專利名稱：新的異喹啉化合物、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的異喹啉化合物、它們的制備方法和含有它們的藥物組合物。
由文獻(xiàn)已知異喹啉化合物可用作血管舒張劑(US 4880817、US 4843071、US 4822800)，或可用于植物的生長(zhǎng)(Czasopismo Techniezne(Krakow)，1992，89(1)，7-12)、作為酪氨酸磷酸酶調(diào)節(jié)劑(WO 9946268)或還可用于合成(Tetrahedron Letters，2002，43(19)，3557-3560；Heterocycles，2000，52(3)，1371-1383)。
鑒于它們的原始結(jié)構(gòu)，本發(fā)明化合物是新化合物且具有與褪黑激素能受體密切相關(guān)的藥理學(xué)性質(zhì)。
最近十年，大量研究已經(jīng)證明褪黑激素(N-乙?；?5-甲氧基色胺)在大量生理病理學(xué)現(xiàn)象中和晝夜節(jié)律控制中扮演重要角色，但是褪黑激素具有相當(dāng)短的半衰期，這是由于它被迅速代謝的緣故。因此關(guān)注的焦點(diǎn)在于獲得臨床褪黑激素類似物的可能性，所述類似物在代謝上更為穩(wěn)定、具有激動(dòng)劑或拮抗劑特征且可預(yù)期它們的治療效果優(yōu)于激素本身。
除了它們?cè)跁円构?jié)律障礙(J.Neurosurg.1985，63，321-341頁(yè))和睡眠障礙(Psychopharmacology，1990，100，222-226頁(yè))方面的有益作用外，褪黑激素能系統(tǒng)的配體還相對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有寶貴的藥理學(xué)性質(zhì)，尤其是抗焦慮與抗精神病性質(zhì)(Neuropharmacology of Pineal Secretions，1990，8(3-4)，264-272頁(yè))和鎮(zhèn)痛性質(zhì)(Pharmacopsychiat.，1987，20，222-223頁(yè))，還用于治療帕金森氏病(J.Neurosurg.1985，63，321-341頁(yè))和阿爾茨海默氏病(Brain Research，1990，528，170-174頁(yè))。這些化合物在某些癌癥(Melatonin-Clinical Perspectives，牛津大學(xué)出版社，1988，164-165頁(yè))、排卵(Science，1987，227，714-720頁(yè))、糖尿病(Clinical Endocrinology，1986，24，359-364頁(yè))和治療肥胖(International Journal of Eating Disorders，1996，20(4)，443-446頁(yè))方面的活性也已得到證明。這些各種各樣的效果經(jīng)由特異性褪黑激素受體的介導(dǎo)而發(fā)揮。分子生物學(xué)研究已經(jīng)證明存在大量能夠與該激素結(jié)合的受體亞型(Trends Pharmacol.Sci.，1995，16，50頁(yè)；WO 9704094)。對(duì)于不同的物種、包括哺乳動(dòng)物而言，已經(jīng)有可能對(duì)一些這樣的受體進(jìn)行定位和鑒別。為了能夠更好地理解這些受體的生理功能，獲得選擇性配體是非常有利的。而且，這類化合物通過(guò)選擇性地與一種或另一種這些受體相互作用，可以在治療與褪黑激素能系統(tǒng)有關(guān)的病變中成為醫(yī)師的優(yōu)選藥物，有些病變已在上文中提及。
除了是新化合物以外，本發(fā)明的化合物可顯示非常強(qiáng)的對(duì)褪黑激素受體的親合性和/或?qū)σ环N或另一種褪黑激素能受體亞型的選擇性。
更特別的是，本發(fā)明涉及式(I)化合物、它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，還涉及它們與可藥用酸或堿的加成鹽 其中◆n是1、2或3，◆A代表基團(tuán) 或基團(tuán) 其中●Z代表硫原子或氧原子，●R和R”可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，●且R’代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C2-C6)鏈烯基、直鏈或支鏈(C2-C6)炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、芳基、芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、雜芳基或雜芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的，◆X代表氮原子或基團(tuán)N-R1，其中R1代表氫原子或直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、芳基、芳酰基、芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、雜芳基、雜芳?；螂s芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的，◆R2代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、(C3-C8)環(huán)烷基氧基或(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷氧基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的，◆符號(hào) 表示該鍵是單鍵或雙鍵，條件是遵守原子的化合價(jià)，其中“芳基”應(yīng)被理解為意指苯基或萘基，這些基團(tuán)是未取代的或被一至三個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、OH、COOH、烷氧基羰基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的、甲?；?、硝基、氰基、羥甲基、氨基——任選被一或兩個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代，和鹵原子，“雜芳基”應(yīng)被理解為意指任何單-或雙-環(huán)基團(tuán)，其含有5至10個(gè)環(huán)成員且可含有1至3個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子，如呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑啉基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、苯并二氫吡喃基、吲哚基、苯并噻吩基或苯并呋喃基，這些基團(tuán)有可能是部分氫化的、未取代的或被一至三個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、OH、COOH、烷氧基羰基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的、甲酰基、硝基、氰基、氨基——任選被一或兩個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代、羥甲基和鹵原子。
在可藥用的酸中，可不加任何限制地提及鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、馬來(lái)酸、檸檬酸、抗壞血酸、甲磺酸、樟腦酸等。
在可藥用的堿中，可不加任何限制地提及氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺、叔丁胺等。
優(yōu)選的n值是2和3。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物是這樣的式(I)化合物，其中●n是2且A代表-NHCOR’基團(tuán)，更特別地代表這樣的-NHCOR’基團(tuán)其中R’代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基或己基，或(C3-C8)環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基，●n是3且A代表-CONHR’基團(tuán)、更特別地代表這樣的-CONHR’基團(tuán)其中R’代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基或己基，或(C3-C8)環(huán)烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
優(yōu)選的R2基團(tuán)是烷氧基、更特別地是甲氧基。
X優(yōu)選代表氮原子或NR1基團(tuán)，其中R1代表環(huán)烷基烷基、未取代或取代的苯基、或芐基——其中的苯基部分是取代的或未取代的。
進(jìn)而更優(yōu)選地，本發(fā)明涉及下列式(I)化合物-N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，-N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丁酰胺，-N-[2—(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丙酰胺，-N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]環(huán)丙烷酰胺，-4-(6-甲氧基-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺，-N-[2-(6-甲氧基-2-苯基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，-N-[2-(2-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，-N-{2-[2-(環(huán)丙基甲基)-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基]乙基}乙酰胺。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物的對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和與可藥用酸或堿的加成鹽構(gòu)成本發(fā)明的主要部分。
本發(fā)明還涉及式(I)化合物的制備方法，該方法的特征在于使用式(II)化合物作為起始物質(zhì)
其中R2和n如式(I)所定義且Ra代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，使其受到POCl3的作用，得到式(III)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，—將其置于披鈀碳存在下，得到式(IV)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，—或在披鈀碳存在下對(duì)其進(jìn)行氫化，得到式(V)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，使該式(V)化合物與式G-R’1化合物縮合，其中G代表離去基團(tuán)如鹵原子或叔丁氧基羰基，且R’1可具有R1所給出的任何含義，氫原子除外，得到式(VI)化合物 其中R2、R’1、n和Ra如上所定義，式(III)至(VI)化合物構(gòu)成式(VII)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，且X和符號(hào) 如式(I)所定義，使其與式HNRR’的胺縮合，其中R和R’如式(I)所定義，得到式(I/a)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R、R’、X、n和符號(hào) 如上所定義，或使該式(VII)化合物進(jìn)行有機(jī)化學(xué)中常規(guī)的反應(yīng)序列，得到式(VIII)化合物
其中R2、X、n和符號(hào) 如上所定義，使其—與酰氯ClCOR’或?qū)?yīng)的混合或?qū)ΨQ的酐反應(yīng)，其中R’如上所定義，得到式(I/b)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R’、X、n和符號(hào) 如上所定義，任選地繼之以式R’a-J化合物的作用，其中R’a可以具有R’的任何含義且J代表離去基團(tuán)如鹵原子或甲苯磺?；玫绞?I/c)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R’、R’a、X、n和符號(hào) 如上所定義，—或者受到式(IX)化合物的作用(IX)其中R’如上所定義，任選地繼之以如上所定義的式R’a-J化合物的作用，得到式(I/d)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例
其中R2、R、R’、n、X和符號(hào) 如上所定義且R”如式(I)所定義，式(I/a)至(I/d)化合物有可能受到硫化劑、例如Lawesson試劑的作用，得到式(I/e)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、n和符號(hào) 如上所定義且B代表C(S)NRR’、N(R)C(S)R’或N(R)C(S)NR’R”基團(tuán)，其中R、R’和R”如上所定義，式(I/a)至(I/e)化合物構(gòu)成式(I)化合物的全體，這些化合物可按照常規(guī)分離技術(shù)加以純化，如果需要將其轉(zhuǎn)化為與可藥用酸或堿的加成鹽，并且任選地按照常規(guī)分離技術(shù)分離為異構(gòu)體。
起始化合物(II)是市售可得的，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員借助常規(guī)化學(xué)反應(yīng)或文獻(xiàn)所述化學(xué)反應(yīng)可容易地獲得。
本發(fā)明化合物和含有它們的藥物組合物經(jīng)證明可用于治療褪黑激素能系統(tǒng)的障礙。
本發(fā)明化合物的藥理學(xué)研究事實(shí)上已經(jīng)證明它們是無(wú)毒的、對(duì)褪黑激素受體具有高親合性且就中樞神經(jīng)系統(tǒng)和微循環(huán)而言具有實(shí)質(zhì)性活性，從而能夠確定本發(fā)明的產(chǎn)物可用于治療緊張狀態(tài)、睡眠障礙、焦慮、嚴(yán)重抑郁、季節(jié)性情感障礙、心血管病變、消化系統(tǒng)病變、由飛行時(shí)差引起的失眠與疲勞、精神分裂癥、恐慌發(fā)作、憂郁、食欲障礙、肥胖、失眠、疼痛、精神病性精神障礙、癲癇、糖尿病、帕金森氏病、老年性癡呆、與正?；虿±硇运ダ嫌嘘P(guān)的各種障礙、偏頭痛、記憶喪失、阿爾茨海默氏病和腦循環(huán)障礙。在活性的另一領(lǐng)域，本發(fā)明產(chǎn)物似乎可用于治療性功能障礙、具有抑制排卵和免疫調(diào)節(jié)性質(zhì)且可用于治療癌癥。
這些化合物將優(yōu)選用于治療嚴(yán)重抑郁、季節(jié)性情感障礙、睡眠障礙、心血管病變、由飛行時(shí)差引起的失眠與疲勞、食欲障礙和肥胖。
例如，這些化合物可用于治療季節(jié)性情感障礙和睡眠障礙。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含至少一種式(I)化合物本身或其與一種或多種可藥用賦形劑的組合。
在本發(fā)明的藥物組合物中，特別地可提及那些適合于口服、腸胃外、鼻、經(jīng)皮或透皮、直腸、經(jīng)舌、眼或呼吸施用的組合物，特別是片劑或糖衣丸、舌下片、藥囊劑、paquet、明膠膠囊劑、glossette、錠劑、栓劑、霜?jiǎng)④浉鄤?、皮膚凝膠劑和可飲用或可注射的安瓿劑。
劑量根據(jù)患者的性別、年齡與體重、施用途徑、治療適應(yīng)癥的屬性或任何有關(guān)的治療而異，每24小時(shí)0.01mg至1g，分一次或多次施用。
下列實(shí)施例闡述本發(fā)明而非以任何方式對(duì)其進(jìn)行限制。下列制備例生成本發(fā)明化合物或用于制備本發(fā)明化合物的合成中間體。
制備例14-(6-甲氧基-3，4-二氫-4-異喹啉基)丁酸乙酯鹽酸鹽步驟A5-氰基-5-(3-甲氧基苯基)戊酸乙酯在0℃下，將2g(3-甲氧基苯基)乙腈和1.5ml 4-溴丁酸乙酯溶于50ml二甲基甲酰胺中。向該溶液逐漸加入600mg 60％氫化鈉(600mg，15mmol)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌4小時(shí)、加入100ml酸性水并用醚萃取。然后將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得油經(jīng)柱純化(洗脫劑醚/環(huán)己烷4/6)，得到黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟B6-氨基-5-(3-甲氧基苯基)己酸乙酯鹽酸鹽將步驟A所得化合物(11.2g，43mmol)預(yù)先溶于150ml乙醇中，倒入高壓釜內(nèi)，然后加入阮內(nèi)鎳(以重量計(jì)10％)。然后將混合物置于氫壓下(10巴)并在50℃下加熱48小時(shí)，同時(shí)攪拌。過(guò)濾除去阮內(nèi)鎳后，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。將醚加入所得殘余物中，向該溶液通入HCl氣，然后攪拌直至沉淀出現(xiàn)。然后抽吸濾出所得沉淀并從甲苯中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)104-106℃步驟C6-(甲酰氨基)-5-(3-甲氧基苯基)己酸乙酯將堿形式的步驟B所得的胺(6.4g，27mmol)溶于60ml甲酸乙酯中。將反應(yīng)混合物在回流下加熱6小時(shí)，同時(shí)攪拌，然后在減壓下蒸發(fā)。將醚加入所得殘余物中。然后連續(xù)用酸性水(1N HCl)、水和10％碳酸氫鹽溶液洗滌有機(jī)相，隨后經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)，得到黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟D4-(6-甲氧基-3，4-二氫-4-異喹啉基)丁酸乙酯鹽酸鹽將步驟C所得的甲醛(6.8g，23mmol)溶于100ml乙腈中，然后將反應(yīng)混合物加熱至約60℃。向該溶液加入磷酰氯(7ml)，在回流下加熱6小時(shí)，同時(shí)攪拌，然后在減壓下蒸發(fā)。將乙醇加入所得殘余物中、再于減壓下蒸發(fā)，重復(fù)兩次，然后加入水。用二氯甲烷洗滌水相，然后用飽和碳酸氫鈉溶液使其呈堿性并用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。將用HCl氣飽和的醚加入所得油中，然后在減壓下蒸發(fā)。在加熱狀態(tài)下將甲苯加入殘余物中并攪拌直至沉淀出現(xiàn)。然后抽吸濾出所得沉淀，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)97-99℃制備例24-(2-氨基乙基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯步驟A氰基(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯在錐形圓口燒瓶?jī)?nèi)，將25g(3-甲氧基苯基)乙腈溶于200ml無(wú)水THF中。向該溶液加入60％氫化鈉(8.88g，0.37mol)并將反應(yīng)混合物在回流下加熱30分鐘，同時(shí)攪拌。然后在半小時(shí)內(nèi)滴加碳酸二甲酯(58ml，0.6814mol)，隨后將反應(yīng)混合物在回流下加熱2小時(shí)，同時(shí)攪拌。將反應(yīng)混合物倒入微酸性冷水中。水相用醚萃取，然后用水洗滌醚相，再蒸發(fā)。向上述所得油中加入碳酸鉀(47.15g，0.34mol)溶液。攪拌后，混合物用醚洗滌。將所得醚相重新用碳酸鉀(12.02g，0.08mol)溶液洗滌。合并兩份水相，立即酸化并用醚萃取。將如此得到的有機(jī)相用10％碳酸氫鈉溶液洗滌、經(jīng)硫酸鎂干燥并在減壓下蒸發(fā)，得到橙黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟B3-氨基-2-(3-甲氧基苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽將步驟A所得化合物(34.32g，0.1672mol)溶于150ml甲醇中。將該溶液倒入高壓釜內(nèi)，然后向溶液加入50ml氯仿和氧化鉑(以重量計(jì)10％)。將高壓釜置于氫壓(60巴)和環(huán)境溫度下，磁力攪拌24小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑后，在減壓下蒸發(fā)溶液。將醚加入所得的油中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)170-172℃步驟C3-(甲酰氨基)-2-(3-甲氧基苯基)丙酸甲酯將堿形式的步驟B所得化合物(20.25g，0.08mol)溶于130ml甲酸乙酯(1.81mol)中。將反應(yīng)混合物在回流下加熱6小時(shí)，然后在減壓下蒸發(fā)。將乙酸乙酯加入所得的油中。將有機(jī)相用堿性水(NaHCO3)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)，得到黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟D6-甲氧基-3，4-二氫-4-異喹啉甲酸甲酯鹽酸鹽將步驟C所得化合物(8.03g，0.03mol)溶于100ml乙腈中，然后將反應(yīng)混合物加熱至大約60℃。向該溶液加入磷酰氯(16ml，0.17mol)，然后在回流下加熱6小時(shí)，同時(shí)攪拌，隨后在減壓下蒸發(fā)。將甲醇加入所得殘余物、再于減壓下蒸發(fā)，重復(fù)兩次，然后加入最少量的丙酮。隨后抽吸濾出所生成的沉淀，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)212-215℃步驟E6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉甲酸甲酯鹽酸鹽將堿形式的步驟D所得化合物(9.21g)溶于150ml甲醇中，然后向該溶液加入披鈀碳(900mg)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度和氫氣下攪拌4小時(shí)。過(guò)濾除去披鈀碳后，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。將用HCl飽和的醚加入所得的油中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)191-193℃步驟F6-甲氧基-3，4-二氫-2，4(1H)-異喹啉二甲酸叔丁基4-甲基酯將步驟E所得化合物(4.02g，15mmol)懸浮于100ml二氯甲烷中，然后加入三乙胺(6.6ml)。當(dāng)溶解完全時(shí)，加入二碳酸二叔丁酯(4g，18mmol)并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘。將溶液倒入100ml水中，用酸性水(0.1N HCl)中和過(guò)量的三乙胺。分離后，水相用二氯甲烷萃取，合并的有機(jī)溶液經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜法純化標(biāo)題產(chǎn)物。
無(wú)色的油。
步驟G4-(羥甲基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將氫化鋁鋰(5.62g，148mmol)懸浮于50ml無(wú)水四氫呋喃中。然后滴加預(yù)先溶于50ml無(wú)水四氫呋喃的步驟F所得化合物(11.9g，37mmol)的溶液。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物加入最少量的氫氧化鈉溶液(2N NaOH)，直至氣體的生成停止，以便生成鋰與鋁的氫氧化物沉淀。然后濾出沉淀，用四氫呋喃洗滌。在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。經(jīng)硅膠色譜法純化標(biāo)題產(chǎn)物。
澄清的黃色油。
步驟H6-甲氧基-4-{[(甲基磺?；?氧基]甲基}-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將步驟G所得化合物(10.5g，36mmol)溶于150ml二氯甲烷中，然后加入三乙胺(8.5ml)。將該溶液冷卻至0℃并滴加甲磺酰氯(4.8ml，62mmol)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)，然后倒入150ml水中。將溶液用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并于減壓下蒸發(fā)。經(jīng)硅膠色譜法純化標(biāo)題化合物。
黃色的油。
步驟I4-(氰基甲基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將氰化鉀(5.52g，85mmol)懸浮于50ml DMSO中，將該溶液加熱至80℃。向該溶液逐漸加入預(yù)先溶于50ml DMSO的步驟H所得化合物(6.3g，17mmol)，然后將反應(yīng)混合物再次于80℃下加熱30分鐘。將溶液倒入150ml水中并用二氯甲烷萃取三次。然后將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥、過(guò)濾并蒸發(fā)。所得暗紅色油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑環(huán)己烷，逐漸加入乙酸乙酯，直至比例達(dá)到8/2)，使所得固體從環(huán)己烷中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)75-77℃步驟J4-(2-氨基乙基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將步驟I所得化合物(6.3g，21mmol)溶于150ml用NH3氣飽和的甲醇中。將該溶液倒入高壓釜內(nèi)，加入阮內(nèi)鎳(600mg)。然后將反應(yīng)混合物在60℃和50巴氫壓下攪拌6小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑后，在減壓下蒸發(fā)溶液，得到無(wú)色油形式的標(biāo)題化合物。
制備例3(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙腈鹽酸鹽步驟A6-甲氧基-4-異喹啉甲酸甲酯鹽酸鹽將堿形式的制備例2步驟D所得化合物(1.56g，0.006mol)溶于10ml十氫化萘中，然后加入活性披鈀碳(以重量計(jì)10％)。將反應(yīng)混合物在130℃下加熱24小時(shí)，同時(shí)攪拌。在加熱狀態(tài)中濾出催化劑并用乙酸乙酯洗滌。在減壓下蒸發(fā)后，將用HCl氣飽和的醚溶液加入所得油中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)178-180℃步驟B(6-甲氧基-4-異喹啉基)甲醇鹽酸鹽將堿形式的步驟A所得化合物(0.395g，0.0015mol)溶于200ml醚中。然后逐漸加入氫化鋁鋰(0.14g，0.004mol)，同時(shí)使燒瓶在冰中冷卻。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌一周。向反應(yīng)混合物加入最少量30％氫氧化鈉溶液(幾滴)，以生成鋰與鋁的氫氧化物沉淀。然后濾出沉淀并用乙酸乙酯洗滌。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。將用HCl氣飽和的醚加入所得油中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)250-252℃步驟C4-(氯甲基)-6-甲氧基異喹啉將步驟B所得化合物的鹽酸鹽(1.09g，0.005mol)懸浮于50ml氯仿中。加入亞硫酰氯(2.80ml，0.04mol)，然后將反應(yīng)混合物在回流下加熱24小時(shí)，同時(shí)攪拌。在減壓下蒸發(fā)后，將乙醚加入所得殘余物中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)256-257℃步驟D(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙腈鹽酸鹽將步驟C所得化合物的鹽酸鹽(0.60g，0.0024mol)溶于10ml飽和碳酸鉀水溶液和40ml二氯甲烷中。然后向前述溶液加入四丁基溴化銨(2g，0.006mol)和氰化鉀(0.80g，0.012mol)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌24小時(shí)。用二氯甲烷萃取溶液，將有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)。向所得的油加入丙酮和用HCl氣飽和的醚。抽吸濾出所生成的沉淀并從甲苯/環(huán)己烷5/5中重結(jié)晶，得到黃色固體形式的標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)114-115℃制備例44-(氨基甲基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯步驟A6-甲氧基-4-{[(甲基磺?；?氧基]甲基}-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯工藝同制備例2步驟A至H。
步驟B4-(疊氮基甲基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將疊氮化鈉(1.12g)懸浮于40ml DMF中，將該溶液加熱至80℃。向前述溶液逐漸加入預(yù)先溶于10ml DMF的步驟A所得化合物(1.6g)，然后將反應(yīng)混合物再次于80℃下加熱2至3小時(shí)。將溶液倒入150ml水中并用乙酸乙酯萃取三次。然后將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并蒸發(fā)。所得暗紅色油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑環(huán)己烷，逐漸加入乙酸乙酯，直至比例達(dá)到5/5)，得到無(wú)色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
步驟C4-(氨基甲基)-6-甲氧基-3，4-二氫-2(1H)-異喹啉甲酸叔丁酯將步驟B所得化合物(1.14g)溶于100ml甲醇中，然后向該溶液加入披鈀碳(120mg)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度和氫下攪拌3小時(shí)。過(guò)濾除去披鈀碳后，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑環(huán)己烷，逐漸加入乙酸乙酯，直至比例達(dá)到5/5)，得到無(wú)色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例14-(6-甲氧基-3，4-二氫-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺將堿形式的制備例1所得化合物(41mmol)溶于10ml乙醇中。加入60ml含水甲胺，并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌12小時(shí)。在減壓下蒸發(fā)后，將50ml水加入濾液中并用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得油經(jīng)硅膠色譜法純化后，得到標(biāo)題產(chǎn)物。
黃色油。
實(shí)施例24-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺將堿形式的實(shí)施例1所得化合物(54mmol)溶于50ml甲醇中，然后向該溶液加入披鈀碳(150mg)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度和氫下攪拌4小時(shí)。過(guò)濾除去披鈀碳后，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。所得油經(jīng)硅膠色譜法純化，得到黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例34-(6-甲氧基-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺步驟A4-(6-甲氧基-4-異喹啉基)丁酸乙酯鹽酸鹽在加熱條件下，將制備例1所得化合物(1.6g，5mmol)溶于20ml含有三乙胺(0.9ml)和無(wú)水乙醇(2ml)的甲苯中。向反應(yīng)混合物加入披鈀碳(300mg)，然后在回流下加熱24小時(shí)，同時(shí)攪拌。過(guò)濾除去披鈀碳后，在減壓下蒸發(fā)有機(jī)相。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇)。將所得油轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽形式，然后使所生成的沉淀從乙腈中重結(jié)晶。
熔點(diǎn)190-192℃步驟B4-(6-甲氧基-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺將步驟A所得化合物(2.2g，7mmol)溶于30ml甲胺(40％水溶液)，將混合物在回流下加熱3小時(shí)，同時(shí)攪拌。將50ml水加入反應(yīng)混合物并用醚萃取。將有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇)。在減壓下蒸發(fā)所得油，使所生成的沉淀從甲苯中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)117-119℃
元素微量分析
實(shí)施例4N-[2-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺鹽酸鹽將制備例2步驟I所得化合物(6g，20mmol)溶于100ml乙酸酐中，然后將該溶液倒入高壓釜內(nèi)。隨后向該溶液加入阮內(nèi)鎳(600mg)，將反應(yīng)混合物在60℃和50巴氫壓下攪拌6小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑后，在減壓下蒸發(fā)溶液。向所得橙色殘余物加入10％氫氧化鈉溶液并攪拌15分鐘，然后用乙酸乙酯萃取(3次)。將有機(jī)相用水洗滌一次，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。將50ml甲醇加入所得油中。將氯化氫氣通入溶液中，然后攪拌24小時(shí)，用CaCl2隔水。在減壓下蒸發(fā)溶液并使所得沉淀從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)182-184℃實(shí)施例5N-[2-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]丙酰胺鹽酸鹽將制備例2所得化合物和2當(dāng)量碳酸鉀溶于3/2乙酸乙酯/水混合物中。然后向該溶液滴加丙酰氯(2當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。分離各相后，將有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑乙酸乙酯/環(huán)己烷5/5)。將甲醇加入所得油中。將氯化氫氣通入溶液中，然后攪拌24小時(shí)，用CaCl2各隔水。在減壓下蒸發(fā)溶液，得到白色固體形式的標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)161-163℃實(shí)施例6N-[2-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]丁酰胺鹽酸鹽用丁酰氯代替丙酰氯，通過(guò)與實(shí)施例5相同的工藝得到標(biāo)題化合物。
吸濕性非常強(qiáng)的白色固體。
實(shí)施例7N-[2-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]環(huán)丙烷酰胺鹽酸鹽用環(huán)丙基碳酰氯代替丙酰氯，通過(guò)與實(shí)施例5相同的工藝得到標(biāo)題化合物。
白色固體。
熔點(diǎn)215-217℃實(shí)施例8N-[2-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]環(huán)丁烷酰胺鹽酸鹽用環(huán)丁基碳酰氯代替丙酰氯，通過(guò)與實(shí)施例5相同的工藝得到標(biāo)題化合物。
白色固體。
熔點(diǎn)130-132℃實(shí)施例9N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺鹽酸鹽將堿形式的制備例3所得化合物(0.30g，0.0015mol)預(yù)先溶于10ml乙酸酐，倒入高壓釜內(nèi)，然后加入阮內(nèi)鎳(以重量計(jì)10％)。然后將混合物置于氫壓(60巴)下并于60℃下加熱6小時(shí)，同時(shí)攪拌。過(guò)濾除去阮內(nèi)鎳后，在環(huán)境溫度下向有機(jī)相加入10％氫氧化鈉溶液并磁力攪拌15分鐘。溶液用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得油經(jīng)柱純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇，直至比例達(dá)到9/1)。將用HCl氣飽和的醚加入純化油中。抽吸濾出所生成的沉淀并從乙醇中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)212-214℃實(shí)施例10N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丙酰胺鹽酸鹽在加熱條件下，將實(shí)施例5的化合物溶于最少量的甲醇中，然后用甲苯稀釋。繼而向該溶液加入1.5當(dāng)量三乙胺，隨后在披鈀碳(以重量計(jì)10％)存在下將反應(yīng)混合物在回流下加熱3小時(shí)。過(guò)濾除去催化劑后，在減壓下蒸發(fā)溶液。所得油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷/甲醇9/1)。將用HCl氣飽和的醚加入純化油中，攪拌直至得到沉淀。抽吸濾出所生成的沉淀，置于真空干燥器內(nèi)。得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)233-235℃實(shí)施例11N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丁酰胺鹽酸鹽從實(shí)施例6所得化合物開始，按照與實(shí)施例10相同的工藝得到標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)195-197℃實(shí)施例12N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]環(huán)丙烷酰胺鹽酸鹽從實(shí)施例7所得化合物開始，按照與實(shí)施例10相同的工藝得到標(biāo)題化合物。
熔點(diǎn)226-228℃實(shí)施例13N-[2-(6-甲氧基-2-苯基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺鹽酸鹽將堿形式的實(shí)施例4所得化合物(460mg，1.8mmol)懸浮于30ml二氯甲烷中。然后加入三苯基鉍(900mg，2mmol)和乙酸銅Cu(OAc)2(190mg，0.95mmol)。將反應(yīng)混合物置于氬氣下并在環(huán)境溫度下磁力攪拌18小時(shí)。將混合物過(guò)濾，加入水并用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑乙酸乙酯/環(huán)己烷2/8)。將用HCl氣飽和的醚加入純化油中，攪拌直至得到沉淀，然后抽吸濾出該沉淀，置于真空干燥器內(nèi)，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)83-85℃實(shí)施例14N-[2-(2-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺將實(shí)施例4所得化合物(740mg，2.5mmol)和碳酸鉀(720mg，5mmol)懸浮于20ml DMF中，然后向該溶液加入芐基溴(0.37ml，3mmol)。將反應(yīng)混合物在125℃下加熱4小時(shí)，同時(shí)攪拌。將溶液倒入50ml水中，用6N HCl酸化并用乙酸乙酯洗滌。然后用碳酸鉀使水相呈堿性并用二氯甲烷萃取。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇，直至比例達(dá)到9/1)。純化的油生成沉淀。使所生成的沉淀從7/3甲苯/環(huán)己烷混合物中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)123-125℃實(shí)施例15N-{2-[2-(3-甲?；交?-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基]乙基}乙酰胺將乙酸銅Cu(OAc)2(960mg，5mmol)和三乙胺(1.5ml，10.5mmol)懸浮于60ml二氯甲烷中。然后向該溶液接連逐漸加入實(shí)施例4化合物(1g，3.5mmol)、3-甲?；交鹚?1.05g，7mmol)和分子篩。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇，直至比例達(dá)到9/1)，得到黃色油形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例16N-[2-(6-甲氧基-2-甲基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺鹽酸鹽在0℃下，向堿形式的實(shí)施例4所得化合物(1.8g，7.2mmol)加入甲酸(0.55ml)和37％甲醛(0.6ml)。將反應(yīng)混合物在80℃下加熱24小時(shí)，同時(shí)攪拌。反應(yīng)混合物冷卻至0℃后，加入10ml 6N HCl。然后將混合物用醚洗滌，用2N NaOH使其呈堿性并用醚萃取。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得黃色的油經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇，直至比例達(dá)到9/1)。將用HCl氣飽和的醚加入純化油中，攪拌直至得到沉淀，然后抽吸濾出該沉淀并置于真空干燥器內(nèi)，得到吸濕性非常強(qiáng)的白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)59-61℃實(shí)施例17N-{2-[2-(環(huán)丙基甲基)-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基]乙基}乙酰胺鹽酸鹽將實(shí)施例4所得化合物(1.03g)和碳酸鉀(1.25g)懸浮于50ml丙酮中。將該溶液在環(huán)境溫度下攪拌10分鐘，然后向溶液加入溴代甲基環(huán)丙烷(0.36ml)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌12小時(shí)。濾出碳酸鉀并蒸發(fā)所回收的溶液。將水加入殘余物中，水相用醚萃取。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。所得殘余物經(jīng)硅膠色譜法純化(洗脫劑二氯甲烷，逐漸加入甲醇，直至比例達(dá)到9/1)。將用HCl氣飽和的醚加入純化油中，攪拌直至得到沉淀，然后抽吸濾出該沉淀并置于真空干燥器內(nèi)，得到吸濕性白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)＜50℃實(shí)施例18N-[(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)甲基]乙酰胺鹽酸鹽將制備例4所得化合物(0.77g)和碳酸鉀(1.8g)溶于50ml 1/1二氯甲烷/水混合物中。然后向該溶液滴加乙酰氯(0.47ml)。將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌2小時(shí)。分離各相后，將有機(jī)相用水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過(guò)濾并在減壓下蒸發(fā)。將甲醇加入所得油中。將氯化氫氣通入該溶液，然后利用CaCl2護(hù)罩?jǐn)嚢?4小時(shí)，為脫保護(hù)時(shí)間。在減壓下蒸發(fā)溶液并使所得沉淀從乙腈中重結(jié)晶，得到白色固體形式的標(biāo)題產(chǎn)物。
熔點(diǎn)246-248℃藥理學(xué)研究實(shí)施例A急性毒性研究每8只小鼠(26±2g)為一組，在口服給藥后評(píng)價(jià)急性毒性。在第一天中定時(shí)觀察動(dòng)物，并于處置后兩周內(nèi)每天觀察。對(duì)LD50(導(dǎo)致50％動(dòng)物死亡的劑量)進(jìn)行了評(píng)價(jià)證明了本發(fā)明化合物的低毒性。
實(shí)施例B強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)在行為模型、即強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中測(cè)試本發(fā)明化合物。
裝置為充滿水的Plexiglas圓筒。動(dòng)物逐個(gè)試驗(yàn)6分鐘。在每次試驗(yàn)開始時(shí)，將動(dòng)物置于圓筒中心。記錄不動(dòng)時(shí)間。當(dāng)每只動(dòng)物停止掙扎并在水表面上保持不動(dòng)、只作出使頭露出水面的動(dòng)作時(shí)，判斷為不動(dòng)。
在試驗(yàn)開始前給藥40分鐘后，本發(fā)明化合物顯著地減少了不動(dòng)時(shí)間，證明了本發(fā)明化合物的抗抑郁活性。確切而言，實(shí)施例9的化合物以2.5mg/kg經(jīng)口給藥，導(dǎo)致不動(dòng)持續(xù)時(shí)間從102秒(對(duì)照)減少至57秒。實(shí)施例3的化合物以25mg/kg經(jīng)口給藥，導(dǎo)致不動(dòng)持續(xù)時(shí)間從129秒(對(duì)照)減少至60秒。
實(shí)施例C與褪黑激素受體MT1和MT2結(jié)合的研究使用2-[125I]-碘褪黑激素作為參照放射性配體，進(jìn)行MT1或MT2受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。使用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定所保留的放射性。
然后使用不同的供試化合物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)，一式三份。就每種化合物而言測(cè)試不同的濃度范圍。從結(jié)果可確定供試化合物的結(jié)合親合性(Ki)。
由此，所發(fā)現(xiàn)的本發(fā)明化合物的Ki值顯示了對(duì)一種或另一種受體亞型MT1或MT2的結(jié)合，這些值≤10μM。確切而言，實(shí)施例9的化合物的Ki(MT1)為9.12×10-9M，Ki(MT2)為2.16×10-9M；實(shí)施例3的化合物的Ki(MT1)為3.8×10-9M，Ki(MT2)為2.6×10-9M；實(shí)施例10的化合物的Ki(MT1)為4.26×10-9M，Ki(MT2)為1.14×10-9M。
實(shí)施例D本發(fā)明化合物對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)活動(dòng)晝夜節(jié)律的作用褪黑激素在借助晝/夜交替影響大部分生理、生化與行為晝夜節(jié)律中的牽連已使得有可能建立供探究褪黑激素能配體的藥理模型。
相對(duì)于眾多參數(shù)、尤其是相對(duì)于運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的晝夜節(jié)律，即內(nèi)源性晝夜節(jié)律鐘活動(dòng)的可靠指標(biāo)，測(cè)試了化合物的效果。
本研究中，評(píng)價(jià)了這類化合物對(duì)特定實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，即置于暫時(shí)隔離(永久性黑暗)的大鼠的效果。
實(shí)驗(yàn)方案一月齡雄性大鼠一旦到達(dá)實(shí)驗(yàn)室，立即接受每24小時(shí)光照12小時(shí)的光照周期(LD 12:12)。
適應(yīng)2至3周后，將它們置于裝有輪子的籠內(nèi)，輪子與記錄系統(tǒng)連接，以便檢測(cè)運(yùn)動(dòng)活動(dòng)階段，從而監(jiān)測(cè)晝(LD)或夜(DD)節(jié)律。
一旦所記錄的節(jié)律于光照周期LD 12:12下顯示穩(wěn)定模式，立即將大鼠置于永久性黑暗中(DD)。
2至3周后，當(dāng)已明確建立自由期(反映內(nèi)源性時(shí)鐘的節(jié)律)時(shí)，向大鼠每日施用供試化合物。
通過(guò)目視觀察活動(dòng)的節(jié)律-光照節(jié)律對(duì)活動(dòng)節(jié)律的影響，-對(duì)永久性黑暗中節(jié)律的影響的消失，-每日施用化合物的影響；暫時(shí)的或持久的效果。
利用軟件包有可能-測(cè)量自由期和處置期間動(dòng)物活動(dòng)的持續(xù)時(shí)間與強(qiáng)度和節(jié)律期，-如果有的話，通過(guò)光譜分析證明晝夜與非晝夜(例如次晝夜)成分的存在。
結(jié)果本發(fā)明化合物明確顯示經(jīng)由褪黑激素能系統(tǒng)對(duì)晝夜節(jié)律具有強(qiáng)大的作用。
實(shí)施例E明/暗籠試驗(yàn)在行為模型、即明/暗籠試驗(yàn)中測(cè)試本發(fā)明化合物，該試驗(yàn)可揭示化合物的抗焦慮活性。
設(shè)備包括兩個(gè)聚乙烯箱子，用Plexiglas覆蓋。其中一個(gè)箱子處于黑暗中。另一個(gè)箱子上方裝有燈，在箱子中心產(chǎn)生大約4000勒克斯的光強(qiáng)度。一條不透明塑料通道將明箱與暗箱分開。動(dòng)物逐個(gè)試驗(yàn)5分鐘。在每次試驗(yàn)期間清掃每個(gè)箱子的地面。在每次試驗(yàn)開始時(shí)，將小鼠置于通道內(nèi)，面向暗箱。記錄小鼠在第一次進(jìn)入暗箱之后于明箱內(nèi)度過(guò)的時(shí)間和穿過(guò)通道的次數(shù)。
在試驗(yàn)開始前施用化合物30分鐘后，本發(fā)明化合物顯著地增加了在明籠內(nèi)度過(guò)的時(shí)間和穿過(guò)通道的次數(shù)，這證明了本發(fā)明化合物的抗焦慮活性。
實(shí)施例F本發(fā)明化合物對(duì)大鼠尾動(dòng)脈的活性體外測(cè)試了本發(fā)明化合物對(duì)大鼠尾動(dòng)脈的活性。在這些血管中存在褪黑激素能受體，因而為研究褪黑激素能配體的活性提供了相關(guān)的藥理模型。刺激受體能夠誘導(dǎo)血管收縮或舒張，這依賴于所研究的動(dòng)脈節(jié)段。
方案在2至3周內(nèi)，使一月齡大鼠習(xí)慣于12h/12h的明/暗周期。
處死后，分離尾動(dòng)脈，供養(yǎng)在高氧培養(yǎng)基中。然后在動(dòng)脈兩端插管，垂直懸掛在器官室內(nèi)適合的培養(yǎng)基中，經(jīng)由其近端灌注。灌注流的壓力變化能夠評(píng)價(jià)化合物的血管收縮或血管舒張效果。
在預(yù)先已被苯福林(1μM)收縮的節(jié)段上評(píng)價(jià)化合物的活性。向預(yù)收縮的節(jié)段加入一定濃度的供試化合物，以非積分方式測(cè)定濃度/響應(yīng)曲線。當(dāng)所觀察的效果達(dá)到平衡時(shí)，改變培養(yǎng)基，使制備物留置20分鐘，然后加入相同濃度的苯福林和另一濃度的供試化合物。
結(jié)果本發(fā)明化合物顯著地改變了預(yù)先被苯福林收縮的尾動(dòng)脈的直徑。
實(shí)施例G藥物組合物片劑1000片，每片劑量為5mg N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺鹽酸鹽(實(shí)施例9) 5g小麥淀粉20g玉米淀粉20g乳糖30g硬脂酸鎂2g二氧化硅1g羥丙基纖維素2g
權(quán)利要求
1.式(I)化合物、它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及其與可藥用酸或堿的加成鹽 其中◆n是1、2或3，◆A代表基團(tuán) 或基團(tuán) 其中●Z代表硫原子或氧原子，●R和R”可以相同或不同，各自代表氫原子或直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，●且R’代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C2-C6)鏈烯基、直鏈或支鏈(C2-C6)炔基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、芳基、芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、雜芳基或雜芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的，◆X代表氮原子或基團(tuán)N-R1，其中R1代表氫原子或直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、芳基、芳酰基、芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的、雜芳基、雜芳?；螂s芳基-(C1-C6)烷基——其中的烷基部分是直鏈或支鏈的，◆R2代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、(C3-C8)環(huán)烷基氧基或(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C6)烷氧基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的，◆符號(hào) 表示該鍵是單鍵或雙鍵，條件是遵守原子的化合價(jià)，其中-“芳基”應(yīng)被理解為意指苯基或萘基，這些基團(tuán)是未取代的或被一至三個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、OH、COOH、烷氧基羰基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的、甲?；?、硝基、氰基、羥甲基、氨基——任選地被一或兩個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代，和鹵原子，-“雜芳基”應(yīng)被理解為意指任何單-或雙-環(huán)基團(tuán)，其含有5至10個(gè)環(huán)成員且可含有1至3個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子，如呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑啉基、吡啶基、喹啉基、異喹啉基、苯并二氫吡喃基、吲哚基、苯并噻吩基或苯并呋喃基，這些基團(tuán)有可能是部分氫化的、未取代的或被一至三個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代，取代基選自直鏈或支鏈(C1-C6)烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)烷氧基、OH、COOH、烷氧基羰基——其中的烷氧基部分是直鏈或支鏈的、甲酰基、硝基、氰基、氨基——任選地被一或兩個(gè)直鏈或支鏈(C1-C6)烷基取代、羥甲基和鹵原子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中n是2且A代表-NHCOR’基團(tuán)，它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中n是3且A代表-CONHR’基團(tuán)，它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中R2代表甲氧基，它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中X代表氮原子，它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其中X代表NPh或NBz基團(tuán)，它們的對(duì)映異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體，以及它們與可藥用酸或堿的加成鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丁酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]丙酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(6-甲氧基-4-異喹啉基)乙基]環(huán)丙烷酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為4-(6-甲氧基-4-異喹啉基)-N-甲基丁酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(6-甲氧基-2-苯基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-[2-(2-芐基-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基)乙基]乙酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物，其為N-{2-[2-(環(huán)丙基甲基)-6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-4-異喹啉基]乙基}乙酰胺，以及其與可藥用酸的加成鹽。
15.制備權(quán)利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使用式(II)化合物作為起始物質(zhì) 其中R2和n如式(I)所定義且Ra代表直鏈或支鏈(C1-C6)烷基，使其受到POCl3的作用，得到式(III)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，—將其置于披鈀碳存在下，得到式(IV)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，—或在披鈀碳存在下對(duì)其進(jìn)行氫化，得到式(V)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，使該式(V)化合物與式G-R’1化合物縮合，其中G代表離去基團(tuán)且R’1可具有R1所給出的任何含義，氫原子除外，得到式(VI)化合物 其中R2、R’1、n和Ra如上所定義，式(III)至(VI)化合物構(gòu)成式(VII)化合物 其中R2、n和Ra如上所定義，且X和符號(hào) 如式(I)所定義，使其與式HNRR’的胺縮合，其中R和R’如式(I)所定義，得到式(I/a)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R、R’、X、n和符號(hào) 如上所定義，或使該式(VII)化合物進(jìn)行有機(jī)化學(xué)中常規(guī)的反應(yīng)序列，得到式(VIII)化合物 其中R2、X、n和符號(hào) 如上所定義，使其—與酰氯ClCOR’或?qū)?yīng)的混合或?qū)ΨQ的酐反應(yīng)，其中R’如上所定義，得到式(I/b)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R’、X、n和符號(hào) 如上所定義，任選地繼之以式R’a-J化合物的作用，其中R’a可具有R’的任何含義且J代表離去基團(tuán)如鹵原子或甲苯磺?；?，得到式(I/c)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R’、R’a、X、n和符號(hào) 如上所定義，—或者受到式(IX)化合物的作用O＝C＝N-R’(IX)其中R’如上所定義，任選地繼之以如上所定義的式R’a-J化合物的作用，得到式(I/d)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、R、R’、n、X和符號(hào) 如上所定義且R”如式(I)所定義，式(I/a)至(I/d)化合物有可能受到硫化劑、例如Lawesson試劑的作用，得到式(I/e)化合物，為式(I)化合物的一個(gè)特例 其中R2、n和符號(hào) 如上所定義且B代表C(S)NRR’、N(R)C(S)R’或N(R)C(S)NR’R”基團(tuán)，其中R、R’和R”如上所定義，式(I/a)至(I/e)化合物構(gòu)成式(I)化合物的全體，這些化合物可按照常規(guī)分離技術(shù)加以純化，如果需要將其轉(zhuǎn)化為與可藥用酸或堿的加成鹽，并且任選地按照常規(guī)分離技術(shù)分離為異構(gòu)體。
16.藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1至14任意一項(xiàng)的式(I)化合物或其與可藥用酸或堿的加成鹽與一種或多種可藥用賦形劑的組合。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的藥物組合物，其用于制備用來(lái)治療褪黑激素能系統(tǒng)障礙的藥物。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的藥物組合物，其用于制備藥物，所述藥物用于治療睡眠障礙、緊張狀態(tài)、焦慮、季節(jié)性情感障礙或嚴(yán)重的抑郁、心血管病變、消化系統(tǒng)病變、由飛行時(shí)差引起的失眠與疲勞、精神分裂癥、恐慌發(fā)作、憂郁、食欲障礙、肥胖、失眠、精神病性精神障礙、癲癇、糖尿病、帕金森氏病、老年性癡呆、與正?；虿±硇运ダ嫌嘘P(guān)的各種障礙、偏頭痛、記憶喪失、阿爾茨海默氏病、腦循環(huán)障礙以及性功能障礙，也作為排卵抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑，以及治療癌癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)化合物，其中n是1、2或3，A代表基團(tuán)(見右下式)，X代表N或NR
文檔編號(hào)A61P35/00GK1535957SQ20041003103
公開日2004年10月13日 申請(qǐng)日期2004年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月9日
發(fā)明者S·普瓦索尼耶-迪里厄, V·瓦萊, A·加納羅, S·尤斯, D·勒西厄爾, P·德拉格朗熱, P·雷納德, C·貝內(nèi)讓, J·A·布坦, V·奧迪諾, S 普瓦索尼耶-迪里厄, 傻, 嚇, 布坦, 窶嗜, 諶, 陜, 鞫蚨 申請(qǐng)人:瑟維爾實(shí)驗(yàn)室