專利名稱：一種抗癌二萜類化合物口服制劑及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌二萜類化合物口服制劑，具體地說(shuō)是涉及一種促分化抑增殖的抗癌二萜類化合物口服制劑及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
在中國(guó)專利ZL98124416.5中公開(kāi)了一種從人工培育多年的植物中發(fā)現(xiàn)的二萜類化合物，如式1所示，但是這種抗癌二萜類化合物在水中的溶解性不好，因而會(huì)影響其在機(jī)體內(nèi)的吸收，使得生物利用度較低。
式I發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服抗癌二萜類化合物在水中的溶解性不好，在生物體內(nèi)的生物利用度低的缺陷，從而提供一種溶解性能好、生物利用度高的抗癌二萜類化合物口服制劑，及其制備方法和用途。
本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明提供一種抗癌二萜類化合物口服制劑，其包括可藥用的復(fù)合溶媒和抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物，
式I所述的復(fù)合溶媒(以重量百分比)，包括極性溶劑5～30wt％半極性溶劑 5～25wt％表面活性劑 0.1～0.5wt％高分子固態(tài)分散載體 0.1～1wt％NaCl0.1～1wt％葡萄糖 1～5wt％調(diào)味劑 5～10wt％余量為水所述的極性溶劑為二甲基亞砜、甲醇、無(wú)水乙醇或甘油；所述的半極性溶劑為丙二醇、異丙醇或丙酮；所述的表面活性劑為聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、Tween類、平平加類、脂肪醇聚氧乙烯醚類或泊洛沙姆；所述的高分子固態(tài)分散載體為環(huán)糊精類、橄欖油、植物油、改性淀粉或羧甲基纖維素鈉；所述調(diào)味劑為煉蜜。
本發(fā)明提供一種上述抗癌二萜類化合物口服制劑的制備方法，將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物溶于可藥用的復(fù)合溶媒的各個(gè)組分(以在復(fù)合溶媒中所占重量百分比表示其含量)中，包括如下步驟1)先將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物溶于5～30wt％極性溶劑，得到透明的溶液；所述的極性溶劑為二甲基亞砜、甲醇、無(wú)水乙醇或甘油；2)將0.1～0.5wt％表面活性劑和5～25wt％半極性溶劑混合成乳液；并與步驟1)得到的二萜類化合物溶液混合成透明溶液；所述的半極性溶劑為丙二醇、異丙醇或丙酮；所述的表面活性劑為聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、Tween類、平平加類、脂肪醇聚氧乙烯醚類或泊洛沙姆；3)將0.1～1wt％高分子固態(tài)分散劑、0.1～1wt％氯化鈉、1～5wt％葡萄糖和5～10wt％調(diào)味劑溶于去離子水中，并高壓蒸氣滅菌；所述的高分子固態(tài)分散載體為環(huán)糊精類、橄欖油、植物油、改性淀粉或羧甲基纖維素鈉；所述調(diào)味劑為煉蜜；4)將步驟2)得到的混合液與步驟3)得到的混合液混合，用去離子水補(bǔ)足總體積，制得抗癌二萜類化合物口服制劑。
本發(fā)明所述的抗癌二萜類化合物口服制劑的制備方法均在無(wú)菌條件下操作。
本發(fā)明提供一種所述的抗癌二萜類化合物口服制劑在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供的抗癌二萜類化合物口服制劑是根據(jù)化合物的“極性相似者相容”的機(jī)理，利用了極性復(fù)合溶劑助溶的性質(zhì)，非離子表面活性劑形成膜液晶相而增溶的性質(zhì)、以及高分子親水固態(tài)分散載體的性質(zhì)，而研制的一種助溶、增溶和固態(tài)分散的復(fù)合體系制劑。本發(fā)明根據(jù)式I所示的二萜類化合物選用的極性溶劑可以形成偶極離子型，選用的半極性溶劑可以誘導(dǎo)偶極型并形成永久偶極，選用的表面活性劑可以乳化而增溶藥物，選用的高分子固態(tài)分散載體可以分散包合藥物，選用的滲透壓調(diào)整劑——NaCl和葡萄糖可以阻止溶血。因而本發(fā)明的復(fù)合溶媒制劑可增加式I所示的二萜類化合物的溶解度，提高藥物在體內(nèi)的生物利用度，從而增強(qiáng)該化合物的抗癌療效，降低用藥劑量。利用本發(fā)明提供的口服制劑，抑瘤率達(dá)64～69％，并對(duì)多種腫瘤有效，臺(tái)偶腺癌，人鼻咽癌，人早幼粒白血病、人腎癌、宮頸癌、食道癌、結(jié)腸癌、膽囊癌。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、制備本發(fā)明的抗癌二萜類化合物口服制劑將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物按如下步驟溶于可藥用的復(fù)合溶媒中所述的復(fù)合溶媒(以重量百分比)，包括
極性溶劑——無(wú)水乙醇15wt％半極性溶劑——丙二醇10wt％表面活性劑——Tween-80 0.5wt％高分子固態(tài)分散載體——羧甲基纖維素鈉0.5wt％NaCl0.9wt％葡萄糖 1wt％調(diào)味劑——煉蜜 5wt％余量為水1)先將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物溶于極性溶劑無(wú)水乙醇，得到透明的溶液；2)將表面活性劑Tween-80和半極性溶劑丙二醇混合成乳液；并與步驟1)得到的二萜類化合物的乙醇溶液混合成透明溶液；3)將高分子固態(tài)分散劑羧甲基纖維素鈉、氯化鈉、葡萄糖和調(diào)味劑溶于去離子水中，并于15磅的高壓蒸氣滅菌；4)將步驟2)得到的混合液與步驟3)得到的混合液混合，用去離子水補(bǔ)足總體積，制得抗癌二萜類化合物口服制劑。
該口服制劑使用的復(fù)合溶媒是利用了增溶助溶的膜液晶技術(shù)，可使難溶于水的抗癌二萜類化合物的溶解度大大增加，表1列出了式I所示的二萜類化合物在水中和本發(fā)明提供的復(fù)合溶媒中的溶解度，可見(jiàn)，該復(fù)合溶媒具有較為明顯的增溶助溶效果。
表1、二萜類化合物在水中與復(fù)合溶媒中的溶解度

實(shí)施例2、二萜類化合物對(duì)人胃腺癌(BGC-823)裸鼠異種移植瘤體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)受試藥物實(shí)施例1制備的二萜類化合物口服制劑，其中的二萜類化合物由中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所生物膜與膜工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備，純度98％以上陽(yáng)性對(duì)照維甲酸(RA)，SIGMA公司產(chǎn)品，用口服制劑配制對(duì)照復(fù)合溶媒細(xì)胞模型人胃腺癌細(xì)胞(BGC-823)，由中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物BALB/C裸鼠，購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，4-5周齡，體重18-22g，雌性，許可證編號(hào)為SCXK11-00-0010。置于空氣凈化室內(nèi)飼養(yǎng)，室溫25±2℃。小鼠使用的籠具、飲用水、飼料等，均經(jīng)高壓蒸汽消毒處理，全部實(shí)驗(yàn)過(guò)程達(dá)到SPF(Specific Pathogeen-free)條件。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組1.瘤組織的接種取培養(yǎng)的人胃腺癌BGC-823細(xì)胞數(shù)瓶，胰酶消化后離心混合制成細(xì)胞懸液，在無(wú)菌條件下，用1ml注射器將細(xì)胞懸液注入BALB/C裸鼠頸部皮下，2.0×105個(gè)細(xì)胞/只。
2.實(shí)驗(yàn)分組接種后次日隨機(jī)分組，同時(shí)給藥，每組6只裸鼠，分為對(duì)照組、高、中、低三個(gè)二萜類化合物組和陽(yáng)性對(duì)照組(維甲酸)——RA組。
3.給藥途徑口服(PO)4.給藥劑量對(duì)照無(wú)藥物，僅為復(fù)合溶媒二萜類化合物300mg/kg(6mg/0.4ml/只/日)150mg/kg(3mg/0.4ml/只/日)75mg/kg(1.5mg/0.4ml/只/日)RA 15mg/kg(0.3mg/0.4ml/只/日)5.實(shí)驗(yàn)方法5.1給藥接種后次日給藥，每日灌胃一次口服制劑，共給藥28天。
5.2稱體重每周一次稱體重并測(cè)瘤塊大小，第四周每日稱體重一次。測(cè)量計(jì)算公式V＝0.5×長(zhǎng)徑×短徑2。
5.3療效評(píng)價(jià)在末次給藥24小時(shí)后，處死動(dòng)物，剖取腫瘤稱重。
腫瘤抑制率＝(C-T)/C×100％(C對(duì)照組平均瘤重T給藥組平均瘤重)。
6.數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)用x+s表示。用SPSS11.0軟件做數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、方差分析、t檢驗(yàn)分析各組瘤重的差別。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)觀察28天，實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示高、中、低劑量二萜類化合物組、RA組的腫瘤抑制率分別為64.3％、49.8％、27.1％、57.7％，除低劑量組外，抑瘤率均超過(guò)40％，抑瘤率與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，說(shuō)明中劑量(150mg/kg)以上的口服制劑對(duì)人胃腺癌動(dòng)物模型有明顯的抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，且提高劑量能增強(qiáng)治療效果。比較實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物體重變化，除RA組外，藥物對(duì)動(dòng)物體重變化均無(wú)影響，而且體重呈上升趨勢(shì)。
表2、對(duì)人胃腺瘤裸鼠移植瘤的療效

療效評(píng)價(jià)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明該抗癌二萜類化合物口服制劑的抑瘤效果顯著，且能促進(jìn)動(dòng)物體重增加，說(shuō)明該藥能提高動(dòng)物的生活質(zhì)量，明顯優(yōu)于RA的治療效果。
實(shí)施例3、二萜類化合物對(duì)人鼻咽癌(CNE-2)裸鼠異種移植瘤體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)受試藥物同實(shí)施例2陽(yáng)性對(duì)照同實(shí)施例2對(duì)照同實(shí)施例2
細(xì)胞模型人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞(由廣東中山醫(yī)科大學(xué)提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組1.瘤組織的接種取培養(yǎng)的人鼻咽癌(CNE-2)細(xì)胞數(shù)瓶，胰酶消化后離心混合制成細(xì)胞懸液，在無(wú)菌條件下，用1ml注射器將細(xì)胞懸液注入BALB/C裸鼠頸部皮下，2.0×105個(gè)細(xì)胞/只。
2.實(shí)驗(yàn)分組同實(shí)施例23.給藥途徑同實(shí)施例24.給藥劑量同實(shí)施例25.實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)施例26.數(shù)據(jù)處理同實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)結(jié)果給藥后分別在14天、21天、28天測(cè)量瘤組織的體積，如表3結(jié)果顯示14天后低劑量組、中劑量組略小于對(duì)照組，高劑量與RA組明顯小于對(duì)照組；21天、28天后，低劑量組略小于對(duì)照組，中劑量和RA組均明顯小于對(duì)照組，高劑量組比對(duì)照組顯示出顯著的抑瘤效果。實(shí)驗(yàn)終期，各組動(dòng)物解剖結(jié)果顯示高、中、低、RA組抑瘤率分別為66.9％、47.6％、27.7％、49.3％，高、中、RA組抑瘤率均超過(guò)40％，其抑瘤率與對(duì)照組相比有顯著性差異(p＜0.05)，比較實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物體重變化，除RA組外，藥物對(duì)動(dòng)物體重變化均無(wú)影響，而且體重呈上升趨勢(shì)。
表3、對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響

p＜0.05有顯著性差異表4、對(duì)人鼻咽癌裸鼠體重的影響

表5、對(duì)腫瘤的療效

療效評(píng)價(jià)結(jié)論該二萜類化合物口服制劑對(duì)人鼻咽癌(CNE-2)有明顯的抑瘤作用，且能促進(jìn)動(dòng)物體重增加，說(shuō)明該藥能提高動(dòng)物的生活質(zhì)量，明顯優(yōu)于RA的治療效果。
實(shí)施例4、二萜類化合物對(duì)人早幼細(xì)胞白血病(NB4)裸鼠異種移植瘤體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)受試藥物同實(shí)施例2陽(yáng)性對(duì)照同實(shí)施例2對(duì)照同實(shí)施例2細(xì)胞模型人早幼細(xì)胞白血病(NB4)(由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液研究所提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組1.瘤組織的接種將5×106/0.2ml人早幼細(xì)胞白血病(NB4)細(xì)胞接種于經(jīng)4Gy銫源照射的裸鼠右前側(cè)，待其長(zhǎng)成瘤后，取無(wú)壞死的瘤組織，制備成單細(xì)胞懸液，接種于裸鼠右前側(cè)，裸鼠在接種前經(jīng)銫源照射4Gy。
2.實(shí)驗(yàn)分組同實(shí)施例23.給藥途徑同實(shí)施例24.給藥劑量同實(shí)施例25.實(shí)驗(yàn)方法同實(shí)施例26.數(shù)據(jù)處理同實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)結(jié)果各組動(dòng)物不同時(shí)間體重的變化列于表6，從不同時(shí)期各組動(dòng)物體重與接種前后比較，除對(duì)照組外，其他各組動(dòng)物在接種后第7天體重均有不同程度的下降；14天以后，其它組體重均呈上升趨勢(shì)。
表6、各組動(dòng)物不同時(shí)間體重的變化(g)

表7、各組動(dòng)物瘤重及抑瘤率

實(shí)驗(yàn)觀察30天，實(shí)驗(yàn)終期，動(dòng)物解剖結(jié)果顯示，高、中、低、RA組抑瘤率分別為79.26％、39.26％、10.37％、43.70％，高中劑量組經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理與對(duì)照組相比有差異顯著(P＜0.05)。比較實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物體重變化，藥物對(duì)動(dòng)物體重變化均無(wú)影響。
療效評(píng)價(jià)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明該二萜類化合物口服制劑對(duì)人早幼粒白血病有明顯的抑瘤作用，并且不影響動(dòng)物體重變化。
實(shí)施例5、二萜類化合物對(duì)大腸癌(CA-II)裸鼠異種移植瘤體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)受試藥物同實(shí)施例2陽(yáng)性對(duì)照同實(shí)施例2對(duì)照同實(shí)施例2細(xì)胞模型大腸癌(CA-II)細(xì)胞(由北大醫(yī)學(xué)部病理系提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組1.瘤組織的接種取培養(yǎng)的人大腸癌(CA-II)細(xì)胞數(shù)瓶，胰酶消化后離心混合制成細(xì)胞懸液，在無(wú)菌條件下，用1ml注射器將細(xì)胞懸液注入BALB/C裸鼠頸部皮下，2.0×105個(gè)細(xì)胞/只。
2.實(shí)驗(yàn)分組同于實(shí)施例23.給藥途徑同于實(shí)施例24.給藥劑量同于實(shí)施例25.實(shí)驗(yàn)方法同于實(shí)施例26.數(shù)據(jù)處理同于實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表8、表9，藥物對(duì)人大腸癌荷瘤裸鼠的療效觀察28天，實(shí)驗(yàn)終期各組動(dòng)物解剖結(jié)果顯示，高、中、低、RA組抑制瘤率分別為68.5％、30.9％、13.2％、47.2％，除低劑量組外，其瘤重與對(duì)照組相比有顯著性差異(p＜0.05)；比較實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物體重變化，除RA組外藥物對(duì)動(dòng)物體重均沒(méi)有影響，而且使體重呈上升趨勢(shì)。
表8、二萜類化合物對(duì)人大腸癌(CA-II)荷瘤裸鼠體重的影響

表9、二萜類化合物對(duì)大腸癌(CA-II)腫瘤抑制作用

療效評(píng)價(jià)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，該二萜類化合物口服制劑對(duì)人大腸癌有明顯的抑瘤作用，且能促進(jìn)動(dòng)物體重增加，說(shuō)明該藥能提高動(dòng)物的生活質(zhì)量，明顯優(yōu)于RA的治療效果。
實(shí)施例6、二萜類化合物對(duì)人肺癌(PG)裸鼠異種移植瘤體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)受試藥物同實(shí)施例2陽(yáng)性對(duì)照同實(shí)施例2陰性對(duì)照同實(shí)施例2細(xì)胞模型人肺癌(PG)細(xì)胞(由北大醫(yī)學(xué)部病理系提供)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同實(shí)施例2
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組1.瘤組織的接種取培養(yǎng)的人肺癌(PG)細(xì)胞數(shù)瓶，胰酶消化后離心混合制成細(xì)胞懸液，在無(wú)菌條件下，用1ml注射器將細(xì)胞懸液注入BALB/C裸鼠頸部皮下，2.0×105個(gè)細(xì)胞/只。
2.實(shí)驗(yàn)分組同于實(shí)施例23.給藥途徑同于實(shí)施例24.給藥劑量同于實(shí)施例25.實(shí)驗(yàn)方法同于實(shí)施例26.數(shù)據(jù)處理同于實(shí)施例2實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果列于表10、表11。藥物對(duì)人肺癌荷瘤裸鼠的療效觀察28天，實(shí)驗(yàn)終期各組動(dòng)物瘤塊稱重，結(jié)果列于表12，高、中、低、RA抑制瘤率分別為57.6％、28.9％、13.4％、39％，其瘤重與對(duì)照組相比有顯著性差異(p＜0.05)，比較實(shí)驗(yàn)前后動(dòng)物體重變化，除RA組外，藥物對(duì)動(dòng)物體重均沒(méi)有影響，而且使體重呈上升趨勢(shì)。
表10、二萜類化合物對(duì)人肺癌(PG)荷瘤裸鼠體重的影響

表11、二萜類化合物對(duì)人肺癌(PG)的治療

療效評(píng)價(jià)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明二萜類化合物口服制劑對(duì)人肺癌有明顯的抑制作用，且能促進(jìn)動(dòng)物體重增加，說(shuō)明該藥能提高動(dòng)物的生活質(zhì)量，明顯優(yōu)于RA的治療效果。
權(quán)利要求
1.一種抗癌二萜類化合物口服制劑，其包括可藥用的復(fù)合溶媒和抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物， 式I所述的復(fù)合溶媒，包括極性溶劑 5～30wt％半極性溶劑5～25wt％表面活性劑0.1～0.5wt％高分子固態(tài)分散載體0.1～1wt％NaCl 0.1～1wt％葡萄糖1～5wt％調(diào)味劑5～10wt％余量為水所述的極性溶劑為二甲基亞砜、甲醇、無(wú)水乙醇或甘油；所述的半極性溶劑為丙二醇、異丙醇或丙酮；所述的表面活性劑為聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、Tween類、平平加類、脂肪醇聚氧乙烯醚類或泊洛沙姆；所述的高分子固態(tài)分散載體為環(huán)糊精類、橄欖油、植物油、改性淀粉或羧甲基纖維素鈉；所述調(diào)味劑為煉蜜。
2.一種權(quán)利要求1所述的抗癌二萜類化合物口服制劑的制備方法，包括如下步驟1)先將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物溶于5～30wt％極性溶劑，得到透明的溶液；所述的極性溶劑為二甲基亞砜、甲醇、無(wú)水乙醇或甘油；2)將0.1～0.5wt％表面活性劑和5～25wt％半極性溶劑混合成乳液；并與步驟1)得到的二萜類化合物溶液混合成透明溶液；所述的半極性溶劑為丙二醇、異丙醇或丙酮；所述的表面活性劑為聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油、Tween類、平平加類、脂肪醇聚氧乙烯醚類或泊洛沙姆；3)將0.1～1wt％高分子固態(tài)分散劑、0.1～1wt％氯化鈉、1～5wt％葡萄糖和5～10wt％調(diào)味劑溶于去離子水中，并高壓蒸氣滅菌；所述的高分子固態(tài)分散載體為環(huán)糊精類、橄欖油、植物油、改性淀粉或羧甲基纖維素鈉；所述調(diào)味劑為煉蜜；4)將步驟2)得到的混合液與步驟3)得到的混合液混合，用去離子水補(bǔ)足總體積，制得抗癌二萜類化合物口服制劑。
3.如權(quán)利要求2所述的抗癌二萜類化合物口服制劑的制備方法，其特征在于，所述的各個(gè)步驟均在無(wú)菌條件下操作。
4.一種權(quán)利要求1所述的抗癌二萜類化合物口服制劑的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗癌二萜類化合物口服制劑，具體地說(shuō)是涉及一種促分化抑增殖的抗癌二萜類化合物口服制劑及其用途。該口服制劑包括可藥用的復(fù)合溶媒和抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物，所述的復(fù)合溶媒包括極性溶劑5～30wt％；半極性溶劑5～25wt％；表面活性劑0.1～0.5wt％；高分子固態(tài)分散載體0.1～1wt％；NaCl0.1～1wt％；葡萄糖1～5wt％；調(diào)味劑5～10wt％；余量為水。該口服制劑是將抗癌有效量的式I所示的二萜類化合物依次溶于極性溶劑和表面活性劑、半極性溶劑、高分子固態(tài)分散劑、氯化鈉、葡萄糖和調(diào)味劑的溶液制得。該口服制劑的復(fù)合溶媒制劑可增加式I所示的二萜類化合物的溶解度，提高藥物在體內(nèi)的生物利用度，從而增強(qiáng)該化合物的抗癌療效，降低用藥劑量。
文檔編號(hào)A61K31/343GK1679538SQ200410030839
公開(kāi)日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2004年4月8日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月8日
發(fā)明者王敬澤 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所