專利名稱：藏藥獨一味軟膠囊制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種單味中藥軟膠囊制劑及其制備方法，特別是涉及一種藏藥獨一味的軟膠囊制劑及其制備方法，屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
獨一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo為唇形科植物，原屬糙蘇屬(Phlomis Linn)，現(xiàn)已從該屬中分出成為獨立的屬，稱獨一味屬，僅1種，又名獨步通，藏語亦稱“大巴”、“打布巴”。其根及根莖或全草人藥，是我國藏、蒙及納西等民族民間常用草藥之一。是藏、蒙及納西民間經(jīng)常用來治療刀、槍傷、跌打損傷、浮腫后流黃水，關(guān)節(jié)炎等疾患的草藥，具有止血止痛、抗菌消炎、活血化瘀的功效。
現(xiàn)代藥理研究獨一味具有以下藥理作用鎮(zhèn)痛作用10％獨一味浸膏0.28ml/10g或0.14ml/10g，給小白鼠灌胃，有鎮(zhèn)痛作用，持續(xù)時間約2小時；獨一味浸膏0.19-3.0g/kg的鎮(zhèn)痛作用與0.23g/kg的阿斯匹林相當(dāng)。
止血作用10％或5％獨一味浸膏0.14ml/10g，給小白鼠灌胃，出血時間由給藥前7.1-7.7分鐘，分別縮短至4.7和3.2分鐘(P＜0.01)，表明有止血作用。
抗菌作用獨一味浸膏對乙型溶血性鏈球菌和產(chǎn)氣桿菌有抑菌作用。獨一味葉皂甙對瘌疾桿菌、綠膿桿菌、產(chǎn)氣桿菌、枯草桿菌和乙型溶血性鏈球菌均有抑菌作用。
免疫作用獨一味浸膏能提高巨噬細(xì)胞吞噬率、巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)、E一花環(huán)形成率及酯酶染色陽性率，表明獨一味有提高非特異性免疫和特異性細(xì)胞免疫的作用。
藏藥獨一味經(jīng)毒理實驗證實其毒副作用小，它的止痛、止血、抑菌，增加機體免疫力的作用機理使其在外科創(chuàng)傷方面有著廣泛的使用價值。外科臨床可用于治療骨折鎮(zhèn)痛、腰椎間盤突出癥、骨性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
根據(jù)對獨一味的化學(xué)和藥理研究結(jié)果，其具有較好的鎮(zhèn)痛和止血功能外。臨床可用于治療糜爛出血性胃炎、消化性潰瘍出血、偏頭痛、泌尿系統(tǒng)感染出血、泌尿道結(jié)石鎮(zhèn)痛出血、慢性細(xì)菌前列腺炎等。
藏藥獨一味還具有扶正固本和提高免疫功能的作用，本藥對計劃生育手術(shù)引起的副作用亦有很好的療效，特別是對放環(huán)及藥流術(shù)后點滴狀淋漓不盡的陰道流血，較西藥療效更好，表明本品是有發(fā)展前景的中藥，值得臨床推廣應(yīng)用。
另外，獨一味還含有17種氨基酸和21種微量元素，可為關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)提供豐富充足的營養(yǎng)物質(zhì)，從而達(dá)到強筋壯骨的目的。
藏藥獨一味在臨床應(yīng)用廣泛，效果好，毒副作用小，頗具臨床價值。但是臨床上控制疼痛、出血性疾病癥狀需要一種能夠服用量小，起效快的藥物來滿足臨床用藥需要，為了充分開發(fā)藏藥資源，增加藏藥劑型，是獨一味制劑開發(fā)的重要研究方向。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種以藏藥獨一味的有效部位提取物為主要原料的軟膠囊制劑；本發(fā)明的第二個目的是以藏藥獨一味的有效部位提取物為主要原料的提供一種軟膠囊制劑的制備工藝。
通過以下技術(shù)手段均可得到本發(fā)明所述的獨一味軟膠囊工藝方案1、1.取獨一味藥材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10～30倍量的水，煎煮1～2小時，第二次加10～20倍量水，煎煮0.5～1.5小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。
2.取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
工藝方案2、1.取獨一味藥材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10～30倍量的水，煎煮1～2小時，第二次加10～20倍量水，煎煮0.5～1.5小時，合并藥液，濾過，濃縮備用。
2.將濃縮液過大孔樹脂層析柱，用30～50倍蒸餾水洗脫，收集洗脫液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。
3.取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
工藝方案3、1.取獨一味藥材，粉碎成粗粉，加70％～99％的乙醇回流提取2～3次，第一次加乙醇8～12倍量，回流1～3小時，第2、3次加乙醇6～10倍量，回流1～2小時。合并回流液，減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，得到醇提濃縮液。
2.醇提濃縮液加水混懸后，依次用石油醚、正丁醇萃取2～3次，回收溶劑，干燥，得到石油醚提取物A，正丁醇提取物B，提取剩余部分為水提取物C。
3.合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
工藝方案4、1.取獨一味藥材，粉碎成粗粉，置于滲漉器中用70％～90％乙醇浸泡12～36小時后，以5ml～10ml/min的速度滲漉，直至流出液經(jīng)薄層層析檢測無斑點為止。減壓濃縮回收乙醇至無醇味，得到獨一味滲漉液。
2.將獨一味滲漉液加水靜置12～36小時，得到沉淀物A，干燥備用。上清液過大孔樹脂層析柱，分別用30～50倍蒸餾水，30～50倍15％～45％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得到提取物B、C。
3.合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
本發(fā)明所用植物油可以是大豆油、色拉油、麻油、花生油、玉米油、杏仁油、桃仁油、棉籽油、葵花籽油、蓖麻油、橄欖油中的一種或幾種；所述的助懸劑可以是甘油、吐溫-80、棕櫚油、單硬脂酸鋁、大豆卵磷脂、蜂蠟等中的任意一種或幾種。
本發(fā)明軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制[鑒別]獨一味的薄層色譜鑒別本發(fā)明為獨一味經(jīng)加工制成的軟膠囊劑，采用TLC法以獨一味對照藥材為對照，鑒別本品中獨一味，該方法重現(xiàn)性好，專屬性強。
取本品內(nèi)容物0.3g，加乙醇5ml，加熱回流10分鐘，濾過，取濾液2ml，濃縮至約1ml，作為供試品溶液。
另取獨一味對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典2000年版一部》附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上(不活化)，以氯仿-甲醇(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105℃加熱約15分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
采用高效液相色譜法測定木犀草素的含量測定(1)色譜條件 色譜柱Hypersil BDS C18(4.6×150mm，5μm)流動相甲醇-0.2％磷酸溶液(40∶60)，檢測波長350nm，檢測靈敏度0.01AUFS，柱溫30℃，流速1.0ml/min，進(jìn)樣量10μl。
(2)對照溶液的制備精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，即得。
(3)供試品溶液的制備分別取各提取試驗項下的浸膏粉約2g，精密稱定，分別置100ml磨口具塞三角瓶中，精密加甲醇25ml稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
(4)線性關(guān)系精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含28.5μg的溶液，吸取該溶液2、5、8、10、12、15μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜測定木犀草素吸收峰面積，以木犀草素吸收峰面積的積分值為A，進(jìn)樣量為C，線性回歸，得回歸方程A＝4×106C-11414，R＝0.9999(n＝6)，結(jié)果表明，在0.057μg□0.4275μg范圍內(nèi)濃度與面積呈良好的線性關(guān)系。
(5)回收率試驗精密稱取已知含量的樣品1g，精密加入木犀草素鈉對照品適量，按供試品溶液制備方法制備，并按上述色譜條件測試，平均回收率為99.68％，RSD為1.21％(n＝6)。
本品獨一味中木犀草素的含量，經(jīng)測定本品樣品中每粒木犀草素的含量在0.8000mg～1.8105mg之間，根據(jù)測定結(jié)果規(guī)定本品每粒含獨一味以木犀草素計，不得少于0.8000mg。
本發(fā)明提供的獨一味軟膠囊劑系指將獨一味藥材提取浸膏粉加適宜的輔料密封于球形、橢圓形或其他形狀的軟質(zhì)囊材中制成的藥劑，其具有以下優(yōu)點與現(xiàn)有劑型相比，該劑型服用劑量小，在腸胃道中崩解快，吸收、顯效也快，生物利用度高、療效確切，制劑穩(wěn)定性增強。本發(fā)明提供的獨一味軟膠囊劑制備工藝中得到的獨一味提取物純度高，止血、鎮(zhèn)痛的療效明確。
下面實驗例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明。
實驗例1 獨一味水提制備工藝研究(1)、最佳工藝條件的確定1.粉碎度的考察獨一味軟膠囊采用水煎煮法提取獨一味中有效成分，獨一味為全草類藥物，直接煎煮不利于有效成分的提出，將其粉碎后，增大藥物的比表面積，利于有效成分的提取。
取獨一味藥材三份，各1000g，分別粉碎成最粗粉(指能全部通過一號篩，但混有能通過三號篩不超過20％的粉末)、粗粉(指能全部通過二號篩，但混有能通過四號篩不超過40％的粉末)、中粉(指能全部通過四號篩，但混有能通過五號篩不超過60％的粉末)，以煎煮藥液的過濾速度、浸膏粉得率為考察指標(biāo)，考察藥材粉碎細(xì)度，結(jié)果見表1。
表1藥材粉碎細(xì)度試驗投料量(g)粉碎度過濾速度浸膏粉得率(％)1000 最粗粉 迅速 25.71000 粗粉慢26.41000 中粉很慢 27.2試驗結(jié)果表明，將獨一味藥材粉碎成最粗粉，粗粉、中粉經(jīng)煎煮浸膏粉得率無明顯差異，而最粗粉煎煮藥液過濾迅速，中粉、粗粉煎煮藥液過濾速度慢，不便于生產(chǎn)中操作，故選擇將獨一味粉碎成最粗粉后煎煮。
2.吸水率的考察取獨一味藥材，粉碎成最粗粉，稱取三份，各1000g，分別加20倍量的水浸泡12小時，濾去剩余水，再分別稱每份藥材重量，計算吸水率，結(jié)果見表2。
表2吸水率試驗結(jié)果編號浸泡前藥材重量(g) 浸泡后藥材重(g)吸水率(％)1 1000 4816 381.6％2 1000 4834 383.4％3 1000 4764 376.4％平均吸水率為380.47％。
3.最佳提取條件的確定獨一味中所含鎮(zhèn)痛、止血有效成分以黃酮類、甙類、糖類等為主，這些化合物在水中溶解度大。在本品制備工藝研究中，以得粉率及木犀草素的含量為考察指標(biāo)，對影響煎煮效果的煎煮次數(shù)，煎煮時間，加水量進(jìn)行了篩選，具體方法如下。
煎煮次數(shù)對煎煮效果的影響取獨一味藥材三份，每份1000g，加20倍的水，分別煎煮1次、2次、3次，分別濾過，濾液濃縮，干燥，計算得粉率并測定木犀草素的含量，結(jié)果見表3。
表3煎煮次數(shù)對煎煮效果的影響投料量(g) 煎煮次數(shù)(次)得粉率(％)木犀草素含量(％)1000115.49 0.0211000221.17 0.0371000323.24 0.032結(jié)果表明，煎煮2次和煎煮3次，得粉率和木犀草素含量接近，為降低生產(chǎn)成本，選擇煎煮2次。
煎煮時間對煎煮效果的影響取獨一味藥材三份，每份1000g，加20倍的水煎煮二次，每次煎煮時間分別按A(1小時、1小時)，B(1小時、0.5小時)C(1.5小時、1小時)三組試驗方案進(jìn)行考察，計算得粉率，并測定木犀草素的含量，結(jié)果見表4。
表4煎煮時間對煎煮效果的影響投料量(g)煎煮時間(小時)得粉率(％) 木犀草素含量(％)1000 A(1，0.5) 20.08 0.0221000 B(1，1) 21.75 0.0291000 C(1.5，1) 25.37. 0.035(注煎煮時間括號內(nèi)的數(shù)值分別為第一次、二次煎煮時間)。
結(jié)果表明A組試驗方案得粉率及木犀草素的含量最低，C組試驗方案得粉率及木犀草素的含量最高，所以選擇C組試驗方案，即煎煮二次，第1次煎煮1.5小時，第2次煎煮1小時。
加水量對煎煮效果的影響取獨一味藥材三份，每份1000g，煎煮二次，每次1小時，每次加水量分別按A(15倍、10倍)，B(20倍、15倍)C(25倍、20倍)三組試驗方案進(jìn)行考察，計算得粉率并測定木犀草素的含量，結(jié)果見表5。
表5 加水量對煎煮效果的影響投料量(g) 加水量(倍) 得粉率(％) 木犀草素含量(％)1000 A(15，10) 14.51 0.0231000 B(20，15) 21.19 0.0371000 C(25，20) 23.63 0.029
(注加水量括號內(nèi)的數(shù)值分別為第一次、二次加水量)。
結(jié)果表明A組試驗方案得粉率和木犀草素含量最低，B組試驗方案得粉率與C組試驗方案相近，而木犀草素的相對含量比C組高，所以結(jié)合療效及服用量，降低生產(chǎn)成本，選擇B組方案，即煎煮二次，第一次加20倍量的水，第二次加15倍量的水。
以上試驗結(jié)果表明，本品最佳提取工藝為獨一味粉碎成最粗粉加水煎煮二次，第一次加20倍量水，煎煮1.5小時，第二次加15倍量水，煎煮1小時。
實驗例2 獨一味水提最佳提取工藝驗證試驗取10倍處方量獨一味藥材，粉碎成最粗粉，稱取三份，每份10000g，分別按上述提取工藝進(jìn)行三批樣品工藝驗證試驗，結(jié)果見表6。
表6最佳提取工藝驗證試驗批號投料量(g) 得粉量(g) 得粉率(％)木犀草素含量(％)1 10000 2448.6 24.490.0332 10000 2234.1 22.340.0313 10000 2692.5 26.920.026實驗例3 獨一味水提分離除雜工藝為了除去藥液中固體微粒，生產(chǎn)中多用過濾方法。由于本方獨一味在加熱過程中極易煮爛，使藥液渾濁、粘稠，難于過濾，且所成浸膏粉吸潮性強。反復(fù)試驗證明，藥液趁熱用粗帆布作濾材，用板框壓濾機進(jìn)行粗濾，濾液再用細(xì)帆布中夾8層濾紙重復(fù)壓濾，而得到澄明液體。
濾液過大孔樹脂層析柱，用水洗脫，可以除去植物蛋白、鞣質(zhì)等雜質(zhì)。對洗脫加水量的考察見表7。
表7洗脫加水量對得粉率的影響濃縮濾液(g)洗脫加水量(倍) 得粉率(％)1000 A(30)16.361000 B(40)19.861000 C(50)20.13
結(jié)果表明A組試驗方案得粉率最低，B組試驗方案得粉率與C組試驗方案相近，所以考慮生產(chǎn)成本的問題，選擇B組方案，即濾液過大孔樹脂層析柱后用40倍水洗脫。
實驗例4 獨一味乙醇回流提取條件研究在獨一味乙醇提取工藝研究中，以得粉率及木犀草素的含量為考察指標(biāo)，對影響提取效果的回流次數(shù)，回流時間，乙醇濃度和乙醇量進(jìn)行了篩選，具體方法如下取獨一味藥材三份，每份1000g，按不同的回流次數(shù)，回流時間，乙醇濃度和乙醇量濃縮，干燥，計算得粉率并測定木犀草素的含量，結(jié)果見表8。
表8不同提取條件對提取效果的影響投料量(g) 回流次數(shù)(次) 乙醇濃度(％)得粉率(％)木犀草素含量(％)75 21.41 0.0221000 285 22.58 0.02695 23.15 0.02975 22.17 0.0271000 385 23.36 0.03095 24.87 0.03475 23.11 0.0271000 485 24.57 0.03295 24.92 0.036結(jié)果表明，用95％的乙醇回流提取3次，得粉率和木犀草素含量最高，故選擇用95％的乙醇回流提取3次來提取獨一味。
實驗例5 浸膏粉細(xì)度的確定制備混懸體時，從混懸液的沉降公式(stock`s公式)V＝2r2(d1-d2)g/9η(V為微粒沉降速度，r為微粒半徑，d1為微粒密度，d2為分散介質(zhì)密度，η為分散介質(zhì)的粘度)可以推知，減小粒度，增加分散媒粘度都可以有效地減小沉降速度，保證混懸液的穩(wěn)定性。所以提取物干粉的粒度越細(xì)越易混勻?，F(xiàn)以沉降比為考察指標(biāo)確定本品制劑中提取物粉的最佳細(xì)度。
取獨一味提取物干粉三份各50g，分別粉碎成過80目、120目、200目篩的細(xì)粉。取上述三種細(xì)粉各5g分別置直徑相同的50ml具塞刻度量筒中，加入同一分散介質(zhì)(大豆油∶蜂蠟＝10∶1)，放置3小時，測定其沉降比。平行操作3份，結(jié)果見表9。
沉降比F＝Hu/Ho式中Ho為原始高度，Hu為經(jīng)過靜置后沉降示的高度。
表9不同細(xì)度的浸膏粉沉降比測定結(jié)果浸膏粉細(xì)度 沉降比80目 0.38120目 0.76200目 0.92試驗結(jié)果表明過200目篩的細(xì)粉F值最大，因此將獨一味提取物干粉碎成過200目篩的細(xì)粉，制成的軟膠囊內(nèi)容物混懸體系最穩(wěn)定。
實驗例6 制備軟膠囊處方及輔料的優(yōu)化篩選為確定本品制劑中最佳輔料，擬定了4個處方，分別以內(nèi)容物的沉降比、成品的裝量差異、成品率為考察指標(biāo)，篩選最佳輔料。
處方的設(shè)計處方1 獨一味提取物干粉 260g色拉油300g大豆磷脂 20g制成 1000粒處方2 獨一味提取物干粉 260g大豆油260g棕櫚油60g制成 1000粒處方3獨一味提取物干粉 260g大豆油268g棕櫚油42g大豆磷脂 10g制成 1000粒處方4獨一味提取物干粉 260g大豆油290g蜂蠟 30g制成 1000粒1.軟膠囊內(nèi)容物沉降比的測定取上述不同處方制成的軟膠囊內(nèi)容物適量，分別置直徑相同的50ml具塞刻度量筒中，放置3小時測定其沉降比，平行操作3份。結(jié)果見表10。
表10不同處方制成軟膠囊內(nèi)容物沉降比測定結(jié)果處方 沉降比1號 0.852號 0.543號 0.674號 0.922.裝量差異及成品率的考察對以上4種不同處方制成軟膠囊裝量差異及成品率進(jìn)行考察，結(jié)果見表11。
表11裝量差異檢查及成品率考察結(jié)果處方號裝量差異 成品率(％)1號合格 72.32號合格 65.83號合格 62.24號合格 91.34試驗結(jié)果表明，處方1、2、3、4制得的軟膠囊內(nèi)容物均勻、穩(wěn)定、流動性好，成品率高、裝量差異檢查符合規(guī)定，選擇處方4為最佳處方。
實驗例7 獨一味提取物的藥效學(xué)試驗1、乙醇回流液用石油醚、正丁醇、水提取分別得到提取物A、B、C。用醋酸小白鼠扭體法考察提取物A、B、C對小鼠的鎮(zhèn)痛作用，用小白鼠尾靜脈止血試驗來考察提取物A、B、C的止血作用。結(jié)果見表12。
表12提取物A、B、C的鎮(zhèn)痛、止血作用提取物鎮(zhèn)痛百分率(％) 出血時間縮短(分)A 85 2.3B 90 4.7C 1003.8結(jié)果表明提取物A、B、C均有一定的止血鎮(zhèn)痛作用。
2、乙醇滲漉液用水沉淀得到提取物A，上清液過大孔樹脂，分別用水、乙醇洗脫得到提取物B、C。
用醋酸小白鼠扭體法考察提取物A、B、C對小鼠的鎮(zhèn)痛作用，用小白鼠尾靜脈止血試驗來考察提取物A、B、C的止血作用。結(jié)果見表13。
表13提取物A、B、C的鎮(zhèn)痛、止血作用提取物 鎮(zhèn)痛百分率(％) 出血時間縮短(分)A 90 3.9B 1005.2C 90 3.3結(jié)果表明提取物A、B、C均有一定的止血鎮(zhèn)痛作用。
上述提取物經(jīng)薄層層析(TLC)分析發(fā)現(xiàn)石油醚提取的部分為脂溶性成分(5、7、3′、4′-四羥基黃酮，5、7、3′、4′-甲羥基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷，5、7、4′-三羥基黃酮-7-O-β-新橙皮糖苷，偏諾皂苷元糖苷，β-谷甾醇和正三十三烷等)，占14％～18％；正丁醇提取的部分為黃酮類和甙類(木犀草素，木犀草素-7-O-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-O-阿拉伯糖苷，芹菜素，芹菜素-7-O新橙皮糖苷，β-谷甾醇等)，占8％～22％；水提的部分為多糖類占55％～65％。
經(jīng)薄層層析(TLC)鑒別發(fā)現(xiàn)，大孔樹脂分離法中水沉淀物與石油醚提取物相似，為脂溶性成分，占16％～21％；水洗脫部分與乙醇回流中水提取物相似，為多糖類成分，占25％～30％；乙醇洗脫部分與正丁醇提取物成分相似，為黃酮類和甙類成分占45％～60％。
實施例1獨一味軟膠囊的制備(水提法)1、取獨一味1000g，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加20倍量的水，煎煮1.5小時，第二次加15倍量水，煎煮1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；得提取物260g.
2、取大豆油290g加熱到80℃，加入蜂蠟30g，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，壓制成軟膠囊，干燥，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊1000粒。
實施例2獨一味軟膠囊的制備(水提+大孔樹脂吸附)1、獨一味藥材1000g，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加20倍量的水，煎煮1.5小時，第二次加15倍量水，煎煮1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮備用。
2、將濃縮液過大孔樹脂層析柱，用40倍水洗脫，收集洗脫液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；得提取物200g。
3、取玉米油270g加熱到80℃，加入大豆卵磷脂20g，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，壓制成軟膠囊，干燥，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊1000粒。
實施例3獨一味軟膠囊的制備(乙醇回流+有機溶劑提取)1、取獨一味藥材1000g，粉碎成粗粉，加95％的乙醇回流提取3次，第一次加乙醇10倍量，回流2小時，第2、3次加乙醇8倍量，回流1.5小時。合并回流液，減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，得到醇提濃縮液。
2、醇提濃縮液加等量蒸餾水混合均勻后，依次用等量石油醚、正丁醇萃取3次，回收溶劑，干燥，得到石油醚提取物A45g，正丁醇提取物B56g，提取剩余部分為水提取物C160g。
3、合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。取橄欖油320g加熱到80℃，加入助懸劑棕櫚油65g，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊1000粒。
實施例4獨一味軟膠囊的制備(乙醇滲漉+大孔樹脂分離)1、取獨一味藥材1000g，粉碎成粗粉，置于滲漉器中用80％乙醇浸泡24小時后，以5mll/min的速度滲漉，直至流出液經(jīng)薄層層析檢測無斑點為止。減壓濃縮回收乙醇至無醇味，得到獨一味滲漉液。
2、將獨一味滲漉液加等量蒸餾水靜置24小時，得到沉淀物A51g，干燥備用。上清液過大孔樹脂層析柱，先用40倍蒸餾水洗脫，洗脫液回收干燥得到提取物B72g，再用40倍量30％乙醇洗脫，回收洗脫液中乙醇，干燥，得到提取物C137g。
3、合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用。取大豆油300g加熱到80℃，加入助懸劑棕櫚油30g，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊1000粒。
實施例5獨一味軟膠囊的質(zhì)量控制方法[鑒別]獨一味的薄層色譜鑒別本發(fā)明為獨一味經(jīng)加工制成的軟膠囊劑，采用TLC法以獨一味對照藥材為對照，鑒別本品中獨一味，該方法重現(xiàn)性好，專屬性強。
取本品內(nèi)容物0.3g，加乙醇5ml，加熱回流10分鐘，濾過，取濾液2ml，濃縮至約1ml，作為供試品溶液。
另取獨一味對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典2000年版一部》附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上(不活化)，以氯仿-甲醇(4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105℃加熱約15分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
采用高效液相色譜法測定木犀草素的含量測定(1)色譜條 件色譜柱Hypersil BDS C18(4.6×150mm，5μm)流動相甲醇-0.2％磷酸溶液(40∶60)，檢測波長350nm，檢測靈敏度0.01AUFS，柱溫30℃，流速1.0ml/min，進(jìn)樣量10μl。
(2)對照溶液的制備精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，即得。
(3)供試品溶液的制備分別取各提取試驗項下的浸膏粉約2g，精密稱定，分別置100ml磨口具塞三角瓶中，精密加甲醇25ml稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
(4)線性關(guān)系精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含28.5μg的溶液，吸取該溶液2、5、8、10、12、15μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜測定木犀草素吸收峰面積，以木犀草素吸收峰面積的積分值為A，進(jìn)樣量為C，線性回歸，得回歸方程A＝4×106C-11414，R＝0.9999(n＝6)，結(jié)果表明，在0.057μg～0.4275μg范圍內(nèi)濃度與面積呈良好的線性關(guān)系。
(5)回收率試驗精密稱取已知含量的樣品1g，精密加入木犀草素鈉對照品適量，按供試品溶液制備方法制備，并按上述色譜條件測試，平均回收率為99.68％，RSD為1.21％(n＝6)。
本品獨一味中木犀草素的含量，經(jīng)測定本品樣品中每粒木犀草素的含量在0.8000mg～1.8105mg之間，根據(jù)測定結(jié)果規(guī)定本品每粒含獨一味以木犀草素計，不得少于0.8000mg。
權(quán)利要求
1.一種獨一味的軟膠囊制劑，其特征在于該軟膠囊由如下重量份的原料藥組成獨一味提取物20～30重量份，植物油25～36重量份，助懸劑1～5重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的獨一味軟膠囊制劑，其特征在于由如下重量份的原料藥組成獨一味提取物26重量份，植物油29重量份，助懸劑3重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的獨一味的軟膠囊制劑，其特征在于所述的獨一味提取物中含有脂溶性成分14％～21％、黃酮類和甙類8％～60％、糖類25％～65％。
4.如權(quán)利要求3所述的制劑，其特征在于有脂溶性成分為5、7、3′、4′-四羥基黃酮，5、7、3′、4′-甲羥基黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-3-O-β-L-阿拉伯糖苷，5、7、4′-三羥基黃酮-7-O-β-新橙皮糖苷，偏諾皂苷元糖苷，β-谷甾醇和正三十三烷；黃酮類和甙類為木犀草素，木犀草素-7-O-葡萄糖苷，槲皮素，槲皮素-O-阿拉伯糖苷，芹菜素，芹菜素-7-O新橙皮糖苷，β-谷甾醇。
5.如權(quán)利要求4所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10～30倍量的水，煎煮1～2小時，第二次加10～20倍量水，煎煮0.5～1.5小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
6.如權(quán)利要求5所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為獨一味藥材100重量份粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加20倍量的水，煎煮1.5小時，第二次加15倍量水，煎煮1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取大豆油29重量份加熱到80℃，加入蜂蠟3重量份，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，干燥，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
7.如權(quán)利要求4所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加10～30倍量的水，煎煮1～2小時，第二次加10～20倍量水，煎煮0.5～1.5小時，合并藥液，濾過，濃縮備用；將濃縮液過大孔樹脂層析柱，用30～50倍蒸餾水洗脫，收集洗脫液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
8.如權(quán)利要求7所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為獨一味藥材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加20倍量的水，煎煮1.5小時，第二次加15倍量水，煎煮1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮備用；將濃縮液過大孔樹脂層析柱，用40倍蒸餾水洗脫，收集洗脫液濃縮成稠膏，減壓干燥，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取大豆油加熱到80℃，加入蜂蠟，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述浸膏細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，干燥，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
9.如權(quán)利要求4所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材，粉碎成粗粉，加70％～99％的乙醇回流提取2～3次，第一次加乙醇8～12倍量，回流1～3小時，第2、3次加乙醇6～10倍量，回流1～2小時；合并回流液，減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，得到醇提濃縮液；醇提濃縮液加水混懸后，依次用石油醚、正丁醇萃取2～3次，回收溶劑，干燥，得到石油醚提取物A，正丁醇提取物B，提取剩余部分為水提取物C；合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
10.如權(quán)利要求9所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材，粉碎成粗粉，加90％的乙醇回流提取3次，第一次加乙醇10倍量，回流2小時，第2、3次加乙醇8倍量，回流1.5小時；合并回流液，減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，得到醇提濃縮液；醇提濃縮液加等量水混懸后，依次用等量石油醚、正丁醇萃取3次，回收溶劑，干燥，得到石油醚提取物A，正丁醇提取物B，提取剩余部分為水提取物C；合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取大豆油加熱到80℃，加入助懸劑蜂蠟，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
11.如權(quán)利要求4所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材，粉碎成粗粉，置于滲漉器中用70％～90％乙醇浸泡12～36小時后，以5ml～10ml/min的速度滲漉，直至流出液經(jīng)薄層層析檢測無斑點為止；減壓濃縮回收乙醇至無醇味，得到獨一味滲漉液；將獨一味滲漉液加水靜置12～36小時，得到沉淀物A，干燥備用；上清液過大孔樹脂層析柱，分別用30～50倍蒸餾水，30～50倍15％～45％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得到提取物B、C；合并上述A、B、C三種提取物，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取植物油加熱到80℃，加入助懸劑，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
12.如權(quán)利要求11所述的獨一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于該方法為取獨一味藥材100重量份，粉碎成粗粉，置于滲漉器中用80％乙醇浸泡24小時后，以5ml/min的速度滲漉，直至流出液經(jīng)薄層層析檢測無斑點為止；減壓濃縮回收乙醇至無醇味，得到獨一味滲漉液；將獨一味滲漉液加水靜置24小時，得到沉淀物A，干燥備用；上清液過大孔樹脂層析柱，分別用40倍蒸餾水，40倍30％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得到提取物B、C；合并上述A、B、C三種提取物共26重量份，粉碎成細(xì)粉，過200目篩備用；取大豆油29重量份加熱到80℃，加入助懸劑蜂蠟3重量份，使其溶化，放涼至40℃左右，加入上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，壓制成軟膠囊，經(jīng)洗丸、干燥即得獨一味軟膠囊。
13.如權(quán)利要求5、6、7、8、9、10、11、12中所述的獨一味軟膠囊制劑，其特征在于所用植物油是大豆油、色拉油、麻油、花生油、玉米油、杏仁油、桃仁油、棉籽油、葵花籽油、蓖麻油、橄欖油中的一種或幾種。
14.如權(quán)利要求5、6、7、8、9、10、11、12中所述的獨一味軟膠囊制劑，其特征在于所用助懸劑可以是甘油、吐溫-80、棕櫚油、單硬脂酸鋁、大豆卵磷脂、蜂蠟等中的任意一種或幾種。
15.如權(quán)利要求1或2所述的獨一味軟膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中鑒別方法為照薄層色譜法取軟膠囊內(nèi)容物0.3g，加乙醇5ml，加熱回流10分鐘，濾過，取濾液2ml，濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取獨一味對照藥材1g，同上法制成對照藥材溶液；吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以比例為4∶1的氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸試液，在105℃加熱約15分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
16.如權(quán)利要求1或2所述的獨一味軟膠囊制劑的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中含量測定方法為高效液相色譜法色譜條件色譜柱Hypersil BDS C18；流動相比例為40∶60的甲醇-0.2％磷酸溶液，檢測波長350nm，檢測靈敏度0.01AUFS，柱溫30℃，流速1.0ml/min，進(jìn)樣量10μl；對照溶液的制備精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，即得；供試品溶液的制備分別取各提取試驗項下的浸膏粉約2g，精密稱定，分別置100ml磨口具塞三角瓶中，精密加甲醇25ml稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；線性關(guān)系精密稱取木犀草素對照品適量，加甲醇制成每1ml含28.5μg的溶液，吸取該溶液2、5、8、10、12、15μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜測定木犀草素吸收峰面積；軟膠囊制劑中每粒含獨一味以木犀草素計，不得少于0.8000mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以藏藥獨一味的有效部位提取物為主要原料的軟膠囊制劑及其制備方法。本發(fā)明軟膠囊有效部位提取物可由水煮提取、乙醇回流、滲漉提取等方法得到，并用有機溶劑萃取或大孔樹脂吸附等方法分離提純；再取大豆油，加入助懸劑蜂蠟和上述提取物細(xì)粉，混勻，過膠體磨，可壓制成本發(fā)明軟膠囊制劑。本發(fā)明軟膠囊具有較好的鎮(zhèn)痛和止血功能，臨床上可用于止血止痛、抗菌消炎、活血化瘀。本發(fā)明還具有在腸胃道中崩解快、吸收、顯效快、服用量小，生物利用度高、療效確切、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。
文檔編號A61P25/04GK1562310SQ20041003107
公開日2005年1月12日 申請日期2004年4月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月20日
發(fā)明者闕文彬 申請人:成都優(yōu)他制藥有限責(zé)任公司