專利名稱：川芎嗪烴基哌嗪類衍生物、制備方法和藥物組合物與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種衍生物及其制備方法，具體涉及川芎嗪烴基哌嗪類衍生物及其制備方法，屬于衍生物類藥物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著全球經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、生活水平的提高以及人口老齡化進(jìn)程的加快，世界各國心腦血管疾病、糖尿病、腫瘤等慢性非傳染性疾病引起的死亡比例不斷上升，并已成為一個重要的公共衛(wèi)生問題。在2003年WHO報告資料中，作為“世界公共衛(wèi)生的頭號敵人”的心腦血管疾病所造成的死亡人數(shù)占總死亡人口的29.2％。目前臨床上治療心腦血管疾病的藥物較多，但普遍存在選擇性差、毒副作用較大等缺點(diǎn)。因此，研究開發(fā)高效、低毒的心腦血管疾病治療藥物仍是藥物研究的重點(diǎn)之一。
川芎，又名芎蘩，是傘形科植物川芎(Ligusticum chuanxiong Hort)的干燥根莖。川芎作為中醫(yī)臨床活血行氣、祛風(fēng)止痛之要藥也廣泛用于中成藥，治療心腦血管疾病。其主要活性成分是川芎嗪等川芎生物堿。
川芎嗪(Ligustrazine)異名川芎嗪I號堿，化學(xué)名2，3，5，6-四甲基吡嗪，簡稱四甲吡嗪(Tetramethylyrazine，TMP)，結(jié)構(gòu)見下圖 我國首先從常用中藥川芎根莖中分得TMP，繼而在姜科植物溫莪術(shù)的根莖和草麻黃的揮發(fā)油成分中也發(fā)現(xiàn)TMP的存在。藥理學(xué)研究表明川芎嗪具有擴(kuò)張血管、抑制血小板聚集、防止血栓形成、改善腦缺血等多種作用。
由于川芎嗪體內(nèi)代謝快、半衰期短，為保持有效的藥物治療濃度，臨床上須頻繁給藥，故易致積蓄中毒，使其應(yīng)用受到一定限制(徐睿，李源，黃熙，川芎嗪藥物代謝動力學(xué)研究進(jìn)展，安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2002，21(1)58-61)。因此，以川芎嗪為先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造，降低其毒性、改善其藥代動力學(xué)性質(zhì)，研究開發(fā)新型高效、低毒的川芎嗪類心腦血管疾病治療藥物具有很重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種川芎嗪烴基哌嗪衍生物及其制備方法和含有川芎嗪烴基哌嗪類衍生物的藥物組合物與應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下1.川芎嗪烴基哌嗪類衍生物本發(fā)明的川芎嗪烴基哌嗪衍生物是2-(4-取代-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪類衍生物，具有如下結(jié)構(gòu)通式 其中R為二苯甲基、取代二苯甲基、肉桂基、川芎嗪基、芐基、取代芐基、苯基、苯乙基或烴基。
本發(fā)明的目標(biāo)化合物的代號及具體結(jié)構(gòu)見表1。
表1 目標(biāo)化合物B1-24的結(jié)構(gòu)式 本發(fā)明將川芎嗪作為肉桂基、三甲氧芐基的生物電子等排體，根據(jù)藥物化學(xué)中的生物電子等排原理和拼合原理，(1)用川芎嗪替換這兩個基團(tuán)，保留二苯基甲基哌嗪藥效團(tuán)，設(shè)計了化合物B1、B2、B3；(2)氟桂嗪和桂利嗪分子結(jié)構(gòu)中都有肉桂基，用川芎嗪替換二苯甲基，保留肉桂基和哌嗪環(huán)，設(shè)計了化合物B4；(3)根據(jù)藥物化學(xué)中的拼合原理，我們保留川芎嗪和哌嗪環(huán)不變，在哌嗪環(huán)的另一個氮原子上引入一些心腦血管藥物基團(tuán)和藥效團(tuán)，如取代苯基、取代芐基、川芎嗪基等，以發(fā)揮藥物的加合或協(xié)同作用，增強(qiáng)藥效，設(shè)計了化合物B6-19；(4)為了考察苯環(huán)與哌嗪氮原子之間碳鏈長度對活性的影響，在哌嗪環(huán)的氮原子上引入苯基和苯乙基，設(shè)計了化合物B20、B21；(5)為進(jìn)一步研究構(gòu)效關(guān)系，在哌嗪環(huán)的氮原子上引入了甲基、乙基和乙腈基，設(shè)計了化合物B22-B24。
2.川芎嗪烴基哌嗪衍生物的合成路線如下 方法1 方法2 3.中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)的制備方法將川芎嗪三水合物(30.4g，160mmol)、冰醋酸(40ml)和30％過氧化氫(18ml，160mmol)的混合物于70℃加熱反應(yīng)4h，補(bǔ)充加入30％過氧化氫(18ml，160mmol)，繼續(xù)反應(yīng)4h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝10，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品。然后加入醋酐(15.1ml，160mmol)，加熱回流2.5h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?，冷卻后加入20％氫氧化鈉溶液(155ml)，放置過夜，三氯甲烷提取(150ml，30ml×5次)，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)粗品，以正己烷重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶1(15.5g，64％)，mp88～89℃。
以上試劑濃度均為重量百分比。
4.中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)的制備方法將所得2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(15.5g，102mmol)用二氯甲烷(300ml)溶解，取氯化亞砜(7.4ml，102mmol)，在冰浴條件下逐滴加入二氯甲烷溶液，冰浴反應(yīng)30min，再室溫反應(yīng)2.5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑，得黃色固體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)(21.1g，100％)，mp102～105℃。
5.中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(3)的制備方法將無水哌嗪(50g，580mmol)用三氯甲烷(300ml)溶解，冰浴條件下向此溶液中滴加2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(20.7g，100mmol)的三氯甲烷(100ml)溶液，室溫反應(yīng)5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，反應(yīng)液用4mol/L氨水洗滌(100ml×3次)，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除溶劑，得黑色油狀物粗品(19g，86％)，不經(jīng)純化可直接用于終產(chǎn)物的合成。取少量粗品用正己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪3(6.6g，30％)，mp94℃。
6.2-(4-取代-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪類衍生物的制備方法(1)2-(4-取代-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪類衍生物的合成(方法1)將2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(10mmol)、N-烴基哌嗪(10mmol)用甲苯(70ml)溶解，再加入三乙胺(30mmol)、碘化鈉(1mmol)，加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶，得B1-4，B20，B22-23。
(2)2-(4-取代-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪類衍生物的合成(方法2)將2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(10mmol)、鹵代芐(10mmol)用甲苯(70ml)溶解，再加入三乙胺(30mmol)、碘化鈉(1mmol)，加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶，得B5-19，B21，B24。
上述快速柱層析分離的洗脫溶劑系統(tǒng)為B1-5用乙酸乙酯/環(huán)己烷；B6-20、B22-24用乙酸乙酯；B21用氯仿/丙酮。
上述N-烴基哌嗪為二苯甲哌嗪、對氟二苯甲哌嗪、4-氯苯基苯基甲哌嗪、(E)-肉桂哌嗪、苯基哌嗪、甲基哌嗪或乙基哌嗪。
上述鹵代芐為2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽、溴芐、對甲基氯芐、對乙基氯芐、對叔丁基氯芐、鄰氯氯芐、間氯氯芐、對氯氯芐、2，4-二氯氯芐、鄰溴溴芐、對溴溴芐、2-腈基氯芐、3-腈基氯芐、4-腈基氯芐、4-硝基溴芐、β-溴苯乙烷或氯乙腈。
7.川芎嗪烴基哌嗪類衍生物藥物組合物本發(fā)明的川芎嗪烴基哌嗪類衍生物藥物組合物，含有上述的川芎嗪烴基哌嗪類衍生物，川芎嗪烴基哌嗪類衍生物與藥用輔料制成不同劑型的藥物。
8.川芎嗪烴基哌嗪類衍生物的應(yīng)用本發(fā)明的川芎嗪烴基哌嗪類衍生物，可用于制備血管內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)與保護(hù)藥物或抗血小板凝集藥物。
川芎嗪烴基哌嗪類衍生物對血小板凝集的作用試驗(yàn)如下動物52只雄性家兔，分為26組，每組2只。
方法(1)每只家兔心臟取血9ml，分別注入3支試管中，2.7ml/支，每種藥物設(shè)6個平行組。
(2)血漿制備取檸檬酸三鈉(3.8％)0.3ml提前放入試管中，如后注入血液2.7ml，每支試管總量3.0ml，血液與抗凝劑的比例嚴(yán)格保持9/1(V/v)。所有與血液接觸的用具必須進(jìn)行硅化。每管26組血液中加入血小板聚集劑(ADP)40uM/ml，另一組為空白對照。25組分別加入TMP與24種衍生物，取藥物濃度0.2mmol/L進(jìn)行試驗(yàn)，另一組為陽性對照。對血液樣本進(jìn)行離心沉淀(270g，5min)，取出混濁的上層血漿，即為富血小板血漿，把余下的血漿再離心沉淀(1000g，10min)，吸取血液的上清液，即為貧血小板血漿(platelet penuriousplasma，PPP)，置于37℃恒溫槽內(nèi)待測。
(3)血小板凝集測定采用PPP自動平衡血小板聚集儀(上?？七_(dá)測試儀器廠產(chǎn)品)測定血小板聚集率。測試過程按編制程序進(jìn)行，由微電腦控制。測試樣本須在1.5h內(nèi)檢測完畢。血小板凝集率以A％表示(n＝3)。
表2 川芎嗪和川芎嗪烴基哌嗪衍生物的血小板凝聚率(％)
*TMP代表川芎嗪。
由表2可以看出，陽性對照藥物川芎嗪在0.2mmol.L-1時的血小板凝集率為7.86％。
引入有效藥物基團(tuán)的化合物如B2(對氟二苯甲基，6.32％)、B3(4-氯苯基苯甲基，5.19％)、B13(2，4-二氯氯芐基，5.70)和B14(2-溴芐基，7.68％)的血小板凝集率均低于川芎嗪，表現(xiàn)出較川芎嗪更高的活性，其中B3(4-氯苯基苯甲基，5.19％)的活性最好。
具體實(shí)施方式
中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)、2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)、2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(3)的制備方法如前面所述。
實(shí)施例1.2-(4-二苯甲基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B1)的制備將2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、二苯甲哌嗪10mmol用70ml甲苯溶解，再加入三乙胺30mmol、碘化鈉1mmol，加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，洗脫劑為乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶3體積比)，正己烷重結(jié)晶，得白色針晶2-(4-二苯甲基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪1.0g，產(chǎn)率56％，mp121-122℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2809.86(CH)，1598.06(C＝C)，1585.41(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.41(d，4H，Ar-H，J＝7.75Hz)，7.26(t，4H，Ar-H，J＝7.70Hz)，7.16(t，2H，Ar-H，J＝7.46Hz)，4.22(1H，CH)，2.30-3.62(m，10H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.52(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS387.5(M+1)。
實(shí)施例2.2-[4-(4，4′-二氟)二苯基甲基-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B2)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、對氟二苯甲哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶1體積比)，得2-[4-(4，4′-二氟)二苯基甲基-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B2)白色結(jié)晶1.5g，產(chǎn)率56％，mp138-140℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2954.35(CH)，1603.08(C＝C)，1505.49(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.34(q，4H，Ar-H，J＝7.04Hz)，6.97(t，4H，Ar-H，J＝8.65Hz)，4.21(s，1H，CH)，3.61-3.62(m，10H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS423.6(M+1)。
實(shí)施例3.2-[4-(4-氯苯基)苯基甲基-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B3)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmolg、4-氯苯基苯基甲哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶2體積比)，得2-[4-(4-氯苯基)苯基甲基-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B3)白色結(jié)晶2.65g，產(chǎn)率45％，mp112-114℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2950.77(CH)，1599.71(C＝C)，1546.64(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.35(q，4H，Ar-H)，7.27(t，2H，Ar-H)，7.24(t，2H，Ar-H)，7.18(t，1H，Ar-H，J＝7.27Hz)，4.20(1H，CH)，2.30-3.62(m，10H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS421.5(M+1)。
實(shí)施例4.2-[4-[(E)-肉桂基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B4)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、肉桂哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶1體積比)，得2-[4-[(E)-肉桂基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B4)淡黃色結(jié)晶0.45g，產(chǎn)率43％，mp74-75℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2935.55(CH)，1596.95(C＝N)，977.98(＝CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.36(d，2H，Ar-H，J＝7.49Hz)，7.29(q，2H，Ar-H)，7.22(t，1H，Ar-H，J＝7.33Hz)，6.51(d，1H，＝CH，J＝15.85Hz)，6.27(m，1H，＝CH)，2.50-3.63(m，12H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.56(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS337.5(M+1)。
實(shí)施例5.2-[4-[(3，5，6-三甲基)-2-吡嗪甲基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B5)的制備將2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽10mmol用70ml甲苯溶解，再加入三乙胺30mmol、碘化鈉1mmol加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱分離，洗脫劑為乙酸乙酯∶環(huán)己烷(1∶1體積比)，正己烷重結(jié)晶，得2-[4-[(3，5，6-三甲基)-2-吡嗪甲基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B5)淡黃色結(jié)晶0.35g，產(chǎn)率59％，mp162-164℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2937.71(CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)3.65(m，12H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS355.6(M+1)。
實(shí)施例6.2-(4-芐基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B6)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯35mml、溴芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-(4-芐基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B6)白色結(jié)晶0.45g，產(chǎn)率44％，mp66℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2936.68(CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.30(m，4H，Ar-H)，7.24(m，1H，Ar-H)，3.49-3.61(m，12H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.52(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS311.5(M+1)。
實(shí)施例7.2-[4-(4-甲基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B7)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、4-甲基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-甲基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B7)白色結(jié)晶0.15g，產(chǎn)率42％，mp66℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2929.10(CH)，1515.58(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.26(m，1H，Ar-H)，7.20(d，1H，Ar-H，J＝7.57Hz)，7.14(q，2H，Ar-H)，3.44-3.62(m，12H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.56(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)，2.35(s，3H，Ar-CH3)；ESI-MS325.6(M+1)。
實(shí)施例8.2-[4-(4-乙基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B8)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、4-乙基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-乙基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B8)油狀物0.6g，產(chǎn)率32％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2932.21(CH)，1512.87(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.27(t，1H，Ar-H，J＝5.92Hz)，7.21(d，1H，Ar-H，J＝7.88Hz)，7.18(t，1H，Ar-H)，7.11(q，1H，Ar-H)，2.58-4.60(m，14H，CH2)，2.46-2.52(t，9H，CH3)，1.22(3H，CH2CH3)；ESI-MS339.5(M+1)。
實(shí)施例9.2-[4-(4-叔丁基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B9)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、4-叔丁基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-叔丁基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B9)油狀物0.45g，產(chǎn)率47％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2960.15(CH)，1656.00(C＝C)，1513.44(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.32(t，2H，Ar-H，J＝6.61Hz)，7.24(d，2H，Ar-H，J＝8.20Hz)，3.48-3.62(m，12H，CH2)，2.47-2.57(t，9H，CH3)，1.32(9H，C(CH3)3)；ESI-MS367.4(M+1)。
實(shí)施例10.2-[4-(2-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B10)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、鄰氯氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(2-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B10)白色結(jié)晶0.15g，產(chǎn)率41％，mp60℃。
光譜數(shù)據(jù)分析IR(KBr，cm-1)2935.80(CH)，1594.16(C＝C)，1571.32(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.49(s，1H，Ar-H)，7.35(d，1H，Ar-H，J＝7.83Hz)，7.24(t，1H，Ar-H，J＝7.42Hz)，7.19(t，1H，Ar-H，J＝7.39Hz)，2.50-3.64(m，12H，CH2)，2.59(s，3H，CH3)，2.55(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS345.4(M+1)。
實(shí)施例11.2-[4-(3-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B11)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、間氯氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(3-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B11)油狀物0.2g，產(chǎn)率31％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2936.45(CH)，1596.95(C＝C)，1574.90(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.32(s，1H，Ar-H)，7.20(m，3H，Ar-H)，3.45-3.62(m，12H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)；ESI-MS345.4(M+1)。
實(shí)施例12.2-[4-(4-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B12)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、對氯氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B12)淡黃色結(jié)晶0.3g，產(chǎn)率44％，mp68℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2946.03(CH)，1596.71(C＝C)，1575.99(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.35(d，2H，Ar-H，J＝8.24Hz)，7.29(d，2H，Ar-H，J＝8.21Hz)，2.30-3.52(m，12H，CH2)，2.47(s，3H，CH3)，2.39(s，3H，CH3)，2.38(s，3H，CH3)；ESI-MS345.4(M+1)。
實(shí)施例13.2-[4-(2，4-二氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B13)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、2，4-二氯氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(2，4-二氯芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B13)白色結(jié)晶0.3g，產(chǎn)率34％，mp62-64℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2943.87(CH)，1587.77(C＝C)，1561.51(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.63(s，1H，Ar-H)，7.53(q，2H，Ar-H)，7.40(t，1H，Ar-H，J＝7.69Hz)，2.40-3.62(m，12H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.52(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS379.5(M)，381.4(M+2)。
實(shí)施例14.2-[4-(2-溴芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B14)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、鄰溴溴芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(2-溴芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B14)白色結(jié)晶0.3g，產(chǎn)率33％，mp90℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2928.22(CH)，761.48(γH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.51(d，1H，Ar-H，J＝7.88Hz)，7.47(d，1H，Ar-H，J＝7.54Hz)，7.26(m，1H，Ar-H)，7.08(t，1H，Ar-H，J＝7.89Hz)，3.58-3.62(m，12H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS389.3(M+1)。
實(shí)施例15.2-[4-(4-溴芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B15)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯35mml、對溴溴芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-溴芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B15)淡黃色結(jié)晶0.3g，產(chǎn)率44％，mp64-66℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2925.61(CH)，1592.58(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.42(d，2H，Ar-H，J＝7.37Hz)，7.19(d，2H，Ar-H，J＝7.81Hz)，2.40-3.61(m，12H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS391(M+2)。
實(shí)施例16.2-[4-(2-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B16)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、2-腈基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(2-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B16)白色結(jié)晶0.4g，產(chǎn)率45％，mp106-108℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2931.17(CH)，2219.88(C≡N)，1652.92(C＝C)，1599.30(C＝N)；NMR(CDCl3，δppm)7.62(d，1H，Ar-H，J＝7.69Hz)，7.54(m，2H，Ar-H)，1H-7.33(m，1H，Ar-H)，2.50-3.69(m，12H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS336.6(M+1)。
實(shí)施例17.2-[4-(3-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B17)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、3-乙腈基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(3-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B17)淡黃色結(jié)晶0.1g，產(chǎn)率43％，mp116-118℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2925.96(CH)，2229.33(C≡N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.64(s，1H，Ar-H)，7.54(q，2H，Ar-H)，7.40(t，1H，Ar-H，J＝7.70Hz)，2.40-3.62(m，12H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.52(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS336.6(M+1)。
實(shí)施例18.2-[4-(4-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B18)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯25mml、4-乙腈基氯芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-腈基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B18)白色結(jié)晶0.65g，產(chǎn)率34％，mp94-96℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2953.65(CH)，2227.05(C≡N)，1607.08(C＝N)，1503.74(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.59(d，2H，Ar-H，J＝8.15Hz)，7.44(d，2H，Ar-H，J＝8.05Hz)，2.40-3.63(m，12H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS336.6(M+1)。
實(shí)施例19.2-[4-(4-硝基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B19)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、4-硝基溴芐10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-[4-(4-硝基芐基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(B19)白色結(jié)晶0.65g，產(chǎn)率39％，mp82-83℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2929.48(CH)，1605.75(C＝C)，1522.47(NO2)，1343.16(NO2)；1H-NMR(CDCl3，δppm)8.17(d，2H，Ar-H，J＝8.49Hz)，7.51(d，2H，Ar-H，J＝7.62Hz)，3.61-3.62(m，12H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS356.5(M+1)。
實(shí)施例20.2-(4-苯基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B20)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、苯基哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得白色結(jié)晶0.55g，產(chǎn)率40％，mp82-84℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2957.59(CH)，1603.01(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.26(m，2H，Ar-H)，6.92(d，2H，Ar-H，J＝7.99Hz)，6.85(t，1H，Ar-H，J＝7.28Hz)，2.67-3.70(m，10H，CH2)，2.62(s，3H，CH3)，2.56(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)；ESI-MS297.6(M+1)。
實(shí)施例21.2-(4-β-苯乙基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B21)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯30mml、β-溴苯乙烷10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為氯仿∶丙酮(1∶1體積比)，得2-(4-β-苯乙基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B21)白色結(jié)晶0.65g，產(chǎn)率40％，mp108℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2929.26(CH)，1601.92(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.30(d，2H，Ar-H，J＝7.93Hz)，7.21(d，3H，Ar-H，J＝7.29Hz)，3.60-3.65(m，14H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS325.6(M+1)。
實(shí)施例22.2-(4-甲基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B22)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、甲基哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-(4-甲基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B22)，油狀物1.2g，產(chǎn)率42％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2935.58(CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)2.30-3.58(m，10H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS235.4(M+1)。
實(shí)施例23.2-(4-乙基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B23)的制備如實(shí)施例1所述方法，不同的是2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽中間體10mmol、乙基哌嗪10mmol、甲苯70mml、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-(4-乙基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B23)，油狀物1.2g，產(chǎn)率33％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2934.96(CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)2.50-3.58(m，10H，CH2)，2.43-2.52(t，9H，CH3)，2.36(q，2H，CH2CH3)，1.02(t，3H，CH2CH3)；ESI-MS249.5(M+1)。
實(shí)施例24.2-(4-乙腈基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B24)的制備如實(shí)施例5所述方法，不同的是2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、甲苯35mml、氯乙腈10mmol、三乙胺30mmol和NaI1mmol混合，洗脫劑為乙酸乙酯，得2-(4-乙腈基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(B24)，淡黃色結(jié)晶0.55g，產(chǎn)率50％，mp96℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2950.10(CH)，2226.11(C≡N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)2.57-3.60(m，12H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.55(s，3H，CH3)，2.50(s，3H，CH3)；ESI-MS260.3(M+1)。
權(quán)利要求
1.川芎嗪烴基哌嗪衍生物，其特征在于，是2-(4-取代-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪類衍生物，具有如下結(jié)構(gòu)通式 其中R為二苯甲基、取代二苯甲基、肉桂基、川芎嗪基、芐基、取代芐基、苯基、苯乙基或烴基。
2.如權(quán)利要求1所述的川芎嗪烴基哌嗪衍生物，其特征在于，具有如下結(jié)構(gòu)之一
3.權(quán)利要求2所述的川芎嗪烴基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于將中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽10mmol、N-烴基哌嗪10mmol用甲苯70ml溶解，再加入三乙胺30mmol、碘化鈉1mmol，加熱回流10h，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶，得B1-4，B20，B22-23；反應(yīng)式如下 將中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪10mmol、鹵代芐10mmol用甲苯70ml溶解，再加入三乙胺30mmol、碘化鈉1mmol，加熱回流10h，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶，得B5-19，B21，B24；反應(yīng)式如下 上述快速柱層析分離的洗脫溶劑系統(tǒng)為B1-5用乙酸乙酯/環(huán)己烷；B6-20、B22-24用乙酸乙酯；B21用氯仿/丙酮；上述N-烴基哌嗪為二苯甲哌嗪、對氟二苯甲哌嗪、4-氯苯基苯基甲哌嗪、(E)-肉桂哌嗪、苯基哌嗪、甲基哌嗪或乙基哌嗪；上述鹵代芐為2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽、溴芐、對甲基氯芐、對乙基氯芐、對叔丁基氯芐、鄰氯氯芐、間氯氯芐、對氯氯芐、2，4-二氯氯芐、鄰溴溴芐、對溴溴芐、2-腈基氯芐、3-腈基氯芐、4-腈基氯芐、4-硝基溴芐、β-溴苯乙烷或氯乙腈。
4.如權(quán)利要求3所述的川芎嗪烴基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于，所述的中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2是按如下步驟制備的(1)中間體2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪1的制備方法將川芎嗪三水合物160mmol、冰醋酸40ml和30％過氧化氫160mmol的混合物于70℃加熱反應(yīng)4h，補(bǔ)充加入30％過氧化氫160mmol，繼續(xù)反應(yīng)4h，冷卻至室溫，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝10，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品；然后加入醋酐160mmol，加熱回流2.5h，T減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙酰化物，冷卻后加入20％氫氧化鈉溶液155ml，放置過夜，三氯甲烷提取150ml，30ml×5次，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪1粗品，以正己烷重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶15.5g，mp88～89℃；以上試劑濃度均為重量百分比；(2)中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2的制備方法將所得2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪15.5g，用二氯甲烷300ml溶解，取氯化亞砜102mmol，在冰浴條件下逐滴加入二氯甲烷溶液，冰浴反應(yīng)30min，再室溫反應(yīng)2.5h，孔C監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑，得黃色固體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2，21.1g，，mp102～105℃。
5.如權(quán)利要求3所述的川芎嗪烴基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于，所述的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪3是按如下方法制備的將無水哌嗪580mmol用三氯甲烷300ml溶解，冰浴條件下向此溶液中滴加2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽100mmol的三氯甲烷100ml溶液，室溫反應(yīng)5h，反應(yīng)液用4mol/L氨水洗滌，100ml×3次，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除溶劑，得黑色油狀物粗品19g，不經(jīng)純化可直接用于終產(chǎn)物的合成；取少量粗品用正己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪3，6.6g，mp94℃。
6.川芎嗪烴基哌嗪類衍生物藥物組合物，含有權(quán)利要求1所述的川芎嗪烴基哌嗪類衍生物，與藥用輔料制成不同劑型的藥物。
7.權(quán)利要求1所述的川芎嗪烴基哌嗪類衍生物的應(yīng)用，用于制備血管內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)與保護(hù)藥物或抗血小板凝集藥物。
全文摘要
川芎嗪烴基哌嗪類衍生物、制備方法和藥物組合物與應(yīng)用，屬于川芎衍生物藥物技術(shù)領(lǐng)域。具有如右結(jié)構(gòu)通式，其中R為二苯甲基、取代二苯甲基、肉桂基、川芎嗪基、芐基、取代芐基、苯基、苯乙基或烴基。將中間體2－氯甲基－3，5，6－三甲基吡嗪鹽酸鹽、N－烴基哌嗪用甲苯溶解，或者將中間體2－(1－哌嗪基甲基)－3，5，6－三甲基吡嗪、鹵代芐用甲苯溶解，再加入三乙胺、碘化鈉，加熱回流10h，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶，即得川芎嗪烴基哌嗪類衍生物。川芎嗪烴基哌嗪類衍生物與藥用輔料制成不同劑型的藥物組合物，用于制備血管內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)與保護(hù)藥物或抗血小板凝集藥物。
文檔編號A61P7/00GK1775776SQ20051004530
公開日2006年5月24日 申請日期2005年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月6日
發(fā)明者劉新泳, 徐文方, 程先超, 鄧麗娟 申請人:山東大學(xué)