專利名稱：異喹啉衍生物治療癌癥和map激酶相關(guān)疾病的用途的制作方法
發(fā)明概述本發(fā)明涉及某些化合物能夠抑制在MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑中起作用的絲氨酸/蘇氨酸激酶——RAF激酶的這一發(fā)現(xiàn)，以及涉及化合物用于治療以MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑中信號過強(qiáng)為特征的疾病(例如像某些癌癥一樣的增殖性疾病)的用途。
背景技術(shù)：
細(xì)胞通過使用多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，使其核與細(xì)胞外環(huán)境進(jìn)行多方面的交流。許多此種信號是通過能夠以轉(zhuǎn)移磷酸基團(tuán)而活化多種因子的蛋白激酶傳遞的。如bcr-abl激酶抑制劑imatinib所表明的，由抑制適當(dāng)?shù)募っ富钚运鶎?dǎo)致的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的破環(huán)具有臨床利益，所述抑制劑的甲磺?；}以商標(biāo)GLEEVEC(在美國)或者GLIVEC投放市場。
MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑是本領(lǐng)域已知的生長因子從細(xì)胞外環(huán)境向細(xì)胞核傳遞其增殖信號的途徑之一。生長因子激活位于細(xì)胞表面的跨膜受體，接著活化的受體啟動了信號級聯(lián)，由此RAS被活化并招募RAF激酶到活化激酶的細(xì)胞膜處，并依次激活MEK激酶，然后MEK激酶激活ERK激酶?；罨腅RK激酶可以移動進(jìn)入細(xì)胞核并在細(xì)胞核內(nèi)激活多種轉(zhuǎn)錄因子。該途徑的異常能夠?qū)е禄蜣D(zhuǎn)錄、細(xì)胞生長的改變并通過負(fù)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和傳遞增殖和生血管信號而助于腫瘤的發(fā)生。已經(jīng)證明RAF激酶抑制劑能夠阻斷MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑中的信號。
已知RAF激酶家族有三個成員，命名為C-RAF(也叫做RAF-1)、B-RAF和A-RAF。據(jù)報道，在包括59％的所測試的黑素瘤細(xì)胞系在內(nèi)的人類癌癥中，B-RAF激酶的激活常常是通過幾個體細(xì)胞點突變之一實現(xiàn)。見Davies，H.等，Nature 417，949-954(2002)。令人驚奇地，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在本文所述方法中使用的化合物是RAF激酶的有效抑制劑，特別是C-RAF激酶和野生型和突變型B-RAF激酶，特別是B-RAF激酶的V599E突變體。
由于抑制血管內(nèi)皮生長因子的能力而作為抗血管生成劑在本發(fā)明治療方法中使用的化合物描述于如此處全文引入為參考的WO 00/94495、美國公開申請2002-0010191和WO 01/58899。然而，這些出版物沒有提出異喹啉化合物具有抑制RAF激酶的特性并且也沒有提出該化合物具有與RAF激酶抑制特性相關(guān)的治療上的利益。
這些化合物的RAF激酶抑制特性使得它們可用作治療增殖性疾病的治療劑，所述的增殖性疾病的特征在于異常的MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑，特別是由RAF激酶過量表達(dá)和RAF激酶激活型突變所表征的許多癌癥，例如具有突變B-RAF，特別是帶有V599E突變體的突變B-RAF的黑素瘤。本發(fā)明還提供了使用所述化合物治療其它由異常的激酶信號傳導(dǎo)途徑所表征疾病的方法，特別是B-RAF發(fā)生了突變，例如具有突變B-RAF的良性Nevi痣。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及治療具有MAP激酶途徑信號過強(qiáng)所表征疾病的病人的方法，其包括給病人施用有效抑制RAF激酶的量的式(I)化合物或者式I化合物的N-氧化物或其可藥用鹽。
其中
r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T相互獨(dú)立的為N或CH，條件是A、B、D、E和T中至少一個但不多于三個為N；G是低級亞烷基、-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-SO2-、氧雜(-O-)、硫雜(-S-)或者-NR-，或者是被酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代的低級亞烷基。
Q是低級烷基，特別是甲基；R是H或者低級烷基；X是Y、-N(R)-、氧雜或硫代；優(yōu)選地為-NH-；Y是H、非取代或者取代的低級烷基、芳基、雜芳基或非取代或取代環(huán)烷基；和Z是氨基、單取代或者二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷酰基、氨基甲酰基、N-單或N，N-二取代氨基甲?；㈦呋?、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯低級烷基硫基、烷基苯硫雜基、苯亞磺酰基、苯低級烷基亞磺酰基、烷基苯亞磺?；?、苯磺?；?、苯低級烷基磺?；蛘咄榛交酋；?，并且如果存在不止一個Z基團(tuán)(m≥2)則取代基Z是相同的或者不同的。
本發(fā)明還涉及式I化合物在制備藥物上的用途，所述的藥物用于治療由MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑中信號過強(qiáng)所表征的疾病。
患者是患有由MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑中信號過強(qiáng)所表征的疾病的哺乳動物，通常是人。這可以通過諸如Western印跡分析或者免疫組織化學(xué)的方法使用針對途徑中成員的活化狀態(tài)特異抗體來測定。此類方法對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是已知的。
通常，由MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑信號過強(qiáng)所表征的疾病是增殖性疾病，特別是由增強(qiáng)的RAF激酶活性所表征的癌癥，例如過表達(dá)野生型B-RAF激酶或者C-RAF激酶的癌癥或者表達(dá)活化的突變型RAF激酶(例如突變型B-RAF激酶)的癌癥。已經(jīng)檢測到突變型RAF激酶的癌癥包括黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌以及肝癌。在許多黑素瘤中突變的B-RAF激酶特別普遍。
依照本發(fā)明，從病人獲取疾病組織樣本，例如作為活組織檢查和切除術(shù)的結(jié)果，并且檢測組織是否產(chǎn)生突變型的RAF激酶，例如突變型的B-RAF激酶，或者組織是否過表達(dá)野生型的RAF激酶，例如野生型B-或C-RAF激酶。如果測試結(jié)果表明在疾病組織中過量產(chǎn)生突變型的RAF激酶或者RAF激酶，則可以通過給病人施用RAF抑制有效量的本文所述RAF抑制劑化合物來進(jìn)行治療。
根據(jù)本發(fā)明，本文所述式I化合物還有的用途是制備治療黑素瘤的藥物，其中包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織，以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型RAF激酶或者過表達(dá)野生型RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過表達(dá)野生型RAF激酶或者表達(dá)活化的突變型B-RAF激酶，則用有效抑制RAF激酶的量的式I化合物治療病人。
然而，如果信號級聯(lián)中另外的激酶是導(dǎo)致信號途徑信號過強(qiáng)的原因，則用RAF激酶抑制化合物下調(diào)MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑也是可能的。因此，本發(fā)明還涉及治療由RAF激酶的激活突變或過表達(dá)以外的原因引起的MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑信號過強(qiáng)所表征的疾病。
通過本領(lǐng)域普遍已知的方法將組織樣本進(jìn)行測試。例如，通過等位基因特異的PCR、DHPLC、質(zhì)譜檢測B-RAF突變，和通過免疫組織化學(xué)、免疫熒光或者Western印跡分析檢測野生型B-RAF或C-RAF。用于檢測B-RAF突變特別有用的方法是基于實施例D1所述方法的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。使用相似的方法確定信號級聯(lián)中其它的激酶是否突變或者過表達(dá)。
本發(fā)明特別重要的方面涉及治療黑素瘤的方法，所述方法包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織，以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型RAF激酶或者過表達(dá)野生型RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過表達(dá)野生型RAF激酶或者表達(dá)活化的突變型B-RAF激酶，則用有效抑制RAF激酶的量的本文所述化合物治療病人。
該實施方案的一個重要方面涉及治療黑素瘤的方法，所述方法包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織，以確定黑素瘤組織是否過表達(dá)B-RAF激酶或者C-RAF激酶活性和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過表達(dá)B-RAF激酶或者C-RAF激酶活性，則用有效抑制RAF激酶的量的本文所述RAF抑制化合物治療病人。
該實施方案的另一個重要方面涉及治療黑素瘤的方法，所述方法包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織，以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型B-RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織表達(dá)突變型B-RAF激酶，則用有效抑制RAF激酶的量的本文所述RAF抑制化合物治療病人。
通常，B-RAF激酶突變是所引用的Davies等的文章中所描述的那些突變中的一種。將這些突變總結(jié)于表1。
表1

因此，本發(fā)明具體涉及治療由活化的突變型B-RAF激酶所表征的疾病的方法，所述方法包括檢測來自病人的組織樣本中B-RAF激酶基因或蛋白質(zhì)的突變并用有效B-RAF激酶抑制化合物，特別是本文所述化合物來治療病人。
本發(fā)明的重要方面包括這些情況，其中突變B-RAF激酶表現(xiàn)為表1所述的突變，特別是V599E突變。
本發(fā)明特別重要的方面包括這些情況，其中疾病是黑素瘤并且突變B-RAF激酶表現(xiàn)為表1所述的突變，特別是V599E突變。
因此，本發(fā)明包括治療由突變B-RAF激酶所表征的疾病的方法，所述方法包括在來自病人的組織中檢測選自G1388A、G1388T、G1394C、G1394A、G1394T、G1403C、G1403A、G1753A、T1782G、G1783C、C1786G、T1787G、T1796A和TG1796-97AT的B-RAF激酶基因突變或者檢測RAF激酶蛋白質(zhì)中相應(yīng)的突變并用本文所述有效B-RAF激酶抑制化合物治療病人。
除非另外指出，本文所使用的用于描述式(I)化合物的一般術(shù)語在本文的公開內(nèi)容中具有下面的意思。
術(shù)語“低級”意思是指基團(tuán)具有最多7個，特別是最多4個碳原子，所述基團(tuán)是不分支的或者一次或多次分支。
提到的任何化合物、鹽等的復(fù)數(shù)形式通常理解為包括一種化合物、一種鹽等。
可能存在的不對稱碳原子(例如式I化合物(或其N-氧化物)，其中n＝1并且R是低級烷基)可以具有(R)、(S)或者(R，S)構(gòu)型，優(yōu)選(R)或者(S)構(gòu)型。在雙鍵或者環(huán)上的取代基可以是順式(＝Z)或者反式(＝E)形式。因此，本發(fā)明化合物可以是同分異構(gòu)體混合物的形式或者純的同分異構(gòu)體形式，優(yōu)選以對應(yīng)異構(gòu)的純非對映異構(gòu)體形式。
指數(shù)r優(yōu)選0或1。
指數(shù)n優(yōu)選0或1，特別是0。也可以是2。
指數(shù)m優(yōu)選0、1或2，特別是0或1。
在式I的環(huán)成員A、B、D、E和T中，不超過3個為N并且其它的是CH或CQ。優(yōu)選地，環(huán)成員A、B、D和E分別是CH或CQ并且T是N。
當(dāng)G是二價基團(tuán)-CH2-O-、-CH2-S-或者-CH2-NH-時，每種情況下，亞甲基結(jié)合到具有環(huán)成員A、B、D、E和T的環(huán)上，同時雜原子(O、S或NH)結(jié)合到式I的異喹啉環(huán)上。
低級亞烷基G可以是分支的或者優(yōu)選不分支的，特別是分支的或者優(yōu)選不分支的C1-C4低級亞烷基，特別是亞甲基(-CH2-)、乙烯基(-CH2-CH2-)、三亞甲基(-CH2-CH2-CH2-)、四亞甲基(-CH2-CH2-CH2-CH2-)。優(yōu)選G是亞甲基。低級亞烷基G優(yōu)選為非替代的，但可以是由酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代。
在酰氧基取代的低級亞烷基G的取代基中，?；鶅?yōu)選芳羰基氧，其中酰基如下所定義，特別是苯甲酰氧基或低級烷酰氧基，更特別是苯甲酰氧基；酰氧基取代的低級亞烷基特別是苯甲酰氧基取代的亞甲基。
作為羥基取代低級亞烷基G優(yōu)選是羥亞甲基(-CH(OH)-)。
優(yōu)選的氧取代的低級亞烷基G取代基是羰基(-C(O)-)。
鹵素取代的低級亞烷基G的取代基是單鹵至全鹵取代的亞烷基，例如二氟亞甲基。
低級烷基特別是C1-C4烷基，例如正丁基、仲丁基、叔丁基、正丙基、異丙基或者特別是甲基或乙基，或者在Y是低級烷基的情況下，特別為異戊基。
芳基優(yōu)選是具有6-14個碳原子的芳香基，例如苯基、聯(lián)苯基、萘基、芴基或菲基，特別是苯基，芳基是非取代的或者是一個或多個優(yōu)選最多三個特別是一個或兩個取代基取代的，特別是被選自氨基、單或二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或者酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷?；?、氨基甲?；-單或者N，N-二取代氨基甲?；?、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯低級烷基硫、烷基苯硫基、苯亞硫?；⒈降图壨榛鶃喠蝓；?、烷基苯基亞硫?；?、苯磺?；?、苯低級烷磺酰基、烷基苯磺?；?、低級基烷(例如乙烯基)、苯基、芳烷基(例如苯甲基或1-甲基-1-苯乙基)、低級烷基硫(例如甲硫基)、低級烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基)、低級烷?；?例如乙?；?、非取代或者取代的環(huán)烷基、低級烷基巰基(例如甲基巰基(-S-CH3))、鹵代低級烷基巰基(例如三氟甲基巰基(-S-CF3))、低級鏈烷磺?；?、鹵代低級鏈烷磺?；?例如特別是三氟甲烷磺?；?、二羥基硼(-B(OH)2))、雜環(huán)基和低級亞烷基二氧基(例如亞甲二氧基)的結(jié)合環(huán)上相鄰碳原子的取代基取代，或者其中兩個相鄰位置被亞烷基或者亞鏈烯基取代以形成融合到芳基環(huán)的5-7個成員的環(huán)；芳基優(yōu)選非取代苯基或者被一個或兩個相同或不同的來自以上基團(tuán)取代的苯基，取代基尤其是鹵素(特別是氟或氯)、低級烷基(特別是甲基、乙基、丙基或叔丁基)、鹵代低級烷基(特別是三氟甲基)、羥基、低級烷氧基(特別是甲氧基或乙氧基)、苯基(低級烷氧基)、低級烷?；?例如乙?；?、苯氧基、鹵代低級烷氧基(如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基)、低級烷氧基羰基(如乙氧基羰基)、低級烷基巰基(如甲基巰基)、鹵代低級烷基巰基(如三氟甲基巰基)、羥基低級烷基(如羥甲基)、低級烷磺酰基(如甲烷磺?；?、鹵代低級烷磺?；?如三氟甲烷磺酰基)、苯基磺?；桓貏e是被一個或兩個相同的或不同的選自非取代或取代低級烷基(優(yōu)選甲基、叔丁基或三氟甲基)和鹵素(特別是氟或氯)的取代基取代。
雜芳基優(yōu)選結(jié)合環(huán)為非飽和雜環(huán)基團(tuán)并且優(yōu)選是單、雙或三環(huán)；其中在結(jié)合到式I分子的基團(tuán)的環(huán)中，至少一個或多個(優(yōu)選1到4)碳原子，特別是一或兩個相應(yīng)芳基的碳原子被選自氮、氧和硫的雜原子取代，結(jié)合環(huán)優(yōu)選具有4-12(特別是5-7)個環(huán)原子；其中雜芳基是非取代的或者被一個或者多個特別是一到三個相同或不同取代基取代，其中所述的取代基選自上面提到的作為芳基取代基的取代基；并且特別是選自咪唑基、噻吩基、呋喃基、吡喃基、噻蒽基(thianthrenyl)、異苯并呋喃基、苯并呋喃基、苯并吡喃基(chromenyl)、2H-吡咯基、吡咯基、低級烷基取代的咪唑基、苯并咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、indolizinyl、異吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、三唑基、四唑基、purinyl、4H-喹嗪基、異喹啉基、喹啉基、2，3-二氮雜萘基、1，5-二氮雜萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、喋啶基(pteridinyl)、咔唑基、菲啶基、吖啶基、perimidinyl、菲咯啉基和furazanyl的雜芳基，這些基團(tuán)各自通過具有至少一個雜原子的環(huán)連接到式I分子的基團(tuán)上；特別優(yōu)選吡啶基。
單或二取代的氨基特別被一個或者兩個相同或者不同的低級烷基(例如甲基)、羥基低級烷基(例如2-羥基乙基)、苯基低級烷基、低級烷?；?例如乙?；?、苯甲?；?、取代苯甲?；〈陌被?，其中苯基是非取代的或者特別是被一個或多個(優(yōu)選一個或兩個)取代基取代的，其中所述取代基選自硝基和氨基，或者也選自鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；桶被柞；?；苯基低級烷氧基羰基，其中苯基是非取代的或者特別是被一個或者多個優(yōu)選一個或者兩個取代基取代的，其中所述取代基選自硝基和氨基，或者也選自鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；桶被柞；徊⑶覂?yōu)選N-低級烷基氨基，例如N-甲基氨基、羥基低級烷基氨基(例如2-羥基乙氨基)、苯低級烷基氨基(例如苯氨基)、N，N-二低級烷基氨基、N-苯低級烷基-N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基苯氨基、低級烷?；被?例如乙酰氨基)或者選自苯甲?；被捅降图壨檠趸驶被娜〈?，其中在每一種情況下，苯基是非取代的或者特別是被硝基和氨基，或者也被鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、或者被氨基甲?；〈?、或者備選地或除前述的基團(tuán)之外還有氨基羰基氨基。
鹵素特別是氟、氯、溴或碘，更特別是氟、氯或溴，特別是氟和氯。
烷基優(yōu)選最多12個碳原子并且特別是低級烷基，更特別是甲基，或者也是乙基、正丙基、異丙基或者叔丁基。
取代烷基特別是低級烷基，優(yōu)選甲基，其可以包含一個或多個特別是最多3個取代基，其中所述取代基特別是選自鹵素，特別是氟例如通常是三氟甲基或者全氟烴基，還選自氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、N-低級烷?；被⒘u基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基和苯低級烷氧基羰基。三氟甲基是重要的取代烷基。
醚化羥基特別是C8-C20的烷氧基例如正癸氧基、低級烷氧基(優(yōu)選)例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或正戊氧基、苯低級烷氧基例如芐氧基，或者也是苯氧基，或者備選地或除上述的C8-C20烷氧基之外還有例如正癸氧基、鹵代低級烷氧基，例如三氟甲氧基或者1，1，2，2-四氟乙氧基。
酯化羥基特別是低級烷?；趸⒈郊柞Ｑ趸?、低級烷氧基羰基氧基(例如叔丁氧基羰基氧基)、或者苯低級烷氧基羰基氧基(例如芐氧基羰基氧基)。
酯化羧基特別是低級烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基或者乙氧基羰基)、苯低級烷氧基羰基或者苯氧基羰基。
烷?；貏e是烷基羰基，更特別是低級烷?；缫阴；?。
N-單取代或N，N-二取代氨基甲?；貏e是在末端氮上被一個或者兩個低級烷基、苯低級烷基或者羥基低級烷基取代基取代的氨基甲?；?。
烷基苯硫基特別是低級烷基苯硫基。
烷基苯基亞硫?；貏e是低級烷基苯基亞硫?；?br> 烷基苯基磺?；貏e是低級烷基苯基磺酰基。
吡啶基Y優(yōu)選3-或者4-吡啶基。
非取代或者取代的環(huán)烷基優(yōu)選C3-C8環(huán)烷基，所述的C3-C8環(huán)烷基是非取代的或者是以與芳基(特別限定的是苯基)相同的方式進(jìn)行取代。優(yōu)選環(huán)己基或者還是環(huán)戊基或環(huán)丙基。還優(yōu)選4-低級烷基環(huán)己基，例如4-叔丁基環(huán)己基。
如果Z存在的話，則Z優(yōu)選是氨基、羥基低級烷基氨基(例如2-羥乙基氨基)、低級烷?；被?例如乙酰氨基)、硝基苯甲酰氨基(例如3-硝基苯甲酰氨基)、氨基苯甲酰氨基(例如4-氨基苯甲酰氨基)、苯基低級烷氧基羰基氨基(例如芐氧基羰基氨基)、或者鹵素(例如溴)；優(yōu)選只存在一個取代基(m＝1)，特別是最后提到的取代基中之一，特別是鹵素。非常特別優(yōu)選式I化合物(或其N-氧化物)，其中Z不存在(m＝0)。
雜環(huán)基特別是具有1個或者兩個選自氮、氧和硫的雜原子的5或者6元雜環(huán)，其中雜環(huán)可以是不飽和的或者完全或部分飽和的，并且是非取代的或者特別是被低級烷基(例如甲基)取代的；優(yōu)選選自2-甲基-嘧啶-4-基、唑-5-基、2-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基、1H-吡唑-3-基和1-甲基-吡唑-3-基。
以能夠被低級亞烷基二氧(例如亞甲二氧)取代的苯基形式的、連接到兩個相鄰的碳原子上的芳基優(yōu)選是3，4-亞甲基二氧苯基。
式I化合物的N-氧化物優(yōu)選這樣的N-氧化物，即異喹啉環(huán)氮或者在具有環(huán)原子A、B、D和E的環(huán)中的氮攜帶有氧原子，或者不止一個上述的氮原子攜帶有一個氧原子。
鹽特別是式I化合物(或其N-氧化物)的可藥用鹽。
作為酸加成鹽的這類鹽(特別是可藥用鹽)通過例如具有堿性氮原子的式I化合物(或其N-氧化物)與優(yōu)選有機(jī)或者無機(jī)酸反應(yīng)形成。適宜的無機(jī)酸有例如氫鹵酸(諸如鹽酸)、硫酸、或者磷酸。適宜的有機(jī)酸有例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、甘醇酸(glycolic acid)、乳酸、2-羥基丁酸、葡糖酸、葡庚糖酸、反丁烯二酸、琥珀酸、脂肪酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、葡糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸(諸如谷氨酸、天門冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰氨基乙酸、N-乙酰天冬酰胺、N-乙酰半胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸絲氨酸)、2-或3-甘油磷酸、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、環(huán)己烷羧酸、苯甲酸、水楊酸、1-或3-羥基萘基-2-羧酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酸基苯甲酸、4-氨基水楊酸、苯二甲酸、苯乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲磺酸或者乙磺酸、2-羥基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-環(huán)己氨基磺酸、N-甲基磺酸、N-乙基磺酸、N-丙基磺酸或者其它有機(jī)質(zhì)子酸，例如抗壞血酸。
當(dāng)存在帶負(fù)電荷的基團(tuán)(例如羧基或者磺基)時，也可以形成具有堿基的鹽(例如金屬鹽或者銨鹽)，例如堿金屬或者堿土金屬鹽(諸如鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽或者鈣鹽)，或者具有氨或適當(dāng)有機(jī)胺的銨鹽，如叔一元胺(例如三乙胺或者三(2-羥乙基)胺)，或者具有環(huán)堿的銨鹽，如N-乙基哌啶或者N，N′-二甲基-哌嗪。
當(dāng)在同一個分子中存在堿性基團(tuán)和酸性基團(tuán)時，式I化合物(或其N-氧化物)也可以形成內(nèi)鹽。
為了分離或純化，也可以使用非藥用鹽，例如苦味酸鹽或者高氯酸鹽。只有可藥用鹽或者游離化合物(任選地以藥物組合物的形式)可以用于治療，因此優(yōu)選可藥用鹽或者游離化合物。
考慮到新化合物游離形式與鹽形式之間的密切關(guān)系，其中所述的鹽也包括那些如在純化新化合物或者對它們的鑒定中作為中間物所使用的鹽，在上文和下本文提到的任何游離化合物也應(yīng)當(dāng)適當(dāng)和有利地理解為包括相應(yīng)的鹽。
本發(fā)明還涉及抑制RAF激酶的方法，其中包括將RAF激酶與式I(I)化合物相接觸。優(yōu)選地，RAF激酶是B-RAF激酶或者C-RAF激酶，或者突變型RAF激酶，特別是突變型B-RAF激酶，特別是V599E突變體。RAF激酶可以是分離的或者處于細(xì)胞環(huán)境中。
如上所述，式I化合物(或其N-氧化物)具有有價值的藥理學(xué)特性。
式I化合物(或其N-氧化物)可以單獨(dú)或者與一種或多種其它治療劑組合施用，可以使用固定組合或者以一段時間內(nèi)交錯方式或者相互獨(dú)立地方式施用本發(fā)明的化合物和一種或多種治療試劑，或者可以組合施用固定組合和一種或多種其它治療試劑。具體而言，用于腫瘤治療的式I化合物(或其N-氧化物)的施用可以單獨(dú)進(jìn)行或者另外與化學(xué)療法(與一種或多種其它化學(xué)治療劑特別是細(xì)胞抑制劑或者與激素或者具有激素樣活性的化合物組合)、放射療法、免疫療法、外科手術(shù)治療或它們的組合一起組合進(jìn)行。長期治療也是可能的，作為與其它治療方法(如剛剛提到的那些)聯(lián)合的輔助治療。也可以是對維持腫塊消退后，甚至化學(xué)預(yù)防治療后病人(例如處于危險之中的病人)狀態(tài)的治療。
已經(jīng)考慮將本發(fā)明的化合物與一種或多種抗增殖的、細(xì)胞生長抑制的或者毒害細(xì)胞的化合物聯(lián)合使用而作為治療劑，其中所述的抗增殖的、細(xì)胞生長抑制的或者毒害細(xì)胞的化合物例如一種或多種選自多胺生物合成抑制劑、不同蛋白激酶特別是蛋白激酶C或酪氨酸蛋白激酶(如表皮生長因子受體蛋白酪氨酸激酶)的抑制劑、生長因子(如血管內(nèi)皮生長因子)抑制劑、細(xì)胞因子、負(fù)性生長調(diào)節(jié)物(如TGF-β或者IFN-β)、芳化酶抑制劑、激素或者激素類似物、和常規(guī)細(xì)胞生長抑制劑中的化學(xué)治療劑。
本發(fā)明的化合物旨在不但用于(預(yù)防性并且優(yōu)選地為治療性)治療人類，而且還用于治療其它溫血動物，例如具有商業(yè)用途的動物，如小鼠、兔或者大鼠、或者豚鼠之類的嚙齒類。
通常，本發(fā)明還涉及式I化合物(或其N-氧化物)在抑制RAF激酶活性上的用途。
式I化合物(或其N-氧化物)還可以用于診斷目的，例如在加入此種化合物后，檢查從作為原始“宿主”的溫血動物(優(yōu)選人類)得到并移植入小鼠的瘤塊是否為減少性生長，從而研究它們對所述化合物的敏感性，以允許更好的確定和測定治療原始宿主內(nèi)的腫瘤疾病的可能的方法。
在下面提到的優(yōu)選的式I化合物中，來自上述一般定義的取代基的定義可以方便地被使用，例如為了用更加特異的定義或者特別是用所標(biāo)明的優(yōu)選定義替換更加一般的定義；在每種情況下優(yōu)選的是上面作為優(yōu)選標(biāo)明的或通過實例方式提及的定義。
優(yōu)選以下式I化合物或其鹽或N-氧化物，其中r是0-2，優(yōu)選0；n是0或1；m是1或特別是0；A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N，或者A、B、E和T是CH并且D是N，或者A、T、D和E是CH并且B是N；其中優(yōu)選A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N。
G是低級亞烷基，特別是亞甲基或者乙烯(-CH2-CH2-)、-CH2-NH-、-CH2-O-、羥基亞甲基或者苯甲酰氧基亞甲基；Q是連接到A、D或者A和D的甲基；R是H或者低級烷基，特別是H或者甲基；X是-NR-、氧雜或者硫雜，特別是-NH-；Y是非取代的或者一個或兩個相同或者不同的、結(jié)合到兩個相鄰碳原子上的取代基取代的苯基，所述取代基選自氨基、低級烷酰基氨(特別是乙酰氨基)、鹵素(特別是氟、氯或者溴)、非取代或者取代低級烷基(特別是甲基、乙基、丙基、叔丁基)或者鹵代低級烷基(特別是三氟甲基)、羥基、低級烷氧基(特別是甲氧基或者乙氧基)、苯低級烷氧基(特別是芐氧基)、氰基、低級鏈烯基(如乙烯基)、C8-C12烷氧基(特別是正癸氧基)、低級烷氧基羰基(如叔丁氧基羰基)、氨基甲?；?、低級烷基氨基甲酰基(如N-甲基-或N-叔丁基-氨基甲?；?、低級烷?；?如乙?；?、苯氧基、鹵代低級烷氧基(如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基)、低級烷氧基羰基(如乙氧基羰基)、低級烷基巰基(如甲基巰基)、鹵代低級烷基巰基(如三氟甲基巰基)、羥基低級烷基(如羥甲基或者1-羥甲基)、低級鏈烷磺?；?如甲基磺酰基)、鹵代低級鏈烷磺?；?如三氟甲基磺?；?、苯基磺?；偷图墎喭榛?如亞甲二氧基)，或者其中兩個相臨近位置被亞烷基或者亞鏈烯基取代以形成融合到芳基環(huán)的5-7個原子數(shù)的環(huán)，Y特別是被一種或者兩種選自鹵素(如氯或溴)、非取代低級烷基(如甲基)和鹵取代低級烷基(如三氟甲基)的取代基取代的苯基，Y特別是苯基或者被一種或者兩種相同或不同的取代基取代的苯基，所述取代基特別是鹵素(特別是氟或氯)和/或非取代或取代低級烷基；Z是氨基、N-低級烷基氨基(如N-甲基氨基)、羥基低級烷基氨基(如2-羥基乙氨基)、苯基低級烷基氨基(如芐氨基)、N，N-二低級烷基氨基、N-苯基低級烷基-N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基苯氨基、低級烷?；被?如乙酰氨基)，或選自苯甲酰氨基和苯低級烷氧基羰基氨基的取代基，其中苯基在每種情況下是非取代的或者特別是被硝基或氨基或者鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；〈蛘弑话被柞；〈?，或者Z是鹵素(特別是溴)，更特別地是氨基、乙酰氨基、硝基苯甲酰氨基、氨基苯甲酰氨基、2-羥乙基氨基、芐氧基羰基氨基或溴；和特別優(yōu)選以下式I化合物或其鹽，其中r是0；n是0；m是0；B、D、E和T是CH并且A是N(3-吡啶基)，或者特別地其中A、B、D和E各是CH并且T是N(4-吡啶基)；G是低級亞烷基，特別是亞甲基；X是-NR-，特別是-NH-；Y是非取代的或者被一個或兩個相同或不同取代基取代的苯基，其中所述的取代基選自鹵素(特別是氟或更特別是氯或溴)、低級烷基(特別是甲基)和鹵代低級烷基(特別是三氟甲基)，特別是4-氯苯基、2-，3-或4-甲基苯基、4-氯-5-三氟甲基苯基、3-溴-5-三氟甲基苯基、或者更加特別地是3，5-二甲基苯基，還可以是4-甲基-3-碘苯基、3，4-二(三氟甲基)苯基或者3-溴-4-乙基苯基；特別優(yōu)選以下式I化合物或其鹽(前提是存在形成鹽的基團(tuán))，其中r是0；n是0-2；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；R是H；X是-NR-，特別是-NH-；和Y是非取代苯基或者被取代的苯基，其中所述的取代基是鹵素(特別是氟或氯)或者低級烷基(如甲基或者三氟甲基)、低級烷氧基(特別是甲氧基)，如4-氯苯基、4-甲氧基苯基或者4-三氟甲氧基苯基、萘基、非取代或者被低級烷基(特別是叔丁基)取代的環(huán)己基(如4-叔丁基環(huán)己基)、非取代或者被鹵素(特別是氟)取代的吲哚基(特別是6-氟吲哚-3-基)、或者低級烷基(特別是異戊基)。
具體而言，優(yōu)選以下式I化合物，其中r是0；n是0；m是0；B、D、E和T是CH并且A是N，或者A、B、D和E各是CH并且T是N；G是低級亞烷基；X是-NH-；Y是非取代或者被一種或者兩種相同或者不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。
還可以優(yōu)選以下式I化合物，其中r是0；n是0-2；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；R是H；X是-NR；和Y是非取代的苯基或者被鹵素、低級烷基、低級烷氧基或非取代或被低級烷基取代的環(huán)己基取代的苯基。
具體而言，特別有用的化合物包括如下化合物，其中r是0；n是0；m是0；
A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；X是-NH-；和Y是被一個或兩個相同或者不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。特別優(yōu)選給定的此類化合物，其中Y是在第4位被叔丁基或者三氟甲基取代的苯基。
可以通過本身已知用于其它化合物的方法特別地是通過式II化合物與式III化合物的反應(yīng)來制備本發(fā)明的化合物。
其中r、m、A、B、D、E、T、G、Q和Z如式I化合物中的定義并且L是離核的離去基團(tuán)。
其中n、R、X和Y如式I化合物中的定義，式II和式III化合物中的不參加反應(yīng)的功能基團(tuán)處于被保護(hù)的形式并且如果需要的話可除去存在的任何保護(hù)基團(tuán)，其中當(dāng)存在形成鹽的基團(tuán)并且可以以鹽形式反應(yīng)時，在方法a)中提到的起始化合物也可以是鹽的形式；并且，如果需要，將所得的式I化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)變成不同的式I化合物或其N-氧化物，將游離的式I化合物或其N-氧化物轉(zhuǎn)化成鹽，將所得的式I化合物或其N-氧化物的鹽轉(zhuǎn)化成游離的化合物或者不同的鹽和/或?qū)⑹絀化合物或其N-氧化物的同分異構(gòu)體混合物分離成單獨(dú)的同分異構(gòu)體。
方法改變的詳述除非另外指出，在下面對制備方法更加詳細(xì)的描述中r、n、m、A、B、D、E、G、Q、R、X、Y和Z如式I化合物中的定義。
方法a)在式II化合物中，離核的離去基團(tuán)L特別是鹵素，更特別是溴、碘或者非常特別是氯。
式II化合物和式III化合物之間的反應(yīng)可以在惰性的極性溶劑中進(jìn)行，溶劑特別是醇例如低級鏈烷醇，如甲醇、丙醇或特別是乙醇或者正丁醇，或在沒有添加溶劑的熔化物中進(jìn)行，特別是當(dāng)反應(yīng)物中的一種是液體形式時。反應(yīng)在提高的溫度下進(jìn)行，優(yōu)選從大約60℃至回流溫度，例如在回流溫度下或者在從大約90到大約110℃的溫度。式III化合物也可以以鹽的形式使用，例如以與強(qiáng)酸(如鹵化氫)形成的酸加成鹽的形式，例如鹽酸鹽的形式，或者將相應(yīng)的酸(例如鹽酸)加入到適當(dāng)?shù)娜軇?例如二氧雜環(huán)己烷之類的醚)中。
式II和/或III化合物中的一個或多個其它功能基團(tuán)例如羧基、羥基、氨基或者巰基是以被保護(hù)形式存在的或者必須是以被保護(hù)形式存在的，因為它們不參加反應(yīng)，保護(hù)基團(tuán)是在肽化合物的合成，還有頭孢菌素和青霉素以及核酸衍生物及糖的合成中通常使用的基團(tuán)。保護(hù)基團(tuán)可以已經(jīng)存在于前體中并且保護(hù)所述功能基團(tuán)不進(jìn)行不必要的副反應(yīng)，如酰化、醚化、酯化、氧化、溶劑分解等等。在原材料中的避免發(fā)生反應(yīng)的功能基團(tuán)(特別是羧基、氨基、羥基和巰基)的保護(hù)基團(tuán)(常規(guī)保護(hù)基團(tuán))特別包括那些在肽化合物、頭孢菌素、青霉素或者核酸衍生物及糖的合成中通常使用的保護(hù)基團(tuán)。保護(hù)基團(tuán)可以已經(jīng)存在于前體中并且保護(hù)所述功能基團(tuán)不進(jìn)行不必要的副反應(yīng)，如?；?、醚化、酯化、氧化、溶劑分解等等。在一些情況下，保護(hù)基團(tuán)能夠?qū)е路磻?yīng)具有選擇性，例如立體選擇性。保護(hù)基團(tuán)的特性是它能夠通過例如溶劑分解、還原、光分解或者酶容易地去除，還可以在例如類似于生理條件下的條件下容易地去除，也就是說沒有不利的副反應(yīng)，并且它不存在于終產(chǎn)物中。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知或者能夠容易地發(fā)現(xiàn)在上下文提到的反應(yīng)中哪些保護(hù)基團(tuán)是合適的。
通過此種保護(hù)基團(tuán)進(jìn)行的功能基團(tuán)的保護(hù)、保護(hù)基團(tuán)本身和去除它們的反應(yīng)描述于標(biāo)準(zhǔn)著作，例如J.F.W.McOmie，《Protective Groups inOrganic Chemistry》，Plenum Press，London and New York 1973、Th.W.Greene，《Protective Groups in Organic Synthesis》，Wiley，New York 1981、“The Peptides”，第3卷(E.Gross和J.Meienhofer著)，Academic Press，London and New York 1981、《Methoden der organischen Chemie》，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974、H.-D.Jakubke和H.Jescheit，《Aminosuren，Peptide，Proteine》，VerlagChemie，Weinheim，Deerfield Beach and Basle 1982、以及JochenLehmann，《Chemie der KohlenhydrateMonosaccharide und Derivate》，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974。
優(yōu)選介紹實施例中提到的保護(hù)基團(tuán)并且，需要的話，用與提到的方法類似的方法去除。
額外的操作步驟在必要時進(jìn)行的額外操作步驟中，起始化合物中不參與反應(yīng)的功能基團(tuán)可以以未保護(hù)的形式或者保護(hù)的形式存在，例如通過一種或多種上面方法a)提到的保護(hù)基團(tuán)保護(hù)。然后通過方法a)提到的方法之一將全部或者部分保護(hù)基團(tuán)去除。
可以以本身已知的方式制備含有形成鹽基團(tuán)的式I化合物(或其N-氧化物)的鹽。例如可以通過用如酸或適當(dāng)?shù)年庪x子交換試劑進(jìn)行處理而得到式I化合物或其N-氧化物的酸加成鹽。也可以將具有兩個酸分子的鹽(例如式I化合物(或其N-氧化物)的二鹵化物)轉(zhuǎn)變成式I化合物(或其N-氧化物)每個分子具有一個酸分子的鹽(例如轉(zhuǎn)變成一鹵化物)；這可以通過例如加熱到熔化狀態(tài)，例如通過在高真空條件下以提高的溫度(如130-170℃)加熱固體形式，從而每分子式I化合物(或其N-氧化物)放出一分子酸來實現(xiàn)。
以常規(guī)的方法可以將鹽轉(zhuǎn)化成游離的化合物，如用適當(dāng)?shù)膲A試劑如堿金屬碳酸鹽、碳酸氫鹽或氫氧化物(如碳酸鉀或氫氧化鈉)處理。
使用適當(dāng)?shù)姆蛛x操作可以以本身已知的方式將立體異構(gòu)混合物(例如非對映異構(gòu)體混合物)分離成相應(yīng)的同分異構(gòu)體。例如通過分級結(jié)晶、層析、溶劑分配(solvent partitioning)等等將非對映異構(gòu)體的混合物分離成為單獨(dú)的非對映異構(gòu)體。分離可以在原材料之一的階段進(jìn)行或者在式I化合物自身的情況下進(jìn)行。通過形成非對映異構(gòu)鹽例如通過具對映異構(gòu)純度的手性酸形成鹽或者通過層析法(例如HPLC層析)，在具有手性配體的層析載體材料上分離對映異構(gòu)體。
可以將式I化合物轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的N-氧化物。是用適當(dāng)?shù)难趸噭?優(yōu)選如間氯過苯甲酸之類的過氧化物)，在適宜的溶劑中進(jìn)行反應(yīng)，溶劑例如鹵化烴(例如氯仿)或者亞甲基氯或者在低級烷羧酸(如乙酸)，優(yōu)選的反應(yīng)溫度為0℃至反應(yīng)混合物的沸騰溫度，特別是近似室溫。
例如通過在能夠加入額外溶劑的水溶液中、優(yōu)選地在提高的溫度例如在回流溫度下、通過無機(jī)酸特別是鹽酸(HCl)的水解可以將Z為低級烷?；被氖絀化合物(或其N-氧化物)水解成相應(yīng)的氨基化合物(Z＝氨基)。
當(dāng)式I化合物(或其N-氧化物)中Z為被一個或兩個相同或者不同的選自低級烷基、羥基低級烷基和苯基低級烷基取代的氨基時，可以通過與低級烷基鹵素、羥基低級烷基鹵素(如有必要其羥基被保護(hù)，見方法a))或者苯基低級烷基鹵素在與方法a)所提到的相似條件下反應(yīng)，將式I化合物(或其N-氧化物)轉(zhuǎn)變成氨基基團(tuán)被相應(yīng)取代的化合物。對于在氨基基團(tuán)Z上引入2-羥基低級烷基取代基，也可以從環(huán)氧化物(例如環(huán)氧乙烷)起始添加。添加特別是在水溶液和/或在極性溶劑存在的情況下進(jìn)行，極性溶劑例如諸如甲醇、乙醇、異丙醇或者1，2-乙烯基二醇的醇、諸如二氧雜環(huán)己烷的醚、諸如二甲基甲酰胺的酰胺或者諸如酚的酚類，添加也可以在無水條件下在非極性溶液(例如苯和甲苯)或者在苯/水乳濁液中進(jìn)行，添加任選地在酸或堿催化劑(例如諸如氫氧化鈉溶液)的堿溶液存在的條件下或者含肼的固相催化劑(諸如氧化鋁)存在的情況下，在醚(例如乙醚)中進(jìn)行，溫度通常約0℃至所述反應(yīng)混合物的沸騰溫度，優(yōu)選在20℃至回流溫度下，其中壓力處于適當(dāng)提高了的壓力下，例如在彈管中，由此溫度也超過了沸騰溫度和/或在惰性氣體例如氮或氬存在條件下進(jìn)行反應(yīng)。對具有低級烷基醛、苯基低級烷基醛或者羥基低級烷基醛(如有必要其羥基是被保護(hù)的)的氨基基團(tuán)Z也可進(jìn)行還原烷基化。還原烷基化優(yōu)選地在常規(guī)溶劑例如諸如甲醇或乙醇的醇或者諸如環(huán)醚(例如四氫呋喃)的醚中，在水缺乏或者存在的條件下，在催化劑特別是結(jié)合到諸如碳的支持材料上的貴金屬催化劑(如鉑)或者特別是鈀，或者重金屬催化劑(如阮內(nèi)鎳)存在下，在正常壓力或者0.1-10兆帕(MPa)的氫化作用中進(jìn)行，或者在適當(dāng)?shù)乃幔瑑?yōu)選相對弱的酸，如低級烷基羧酸或者特別是甲苯磺酸之類的磺酸存在的條件下，依靠復(fù)雜氫化物(例如氫化硼)，特別是堿金屬氰基氫化硼(例如氰基硼氫鈉)的還原作用進(jìn)行。常用的溶劑如甲醇或乙醇之類的醇或醚(例如四氫呋喃之類的環(huán)醚)，可以存在或不存在水。
在式I化合物(或其N-氧化物)中，通過酰化作用可以將氨基基團(tuán)Z轉(zhuǎn)變成被低級烷酰基、苯甲?；⑷〈郊柞；蛘弑交图壨檠趸驶〈陌被鶊F(tuán)，其中所述的苯基低級烷氧基羰基中的苯基是非取代的或取代的。相應(yīng)的酸包含游離羧基或者是其反應(yīng)性酸衍生物的形式，例如衍生的活化酯或反應(yīng)性酐的形式，也可以是反應(yīng)性環(huán)酰胺的形式。反應(yīng)酸衍生物也可以在原位(in situ)形成?；罨ヌ貏e是在欲被酯化的基團(tuán)的連接碳原子上是不飽和的酯，例如乙烯基酯類型，諸如乙烯基酯(可通過例如由乙烯基乙酸鹽與相應(yīng)酯進(jìn)行酯交換得到；活化乙烯基酯方法)、氨基甲?；?可通過例如用isoxazolium試劑處理相應(yīng)的酸得到；1，2-oxazolium或者Woodward方法)、或者1-低級烷氧基乙烯基酯(可通過例如用低級烷氧基乙炔處理相應(yīng)的酸得到；乙氧基乙炔方法)，或者脒基酯類型(諸如N，N′-二取代脒基酯)(可通過例如用適當(dāng)?shù)腘，N′-二取代碳二亞胺(例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺)或者特別是N-(3-二甲胺基丙基)-N′-乙基碳二亞胺處理相應(yīng)的酸得到；碳二亞胺方法)或者N，N-二取代脒基酯(可通過例如用N，N-二取代氨腈處理相應(yīng)的酸得到；氨腈方法)、適當(dāng)?shù)姆蓟ヮ?特別是被親電子取代基適當(dāng)取代的苯基酯類)(可通過例如在縮合劑如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺存在的條件下用適當(dāng)?shù)娜〈又T如4-硝基酚、4-甲基磺酰酚、2，4，5-三氯苯酚、2，3，4，5，6-五氯苯酚或者4-苯氫氧化重氮苯酚處理相應(yīng)的酸得到；活化芳基酯方法)、氰甲基酯(可通過例如在堿存在的情況下用氯乙氰處理相應(yīng)的酸得到；氰甲基酯方法)、硫酯(特別是非取代或者取代如硝基取代的苯硫基酯)(可根據(jù)例如酐或者碳二亞胺方法用非取代或取代(例如硝基取代)的苯硫酚及其它處理相應(yīng)的酸得到；活化硫酯方法)或者特別是氨基或酰氨基酯(可根據(jù)例如酐或者碳二亞胺方法用N-羥氨基或N-羥酰氨基化合物如N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基哌啶、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二羥酸亞胺、1-羥基丁基苯基(benztriazole)或者3-羥基-3，4-二氫-1，2，3-benztriazin-4-酮處理相應(yīng)的酸得到；活化N-羥基酯方法)。還可以使用內(nèi)酯，如γ-內(nèi)酯。酸酐可以是對稱的或優(yōu)選這些酸的混合酸酐，例如無機(jī)酸的酐，如?；u，特別是?；?可通過例如用亞硫酰氯、五氯化磷、碳酰氯或者草酰氯處理相應(yīng)的酸得到；?；确椒?、疊氮化物(可經(jīng)由例如相應(yīng)的酰肼并且用亞硝酸對其進(jìn)行處理從相應(yīng)的酸性酯得到；疊氮化物方法)、具有碳酸半酯(例如碳酸低級烷基半酯)的酐(特別是氯甲酸甲酯)(可通過例如用氯甲酸低級烷基酯或1-低級烷氧基羰基-2-低級烷氧基-1，2-二氫喹啉處理相應(yīng)的酸得到；混合的O-烷基碳酸酐方法)，或者具有二鹵化特別是二氯化磷酸的酐(可通過例如用磷酰氯處理相應(yīng)的酸得到；磷酰氯方法)、具有其它磷酸衍生物的酐(例如在磺酸酐和/或外消旋化還原添加物(如N-羥基苯并三唑)存在的條件下，或者在氰基膦酸二乙基酯存在的條件下，通過苯基N-苯基磷酰胺氯化物或者通過烷基磷酸酰胺的反應(yīng)得到的那些)或者具有亞磷酸衍生物的酐，或者具有有機(jī)酸的酐(例如具有有機(jī)羧酸的混合酐)(可用例如非取代或取代低級烷基羧酸鹵化物或苯基低級烷基羧酸鹵化物例如苯基乙酸、新戊酸、三氟乙酸氯處理相應(yīng)的酸得到；混合羧酸酐方法)或具有有機(jī)磺酸的混合酐(可用例如適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)磺酸鹵化物例如低級烷基磺酸氯或者芳基磺酸氯如甲磺酸氯或?qū)妆交撬崧忍幚硐鄳?yīng)的酸的鹽如堿金屬鹽得到；混合磺酸酐方法)以及對稱酐(可在例如碳二亞胺或1-二乙基氨基丙炔存在的條件下通過縮合相應(yīng)的酸得到；對稱酐方法)。適宜的環(huán)酰胺，特別是具有芳香性質(zhì)的5個原子數(shù)的二氮雜環(huán)的酰胺例如具有咪唑類如咪唑的酰胺(例如通過用N，N′-羰基二咪唑處理相應(yīng)的酸得到；咪唑方法)，或者吡唑(如3，5-二甲基吡唑)的酰胺(可通過例如用乙酰丙酮處理經(jīng)由?；碌玫剑贿吝蛲?pyrazolide)方法)。如所提到的，作為?；瘎┦褂玫聂人嵫苌镆部梢栽谠恍纬?。例如，在適宜的N，N′-二取代碳二亞胺，例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺或特別是N-(3-二甲胺基丙基)-N′-乙基碳二亞胺存在的條件下，可以通過將式I的原材料的混合物和作為?；噭┦褂玫乃徇M(jìn)行反應(yīng)而在原位形成N，N′-二取代脒基酯。此外，在欲被?；氖絀的原材料存在的條件下，通過相應(yīng)酸的混合物與氨基原材料在N，N′-二取代碳二亞胺(例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺)和N-羥基胺或N-羥基酰胺(例如羥基琥珀酰亞胺)存在的條件下，任選地在適當(dāng)堿(例如4-二甲基氨基吡啶)存在的條件下進(jìn)行反應(yīng)可以形成作為?；瘎┦褂玫乃岬陌被セ蝓０被?。此外，通過與N，N，N′，N′-四烷基uronium化合物如O-benztriazol-1-基-N，N，N′，N′-四甲基-uronium六氟磷酸、O-(1，2-二氫-2-氧-1-吡啶基)-N，N，N′，N′-四甲基uronium四氟硼酸(在1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-7-烯-(1，5，5)缺乏或存在條件下)或O-(3，4-二氫-4-氧-1，2，3-benztriazolin-3-基)-N，N，N′，N′-四甲基uronium四氟硼酸進(jìn)行反應(yīng)在原位實現(xiàn)活化。最后，通過烷基磷酸酰胺(例如六甲基磷酸三酰胺)在磺酸酐如4-甲苯磺酸酐存在條件下與鹽(例如四氟硼酸鈉之類的四氟硼酸鹽)或與六甲基磷酸三酰胺的不同衍生物(如苯并三唑-1-基-氧-三(二甲氨基)六氟化磷)優(yōu)選在外消旋化還原添加物如N-羥基丁基苯基存在條件下反應(yīng)來原位制備羧酸的磷酸酐。如果需要可以加入有機(jī)堿，優(yōu)選叔胺，例如三低級烷基胺，特別是乙基二異丙胺或更加特別地是三乙胺和/或雜環(huán)堿，例如4-二甲基氨基吡啶或優(yōu)選N-甲基嗎啉或吡啶。優(yōu)選在惰性的、質(zhì)子惰性的、優(yōu)選無水溶劑或溶劑混合物中進(jìn)行縮合，例如在羧酸酰胺(如甲酰胺或者二甲基酰胺)、鹵代烴(如亞甲基氯、四氯化碳或者氯苯)、酮(例如丙酮)、環(huán)醚(例如四氫呋喃或二氧雜環(huán)己烷)、酯(例如乙酸乙酯)、或腈(例如乙腈)，或它們混合物中進(jìn)行縮合，其中溫度為適當(dāng)降低的或升高的溫度，例如從大約-40℃到大約+100℃，優(yōu)選從大約-10℃到大約+70℃范圍內(nèi)的溫度，其中芳基磺酰基酯也可以在大約+100℃-+200℃，特別是10-30℃的溫度，并且在恰當(dāng)?shù)亩栊詺怏w如氮或氬氣環(huán)境中。也可以是水性(如醇性溶劑)，如乙醇，或者芳香溶劑(如苯或者甲苯)。
式I化合物中的硝基基團(tuán)Z可以被還原成氨基基團(tuán)，例如通過金屬還原或者選擇性氫化；例如通過在水/醇混合物(如甲醇/水)中，在提高的溫度(例如30-60℃)下與鎂/硫酸銨反應(yīng)(見Synth.Commun.25(2)，4025-4028(1995))；通過在酰胺(如二甲基甲酰胺)中，在低于室溫(如在大約0℃)條件下與鋅/硼氫化物進(jìn)行反應(yīng)；通過在水/鹵代烴混合物(如水/亞甲基氯混合物)中，在提高的溫度(如25-35℃)條件下與1，1′-二辛烷基-4，4′-二吡啶二溴化物/連四硫酸鈉/碳酸鉀反應(yīng)(見Tetrahedron Lett.34(46)，7445-7446(1993))；在醇如甲醇/水中，在優(yōu)選0-40℃的溫度，以氯的形式與Amberlyte IRA-400離子交換劑上的硼氫化鈉反應(yīng)(見Synthetic Commun.19(5/6)，805-811(1989))；在鹵代烴/醇混合物(例如亞甲基氯/甲醇)中，在優(yōu)選10-35℃的溫度下，與硼氫化鉀進(jìn)行反應(yīng)(見Synthetic Commun.19(17)，3047-3050(1989))；在二氧雜環(huán)己烷中與硼氫化鈉反應(yīng)；在四氫呋喃中與硼烷反應(yīng)；通過在醇中，在Pd/C存在產(chǎn)優(yōu)選0-35℃的溫度下并且甲酸銨存在下的氫化(見Tetrahedron Lett.25(32)，3415-3418(1989))；在醚(如四氫呋喃)中與四氯化鈦/氫化鋰鋁或者四氯化鈦/鎂反應(yīng)(見Bull.Chem.Soc.Belg.97(1)，51-53(1988))；或者在提高的溫度下(優(yōu)選回流溫度下)與氯化鐵銨/水進(jìn)行反應(yīng)(Synth.Commun.22，3189-3195(1992))。
當(dāng)式I化合物中G是酰氧基取代的低級烷基并且其它基團(tuán)如按式I所定義時，可以通過水解作用將?；コ玫紾是羥基取代的低級亞烷基的式I的相應(yīng)化合物。水解優(yōu)選在常規(guī)條件下進(jìn)行，例如在酸或堿(如HCl或者NaOH)存在條件下在水溶液中或者在適當(dāng)?shù)娜軇┗蛉軇┗旌衔镏羞M(jìn)行。
也可以從G是酰氧基取代的低級烷基的式I化合物制備G是低級亞烷基的式I化合物。在該種情況下，反應(yīng)優(yōu)選在常規(guī)溶劑或溶劑混合物中通過催化的氫化(在適當(dāng)催化劑存在下的氫化)進(jìn)行。
一般過程條件本本文提到的所有過程步驟可以在本身已知的反應(yīng)條件下進(jìn)行，優(yōu)選那些特別是提到的缺乏或通常存在溶劑或稀釋劑的條件，優(yōu)選那些在催化劑、縮合劑或者中和劑(例如離子交換劑，如以H+形式的陽離子交換劑)缺乏或者存在條件下，依賴于反應(yīng)或反應(yīng)物的性質(zhì)在降低、正?；蛘咛岣叩臏囟认?如大約-100℃至大約190℃，優(yōu)選地在-80℃至大約150℃，例如-80至-60℃、室溫、-20至40℃，或者所使用溶劑的沸點)、在大氣壓下或者在壓力恰當(dāng)?shù)拈]合容器中和/或在惰性氣體如氬氣或氮?dú)庵袑λ褂萌軇┒允嵌栊缘牟⑶乙虼顺蔀槿軇┑娜軇?br> 當(dāng)形成鹽的基團(tuán)存在時，所有原材料和中間化合物可以以鹽存在。在此種化合物反應(yīng)過程中也可以存在鹽，其前提是反應(yīng)不會因此而受損。
在反應(yīng)的所有階段，例如通過與下面“額外過程步驟”中描述的方法相似的方法，所形成的同分異構(gòu)混合物可以分離成為單獨(dú)的同分異構(gòu)體例如非對映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體，或者分離成為同分異構(gòu)體的目的混合物如外消旋化合物或非對映異構(gòu)體混合物。
在一些情況下，例如在氫化作用的情況下，可以實現(xiàn)立體選擇性反應(yīng)，以致于例如可以容易地得到單獨(dú)的同分異構(gòu)體。
除非在過程的描述中另外指出，可以從中選擇適于具體反應(yīng)的試劑包括例如水、酯(例如低級烷基低級酸酯，如二乙基乙酸)、醚(例如脂肪醚，如乙醚)，或環(huán)醚(如四氫呋喃)、液態(tài)芳香烴(例如苯或甲苯)、醇(例如甲醇)、乙醇或1-丙醇或2-丙醇、腈(例如乙腈)、鹵代烴(例如亞甲基氯)、酰胺(例如二甲基甲酰胺)、堿(例如雜環(huán)氮堿，如吡啶)、羧酸(例如低級羧酸，如乙酸)、羧酸酐(例如低級酸酐，如乙酸酐)、環(huán)烴、直鏈烴或支鏈烴(例如環(huán)己烷、己烷或異戊烷)，或者這些溶劑的混合物(如水溶液)。在進(jìn)行如層析或分配中也可以用到此種溶劑混合物。
本發(fā)明還涉及以下形式的方法，其中將在任何階段作為中間物得到的化合物用作原材料并開展剩余步驟，或者那些在任何階段將過程打斷的方法形式，或者那些原材料在反應(yīng)條件下形成或者原材料以反應(yīng)衍生物或鹽的形式使用的方法形式，或者那些根據(jù)本發(fā)明過程得到的化合物在過程條件下產(chǎn)生并且在原位進(jìn)一步加工的方法形式。優(yōu)選使用那些能夠?qū)е律鲜龌衔锍蔀閮?yōu)選，特別是成為特別優(yōu)選、更加特別優(yōu)選和/或非常特別優(yōu)選的原材料。
優(yōu)選以相似于實施例中提到的方法和過程步驟制備式I化合物(或其N-氧化物)。
可以以水合物的形式獲得式I化合物(或其N-氧化物)(包括它們的鹽)，或者它們的晶體可以包括例如用于結(jié)晶的溶劑(以溶劑合物形式存在)。
藥物組合物、方法和用途本發(fā)明還涉及包含作為活性成分的式I化合物(或其N-氧化物)的并且特別是能夠用于治療在開始時提到的疾病的藥物組合物。特別優(yōu)選用于腸內(nèi)(如鼻、口、直腸)或者特別是口腔和腸胃外(如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)施用于溫血動物(特別是人)的組合物。組合物只包含活性成分或者優(yōu)選地包含活性成分和可藥用載體?；钚猿煞值膭┝咳Q于欲被治療的疾病并且取決于物種、年齡、體重和個體狀況、個體藥物代謝動力學(xué)數(shù)據(jù)和施用模式。
本發(fā)明還涉及在預(yù)防性特別是治療性治療人或者動物體的方法中使用的藥物組合物，制備藥物組合物的方法(特別是制備用于治療腫瘤的組合物形式)，還涉及治療上述疾病，特別是腫瘤疾病，更特別是上面提到的那些疾病的方法。
本發(fā)明還涉及制備含有作為活性組分(活性成分)的式I化合物(或其N-氧化物)的藥物組合物的方法和式I化合物作為活性成分在藥物組合物中的用途。
優(yōu)選適于以有效抑制RAF激酶(特別是突變型RAF激酶)的量與至少一種藥用載體一起施用于患有由異常MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑所表征的疾病，特別是腫瘤疾病，最優(yōu)選黑素瘤的溫血動物，特別是人或者有商業(yè)用途的哺乳動物，并包含式I化合物(或其N-氧化物)或其可藥用鹽(前提是存在形成鹽的基團(tuán))的藥物組合物。
還優(yōu)選用于預(yù)防性，特別是治療性治療溫血動物(特別是人或有商業(yè)用途的哺乳動物)中腫瘤疾病和其它增殖性疾病并含有有效預(yù)防或特別是治療所提到疾病的量的作為活性成分的新式I化合物(或其N-氧化物)或其可藥用鹽的藥用組合物，其中所述的人或有商業(yè)用途的哺乳動物需要此種治療，特別患有此種疾病。
藥物組合物包含約1％至約95％的活性成分，一次給藥的劑量形式優(yōu)選包含約20％至約90％的活性成分，不是一次給藥的劑量形式優(yōu)選包含約5％至約20％的活性成分。單位劑形是例如糖錠劑、片劑、安瓿劑、藥水瓶、栓劑或膠囊劑。其它劑形是例如軟膏劑、乳膏劑、糊劑、泡沫劑、酊劑、唇膏劑、滴劑、噴霧劑、分散劑等等。實例為含有約0.05g至約1.0g活性成分的膠囊。
以本身已知的方式制備本發(fā)明藥物組合物，例如通過常規(guī)混合、?；⒊尚?confection)、溶解或者凍干法。
此外，活性成分的溶液優(yōu)選地還使用懸浮液或分散液，特別是等滲水溶液、分散液或懸浮液，其中就例如包含單獨(dú)的或與載體(例如甘露醇)一起的活性物質(zhì)的凍干組合物而言，可以在使用前制備。藥用組合物是無菌的和/或包含賦形劑，如防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑和/或乳化劑、溶解劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖液，并且以本身已知的方式來制備，例如通過常規(guī)的溶解或凍干方法制備。提到的溶液或懸浮液可以包含增加粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或白明膠，或者溶解劑例如Tween 80[聚氧乙烯(20)山梨聚糖一油酸；ICI Americas，Inc，USA的商標(biāo)]。
油中的懸浮液包含常規(guī)用于注射目的的作為油性成分的植物油、合成或半合成油。這里可能提及的是如特別的液態(tài)脂肪酸酯，其中所述的脂肪酸酯包含作為酸成分的具有8-22特別是12-22個碳原子的長鏈脂肪酸例如月桂酸、十三烷酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、山崳酸或相應(yīng)的不飽和酸，例如油酸、反油酸、芥子酸、巴西烯酸或亞油酸，并任意地加入抗氧化劑，如維生素E、β-胡蘿卜素或3，5-二叔丁基-4-苯甲醇。這些脂肪酸酯的醇成分具有最多6個碳原子并且是一或多羥基的，例如一、二或三羥基的醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇或它們的同分異構(gòu)體，但特別是乙二醇和甘油。因此可能提到的脂肪酸酯的實例是油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、“Labrafil M 2375”(來自Gattefossé，Paris的聚氧乙烯二醇甘油三油酸酯)、“Labrafil M 1944CS”(通過杏仁油醇解作用制備、并且由甘油酯和聚乙烯乙二醇酯組成的不飽和聚氧二醇甘油酯；Gattefossé，F(xiàn)rance)、“Labrasol”(通過TCM醇解作用制備并且由甘油酯和聚乙烯乙二醇酯組成的飽和聚氧二醇甘油酯；Gattefossé，F(xiàn)rance)和/或“Miglyol 812”(來自Hüls AG，Germany的鏈長度為C8-C12的飽和脂肪酸的甘油三酯)，但是特別是植物油，例如棉籽油、杏仁油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、大豆油和更特別是花生油。
在無菌的條件下以常規(guī)的方式制備注射組合物，在將其裝入例如安瓿或者藥水瓶并且將容器密封也同樣如此。
可以通過例如將活性成分與一種或多種固體載體相混合，適當(dāng)粒化所得混合物，并且如有必要通過加入額外的賦形劑至片劑或者糖錠劑核中來適當(dāng)加工混合物或者顆粒而得到用于經(jīng)口施用的藥物組合物。
適當(dāng)?shù)妮d體，特別是充填劑，例如糖(如乳糖、蔗糖)、甘露醇或山梨醇、纖維素制劑和/或磷酸鈣(如磷酸三鈣或磷酸氫鈣)，以及粘合劑，例如淀粉(如玉米、小麥、水稻或者馬鈴薯淀粉)、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或如有必要的崩解劑，例如上面提到的淀粉、羧甲基淀粉、交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、藻酸及其鹽(如藻酸鈉)。額外的賦形劑特別是流動調(diào)節(jié)劑和潤滑劑，例如硅酸、滑石粉、硬脂酸或其鹽(如硬脂酸鎂或鈣)和/或聚乙二醇或其衍生物。
糖錠劑核可以與適當(dāng)?shù)摹⑷芜x的腸溶衣一起提供，除此之外可以使用的有包含阿拉伯樹膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦的濃縮糖溶液，或者在適當(dāng)有機(jī)溶劑或溶劑混合物中的包衣溶液、或者用于制備腸溶衣的適當(dāng)纖維素制劑，如乙酰纖維素鄰苯二甲酸或羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸的溶液。例如為了鑒定的目的或者為了指示活性成分的不同劑量可以將顏料或色素加到片劑或者糖錠劑包衣中。
用于經(jīng)口施用的藥物組合物還可以是硬白明膠膠囊和由白明膠和增塑劑(如甘油或山梨醇)組成的軟密封膠囊。硬白明膠膠囊可以含有例如與填充劑(如玉米淀粉)、粘合劑和/或助流劑(如滑石粉或硬脂酸鎂)和任選地穩(wěn)定劑相混合的顆粒形式的活性成分。在軟膠囊中，活性成分優(yōu)選地溶解在或懸浮于在適當(dāng)?shù)囊后w賦形劑，例如脂肪油、石蠟油或液態(tài)聚乙二醇或1，2-乙烯基二醇或丙二醇的脂肪酸酯，同樣也可以加入穩(wěn)定劑和去污劑，如聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯類型。
適于經(jīng)直腸施用的藥物組合物有例如由活性成分和栓劑基質(zhì)組合組成的栓劑。適宜的栓劑基質(zhì)有例如天然或合成的甘油三酯、鏈烷烴、聚乙二醇或高級烷醇。
對于腸胃外施用，水溶形式的活性成分的水溶液形式，如水溶鹽形式，或者包含增加粘度物質(zhì)如羧甲基纖維素鈉、山梨醇和/或葡聚糖和如有必要的穩(wěn)定劑的水性注射懸浮液是特別適合的?；钚猿煞秩芜x地與賦形劑一起還可以是凍干的形式，并且可以在腸胃外施用之前通過加入適當(dāng)?shù)娜軇┒渲瞥扇芤骸?br> 用于例如經(jīng)腸胃外施用的溶液也可以用作灌注溶液。
優(yōu)選的防腐劑有例如抗氧化劑(如抗壞血酸)或者殺微生物劑(如山梨酸或者苯甲酸)。
本發(fā)明特別涉及治療由異常MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑所表征的病理狀況中之一，特別是能夠?qū)AF激酶抑制作出反應(yīng)的疾病，特別是相應(yīng)的腫瘤疾病的過程或方法。式I化合物(或其N-氧化物)可以以藥物組合物的形式、優(yōu)選以有效抑制所提到疾病的量、預(yù)防性或者治療性地施用于需要此種治療的溫血動物(如人)，化合物特別是以藥物組合物的形式進(jìn)行使用。在體重為大約70kg的情況下，所施用的本發(fā)明化合物的日劑量約0.1g至約5g，優(yōu)選約0.5g至約2g。
在每一個具體案例中使用的藥物制劑(藥劑)的優(yōu)選的劑量、組合物和制備在上面有所描述。
原材料優(yōu)選所使用的原材料和所選擇的反應(yīng)條件能得到作為優(yōu)選而提及的化合物。
式II和III的原材料是已知的，能夠通過本身已知的過程制備，或者是商業(yè)可得的；具體而言，它們可以通過與實施例中所提到的那些過程相類似的過程來制備。
在原材料的制備中，如有必要則所存在的不應(yīng)該參加反應(yīng)的任何功能基團(tuán)是被保護(hù)的形式。在方法a)或者實施例中描述了優(yōu)選的保護(hù)基團(tuán)、它們的引入和它們的去除。可以用所述原材料和中間物的鹽代替原材料和中間物來進(jìn)行反應(yīng)，前提是存在形成鹽的基團(tuán)，并且也可以使用鹽進(jìn)行所述反應(yīng)。因此，上下文提及的任何原材料也旨在包括它們的鹽，只要是有利并可能的。
對于G是-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、氧雜、硫雜或-NR-并且其它符號如式I中所定義的式II化合物的制備，可以通過例如式IV化合物與式V化合物的反應(yīng)優(yōu)選地在與用于式II化合物和式III化合物的反應(yīng)方法a)中所提到的條件相類似的條件下，或者利用具有Pd0鈀復(fù)合催化，例如與四(三苯膦基)鈀復(fù)合物、鈀(O)-P(鄰甲苯基)3復(fù)合物、具有螯合二(膦)的鈀(O)復(fù)合物(見，例如J.Org.Chem.61，7240-7241(1996))等等，優(yōu)選在堿金屬碳酸鹽(如K2CO3)存在條件下，在適當(dāng)?shù)娜軇?如甲苯)中，在提高的溫度(優(yōu)選回流溫度)下用Pd0催化，
其中L*是離核的離去基團(tuán)，特別是鹵素(如溴)，并且m和Z及波浪線所指示的鍵如式I化合物中所定義(特別地m＝0(即Z不存在)時L*是溴的式IV相應(yīng)化合物可以從SPECS & BIOSPECS，Rijskwijk，Holland商業(yè)性得到)。
其中G是-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-NH-，或者是氧雜、硫雜或-NR-，并且A、B、D、E、T、Q和r如式I化合物中所定義。從而得到了式II*化合物。
其中m和Z及波浪線所指示的鍵以及A、B、D、E、T、Q和r如式I化合物中所定義，并且G是-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-NH-，或者是氧雜、硫雜或-NR-。
通過使用相應(yīng)的酸酐(例如為引入L＝Cl所使用的磷酰氯(POCl3))或者使用下面提到的用于將式XII化合物轉(zhuǎn)變成式II化合物的不同試劑，引入如式II中所定義的離核基團(tuán)L，以制備式II相應(yīng)的化合物。
式IV和V的原材料是已知的，可通過本身已知的方法制備，或者是商業(yè)獲得。
通過將式VI的內(nèi)酯與堿金屬氰化物(特別是氰化鉀)，在提高的溫度(例如100℃-200℃)條件下反應(yīng)來制備G是亞甲基并且其它符號如式I化合物中所定義的式II的化合物(見Org.Synthesis，Coll.第3卷，174)，得到了式VII的氰甲基苯甲酸。
其中Z和m如式I化合物中所定義。
其中基團(tuán)如式VI中所定義；然后通過例如在適當(dāng)?shù)娜軇├琨u代低級(如二氯甲烷)中向式VII化合物中加入適當(dāng)?shù)亩图壨榛柞０范图壨榛阴＠缍谆柞０范谆阴?，并且攪動混合物至完全反?yīng)、優(yōu)選在溫度0-60℃(如大約室溫)的條件下，將式VII化合物轉(zhuǎn)變成低級烷基酯。得到了式VIII的相應(yīng)的低級烷基酯。
其中Alk是低級烷基(特別是甲基)，并且其它基團(tuán)如式VI中所定義。然后，在適當(dāng)?shù)娜軇缑?如四氫呋喃)或酯(如丙酸乙酯)或其混合物中，在醇(例如甲醇)和相應(yīng)的醇化物(例如堿金屬甲醇化物，如甲醇鈉)存在的條件下，在優(yōu)選0℃至回流溫度，優(yōu)選大約5-30℃的溫度下，將酯與式IX的醛進(jìn)行反應(yīng)，得到式X化合物。
其中A、B、D、E、Q和r如式I化合物中所定義。
其中基團(tuán)A、B、D、E、Q和Z和指數(shù)r及m如式I化合物中所定義；此化合物被轉(zhuǎn)變成(在與制備式VIII的低級烷基酯的條件相類似下)式XI的相應(yīng)的低級烷基酯。
其中Alk是低級烷基(特別是甲基)，并且其它基團(tuán)如式X中所定義。隨后在適當(dāng)?shù)娜軇?例如醚，如四氫呋喃)或者醇(如甲醇)或者它們的混合物中，在適當(dāng)催化劑(特別是結(jié)構(gòu)催化劑，如阮內(nèi)鈷或者特別是阮內(nèi)鎳)存在條件下、在優(yōu)選的10-80℃溫度下、在0.5-100巴壓力(特別是在大約正常壓力下)進(jìn)行氫化，得到式XII異喹啉化合物。
其中基團(tuán)A、B、D、E、Q和Z以及指數(shù)r和m如式I化合物中所定義。
然后，通過用于引入離核的離去基團(tuán)的適當(dāng)試劑，例如磷酰鹵化物或者磷酰五鹵化物，特別是磷酰氯(POCl3)或者磷酰五氯，在沒有溶劑存在下或者在適當(dāng)?shù)娜軇?例如乙腈)中，在缺乏或者優(yōu)選存在相應(yīng)的酸(例如氫鹵酸，如鹽酸)的條件下，在從40℃到回流溫度(優(yōu)選在大約40-60℃)的優(yōu)選溫度下將式XII化合物轉(zhuǎn)變成式II的相應(yīng)化合物或其鹽。
以相似的方式使用其中-CHO-基團(tuán)被相應(yīng)的低級醛基取代的類似于式IX化合物，經(jīng)由其中次甲基(methylidene)(式X，XI)或亞甲基(式XII)被相應(yīng)的低級亞烷基或者低級亞烷基取代的類似于式X-XII的化合物可以制備其中G是低級亞烷基的式II的相應(yīng)化合物。
其它的原材料是已知的，可以通過本身已知的方法制備或者是商業(yè)獲得，或者具體而言可以通過與實施例中提到的過程相類似的過程來制備。
下面的實施例用來闡明本發(fā)明而不對其范圍進(jìn)行限制。
合成實施例實施例S11-(3，5-二甲基苯胺基)-4-[(吡啶-4-基)-甲基]-異喹啉(＝N-(3，5-二甲基苯基)-[4-(吡啶-4-基甲基)-異喹啉-1-基]-胺)在無水條件下，將100mg(0.825mmol)3，5-二甲基苯胺溶解于4ml乙醇，并加入196μl(0.784mmol)HCl(以4N的濃度存在于二氧雜環(huán)己烷中)。在加入200mg(0.785mmol)1-氯-4-[(吡啶-4-基)-甲基]-異喹啉后，將混合物在90℃加熱8小時。然后蒸發(fā)濃縮；將剩余物置于4ml水、1ml飽和氨溶液和20ml CH2Cl2中，并且將有機(jī)相分開，用Na2SO4(無水)干燥并再次蒸發(fā)濃縮。經(jīng)過柱層析(SiO2；乙酸乙酯/己烷3∶1)和從乙酸乙酯/己烷中結(jié)晶得到標(biāo)題化合物m.p.156-158℃；FAB-MS(M+H)+＝340；Anal.calc.(C23H21N3·0.1H2O)C 80.95％，H 6.26％，N12.31％；found C 80.9％，H 6.2％，N 12.4％。
原材料制備如下S1a)2-氰甲基-苯甲酸甲酯通過溫和加熱將175g(1.08mol)2-氰甲基苯甲酸(對于制備見Org.Synthesis，Coll，第3卷，174)溶于1.7升CH2Cl2；在室溫下滴加242ml(≈90％，1.6mol)二甲基甲酰胺二甲基縮醛，并且攪動38小時直至完全反應(yīng)。用1.2升飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌反應(yīng)混合物2次。使用2份CH2Cl2抽提水相，干燥有機(jī)相(Na2SO4)并蒸發(fā)濃縮。柱層析(SiO2；乙酸乙酯/己烷1∶4，在乙酸乙酯/己烷/CH2Cl2中使用)得到標(biāo)題化合物m.p.49-50℃Anal.calc.(C10H9NO2)C 68.56％，H 5.18％，N 8.00％；found C 68.5％，H5.1％，N 7.9％。
S1b)2-[(1-氰-2-(吡啶-4-基)-乙烯基)-苯甲酸在隔絕空氣的條件下，將127.7ml(1.35mol)吡啶-4-甲醛(Fluka，Buchs，Switzerland)加入到1.8升THF中的215.6g(1.23mol)2-氰甲基苯甲酸甲酯溶液中。將混合物冷卻至8-9℃，在20分鐘內(nèi)滴加297ml(1.6mol)5.4M的甲醇鈉甲醇溶液，并且在10-15℃將混合物攪動1.5小時。然后用大約350ml 4N HCl將混合物調(diào)至pH6.0并且在5℃將混合物攪動1小時。結(jié)晶標(biāo)題化合物并且抽吸過濾并用THF/水(2∶1)和THF徹底洗滌m.p.218-219℃；FAB-MS(M+H)+＝251；Anal.calc.(C15H10N2O2)C 71.99％，H 4.03％，N 11.19％；found C 71.9％，H 4.1％，N 11.1％。
S1c)2-[(1-氰-2-(吡啶-4-基)-乙烯基)-苯甲酸甲酯在無水的條件下，將211g(0.843mol)2-[(1-氰-2-(吡啶-4-基)-乙烯基)-苯甲酸懸浮于3.3升CH2Cl2；在室溫下加入169ml(≈90％，1.1mol)二甲基甲酰胺二甲基縮醛(Fluka，Buchs，Switzerland)并攪動22小時直至完全反應(yīng)。過濾反應(yīng)混合物并用CH2Cl2徹底洗滌剩余物并丟棄。通過蒸發(fā)、層析(SiO2；乙酸乙酯)和從乙酸乙酯/己烷中進(jìn)行結(jié)晶濃縮過濾液得到標(biāo)題化合物m.p.102-104℃；FAB-MS(M+H)+＝265；Anal.calc.(C16H12N2O2)C 72.72％，H 4.58％，N 10.60％；found C 72.7％，H 4.8％，N 10.5％。
S1d)4-(吡啶-4-基-甲基)-2H-異喹啉-1-酮在存在5×40g阮內(nèi)鎳(間隔加入)的條件下，將163g(617mmol)2-[(1-氰-2-(吡啶-4-基)-乙烯基)-苯甲酸甲酯在3升THF中于40℃下反應(yīng)90小時進(jìn)行氫化。過濾反應(yīng)混合物并且通過蒸發(fā)和從乙腈/乙酸乙酯中結(jié)晶濃縮過濾液(得到標(biāo)題中的化合物)。進(jìn)一步的產(chǎn)物可以通過層析(SiO2；乙酸乙酯→丙酮)從母液中獲得m.p.189-190℃；FAB-MS(M+H)+＝237；Anal.calc.(C15H12N2O·0.05H2O)C 75.96％，H 5.14％，N 11.81％；found C 75.8％，H 5.2％，N 11.9％。
S1e)1-氯-4-(吡啶-4-基甲基)-異喹啉在隔絕空氣的條件下，將32.7g(139mmol)4-(吡啶-4-基甲基)-2H-異喹啉-1-酮在560ml乙腈中制成漿并且加入69.2ml(277mmol)溶于二氧雜環(huán)己烷的4N HCl和31.7ml(346mmol)POCl3。在50℃下將混合物攪動22小時，然后在冰浴中冷卻，并且在30分鐘內(nèi)加入溶于1.64升水中的128.6g NaHCO3的溶液。在加入的過程中，首先形成了澄清的溶液，然后沉降標(biāo)題化合物，并且在15分鐘之后過濾出化合物，并用水和醚徹底洗滌，并且在60℃的高真空條件下干燥m.p.119-120℃；FAB-MS(M+H)+＝255。
實施例S21-(3-氯芐氨基)-4-[(吡啶-4-基)-甲基]-異喹啉在無水條件下，將1.6ml(13.1mmol)3-氯芐氨基和800mg(3.14mmol)1-氯-4-(吡啶-4-基甲基)-異喹啉(實施例1e)在150℃下攪動2小時。將混合物懸浮于乙酸乙酯中，加入1ml濃縮氨溶液，用水和鹽水洗滌并且干燥有機(jī)相(Na2SO4)并蒸發(fā)濃縮。柱層析(SiO2；乙酸乙酯)后得到標(biāo)題中的化合物m.p.141-142℃；FAB-MS(M+H)+＝360；Anal.calc.(C22H18N3Cl)C 73.43％，H 5.04％，N 11.68％，Cl 9.85％；found C 73.2％，H 5.1％，N 11.6％，Cl 9.9％。
實施例S31-(4-叔丁基苯胺基)-4-[(吡啶-4-基)-甲基]-異喹啉在無水條件下，在氮?dú)鈱酉聦?7.5ml(172.7mmol)4-叔丁基苯胺基和7.0g(27.5mmol)1-氯-4-(吡啶-4-基甲基)-異喹啉(實施例1e)于80℃下攪動3小時。然后將混合物冷卻并在5％(w/v)NaHCO3(水溶液)和乙酸乙酯中進(jìn)行分配。經(jīng)MgSO4干燥乙酸乙酯相并蒸發(fā)。通過快速層析(硅膠，50％(v/v)乙酸乙酯/己烷)和隨后從干冰/異丙基醇浴中的己烷結(jié)晶得到8.6g淺黃色粉末，m.p.157-159℃；Anal.calc.C 81.71％，H 6.86％，N11.43％；found C 81.88％，H 6.85％，N 11.43％。
生物學(xué)實施例使用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)從昆蟲細(xì)胞中純化具有人序列的活性B-Raf、C-Raf和V599E B-Raf蛋白質(zhì)。在用IκB-α包被并用Superblock封閉的96孔微孔板中測試Raf的抑制。使用磷酸化IκB-α特異抗體(Cell Signaling#9246)、偶聯(lián)有堿性磷酸酶的抗小鼠IgG二級抗體(Pierce # 31320)和堿性磷酸酶底物ATTOPHOS(Promega，#S101)可以檢測IκB-α在第36位絲氨酸上的磷酸化。
下面各化合物能夠以0.01-3.5μM的IC50抑制野生型C-RAF和/或以0.03-3.7μM的IC50抑制野生型B-RAF和/或以0.01-3.4μM的IC50抑制突變型B-RAF(V599E)。



















實施例D1A)人B-Raf基因中T1796A突變的檢測檢測引物GATTTTGGTCTAGCTACAGA二級引物GACTTTCTAGTAACTCAGCAG使用GENELUTE哺乳動物基因組DNA試劑盒(Sigma目錄號#G1N 350)從來自黑素瘤細(xì)胞系的人細(xì)胞中分離基因組DNA。在PCR儀(MJ Research，Model PTC100)上使用Roche的PCR Core試劑盒(目錄號#1578553)在50μl總體積中進(jìn)行PCR反應(yīng)。PCR反應(yīng)混合物包含5μl10×反應(yīng)緩沖液，1μl 10mM dNTPs，100-1000ng模板DNA，0.5μl Taq聚合酶(2.5-5單位)、1μl每種引物的31uM貯存液。
PCR條件如下95℃ 3分鐘
72℃ 10分鐘、4℃在擴(kuò)增后，將8μl PCR反應(yīng)混合物與2μl核酸上樣緩沖液[BioRad目錄號#161-0767]混合。將10μl樣品加到包含0.3μg/ml溴化乙錠[Pierce目錄號#17898]的1.5％瓊脂糖[GIBCO-BRL目錄號#15510-027]凝膠上。在相鄰的泳道中加上分子量標(biāo)準(zhǔn)[100bp DNA ladder購自Invitrogen，目錄號#10380-012]。通過在TAE緩沖液(0.04M Tris-乙酸，0.01M EDTA，0.02M冰醋酸pH8.4)[Roche目錄號#1666690]中的電泳分離DNA。電泳條件是120伏電泳30-40分鐘。在分離后將膠暴露于紫外線下并用AlphaImager2000取證(documentation)系統(tǒng)進(jìn)行拍照。
一般而言，在膠中可檢測到2條帶。跑到100bp分子量標(biāo)準(zhǔn)前面的遷移較快條帶代表引物。T1796A突變體特異的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物DNA具有152bp的預(yù)期大小并且如所期望遷移在100bp標(biāo)準(zhǔn)和200bp標(biāo)準(zhǔn)之間。通過測序證實PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的存在表明在模板DNA中存在T1796A突變。缺乏PCR擴(kuò)增產(chǎn)物證明組織樣品中缺乏突變。
通過使用指示下表所示突變的檢測引物和二級引物的方法來檢測其它B-RAF突變。


這些實施例旨在進(jìn)一步描述但非限制本發(fā)明。
序列表<110>諾瓦提斯公司<120>治療方法<130>4-32905A<160>28<170>PatentIn版本3.2<210>1<211>20<212>DNA<213>智人<400>1acagtgggac aaagaattga 20<210>2<211>20<212>DNA<213>智人<400>2acagtgggac aaagaattgt 20<210>3<211>20<212>DNA<213>智人<400>3ggacaaagaa ttggatctgc 20<210>4<211>20<212>DNA<213>智人
<400>4ggacaaagaa ttggatctga 20<210>5<211>20<212>DNA<213>智人<400>5ggacaaagaa ttggatctgt 20<210>6<211>20<212>DNA<213>智人<400>6attggatctg gatcatttgc 20<210>7<211>20<212>DNA<213>智人<400>7attggatctg gatcatttga 20<210>8<211>23<212>DNA<213>智人<400>8gagtaataat atatttcttc ata 23<210>9<211>20<212>DNA
<213>智人<400>9cagtaaaaat aggtgatttg 20<210>10<211>21<212>DNA<213>智人<400>10cagtaaaaat aggtgatttt c21<210>11<211>22<212>DNA<213>智人<400>11gtaaaaatag gtgattttgg tg 22<210>12<211>23<212>DNA<213>智人<400>12gtaaaaatag gtgattttgg tcg 23<210>13<211>20<212>DNA213>智人<400>13gattttggtc tagctacaga 20<210>14<211>21
<212>DNA<213>智人<400>14gattttggtc tagctacaga t 21<210>15<211>23<212>DNA<213>智人<400>15tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>16<211>23<212>DNA<213>智人<400>16tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>17<211>23<212>DNA<213>智人<400>17tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>18<211>23<212>DNA<213>智人<400>18tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>19
<211>23<212>DNA<213>智人<400>19tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>20<211>23<212>DNA<213>智人<400>20tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>21<211>23<212>DNA<213>智人<400>21tgtcaccaca ttacatactt acc 23<210>22<211>21<212>DNA<213>智人<400>22gactttctag taactcagca g21<210>23<211>21<212>DNA<213>智人<400>23actttctag taactcagca g 21
<210>24<211>21<212>DNA<213>智人<400>24gactttctag taactcagca g21<210>25<211>21<212>DNA<213>智人<400>25gactttctag taactcagca g21<210>26<211>21<212>DNA<213>智人<400>26gactttctag taactcagca g21<210>27<211>21<212>DNA<213>智人<400>27gactttctag taactcagca g21<210>28<211>21<212>DNA<213>智人<400>28gactttctag taactcagca g2權(quán)利要求
1.治療患有MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑信號過強(qiáng)所表征疾病的病人的方法，所述方法包括對病人施用有效抑制RAF激酶的量的式(I)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽， 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T相互獨(dú)立的為N或者CH，附加條件是A、B、D、E和T中至少一個但最多三個為N；G是低級亞烷基、-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-S02-、氧雜(-O-)、硫雜(-S-)或者-NR-，或者是被酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代的低級亞烷基；Q是低級烷基，特別是甲基；R是H或者低級烷基；X是Y、-N(R)-、氧雜或硫代；優(yōu)選為-NH-；Y是H、非取代或者取代的低級烷基、芳香基、雜芳香基或者非取代或取代環(huán)烷基；和Z是氨基、單取代或者二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷酰基、氨基甲?；?、N-單或N，N-二取代氨基甲酰基、脒基、胍基、巰基、磺基、笨硫基、苯低級烷基硫基、烷基苯硫基、苯亞磺酰基、苯低級烷基亞磺酰基、烷基苯亞磺?；?、苯磺?；?、苯低級烷基磺?；蛘咄榛交酋；?，并且如果存在不止一個Z基(m≥2)，則取代基Z可以是相同的或者不同的。
2.式(I)化合物或其N-氧化物或可藥用鹽的用途，用于制備治療MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑信號過強(qiáng)所表征疾病的藥物， 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T相互獨(dú)立的為N或者CH，附加條件是A、B、D、E和T中至少一個但最多三個為N；G是低級亞烷基、-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-SO2-、氧雜(-O-)、硫雜(-S-)或者-NR-，或者是被酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代的低級亞烷基；Q是低級烷基，特別是甲基；R是H或者低級烷基；X是Y、-N(R)-、氧雜或硫代；優(yōu)選為-NH-；Y是H、非取代或者取代的低級烷基、芳香基、雜芳香基或者非取代或取代環(huán)烷基；和Z是氨基、單取代或者二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷?；?、氨基甲?；?、N-單或N，N-二取代氨基甲?；?、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯低級烷基硫基、烷基苯硫基、苯亞磺?；?、苯低級烷基亞磺?；⑼榛絹喕酋；?、苯磺酰基、苯低級烷基磺酰基或者烷基苯磺?；⑶胰绻嬖诓恢挂粋€Z基(m≥2)則取代基Z可以是相同的或者不同的。
3.分別根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法或用途，其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N，或者A、B、E和T是CH并且D是N，或者A、T、D和E是CH并且B是N；特別是其中A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N；G是低級亞烷基、-CH2-NH-、-CH2-O-、羥基亞甲基或者苯甲酰氧基亞甲基；Q是甲基；R是H或者低級烷基；X是-NR-、氧雜或者硫雜；Y是非取代的或者用一個或兩個相同或者不同的選自氨基、低級烷?；被?、鹵素、非取代或者取代低級烷基、羥基、低級烷氧基、苯基低級烷氧基、氰基、低級鏈烯基、C8-C12烷氧基、低級烷氧基羰基、氨基甲酰基、低級烷基氨基甲?；?、低級烷?；?、苯氧基、鹵代低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷基巰基、鹵代低級烷基巰基、羥基低級烷基、低級鏈烷磺酰基、鹵代低級鏈烷磺?；?、苯基磺酰基和低級亞烷基二氧的取代基結(jié)合到兩個相鄰碳原子上進(jìn)行取代的苯基，或者其中兩個相臨近位置被亞烷基或者亞鏈烯基取代以形成融合到芳基環(huán)的5-7成員環(huán)的苯基；Z是氨基、N-低級烷基氨基、羥基低級烷基氨基、苯基低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、N-苯基低級烷基-N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基苯氨基、低級烷?；被⒈郊柞０被捅交图壨檠趸驶被?，其中在每種情況下的苯基是非取代的或者被硝基、氨基、鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、氨基甲酰基、2-羥乙基氨基、芐氧基羰基氨基或溴。
4.分別根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法或用途，其中r是0；n是0；m是0；B、D、E和T是CH并且A是N，或者A、B、D和E各是CH并且T是N；G是低級亞烷基；X是-NH-；Y是非取代的或者被一個或兩個相同或不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。
5.分別根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法或用途，其中r是0；n是0-2；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；R是H；X是-NR；和Y是非取代或者被鹵素、低級烷基、低級烷氧基或非取代或者被低級烷基取代的環(huán)己基取代的苯基。
6.分別根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法或用途，其中r是0；n是0；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；X是-NH-；和Y是被一個或兩個相同或不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法或用途，其中Y是在第4位被叔丁基取代的苯基。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的方法或用途，其中Y是在第4位被三氟甲基取代的苯基。
9.分別根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法或用途，其中所述的由MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑信號過強(qiáng)所表征的疾病是癌癥。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法或用途，其中所述癌癥是黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法或用途，其中所述癌癥是黑素瘤。
12.治療病人黑素瘤的方法，其中包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型RAF激酶或者過表達(dá)野生型RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過表達(dá)野生型RAF激酶或者表達(dá)活化了的突變型B-RAF激酶，則用有效抑制RAF激酶的量的式(I)化合物或者其N-氧化物或可藥用鹽治療病人， 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T相互獨(dú)立的為N或者CH，條件是A、B、D、E和T中至少一個但最多三個為N；G是低級亞烷基、-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-SO2-、氧雜(-O-)、硫雜(-S-)或者-NR-，或者是被酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代的低級亞烷基；Q是低級烷基，特別是甲基；R是H或者低級烷基；X是Y、-N(R)-、氧雜或硫代；優(yōu)選地為-NH-；Y是H、非取代或者取代的低級烷基、芳香基、雜芳香基或者非取代或取代環(huán)烷基；和Z是氨基、單取代或者二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷?；?、氨基甲酰基、N-單或N，N-二取代氨基甲?；?、脒基、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯低級烷基硫基、烷基苯硫基、苯亞磺?；⒈降图壨榛鶃喕酋；?、烷基苯亞磺?；?、苯磺?；?、苯低級烷基磺?；蛘咄榛交酋；⑶胰绻嬖诓恢挂粋€Z基(m≥2)，則取代基Z可以是相同的或者不同的。
13.式(I)化合物或者其N-氧化物或可藥用鹽用于制備治療黑素瘤的藥物的用途，所述用途包括(a)測試來自病人的黑素瘤組織以確定黑素瘤組織是否表達(dá)突變型RAF激酶或者過表達(dá)野生型RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過表達(dá)野生型RAF激酶或者表達(dá)活化了的突變型B-RAF激酶，則用有效的RAF激酶抑制量的式(I)化合物治療病人， 其中r是0-2；n是0-2；m是0-4；A、B、D、E和T相互獨(dú)立的為N或者CH，附加條件是A、B、D、E和T中至少一個但最多三個為N；G是低級亞烷基、-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-SO2-、氧雜(-O-)、硫雜(-S-)或者-NR-，或者是被酰氧基、氧、鹵素或者羥基取代的低級亞烷基；Q是低級烷基，特別是甲基；R是H或者低級烷基；X是Y、-N(R)-、氧雜或硫代；優(yōu)選為-NH-；Y是H、非取代或者取代的低級烷基、芳香基、雜芳香基或者非取代或取代環(huán)烷基；和Z是氨基、單取代或者二取代氨基、鹵素、烷基、取代烷基、羥基、醚化或酯化羥基、硝基、氰基、羧基、酯化羧基、烷?；被柞；?、N-單或N，N-二取代氨基甲?；㈦呋?、胍基、巰基、磺基、苯硫基、苯低級烷基硫基、烷基苯硫基、苯亞磺?；⒈降图壨榛鶃喕酋；⑼榛絹喕酋；?、苯磺?；⒈降图壨榛酋；蛘咄榛交酋；?，并且如果存在不止一個Z基(m≥2)則取代基Z可以是相同的或者不同的。
14.分別根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法或用途，其中r是0-2；n是0或1；m是0或1；A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N，或者A、B、E和T是CH并且D是N，或者A、T、D和E是CH并且B是N；特別是其中A、B、D和E各是CH并且T是N，或者A、D和E各是CH并且B和T是N，G是低級亞烷基、-CH2-NH-、-CH2-O-、羥基亞甲基或者苯甲酰氧基亞甲基；Q是甲基；R是H或者低級烷基；X是-NR-、氧雜或者硫雜；Y是非取代的或者用一個或兩個相同或者不同的選自氨基、低級烷?；薄Ⅺu素、非取代或者取代低級烷基、羥基、低級烷氧基、苯基低級烷氧基、氰基、低級鏈烯基、C8-C12烷氧基、低級烷氧基羰基、氨基甲?；?、低級烷基氨基甲?；?、低級烷酰基、苯氧基、鹵代低級烷氧基、低級烷氧基羰基、低級烷基巰基、鹵代低級烷基巰基、羥基低級烷基、低級鏈烷磺?；?、鹵代低級鏈烷磺?；?、苯基磺?；偷图墎喭榛醯娜〈Y(jié)合到兩個相鄰碳原子上進(jìn)行取代的苯基，或者其中兩個相臨近位置被亞烷基或者亞鏈烯基取代以形成融合到芳基環(huán)的5-7成員環(huán)的苯基；Z是氨基、N-低級烷基氨基、羥基低級烷基氨、苯基低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、N-苯基低級烷基-N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基苯氨基、低級烷?；被?、苯甲酰氨基和苯基低級烷氧基羰基氨基，其中在每種情況下的苯基是非取代的或者被硝基、氨基、鹵素、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷?；?、氨基甲?；?-羥乙基氨基、芐氧基羰基氨基或溴取代的苯基。
15.分別根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法或用途，其中r是0；n是0；m是0；B、D、E和T是CH并且A是N，或者A、B、D和E各是CH并且T是N；G是低級亞烷基；X是-NH-；Y是非取代的或者被一個或兩個相同或不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。
16.分別根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法或用途，其中r是0；n是0-2；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；R是H；X是-NR；和Y是非取代或者被鹵素、低級烷基、低級烷氧基或非取代或者被低級烷基取代的環(huán)己基取代的苯基。
17.分別根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法或用途，其中r是0；n是0；m是0；A、B、D和E各是CH并且T是N；G是亞甲基；X-NH-；和Y是被一個或兩個相同或不同的選自鹵素和低級烷基的取代基取代的苯基。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法或用途，其中Y是第4位被叔丁基取代的苯基。
19.分別根據(jù)權(quán)利要求12或13的方法或用途，其中所述黑素瘤表達(dá)突變型RAF激酶。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法或用途，其中所述突變型RAF激酶對應(yīng)選自G1388A、G1388T、G1394C、G1394A、G1394T、G1403C、G1403A、G1753A、T1782G、G1783C、C1786G、T1787G、T1796A和TG1796-97AT的B-RAF激酶基因中的突變。
21.根據(jù)權(quán)利要求18的方法或用途，其中所述的黑素瘤表達(dá)突變型RAF激酶。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法或用途，其中所述的突變型RAF激酶是V599E突變。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過對需要此種治療的病人施用式(I)化合物來治療由異常MAP激酶信號傳導(dǎo)途徑所表征的疾病，其中可變的取代基為本文所定義的取代基。本發(fā)明方法對于治療具有突變RAF激酶的癌癥(特別是黑素瘤)特別有用。
文檔編號A61K31/472GK1758910SQ200480006570
公開日2006年4月12日 申請日期2004年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月11日
發(fā)明者D·B·巴特, G·博爾德, S·金, T·M·拉姆齊, M·L·薩比奧 申請人:諾瓦提斯公司