng)創(chuàng)傷；阿爾茨海默?。缓嗤㈩D氏癥；帕金森氏癥；急性和慢性痛；過敏性鼻炎；變應(yīng)性結(jié)膜炎；慢性心力衰竭；急性冠狀動脈綜合征；惡病質(zhì)；瘧疾；麻風病；利什曼病；萊姆氏??；Reiter綜合征；急性滑膜炎；肌肉退化，粘液囊炎；腱炎；腱鞘炎；成疝、疝氣、或椎間盤脫出綜合征；骨硬化癥；血栓癥；再狹窄；硅肺；肺肉瘤病；骨吸收病，如骨質(zhì)疏松癥；移植物抗宿主反應(yīng)；多發(fā)性硬化癥；狼瘡；纖維肌痛；AIDS和其他病毒性疾病例如帶狀皰疹，單純性I型或II型皰疹，流感病毒和巨細胞病毒；以及糖尿病。在另一方面，細胞增生性疾病包括初期癌或癌前期病變。在另一方面，細胞增生性疾病包括癌癥。多種要治療的癌癥包括但不限于乳腺癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、腎癌、肝癌、腦癌、黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、慢性髓細胞性白血病(chronic myelogenous leukemia)、血液腫瘤、以及淋巴腫瘤，包括在遠離原發(fā)腫瘤的其它組織或器官中的轉(zhuǎn)移病灶。要治療的腫瘤包括但不限于惡性毒瘤、癌瘤、以及腺癌。在一方面，“初期癌細胞”(precancer cell)或“癌前期的細胞”(precancerous cell)為表現(xiàn)出初期癌或癌前期病變的細胞增生性疾病的細胞。在另一方面，“癌細胞”或“癌性細胞”為表現(xiàn)出癌癥病變的細胞增生性疾病的細胞。在一優(yōu)選方面，癌細胞或癌前期的細胞通過組織樣本(例如活組織檢查樣本)的組織學分類或分級來確定。在另一方面，癌細胞或癌前期的細胞通過采用合適的分子標記物來確定。
“血液學系統(tǒng)的細胞增生性疾病”為涉及血液學系統(tǒng)細胞的細胞增生性疾病。在一方面，血液學系統(tǒng)的細胞增生性疾病包括淋巴瘤、非白血性白血病、骨髓腫瘍、肥大細胞腫瘍、脊髓發(fā)育不良、良性單克隆性丙種球蛋白病、淋巴瘤樣肉芽腫、淋巴瘤樣丘疹病、真性紅細胞增多、慢性粒細胞性白血病、特發(fā)性骨髓外化生、以及特發(fā)性血小板增多癥。在另一方面，血液學系統(tǒng)的細胞增生性疾病包括血液學系統(tǒng)細胞的細胞超常增生、細胞發(fā)育異常、以及細胞組織變形。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的組合物可以用于治療選自本發(fā)明的血液學腫瘤或本發(fā)明的血液學細胞增生性疾病中的腫瘤。在一方面，本發(fā)明的血液學腫瘤包括多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤(包括Hodgkin’s淋巴瘤、非Hodgkin’s淋巴瘤、兒童期淋巴瘤、以及源自淋巴細胞和皮膚的淋巴瘤)、非白血性白血病(包括兒童期非白血性白血病、毛細胞性白血病、急性淋巴細胞性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、慢性粒細胞性白血病、慢性髓細胞性白血病、以及肥大細胞白血病)、骨髓腫瘍、以及肥大細胞腫瘍。
“肺細胞增生性疾病”為涉及肺部細胞的細胞增生性疾病。在一方面，肺細胞增生性疾病包括所有形式的影響肺部細胞的細胞增生性疾病。在一方面，肺細胞增生性疾病包括肺癌、肺部初期癌或癌前期病變、肺部良性瘤或良性損傷、以及肺部惡性瘤或惡性損傷、以及在除肺以外的身體其它組織和器官的轉(zhuǎn)移病灶。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的組合物可以用于治療肺癌或肺細胞增生性疾病。在一方面，肺癌包括所有形式的肺部腫瘤。在另一方面，肺癌包括惡性肺腫瘤、原位癌瘤、典型類癌瘤、以及非典型類癌瘤。在另一方面，肺癌包括小細胞肺癌(“SCLC”)、非小細胞肺癌(“NSCLC”)、鱗狀上皮細胞癌、腺癌、小細胞癌、大細胞癌、adenosquamous細胞癌、以及間皮瘤。在另一方面，肺癌包括“瘢痕癌”、細支氣管肺泡癌、巨細胞癌、梭形細胞癌、以及大細胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌。在另一方面，肺癌包括有組織學的和超微結(jié)構(gòu)的非均一性(例如混合細胞類型)的肺腫瘤。
在一方面，肺細胞增生性疾病包括所有形式的影響肺部細胞的細胞增生性疾病。在一方面，肺細胞增生性疾病包括肺癌、肺部初期癌或癌前期病變。在另一方面，肺細胞增生性疾病包括石棉誘發(fā)超常增生、鱗狀化生、以及間皮細胞化生良性反應(yīng)。在另一方面，肺細胞增生性疾病包括復層鱗狀上皮替代柱狀上皮、以及粘膜發(fā)育不良。在另一方面，受吸入性有害環(huán)境因素(如香煙和石棉)影響的個體患肺細胞增生性疾病的危險可能增大。在另一方面，可能使個體患肺細胞增生性疾病的早期肺疾病包括慢性間質(zhì)性肺病、壞死性肺部疾病、硬皮癥、類風濕病、伯克氏肉樣瘤、間質(zhì)性肺炎、結(jié)核病、反復性肺炎、原發(fā)性肺纖維化、肉芽腫病、石棉沉著病、纖維化肺泡炎、以及何杰金氏病。
“結(jié)腸細胞增生性疾病”為涉及結(jié)腸細胞的細胞增生性疾病。在一優(yōu)選方面，該結(jié)腸細胞增生性疾病為結(jié)腸癌。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的組合物可以用于治療結(jié)腸癌或結(jié)腸細胞增生性疾病。在一方面，結(jié)腸癌包括所有形式的結(jié)腸部腫瘤。在另一方面，結(jié)腸癌包括腺癌、鱗狀上皮細胞癌、以及腺鱗片細胞癌。在另一方面，結(jié)腸癌與選自遺傳性非息肉性結(jié)腸直腸癌、家族性腺瘤性息肉病、加德納綜合征、Peutz-Jeghers綜合征、Turcot’s綜合征、幼年性息肉病中的遺傳性綜合征有關(guān)。在另一方面，結(jié)腸癌是由選自遺傳性非息肉性結(jié)腸直腸癌、家族性腺瘤性息肉病、加德納綜合征、Peutz-Jeghers綜合征、Turcot’s綜合征、幼年性息肉病中的遺傳性綜合征所導致的。
在一方面，結(jié)腸細胞增生性疾病包括所有形式的影響結(jié)腸細胞的細胞增生性疾病。在一方面，結(jié)腸細胞增生性疾病包括結(jié)腸癌、結(jié)腸部癌前期病變、結(jié)腸腺瘤息肉和結(jié)腸異時損傷。在一方面，結(jié)腸細胞增生性疾病包括腺瘤。在一方面，結(jié)腸細胞增生性疾病表現(xiàn)為結(jié)腸超常增生、結(jié)腸組織異常、以及結(jié)腸發(fā)育不良。在另一方面，可能使個體患結(jié)腸細胞增生性疾病的早期結(jié)腸疾病包括早期結(jié)腸癌。在另一方面，可能使個體患結(jié)腸細胞增生性疾病的當前疾病包括Crohn’s病和潰瘍性結(jié)腸炎。在一方面，結(jié)腸細胞增生性疾病與選自p53、ras、FAP和DCC中的基因的突變有關(guān)。個體患結(jié)腸細胞增生性疾病危險的增加是由于出現(xiàn)了選自p53，ras，F(xiàn)AP和DCC中的基因的突變。
“前列腺細胞增生性疾病”為涉及前列腺細胞的細胞增生性疾病。在一方面，前列腺細胞增生性疾病包括所有形式的影響前列腺細胞細胞增生性疾病。在一方面，前列腺細胞增生性疾病包括前列腺癌、前列腺初期癌或前列腺癌前期病變、前列腺良性瘤或良性損傷、以及前列腺惡性瘤或惡性損傷、以及在除前列腺以外的身體其它組織和器官的轉(zhuǎn)移病灶。在另一方面，前列腺細胞增生性疾病包括前列腺超常增生、前列腺組織異常、以及前列腺發(fā)育不良。
“皮膚細胞增生性疾病”為涉及皮膚細胞的細胞增生性疾病。在一方面，皮膚細胞增生性疾病包括所有形式的影響皮膚細胞細胞增生性疾病。在一方面，皮膚細胞增生性疾病包括皮膚初期癌或皮膚癌前期病變、皮膚良性瘤或良性損傷、黑素瘤、惡性黑色素瘤和其他皮膚惡性瘤或惡性損傷、以及在除皮膚以外的身體其它組織和器官的轉(zhuǎn)移病灶。在另一方面，皮膚細胞增生性疾病包括皮膚超常增生、皮膚組織異常、以及皮膚發(fā)育不良。
“卵巢細胞增生性疾病”為涉及卵巢細胞的細胞增生性疾病。在一方面，卵巢細胞增生性疾病包括所有形式的影響卵巢細胞細胞增生性疾病。在一方面，卵巢細胞增生性疾病包括卵巢初期癌或卵巢癌前期病變、卵巢良性瘤或良性損傷、卵巢癌、卵巢惡性瘤或惡性損傷、以及在除卵巢以外的身體其它組織和器官的轉(zhuǎn)移病灶。在另一方面，卵巢細胞增生性疾病包括卵巢皮膚超常增生、卵巢組織異常、以及卵巢發(fā)育不良。
“乳腺細胞增生性疾病”為涉及乳腺細胞的細胞增生性疾病。在一方面，乳腺細胞增生性疾病包括所有形式的影響乳腺細胞細胞增生性疾病。在一方面，乳腺細胞增生性疾病包括乳腺癌、乳腺初期癌或乳腺癌前期病變、乳腺良性瘤或良性損傷、以及乳腺惡性瘤或惡性損傷、以及除乳腺以外的身體其它組織和器官的轉(zhuǎn)移病灶。在另一方面，乳腺細胞增生性疾病包括乳腺超常增生、乳腺組織異常、以及乳腺發(fā)育不良。
在一方面，乳腺細胞增生性疾病為乳腺癌前期病變。在一方面，本發(fā)明的組合物可能被用于治療乳腺癌前期病變。在一方面，乳腺癌前期病變包括乳腺非典型超常增生、原位管癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)、乳腺管內(nèi)癌、原位小葉癌(LCIS)、小葉瘤形成、以及0期或0級乳腺生長物或損傷(例如0期或0級乳腺癌、或原位癌)。在另一方面，乳腺癌前期病變根據(jù)the American Joint Committee on Cancer(AJCC)所接受的TNM分類法被分期。其中原發(fā)性腫瘤(T)被確定為T0期或Tis期；而局部淋巴結(jié)(N)被確定為N0期；而遠端轉(zhuǎn)移(M)被確定為M0期。
在一優(yōu)選方面，乳腺細胞增生性疾病為乳腺癌。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的組合物可能被用于治療乳腺癌。在一方面，乳腺癌包括所有形式的乳腺腫瘤。在一方面，乳腺癌包括原發(fā)上皮乳腺癌。在另一方面，乳腺癌包括乳腺與其它腫瘤(如淋巴瘤、肉瘤或黑素瘤)相關(guān)的癌癥。在另一方面，乳腺癌包括乳腺癌瘤、乳腺葉狀囊肉瘤、乳腺血管肉瘤、以及乳腺原發(fā)淋巴瘤。在一方面，乳腺癌包括I期、II期、IIIA期、IIIB期、IIIC、IV期乳腺癌。在一方面，乳腺導管癌包括浸潤性癌、有主要管內(nèi)部分的浸潤性原發(fā)癌、炎性乳腺癌、以及乳腺導管癌并帶有選自下組中的組織學類型黑頭粉刺、粘蛋白狀的(膠體)、髓狀、有淋巴細胞(lymphcytic)滲透髓狀、乳頭狀、硬癌的、以及管狀的。在一方面，乳腺小葉癌包括有主要原發(fā)部分的浸潤性小葉癌、浸潤性小葉癌、以及浸潤性小葉癌。在一方面，乳腺癌包括佩吉特氏病、有導管內(nèi)癌的佩吉特氏病、以及有浸潤性導管癌的佩吉特氏病。在另一方面，乳腺癌包括有組織學的和超微結(jié)構(gòu)的非均一性(例如混合細胞類型)的乳腺腫瘤。
在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物可用于治療乳腺癌。在一方面，要、被治療的乳腺癌包括家族性乳腺癌。在另一方面，被治療的乳腺癌包括散發(fā)性乳腺癌。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)出現(xiàn)在男性對象。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)出現(xiàn)在女性對象。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)發(fā)生于絕經(jīng)前女性對象和絕經(jīng)后女性對象。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)發(fā)生于大于或等于30歲的對象，或小于30歲的對象。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)發(fā)生于大于或等于50歲的對象，或小于50歲的對象。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)發(fā)生于大于或等于70歲的對象，或小于70歲的對象。
在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征以確定在BRAC1、BRAC2、或p53中為家族性突變或自發(fā)性突變。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征為帶有HE2/神經(jīng)鞘基因放大、HE2/神經(jīng)鞘過表達、或帶有低、中、高水平HE2/神經(jīng)鞘表達。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)為標識被表征，該標識選自由雌激素受體(ER)、孕酮受體(PR)、人表皮生長因子受體-2、Ki-67、CA15-3、CA27-29、和c-Met。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征為ER-未知量、富ER、或貧ER。在另一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征ER陰性或ER陽性。乳腺癌的ER分類可以用任何可重現(xiàn)的手段實行。在一優(yōu)選方面，乳腺癌的ER分類按照Onkologie 27175-179(2004)中提出的方法實行。在另一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征為PR-未知量、富PR、或貧PR。在另一方面，要治療的乳腺癌要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征為受體陽性或受體陰性。在一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被表征為與CA 15-3或CA 27-29的血液水平提升有關(guān)，或與二者一起的血液水平提升有關(guān)。
在一方面，要治療的乳腺癌包括乳腺局限性腫瘤。在一方面，要治療的乳腺癌包括與陰性哨兵淋巴結(jié)(SLN)活組織檢查相關(guān)的乳腺腫瘤。在一方面，要治療的乳腺癌包括與陽性腋淋巴結(jié)(SLN)相關(guān)的乳腺腫瘤，其中的腋淋巴結(jié)已經(jīng)由任意適當?shù)姆椒ū环制凇Ｔ诹硪环矫?，要治療的乳腺癌已?jīng)被表征為帶有結(jié)節(jié)陰性情況(例如陰性節(jié)點)或帶有結(jié)節(jié)陽性情況(例如陽性節(jié)點)。在另一方面，要治療的乳腺癌包括已經(jīng)轉(zhuǎn)移到身體其它位置的乳腺腫瘤。在另一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)被分類為已經(jīng)轉(zhuǎn)移至下列位置骨骼、肺臟、肝臟、或腦。在另一方面，要治療的乳腺癌已經(jīng)依照下列特性被分類轉(zhuǎn)移的，局限的，局部的，局限區(qū)域的、局部發(fā)展的、遠端的(distant)、多中心的、雙側(cè)的、同側(cè)的、新診斷的、復發(fā)的、以及不可手術(shù)的。
在一方面，本發(fā)明的一種化合物可以為相對于普遍人群，患細胞增生性疾病的危險增加的對象，用于治療或預(yù)防乳腺細胞增生性疾病或治療或預(yù)防乳腺癌。在一方面，相對于普遍人群患細胞增生性疾病的危險增加的對象是有乳腺癌家族病史或個人病史的女性對象。在一方面，相對于普遍人群患細胞增生性疾病的危險增加的對象是在BRAC1或BRAC2，或二者中有種系或自發(fā)突變的女性對象。在一方面，相對于普遍人群患細胞增生性疾病的危險增加的對象是有乳腺癌家族病史者，并且在BRAC1或BRAC2，或二者中有種系或自發(fā)突變的女性對象。在另一方面，相對于普遍人群患細胞增生性疾病的危險增加的對象的年齡為大于30歲、大于40歲、大于50歲、大于60歲、大于70歲、大于80歲、或大于90歲。在一方面，相對于普遍人群患細胞增生性疾病的危險增加的對象是有乳腺非典型超常增生、原位管癌(DCIS)、乳腺管內(nèi)癌、原位小葉癌(LCIS)、小葉瘤形成、以及0期或0級乳腺生長物或損傷(例如0期或0級乳腺癌、或原位癌)的女性對象。
在另一方面，要治療的乳腺癌依照Scarff-Bloom-Richardson系統(tǒng)在組織學上被分級，在其中乳腺腫瘤被確定為間接核分裂計數(shù)分為1、2、或3；核多態(tài)性分為1、2、或3；小管結(jié)構(gòu)分為1、2、或3；以及Scarff-Bloom-Richardson總分為3至9。在另一方面，要治療的乳腺癌依照International Consensus Panel on the Treatment of BreastCancer從下列等級中選定腫瘤等級1級、1-2級、2級、2-3級、或3級。
在一方面，要治療的癌癥根據(jù)the American Joint Committee on Cancer(AJCC)所接受的TNM分類法被分期，其中腫瘤(T)被確定為TX期，T1期，T1mic期，T1a期，T1b期，T1c期，T2期，T3期，T4期，T4a期，T4b期，T4c期，或T4d期；而其中局部淋巴結(jié)(N)被確定為NX期，N0期，N1期，N2期，N2a期，N2b期，N3期，N3a期，N3b期，或N3c期；而其中遠端轉(zhuǎn)移(M)被確定為MX期、M0期或M1期。在另一方面，要治療的癌癥根據(jù)the American Joint Committee on Cancer(AJCC)分類被分期為I期、II期、IIIA期、IIIB期、IIIC、IV期。在另一方面，要治療的癌癥根據(jù)the American Joint Committee on Cancer(AJCC)分類被分級為GX級(意即不可評級)、1級、2級、3級或4級。在另一方面，要治療的癌癥根據(jù)the AmericanJoint Committee on Cancer(AJCC)病理分類(PN)被分期為pNX期、pN0期、PN0(I-)期、PN0(I+)期、PN0(mol-)期、PN0(mol+)期、PN1期、PN1(mi)期、PN1a期、PN1b期、PN1c期、pN2期、pN2a期、pN2b期、pN3期、pN3a期、pN3b期、或pN3c期。
在一方面，要治療的癌癥包括已被確定為直徑小于或等于2厘米的腫瘤。在另一方面，要治療的癌癥包括已被確定為直徑約2厘米至約5厘米的腫瘤。在另一方面，要治療的癌癥包括已被確定為直徑大于或等于約3厘米的腫瘤。在另一方面，要治療的癌癥包括已被確定為直徑大于5厘米的腫瘤。在另一方面，要治療的癌癥由顯微鏡下形態(tài)被分類為高分化的、中等分化的、低分化的、或不分化的。在另一方面，要治療的癌癥由顯微鏡下形態(tài)按間接核分裂計數(shù)(意即細胞分裂數(shù)量)以及核多態(tài)性(意即細胞變化)被分類。在另一方面，要治療的癌癥由顯微鏡下形態(tài)按與壞死的(不同)區(qū)域(意即瀕死或變性細胞的區(qū)域)相關(guān)被分類。在另一方面，要治療的癌癥被分類為帶有異常核型、帶有異常數(shù)量的染色體、或帶有一種或多種形態(tài)異常的染色體。在一方面，要治療的癌癥被分類為非整倍體的、三倍體的、四倍體的、或帶有改變的倍數(shù)性。在一方面，要治療的癌癥被區(qū)分為具有染色體轉(zhuǎn)移、整個染色體的刪除或復制、或染色體的部分刪除、復制或擴增。
在一方面，要治療的癌癥由DNA細胞計量術(shù)、流式細胞計量術(shù)、或圖像細胞計量術(shù)評估。在一方面，要治療的癌癥被表征為有10％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，或90％的細胞處于細胞分裂DNA合成期(意即細胞分裂S期)。在一方面，要治療的癌癥被表征為有S期部分或高S期部分。
本文中所使用的“正常細胞”是指不能被定為“細胞增生性疾病”部分的細胞。在一方面，正常細胞缺少失控或異常增長，或兩者都缺少。失控和異常增長可以導致不希望的狀況或疾病。優(yōu)選地，正常細胞擁有正常工作的細胞周期關(guān)卡控制機制。
本文中所使用的“與細胞接觸”是指一種化合物或其它的物質(zhì)組合物與細胞直接接觸，或者接近到足夠在細胞內(nèi)引起希望的生理反應(yīng)的情況。
本文中所使用的“候選化合物”是指已經(jīng)或?qū)⒁谝粋€或多個在體外或在體內(nèi)生物學鑒定中被測試的本發(fā)明的化合物。該測試是為了確定該化合物是否適合在細胞、組織、系統(tǒng)、動物、或中人誘導所需的生理或醫(yī)學反應(yīng)，這種反應(yīng)正是研究人員或臨床醫(yī)師所尋找的。在一方面，候選化合物為式IIIa；在另一方面，候選化合物為式IIIa、IVa、IVb、Va、Vb。在一優(yōu)選方面，該生理或醫(yī)學反應(yīng)為癌癥的治療。在另一方面，該生理或醫(yī)學反應(yīng)為細胞增生性疾病的治療或預(yù)防。在一方面，在體外或在體內(nèi)生物學鑒定包括但不限于酶活性鑒定、電泳動度鑒定、報道基因鑒定、活體外細胞活力鑒定、以及在實施例65-73中所列的鑒定。
本文中所使用的“單一療法”是指對有此需要的對象給藥單一活性化合物或治療化合物。優(yōu)選地，單一療法包括給藥在治療有效量的一種活性化合物。例如，使用(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的癌癥單一療法包含將在治療有效量的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物，對有治療癌癥需要的對象給藥。單一療法和聯(lián)合治療相比，后者將多種活性化合物組合給藥，優(yōu)選該組合的每種化合物均為治療上有效的量。在一優(yōu)選方面，使用本發(fā)明的化合物的單一療法在誘導希望的生理反應(yīng)上比聯(lián)合治療更有效。
本文中所使用的“治療”說明了為與疾病、病變、失調(diào)抗爭的目的對病人的處理和照顧，并且包括將本發(fā)明的化合物給藥以預(yù)防癥狀或并發(fā)癥的發(fā)生，減輕癥狀或并發(fā)癥，或消除疾病、病變或失調(diào)。
在一方面，治療癌癥的結(jié)果是腫瘤尺寸的減小。腫瘤尺寸的減小也被稱為“腫瘤消退”。優(yōu)選地，治療后腫瘤尺寸比治療前減小5％或更多；更優(yōu)選為，治療后腫瘤尺寸比治療前減小10％或更多；更優(yōu)選為，減小20％或更多；更優(yōu)選為，減小30％或更多；更優(yōu)選為，減小40％或更多；還更優(yōu)選為，減小50％或更多；并且最優(yōu)選為，減小75％或更多。腫瘤尺寸可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。在一優(yōu)選方面，腫瘤尺寸可以由腫瘤直徑來測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是腫瘤體積的減小。優(yōu)選地，治療后腫瘤體積比治療前減小5％或更多；更優(yōu)選為，治療后腫瘤體積比治療前減小10％或更多；更優(yōu)選為，減小20％或更多；更優(yōu)選為，減小30％或更多；更優(yōu)選為，減小40％或更多；還更優(yōu)選為，減小50％或更多；并且最優(yōu)選為，減小75％或更多。腫瘤體積可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是腫瘤數(shù)量的減少。優(yōu)選地，治療后腫瘤數(shù)量比治療前減小5％或更多；更優(yōu)選為，治療后腫瘤數(shù)量比治療前減小10％或更多；更優(yōu)選為，減小20％或更多；更優(yōu)選為，減小30％或更多；更優(yōu)選為，減小40％或更多；還更優(yōu)選為，減小50％或更多；并且最優(yōu)選為，減小75％或更多。腫瘤數(shù)量可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。在一優(yōu)選方面，腫瘤數(shù)量可以通過計算在肉眼下或在特定的放大倍數(shù)下的腫瘤。在一優(yōu)選方面，規(guī)定的放大倍數(shù)為2×，3×，4×，5×，10×，或50×。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是在遠離原發(fā)腫瘤處的其它組織或器官中的轉(zhuǎn)移病灶數(shù)量的減少。優(yōu)選地，治療后轉(zhuǎn)移病灶數(shù)量比治療前減小5％或更多；更優(yōu)選為，治療后轉(zhuǎn)移病灶數(shù)量比治療前減小10％或更多；更優(yōu)選為，減小20％或更多；更優(yōu)選為，減小30％或更多；更優(yōu)選為，減小40％或更多；還更優(yōu)選為，減小50％或更多；并且最優(yōu)選為，減小75％或更多。轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。在一優(yōu)選方面，轉(zhuǎn)移病灶數(shù)量可以通過計算在肉眼下或在一規(guī)定的放大倍數(shù)下的轉(zhuǎn)移病灶。在一優(yōu)選方面，規(guī)定的放大倍數(shù)為2×，3×，4×，5×，10×，或50×。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是治療后的對象的人群的平均生存時間與只接受了載體的人群相比有所增加。優(yōu)選地，平均生存時間增加30天以上；更優(yōu)選為，增加60天以上；更優(yōu)選為，增加90天以上；而最優(yōu)選為，增加120天以上；人群的平均生存時間的增加可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加可以(例如)通過計算人群的自使用活性化合物治療開始的平均生存時間的長度來測量。在另一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加也可以(例如)通過計算人群的自第一輪使用活性化合物治療完成開始的平均生存時間的長度來測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是治療后的對象的人群的平均生存時間與未接受治療的人群相比有所增加。優(yōu)選地，平均生存時間增加30天以上；更優(yōu)選為，增加60天以上；更優(yōu)選為，增加90天以上；而最優(yōu)選為，增加120天以上；人群的平均生存時間的增加可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加可以(例如)通過計算人群的自使用活性化合物治療開始的平均生存時間的長度來測量。在另一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加也可以(例如)通過計算人群的自第一輪使用活性化合物治療完成開始的平均生存時間的長度來測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是治療后的對象的人群的平均生存時間與接受使用非本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物的單一療法的人群相比有所增加。優(yōu)選地，平均生存時間增加30天以上；更優(yōu)選為，增加60天以上；更優(yōu)選為，增加90天以上；而最優(yōu)選為，增加120天以上；人群的平均生存時間的增加可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加可以(例如)通過計算人群的自使用活性化合物治療開始的平均生存時間的長度來測量。在另一優(yōu)選方面，人群的平均生存時間的增加也可以(例如)通過計算人群的自第一輪使用活性化合物治療完成開始的平均生存時間的長度來測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是治療后的對象的人群的死亡率與未接受治療的人群相比有所下降。在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是治療后的對象的人群的與接受使用非本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物的單一療法的人群相比有所下降。優(yōu)選地，該死亡率下降超過2％；更優(yōu)選為，超過5％；更優(yōu)選為，超過10％；而最優(yōu)選為，超過25％。在一優(yōu)選方面，對象人群的死亡率的下降可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在另一優(yōu)選方面，人群的死亡率的下降可以(例如)通過計算人群自使用活性化合物治療開始的每單位時間的與疾病相關(guān)的死亡數(shù)來測量。在另一優(yōu)選方面，人群的死亡率的下降可以(例如)通過計算人群自第一輪使用活性化合物治療完成開始的每單位時間的與疾病相關(guān)的死亡數(shù)來測量。
在另一方面，治療癌癥的結(jié)果是腫瘤生長速度降低。優(yōu)選地，治療后腫瘤生長速度與治療前相比至少降低了5％；更優(yōu)選為，腫瘤生長速度至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。腫瘤生長速度可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，腫瘤生長速度可以按照每單位時間腫瘤直徑的變化來測量。
在另一方面，治療或預(yù)防細胞增生性疾病的結(jié)果是細胞再生長有所降低。優(yōu)選地，治療后細胞再生長至少降低了5％；更優(yōu)選為，至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。細胞再生長可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，細胞再生長可以(例如)通過測量每單位時間在組織樣本中的分裂細胞數(shù)來測量。在另一優(yōu)選方面，腫瘤再生長可表現(xiàn)為在治療停止后腫瘤不再復發(fā)。
在另一方面，治療或預(yù)防細胞增生性疾病的結(jié)果是細胞增生的速度有所降低。優(yōu)選地，治療后細胞增生的速度至少降低了5％；更優(yōu)選為，至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。增生細胞的比例可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，例如通過測定組織樣本中每單位時間分裂的細胞的數(shù)量確定細胞增生速度。
在另一方面，治療或預(yù)防細胞增生性疾病的結(jié)果是增生細胞的比例有所降低。優(yōu)選地，治療后增生細胞的比例至少降低了5％；更優(yōu)選為，至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。增生細胞的比例可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一優(yōu)選方面，增生細胞的比例可以(例如)通過將在組織樣本中的分裂細胞的數(shù)量相比于不分裂細胞的數(shù)量定量化來測量。在另一優(yōu)選方面，增生細胞的比例等于分裂指數(shù)。
在另一方面，治療或預(yù)防細胞增生性疾病的結(jié)果是細胞增生范圍或區(qū)域的尺寸的減小。優(yōu)選地，治療后細胞增生范圍或區(qū)域的尺寸與治療前相比至少降低了5％；更優(yōu)選為，至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。細胞增生范圍或區(qū)域的尺寸可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。在一優(yōu)選方面，細胞增生范圍或區(qū)域的尺寸可以作為細胞增生范圍或區(qū)域的直徑或?qū)挾葴y量。
在另一方面，治療或預(yù)防細胞增生性疾病的結(jié)果是有異常表現(xiàn)或異常形態(tài)的細胞的數(shù)量或比例有所下降。優(yōu)選地，治療后有異常表現(xiàn)或異常形態(tài)的細胞的數(shù)量與治療前相比至少降低了5％；更優(yōu)選為，至少降低了10％；更優(yōu)選為，至少降低了20％；更優(yōu)選為，至少降低了30％；更優(yōu)選為，至少降低了40％；更優(yōu)選為，至少降低了50％；還更優(yōu)選為，至少降低了50％；而最優(yōu)選為，至少降低了75％。異常細胞表現(xiàn)或異常細胞形態(tài)可以用任何可重現(xiàn)的測量手段測量。在一方面，異常細胞形態(tài)可以采用顯微鏡檢查法(例如使用倒置組織培養(yǎng)顯微鏡)測量。在一方面，異常細胞形態(tài)的形式為核多態(tài)性。
本文中所用的術(shù)語“選擇性地”的意思是傾向于在某一群體中比在另一群體中以更高的頻率發(fā)生。在一方面，所對比的群體為細胞群體。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物選擇性地對癌細胞或癌前細胞起作用，而不對正常細胞起作用。在另一優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物選擇性地對一種分子靶標(例如c-Met)起調(diào)節(jié)作用但不顯著調(diào)節(jié)另一種分子靶標(例如蛋白激酶C)。在另一優(yōu)選方面，本發(fā)明提供了一種方法用來選擇性地抑制一種酶(例如)的活性。優(yōu)選地，如果事件在群體A中發(fā)生的頻率大于在群體B中頻率的兩倍，則相比于群體B中該事件選擇性地發(fā)生于群體A中。更優(yōu)選為，如果事件在群體A中發(fā)生的頻率大于5倍，則該事件選擇性地發(fā)生；如果事件在群體A中發(fā)生的頻率大于10倍，則該事件選擇性地發(fā)生；更優(yōu)選為，大于50倍；更優(yōu)選為，大于100倍；最優(yōu)選為，事件在群體A中發(fā)生的頻率大于在群體B中頻率的1000倍。例如，如果與正常細胞相比，細胞死亡發(fā)生在癌細胞中的頻率多于兩倍，則細胞死亡可以被稱為選擇性地發(fā)生于癌細胞中。
在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物選擇性地調(diào)節(jié)一種分子靶標(例如c-Met)的活性。在一方面，調(diào)節(jié)是指激活或抑制一種分子靶標的活性。優(yōu)選地，如果本發(fā)明的化合物激活或抑制一種分子靶標的活性的程度為同樣條件下僅不使用上述化合物時分子靶標的活性被激活或抑制的程度的至少2倍，則本發(fā)明的化合物可調(diào)節(jié)該分子靶標的活性。更優(yōu)選為，如果本發(fā)明的化合物激活或抑制一種分子靶標的活性的程度為同樣條件下僅不使用上述化合物時分子靶標的活性被激活或抑制的程度的至少5倍，至少10倍，至少50倍，至少100倍，則本發(fā)明的化合物可調(diào)節(jié)該分子靶標的活性。分子靶標的活性可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。分子靶標的活性可以在體外或在體內(nèi)測量。例如，分子靶標的活性可以在體外通過酶活性測定或DNA結(jié)合測定來測量，或者在體內(nèi)通過測定報道基因的表達來測量。
在一方面，如果加入本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物后對分子靶標的活性的激活或抑制的程度與為同樣條件下僅不使用上述化合物時分子靶標的活性被激活或抑制的程度相比不大于10％，則該化合物不顯著調(diào)節(jié)分子靶標的活性。在一優(yōu)選方面，本發(fā)明的化合物不顯著調(diào)節(jié)蛋白激酶C的活性。
本文中所使用的術(shù)語“同工酶選擇性”的意思是相對于酶的一種同工酶，優(yōu)先抑制或激活所述酶的另一同工酶(例如，相對于激酶β同工酶，優(yōu)先抑制或刺激激酶α同工酶)。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物在實現(xiàn)生理影響的劑量上體現(xiàn)了至少4倍的差異。優(yōu)選為至少10倍的差異，更優(yōu)選為至少50倍的差異。優(yōu)選地，本發(fā)明的化合物在抑制范圍內(nèi)都體現(xiàn)這種差異，并且對感興趣的分子靶標在IC50(意即50％抑制)處舉例說明該差異。
在一優(yōu)選實施方式中，對細胞或有此需要的對象將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物給藥的結(jié)果是對c-Met活性的調(diào)節(jié)(意即激活或抑制)。這里所說的c-Met活性是指由c-Met實行的任何生理功能或活動。例如，c-Met的功能包括下游目標蛋白質(zhì)的磷酸化。c-Met的其它功能包括自磷酸化作用、結(jié)合受體蛋白質(zhì)如Gab-1、Grb-2、Shc、SHP2、和c-Cbl、以及激活信號傳導物如Ras、Src、PI3K、PLC-γ、STATs、ERK1和2、和FAK。
在一優(yōu)選實施方式中，對細胞或有此需要的對象將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物給藥的結(jié)果對ERK1或ERK2，或兩者活性的調(diào)節(jié)(意即激活或抑制)。這里所說的ERK1或ERK2活性是指由ERK1或ERK2實行的任何生理功能或活動。例如，ERK1或ERK2的功能包括下游目標蛋白質(zhì)的磷酸化。
在一方面，激活是指將一種物質(zhì)組合物(例如蛋白質(zhì)或核酸)置于適合實行所需的生理功能的狀態(tài)。在一方面，可以被激活的一種物質(zhì)組合物也有未激活的狀態(tài)。在一方面，一種被激活的物質(zhì)組合物有抑制或激活功能，或兩者都有。
在一方面，提升是指一種物質(zhì)組合物(例如蛋白質(zhì)或核酸)所需的生理活性的增長。在一方面，提升可能通過一種物質(zhì)組合物的濃度增加而發(fā)生。
本文中所使用的“細胞周期關(guān)卡途徑”是指有關(guān)細胞周期關(guān)卡調(diào)節(jié)的生理途徑。細胞周期關(guān)卡途徑可能對組成細胞周期關(guān)卡一種或多種功能有抑制或激活作用，或兩者都有。一個細胞周期關(guān)卡包含至少兩種物質(zhì)組合物(優(yōu)選為蛋白質(zhì))，兩者都促成了細胞周期關(guān)卡的調(diào)節(jié)。細胞周期關(guān)卡途徑可以通過激活一個或多個細胞周期關(guān)卡的成員來激活。優(yōu)選地，細胞周期關(guān)卡途徑為生物化學信號途徑。
本文中所使用的“細胞周期關(guān)卡調(diào)節(jié)器”是指一種對細胞周期關(guān)卡的調(diào)節(jié)(至少部分地)起作用的物質(zhì)組合物。細胞周期關(guān)卡調(diào)節(jié)器可能對組成細胞周期關(guān)卡一種或多種功能有抑制或刺激作用，或兩者都有。在一方面，細胞周期關(guān)卡調(diào)節(jié)器是一種蛋白質(zhì)。在另一方面，細胞周期關(guān)卡調(diào)節(jié)器不是一種蛋白質(zhì)。
在一方面，治療癌癥或細胞增生性疾病的結(jié)果是細胞死亡，并且優(yōu)選為細胞死亡的結(jié)果是群體的細胞數(shù)量至少減少10％。更優(yōu)選為，細胞死亡意味著至少減少20％；更優(yōu)選為，至少減少30％；更優(yōu)選為，至少減少40％；更優(yōu)選為，至少減少50％；最優(yōu)選為，至少減少75％。群體的細胞數(shù)量可以用任何可重現(xiàn)的手段測量。在一方面，群體的細胞數(shù)量使用熒光激活細胞分選術(shù)(FACS)測量。在另一方面，群體的細胞數(shù)量使用免疫熒光顯微技術(shù)測量。在另一方面，群體的細胞數(shù)量使用光顯微術(shù)測量。在另一方面，測量細胞死亡的方法如Li等，(2003)Proc Natl Acad Sci U S A.100(5)2674-8中所示。在另一方面，用凋亡導致細胞死亡。
在優(yōu)選的方面，有效量的本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物對正常細胞沒有顯著細胞毒性。如果將治療有效量的一種化合物給藥后，不誘導大于10％的正常細胞死亡，則治療有效量的該化合物對正常細胞沒有顯著細胞毒性。如果將治療有效量的一種化合物給藥后，不誘導大于10％的正常細胞死亡，則治療有效量的該化合物不顯著影響正常細胞的活力。在另一方面，用凋亡導致細胞死亡。
在一方面，將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物與細胞接觸，選擇性地在癌細胞中誘導或激活細胞死亡。優(yōu)選地，將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物對有此需要的對象給藥，選擇性地在癌細胞中誘導或激活細胞死亡。在另一方面，將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物與細胞接觸，選擇性地在患有細胞增生性疾病的一種或多種細胞中誘導細胞死亡。優(yōu)選地，將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物對有此需要的對象給藥，選擇性地在患有細胞增生性疾病的一種或多種細胞中誘導細胞死亡。在優(yōu)選的方面，本發(fā)明是關(guān)于通過將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物對有此需要的對象給藥以治療或預(yù)防癌癥的方法，其中，將本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物給藥導致下列結(jié)果處于G1和/或S期的細胞的積聚，導致癌細胞死亡的細胞毒性并不引起正常細胞的細胞死亡，動物體中抗癌抗菌素治療指數(shù)至少為2，細胞周期關(guān)卡的激活。這里所使用的“治療指數(shù)”是指最大允許劑量除以有效劑量。
對本文中所涉及的已知技術(shù)或等效技術(shù)的詳細描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以參見一般參考文獻。這些文獻包括Ausubel等，Current Protocols in Molecular Biology，JohnWiley and Sons，Inc.(2005)；Sambrook等，Molecular Cloning，A Laboratory Manual(3ded.)，Cold Spring Harbor Press，Cold Spring Harbor，New York(2000)；Coligan等，Current Protocols in Immunology，John Wiley & Sons，N.Y.；Enna等，Current Protocols inPharmacology，John Wiley & Sons，N.Y.；Fingl等，The Pharmacological Basis ofTherapeutics(1975)，Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA，18th edition(1990)。在實施或使用本發(fā)明的某方面時，這些文獻當然也可以作為參考。
在其他方面，本發(fā)明的化合物，或其藥物學可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物可以與第二種化學治療藥物聯(lián)合給藥。該第二種化學治療藥物可以為紫杉烷、芳香酶抑制劑、蒽環(huán)類抗生素、靶向微管的藥物、拓撲異構(gòu)酶毒性藥、靶向單克隆或多克隆抗體、分子靶標或酶的抑制劑(例如，激酶抑制劑)、或胞苷類似物藥。在優(yōu)選的方面，所述化學治療藥物可以是但不限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、阿納托司唑、依西美坦、來曲唑、HERCEPTIN(曲妥珠單抗)、GLEEVE(imatanib)C、TAXOL(紫杉醇)、環(huán)磷酰胺、洛伐他汀、minosine、阿糖胞苷(araC)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、甲氨喋呤(MTX)、泰索帝(紫杉萜)、諾雷德(戈舍瑞林)、長春新堿、長春堿、諾考達唑、替尼泊苷、依托泊苷、健擇(吉西他濱)、epothilone、諾維本(navelbine)、喜樹堿、柔紅霉素(daunonibicin)、放線菌素D、米托蒽醌、安吖啶、多柔比星(阿霉素)、表柔比星、或伊達比星或其它在www.cancer.org/docroot/cdg/cdg 0.asp中所列的藥物。在另一方面，所述第二種化學治療藥物可以是細胞因子，例如G-CSF(粒細胞集落刺激因子)。在另一方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物可以與輻射療法聯(lián)合給藥。在另一方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物可以與標準的化學療法組合聯(lián)合給藥，所述化學療法組合為例如但不限于，CMF(環(huán)磷酰胺、甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶)、CAF(環(huán)磷酰胺、阿霉素和5-氟尿嘧啶)、AC(阿霉素和環(huán)磷酰胺)、FEC(5-氟尿嘧啶、表柔比星和環(huán)磷酰胺)、ACT或ATC(阿霉素、環(huán)磷酰胺和紫杉醇)、CMFP(環(huán)磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶和潑尼松)。
本發(fā)明的化合物，或其藥物學可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物可以被摻入適于給藥的藥物組合物中。這些組合物通常包含本化合物(意即，包括活性化合物)，以及一種藥物學可接受的賦形劑或載體。本文中所使用的“藥物學可接受的賦形劑”或“藥物學可接受的載體”意指包括與藥物給藥相容的任一和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣劑、抗菌劑和抗真菌劑、等張劑和吸收延遲劑等。合適的載體在最新版的Remington’s Pharmaceutical Sciences(本領(lǐng)域標準的參考文獻)中有詳細描述。這種載體或稀釋劑的優(yōu)選實例包括但不限于水、鹽水、林格氏液、葡萄糖溶液、以及5％人血清白蛋白。藥物學可接受的載體包括固體載體如乳糖、高嶺土、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸等。示例性的液體載體包括糖漿、花生油、橄欖油、水等。類似地，該載體或稀釋劑可能包括本領(lǐng)域已知的延時材料，如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，單獨或與蠟、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、異丁烯酸甲酯等一起使用。本發(fā)明的藥物組合物中還可包括本領(lǐng)域公知的其他填充劑、賦形劑、矯味劑、和其他添加劑。也可能使用脂質(zhì)體和非水載體，例如不揮發(fā)油。這些介質(zhì)和物質(zhì)在藥物活性物質(zhì)中的應(yīng)用是本領(lǐng)域所熟知的。除了與活性化合物不相容的常規(guī)介質(zhì)和物質(zhì)以外，均可考慮在組合物中應(yīng)用這些介質(zhì)和物質(zhì)。增補活性化合物也可以加入組合物中。
在一方面，本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物是以一種合適的劑型給藥，該劑型的制備是通過將一種治療有效量的(例如，足以通過抑制腫瘤生長、殺死腫瘤細胞、治療或預(yù)防細胞增生性疾病等實現(xiàn)所需的治療效果的有效水平)本發(fā)明的化合物，或其藥理學上可接受的鹽、前藥、代謝物、類似物、或衍生物，(作為活性成分)與標準的藥物載體或稀釋劑按照常規(guī)步驟(意即，通過制備本發(fā)明的藥物組合物)結(jié)合。這些步驟可包括以適于獲得所需的制劑的方式將這些成分混合、造粒、以及壓制或溶解。
4.藥物組合物及劑型 本發(fā)明的化合物被配制成與其所需的給藥途徑相容的形式。給藥途徑的例子包括非胃腸道，例如靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、皮下、經(jīng)口(oral)(例如吸入)、經(jīng)皮(局部)、以及透粘膜給藥。用于非胃腸道、皮內(nèi)、或皮下施用的溶液或混懸液可以包括下列組分用于注射的無菌稀釋劑(如水)、鹽水溶液、不揮發(fā)油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑(如苯甲醇或?qū)αu基苯甲酸甲酯)；抗氧化劑(如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉)；螯合劑(如乙二胺四乙酸)；緩沖劑(如醋酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽、以及用于調(diào)整張度(tonicity)的物質(zhì)如氯化鈉或葡萄糖)。PH值可由酸堿調(diào)節(jié)，例如鹽酸或氫氧化鈉。非胃腸道制劑可以被封裝于玻璃或塑料的安瓿、一次性注射器或多劑量瓶中。
本發(fā)明的化合物或藥物組合物可以通過許多當前已經(jīng)熟知的用于化學療法治療的方法對對象給藥。例如，對癌癥的治療，本發(fā)明的化合物可以被直接注射入腫瘤、注射入血流或體腔、或口服或采用貼劑經(jīng)過皮膚施用。所選的劑量應(yīng)足以構(gòu)成有效治療但不高到產(chǎn)生不可接受的副作用。病人的疾病情況的狀態(tài)(例如癌癥、前期癌等)和健康狀況在治療期間和治療后的一段合理時間內(nèi)應(yīng)優(yōu)選被嚴密觀察。
本文所使用的術(shù)語“治療有效量”是指用來治療、減輕、或預(yù)防某一特定疾病或病變，或體現(xiàn)可檢測到的治療的或抑制的效果的藥物的量。該效果可以用任何本領(lǐng)域已知的鑒定方法檢測。對某個對象的精確的有效量取決于該對象的體重、尺寸以及健康狀況；病變的性質(zhì)和程度；以及所選擇給藥的療法或療法的組合來確定。對一給定情況的治療有效量可由在臨床醫(yī)師經(jīng)驗和判斷范圍內(nèi)的例行檢查所確定。在一優(yōu)選方面，要治療的該疾病或病變?yōu)榘┌Y。在另一方面要治療的該疾病或病變?yōu)榧毎錾约膊　?br> 對任何化合物，治療有效量可以通過細胞培養(yǎng)測定(例如，贅生性細胞)或動物模型(通常為大鼠、小鼠、兔子、狗、或豬)初步估算。動物模型也可以被用來確定合適的濃度范圍和給藥途徑。這些信息可以被用來確定可用于對人給藥的劑量或途徑。治療/預(yù)防效力和毒性可以在細胞培養(yǎng)物或?qū)嶒瀯游镆詷藴仕帉W程序測定，例如，ED50(對群體中的50％治療上有效的劑量)和LD50(對群體中的50％致命的劑量)。毒性劑量與治療有效劑量之比為治療指數(shù)，它可以表達為LD50/ED50的比值。優(yōu)選具有較大的治療指數(shù)的藥物組合物。劑量可根據(jù)所使用的劑型、病人敏感性、以及給藥途徑可以在這一范圍內(nèi)變化。
調(diào)整劑量和給藥方式以提供足夠的水平的活性藥物或保持所需的效果。可能需要考慮的因素包括疾病狀態(tài)的嚴重程度、對象的整體健康狀態(tài)、年齡、體重、性別、給藥的時間和頻率、藥物組合、反應(yīng)敏感度、以及對治療的耐受力/反應(yīng)。取決于特定制劑的半衰期或清除率，長效藥物組合物可以每隔3至4天、每星期給藥、或每兩星期給藥一次。
含有本發(fā)明活性化合物的藥物組合物可能以通常已知的方式制造，例如通過常規(guī)混合、溶解、造粒、錠劑制作、研磨、乳化、包封、截留(entrapping)、或凍干工藝。藥物組合物可能以傳統(tǒng)方式制造，采用一種或多種藥物學可接受的載體。這些載體包含有更易于將活性化合物處理成可以藥用的制劑的賦形劑和/或賦形劑。當然，合適的制劑要根據(jù)所選擇的給藥途徑而定。
適合于注射用途的藥用化合物包括無菌水溶液(當為水溶性時)或分散體以及用于無菌可注射水溶液或分散體的臨時(extemporaneous)制劑的無菌粉末。對于靜脈給藥，合適的載體包括生理鹽水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，N.J.)或磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)。在所有情況下，該組合物必須為無菌的并且應(yīng)為易于注射的液體。在制造和儲存情況下，該組合物必須為穩(wěn)定的并且必須在貯存中防止微生物(例如細菌和真菌)的污染作用。該載體可以為溶劑或分散劑并包含例如，水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、以及液態(tài)聚乙二醇等等)、以及合適的上述物質(zhì)的混合物。適當?shù)牧鲃有钥梢酝ㄟ^，例如，使用包衣(如卵磷脂)，在分散時保持所需要的顆粒大小以及使用表面活性劑等方式保持。防止微生物作用可以使用各種抑菌的和抗真菌劑，例如，對羥基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞等等實現(xiàn)。在許多情況下，在組合物中優(yōu)選包括等張劑，例如，糖、多元醇(如甘露醇、山梨糖醇、氯化鈉)。可注射組合物的延長吸收可以通過在組合物中包含吸收延遲劑(例如，單硬脂酸鋁和明膠)實現(xiàn)。
可以通過將所需量的活性化合物和所需的一種或多種上面所列的成分一起加入到一種合適的溶劑中，然后經(jīng)過過濾滅菌來制備無菌的可注射溶液。通常，可以通過將活性化合物加入一種包含一種基本的分散介質(zhì)以及所需的其他上面所列的成分的無菌賦形物中來制備分散體。如需要用于制備無菌可注射溶液的無菌粉末，制備方法為真空干燥和冷凍干燥以生成活性成分的粉末，加上來自前述無菌過濾溶液中的任一所需的成分。
口服組合物通常包括惰性稀釋劑或可食用的藥物學可接受的載體。它們可以被封裝進膠囊中或壓制進藥片中。為了口服治療給藥的目的，該活性化合物可以加入賦形劑中并以藥片、含片、或膠囊的形式使用。口服組合物也可以使用用作漱口劑的液體載體制備，其中在液體載體中的化合物經(jīng)口施用并在漱口后被吐出或咽下。藥物學相容的粘合劑、和/或輔料可以被加入作為組合物的一部分。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可以包含任何下列成分，或相似特性的化合物粘合劑(如微晶纖維素、西黃蓍膠或明膠)；賦形劑(如淀粉或乳糖)；崩解劑(如褐藻酸、Primogel、或玉米淀粉)；潤滑劑(如硬脂酸鎂或Sterotes)；助流劑(如膠體二氧化硅)；甜味劑(如蔗糖或糖精)；或調(diào)味劑(如椒薄荷、水楊酸甲酯、或橙味劑)。
對于吸入給藥，該化合物以噴霧劑的形式從加壓的容器或配藥器傳遞，所述容器或配藥器中包含合適的推進劑例如氣體如二氧化碳，或霧化器。
系統(tǒng)給藥也可以為透粘膜或經(jīng)皮方式。對于透粘膜或經(jīng)皮給藥方式，適用于所需穿透的屏障的滲透劑在配方中被使用。這些滲透劑通常為本領(lǐng)域所公知，例如對透粘膜給藥而言包括清潔劑、膽鹽、以及夫西地酸衍生物。透粘膜給藥可以通過鼻腔噴霧或栓劑實現(xiàn)。對于經(jīng)皮給藥，活性化合物被配制成本領(lǐng)域通常已知的油膏、軟膏、凝膠或乳膏。
在一方面，活性化合物與將保護化合物以防止其從身體中迅速清楚的藥物學可接受的載體一起制備，如控制釋放劑型，包括埋植劑和微囊傳遞系統(tǒng)?？梢允褂每缮锝到獾?、生物相容性聚合物，如亞乙基乙烯醋酸酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、聚原酸酯類、以及聚乳酸。這些劑型的制備對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見的。該材料也可以商業(yè)方式從Alza Corporation and Nova Pharmaceuticals，Inc.得到。脂質(zhì)混懸液(包括靶向受感染細胞的帶有抗病毒抗原的單克隆抗體的脂質(zhì)體)也可以被用作藥物學可接受的載體。這些可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法(如US.專利4,522,811中所述)制備。
配制口服或非胃腸道的劑量單位形式的組合物特別有優(yōu)勢，因其易于給藥并劑量一致。這里所說的劑量單位形式是指物理上離散的適于以單位劑量用于要治療的對象的單元；每個單元含有預(yù)定量的計算能產(chǎn)生所需的治療效果的活性化合物以及所需的藥用載體。本發(fā)明的劑量單位形式的具體規(guī)格取決于并直接依賴于該活性化合物獨特的特性和要達到的特定的治療效果。
在治療應(yīng)用中，用于本發(fā)明的藥物組合物的劑量隨藥物、年齡、體重、以及接受其的病人的臨床狀況，以及進行治療的臨床醫(yī)師或從業(yè)者的經(jīng)驗和判斷的不同，以及其它影響所選劑量的因素而變化。通常，劑量應(yīng)足夠?qū)е履[瘤生長減慢，優(yōu)選為腫瘤生長消退，并還優(yōu)選為導致腫瘤完全消退。劑量范圍可以從每天約0.01毫克/千克到每天約3000毫克/千克。在優(yōu)選的方面，劑量范圍可以從每天約1毫克/千克到每天約1000毫克/千克。在一方面，單獨的、分開的、或連續(xù)的劑量形式的劑量的范圍為約0.1毫克/天到約50克/天；或約0.1毫克/天到約25克/天；或約0.1毫克/天到約10克/天；或約0.1毫克/天到約3克/天；或約0.1毫克/天到約1克/天(這意味著可以隨病人體重的kg數(shù)，體表面積的平方米數(shù)，和年齡來調(diào)整劑量)。藥物的有效劑量是其提供了由臨床醫(yī)師或其他有資格的觀察者注意到的客觀的，可識別的改善。例如，病人中腫瘤的消退可以參考腫瘤的直徑來測量。腫瘤直徑的減小表示了腫瘤消退。腫瘤消退也可表現(xiàn)為停止治療后腫瘤不再復發(fā)。本文中所使用的術(shù)語“劑量有效方式”是指在對象或細胞中產(chǎn)生所需的生物學效果的活性化合物的量。
藥物組合物可以和給藥說明一起包含在容器，包裝，或配藥器中。
所有引用的專利，專利申請以及參考均為全文引用作為參考。
實施例 下面提供的實施例用以進一步說明本發(fā)明不同的特征。所述實施例也用來說明可用于實施本發(fā)明的方法。這些實施例并不限制所要求保護的本發(fā)明。
實施例1.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的制備 步驟1
在30分鐘內(nèi)逐滴向1，2，3，4-四氫喹啉(100毫升)的無水四氫呋喃(300毫升)溶液加入溴乙基丙酮酸酯(53毫升)。將混合物在室溫下攪拌24小時。將反應(yīng)混合物過濾后，用四氫呋喃(100毫升)洗滌固體。將濾液蒸發(fā)至干燥生成117克褐色油狀的3-(3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-2-氧代丙酸乙酯。
步驟2
將無水氯化鎂(29.4克，0.31摩爾)混懸于2-甲氧基乙醇(400毫升)之中，并且將混合物在125℃攪拌15分鐘。然后加入3-(3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-2-氧代丙酸乙酯(76.57克0.31摩爾)在2-甲氧基乙醇(100毫升)中的溶液，并將混合物在125℃攪拌60分鐘。將該混合物進一步回流攪拌5小時，冷卻并且蒸發(fā)至干燥。殘渣隨后用2M鹽酸(500毫升)被酸化然后用二氯甲烷(3×500毫升)萃取。合并的有機層隨后用5％碳酸氫鈉溶液洗滌并在蒸發(fā)干燥前用無水硫酸鎂干燥。殘渣隨后用硅膠色譜柱提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)洗脫以生成5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-羧酸乙酯(31.0克，47％)。1H NMR(CDCl3)400MHz δ7.9(d，1H，J＝8Hz)，7.79(s，1H)，7.17(m，1H)，6.99(d，1H，J＝7.2Hz)，4.37(m，2H)，4.18(t，2H，J＝5.6Hz)，3.0(t，2H，J＝6Hz)，2.24(t，2H，J＝6Hz)，1.42(t，3H，J＝7.2Hz)。
步驟3
加入氫氧化鈉(30.8克，0.77摩爾)至5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-羧酸乙酯(31克，0.14摩爾)的乙醇(200毫升)和水(200毫升)的溶液中。在冷卻至室溫并用水(2.64升)稀釋以前，將混合物加熱回流2小時。然后用二氯甲烷(2×300毫升)洗滌該混合物并用濃鹽酸將水層酸化至pH值1.0。形成的沉淀物通過過濾收集，用水洗滌后干燥生成暗黃色固體狀的5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-羧酸(23克，85％)。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.95(brs，1H)，7.96(s，1H)，7.69(d，1H，J＝8.4Hz)，7.06(t，1H，J＝6.8Hz)，6.92(d，1H，J＝6.8Hz)，4.19(t，2H，J＝6Hz)，2.91(t，2H，J＝6Hz)，2.11(t，2H，J＝5.6Hz). 步驟4
將5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-羧酸(37.5克，0.186摩爾)、亞鉻酸銅(13.5克，43毫摩爾)和喹啉(180毫升)在攪拌下加熱到185℃2小時。然后將該混合物冷卻，用二氯甲烷(1升)稀釋，并使用hyflo過濾。用2M鹽酸(2×600毫升)洗滌濾液，并且用2M氫氧化鈉(150毫升)洗滌濾液兩次，然后蒸發(fā)至干燥。殘渣隨后用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶6)洗脫產(chǎn)生淡黃色固體狀的5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉(21克，72％)。1H NMR(CDCl3)400MHz δ7.44(dd，1H，J＝0.8和7.6Hz)，7.07(d，1H，J＝3.2Hz)，7.01(t，1H，J＝7.2Hz)，6.9(dd，1H，J＝0.8和6.8Hz)，6.43(d，1H，J＝3.2Hz)，4.16(t，2H，J＝6Hz)，2.99(t，2H，J＝6.4Hz)，2.24(m，2H). 步驟5
0℃下，加入草酰氯(2.22毫升，25.3毫摩爾)至5，6-二氫-4H-吡咯并喹啉(4.0克，25.3毫摩爾)的無水乙醚(300毫升)的溶液中。將該混合物在0℃下攪拌30-45分鐘，然后冷卻至-78℃。然后將甲醇鈉在甲醇中的溶液(0.5M)(60毫升)緩慢加入并且使該混合物回暖至室溫。然后用乙酸乙酯(200毫升)稀釋該混合物，用水(100毫升)洗滌該混合物，隨后用飽和的氯化鈉水溶液(50毫升)洗滌該混合物。將合并的有機層用無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干燥。殘渣溶于乙酸乙酯(100毫升)后經(jīng)過2英寸粗硅膠塞過濾并蒸發(fā)生成黃色固體狀的5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)乙醛酸甲酯(5.3克，85％)1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.3(s，1H)，8.14(d，1H)，7.22(t，1H)，7.04(d，1H)，4.2(t，2H)，3.95(s，3H)，3.0(t，2H)，2.3(t，2H). 步驟6
0℃下在30分鐘內(nèi)向5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)乙醛酸甲酯(1.0克，4.12毫摩爾)和吲哚-3-乙酰胺(0.8克，4.5毫摩爾)在無水四氫呋喃的溶液中逐滴加入叔丁醇鉀溶液(在四氫呋喃中1M)(12.4毫升，12.4毫摩爾)。將該混合物在0℃下攪拌2小時。然后加入濃鹽酸(10毫升)，并將該混合物在室溫下攪拌1小時。隨后用乙酸乙酯(200毫升)稀釋該混合物，用水(50毫升)和飽和氯化鈉水溶液(50毫升)洗滌2次，然后用無水硫酸鈉干燥有機層。將殘渣用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)洗脫以生成亮紅色固體狀的3-5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(1.2克，80％)。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.5(brs，1H)，7.78(s，1H)，7.63(d，1H，J＝2.8Hz)，7.44(s，1H)，7.35(d，1H，J＝8Hz)，7.16(d，1H，J＝8.4Hz)，7.11(t，1H，J＝7.6Hz)，6.86(t，1H，J＝7.6Hz)，6.80(d，1H，J＝7.2Hz)，6.64(t，1H，J＝8Hz)，6.57(d，1H，J＝8Hz)，4.2(t，2H，J＝6Hz)，2.96(t，2H，J＝6Hz)，2.24(m，2H). 實施例2.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 (±)-順式化合物、(±)-反式化合物，或其混合物的制備是采用如步驟A至C中分別所述的還原條件獲得。
步驟A用鋅/汞還原3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮
用于還原3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的活性鋅-汞還原劑用金屬鋅和HgCl2來制備。將鋅粉末(2.5克)和氯化汞(II)(0.25克)混懸入脫離子水(3毫升)并攪拌20分鐘。然后加入幾滴濃鹽酸，隨后攪拌該混合物幾分鐘。濾出固體，用脫離子水(50毫升)、乙醇(50毫升)洗滌，并干燥。
將3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(0.35克，95.4微摩爾)加入如上制備的鋅(汞)還原劑在無水乙醇(50毫升)內(nèi)的混懸液中。將該混合物加熱回流30-60分鐘，同時使干燥氯化氫氣體緩慢通過該混合物?；旌衔锶缓蟊焕鋮s、過濾和蒸發(fā)至干燥。然后加入5％碳酸鉀溶液(150毫升)和乙酸乙酯(300毫升)。將有機層用無水硫酸鎂干燥，然后被蒸發(fā)以生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的2∶1的混合物(0.2克)。
步驟B在鈀碳存在下用氫氣還原3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮
將3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(16g，43.6mmol)和10％鈀碳(Pd/C，濕催化劑)(8克)的混懸液在1個大氣壓的氫氣下，在甲醇(600毫升)中室溫下攪拌48小時。催化劑隨后經(jīng)過Celite床過濾，濾液被蒸發(fā)至干燥。將殘渣再溶于甲醇中，并且產(chǎn)物通過加入冷水被沉淀。沉淀物被過濾，用水洗滌，并在真空下干燥以生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(9.2克).1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.56(s，1H)，10.66(s，1H)，7.43(d，1H，J＝7.6Hz)，7.14(d，2H，J＝8Hz)，6.86-6.97(m，4H)，6.78(t，1H，J＝7.2Hz)，6.69(d，1H，J＝6.8Hz)，4.88(dd，2H，J＝9.2和45.6Hz)，3.88(m，2H)，2.76(t，2H，J＝5.6Hz)，1.94(t，2H，J＝6Hz)。
步驟C在甲醇中用鎂還原3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮。

將鎂屑(3.05克，0.125摩爾)加入3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(2.56克，6.97毫摩爾)在無水甲醇(100毫升)的溶液中，并在1個大氣壓的氮氣下加熱回流40分鐘。冷卻至室溫后，將該混合物倒入乙酸乙酯(300毫升)中，用1M鹽酸(300毫升)和水(500毫升)洗滌。將有機層用無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干燥。然后殘渣由硅膠色譜法使用40-50％在己烷中的乙酸乙酯提純獲得淡粉紅色固體狀的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(2.3克)。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.54(s，1H)，11.03(s，1H)，7.32-7.4(m，4H)，7.17(d，1H，J＝7.2Hz)，7.07(t，1H，J＝7.6Hz)，6.96(t，1H，J＝7.6Hz)，6.82-6.89(m，2H)，4.5(dd，2H，J＝7.2和20Hz)，4.07(t，2H，J＝5.2Hz)，2.87(t，2H，J＝6Hz)，2.08(m，2H). 實施例3.由(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮
將(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(378毫克，1.02毫摩爾)在叔丁醇鉀(11毫克，98微摩爾)的叔丁醇(10毫升)溶液中加熱至50℃16小時。將該混合物倒入乙酸乙酯(100毫升)中并用水(100毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并蒸發(fā)至干燥以生成黃褐色粉末狀的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(276毫克)。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.54(s，1H)，11.03(s，1H)，7.32-7.4(m，4H)，7.17(d，1H，J＝7.2Hz)，7.07(t，1H，J＝7.6Hz)，6.96(t，1H，J＝7.6Hz)，6.82-6.89(m，2H)，4.5(dd，2H，J＝7.2和20Hz)，4.07(t，2H，J＝5.2Hz)，2.87(t，2H，J＝6Hz)，2.08(m，2H)。
實施例4.3(R)，4(S)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和3(S)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的色譜分離
將在甲醇(10毫升)和乙腈(6毫升)中的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(135毫克)的混合物以制備超臨界流體色譜法，采用20毫米×250毫米手性AD柱，以流速為3.5毫升/分鐘的35％甲醇/CO2洗脫，在4.55分鐘得到較快的洗脫峰(60mg)，為3(R)，4(S)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，在6.05分鐘得到較慢的洗脫峰(56mg)，為3(S)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。絕對立體化學歸屬僅基于相關(guān)化合物的相對保留時間，且可能是相反的。
實施例5.3(R)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚3-基)吡咯烷-2，5-二酮和3(S)，4(S)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的色譜分離
將(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(200mg)在乙腈中(1毫升)的混合物以使用CHIRALPAKAD柱(Daicel，U.S.A.)20mm×250mm的制備超臨界流體色譜法，用35％甲醇/CO2以3.5ml/分鐘的流速洗脫。色譜處理獲得具有負旋光度的反式異構(gòu)體(82mg)的較快洗脫峰，是(-)-3(R)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和具有正旋光度的反式異構(gòu)體(86mg)的較慢洗脫峰，是(+)-3(S)，4(R)-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。絕對立體化學歸屬僅基于相關(guān)化合物的相對保留時間，且可能是相反的。所有旋光度的測量是在25℃、589nm以及氯仿中進行的。
色譜法分離的反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的(+)或(-)異構(gòu)體的結(jié)晶可通過采用蒸氣壓(vapor stress)技術(shù)和在49℃緩慢蒸發(fā)從2，2，2-三氟乙醇中制備。這些異構(gòu)體的結(jié)晶也可以在室溫下通過使用晶種蒸發(fā)從乙醇中制備，該晶種例如是那些采用蒸氣壓技術(shù)制備的。
實施例6.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(2-三氟甲基-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(2-三氟甲基-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2’-三氟甲基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.16(s，1H)，7.83(d，2H，J＝7.2Hz)，7.58(m，2H)，7.37(d，1H，J＝7.6Hz)，7.33(s，1H)，6.85(d，1H，J＝6.8Hz)，6.66(t，1H，J＝7.2Hz)，5.96(d，1H，J＝8.8Hz)，4.2(t，2H，J＝5.6Hz)，2.95(t，2H，J＝6.4Hz)，2.22(m，2H)。
實施例7.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-噻吩-2-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-噻吩-2-基)-吡咯-2，5-二酮，用2-噻吩基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ7.87(s，1H)，7.49(d，1H，J＝5.2Hz)，7.37(s，1H)，7.3(d，1H，J＝4Hz)，7.02(t，1H，J＝4Hz)，6.89-6.98(m，2H)，6.53(d，1H，J＝7.6Hz)，4.92(t，2H，J＝6Hz)，3.04(t，2H，J＝6Hz)，2.31(m，2H)。
實施例8.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用3-甲氧基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(CDCl3)400MHz δ8.01(s，1H)，7.31(s，1H)，7.23(t，1H，J＝7.6Hz)，7.09(m，2H)，6.87-6.92(m，2H)，6.73(t，1H，J＝7.6Hz)，6.14(d，1H，J＝8Hz)，4.25(t，2H，J＝5.2Hz)，2.99(t，2H，J＝5.6Hz)，2.67(m，2H)。
實施例9.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-2-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-2-基)-吡咯-2，5-二酮，用吡啶-2-基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.58(d，1H，J＝4.4Hz)，8.12(s，1H)，7.78(dt，1H，J＝1.6和7.6Hz)，7.68(d，1H，J＝8Hz)，7.31(s，1H)，7.25(m，1H)，6.87(d，1H，J＝6Hz)，6.68(t，1H，J＝8Hz)，5.91(d，1H，J＝7.6Hz)，4.24(t，2H，J＝5.6Hz)，2.97(t，2H，J＝6Hz)，2.25(m，2H)。
實施例10.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用4-甲氧基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(CDCl3)400MHz δ7.95(s，1H)，7.51(m，2H)，7.25(s，1H)，6.85-6.89(m，3H)，6.75(t，1H，J＝8Hz)，6.24(d，1H，J＝8Hz)，4.26(t，2H，J＝5.6Hz)，3.82(s，3H)，2.99(t，2H，J＝6.4Hz)，2.27(m，2H)。
實施例11.3-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮 按實施例1的步驟1-6制備3-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮，用3，4-(亞甲二氧基)苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ7.98(s，1H)，7.04-7.07(m，2H)，6.90(d，1H，J＝7.2Hz)，6.76-6.82(m，2H)，6.30(d，1H，J＝8Hz)，5.98(s，2H，)，4.26(t，2H，J＝5.6Hz)，2.99(t，2H，J＝6Hz)，2.28(m，2H)。
實施例12.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-苯基-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-苯基-吡咯-2，5-二酮，用苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHzδ8.01(s，1H)，7.52(m，2H)，7.35(m，3H)，7.27(s，1H)，6.87(d，1H，J＝7.2Hz)，6.7(t，1H，J＝7.2Hz)，6.08(d，1H，J＝8Hz)，4.26(t，2H，J＝5.6Hz)，2.99(t，2H，J＝5.6Hz)，2.27(m，2H)。
實施例13.3-苯并[b]噻吩-2-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-苯并[b]噻吩-2-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮，用2-苯并噻吩基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.11(s，1H)，8.14(s，1H)，8.01(d，1H，J＝8Hz)，7.84(s，1H)，7.45(d，1H，J＝8Hz)，7.3(t，1H，J＝7.2Hz)，7.15(t，1H，J＝7.6Hz)，6.71(d，1H，J＝6.8Hz)，6.43(t，1H，J＝7.6Hz)，5.99(d，1H，J＝8Hz)，4.26(t，2H，J＝5.2Hz)，2.86(t，2H，J＝5.6Hz)，2.1(m，2H)。
實施例14.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-苯氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-苯氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用3-苯氧基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.03(s，1H)，8.01(s，1H)，7.43(t，1H，J＝7.6Hz)，7.28(d，1H，J＝7.6Hz)，7.15(t，2H，J＝7.6Hz)，7.03(t，2H，J＝7.6Hz)，6.92(d，1H，J＝6.8Hz)，6.8(s，1H)，6.76(t，1H，J＝8Hz)，6.60(d，2H，J＝7.6Hz)，6.08(d，1H，J＝8Hz)，4.27(t，2H，J＝5.6Hz)，2.97(t，2H，J＝6Hz)，2.16(m，2H)。
實施例15.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用3-氯苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.11(s，1H)，8.13(s，1H)，7.47-7.43(m，2H)，7.36(t，1H，J＝7.6Hz)，7.29(d，1H，J＝7.6Hz)，6.86(d，1H，J＝6.8Hz)，6.68(t，1H，J＝7.6Hz)，5.97(d，1H，J＝8Hz)，4.31(t，2H，J＝5.6Hz)，2.93(t，2H，J＝5.6Hz)，2.16(m，2H)。
實施例16.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2-氯苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.1(s，1H)，8.17(s，1H)，7.55(d，1H，J＝8Hz)，7.45-7.49(m，1H)，7.36(d，2H，J＝4.4Hz)，6.81(d，1H，J＝7.2Hz)，6.58(t，1H，J＝8Hz)，5.92(d，1H，J＝8.4Hz)，4.27(m，2H)，2.89(t，2H，J＝6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例17.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，5-二甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，5-二甲氧基-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2，5-二甲氧基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ10.93(s，1H)，8.06(s，1H)，6.97(s，2H)，6.81(d，1H，J＝7.6Hz)，6.77(s，1H)，6.6(t，1H，J＝8Hz)，5.92(d，1H，J＝8Hz)，4.26(t，2H，J＝5.2Hz)，3.63(s，3H)，3.3(s，3H)，2.9(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例18.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2-氯-4-氟苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.11(s，1H)，8.16(s，1H)，7.57(dd，1H，J＝2.8和9.2Hz)，7.44(dd，1H，J＝6.8和8.4Hz)，7.28(dt，1H，J＝2.4和8.4Hz)，6.84(d，1H，J＝7.2Hz)，6.66(t，1H，J＝8Hz)，5.98(d，1H，J＝8Hz)，4.27(m，2H)，2.9(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例19.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-萘-1-基-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-萘-1-基-吡咯-2，5-二酮，用1-萘基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.1(s，1H)，8.17(s，1H)，8.02(d，1H，J＝8Hz)，7.97(d，1H，J＝8Hz)，7.75(d，1H，J＝8Hz)，7.43-7.55(m，3H)，7.37(t，1H，J＝8Hz)，6.66(d，1H，J＝6.8Hz)，6.27(t，1H，J＝8Hz)，5.57(d，1H，J＝8Hz)，4.24(t，2H，J＝5.2Hz，2.83(t，2H，J＝5.6Hz)，2.08(m，2H)。
實施例20.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，6-二氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，6-二氯-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2，6-二氯苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.23(s，1H)，8.27(s，1H)，7.53-7.62(m，3H)，6.85(d，1H，J＝7.2Hz)，6.64(t，1H，J＝8.4Hz)，6.01(d，1H，J＝8Hz)，4.27(t，2H，J＝5.6Hz)，2.9(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例21.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-溴-苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-溴-苯基)-吡咯-2，5-二酮，用2-溴苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.09(s，1H)，8.17(s，1H)，7.75(m，1H)，7.37(m，2H)，7.33(m，1H)，6.81(d，1H，J＝7.2Hz)，6.58(t，1H，J＝8Hz)，5.95(d，1H，J＝8Hz)，4.26(t，2H，J＝5.6Hz)，2.9(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例22.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吲哚-1-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吲哚-1-基)-吡咯-2，5-二酮，用N-吲哚-2-乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.21(s，1H)，8.18(s，1H)，7.58(d，1H，J＝8Hz)，7.52(d，1H，J＝3.2Hz)，7.01(m，2H)，6.91(t，1H，J＝6.8Hz)，6.74(d，1H，J＝2.8Hz)，6.71(d，1H，J＝7.2Hz)，6.4(t，1H，J＝8Hz)，5.63(d，1H，J＝8Hz)，4.28(t，2H，J＝4.8Hz)，2.85(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(m，2H)。
實施例23.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-3-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-3-基)-吡咯-2，5-二酮，用吡啶-3-基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.14(s，1H)，8.53(m，2H)，8.12(s，1H)，7.78(d，1H，J＝7.6Hz)，7.41(dd，1H，J＝4.8和8Hz)，6.86(d，1H，J＝7.2Hz)，6.66(t，1H，J＝7.6Hz)，5.97(d，1H，J＝8.4Hz)，4.3(t，2H，J＝5.2Hz)，2.93(t，2H，J＝5.6Hz)，2.16(m，2H)。
實施例24.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮，用5-溴-1H-吲哚-3-基-乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.77(s，1H)，10.92(s，1H)，7.82(s，1H)，7.69(d，1H，J＝2.4Hz)，7.33(d，1H，J＝8.4Hz)，7.10(dd，1H，J＝2和8.4Hz)，6.99(d，1H，J＝1.6Hz)，6.76(d，1H，J＝7.2Hz)，6.55(t，1H，J＝8Hz)，6.36(d，1H，J＝8Hz)，4.25(t，2H，J＝5.6Hz)，2.92(t，2H，J＝5.6Hz)，2.17(m，2H)。
實施例25.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-4-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-吡啶-4-基)-吡咯-2，5-二酮，用吡啶-4-基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.17(s，1H)，8.53(m，2H)，8.54(d，2H，J＝6Hz)，8.17(s，1H)，7.32(d，2H，J＝4.8Hz)，6.88(d，1H，J＝7.2Hz)，6.69(t，1H，J＝7.6Hz)，5.93(d，1H，J＝8Hz)，4.31(t，2H，J＝6Hz)，2.94(t，2H，J＝6Hz)，2.16(m，2H)。
實施例26.3-聯(lián)苯基-4-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-聯(lián)苯基-4-基-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮，用4-苯基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(丙酮-d6)400MHz δ8.08(s，1H)，7.6-7.73(m，7H)，7.48(t，2H，J＝6.8Hz)，7.39(d，1H，J＝7.2Hz)，6.84(d，1H，J＝8Hz)，6.65(t，1H，J＝8.4Hz)，6.23(t，1H，J＝7.2Hz)，5.97(d，1H，J＝8.4Hz)，4.38(m，2H)，2.98(m，2H)，2.28(m，2H)。
實施例27.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲基磺?；?苯基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲基磺?；?苯基)-吡咯-2，5-二酮，用4-甲基磺?；交阴０反娌襟E6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.09(s，1H)，7.9(d，2H，J＝8.4Hz)，7.71(d，2H，J＝8.4Hz)，7.64(s，1H)，6.91(d，1H，J＝7.2Hz)，6.73(t，1H，J＝7.6Hz)，5.95(d，1H，J＝8.4Hz)，4.29(t，2H，J＝5.6Hz)，3.06(s，3H)，3.0(t，2H，J＝6Hz)，2.29(m，2H)。
實施例28.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-三氟甲基-喹啉-4-基-硫烷基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-三氟甲基-喹啉-4-基-硫烷基)-吡咯-2，5-二酮，用2-[[2-(三氟甲基)-4-喹啉基]硫代]乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.3(d，1H，J＝7.6Hz)，8.11(d，1H，J＝8.4Hz)，8.05(s，1H)，7.68-7.82(m，4H)，7.23(s，1H)，6.83(m，2H)，4.21(t，2H，J＝6Hz)，2.92(t，2H，J＝6Hz)，2.21(m，2H).。
實施例29.3-(4-苯甲酰氧基苯基)-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(4-苯甲酰氧基苯基)4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-吡咯-2，5-二酮，用4-芐氧基苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1HNMR(CDCl3)400MHz δ7.95(s，1H)，7.5(d，2H，J＝8.8Hz)，7.33-7.43(m，6H)，6.93(d，2H，J＝8.8Hz)，6.88(d，1H，J＝7.2Hz)，6.73(t，1H，J＝7.2Hz)，6.23(d，1H，J＝8.4Hz)，5.08(s，2H)，4.25(t，2H，J＝5.6Hz)，2.99(t，2H，J＝6Hz)，2.27(m，2H)。
實施例30.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例1的步驟1-6制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基]-吡咯-2，5-二酮，用4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基乙酰胺代替步驟6中的吲哚-3-乙酰胺。1H NMR(CDCl3)400MHz δ7.95(s，1H)，7.48(m，3H)，6.86(m，3H)，6.74(t，1H，J＝8Hz)，6.23(d，1H，J＝8.Hz)，4.26(t，2H，J＝5.2Hz)，4.16(t，2H，J＝5.6Hz)，3.77(t，4H，J＝4.8Hz)，2.99(t，2H，J＝6Hz)，2.87(t，2H，J＝5.2Hz)，2.65(m，4H)，2.28(m，2H)。
實施例31.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-1-萘基-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的制備 將1-萘基硼酸(41毫克，0.24毫摩爾)、3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(88毫克，0.2毫摩爾)(按實施例24的方法制備)、四三苯基膦鈀(5mol％)在甲苯(4毫升)、乙醇(4毫升)、飽和NaHCO3(1毫升)、以及水(2毫升)中的混合物在氮氣中于100℃下加熱5小時。冷卻至室溫后，將該混合物用乙酸乙酯(3×15毫升)萃取并濃縮。殘渣隨后用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)洗脫以生成亮紅色固體狀的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-1-萘基-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮(70毫克，71％)。1H NMR(CD3OD)δ1.80-1.92(m，2H)，2.72-2.80(t，J＝6.0Hz，2H)，3.94-3.99(t，J＝6.0Hz，2H)，6.50-6.58(m，3H)，6.66(s，1H)，6.72(m，1H)，6.98(dd，J＝8.4Hz，J’＝2.0Hz，1H)，7.00-7.50(m，2H)，7.28(dd，J＝6.8Hz，J’＝8.4Hz，1H)，7.38-7.43(m，2H)，7.61(s，1H)，7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，1H)，7.97(s，1H)。
實施例32.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-苯基-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例31的方法制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-苯基-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮，用苯基硼酸代替1-萘基硼酸。1H NMR(CD3OD)δ2.10-2.18(m，2H)，2.90(t，J＝5.6Hz，2H)，4.18(t，J＝5.6Hz，2H)，6.63(t，J＝7.6Hz，1H)，6.75-6.83(m，5H)，7.11-7.20(m，3H)，7.22(dd，J＝8.4Hz，J’＝1.2Hz，1H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.93(s，1H)。
實施例33.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例31的方法制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮，用4-甲氧基苯基硼酸代替1-萘基硼酸。1H NMR(CD3OD)δ2.09-2.18(m，2H)，2.90(t，J＝6.0Hz，2H)，4.15(t，J＝6.0Hz，2H)，6.62-6.68(m，2H)，6.73(s，4H)，6.77-6.82(m，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.53(s，1H)，7.91(s，1H)。
實施例34.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(3-甲基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例31的方法制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(3-甲基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮，用3-甲基苯基硼酸代替1-萘基硼酸。1H NMR(CD3OD)δ2.00-2.10(m，2H)，2.11(s，3H)，2.81-2.88(t，J＝6.0Hz，2H)，4.03-4.11(t，J＝5.6Hz，2H)，6.50(d，J＝7.2Hz，1H)，6.64(t，J＝7.6Hz，1H)，6.74-6.81(m，3H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，6.94(d，J＝7.6Hz，1H)，7.03(t，J＝7.2Hz，1H)，7.22(dd，J＝8.4Hz，J’＝2.0Hz，1H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H)，7.48(s，1H)，7.90(s，1H)。
實施例35.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例24的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮用Mg在甲醇中如實施例2步驟C中所述還原，以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-溴-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CD3OD)δ2.18-2.26(m，2H)，2.96(t，J＝6.0Hz，2H)，4.12(t，J＝6.4Hz，2H)，4.40(d，J＝6.8Hz，1H)，4.52(d，J＝6.8Hz，1H)，6.86-6.96(m，2H)，7.08(s，1H)，7.13-7.30(m，5H)。
實施例36.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-苯基-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將如實施例32所述制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-苯基-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮用Mg在甲醇中如實施例2步驟C所述還原，以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-苯基-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CD3OD)δ2.00-2.16(m，2H)，2.94(t，J＝6.0Hz，2H)，3.92-3.99(m，1H)，4.00-4.08(m，1H)，4.36(d，J＝6.4Hz，1H)，4.68(d，J＝6.4Hz 1H)，6.88-6.97(m，2H)，7.04(s，1H)，7.12-7.15(m，1H)，7.17-7.47(m，9H)。
實施例37.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(1-萘基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將如實施例31所述制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(1-萘基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮用Mg在甲醇中如實施例2步驟C所述還原，以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(1-萘基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CD3OD)δ1.85-1.95(m，1H)，1.95-2.05(m，1H)，2.74-2.88(m，2H)，3.72-3.83(m，1H)，3.88-3.98(m，1H)，4.40(d，J＝6.4Hz，1H)，4.62(d，J＝6.4Hz，1H)，6.80(d，J＝6.8Hz，1H)，6.78(t，J＝8.0Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.07-7.13(m，2H)，7.18-7.23(dd，J＝8.4Hz，J＝1.6Hz，2H)，7.27-7.34(m，2H)，7.41-7.49(m，3H)，7.78-7.83(dd，J＝8.4Hz，J＝3.2Hz，2H)，7.86-7.90(d，J＝7.6Hz，1H)。
實施例38.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例33的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮用Mg在甲醇中如實施例2步驟C所述還原，以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CD3OD)δ2.03-2.22(m，2H)，2.98(t，J＝6.0Hz，2H)，3.80(s，3H)，3.97-4.06(m，1H)，4.06-4.14(m，1H)，4.38(d，J＝6.8Hz，1H)，4.67(d，J＝6.8Hz，1H)，6.86(d，J＝8.4Hz，2H)，6.91-7.00(m，2H)，7.08(s，2H)，7.17-7.27(m，4H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.37(d，J＝8.8Hz，1H)。
實施例39.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(3-甲基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例34的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(3-甲基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯-2，5-二酮用Mg在甲醇中如實施例2步驟C所述還原，以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(5-(3-甲基苯基)-1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CD3OD)δ1.98-2.18(m，2H)，2.34(s，3H)，2.85-3.00(m，2H)，3.90-3.98(m，1H)，3.98-4.09(m，1H)，4.35(d，J＝7.2Hz，1H)，4.64(d，J＝6.8Hz，1H)，6.88-6.99(m，2H)，7.00-7.10(m，3H)，7.13-7.26(m，5H)，7.36(m，2H)。
實施例40.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 向5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)乙醛酸甲酯(0.243克，1毫摩爾)和2-氯-4-氟苯基乙酰胺(1毫摩爾)在無水四氫呋喃(5毫升)中的溶液加入叔丁醇鉀(1M在四氫呋喃中)(2.5毫升，2.5毫摩爾)的溶液。混合物在0℃下攪拌2小時。然后加入濃鹽酸(0.5毫升)并在室溫下攪拌1小時。然后將該混合物用乙酸乙酯(20毫升)稀釋，用水(2×15毫升)和飽和的氯化鈉水溶液(15毫升)洗滌。然后有機層用無水硫酸鈉干燥并在減壓下濃縮以生成油。該殘余物用無水甲醇(15ml)稀釋，所得溶液裝入烘干的鎂屑(0.5克，20.5毫摩爾)并在70℃下在通風瓶中攪拌直到鎂屑完全溶解或攪拌2小時。然后將該瓶冷卻至室溫。該混合物用乙酸乙酯(25毫升)稀釋并用10％鹽酸(2×25m)和飽和的氯化鈉水溶液(20毫升)洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥并在在減壓下濃縮。將殘余物用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷梯度(40分鐘內(nèi)10％乙酸乙酯至50％乙酸乙酯)洗脫以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮(25.6毫克，6.7％)。1H NMR(DMSO-d6)400MHzδ12.5(s，1H)，7.52(t，1H，J＝6.4Hz)，7.49(dd，1H，J＝6.42.4Hz)，7.34(s，1H)，7.21(td，1H，J＝6.02.8Hz)，7.10(d，1H，J＝7.6Hz)，6.87(m，2H)，4.67(d，1H，J＝8.0Hz)，4.51(d，1H，J＝7.2Hz)，2.90(t，2H，J＝5.6Hz)，2.11(t，2H，J＝5.2Hz)。
實施例41.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，6-二氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，6-二氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用2，6-二氯苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量52.2毫克，13.0％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.82(s，1H)，7.34(m，3H)，7.10(d，1H，J＝7.2Hz)，6.87(m，2H)，5.16(d，1H J＝7.6Hz)，5.10(d，1H，J＝7.6Hz)，2.91(t，2H，J＝6.0Hz)2.10(m，2H)。
實施例42.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-溴苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-溴苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用4-溴苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量33.1毫克，8.1％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.55(s，1H)，7.53(dt，2H，J＝8.82.0Hz)，7.34(dt，3H，J＝8.02.0Hz)，7.15(dd，1H，J＝7.61.0Hz)，6.86(m，2H)，4.53(d，1H，J＝8.0Hz)，4.37(d，1H，J＝8.0Hz)，4.10(t，2H，J＝1.6Hz)，2.90(t，2H，J＝2.0Hz)，2.12(t，2H，J＝1.8Hz)。
實施例43.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用4-氯苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量32.7毫克，9.0％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.54(s，1H)，7.40(m，4H)，7.33(s，1H)，7.15(dd，1H，J＝6.80.8Hz)，6.86(m，2H)，4.54(d，1H，J＝8.0Hz)，7.38(d，1H，J＝7.6Hz)，4.10(t，2H，J＝5.6Hz)，2.90(t，2H，J＝6.0Hz)，2.11(m，2H)。
實施例44.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-三氟甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-三氟甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用4-三氟甲氧基苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量67.8毫克，16.4％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.56(s，1H)，7.52(d，2H，J＝8.4Hz)，7.35(s，1H)，7.33(d，2H，J＝8.0Hz)，7.15(d，1H，J＝7.2Hz)，6.86(m，2H)，4.58(d，1H，J＝8.0Hz)，4.45(d，1H，J＝8.0Hz)，4.10(t，2H，J＝6.0Hz)，2.90(t，2H，J＝6.0)，2.10(t，2H，J＝5.6)。
實施例45.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(噻吩-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(噻吩-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，用噻吩-3-基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量50.3毫克，15.0％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.50(s，1H)，7.52(m，1H)，7.49(m，1H)，7.35(s，1H)，7.21(dd，1H，J＝4.01.2Hz)，7.16(d，1H，7.6Hz)，6.89(d，1H，J＝4.4Hz)，6.85(t，1H，J＝6.8Hz)，4.56(d，1H，J＝7.2Hz)，4.41(d，1H，J＝7.2Hz)，4.10(t，2H，J＝6.0Hz)，2.90(t，2H，J＝6.0Hz)，2.10(m，2H) 實施例46.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用2-氟苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量30.6毫克，8.8％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.64(s，1H)，7.36(m，3H)，7.17(m，3H)，6.84(m，2H)，4.44(d，1H，J＝7.2Hz)，4.40(d，1H，J＝7.6Hz)，4.10(s，2H)，2.88(s，2H)，2.09(s，2H)。
實施例47.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-噻吩-2-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-噻吩-2-基)吡咯烷-2，5-二酮，用2-噻吩-2-基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量30.6毫克，8.8％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.58(s，1H)，7.45(dd，1H，J＝5.20.8Hz)，7.40(s，1H)，7.22(d，1H，J＝8.0Hz)，7.12(d，1H，J＝3.2Hz)，6.99(dd，1H，J＝5.2和3.6Hz)，4.63(d，1H，J＝8.0Hz)，4.60(d，1H，J＝7.6Hz)，2.90(t，2H，J＝6.0Hz)，2.12(t，2H，J＝6.0Hz)。
實施例48.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，4-二氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，4-二氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用2，4-二氯苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。產(chǎn)量20.9毫克，5.2％。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.65(s，1H)，7.69(s，1H)，7.51(d，1H，J＝8.0Hz)，7.43(d，1H，J＝8.0Hz)，7.34(s，1H)，7.12(m，1H)，6.87(m，2H)，4.65(d，1H，J＝7.6Hz)，4.55(d，1H，J＝7.6Hz)，4.10(t，2H，J＝6.0Hz)，2.90(t，2H，J＝6.0)，2.12(t，2H，J＝6.0Hz)。
實施例49.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-苯基-吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-苯基-吡咯烷-2，5-二酮，用苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.511(s，1H)，7.24-7.36(m，6H)，7.13(d，1H，J＝7.2)，6.8-6.88(m，2H)，4.49(d，1H，J＝8.0Hz)，4.3(d，1H，J＝7.6Hz)，4.08(m，2H)，2.88(m，2H)，2.088(m，2H)。
實施例50.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮，用2-氯苯基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.655(s，1H)，7.41-7.48(m，2H)，7.27-7.35(m，3H，J＝7.2)，7.87(d，1H，J＝7.6)，6.81-6.88(m，2H)，4.632(d，1H，J＝7.6Hz)，4.494(d，1H，J＝7.2)，4.07-4.10(m，2H)，2.884(m，2H)，2.09(m，2H)。
實施例51.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(N-甲基吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例40的方法制備(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(N-甲基吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，用N-甲基吲哚-3-基乙酰胺代替2-氯-4-氟苯基乙酰胺。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.55(s，1H)，7.44-7.34(m，4H)，7.2-7.18(m，2H)，7.01(t，1H)，6.82-6.89(m，2H)，4.49(dd，2H)，4.093(t，2H)，4.093(t，2H)，3.73(s，3H)，2.89(t，2H)，2.07(m，2H)。
實施例52.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例10的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲氧基苯基)吡咯-2，5-二酮按實施例2方案B的方法還原，生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.62(s，1H)，7.15(d，1H，J＝7.6Hz)，6.8-6.93(m，4H)，6.7(s，1H)，6.55(d，2H，J＝8.4Hz)，4.8(d，1H，J＝8.8Hz)，4.48(d，1H，J＝8.8Hz)，3.96(m，2H)，3.63(s，3H)，2.87(t，2H，J＝6Hz)，2.10(m，2H)。
實施例53.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，5-二甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例17的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，5-二甲氧基苯基)吡咯-2，5-二酮按實施例2方案B的方法還原，生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2，5-二甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(CDCl3)400MHzδ8.0(s，1H)，7.19(d，1H，J＝7.6Hz)，6.89(t，1H，J＝7.2Hz)，6.77(d，2H，J＝7.2Hz)，6.44-6.51(m，3H)，4.84(d，2H，J＝9.6Hz)，3.88-4.00(m，2H)，3.6(s，3H)，3.49(s，3H)，2.8(m，2H)，2.05(m，2H)。
實施例54.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例18的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)吡咯-2，5-二酮按實施例2方案B的方法還原，生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(2-氯-4-氟-苯基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.82(s，1H)，7.02-7.18(m，4H)，6.7-6.85(m，3H)，5.01(d，1H，J＝9.2Hz)，4.79(d，2H，J＝9.6Hz)，3.96(m，2H)，2.79(m，2H)，1.97(m，2H)。
實施例55.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 按實施例15的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-氯-苯基)吡咯-2，5-二酮按實施例2方案B的方法還原，生成(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-氯苯基)吡咯烷-2，5-二酮。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.66(s，1H)，7.13(d，1H，J＝8Hz)，6.95-7.02(m，5H)，6.78(t，1H，J＝7.6Hz)，6.7(d，1H，J＝7.2Hz)，4.84(d，1H，J＝9.2Hz)，4.65(d，2H，J＝8.8Hz)，3.9-4.03(m，2H)，2.79(t，2H，J＝5.6Hz)，1.97(m，2H)。
實施例56.(±)-磷酸單-[反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲基]酯的制備 步驟1
將(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(3.0克，8.13毫摩爾，按實施例2步驟C的方法制備)和甲醛(30毫升，37％水溶液)在四氫呋喃(30毫升)中在室溫下攪拌14-16小時。然后，將該混合物用乙酸乙酯(50毫升)和水(50毫升)吸收。有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。在減壓下除去溶劑，殘渣使用硅膠色譜法提純，用EtOAc/己烷1∶1洗脫生成2.5克(77％)(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，為橙色泡沫狀固體(2.5克，77％)。
步驟2
在無水四氫呋喃(5毫升)中的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(0.06克)用二芐基氨基磷酸酯(0.156毫升，3.5當量)處理，然后加入四唑(3％乙腈溶液，2毫升)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌20分鐘，冷卻至-78℃。在-78℃下加入間氯過苯甲酸(70％，0.162g)的二氯甲烷(2毫升)溶液。在-78℃下5分鐘后，使該反應(yīng)混合物升至室溫并攪拌5分鐘。在減壓下除去溶劑，殘渣由快速色譜法在二氧化硅色譜柱上提純，使用乙酸乙酯、正己烷洗脫以生成固體的磷酸二芐基酯反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲基酯(70毫克)。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.10(s，1H)，7.32-7.39(m，12H)，6.84-7.24(m，2H)，5.49(brs，2H)，5.03(m，4H)，4.61(dd，2H)，4.06(brs，2H)，2.87(brs，2H)，2.07(brs，2H). 步驟3
在甲醇(2毫升)和Pd/C(10％，20毫克)中的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯的磷酸二芐基酯(0.160克)在室溫下1個大氣壓的氫氣下攪拌2小時。該混合物經(jīng)過Celite過濾并將溶劑除去以生成(±)-磷酸單-[反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲基]酯(0.110克)。
實施例57.(±)-反式-2-氨基-丙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并(3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯的制備 步驟1
將N-苯甲氧甲?；彼?1.1當量)加入(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(0.5毫摩爾)的四氫呋喃(8毫升)溶液中，然后加入HBTU(1.5當量)和DIPEA(2.2當量)。該混合物在室溫下攪拌15小時。在減壓下除去溶劑并且殘渣由乙酸乙酯和水(1∶1，15毫升)吸收。將有機層分離并干燥。殘渣使用硅膠色譜法提純以提供N-苯甲氧甲?；Ｗo的產(chǎn)物。
步驟2
將來自步驟1的N-苯甲氧甲?；Ｗo的產(chǎn)物(0.5毫摩爾)在甲醇(8毫升)中的溶液和幾滴4M HCl在乙酸乙酯和10％Pd/C(10％w/w)中在室溫下1個大氣壓的氫氣中攪拌2小時。然后將該混合物經(jīng)過Celite過濾并將溶劑除去以提供最終產(chǎn)品(±)-反式-2-氨基-丙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.10(s，1H)，8.57(s，2H)，6.84-7.41(m，9H)，5.61(m，2H)，4.62(dd，2H)，4.07(brs，2H)，3，72(brm，1H)，2.87(brs，2H)，2.23(s，6H)，2.08(brs，2H)，1.40(d，J＝6.4Hz，3H)。
實施例58.(±)-反式-2-氨基-乙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯的制備 按實施例57的方法制備(±)-反式-2-氨基-乙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯，用N-苯甲氧甲?；拾彼岽鍺-苯甲氧甲?；彼?。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.19(s，1H)，8.46(s，2H)，6.82-7.43(m，9H)，5.61(s，2H)，4.65(dd，2H)，4.08(brt，J＝5.6Hz，2H)，3.88(brs，2H)，2.87(t，J＝5.6Hz，2H)，2.48(s，2H)，2.08(t，J＝4.8Hz，2H)。
實施例59.(±)-反式-2-二甲基氨基-乙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯的制備 將N，N-二甲基甘氨酸(1.1當量)加入(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1-羥甲基-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(0.5毫摩爾)的四氫呋喃(8毫升)溶液中，然后加入HBTU(1.5當量)和DIPEA(N，N-二異丙基乙基胺，2.2當量)。將該混合物在室溫下攪拌15小時。在減壓下除去溶劑并且殘渣由乙酸乙酯和水(1∶1，15毫升)吸收。將有機層分離并干燥以生成殘渣。殘渣由色譜法在硅膠色譜柱上提純，使用乙酸乙酯正己烷洗脫以生成(±)-反式-2-二甲基氨基-乙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.10(s，1H)，6.82-7.41(m，9H)，5.70(m，2H)，4.62(dd，2H)，4.07(brs，2H)，3.23(s，2H)，2.87(brs，2H)，2.23(s，6H)，2.08(brs，2H)。
實施例60.(±)-反式異煙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯的制備 按實施例59的方法制備(±)-反式異煙酸-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-1-基甲酯，用4-羧基吡啶代替N，N-二甲基甘氨酸。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.19(s，1H)，8.83(d，2H)，7.83(d，2H)，6.83-7.42(m，9H)，5.88(s，2H)，4.65(dd，2H)，4.05(brt，2H)，2.86(brs，2H)，2.08(brs，2H)。
實施例61.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1-甲基吲哚3-基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮和(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯烷-2，5-二酮的制備 步驟1 將碳酸鉀(0.5克)和碘甲烷(0.1毫升)加入至3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮(100毫克，見實施例1)的無水二甲基甲酰胺(5毫升)溶液中。該混合物在室溫下攪拌48小時后，倒入乙酸乙酯(100毫升)中，用水(100毫升)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并被蒸發(fā)以生成紅色固體狀的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(93毫克)。
步驟2 將10％Pd-C(50毫克)加入至3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯-2，5-二酮(93毫克)的甲醇(5毫升)和乙酸乙酯(5毫升)溶液中，將該混合物在室溫下1個大氣壓的氫氣下攪拌48小時。加入甲苯(50毫升)后將該混合物再在室溫下1個大氣壓的氫氣下攪拌2小時。然后將該混合物通過Celite墊過濾并蒸發(fā)以生成殘渣。殘渣使用硅膠色譜法提純，用35-40％乙酸乙酯的正己烷溶液洗脫以生成淡黃色固體狀的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1-甲基吲哚-3-基)-1-甲基吡咯烷-2，5-二酮(53毫克)。1HNMR(CDCl3)400MHzδ7.23(s，1H)，7.05-7.07(m，2H)，7.01(d，1H，J＝7.2Hz)，6.92-6.97(m，1H)，6.85(t，1H，J＝7.2Hz)，6.74(d，1H，J＝6.8Hz)，6.64(d，2H，J＝6.4Hz)，4.78(m，2H)，3.75-3.84(m，2H)，3.45(s，3H)，3.27(s，3H)，2.79(t，2H，J＝5.6Hz)，1.98(m，2H)。
實施例62.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 (±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮可以通過1H-吲哚和3，4-二溴-1-苯基-吡咯-2，5-二酮在甲基溴化鎂存在下反應(yīng)生成3-溴-4-(1H-吲哚-3-基)-1-苯基-吡咯-2，5-二酮來制備。該3-溴-4-(1H-吲哚-3-基)-1-苯基-吡咯-2，5-二酮隨后與5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉和LiHMDS(六甲基乙硅烷鋰)在甲苯中的溶液或(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-硼烷二醇和Pd(PPh3)4(四(三苯基膦)鈀)反應(yīng)以生成3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-1-苯基-吡咯-2，5-二酮，如實施例2步驟C所述將其用甲醇中的Mg處理從而還原和去保護，然后在鈀炭上催化氫化以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。Bnz為芐基。

實施例63.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 (±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮可以通過下述方式來制備將1-烯丙基-7-溴-1H-吲哚與(COCl)2(草酰氯)和甲醇鈉在極性非質(zhì)子性溶劑如二氯甲烷中反應(yīng)以生成(1-烯丙基-7-溴-1H-吲哚-3-基)-乙醛酸甲酯，隨后將其與2-(1H-吲哚-3-基)-乙酰胺和t-BuOK(叔丁醇鉀)在THF中反應(yīng)以生成3-(1-烯丙基-7-溴-1H-吲哚-3-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮。用在回流的甲醇中的Mg還原該3-(1-烯丙基-7-溴-1H-吲哚-3-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮，如實施例2步驟C所述，生成3-(1-烯丙基-7-溴-1H-吲哚-3-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯烷-2，5-二酮，將其用9-BBN(9-硼雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷)和Pd(PPh3)4(四(三苯基膦)鈀)處理以生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。

實施例64.(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的順式和反式異構(gòu)體可以由下述方式制備先使(1H-吲哚-3-基)-乙醛酸甲酯和(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-乙酸甲酯在堿如LDA(二異丙基酰胺鋰)存在下，在極性非質(zhì)子溶劑如THF中反應(yīng)以生成2-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丁-2-烯二酸二甲酯?；蛘?，2-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丁-2-烯二酸二甲酯可以通過使(1H-吲哚-3-基)-乙酸甲酯和(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-乙醛酸甲酯在堿(如LDA)存在，在THF中反應(yīng)來制備。將該2-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-3-(1H-吲哚-3-基)-丁-2-烯二酸二甲酯以貴金屬催化劑(如鈀炭)催化氫化以生成2-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-3-(1H-吲哚-3-基)-琥珀酸二甲酯，其與芐胺(PhCH2NH2)反應(yīng)生成順式和反式3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-1-苯基-吡咯烷-2，5-二酮的混合物。該順式和反式異構(gòu)體的混合物可以通過在鈀炭上催化氫化去保護以生成順式和反式3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯烷-2，5-二酮的混合物?？蓪⑺鲰樖胶头词疆悩?gòu)體分離以得到所有的四種順式和反式異構(gòu)體(例如通過如實施例4和5中所述的色譜法)。可以在50℃下用在叔丁醇(如實施例3)或THF和叔丁醇的混合物中的叔丁醇鉀處理該去保護的順式和反式異構(gòu)體的混合物以生成反式異構(gòu)體占多數(shù)的混合物。或者，可以將該2-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-3-(1H-吲哚-3-基)-琥珀酸二甲酯與在甲醇中的氨在升高的溫度下反應(yīng)以生成順式異構(gòu)體占多數(shù)的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯烷-2，5-二酮，可以在50℃下用在叔丁醇(如實施例3)或THF和叔丁醇的混合物中的叔丁醇鉀將其異構(gòu)化以生成反式異構(gòu)體占多數(shù)的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(1H-吲哚-3-基)-吡咯烷-2，5-二酮。

實施例65.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮的制備 在0℃下逐滴向(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-乙醛酸甲酯(0.50克，2.05毫摩爾)和2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺(0.37克，2.26毫摩爾)在無水四氫呋喃(5mL)中的混合物內(nèi)加入叔丁醇鉀(1.0M在四氫呋喃中，6.17毫升，6.17毫摩爾)。該混合物在0℃下攪拌3小時，然后在0℃下加入濃鹽酸(1.5毫升)。所得混合物攪拌1小時，用乙酸乙酯(150毫升)稀釋，用水(2×50mL)洗滌，在無水硫酸鈉上干燥并濃縮以生成0.91克橙色固體。該殘渣經(jīng)柱色譜提純，用20-40％乙酸乙酯的正己烷溶液洗脫以生成3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮。Mp 99-101℃；1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.01(s，1H)，7.81(bs，1H)，7.20-7.25(m，1H)，7.06-7.08(m，2H)，6.85-6.91(m，2H)，7.25(t，1H)，6.13(d，J＝8.0Hz，1H)，4.24(t，2H)，3.66(s，3H)，2.97(t，J＝6.0Hz，2H)，2.22-2.26(m，2H)。
實施例66.3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1H-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例65的方法制備3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1H-吡咯-2，5-二酮，用2-(4-(芐氧基)苯基)乙酰胺代替2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺。Mp 262-265℃；1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ10.96(s.1H)，8.01(d，1H)，7.33-7.45(m，7H)，6.99(d，J＝6.8Hz，2H)，6.83(d，J＝7.2Hz，1H)，6.63(t，1H)，6.09(d，J＝8.4Hz，1H)，5.13(s，2H)，4.27(m，2H)，2.92(m，2H)，2.15(m，2H)。
實施例67.3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮的制備 按實施例65的方法制備3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮，用2-(4-氟苯基)乙酰胺代替2-(3-甲氧基苯基)乙酰胺。Mp 234-235℃；1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.05(s.1H)，8.07(d，1H)，7.42-7.46(m，2H)，7.71-7.22(m，2H)，6.83(d，J＝7.2Hz，1H)，6.65-6.69(m，1H)，6.00(d，J＝8.0Hz，1H)，4.21(s，2H)，2.92(bs，2H)，2.15(bs，2H)。
實施例68.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮(0.73克，2.04毫摩爾)、鎂(0.89克，36.7毫摩爾)在無水甲醇中的混合物加熱回流1.5小時。冷卻至室溫后，將該淺黃色溶液用乙酸乙酯(200毫升)稀釋，用1.0M鹽酸(2×50毫升)、水(100毫升)洗滌，在硫酸鈉上干燥并濃縮以提供淺褐色固體。將該殘渣用硅膠色譜柱提純，用40-50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫以生成淺黃色固體狀的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮。Mp 87-91℃；1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.73(s.1H)，7.25-7.30(m，1H)，7.14(d，J＝7.6Hz，1H)，6.93-7.01(m，3H)，6.77-6.86(m，3H)，4.36(d，J＝6.4Hz，1H)，4.24(d，J＝6.4Hz，1H)，4.18(t J＝5.5Hz，2H)，3.78(s，3H)，2.97(t，J＝5.6Hz，2H)，2.19-2.24(m，2H)。
實施例69.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-羥基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 在-78℃、1個大氣壓的氮氣下，將三溴化硼(1.0M在二氯甲烷中)(5.2毫升)緩慢加入至(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-甲氧基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的二氯甲烷(10毫升)溶液中。所得的混合物在-78℃下攪拌30分鐘并在室溫下攪拌3小時。將該反應(yīng)混合物冷卻至-78℃然后通過加入甲醇(5毫升)驟冷。使該混合物升至室溫并在室溫下保持30分鐘。將該反應(yīng)混合物用二氯甲烷(80毫升)稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液(15毫升)、水(15毫升)和飽和氯化鈉(15毫升)洗滌。將有機層在無水硫酸鈉上干燥并濃縮。殘渣由快速色譜法在硅膠上提純，用乙酸乙酯∶己烷∶二氯甲烷(5∶5∶1，v/v)洗脫以生成褐色固體狀的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(3-羥基苯基)吡咯烷-2，5-二酮(1.15克，63％)。Mp 108-110℃.1HNMR(CDCl3)400MHz δ8.69(s，1H)，7.18(t，1H，J＝8.0Hz)，7.12(d，1H，J＝8.0Hz)，6.99(d，1H，J＝6.8Hz)，6.97(d，1H，J＝2.0Hz)，6.93(d，1H，J＝6.4Hz)，6.76(m，1H)，6.69(d，1H，J＝1.6Hz)，5.67(brs，1H)，4.32(d，1H，J＝6.0Hz)，4.20(d，1H，J＝6.0Hz)，4.07(t，2H，J＝5.6Hz)，2.96(t，2H，J＝6.0Hz)，2.19(m，2H)，LC/MS347.3[M+H]。
實施例70.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例67的方法制備的3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)-1H-吡咯-2，5-二酮用實施例68中的方法還原生成(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)吡咯烷-2，5-二酮1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-氟苯基)-1H-吡咯烷-2，5-二酮。Mp 208-210℃；1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.52(s.1H)，7.40-7.43(m，2H)，7.32(m，1H)，7.13-7.17(m，3H)，6.82-6.89(m，2H)，4.53(m，1H)，4.36(m，1H)，4.09(t，J＝5.2Hz，2H)，2.89(t，J＝6.0Hz，2H)，2.09-2.11(m，2H)。
實施例71.(±)-反式-3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將按實施例66的方法制備的3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-1H-吡咯-2，5-二酮用實施例68中的方法還原生成(±)-反式-3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)吡咯烷-2，5-二酮。Mp 91-93℃；1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.47(s.1H)，7.25-7.43(m，8H)，7.15(d，J＝7.6Hz，2H)，6.82-6.96(m，4H)，5.07(s，2H)，4.45(d，J＝7.6Hz，1H)，4.24(d，J＝7.6Hz，1H)，4.07-4.10(m，2H)，2.87-2.90(m，2H)，2.09-2.10(m，2H)。
實施例72.(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-羥基苯基)吡咯烷-2，5-二酮的制備 將(±)-反式-3-[4-(芐氧基)苯基]-4-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)吡咯烷-2，5-二酮(0.2克)和Pd/C(10％w/w，0.076克)的混合物在1個大氣壓的氫氣下攪拌整夜。將該催化劑通過Celite墊濾出并濃縮。殘渣由硅膠色譜柱提純，用30-40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫以提供0.07克淺黃色固體狀的(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4-(4-羥基苯基)吡咯烷-2，5-二酮。Mp 105-107℃；1H NMR(丙酮-d6)400MHz δ10.27(s.1H)，8.34(s，1H)，7.17-7.21(m，4H)，6.80-6.91(m，4H)，4.39(d，J＝7.0Hz，1H)，4.22(d，J＝7.0Hz，1H)，4.13(d，J＝5.6Hz，2H)，2.92(d，J＝5.2Hz，2H)，2.15-2.19(m，2H)。
實施例73.7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯的制備 步驟1
將氨基乙醇(1.2毫升，19.8毫摩爾)加入至7-甲酰基吲哚(2.4克，16.6毫摩爾)的1，2-二氯乙烷(60毫升)溶液中后，加入冰醋酸(2.0毫升)和三乙酸基硼氫化鈉(3.5克，16.6毫摩爾)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時。加入水(10毫升)和1.0M氫氧化鈉(10毫升)以驟冷反應(yīng)混合物。然后，分離有機層并且將水層用1，2-二氯乙烷(40毫升)萃取。合并的有機萃取物經(jīng)飽和碳酸氫鈉(2×30毫升)、水(2×50毫升)洗滌，在無水硫酸鈉上干燥并蒸干。得到油狀的2-[(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基]-乙醇(4.4克)。LCMS(M+H)＝189。
步驟2
向2-[(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基]-乙醇(4.4克)在1，2-二氯乙烷(40毫升)中的溶液加入三乙胺(4.85毫升，34.6毫摩爾)，然后加入氯甲酸芐酯(3.57毫升，25.34毫摩爾)。將該混合物在室溫下攪拌2小時。加入水(20毫升)和1.0M氫氧化鈉(10毫升)以驟冷混合物。分離有機層并將水層用1，2-二氯乙烷(20毫升)萃取。合并的有機萃取物用1.0M鹽酸(20毫升)、水(20毫升)洗滌，在無水硫酸鈉上干燥并蒸干。殘渣由硅膠色譜法提純，用20％乙酸乙酯的己烷溶液至40％乙酸乙酯的己烷溶液洗滌以得到無色油狀的(2-羥基-乙基)-(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基甲酸芐基酯(2.79克，兩步結(jié)合產(chǎn)率為52％)。1H NMR(CDCl3)400MHz δ9.97(br s，1H)，7.75-6.9(m，8H)，6.54(br s，1H)，5.21(s，2H)，4.9-4.6(m，3H)，3.85-3.57(m，2H)，3.55-3.23(m，3H)；LCMS M+H＝325. 步驟3
將三乙胺(1.56毫升，11.2毫摩爾)加入至(2-羥基-乙基)-(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基甲酸芐酯(2.79克，8.61毫摩爾)的二氯乙烷(50毫升)溶液中。將該混合物冷卻至0℃，并逐滴加入甲磺酰氯(0.74毫升，9.47毫摩爾)。使該混合物升至室溫并攪拌2小時。然后，加入水(30毫升)和1.0M氫氧化鈉(10毫升)驟冷混合物。分離有機層并將水層用二氯乙烷(20毫升)萃取。合并的有機萃取物用1.0M鹽酸(20毫升)、水(30毫升)洗滌，在無水硫酸鈉上干燥并蒸干。得到油狀的甲磺酸2-[芐氧羰基-(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基]-乙酯(3.46克)。
步驟4
向冷卻至0℃的甲磺酸2-[芐氧羰基-(1H-吲哚-7-基甲基)-氨基]-乙酯(3.46克，8.61毫摩爾)在二甲基甲酰胺(20毫升)中的溶液內(nèi)加入在礦物油中的氫化鈉(60％)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時，然后加入水(40毫升)以驟冷反應(yīng)混合物。水層用乙酸酯(4×20毫升)萃取。合并的有機萃取物用水(3×30毫升)洗滌，在無水硫酸鈉上干燥并蒸干。殘渣由硅膠色譜法提純，用二氯甲烷洗脫得到無色油狀的3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(1.95克，兩步結(jié)合產(chǎn)率為74％)。1HNMR(CDCL3)400MHz δ7.6-7.45(m，1H)，7.4-7.2(m，5H)，7.17-6.9(m，3H)，6.6-6.48(m，1H)，5.2-5.05(m，2H)，5.0-4.82(m，2H)，4.4-4.2(m，2H)，4.1-3.95(m，2H)；LCMS(M+H)＝307。
步驟5
向3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(557毫克，1.8毫摩爾)在0℃下的無水四氫呋喃(10毫升)中的溶液內(nèi)加入草酰氯(238微升，2.7毫摩爾)，然后加入另一部分草酰氯(340微升，3.85毫摩爾)。該混合物在0℃下攪拌直到所有起始原料被消耗完，然后被冷卻至-78℃。然后緩慢加入甲醇鈉的甲醇溶液(0.5M)(10毫升)并使該混合物升至室溫。室溫下1小時后用乙酸乙酯(200毫升)稀釋該混合物并用水(300毫升)洗滌。將有機層在無水硫酯鈉上干燥并蒸干。殘渣用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脫以生成淡黃色固體7-甲氧基草?；?3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(481毫克，67％)。1H NMR(CDCl3)400MHz δ8.26-8.36(m，2H)，7.22-7.37(m，6H)，7.10(dd，1H，J＝32.8和7.2Hz)，5.11(d，2H，J＝8.0Hz)，4.94(d，2H，J＝22.4Hz)，4.41-4.48(m，2H)，4.01-4.05(m，2H)，3.93(m，3H)。
步驟6
向7-甲氧基草酰基-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(481毫克，1.22毫摩爾)和吲哚-3-乙酰胺(234毫克，1.34毫摩爾)在0℃下的無水四氫呋喃(14毫升)中的溶液加入叔丁醇鉀(412毫克，3.67毫摩爾)。該混合物在0℃下攪拌2小時。然后，加入濃鹽酸(5毫升)并將該混合物在室溫下攪拌2小時。然后用乙酸乙酯(300毫升)稀釋該混合物，用水(500毫升)洗滌，并將有機層用無水硫酸鈉干燥。殘渣用硅膠色譜法提純，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)洗脫以生成亮橙色/紅色固體狀的7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(1.2克，80％)。1H NMR(DMSO-d6)400MHz δ11.66(d，1H，J＝2.4Hz)，10.94(s，1H)，7.69-7.75(m，2H)，7.19-7.38(m，6H)，6.98(t，1H，J＝7.2Hz)，6.73-6.89(m，3H)，6.60-6.66(m，2H)，4.90-5.08(m，2H)，4.50(m，2H)，3.95(m，2H)。
實施例74.(±)-反式-7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯的制備
將鎂屑(195毫克，8.0毫摩爾)加入7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(230毫克，0.44毫摩爾)在無水甲醇(20毫升)中的溶液，并在1個大氣壓的氮氣下加熱回流1.5小時。冷卻至室溫后，將該混合物倒入乙酸乙酯(200毫升)并用1M鹽酸(100毫升)洗滌。將有機層在無水硫酸鈉上干燥并蒸干。然后，用50-60％乙酸乙酯的己烷溶液以硅膠色譜法提純殘渣以生成米白色固體狀的(±)-反式-7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(205毫克)。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.56(s，1H)，11.03(d，1H，J＝2Hz)，7.21-7.43(m，10H)，7.09(t，1H，J＝7.2Hz)，6.92-7.00(m，2H)，6.82-6.89(m，3H)，5.04(s，2H)，4.87(d，2H，J＝7.6Hz)，4.54(dd，2H，J＝7.6和28.8Hz)，4.30(m，2H)，3.92(m，2H)。
實施例75.(±)-反式-3-(1H-吲哚-3-基)-4-(1，2，3，4-四氫-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-7-基-吡咯烷-2，5-二酮的制備
將(±)-反式-7-[4-(1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧代-吡咯烷-3-基]-3，4-二氫-1H-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-2-羧酸芐酯(161毫克，0.31毫摩爾)和10％鈀炭(100毫克)在無水甲醇(15毫升)中的溶液在1個大氣壓的氫氣下攪拌16小時。該催化劑隨后經(jīng)Celite床過濾并將濾液蒸干以生成米白色固體狀的(±)-反式-3-(1H-吲哚-3-基)-4-(1，2，3，4-四氫-[1，4]二氮雜并[6，7，1-hi]吲哚-7-基-吡咯烷-2，5-二酮(95毫克)。1HNMR(DMSO-d6)400MHz δ11.04(d，1H，J＝1.6Hz)，7.35-7.42(m，4H)，7.24(dd，1H，J＝2.8和5.6Hz)，7.09(t，1H，J＝7.2Hz)，6.89-6.98(m，3H)，4.52(dd，2H，J＝7.2和24.8Hz)，4.11(s，2H)，4.07-4.10(m，2H)，3.14-3.17(m，2H)。
實施例76. 使用四唑化合物MTS，通過測定在代謝活性細胞中的脫氫酶的活性來確定細胞生存力。該測定按Promega Technical Bulletin No.169(CellTiter 96水性非放射性細胞增殖測定)中所述的方式進行。測定了13種人類癌細胞系(例如見表1)。細胞被保持在37℃，5％CO2的環(huán)境下。粘附細胞被保持在補充有15％熱滅活的FBS、10mML-谷氨酰胺、以及10mM Hepes的PH值為7.5的極限必需培養(yǎng)基(DMEM)培養(yǎng)基(4.5克/升葡萄糖)中。懸浮細胞被保持在補充有10％熱滅活的FBS和10mM Hepes的PH值為7.5的RPMI 1640培養(yǎng)基中。簡要的說，細胞被種在96孔的培養(yǎng)板中，如表1中所示，并溫育16-24小時。將候選化合物在DMSO中系列地稀釋，在細胞培養(yǎng)基中再稀釋，然后加入細胞(最后DMSO的濃度為0.33％)。將細胞在候選化合物存在下溫育72小時。將MTS儲備液(MTS 2gm/升，PMS 46.6毫克/毫升在PBS中)加入細胞(最后MTS濃度2gm/升而PMS 7.67毫克/升)并溫育4小時。將SDS以1.4％的最終濃度加入并且使用讀板器在490nM測定在2小時內(nèi)的吸光度。IC50被定義為與對照孔內(nèi)只用DMSO(0.33％)處理的細胞相比導致存活細胞數(shù)減少50％的化合物的濃度，并且用非線性回歸分析計算IC50。在表2中各種化合物的IC50值。
表1 表2 實施例77. 指數(shù)增長的MDA-MB-231細胞或Paca-2細胞被以每孔1000細胞種于6孔培養(yǎng)板中，并被允許附著24小時。將MDA-MB-231和Paca-2細胞在補充有10％(v/v)胎牛血清(FCS)和5毫升的青霉素/鏈霉素的DMED中在37℃在5％CO2條件下培養(yǎng)。MDA-MB-231和Paca-2被分別建立雌激素受體陰性人類乳腺癌細胞系和胰腺癌細胞系。將(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮以10mM的濃度溶解于DMSO中，并分別以0.1、0.25、0.5、1或2μM的濃度加入細胞中。對照培養(yǎng)板只接受DMSO，其占總培養(yǎng)體積的百分比與和最高濃度的藥物一起給藥的相同。每天觀察細胞結(jié)構(gòu)持續(xù)10-15天，然后用改良的賴-吉染色(Wright-Giemsa stain，Sigma)固定并染色。用(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮處理導致MDA-MB-231細胞或Paca-2細胞的細胞死亡，例如見圖2。發(fā)現(xiàn)(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的IC50為0.5μM。發(fā)現(xiàn)(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的IC50為0.5μM。
實施例78. MDA-MB-231細胞(ATCC#HTB-26)，在DMEM+15％熱滅活的胎牛血清及10mM pH值為7.5的HEPES中，被鋪于60毫米的板(每板2×105個細胞)。兩天后不同濃度的在DMSO中的候選混合物在培養(yǎng)基中稀釋并加入各個培養(yǎng)板使最后的DMSO在細胞培養(yǎng)基中的濃度為0.1％。在溫育2天后，將該培養(yǎng)物胰蛋白酶化，細胞用培養(yǎng)基洗滌，使用血細胞計數(shù)器計數(shù)，并將500個細胞，包括體細胞，被鋪在100mM的在培養(yǎng)基中的板中。兩周后，該培養(yǎng)基被除去并且細胞集落用甲醇固定10分鐘，用1％結(jié)晶紫染色10分鐘，用水洗滌并風干。當細胞集落的細胞數(shù)大于每個集落50個細胞時，細胞集落被視覺計數(shù)。平板率(plating efficiency)被定義為形成的集落的平均數(shù)除以500。存活分數(shù)被定義為候選化合物的平板率除以DMSO的平板率乘以100。對于候選化合物滴定，IC50濃度的確定是通過擬合方程y＝AeBx至數(shù)據(jù)點以及外推存活分數(shù)等于50的濃度。用(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮處理導致MDA-MB-231細胞的細胞死亡，例如見圖3。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的IC50為0.62μM。(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的IC50為4.1μM。
實施例79. 重組蛋白激酶C(Calbiochem)(100納克)與0.05、0.5、或10μM的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在室溫下溫育15分鐘。隨后，將混于含20μM ATP、0.2μCi/μl 32P-ATP、0.2μg/μl組蛋白H1(Upstate)的激酶緩沖(20mM Tris-HCl pH為7.5，10mM MgCl2)的放射性標記被加入每個樣本中。激酶反應(yīng)在室溫下進行5分鐘。用12％SDS-PAGE和放射自顯影術(shù)分析反應(yīng)產(chǎn)物。
用測試濃度的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在室溫下處理重組蛋白激酶C 15分鐘，與僅用載體處理相比，未減弱激酶活性。例如見圖4。
實施例80. 在指示濃度的單獨的對映體(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮和(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮存在或不存在的條件下，將MDA-MB-231細胞整晚(16小時)除血漿(serum-deprived)。用100納克/毫升重組人體肝細胞生長因子/分散因子(HGF/SF)(R&D Systems#294-HG)處理細胞10分鐘。全細胞提取物在溶胞緩沖液(20mM Trwas-HCl pH為7.5，150mM NaCl，1mM Na2EDTA，1mM EGTA，1％Triton X-100，2.5mM焦磷酸鈉，1mM β-甘油磷酸酯，1mM Na3VO4，1μg/ml亮肽素，1mM苯甲磺酰氟)中制備并超聲處理。蛋白質(zhì)濃度按照制造商的說明使用BioRad試劑(BioRad，Hercules，CA)通過Bradford測定來測量。樣品(50微克的蛋白質(zhì))在還原條件下由8％SDS-PAGE拆分，并被傳送到PVDF膜(BioRad)上。將該膜在含有5％牛奶的TBS-T(50mM Trwas-HCl pH為7.6，200mM NaCl，0.05％Tween 20)中溫育1小時。蛋白質(zhì)通過在4℃下在有5％牛奶的TBS-T以及或者抗磷酸化的c-Met(#3121)、抗磷酸化的Erk1/2(#9101)、抗總Erk1/2蛋白(#9102)的多克隆抗體(細胞信號傳導技術(shù))或者抗β-肌纖蛋白(A-5441)(Sigma)的單克隆抗體中溫育整夜來探測蛋白質(zhì)，用作蛋白總載量的對照。在TBS-T中充分洗滌后，加入horseradish過氧化物酶結(jié)合的抗-兔IgG(1∶5000)或抗-鼠IgG(1∶2000)(Amersham Biosciences)1小時，然后按照制造商的說明，使用增強化學發(fā)光檢測系統(tǒng)(Amersham Biosciences)，使特定的蛋白譜線顯現(xiàn)。例如見圖5。
用(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮來處理在至少為500nM的濃度下抑制c-Met基本的或HGF誘發(fā)的自磷酸化作用。(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在更高濃度(10至20μM)下對c-Met的磷酸化作用有部分抑制效果。另外，(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮減弱了ERK1/2的磷酸化作用；一種熟知的c-Met酪氨酸激酶受體信號傳導的下游目標。例如見圖5。
實施例81. 無胸腺的雌性裸小鼠(CRL:NU/NU-nuBR)在側(cè)面被皮下注射MDA-MB-231人類乳腺癌細胞(8×106個細胞/小鼠)。在注射前，在37℃在5％CO2下將MDA-MB-231細胞在補充有10％(v/v)熱滅活的10％(v/v)胎牛血清(FBS)、1％Hepes緩沖液(Invitrogen#15630-080)和1％青霉素/鏈霉素(Invitrogen#15140-122)的DMEM(Invitrogen#11965-092)中培養(yǎng)。腫瘤被允許生長至50毫米3大小。動物被隨機分成3組，每組5只動物。注射后第10天，向帶有已建立的腫瘤的小鼠腹膜內(nèi)給藥用碘化的罌粟子油(碘化油)10毫克/毫升作為載體(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(160mg/kg)，(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(160毫克/千克)或載體對照。藥物或載體每3天給藥，共給藥10個劑量(q3dx10)。周期性評估腫瘤大小在研究中。對每個對象，腫瘤體積用公式(L×W2)/2計算，其中L和W分別為腫瘤的長度和寬度。對每個治療組計算腫瘤的算術(shù)平均大小+/-平均值的標準差(SEM)。每組的平均值根據(jù)初始腫瘤體積平均值被標準化以確定腫瘤體積增長倍數(shù)。例如見圖6。
與用載體治療的對照組相比，用(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在160毫克/千克劑量分別減小了標準化的人類乳腺癌異種移植的腫瘤體積80.5％(p＝0.0037)和43.5％(p＝0.133)，例如見圖6。
實施例82. 無胸腺的雌性裸小鼠(CRL:NU/NU-nuBR)在側(cè)面被皮下注射MDA-MB-231人類乳腺癌細胞(8×106個細胞/小鼠)。在注射前，在37℃在5％CO2下將MDA-MB-231細胞在補充有10％(v/v)熱滅活的10％(v/v)胎牛血清(FBS)、1％Hepes緩沖液(Invitrogen#15630-080)和1％青霉素/鏈霉素(Invitrogen#15140-122)的DMEM(Invitrogen#11965-092)中培養(yǎng)。腫瘤被允許生長至50毫米3大小。動物被隨機分成3組，每組8只動物。注射后第4天，腹膜內(nèi)給藥以DMA/PEG400(1∶4v/v)50毫克/毫升作為載體的(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(80mg/kg)，(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(80毫升/千克)或載體對照，以處理帶有已建立的腫瘤的小鼠。藥物或載體每天給藥一次，連續(xù)給藥5天后連續(xù)2天不治療(一個給藥周期)。共給藥4個治療周期。期性評估腫瘤大小在研究中。對每個對象，腫瘤體積用公式(L×W2)/2計算，其中L和W分別為腫瘤的長度和寬度。對每個治療組計算腫瘤的算術(shù)平均大小/-平均值的標準差(SEM)。圖6中的各數(shù)據(jù)點代表八個腫瘤的算術(shù)平均值/-平均值的標準差(SEM)。
與用載體治療的對照組相比，(±)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或(±)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在80毫克/千克劑量下分別減小了人類乳腺癌異種移植的平均腫瘤體積73.4％(p＝0.04)和69.4％(p＝0.075)，例如見圖7。
實施例83.(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮誘發(fā)大范圍的腫瘤細胞死亡，這與其抑制c-Met磷酸化的能力相關(guān) CFA＝集落形成測定 na＝不適用 為確定c-Met抑制，將指數(shù)增長的MCF-7和MDA-MB-231人類乳腺癌細胞，DLD1和HT29人類結(jié)腸癌細胞，PACA2和PANC-1人類胰腺癌細胞以及人類非小細胞肺癌細胞在0.5％FBS中除血清，并用增加量的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮處理24小時，如所示。使受激的或未受激的細胞然后與100納克/毫升HGF一起10分鐘，然后制備全細胞提取物。全細胞溶解產(chǎn)物(50g)被SDS-PAGE拆分，被傳輸至PVDF膜上并用增強化學發(fā)光測定系統(tǒng)(ECL)確定c-Met的磷酸化狀態(tài)。自Biosource International得到抗磷酸(基)(Y1349)c-甲基(磷酸(基)-c-甲基)的多克隆抗體，自Invitrogen得到抗β-肌纖蛋白的單克隆抗體。抑制百分比使用Scion Image以光密度法確定。
對于集落形成測定(CFA)，將指數(shù)生長的細胞種于6孔培養(yǎng)板上每孔2000細胞，并被允許附著24小時。然后，將濃度增加的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮(自0.01至30M)加入培養(yǎng)基額外24小時。暴露24小時后，將該藥物除去并且加入新鮮培養(yǎng)基持續(xù)接下來的14-21天，以使集落形成。細胞用GEMSA(Gibco BRL)固定并染色。大于50個細胞的集落被計為存活并且以細胞存活百分比作圖以確定IC50。
發(fā)現(xiàn)(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在大范圍的人類腫瘤細胞系中有效地抑制了生長并誘發(fā)凋亡。在暴露于(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮24小時后，如通過集落形成測定(CFA)所確定，(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對表達c-Met的實體瘤類型的IC50為在0.1-0.7范圍內(nèi)。更值得注意的是，(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對更多的缺乏c-Met的細胞，如NCI-H661(人類非小細胞肺癌細胞)和NCI-H446(人類小肺癌細胞)的IC50約高10倍，強烈表明c-Met的存在和細胞對(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的細胞毒性敏感度之間具有相關(guān)性。應(yīng)注意到的是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對c-Met的抑制和細胞毒性的IC50在處理24小時后與在表達c-Met的癌細胞中極為相似。
實施例84.(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在癌細胞中誘發(fā)凋亡 A)用DMSO作為對照，或者B)用1.2μM(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮處理在96孔培養(yǎng)板(Costar 3603，5,000/孔)中的A549人類肺癌細胞38小時后，加入1∶200熒光Annexin V(綠色)和1∶500碘化丙錠(紫紅色，最終濃度1微克/毫升)。標記過程被允許在37℃下進行20分鐘，然后用IC100 Image Cytometer(Beckman Coulter，Inc)在10倍放大率下進行圖像采集和分析。
為確定(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮是否主要通過細胞生長抑制或細胞凋亡機制工作，將暴露于(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的癌細胞用熒光標識的Annexin V(綠色熒光)和碘化丙錠(亮紫紅色熒光)染色。Annexin V是經(jīng)過驗證的與外翻膜(externalized membrane)磷脂酰絲氨酸(凋亡開始的早期標記物)以高親和力特異性地結(jié)合，而碘化丙錠為死亡細胞的標記物。將人類肺癌細胞于1.2μM的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮一起溫育38小時，以強烈的Annexin V染色證明誘發(fā)了細胞凋亡。一小部分細胞(～10-20％)被Annexin V和碘化丙錠同時染色，表明由(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮所處理的細胞亞群在38小時內(nèi)已經(jīng)死亡。這些數(shù)據(jù)與(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮主要通過激活凋亡機制誘導細胞死亡相一致。(見圖8) 實施例85.(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮抑制轉(zhuǎn)移癌細胞侵襲 將MDA-MB-231細胞用標示濃度的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮預(yù)處理24小時。每份300微升的各細胞懸溶液(濃度為0.5×106細胞/毫升，在不含血清的培養(yǎng)基中)被置于單獨的插入物(insert)中并在37℃下溫育24小時。底部裝插入物的孔含500微升的10％FBS培養(yǎng)基。24小時后，插入物中的培養(yǎng)基被吸出而用棉簽將未能侵入的細胞輕輕從插入物中除去。然后，每個插入物被傳送到干凈的含有細胞染色溶液的孔中并在室溫下溫育10分鐘。插入物的底部通過在萃取溶液中溫育脫色，并且在560nM處測量OD。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮抑制MDA-MB-231癌細胞在會合培養(yǎng)物中跨間隙的遷移。數(shù)據(jù)代表了兩次獨立試驗的平均值。(見圖9) 由大部分癌癥引起的死亡和發(fā)病為局部侵襲和原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移至其它組織的結(jié)果。這一過程主要依賴于腫瘤細胞的活動和生長。由HGF激活的c-Met誘發(fā)多種細胞反應(yīng)，包括活動性、侵襲、創(chuàng)傷愈合以及組織再生。已經(jīng)確認的是c-Met的異常激活是原發(fā)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展以及繼發(fā)轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵原因。HGF可以使上皮片脫離，以激活細胞活動和侵襲通過細胞外基質(zhì)，且HGF產(chǎn)物與腫瘤在體內(nèi)轉(zhuǎn)移相關(guān)。
如上面所示，(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮抑制侵襲性MDA-MB-231乳腺癌細胞表型，估計IC50值約為500nM。
相似的結(jié)果可以在腦和肺癌細胞中看到(數(shù)據(jù)未表示)。
實施例86.乳腺癌異種移植模型 (-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮對人類乳腺癌異種移植有效果。將MDA-MB-231人類乳腺癌細胞皮下接種入雌性裸小鼠(8.0×106細胞/小鼠)并且被允許形成明顯的腫瘤。當腫瘤達到約60毫米3時，向該動物每天口服給藥200毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮治療或載體對照(連續(xù)給藥5天而后連續(xù)2天不給藥)。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮被配制在PEG 400∶20％維生素E TPGS(60∶40)中。動物總共接受了20個劑量的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或載體對照。腫瘤在整個治療期和治療后觀察期中被測量。每一點代表10個腫瘤的平均值±SEM。(見圖10) 用(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮作為單一療法治療對減緩腫瘤生長有效果。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的腫瘤生長抑制經(jīng)計算為79％并且為統(tǒng)計上顯著的(p＝0.009)。載體或200毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的口服給藥不產(chǎn)生明顯的體重變化。
實施例87.結(jié)腸癌異種移植模型 在人類結(jié)腸癌異種移植模型HT29中，人類結(jié)腸癌細胞被皮下接種入無胸腺的雌性裸小鼠(5×106細胞/小鼠)中并被允許形成明顯的腫瘤。當腫瘤達到約60毫米3大時，向該動物每天口服給藥200毫克/千克或300毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮治療或載體對照(連續(xù)給藥5天而后連續(xù)2天不給藥)。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮配制在PEG 400∶20％維生素E TPGS(60∶40)。動物總共接受了20個劑量的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或載體對照。腫瘤在整個治療期和治療后觀察期中被測量。每一點代表10個腫瘤的平均值±SEM。(見圖11) 在高侵襲性的結(jié)腸癌異種移植模型中，用200毫克/千克或300毫克/千克劑量作為單一療法給藥的動物表現(xiàn)出明顯的腫瘤生長抑制，300毫克/千克劑量比200毫克/千克劑量的效果更明顯。以200毫克/千克劑量給藥的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮表現(xiàn)的最優(yōu)腫瘤生長抑制為39％(p＝0.006)，而300毫克/千克劑量表現(xiàn)的最優(yōu)腫瘤生長抑制為55％(p＝0.00001)?？诜o藥載體或200毫克/千克或300毫克/千克(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮不產(chǎn)生明顯的體重變化。
實施例88.胰腺癌異種移植模型 (-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮在人類胰腺癌異種移植模型中有效果。PACA-2在人類胰腺癌細胞被皮下接種入無胸腺的雌性裸小鼠(5×106細胞/小鼠)并被允許形成明顯的腫瘤。當腫瘤達到約60毫米3大時，該動物每天口服200毫克/千克或300毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮治療或載體對照(連續(xù)給藥5天而后連續(xù)2天不給藥)。(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮配制在PEG 400∶20％維生素E TPGS(60∶40)中。動物總共接受了20個劑量的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮或載體對照。腫瘤在整個治療期和治療后觀察期中被測量。每一點代表10個腫瘤的平均值±SEM。(見圖12) 用200毫克/千克的300毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮作為單一療法治療表現(xiàn)出明顯的腫瘤生長抑制，200毫克/千克劑量與300毫克/千克劑量效果相當。200毫克/千克劑量的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮表現(xiàn)的最優(yōu)腫瘤生長抑制為58％(p＝0.036)而300毫克/千克劑量表現(xiàn)的最優(yōu)腫瘤生長抑制為60％(p＝0.018)。載體對照或200毫克/千克和300毫克/千克的(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮的口服給藥不產(chǎn)生明顯的體重變化。
其它實施方式在后面的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。盡管多個實施方式被詳細描述，在不偏離本發(fā)明的主旨及范圍的情況下，可以作出多種修改。
權(quán)利要求
1.式IVa、IVb、Va或Vb的吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物，或其藥物學可接受的鹽
其中
R1、R2和R3各自獨立地選自由氫、F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、和-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基組成的組中；
R4獨立地選自氫、-(C1-C6)烷基、和-CH2R7；
R5、R6獨立地選自氫、以及-(C1-C6)烷基；
R7獨立地選自-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(CH2)-苯基)、-O-P(＝O)(-O-(CH2)-苯基)2、羧酸基、氨基羧酸基和肽；
Q選自芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基；
X選自-(CH2)-、-(NR8)-、S、和O；
R8獨立地選自氫、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、和-O-(C1-C6)烷基、-C(＝O)-O-(C1-C6)烷基和-C(＝O)-O-(C1-C6)取代的烷基；
Y選自-(CH2)-或鍵；
其中所述的芳基、雜芳基、-O-芳基、-S-芳基、-O-雜芳基、和-S-雜芳基可被一個或多個選自以下組中的取代基取代F、Cl、Br、I、-NR5R6、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基、-O-(C3-C9)取代的環(huán)烷基、-芳基、-芳基-(C1-C6)烷基、-芳基-O-(C1-C6)烷基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)、以及-(S(＝O)2)-(C1-C6)烷基；以及
m為1或2。
2.權(quán)利要求1所述的化合物，其中Q是吲哚基或由一個或多個獨立地選自F、Cl、Br、I、-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)氟取代的烷基、-(C3-C9)環(huán)烷基、-(C3-C9)氟取代的環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)氟取代的烷基、-O-(C3-C9)環(huán)烷基和-O-(C3-C9)氟取代的環(huán)烷基、-芳基、-O-芳基、-O-(C1-C4)烷基-芳基、-O-(C1-C4)烷基-雜環(huán)和-S(＝O)2-(C1-C6)烷基中的取代基取代的吲哚基。
3.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R4是-CH2R7，并且R7是-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)、-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2、羧酸基、氨基羧酸基或肽。
4.權(quán)利要求3所述的化合物，其中R7是-O-P(＝O)(OH)2、-O-P(＝O)(-OH)(-O-(C1-C6)烷基)或-O-P(＝O)(-O-(C1-C6)烷基)2。
5.權(quán)利要求3所述的化合物，其中R7是羧酸基、氨基羧酸基或肽。
6.權(quán)利要求5所述的化合物，其中R7是丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸或纈氨酸。
7.權(quán)利要求6所述的化合物，其中R7是L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸或L-纈氨酸。
8.權(quán)利要求5所述的化合物，其中R7是肽。
9.權(quán)利要求8所述的化合物，其中所述肽包含二個或更多個選自以下組中的亞氨基酸或氨基酸L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸和L-纈氨酸。
10.權(quán)利要求1所述的化合物，其中X選自-(NR8)-、S和O。
11.權(quán)利要求1所述的化合物，其中m是2。
12.權(quán)利要求1所述的化合物，其選自(+)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(-)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮，和(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
13.權(quán)利要求1所述的化合物，其是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
14.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1所述的式IVa、IVb、Va或Vb的化合物或其藥物學可接受的鹽以及一種或多種藥物學可接受的載體或賦形劑。
15.權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中所述化合物是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
16.權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其還含有第二化學治療劑。
17.權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其中所述的第二化學治療劑選自他莫昔芬、雷洛昔芬、阿那曲唑、依西美坦、來曲唑、曲妥珠單抗、imatanib、紫杉醇、環(huán)磷酰胺、洛伐他汀、minosine、吉西他濱、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、多西他奇、戈舍瑞林、長春新堿、長春堿、諾考達唑、替尼泊苷、依托泊苷、吉西他濱、epothilone、諾維本、喜樹堿、柔紅霉素、放線菌素D、米托蒽醌、安吖啶、多柔比星、表柔比星或伊達比星。
18.一種治療細胞增生性疾病的方法，所述方法包括將治療有效量的如權(quán)利要求1中所定義的式IVa、IVb、Va或Vb化合物、或其藥物學可接受的鹽、或其前藥或代謝物，與藥物學可接受的載體一起給藥于有此需要的對象，其中所述的細胞增生性疾病得到治療。
19.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的細胞增生性疾病為癌前期病變。
20.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的細胞增生性疾病為癌癥。
21.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述的癌癥為肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、慢性髓細胞性白血病、黑素瘤或卵巢癌。
22.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的細胞增生性疾病為乳腺細胞增生性疾病。
23.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的乳腺細胞增生性疾病為乳腺癌前期病變。
24.權(quán)利要求23所述的方法，其中所述的乳腺癌前期病變選自乳腺非典型增生、原位管癌、和原位小葉癌。
25.權(quán)利要求22所述的方法，其中所述的乳腺細胞增生性疾病為乳腺癌。
26.權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的乳腺癌為雌激素受體陰性乳腺癌。
27.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的式IVa、IVb、Va或Vb化合物、或其藥物學可接受的鹽、或其前藥或代謝物與第二化學治療劑聯(lián)合給藥。
28.權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的第二化學治療藥劑選自他莫昔芬、雷洛昔芬、阿那曲唑、依西美坦、來曲唑、曲妥珠單抗、imatanib、紫杉醇、環(huán)磷酰胺、洛伐他汀、minosine、吉西他濱、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、多西他奇、戈舍瑞林、長春新堿、長春堿、諾考達唑、替尼泊苷、依托泊苷、吉西他濱、epothilone、諾維本、喜樹堿、柔紅霉素、放線菌素D、米托蒽醌、安吖啶、多柔比星、表柔比星或伊達比星。
29.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述的癌癥治療包括腫瘤尺寸尺寸的減小。
30.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述的癌癥為轉(zhuǎn)移癌。
31.權(quán)利要求30所述的方法，其中所述的癌癥治療包括抑制轉(zhuǎn)移癌細胞的侵襲。
32.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述化合物選自(+)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(-)-順式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、(+)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮、和(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
33.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述化合物是(-)-反式-3-(5，6-二氫-4H-吡咯并[3，2，1-ij]喹啉-1-基)-4(1H-吲哚-3-基)吡咯烷-2，5-二酮。
34.權(quán)利要求18所述的方法，其中所述患有增生性疾病的細胞含有編碼c-Met的DNA。
35.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述的細胞具有構(gòu)成性增強的c-Met活性。
全文摘要
本發(fā)明涉及吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物以及吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物，以及這些化合物的制備方法。本發(fā)明還涉及包含吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物以及吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物的藥物組合物。本發(fā)明提供了通過對有此需要的對象給予治療有效量的本發(fā)明的吡咯并喹啉基-吡咯-2，5-二酮化合物或吡咯并喹啉基-吡咯烷-2，5-二酮化合物治療細胞增生性疾病，例如癌癥的方法。
文檔編號A61K31/661GK101133055SQ200680006758
公開日2008年2月27日 申請日期2006年2月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月9日
發(fā)明者李嘉強, M·A·阿什韋爾, J·希爾, M·M·穆薩, N·孟希 申請人:艾科優(yōu)公司