專利名稱：川芎嗪?；哙貉苌?、制備方法和藥物組合物與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病藥物和制備方法，具體涉及川芎嗪?；哙侯愌苌铩⒅苽浞椒霸撗苌锱c輔劑組成藥物組合物，屬于川芎類衍生物藥物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是嚴重危害人類健康的常見病、多發(fā)病，隨著社會人口的的老齡化，發(fā)病率日益上升。令人擔憂的是隨著社會競爭的日益激烈，心腦血管疾病的發(fā)病年齡也越來越年輕，已不再是老年人的專利。據(jù)統(tǒng)計，全球每年有1600萬人死于各類心腦血管疾病，是威脅人類健康的頭號殺手，已被世界衛(wèi)生組織列為當前全組織范圍總體工作重點之一。目前臨床上用于治療心腦血管疾病的藥物很多，但普遍存在特異性差、毒副作用較大等的缺點，因此研制開發(fā)新型、高效、低毒的心腦血管藥物仍是藥物研究的熱點。
川芎(Ligusticum Wallichii Franch)為傘形科植物川芎的干燥根莖，是祖國醫(yī)學實踐證明療效顯著的首位活血化淤中草藥，具有活血化淤、行氣定痛之功效，廣泛用于缺血性心腦血管疾病的治療，其主要活性成分是川芎生物堿。川芎I號生物堿，又名川芎嗪(Ligustrazine，Lig)，化學名為2，3，5，6-四甲基吡嗪，簡稱四甲吡嗪(Tetramethylpyrazine，TMP)，結(jié)構(gòu)見下圖。
藥理學研究證明，川芎嗪具有擴張血管、解除血管平滑肌痙攣、增加冠脈血流、降低血液黏度、防止血栓形成、改善腦缺血以及抑制血小板聚集等多種作用，參見郭軍，孟華，王驪麗等，川芎嗪的藥動-藥效學研究近況，南京中醫(yī)藥大學學報(自然科學版)，2002，18(5)318-320；和吳文元，川芎嗪治療周圍動脈粥樣硬化閉塞癥療效觀察，實用中醫(yī)藥雜志，2002，18(8)5-6。
川芎嗪在人體內(nèi)的藥代動力學研究發(fā)現(xiàn)，口服300mg磷酸川芎嗪膠囊(相當于川芎嗪174.4mg)，30min左右達到血藥濃度的最高峰3.114±0.902μg/ml，隨即藥物由中央室向周邊室快速分布，半衰期為0.4855±0.118h，中央室表觀分布容積為17.76L，總表觀分布容積為66.77L，同時藥物在體內(nèi)迅速消除，其消除半衰期為2.894±0.558h，給藥后3h，血藥濃度降到約0.5μg/ml，參見蔡偉，董善年，樓雅卿，正常人口服磷酸川芎嗪的藥代動力學研究，藥學學報，1989，24(12)881-886。研究結(jié)果表明，川芎嗪具有容易被氧化、吸收迅速、分布廣泛和主要在肝內(nèi)迅速消除的特點，在體內(nèi)生物利用度低，半衰期短，為保持有效的藥物治療濃度必須頻繁給藥，易造成體內(nèi)積蓄中毒，參見葉云鵬，王世真，江驥，人體尿中川芎嗪代謝產(chǎn)物的研究，中國醫(yī)學科學院學報，1996，18(4)288-291。因此，以川芎嗪為先導(dǎo)藥物，進行化學結(jié)構(gòu)的改造和修飾，改善其藥代動力學參數(shù)，提高其療效，對研制和開發(fā)新型高效、低毒的川芎嗪類心腦血管疾病治療藥物具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種川芎嗪?；哙貉苌锛捌渲苽浞椒ā?br> 本發(fā)明的另一任務(wù)是提供一種含有川芎嗪?；哙貉苌锏乃幬锝M合物與應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下1.川芎嗪?；哙貉苌锉景l(fā)明的川芎嗪?；哙貉苌锞哂腥缦陆Y(jié)構(gòu)通式 其中RCO-為乙酰水楊?；燉；?、異煙?；?、[2-(4-氯苯氧基)-2-甲基-]丙?；?、肉桂?；?、4-氟肉桂?；?-氯肉桂?；?、4-溴肉桂?；?、4-甲基肉桂?；?、4-甲氧基肉桂酰基、2，5-二甲氧基肉桂酰基、3，4-二甲氧基肉桂?；?、2，3-二甲氧基肉桂?；⒁阴０⑽乎；?-硝基肉桂?；?、呋喃甲?；?、3，4，5-三甲氧基苯甲?；?、苯甲酰基、2-甲氧基苯甲?；?、4-甲氧基苯甲?；?、3，4-甲氧基苯甲酰基、2-氯苯甲酰基、3-氯苯甲?；?、4-氯苯甲?；?、2，4-二氯苯甲酰基、2-碘苯甲?；?-碘苯甲?；?-硝基苯甲?；?、3，5-二硝基苯甲?；?、苯乙酰基、4-硝基苯乙酰基、β-苯丙?；⒈交酋；?、4-甲基苯磺?；⒓谆酋；⒁已豸驶?、氯乙?；?、苯乙二酮基或水楊酰基。
設(shè)計原理如下二苯甲基哌嗪類鈣通道阻滯劑藥物如氟桂嗪(Flunarizine)、桂利嗪(Cinnarizine)等是重要的心腦血管疾病治療藥物，結(jié)構(gòu)式如下 氟桂嗪 桂利嗪根據(jù)藥物化學中的生物電子等排原理，用川芎嗪替代氟桂嗪和桂利嗪分子結(jié)構(gòu)中的肉桂基，保留哌嗪環(huán)不變，并根據(jù)藥物化學中的拼合原理，在哌嗪環(huán)的另一個氮原子上引入一些有效藥物基團，如乙酰水楊?；?、煙酰基、異煙酰基、[(4-氯苯氧基)-2-甲基-]丙酰基、肉桂?；?、呋喃甲?；?、沒食子?；⑷〈郊柞；?、川芎嗪基等，以發(fā)揮藥物的加合或協(xié)同作用，增強藥效，設(shè)計合成了化合物A1-29；在哌嗪環(huán)的氮原子上引入苯乙?；?、苯丙?；?、苯乙二酮基、苯基和苯乙基以考察苯環(huán)與哌嗪氮原子之間碳鏈長度和羰基數(shù)目對活性的影響，設(shè)計合成了A30-32、A38；在哌嗪環(huán)氮原子上引入磺?；⒁已豸驶然鶊F以進一步研究構(gòu)效關(guān)系，設(shè)計合成了A33-37；將A1氨解，暴露出苯環(huán)上的羥基，以考察活性的變化，設(shè)計合成了A39。
上述的A1-A39是本發(fā)明合成的目標化合物的代號，具體結(jié)構(gòu)見表1。
表1.本發(fā)明目標化合物A1-39的結(jié)構(gòu)
2.川芎嗪?；哙貉苌锏暮铣陕肪€如下
方法1 方法2 方法3 3.川芎嗪?；哙貉苌镏虚g體的制備方法3.1中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)的制備方法將川芎嗪三水合物、冰醋酸和30％過氧化氫的混合物于70℃加熱反應(yīng)4h，補充加入等量30％過氧化氫，反應(yīng)4h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝10，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品。加入醋酐，加熱回流2.5h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?，冷卻后加入20％氫氧化鈉溶液，放置過夜，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)粗品，以正己烷重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶(1)。將2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)用二氯甲烷溶解，取氯化亞砜，在冰浴條件下逐滴加入二氯甲烷溶液，冰浴反應(yīng)30min，再室溫反應(yīng)2.5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑，得黃色固體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)。以上試劑濃度均為重量百分比。
3.2中間體N-?；哙?3)的制備方法有機羧酸和氯化亞砜在圓底燒瓶中加熱回流反應(yīng)5h，蒸除過量氯化亞砜，殘余物進行減壓蒸餾，得酰氯衍生物。六水哌嗪與冰醋酸在圓底燒瓶中攪拌至溶解，室溫下滴加已合成的酰氯衍生物，攪拌2h，加入水，再用氫氧化鈉溶液調(diào)pH＝12，冷卻放置，過濾除去少量雙?；a(chǎn)物，濾液用三氯甲烷提取，水洗至中性，蒸除三氯甲烷后得白色或黃色固體，用苯-石油醚重結(jié)晶得精品N-?；哙?3)。
上述3.2的有機羧酸是乙酰水楊酸、煙酸、異煙酸、2-(4-氯苯氧基)-2-甲基丙酸、肉桂酸、4-鹵代肉桂酸、4-甲基肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、2，5-二甲氧基肉桂酸、3，4-二甲氧基肉桂酸、2，3-二甲氧基肉桂酸、乙酰阿魏酸、3-硝基肉桂酸、呋喃甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、苯甲酸、2-甲氧基苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、3，4-二甲氧基苯甲酸、2-氯苯甲酸、3-氯苯甲酸、4-氯苯甲酸、2，4-氯苯甲酸、2-碘苯甲酸、4-碘苯甲酸、4-硝基苯甲酸、3，5-二硝基苯甲酸、苯乙酸、4-硝基苯乙酸、β-苯丙酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、甲基磺酸、乙酸或氯乙酸。
3.3中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)的制備方法將無水哌嗪用三氯甲烷溶解，冰浴條件下向此溶液中滴加中間體(2)的三氯甲烷溶液，室溫反應(yīng)5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，用氨水洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除溶劑，得黑色油狀物粗品，正己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶。
4.川芎嗪?；哙貉苌顰1-A39的制備方法用中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)通過對中間體N-酰基哌嗪(3)的哌嗪環(huán)的烴化反應(yīng)，然后經(jīng)分離、純化得川芎嗪?；哙貉苌顰6-8，16-28，30，32-36；用有機酰氯通過對中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)的哌嗪環(huán)的?；磻?yīng)，然后經(jīng)分離、純化得川芎嗪?；哙貉苌顰1-5，9-15，29，31，37，38；用氨水對化合物A1進行氨解，經(jīng)分離、純化得川芎嗪?；哙貉苌顰39。
(1)合成方法方法1川芎嗪酰基哌嗪衍生物A6-8，16-28，30，32-36的制備方法將2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)、N-?；哙?3)用甲苯溶解，再加入三乙胺、碘化鈉，加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，正己烷重結(jié)晶。
方法2川芎嗪?；哙貉苌顰1-5，9-15，29，31，37，38的制備方法將2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)用二氯甲烷溶解，加入無水碳酸鈉，滴加有機酰氯的二氯甲烷溶液，回流10h，過濾，濾液蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，得粗品，正己烷重結(jié)晶。
方法3川芎嗪?；哙貉苌顰39的制備方法(該法將用中間體2和3制得的A1進行氨解)將2-(4-乙酰水楊?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A1)與氨水混合，室溫攪拌5h，氯仿提取，提取液蒸干，得油狀物，快速柱層析分離。
(2)分離純化，按下列方法之一或同時使用①快速柱層析分離，洗脫溶劑系統(tǒng)為氯仿/丙酮。
②直接用有機溶劑重結(jié)晶。
優(yōu)選的，上述的有機溶劑是正己烷。
5.川芎嗪酰基哌嗪衍生物藥物組合物本發(fā)明的川芎嗪?；哙貉苌锼幬锝M合物，含有上述的川芎嗪酰基哌嗪衍生物，川芎嗪?；哙貉苌锱c藥用輔料制成不同劑型的藥物。
6.川芎嗪酰基哌嗪衍生物的應(yīng)用川芎嗪?；哙貉苌镉糜谥苽溲軆?nèi)皮細胞(VECs)的修復(fù)與保護藥物，或抗血小板凝集藥物。
川芎嗪?；哙貉苌锏难“迥瘜嶒炄幟仕崛c(3.8％)0.3ml提前放入試管。
方法取藥物濃度為0.2mmol/L進行血小板凝集實驗。向41組家兔(每組兩只)心臟取血，每只9ml，分別注入3支試管中，2.7ml/支，每種藥物設(shè)6個平行組。向40組血液中加入血小板聚集劑(ADP)40μM/ml，另一組為空白對照，然后分別加入TMP與38種衍生物A1-38，最終濃度為0.2mmol/L，另一組為陽性對照。對血液樣本進行離心沉淀(270g，5min)，取出上層血漿，為富血小板血漿，把余下的血漿再離心沉淀(1000g，10min)，吸取上清液，為貧血小板血漿(platelet penurious plasma，PPP)，置于37℃恒溫槽內(nèi)待測。采用PPP自動平衡血小板聚集儀測定血小板聚集率。血小板凝集率以A％表示(n＝3)。測試過程按編制程序進行，由微電腦控制。測試樣本在1.5h內(nèi)檢測完畢，川芎嗪及其?；哙貉苌顰1-A38的血小板凝集率見表2。
表2川芎嗪及其?；哙貉苌顰1-A39的血小板凝集率
TMP-川芎嗪。
由表2的結(jié)果可以看出，陽性對照藥物川芎嗪在0.2mmol.L-1時的血小板凝集率為7.86％，引入有效藥物基團的化合物如A1(乙酰水楊酰基，3.02％)、A2(煙?；?.08％)、A3(異煙?；?，6.07％)、A10(4-甲氧基肉桂?；?，5.99％)、A12(3，4-二甲氧基肉桂酰基，6.13％)、A14(乙酰阿魏?；?，5.84％)的血小板凝集率均低于川芎嗪，呈現(xiàn)出較高的活性，其中A1(乙酰水楊?；?，3.02％)活性最好；隨著苯環(huán)與羰基之間亞甲基(-CH2-)數(shù)目的增多(如化合物A30、A31、A32)，血小板凝集率顯著降低，活性增強；肉桂?；南╂I飽和后血小板凝集率變化不大；苯環(huán)引入甲氧基后血小板凝集率變化不大(如A18、A19、A20)；苯環(huán)引入鹵素或硝基等取代基后，活性變化規(guī)律不明顯?；衔顰1暴露出羥基后(A39)血小板凝集率升高。
具體實施方式
下面實施例中的提到的試劑濃度均為重量百分比，快速柱層析分離中洗脫溶劑均為體積比。
實施例1.中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)的制備將川芎嗪三水合物(30.4g，160mmol)、冰醋酸(40ml)和30％過氧化氫(18ml，160mmol)的混合物于70℃加熱反應(yīng)4h，補充加入30％過氧化氫(18ml，160mmol)，繼續(xù)反應(yīng)4h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝10，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品。然后加入醋酐(15.1ml，160mmol)，加熱回流2.5h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全后，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?，冷卻后加入20％氫氧化鈉溶液(155ml)，放置過夜，三氯甲烷提取(150ml，30ml×5次)，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得到2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)粗品，以正己烷重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)15.5g，產(chǎn)率64％，mp88～89℃。
將所得的2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪(1)結(jié)晶(15.5g，102mmol)用二氯甲烷(300ml)溶解，取氯化亞砜(7.4ml，102mmol)，在冰浴條件下逐滴加入二氯甲烷溶液，冰浴反應(yīng)30min，再室溫反應(yīng)2.5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑，得黃色固體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)21.1g，產(chǎn)率為100％，mp102～105℃。
實施例2.中間體N-酰基哌嗪(3)的制備取羧酸(100mmol)和氯化亞砜(200mmol)至圓底燒瓶中，安裝冷凝管和干燥管，加熱回流反應(yīng)5h，蒸除過量氯化亞砜，殘余物進行減壓蒸餾，得酰氯衍生物。
將六水哌嗪(11.7g，60mmol)置于圓底燒瓶中，加入冰醋酸(50ml)，攪拌至溶解，室溫下滴加上面合成的酰氯(50mmol)，滴加完畢，攪拌2h，向反應(yīng)液中加入水(50ml)，再用氫氧化鈉溶液調(diào)pH＝12，冷卻放置，過濾除去少量雙酰化產(chǎn)物，濾液用三氯甲烷提取5次，合并提取液，水洗至中性，用無水硫酸鈉干燥，蒸除三氯甲烷后得白色或黃色固體，用苯-石油醚重結(jié)晶得精品N-?；哙?3)，產(chǎn)率為70～90％。
實施例3.中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)的制備將無水哌嗪(50g，580mmol)用三氯甲烷(300ml)溶解，冰浴條件下向此溶液中滴加2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(20.7g，100mmol)的三氯甲烷(100ml)溶液，室溫反應(yīng)5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，反應(yīng)液用4mol/L氨水洗滌(100ml×3次)，有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除溶劑，得黑色油狀物粗品19g，產(chǎn)率為86％，不經(jīng)純化可直接用于終產(chǎn)物的合成。取少量粗品用正己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)。
實施例4.2-(4-乙酰水楊酰基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A1)的制備將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)(10mmol)用二氯甲烷(100ml)溶解，加入無水碳酸鈉(1.06g，10mmol)，在室溫下向此混合物中滴加乙酰水楊酰氯(10mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液，回流10h，過濾，濾液蒸干，快速柱分離，得2-(4-乙酰水楊?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A1)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，油狀物，產(chǎn)率為48％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2920.52(CH)，1766.95(C＝O)，1640.86(C＝O)，1606.93(C＝N)，1195.56(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.29(m，1H，Ar-H)，7.19(dd，1H，Ar-H)，7.14(t，1H，Ar-H，J＝7.42Hz)，7.05(d，1H，Ar-H，J＝8.12Hz)，3.18-3.66(m，10H，CH2)，2.47(s，3H，CH3)，2.37(s，3H，CH3)，2.34(s，3H，CH3)，2.16(t，3H，COCH3，J＝4.98Hz)；ESI-MS383.3(M+1)。
實施例5.2-(4-煙?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A2)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與煙酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝1∶1，正己烷重結(jié)晶，得白色晶體2-(4-煙?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A2)，產(chǎn)率為44％，mp120-121℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2916.66(CH)，1630.39(C＝O)，1590.11(C＝C)，1567.99(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)8.65(m，2H，Ar-H)，7.73(m，1H，Ar-H)，7.34(m，1H，Ar-H)，3.42-3.77(m，10H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS326.5(M+1)。
實施例6.2-[4-[2-(4-氯苯氧基)-2-甲基-]丙?；?1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A4)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與2-(4-氯苯氧基)-2-甲基丙酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝5∶1，正己烷重結(jié)晶，得白色晶體2-[4-[2-(4-氯苯氧基)-2-甲基-]-丙?；?1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A4)，產(chǎn)率為49％，mp100-101℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2937.20(CH)，1629.32(C＝O)，1596.54(C＝C)，1578.56(C＝N)，1242.16(C-O)，1002.05(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.19(m，2H，Ar-H)，6.75(m，2H，Ar-H)，3.80(s，2H，CH2)，3.63(s，2H，CH2)，3.50(s，2H，CH2)，2.51(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.41(s，2H，CH2)，2.19(s，2H，CH2)，1.62(s，6H，C(CH3)2)；ESI-MS417.6(M+1)。
實施例7.2-[4-[(E)-3，4-二甲氧基肉桂酰基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A12)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與(E)-3，4-二甲氧基肉桂酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝2∶1，得油狀物2-[4-[(E)-3，4-二甲氧基肉桂酰基]-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A12)，產(chǎn)率為52％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2935.64(CH)，1645.14(C＝O)，1597.84(C＝C)，1513.44(C＝N)，1262.19(C-O)，1024.92(C-O)，999.80(＝CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.59(d，1H，＝CH，J＝15.34Hz)，7.09(dd，1H，Ar-H，J＝8.29Hz)，7.02(d，1H，Ar-H，J＝1.57Hz)，6.84(d，1H，Ar-H，J＝8.29Hz)，6.70(d，1H，＝CH，J＝15.34Hz)，3.90(6H，OCH3)，2.52-3.65(m，10H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS411.5(M+1)。
實施例8.2-(4-乙酰阿魏?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A14)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與乙酰阿魏酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝2∶1，得油狀物2-(4-乙酰阿魏?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A14)，產(chǎn)率為42％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2920.41(CH)，1765.60(C＝O)，1648.46(C＝O)，1603.67(C＝C)，1509.17(C＝N)，1260.13(C-O)，1196.81(C-O)，1001.28(＝CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.61(d，1H，＝CH，J＝15.38Hz)，7.12(d，1H，Ar-H，J＝9.79Hz)，7.07(s，1H，Ar-H)，7.03(d，1H，Ar-H，J＝8.14Hz)，6.79(d，1H，＝CH，J＝15.38Hz)，3.86(s，3H，OCH3)，2.50-3.80(m，10H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.55(s，3H，CH3)，2.50(s，3H，CH3)，2.32(s，3H，COCH3)；ESI-MS439.6(M+1)。
實施例9.2-[4-(3，5-二硝基苯甲酰基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A29)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與3，5-二硝基苯甲酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝5∶1，正己烷重結(jié)晶，得淡黃色晶體2-[4-(3，5-二硝基苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A29)，產(chǎn)率為45％，mp198-199℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2951.71(CH)，1639.02(C＝O)，1591.30(C＝C)，1542.23(NO2)，1344.54(NO2)；1H-NMR(CDCl3，δppm)9.09(s，1H，Ar-H)，8.59(d，2H，Ar-H，J＝1.68Hz)，2.66-3.84(m，10H，CH2)，2.53(s，3H，CH3)，2.50(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS415.5(M+1)。
實施例10.2-(4-氯乙?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A37)的制備如實施例4所述的方法，所不同的是將實施例3制備的中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(4)與氯乙酰氯反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，正己烷重結(jié)晶，得淡黃色晶體2-(4-氯乙酰基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A37)，產(chǎn)率為34％，mp76-77℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2941.71(CH)，1668.60(C＝O)，1654.54(C＝N)；1H-NMR(CDCl3，δppm)4.06(s，2H，ClCH2)，3.51-3.67(m，10H，CH2)，2.59(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS297.5(M+1)。
實施例11.2-[4-[(E)-4-氟肉桂?；鵠-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A6)的制備將實施例1制備的中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽(2)(10mmol)、實施例2制備的中間體N-(4-氟肉桂?；?哌嗪(10mmol)用甲苯(70ml)溶解，再加入三乙胺(4.17ml，30mmol)、碘化鈉(催化量)，加熱回流10h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，快速柱分離，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝1∶2，正己烷重結(jié)晶，得2-[4-[(E)-4-氟肉桂?；鵠-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A6)，白色晶體，產(chǎn)率為61％，mp107-108℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2917.54(CH)，1647.23(C＝O)，1601.33(C＝C)，1510.10(C＝N)，986.65(＝CH)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.62(d，1H，＝CH，J＝15.41Hz)，7.49(m，2H，Ar-H)，7.05(t，2H，Ar-H，J＝8.57Hz)，6.78(d，1H，＝CH，J＝15.41Hz)，2.50-3.72(m，10H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.53(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS369.4(M+1)。
實施例12.2-(4-呋喃甲?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A16)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-呋喃甲?；哙悍磻?yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，正己烷重結(jié)晶，得淡黃色晶體2-(4-呋喃甲?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A16)，產(chǎn)率為51％，mp100-102℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)3098.74(＝CH)，2948.27(CH)，1621.05(C＝O)，1581.79(C＝C)，1292.18(C-O)，1023.80(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.46(1H，furan-2-H)，6.97(1H，furan-4-H，J＝3.32Hz)，6.47(1H，furan-3-H，J2-3＝1.57Hz，J3-4＝3.13Hz)，2.50-3.78(m，10H，CH2)，2.59(s，3H，CH3)，2.56(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS315.3(M+1)。
實施例13.2-[4-(3，4，5-三甲氧基苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A17)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-3，4，5-三甲氧基苯甲酰基哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，得2-[4-(3，4，5-三甲氧基苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A17)，油狀物，產(chǎn)率為44％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2939.22(CH)，1636.18(C＝O)，1583.82(C＝C)，1505.51(C＝N)，1231.28(C-O)，1127.39(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)6.62(s，2H，Ar-H)，3.85-3.87(9H，OCH3)，2.56-3.66(m，10H，CH2)，2.59(s，3H，CH3)，2.50(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)；ESI-MS415.3(M+1)。
實施例14.2-[4-(4-甲氧基苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A20)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-(4-甲氧基苯甲?；?哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝8∶1，正己烷重結(jié)晶，得淡黃色晶體2-[4-(4-甲氧基苯甲酰基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A20)，產(chǎn)率為45％，mp82-85℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2921.16(CH)，1621.72(C＝O)，1573.75(C＝C)，1514.22(C＝N)，1245.92(C-O)，1033.00(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.37(d，2H，Ar-H，J＝8.68Hz)，6.90(d，2H，Ar-H，J＝8.67Hz)，3.82(3H，OCH3)，3.60-3.70(m，10H，CH2)，2.57(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS355.4(M+1)。
實施例15.2-[4-(2-氯苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A22)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-(2-氯苯甲?；?哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，正己烷重結(jié)晶，得淡黃色晶體2-[4-(2-氯苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A22)，產(chǎn)率為50％，mp148℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2953.76(CH)，1632.68(C＝O)，1591.87(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.35(m，4H，Ar-H)，2.30-3.83(m，10H，CH2)，2.58(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS359.4(M+1)。
實施例16.2-[4-(4-碘苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A27)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-(4-碘苯甲?；?哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝5∶1，正己烷重結(jié)晶，得2-[4-(4-碘苯甲?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A27)，白色晶體，產(chǎn)率為52％，mp166-168℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2938.22(CH)，1619.75(C＝O)，1586.17(C＝C)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.75(d，2H，Ar-H，J＝8.26Hz)，7.14(d，2H，Ar-H，J＝8.25Hz)，2.57-3.65(m，10H，CH2)，2.50(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)；ESI-MS451.3(M+1)。
實施例17.2-[4-(β-苯丙酰基)-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A32)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-(β-苯丙?；?哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝8∶1，正己烷重結(jié)晶，得2-[4-(β-苯丙?；?-1-哌嗪基甲基]-3，5，6-三甲基吡嗪(A32)，淡黃色晶體，產(chǎn)率為47％，mp74-76℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2935.95(CH)，1630.00(C＝O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)7.27(t，2H，Ar-H，J＝5.15Hz)，7.20(d，3H，Ar-H，J＝7.57Hz)，2.90-3.59(m，8H，CH2)，2.60(2H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，2.44(t，2H，J＝4.73Hz)，2.36(t，2H，J＝4.58Hz)；ESI-MS353.3(M+1)。
實施例18.2-(4-甲基磺?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A35)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-甲基磺?；哙悍磻?yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝3∶1，正己烷重結(jié)晶，得2-(4-甲基磺?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A35)，白色晶體，產(chǎn)率為41％，mp116-117℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2947.79(CH)，1641.98(C＝C)，1324.32(SO2)，1161.38(SO2)，1132.50(SO2)；1H-NMR(CDCl3，δppm)3.75(2H，CH2)，3.31-3.32(m，8H，CH2)，2.79(3H，SO2CH3)，2.57(s，3H，CH3)，2.54(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)；ESI-MS299.4(M+1)。
實施例19.2-(4-乙氧羰基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A36)的制備如實施例11所述的方法，所不同的是將實施例1制備的中間體(2)與實施例2制備的中間體N-乙氧羰基哌嗪反應(yīng)，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝4∶1，正己烷重結(jié)晶，得2-(4-乙氧羰基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A36)，淡黃色晶體，產(chǎn)率為58％，mp94-96℃。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)2929.29(CH)，1702.38(C＝O)，1236.10(C-O)，1129.85(C-O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)3.44-4.13(m，10H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，2.47(s，3H，CH3)，2.44(2H，CH2)，1.24(t，3H，CH3，J＝7.12Hz)；ESI-MS293.4(M+1)。
實施例20.2-(4-水楊?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A39)的制備將實施例4制備的2-(4-乙酰水楊?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A1)10mmol與氨水(25-28％，50mmol)混合，室溫攪拌5h，氯仿提取，提取液蒸干，快速柱分離，洗脫劑為氯仿∶丙酮＝1∶1，得2-(4-水楊酰基-1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪(A39)，油狀物，產(chǎn)率為51％。
光譜分析數(shù)據(jù)IR(KBr，cm-1)3065.70(OH)，2919.83(CH)，1614.15(C＝O)；1H-NMR(CDCl3，δppm)9.68(s，1H，OH)，7.26(m，1H，Ar-H)，7.20(d，1H，Ar-H，J＝7.72Hz)，6.96(m，1H，Ar-H)，6.82(t，1H，Ar-H，J＝7.33Hz)，2.58-3.70(m，10H，CH2)，2.56(s，3H，CH3)，2.48(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)；ESI-MS341.4(M+1)。
權(quán)利要求
1.川芎嗪?；哙貉苌铮涮卣髟谟?，具有如下結(jié)構(gòu)通式 其中RCO-為乙酰水楊?；?、煙酰基、異煙酰基、[2-(4-氯苯氧基)-2-甲基-]丙?；?、肉桂?；?、4-氟肉桂?；?、4-氯肉桂?；?-溴肉桂?；?、4-甲基肉桂?；?-甲氧基肉桂?；?、2，5-二甲氧基肉桂酰基、3，4-二甲氧基肉桂?；?、2，3-二甲氧基肉桂?；⒁阴０⑽乎；?-硝基肉桂?；?、呋喃甲?；?、3，4，5-三甲氧基苯甲?；⒈郊柞；?、2-甲氧基苯甲?；?、4-甲氧基苯甲?；?、3，4-甲氧基苯甲?；?、2-氯苯甲?；?、3-氯苯甲?；?、4-氯苯甲?；?、2，4-二氯苯甲?；?、2-碘苯甲酰基、4-碘苯甲?；?、4-硝基苯甲?；?、3，5-二硝基苯甲?；⒈揭阴；?、4-硝基苯乙酰基、β-苯丙酰基、苯磺?；?-甲基苯磺?；⒓谆酋；?、乙氧羰基、氯乙?；?、苯乙二酮基或水楊酰基。
2.如權(quán)利要求1所述的川芎嗪酰基哌嗪衍生物，其特征在于，具有如下結(jié)構(gòu)之一
3.權(quán)利要求2所述川芎嗪酰基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于，將中間體N-?；哙?和中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2用甲苯溶解，再加入三乙胺、碘化鈉，加熱回流10h，過濾，濾液減壓蒸干，得油狀物，然后經(jīng)分離、純化得川芎嗪?；哙貉苌顰6-8，16-28，30，32-36；反應(yīng)式如下 將中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪4用二氯甲烷溶解，加入無水碳酸鈉，滴加有機酰氯的二氯甲烷溶液，回流10h，過濾，濾液蒸干，得油狀物，然后經(jīng)分離、純化得川芎嗪?；哙貉苌顰1-5，9-15，29，31，37，38；反應(yīng)式如下 將2-(4-乙酰水楊?；?1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪A1與氨水混合，室溫攪拌5h，氯仿提取，提取液蒸干，得油狀物，快速柱層析分離，得川芎嗪?；哙貉苌顰39，反應(yīng)式如下
4.如權(quán)利要求3所述川芎嗪酰基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于，所述中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2是按如下方法制備的將川芎嗪三水合物、冰醋酸和30％過氧化氫的混合物于70℃加熱反應(yīng)4h，補充加入等量30％過氧化氫，反應(yīng)4h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，冷卻至室溫，以50％氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH＝10，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸去三氯甲烷，得到川芎嗪單氮氧化合物粗品；加入醋酐，加熱回流2.5h，TLC監(jiān)測至反應(yīng)完全，減壓蒸除過量的醋酐，得到黑色漿狀川芎嗪乙?；?，冷卻后加入20％氫氧化鈉溶液，放置過夜，三氯甲烷提取，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸除溶劑，得2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪粗品1，以正己烷重結(jié)晶，得黃色針狀結(jié)晶，將2-羥甲基-3，5，6-三甲基吡嗪1用二氯甲烷溶解，取氯化亞砜，在冰浴條件下逐滴加入二氯甲烷溶液，冰浴反應(yīng)30min，再室溫反應(yīng)2.5h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑，得黃色固體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2，反應(yīng)式如下
5.如權(quán)利要求3所述川芎嗪?；哙貉苌锏闹苽浞椒?，其特征在于，所述中間體N-?；哙?是按如下方法制備的有機羧酸和氯化亞砜在圓底燒瓶中加熱回流反應(yīng)5h，蒸除過量氯化亞砜，殘余物進行減壓蒸餾，得酰氯衍生物；六水哌嗪與冰醋酸在圓底燒瓶中攪拌至溶解，室溫下滴加已合成的酰氯衍生物，攪拌2h，加水，再用氫氧化鈉溶液調(diào)pH＝12，冷卻放置，過濾除去少量雙?；a(chǎn)物，濾液用三氯甲烷提取，水洗至中性，蒸除三氯甲烷后得白色或黃色固體，用苯-石油醚重結(jié)晶得精品N-?；哙?；上述的有機羧酸是乙酰水楊酸、煙酸、異煙酸、2-(4-氯苯氧基)-2-甲基丙酸、肉桂酸、4-鹵代肉桂酸、4-甲基肉桂酸、4-甲氧基肉桂酸、2，5-二甲氧基肉桂酸、3，4-二甲氧基肉桂酸、2，3-二甲氧基肉桂酸、乙酰阿魏酸、3-硝基肉桂酸、呋喃甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、苯甲酸、2-甲氧基苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、3，4-二甲氧基苯甲酸、2-氯苯甲酸、3-氯苯甲酸、4-氯苯甲酸、2，4-氯苯甲酸、2-碘苯甲酸、4-碘苯甲酸、4-硝基苯甲酸、3，5-二硝基苯甲酸、苯乙酸、4-硝基苯乙酸、β-苯丙酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、甲基磺酸、乙酸或氯乙酸。
6.如權(quán)利要求3所述川芎嗪酰基哌嗪衍生物的制備方法，其特征在于，所述中間體2-(1-哌嗪基甲基)-3，5，6-三甲基吡嗪4是按如下方法制備的將無水哌嗪用三氯甲烷溶解，冰浴條件下向此溶液中滴加中間體2-氯甲基-3，5，6-三甲基吡嗪鹽酸鹽2的三氯甲烷溶液，室溫反應(yīng)5h，用氨水洗滌，有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸除溶劑，得黑色油狀物粗品，正己烷重結(jié)晶，得白色結(jié)晶。
7.川芎嗪?；哙貉苌锼幬锝M合物，含有權(quán)利要求1所述的川芎嗪酰基哌嗪衍生物，與藥用輔料制成不同劑型的藥物。
8.權(quán)利要求1所述的川芎嗪?；哙貉苌锏膽?yīng)用，用于制備血管內(nèi)皮細胞修復(fù)與保護藥物或抗血小板凝集藥物。
全文摘要
川芎嗪?；哙貉苌?、制備方法和藥物組合物與應(yīng)用，屬于川芎類衍生物藥物技術(shù)領(lǐng)域。川芎嗪?；哙貉苌锞哂腥缟辖Y(jié)構(gòu)通式，用N－?；哙和ㄟ^對2－氯甲基－3，5，6－三甲基吡嗪鹽酸鹽的哌嗪環(huán)的烴化反應(yīng)，得川芎嗪?；哙貉苌顰6－8，16－28，30，32－36；用2－(1－哌嗪基甲基)－3，5，6－三甲基吡嗪通過對2－氯甲基－3，5，6－三甲基吡嗪鹽酸鹽的哌嗪環(huán)的?；磻?yīng)，得川芎嗪?；哙貉苌顰1－5，9－15，29，31，37，38；用氨水對化合物A1進行氨解，得川芎嗪?；哙貉苌顰39。川芎嗪?；哙貉苌锱c藥用輔料制成不同劑型的藥物組合物，用于制備血管內(nèi)皮細胞修復(fù)與保護藥物或抗血小板凝集藥物。
文檔編號A61P3/00GK1775762SQ20051004530
公開日2006年5月24日 申請日期2005年12月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月6日
發(fā)明者劉新泳, 徐文方, 程先超, 李錦 申請人:山東大學