專利名稱：用于醫(yī)藥用途的固體粒子抗真菌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗真菌劑組合物。更具體地，本發(fā)明涉及用于醫(yī)藥用途的抗真菌劑的水懸浮液。
背景技術(shù)：
一般認(rèn)為，相對(duì)其它抗菌劑而言，極其缺乏用于治療系統(tǒng)性真菌疾病的有效抗真菌藥物。在美國(guó)只批準(zhǔn)了十種抗真菌藥物用于治療系統(tǒng)性真菌感染。使用最普遍的五種抗真菌藥物是兩性霉素B、氟胞嘧啶、酮康唑、伊曲康唑、和氟康唑。后三種化合物被歸入三唑類，有關(guān)的分子結(jié)構(gòu)通式如

圖1所示。
三唑類抗真菌劑的一個(gè)例子是伊曲康唑(圖2)。伊曲康唑能有效治療系統(tǒng)性霉菌病，尤其是曲霉病和念珠菌病。為了克服溶解度缺陷引起的生物利用度問題，已經(jīng)制備了伊曲康唑的新的口服和靜脈制劑。例如，當(dāng)伊曲康唑在羥丙基-β-環(huán)糊精中配制時(shí)，所述環(huán)糊精是一種能與藥物形成包合配合物的載體低聚糖，伊曲康唑的生物利用度得到提高，從而提高了水溶性。已知其市售制劑的商品名為SPORANOX注射劑，由JANSSEN PHARMACEUTICA PRODUCTS，L.P發(fā)明。目前該藥由Abbott Labs生產(chǎn)，由Ortho Biotech，Inc配銷。
靜脈用伊曲康唑可用于選定的臨床環(huán)境中。例子是如下兩類病人的胃酸缺乏一類是AIDS病人，由于與其它藥物的協(xié)同治療導(dǎo)致其不能有效吸收口服藥物，或者另一類是不能口服藥物的病危病人。目前的商品，SPORANOX注射劑，裝在含250mg伊曲康唑和10g羥丙基-β-環(huán)糊精(稱為”HPBCD”)的25mL玻璃瓶中。這些小瓶在使用前用50mL 0.9％鹽水稀釋。得到的環(huán)糊精濃度在再生的產(chǎn)品中超過10％(w/v)。盡管傳統(tǒng)認(rèn)為HPBCD對(duì)于注射來說是安全的，但是，已經(jīng)有報(bào)道說如10％這樣的高濃度在動(dòng)物模型中會(huì)誘導(dǎo)內(nèi)皮組織產(chǎn)生重大的改變(Duncker G；Reichelt J.；Effects of the pharmaceutical cosolventhydroxypropyl-beta-cyclodextrin on porcine cornal endothelium.Graefe′sArchive for Clinical and Experimental Ophthalmology(Germany)1998，236/5，380-389)。
其它賦形劑經(jīng)常被用于配制水溶性差的靜脈注射藥物。例如，紫杉醇(Taxol，由Bristol-Myers Squibb生產(chǎn))包含52.7％(w/v)的CremophorEL(聚氧乙基化蓖麻油)和49.7％(v/v)無水乙醇，USP。CremophorEL的給藥會(huì)導(dǎo)致不期望的超敏反應(yīng)(Volcheck，G.W.，VanDellen，R.G.Anaphylaxis to intravenous cyclosporine and tolerance to oralcyclosporinecase report and review.Annals of Allergy，Asthma，andImmunology，1998，80，159-163；Singla A.K.；Garg A.；Aggarwal D.，Paclitaxel and its formulations.International Journal of Pharmaceutcs.2002，235/1-2，179-192)。
由于與增溶劑有關(guān)的潛在毒性問題，在配制中有必要使增溶劑的水平最小化，其中不用完全依賴可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的添加劑就能達(dá)到更高的藥物負(fù)荷。
在水中為難溶或不溶的藥物的遞送是一個(gè)挑戰(zhàn)。當(dāng)這些藥物制劑被配制成一種亞微米到微米尺寸的粒子的穩(wěn)定懸浮液時(shí)，它們可具有重要的有益效果。精確控制粒尺寸對(duì)這些制劑的安全和有效的使用是必要的。制藥用途的適用性包括小粒子尺寸(＜50μm)、低毒(例如從毒性配方組分或剩余溶劑)、和給藥后藥物粒子的生物利用度。
美國(guó)專利No.2,745,785公開了一種遞送不溶性藥物的方法。該專利公開了一種制備適合于非腸道給藥的青霉素G晶體的方法。該方法包括如下步驟通過加水減少青霉素G的溶解度，從而使青霉素G在甲酰胺溶液中重結(jié)晶。‘785專利進(jìn)一步指出，青霉素G粒子能用如下物質(zhì)包衣潤(rùn)濕劑如卵磷脂、或乳化劑、表面活性和消泡劑、或山梨聚糖的部分高級(jí)脂肪酸酯或其聚氧化烯衍生物、或芳烷基聚醚醇或其鹽?！?85專利還公開了在壓力下用空氣噴凈法微粉化青霉素G，以形成范圍為約5至20微米的晶體。
另一種方法在美國(guó)專利No.5,118,528被公開，它公開了一種制備納米粒子的方法。該方法包括如下步驟(1)制備一種物質(zhì)在一種溶劑或溶劑混合物中的液相，可以向其中加入一種或多種表面活性劑；(2)制備非溶劑或非溶劑混合物的第二液相，該非溶劑與物質(zhì)的溶劑或溶劑混合物混溶；(3)攪拌下使(1)和(2)混合；(4)除去不需要的溶劑，得到納米粒子的膠態(tài)懸浮液?！?28專利公開了，它不需要能量的供給就能得到小于500nm的物質(zhì)粒子。尤其是，‘528專利聲明，沒有必要使用高能量裝置如超聲波儀和均化器。
美國(guó)專利No.4,826,689公開了一種從水不溶性藥物或其它有機(jī)化合物制備均一尺寸粒子的方法。首先，將一種合適的固體有機(jī)化合物溶解于有機(jī)溶劑中，該溶液能用非溶劑稀釋。然后，注入含水沉淀液體，沉淀具有基本均一的平均直徑的未聚集粒子。然后將粒子從有機(jī)溶劑中分離出來。依照該發(fā)明，根據(jù)有機(jī)化合物和所需的粒子尺寸，溫度、非溶劑和有機(jī)溶劑的比率、注入速率、攪拌速率和體積等參數(shù)可以變化?！?89專利公開了形成亞穩(wěn)態(tài)藥物的方法，該藥物是熱力學(xué)不穩(wěn)定的并最終轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的晶態(tài)?！?89專利公開了捕捉該亞穩(wěn)態(tài)藥物，此時(shí)的自由能在起始藥物溶液自由能和穩(wěn)定晶形自由能之間。‘689專利公開了，使用結(jié)晶抑制劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)和表面活性劑(例如聚(氧乙烯)-共-(氧丙烯))來使沉淀物足夠穩(wěn)定，從而用離心過濾、薄膜過濾或反滲透等方法得到分離。
美國(guó)專利5,091,188；5,091,187和4,725,442公開了(a)用天然或合成磷脂包裹藥物小粒子，或(b)將藥物溶解在合適的親脂性載體中，并且形成被天然或半合成的磷脂穩(wěn)定的乳狀液。
另一種提供用于醫(yī)藥用途的不溶性藥物的方法被公開于美國(guó)專利No.5,145,684。該‘684專利公開了在表面改性劑存在的情況下，不溶性藥物通過濕磨法產(chǎn)生有效平均粒子尺寸小于400nm的藥物粒子?！?84專利強(qiáng)調(diào)在該方法中有望不用任何溶劑?！?84專利公開了表面改性劑以足夠的量被吸附在藥物粒子表面，以阻止凝聚成更大粒子。
但是，另一種提供用于醫(yī)藥用途的不溶性藥物的試驗(yàn)被公開于美國(guó)專利No.5,922,355。該‘355專利公開了用如下方法得到不溶性藥物的亞微米尺寸的粒子使用表面改性劑和磷脂的混合物，緊接著使用超聲處理、均化、研磨、微流態(tài)化、沉淀或重結(jié)晶等技術(shù)使粒子尺寸變小。
美國(guó)專利No.5,780,062公開了一種制備不溶性藥物小粒子的方法，包括如下步驟(1)將藥物溶解在與水混溶的第一溶劑中；(2)制備聚合物和兩親物在第二水溶劑中的第二溶液，其中藥物基本不溶解，由此形成聚合物/兩親物復(fù)合體；(3)混合第一步和第二步的溶液，以沉淀藥物和聚合物/兩親物復(fù)合體的聚集體。
美國(guó)專利No.5,858,410公開了一種適于醫(yī)藥用途的藥物納米懸浮液。該‘410專利公開了，將至少一種治療上活性的固體化合物分散在溶劑中，使其在活塞-間隙均化器中進(jìn)行高壓均化，得到平均直徑為10nm到1000nm的粒子，該尺寸由光子關(guān)聯(lián)能譜法(PCS)測(cè)定，總?cè)后w中大于5μm的粒子比例小于0.1％(數(shù)量分布由庫(kù)樂爾特顆粒計(jì)數(shù)器測(cè)定)，不用預(yù)先轉(zhuǎn)化為熔化物，其中活性化合物在室溫下是固體，不溶解，只有在水、水介質(zhì)和/或有機(jī)溶劑中微溶或中等溶解。在‘410專利中的實(shí)施例公開了在均化前進(jìn)行噴射研磨。
美國(guó)專利No.4,997,454公開了一種從固體化合物制備均一尺寸粒子的方法。該‘454專利的方法包括如下步驟將固體化合物溶于合適的溶劑中，然后注入沉淀液體，從而使具有基本均一的平均直徑的非聚集粒子沉淀下來。然后將粒子從溶劑中分離?！?54專利不贊同形成晶態(tài)粒子，因?yàn)樵诔恋磉^程中晶體會(huì)溶解并重結(jié)晶，因此使粒子尺寸分布范圍變寬?！?54專利贊同在沉淀過程中，在粒子亞穩(wěn)態(tài)捕獲粒子。
美國(guó)專利No.5,605,785公開了制備照相用化合物的無定形分散體的方法。形成無定形分散體的方法包括任何已知的乳化方法，其產(chǎn)生了含有無定形粒子的分散相。
美國(guó)專利No.6,245,349公開了抗真菌劑的濃縮藥物遞送組合物，它是由如下組分配制而成磷脂組分、選自丙二醇或某種聚乙二醇化合物中的組分、具有高的親水-親油平衡值(HLB)的表面活性劑、和藥物組分，以及任選的水和/或油組分。濃縮藥物遞送組合物可以用含水流體稀釋，以形成水包油型微乳狀液組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及用一種或多種表面活性劑包衣的亞微米到微米大小的抗真菌劑粒子的水懸浮液組合物。由光散射法(HORIBA)或微觀測(cè)量法測(cè)定，抗真菌劑粒子的容重(volume-weighted)平均粒子直徑應(yīng)該小于約50μm。更優(yōu)選地，粒子尺寸應(yīng)該小于約7μm，甚至更優(yōu)選小于約2μm，甚至更優(yōu)選小于約400nm，最優(yōu)選小于約100nm，或任意范圍或其中范圍的組合。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗真菌劑為三唑類抗真菌劑。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，該三唑類抗真菌劑選自伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、氟康唑、瑞扶康唑、伏立康唑、沙康唑、艾伯康唑、genaconazole、和泊沙康唑。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，抗真菌劑是伊曲康唑。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物適合用于制藥。
本發(fā)明中用于包裹粒子的合適的表面活性劑可選自離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、生物學(xué)來源的表面活性劑、或氨基酸和它們的衍生物。
優(yōu)選的離子型表面活性劑是膽汁鹽，優(yōu)選的膽汁鹽是脫氧膽酸鹽。優(yōu)選的非離子型表面活性劑是聚烷氧醚，優(yōu)選的聚烷氧醚是Poloxamer188。另一種優(yōu)選的非離子型表面活性劑是Solutol HS 15(聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯)。還有另一種優(yōu)選的非離子型表面活性劑是羥乙基淀粉。優(yōu)選的生物學(xué)來源的表面活性劑是清蛋白。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的粒子懸浮在還有pH調(diào)節(jié)劑的水介質(zhì)中。合適的pH調(diào)節(jié)劑包括但不限于三羥甲基氨基甲烷緩沖液、磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、THAM(三(羥甲基)氨基甲烷)、葡甲胺(N-甲基葡萄糖胺)、檸檬酸鹽、氫氧化鈉、鹽酸、和氨基酸如甘氨酸、精氨酸、賴氨酸、丙氨酸和亮氨酸。水介質(zhì)也可以包含滲透壓調(diào)節(jié)劑，例如但不限于甘油、單糖如葡萄糖、和糖醇如甘露醇和山梨糖醇。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，抗真菌劑的含量按重量體積比(w/v)計(jì)優(yōu)選為約0.01％至約50％，更優(yōu)選約0.05％至約30％，最優(yōu)選約0.1％至約20％。
在還一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性劑的含量?jī)?yōu)選為約0.001％至約5％w/v，更優(yōu)選從約0.005％至約5％w/v，最優(yōu)選從約0.01％至約5％w/v。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，除去組合物中的水介質(zhì)以形成干粒子，然后該粒子可以被重新配制，得到一種可接受的藥物劑型。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，水懸浮液組合物被冷凍。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括由亞微米到微米大小的伊曲康唑粒子的水懸浮液，其含量為0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹0.001-5％w/v的膽汁鹽(例如脫氧膽酸鹽)、0.001-5％w/v的聚烷氧乙醚(例如泊洛沙姆188)和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為約0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹約0.001-5％w/v的膽汁鹽(例如脫氧膽酸鹽)、0.001-5％w/v的聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯(w/v)和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為約0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹約0.001-5％聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯(w/v)和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的還一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為0.01-50％w/v，這些粒子被約0.001-5％(w/v)的清蛋白所包裹。
在又一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物通過微量沉淀方法制得，該方法包括如下步驟(i)在與水混溶的第一溶劑中溶解抗真菌劑得到一種溶液；(ii)把上述溶液和第二水性溶劑混合，得到預(yù)懸浮液；(iii)向預(yù)懸浮液中加入能量，形成如下粒子，其平均有效粒子尺寸小于50μm；更優(yōu)選小于約7μm，甚至更優(yōu)選小于約2μm，甚至更優(yōu)選小于約400nm，最優(yōu)選小于約100nm或任意范圍或其中各范圍的組合，其中抗菌劑在第一溶劑中的溶解度比在第二溶劑中大，第一溶劑或第二溶劑包括一種或多種表面活性劑，這些表面活性劑選自非離子型表面活性劑、離子型表面活性劑、生物學(xué)來源的表面活性劑、和氨基酸以及它們的衍生物。
參考附圖和伴隨的說明，本發(fā)明的這些和其他方面和特征將會(huì)被討論。
附圖簡(jiǎn)述圖1是三唑類抗真菌劑的分子結(jié)構(gòu)通式；圖2是伊曲康唑的分子結(jié)構(gòu)式；圖3是用于本發(fā)明的微量沉淀過程的方法A的示意圖，以制備懸浮液；圖4是用于本發(fā)明的微量沉淀過程的方法B的示意圖，以制備懸浮液；圖5是一個(gè)曲線圖，該圖比較了SPORANOX和本發(fā)明的伊曲康唑的制劑1懸浮液的藥物代謝動(dòng)力學(xué)，其中ITC＝在制劑1(80mg/kg)推注后測(cè)量的伊曲康唑的血漿濃度；ITC-OH＝在制劑1(80mg/kg)推注后測(cè)量的初級(jí)代謝產(chǎn)物羥基伊曲康唑的血漿濃度；總計(jì)＝在制劑1(80mg/kg)推注后測(cè)量的伊曲康唑和羥基伊曲康唑(ITC+ITC-OH)的聯(lián)合濃度；Sporanox-ITC＝在20mg/kg的Sporanox IV推注后測(cè)量的伊曲康唑的血漿濃度；Sporanox-ITC-OH＝在20mg/kg的Sporanox IV推注后測(cè)量的初級(jí)代謝產(chǎn)物羥基伊曲康唑的血漿濃度；Sporanox-總計(jì)＝在20mg/kg的Sporanox IV推注后測(cè)量的伊曲康唑和羥基伊曲康唑(ITC+ITC-OH)的聯(lián)合濃度；圖6是一個(gè)曲線圖，該圖比較了用SPORANOX(頂面板)和制劑1(底面板)治療的平均體重和白色念珠菌菌落計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)；圖7是一個(gè)曲線圖，該圖顯示了在各種劑量的伊曲康唑懸浮液制劑(制劑1)給藥后，伊曲康唑(1-ITC)和它的代謝物羥基-伊曲康唑(1-ITC-OH)在腎中的分布(在每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)旁邊的數(shù)字表示在腎中發(fā)現(xiàn)的真菌菌落計(jì)數(shù)，這與由該數(shù)據(jù)點(diǎn)表示的懸浮液劑量有關(guān))；圖8是一個(gè)曲線圖，該圖顯示了腎中的真菌計(jì)數(shù)，它隨著腎中伊曲康唑含量的升高而下降。(注S＝SPORANOX，N＝制劑1的納米懸浮液)。
優(yōu)選實(shí)施方案詳述盡管本發(fā)明容許的實(shí)施方案存在許多形式，但如圖所示，將在本文中詳細(xì)描述其具體實(shí)施方案，應(yīng)理解所公開內(nèi)容被認(rèn)為是本發(fā)明原理的例證，不是用于將本發(fā)明限于所述的具體實(shí)施方案。
本發(fā)明涉及一種抗真菌組合物，它包括用一種或多種表面活性劑包衣的亞微米到微米大小的抗真菌劑粒子的水懸浮液。由光散射法(HORIBA)或微觀測(cè)量法測(cè)定，抗真菌劑粒子直徑的容重粒子大小應(yīng)小于約50μm。更優(yōu)選地，粒子尺寸應(yīng)該小于約7μm，更優(yōu)選小于約2μm，甚至更優(yōu)選小于約400nm，甚至更優(yōu)選小于約200nm，最優(yōu)選小于約100nm、或任意范圍或其中范圍的組合。
抗真菌劑優(yōu)選是水溶性差的有機(jī)化合物?！八苄圆睢笔侵富衔锏乃苄孕∮?0mg/ml，優(yōu)選小于1mg/ml?？拐婢鷦┑膬?yōu)選種類是三唑類抗真菌劑，它的分子結(jié)構(gòu)通式如圖1所示。三唑類抗真菌劑的例子包括但不限于伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、氟康唑、瑞扶康唑、伏立康唑、沙康唑、艾伯康唑、genaconazole、和泊沙康唑。本發(fā)明優(yōu)選的抗真菌劑是伊曲康唑。伊曲康唑的分子結(jié)構(gòu)如圖2所示。
本發(fā)明適于醫(yī)藥用途。這些組合物能通過各種途徑進(jìn)行給藥。優(yōu)選的給藥途徑是腸道外和口服。腸道外給藥的方式包括靜脈內(nèi)注射、動(dòng)脈內(nèi)注射、鞘內(nèi)注射、腹膜內(nèi)注射、眼內(nèi)注射、關(guān)節(jié)內(nèi)注射、肌肉注射、皮下注射等。本發(fā)明也可以通過其它途徑給藥，包括口服、面頰、牙周、直腸、鼻、肺、經(jīng)皮或局部。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，組合物的水介質(zhì)被除去形成干粒子。除去水介質(zhì)的方法可以是本領(lǐng)域所知的任一種方法。一個(gè)例子是蒸發(fā)。另一個(gè)例子是冷凍干燥或凍干法。然后將干粒子制成任意令人滿意的物理形式，其包括但不限于溶液、片劑、膠囊、懸浮液、乳膏、洗劑、乳劑、氣霧劑、粉劑、包含到用于持續(xù)釋放的貯存器或基質(zhì)裝置中(例如植入物或透皮貼劑)等。這些藥物形式的給藥途徑包括但不限于腸道外、口服、面頰、牙周、直腸、鼻、肺、經(jīng)皮和局部等。此外，活性藥物試劑可以通過受控的或持續(xù)的釋放劑型遞送，包含到遞藥裝置如可植入裝置和透皮貼劑中。藥物可以被配制用于系統(tǒng)遞送或用于組織和/或受體特異性尋靶。
本發(fā)明的水懸浮液也可以被冷凍以提高貯藏穩(wěn)定性。冷凍水懸浮液來提高穩(wěn)定性在普通轉(zhuǎn)讓和共同未決的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)No.60/347,548中被公開，該專利引入本文以供參考，并成為本文的一部分。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗真菌劑的含量按重量體積比(w/v)計(jì)優(yōu)選為約0.01％至約50％，更優(yōu)選約0.05％至約30％w/v，最優(yōu)選約0.1％至約20％w/v。
本發(fā)明中用于包裹粒子的合適的表面活性劑可選自離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、生物學(xué)來源的表面活性劑、或氨基酸和它們的衍生物。離子型表面活性劑可以是陰離子型表面活性劑或陽離子型表面活性劑。
合適的陰離子型表面活性劑包括但不限于月桂酸鉀、月桂基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、烷基聚氧乙烯硫酸酯、藻酸鈉、琥珀酸二辛酯磺酸鈉、丙三酯、羧甲基纖維素鈉、膽酸和其它膽汁酸(例如，膽酸、脫氧膽酸、甘氨膽酸、?；悄懰?、甘脫氧膽酸(glycodeoxycholic acid))及其鹽(例如脫氧膽酸鈉等)。
合適的陽離子型表面活性劑包括但不限于季銨化合物，例如苯扎氯銨、十六烷基三甲基溴化銨、月桂基二甲基芐基氯化銨、酰基肉堿鹽酸鹽、或烷基鹵化吡啶鎓。
合適的非離子型表面活性劑包括聚氧乙烯脂肪醇醚(Macrogol和Brij)、聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯(Polysorbates)、聚氧乙烯脂肪酸酯(Myrj)、山梨聚糖酯(Span)、甘油單硬脂酸酯、聚乙二醇、聚丙二醇、十六醇、十六醇十八醇混合物、十八醇、芳烷基聚醚醇、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(poloxomers)、polaxamines、甲基纖維素、羥基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、非結(jié)晶纖維素、多糖，包括淀粉和淀粉衍生物，比如羥乙基淀粉(HES)、聚乙烯醇、和聚乙烯吡咯烷酮。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選形式中，非離子型表面活性劑是聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物，優(yōu)選丙二醇和乙二醇的嵌段共聚物。這些聚合物以商品名POLOXAMER出售，有時(shí)也稱為PLURONIC，并由包括Spectrum Chemical和Ruger的幾個(gè)供應(yīng)商銷售。聚氧乙烯脂肪酸酯中包括具有短烷基鏈的那些物質(zhì)。這種表面活性劑的一個(gè)例子是BASFAktiengesellschaft生產(chǎn)的SOLUTOLHS 15，聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯。
合適的生物學(xué)來源的表面活性劑包括如下分子如清蛋白、酪蛋白、肝素、水蛭素、或其它合適的蛋白質(zhì)或多糖等。其它合適的表面活性劑包括任意氨基酸，比如亮氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、或這些氨基酸的其它衍生物，比如酰胺或酯衍生物以及由這些氨基酸形成的多肽。
優(yōu)選的離子型表面活性劑是膽汁鹽，優(yōu)選的膽汁鹽是脫氧膽酸鹽。優(yōu)選的非離子型表面活性劑是聚烷氧基醚，優(yōu)選的聚烷氧基醚是Poloxamer 188。另一種優(yōu)選的非離子型表面活性劑是Solutol HS 15(聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯)。還一種優(yōu)選的非離子表面活性劑是羥乙基淀粉。優(yōu)選的生物學(xué)來源的表面活性劑是清蛋白。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性劑的含量?jī)?yōu)選為約0.001％至5％w/v，更優(yōu)選從約0.005％至約5％w/v，最優(yōu)選約0.01％至5％w/v。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，粒子懸浮于還包含pH調(diào)節(jié)劑的水介質(zhì)中。合適的pH調(diào)節(jié)劑包括但不限于三羥甲基氨基甲烷緩沖液、磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、THAM(三(羥甲基)氨基甲烷)、葡甲胺(N-甲基葡萄糖胺)、檸檬酸鹽、氫氧化鈉、鹽酸、和氨基酸例如甘氨酸、精氨酸、賴氨酸、丙氨酸和亮氨酸。水介質(zhì)可以另外包含滲透壓調(diào)節(jié)劑，例如但不限于甘氨酸、單糖如葡萄糖，和糖醇如甘露醇和山梨糖醇。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑粒子的水懸浮液，其含量為0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹0.001-5％w/v的膽汁鹽(例如脫氧膽酸鹽)，0.001-5％w/v的聚烷氧醚(例如Poloxamer 188)、和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為約0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹約0.001-5％w/v的膽汁鹽(例如脫氧膽酸鹽)，0.001-5％w/v的聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯、和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為約0.01-50％w/v，這些粒子被如下物質(zhì)所包裹約0.001-5％w/v的聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯、和被加入以調(diào)節(jié)配制滲透壓的甘油。
在本發(fā)明的還一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，組合物包括伊曲康唑的水懸浮液，其含量為0.01-50％w/v，這些粒子被約0.001-5％w/v的清蛋白所包裹。
在本發(fā)明中，制備這種懸浮液的方法在普通轉(zhuǎn)讓和共同未決的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)09/874,499；09/874,799；09/874,637；和10/021/692中被公開；這些專利引入本文以供參考，并成為本文的一部分。制備這種懸浮液以用于實(shí)施本發(fā)明的一般方法如下所述。
這些方法通常被分為三個(gè)一般類別。每一類都具有如下步驟(1)在與水混溶的第一有機(jī)溶劑中溶解抗真菌劑，得到第一溶液；(2)第一溶液與第二水溶劑混合，使抗真菌劑沉淀，得到預(yù)懸浮液；(3)以高剪切力混合或加熱的形式向預(yù)懸浮液中加入能量，產(chǎn)生具有上述期望尺寸范圍的抗真菌劑的穩(wěn)定形式。
根據(jù)抗真菌劑的物理性質(zhì)區(qū)別這三類方法，這些性質(zhì)通過X-光衍射研究、差示掃描量熱法(DSC)研究、或其它合適的研究確定，所述研究在加入能量步驟之前和之后進(jìn)行。在第一類方法中，在加入能量步驟之前處于預(yù)懸浮液的抗真菌劑為無定形、半結(jié)晶形、或過冷液體形式，并具有平均有效的粒子大小。在加入能量步驟之后，抗真菌劑處于結(jié)晶形，其平均有效的粒子大小基本上與預(yù)懸浮液相同(也就是小于約50μm)。
在第二類方法中，在加入能量步驟之前抗真菌劑處于結(jié)晶形，具有平均有效的粒子大小。在加入能量步驟之后，抗真菌劑處于結(jié)晶形，其平均有效的粒子大小基本上與加入能量步驟之前的相同，但是在加入能量步驟之后的晶體不太可能聚集。
通過激光動(dòng)態(tài)光散射法和光學(xué)顯微術(shù)可觀察有機(jī)化合物的較低聚集趨勢(shì)。
在第三類方法中，在增加能量步驟之前抗真菌劑處于結(jié)晶形，其易碎且具有平均有效的粒子大小?！耙姿椤笔侵噶Ｗ右姿?，更容易碎裂成更小的粒子。在加入能量步驟之后，有機(jī)化合物處于結(jié)晶形，其平均有效粒子大小比預(yù)懸浮液的晶體小。與不易碎的結(jié)晶形態(tài)的有機(jī)化合物相比，通過采取必要的步驟來放置易碎的結(jié)晶形的有機(jī)化合物，能更快和更有效地進(jìn)行后續(xù)的加入能量步驟。
加入能量步驟能以任何方式進(jìn)行，其中預(yù)懸浮液被暴露于空化、剪切或沖擊力。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選形式中，加入能量步驟是退火步驟。退火在本發(fā)明中是指通過單一或重復(fù)施加能量(直接加熱或機(jī)械應(yīng)力)，緊接著熱弛豫，把熱力學(xué)不穩(wěn)定的物質(zhì)轉(zhuǎn)變成更穩(wěn)定的形式。這種能量的降低可以通過把固體形式從不太規(guī)則的形式轉(zhuǎn)變?yōu)楸容^規(guī)則的晶格結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)?；蛘?，這種穩(wěn)定化可以通過表面活性劑分子在固-液界面的重排來實(shí)現(xiàn)。
這三種方法將會(huì)在下面分別討論。但是應(yīng)理解，在下面要討論的任一類方法中，要考慮待處理的任何藥物，來選擇工藝條件，如表面活性劑或其組合的選擇、表面活性劑的用量、反應(yīng)溫度、溶液的混合速度、沉淀速度等。
第一類方法以及第二和第三類方法可進(jìn)一步被劃分為兩個(gè)子類方法A和B，它們分別以圖解形式顯示于圖3和圖4中。
本發(fā)明的第一溶劑為一種溶劑或多種溶劑的混合，其中相關(guān)的抗真菌劑是相對(duì)可溶的，而且可以與第二溶劑混溶。這些溶劑的例子包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮、N-甲基-2-吡咯烷酮(也稱為N-甲基-2-吡咯烷酮)、2-吡咯烷酮、二甲亞砜、二甲基乙酰胺、乳酸、甲醇、乙醇、異丙醇、3-戊醇、正丙醇、甘油、丁二醇(丁二醇)、乙二醇、丙二醇、單?；投；膯嗡岣视王?比如甘油辛酸酯)、二甲基異山梨醇、丙酮、二甲基甲酰胺、1、4-二惡烷、聚乙二醇(比如PEG-4、PEG-8、PEG-9、PEG-12、PEG-14、PEG-16、PEG-120、PEG-75、PEG-150)、聚乙二醇酯(其例子如PEG-4二月桂酸酯、PEG-20二月桂酸酯、PEG-6異硬脂酸酯、PEG-8棕櫚酸硬脂酸酯、PEG-150棕櫚酸硬脂酸酯)、聚乙二醇山梨聚糖(比如PEG-20山梨聚糖異硬脂酸酯)、聚乙二醇單烷基醚(其例子如PEG-3二甲基醚、PEG-4二甲基醚)、聚丙二醇(PPG)、聚藻酸亞丙酯、PPG-10丁二醇、PPG-10甲基葡萄糖醚、PPG-20甲基葡萄糖醚、PPG-15硬脂醚、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、丙二醇月桂酸酯。
方法A在方法A中(見圖3)，抗真菌劑首先溶解于第一溶劑中得到第一溶液。根據(jù)抗真菌劑在第一溶劑中的溶解性，抗真菌劑的加入量為約0.01％(w/v)至約50％(w/v)。必須將濃縮物從約30℃加熱到約100℃，以確保抗真菌劑在第一溶劑中完全溶解。
提供第二水溶液，向其中加入一種或多種表面活性劑。該表面活性劑選自如上所述的離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、或生物學(xué)來源表面活性劑。
還希望向第二溶液中加入pH調(diào)節(jié)劑，比如氫氧化鈉、鹽酸、三羥甲氨基甲烷緩沖液或檸檬酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、葡甲胺或類似物。第二溶液的pH范圍應(yīng)該在約3到約11之間。
在本發(fā)明的一種優(yōu)選形式中，制備亞微米大小的抗真菌劑粒子的方法包括將第一溶液加入到第二溶液的步驟。加入速度取決于抗真菌劑的批量大小和沉淀動(dòng)力學(xué)。典型地，對(duì)于小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室方法(制備1升)，加入速度為約0.05cc/分鐘至約10cc/分鐘。在加入過程中，溶液應(yīng)該處于持續(xù)攪拌狀態(tài)。利用光學(xué)顯微鏡法已經(jīng)觀察到，形成了無定形粒子、半結(jié)晶固體或過冷液體以得到預(yù)懸浮液。該方法另外包括如下步驟使預(yù)懸浮液進(jìn)行退火步驟，以使無定形粒子、過冷液體或半結(jié)晶固體轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的固態(tài)結(jié)晶。所得粒子具有平均有效粒子尺寸，這由動(dòng)態(tài)光散射法(例如在上述范圍中的光相關(guān)性光譜學(xué)、激光衍射、小角激光散射(LALLS)、中角激光散射(MALLS)、遮光法(例如Coulter法)、流變學(xué)或顯微鏡方法(光學(xué)或電子))測(cè)量得到。
能量加入步驟包括通過超聲處理、均化、逆流均化(例如，MiniDeBEE2000均化器，得自BEE Incorporated，NC，在該裝置中，流體射流沿著第一通道被導(dǎo)引，在第一通道中放入一個(gè)結(jié)構(gòu)，使流體以受控流動(dòng)途徑沿著新的通道被改變方向，從而乳化或混合該流體)、微流態(tài)化、或其它能提供撞擊、剪切或空化力的方法加入能量。在這個(gè)階段樣品可以被冷卻或加熱。在本發(fā)明的一種優(yōu)選形式中，通過均化實(shí)施退火步驟。在本發(fā)明的另一種優(yōu)選形式中，退火可以通過乳化裝置的使用來實(shí)現(xiàn)，其記述于美國(guó)專利5,720,551中，該專利被引入本文以供參考，并在此處成為本文的一部分。
根據(jù)退火速度，希望將加工樣品的溫度調(diào)節(jié)到約-30℃至30℃的范圍。或者，為了在加工的固體中達(dá)到一個(gè)理想的相變，也有必要在退火步驟階段將預(yù)懸浮液加熱到約30℃至約100℃的溫度范圍。
方法B
方法B與方法A在下列方面有區(qū)別。第一個(gè)區(qū)別是將一種表面活性劑或幾種表面活性劑的組合加入到第一溶液中。該表面活性劑可以選自如上所述的離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、或生物學(xué)來源表面活性劑。
假如在制劑中使用了注射用水，并且采用了用于溶液滅菌的恰當(dāng)方式，那么應(yīng)用本發(fā)明所述方法得到的藥物懸浮液就可以作為一種可注射的溶液直接給藥。可以通過藥物濃縮液(藥物、溶劑和任選的表面活性劑)和稀釋介質(zhì)(水、任意的緩沖系和表面活性劑)在混合得到預(yù)懸浮液之前的單獨(dú)滅菌來完成滅菌。滅菌方法包括首先通過3.0微米的濾器進(jìn)行預(yù)過濾，之后通過0.45微米粒子濾器過濾，之后用蒸汽或加熱滅菌、或用兩次重復(fù)的0.2微米膜濾器進(jìn)行滅菌過濾。
任選地，無溶劑懸浮液可以通過沉淀后除去溶劑來制備。這能通過離心過濾、透析、滲濾、力場(chǎng)分餾、高壓過濾、或本領(lǐng)域眾所周知的其它分離技術(shù)來完成。典型地，通過一到三次連續(xù)的離心過濾可以徹底除去N-甲基-2-吡咯烷酮；在每次離心過濾之后，上清液被輕輕倒出并拋棄。沒有有機(jī)溶劑的新鮮量取的懸浮液媒介物被加到剩下的固體中，通過均化來分散該混合物。本領(lǐng)域的其他技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，其它高剪切混合技術(shù)可以應(yīng)用在這個(gè)再生步驟中。
此外，可以通過利用上述段落中描述的分離方法，將任何不理想的賦形劑如表面活性劑等替代成一種更理想的賦形劑。在離心過濾或過濾之后，溶劑和第一媒介物可以隨上清液一起拋棄。然后，可以加入一種沒有溶劑和沒有第一賦形劑的新鮮量取的懸浮液賦形劑。或者，可以加入新的表面活性劑。例如，在離心過濾和除去上清液后，由藥物、N-甲基-2-吡咯烷酮(溶劑)、Poloxamer 188(第一賦形劑)、脫氧膽酸鈉、丙三醇和水組成的懸浮液可以被磷脂(新表面活性劑)、丙三醇和水來代替。
I.第一類方法第一類方法一般包括如下步驟在水混溶的第一溶劑中溶解抗真菌劑，之后將該溶液和一種水溶液混合以得到預(yù)懸浮液，其中抗真菌劑處于無定形形式、半結(jié)晶形式、或過冷液體形式，這通過X射線衍射研究、DSC、光學(xué)顯微鏡法或其它分析技術(shù)測(cè)量，并具有平均有效粒子尺寸，其范圍在上述的一個(gè)有效粒子尺寸范圍中?；旌喜襟E之后是能量加入步驟，本發(fā)明中的優(yōu)選形式是退火步驟。
II.第二類方法第二類方法包括基本上與第一類方法中的步驟相同的步驟，但是在下列方面有不同。對(duì)于預(yù)懸浮液的X射線衍射、DSC和其它合適的分析技術(shù)顯示，抗真菌劑處于結(jié)晶形式，并具有平均有效粒子尺寸。在能量加入步驟之后，抗真菌劑具有與在能量增加步驟之前基本上相同的平均有效粒子尺寸，但是當(dāng)與預(yù)懸浮液粒子相比時(shí)，該抗真菌劑聚集成更大粒子的趨勢(shì)較小。不受理論的約束，據(jù)信粒子穩(wěn)定性的區(qū)別可能歸因于表面活性劑分子在固液界面的重有序化。
III.第三類方法第三類方法修改了第一類和第二類方法中的前兩個(gè)步驟，以確保在預(yù)懸浮液中的抗真菌劑處于易碎形式且具有平均有效粒子尺寸(例如細(xì)長(zhǎng)針和薄板)。通過選擇合適的溶劑、表面活性劑或表面活性劑的組合、單獨(dú)溶液的溫度、混合速度和沉淀速度等，可以形成易碎粒子。通過在第一溶液和水溶液混合的步驟中引入晶格缺陷(例如晶體的裂開面)也可以增強(qiáng)易碎性。這通過例如在沉淀步驟中提供的快速結(jié)晶而產(chǎn)生。在能量加入步驟中，這些易碎晶體被轉(zhuǎn)變成晶體，該晶體在動(dòng)力學(xué)上被穩(wěn)定，并且其平均有效粒子尺寸比預(yù)懸浮液的要小?！霸趧?dòng)力學(xué)上被穩(wěn)定”是指，與在動(dòng)力學(xué)上未被穩(wěn)定的粒子相比，在動(dòng)力學(xué)上被穩(wěn)定的粒子聚集的趨勢(shì)下降。在這種情況下，能量加入步驟導(dǎo)致易碎粒子的碎裂。與沒有采取步驟使有機(jī)化合物處于易碎形式的加工相比，通過確保預(yù)懸浮液粒子處于易碎狀態(tài)，有機(jī)化合物能更容易更快地被制成在所需尺寸范圍的粒子。
實(shí)施例11％伊曲康唑懸浮液的制備每100mL懸浮液包含伊曲康唑 1.0g(1.0％w/v)脫氧膽酸鈉鹽一水合物 0.1g(0.1％w/v)Poloxamer 188，NF 0.1g(0.1％w/v)丙三醇，USP2.2g(2.2％w/v)氫氧化鈉，NF(0.1N或1.0N) 用于pH調(diào)節(jié)鹽酸，NF(0.1N或1.0N) 用于pH調(diào)節(jié)注射用無菌水，USP QS目標(biāo)pH(范圍) 8.0(6到9)制備微量沉淀用的表面活性劑溶液(2升)將注射用無菌水注入適當(dāng)清潔的池中并攪拌。加入所需量的丙三醇，攪拌直至溶解。加入所需量的脫氧膽酸鈉鹽一水合物，攪拌直至溶解。如果必要，用最小量的氫氧化鈉和/或鹽酸將表面活性劑溶液的pH調(diào)節(jié)到8.0。用0.2μm濾器過濾該表面活性劑溶液。定量地將表面活性劑溶液轉(zhuǎn)移到為均化器提供的容器中。在加料漏斗中邊混合邊冷卻該表面活性劑溶液。
制備替換溶液制備4升替換溶液。將WFI注入適當(dāng)清潔的池中并攪拌。將稱重的Poloxamer 188(Spectrum Chemical)加到量過體積的水中。開始混合Poloxamer 188/水的混合物，直到Poloxamer 188完全溶解。加入所需量的丙三醇，攪拌直至溶解。一旦丙三醇已經(jīng)完全溶解，就加入所需量的脫氧膽酸鈉鹽一水合物，并攪拌直至溶解。如果必要，用最小量的氫氧化鈉和/或鹽酸將洗液的pH調(diào)節(jié)到8.0。用0.2μm膜濾器過濾該替換溶液。
制備藥物濃縮物對(duì)于2L的批料，將120.0mL的N-甲基-2-吡咯烷酮加到250mL燒杯中。稱量2.0g Poloxamer188。稱量20.0g伊曲康唑(Wyckoff)。將稱重的Poloxamer 188和N-甲基-2-吡咯烷酮轉(zhuǎn)移到250mL燒杯中。攪拌直至溶解，然后加入伊曲康唑。加熱攪拌直至溶解。將該藥物濃縮物冷卻至室溫，用0.2微米的濾器過濾。
微量沉淀將足夠的WFI加到表面活性劑溶液中，該表面活性劑已經(jīng)在供應(yīng)均化器的容器中，從而獲得想要的目標(biāo)濃縮物。當(dāng)該表面活性劑溶液被冷卻后，連續(xù)混合下開始將藥物濃縮物加入到該表面活性劑溶液中。
均化慢慢地增加均化器的壓力，直到操作壓力達(dá)到10,000psi。邊混合邊循環(huán)均化該懸浮液。對(duì)于在50Hz下的2,000mL的懸浮液，通過一次應(yīng)需要約54秒。均化后，采集20mL樣品用于粒子尺寸分析。冷卻該懸浮液。
洗滌替換然后將該懸浮液分裝到500mL離心瓶。離心，直到發(fā)現(xiàn)潔凈的沉淀分離物。測(cè)量上清液的體積，并用更早以前制備的新鮮的替換溶液來替換。定量地將每個(gè)離心瓶中的沉淀物轉(zhuǎn)移到適當(dāng)清潔的帶標(biāo)簽的容器中，用于再懸浮(合并樣品)。合并樣品的再懸浮在高剪切混合機(jī)中進(jìn)行，直到看不見明顯的塊狀物。采集20mL樣品用于粒子尺寸分析。
然后將該懸浮液分裝到500mL離心瓶。離心，直到發(fā)現(xiàn)潔凈的沉淀分離物。測(cè)量上清液的體積，并用更早以前制備的新鮮的替換溶液來替換。定量地將每個(gè)離心瓶中的沉淀物轉(zhuǎn)移到適當(dāng)清潔的帶標(biāo)簽的容器中，用于再懸浮(合并樣品)。合并樣品的再懸浮在高剪切混合機(jī)中進(jìn)行，直到看不見明顯的塊狀物。采集20mL樣品用于粒子尺寸分析。
第二次均化將上述懸浮液轉(zhuǎn)移到均化器的加料漏斗中，在混合下冷卻該懸浮液。慢慢地增加均化器的壓力，直到操作壓力達(dá)到10,000psi。邊監(jiān)控溶液的溫度邊進(jìn)行均化。均化后，冷卻懸浮液并采集三份30mL樣品用于粒子分析。將剩余的懸浮液收集到2升的瓶子中。
填充基于可接受的粒子尺寸確定測(cè)試(指50nm到2微米的容重直徑)，將30mL樣品采集到帶橡皮塞的50mL玻璃小瓶中。
實(shí)施例2伊曲康唑懸浮液的其它制劑伊曲康唑懸浮液與不同組合的表面活性劑的其它制劑也能用實(shí)施例1中描述的方法來制備。表1總結(jié)了各種伊曲康唑懸浮液的表面活性劑的組成。
表1各種1％伊曲康唑懸浮液組成的總結(jié)
*％按最終體積懸浮液的重量計(jì)算(w/v)實(shí)施例3市售伊曲康唑制劑(SPORANOX)和本發(fā)明懸浮液組合物之間的急性毒性比較。
市售伊曲康唑制劑(SPORANOX)的急性毒性與本發(fā)明的各種1％伊曲康唑制劑的急性毒性相比較，結(jié)果列于表1中。SPORANOX來自Janssen Pharmaceutical Products，LP.。它以被羥丙基-β-環(huán)糊精溶解的1％靜脈內(nèi)(I.V.)溶液的形式使用。結(jié)果列于表2中，對(duì)每種制劑指出了最大容受劑量(MTD)。
表2各種伊曲康唑制劑的急性毒性比較
a環(huán)糊精＝羥丙基-β-環(huán)糊精
b脾obs＝增大和/或蒼白c尾obs＝灰色到黑色和/或壞死LD50＝導(dǎo)致50％死亡率的致死量NOEL＝無影響濃度MTD＝最大耐受劑量實(shí)施例4SPORANOX與伊曲康唑懸浮液制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)的比較年輕成年雄性Sprague Dawley大鼠被靜脈(IV)處理，用20mg/kg的SPORANOX注射劑或制劑1通過尾部靜脈以1ml/min的速度單獨(dú)注射。給藥后，動(dòng)物被麻醉并且在不同的時(shí)間點(diǎn)(n＝3)采集回流血液。時(shí)間點(diǎn)如下0.03、0.25、0.5、1、2、4、6、8、24、48、96、144、192、288和360小時(shí)(SPORANOX注射劑只到192小時(shí))。血液和EDTA一起被收集到試管中，并以3200rpm的速度離心分離15分鐘，以分離血漿。在分析以前血漿在-70℃冷凍儲(chǔ)藏。母體伊曲康唑和代謝物羥基-伊曲康唑的濃度用高效液相色譜儀(HPLC)測(cè)定。伊曲康唑(ITC)和羥基-伊曲康唑(OH-ITC)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)(PK)參數(shù)用WinNonlinProfessional Version3.1(Pharsight Corp.，Mountain View，CA)的非分割方法獲得。
表3提供了由每個(gè)伊曲康唑制劑確定的血漿藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)的比較。不再在48小時(shí)對(duì)20mg/kg的SPORANOX注射劑和在96小時(shí)對(duì)制劑1的血漿伊曲康唑進(jìn)行檢測(cè)。最初在0.25小時(shí)對(duì)20mg/kg的SPORANOX注射劑和制劑1的血漿羥基-伊曲康唑進(jìn)行檢測(cè)。不再在96小時(shí)對(duì)20mg/kg的SPORANOX注射劑和在144小時(shí)對(duì)制劑1的羥基-伊曲康唑進(jìn)行檢測(cè)。
表3對(duì)Sporanox和懸浮液制劑在對(duì)大鼠IV給藥后的血漿藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)的比較
圖5比較了SPORANOX和伊曲康唑粒子懸浮液制劑1的藥物代謝動(dòng)力學(xué)(PK)。如上所示，因?yàn)樵搼腋∫褐苿┑亩拘员萐PORANOX要低，所以在這個(gè)同等毒性實(shí)驗(yàn)中它的給藥量更高。SPORANOX以20mg/kg來給藥，而制劑1以80mg/kg來給藥。SPORANOX的血漿濃度在20小時(shí)內(nèi)下降得較快。而本懸浮液制劑的伊曲康唑血漿濃度保持在高濃度約3-4倍長(zhǎng)的時(shí)間。伊曲康唑的血漿濃度在30分鐘時(shí)顯示初始最小值。這與血漿濃度的最小值相符，該最小值是由脾和肝的巨噬細(xì)胞對(duì)藥物納米晶體的螯合作用所引起的，因此臨時(shí)性地從循環(huán)中除去藥物。但是，當(dāng)巨噬細(xì)胞明顯地釋放藥物進(jìn)入循環(huán)，藥物濃度就很快反彈。而且，如圖5中羥基伊曲康唑代謝物的PK曲線所示，制劑1藥物被有效地代謝。與SPORANOX制劑的代謝物PK曲線相比較，懸浮液制劑代謝物的出現(xiàn)速度被滯后。但是，對(duì)于懸浮液的母體分子來說，代謝物在循環(huán)中持續(xù)的時(shí)間比SPORANOX制劑的代謝物更長(zhǎng)。當(dāng)AUC(在血液濃度與時(shí)間曲線下面的面積)被劑量歸一化之后，該懸浮液的生物利用度至少和SPORANOX一樣。
實(shí)施例5伊曲康唑的其它懸浮液制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究對(duì)不同的伊曲康唑制劑在各種不同劑量下也進(jìn)行了藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究。其結(jié)果總結(jié)于表4中。
表4各種伊曲康唑納米懸浮液制劑在對(duì)大鼠IV給藥后的血漿藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)
實(shí)施例6抗真菌功效研究用9.5×106或3×106cfu C.albicans/ml鹽水靜脈一次接種的正常大鼠和免疫抑制(在接種前和接種當(dāng)天每天施用潑尼松龍兩次)大鼠，用SPORANOX注射劑每天1次靜脈處理，連續(xù)處理10天，第一劑在接種后4到5小時(shí)施用。最初2天SPORANOX注射劑的劑量為5或20mg/kg，然后在余下8天為5或10mg/kg，這是由于以20mg/kg劑量給藥2天后產(chǎn)生的毒性。類似地，用1×106.5cfu C.albicans/ml的鹽水接種的免疫抑制大鼠，用制劑1每隔一天一次以20、40或80mg/kg靜脈處理，共10天，在接種當(dāng)天開始。在C.albicans接種后11天，殺死用SPORANOX注射劑和制劑1處理的大鼠，大鼠的腎被采集、稱重和培養(yǎng)，用于C.albicans菌落數(shù)和伊曲康唑和羥基-伊曲康唑濃度的確定。當(dāng)發(fā)現(xiàn)未處理的參照大鼠處于垂死狀態(tài)或動(dòng)物體重為20％時(shí)，采集其腎。另外，在每個(gè)研究過程中要定期測(cè)量體重。
用SPORANOX注射劑和制劑1處理的免疫抑制大鼠的比較結(jié)果列于表5和圖6中。每天以10-20mg/kg的量注射SPORANOX看來比每天以5mg/kg的量注射SPORANOX的效果要略好?；谀I菌落數(shù)，每隔一天以20mg/kg的劑量施用制劑1看來與每天以20mg/kg的劑量施用SPORANOX注射劑的效果一樣，可能比以5mg/kg(例如，推薦的臨床劑量)的量施用SPORANOX注射劑更有效果，反之，基于腎菌落數(shù)(即C.albicans沒有被檢測(cè))和升高的腎伊曲康唑濃度，較高劑量的制劑1看來更有效。
表5平均C.albicans菌落數(shù)和伊曲康唑和羥基-伊曲康唑的腎中濃度
圖6是用SPORANOX(頂面板)與用制劑(底面板)1處理的平均體重和C.albicans菌落數(shù)的數(shù)據(jù)比較。
在上述實(shí)施例中，本發(fā)明中的抗真菌劑的粒子懸浮液制劑顯示出比相同藥物的常規(guī)完全溶解的制劑毒性更低。因此，可以施用更多的藥物，而不會(huì)帶來不良反應(yīng)。因?yàn)樵谧⑸浜笏幬锪Ｗ硬粫?huì)立即溶解，所以它們被捕獲在肝和脾中的儲(chǔ)藏庫(kù)中。它們作為延長(zhǎng)釋放的避難所，允許不太頻繁地給藥。給藥的劑量越大允許靶器官中出現(xiàn)的藥物濃度就越高，在此處靶器官指腎(圖7)。在該器官中藥物濃度越高導(dǎo)致傳染性有機(jī)體的殺死率越高(圖8)。
實(shí)施例7其它三唑類抗真菌劑的預(yù)示性實(shí)施例本發(fā)明期望使用實(shí)施例1所述的方法制備亞微米或微米大小的三唑類抗真菌劑的1％懸浮液和實(shí)施例2所述的制劑，除了該抗真菌劑是除伊曲康唑以外的三唑類抗真菌劑?？捎玫娜蝾惪拐婢鷦┑睦影ǖ幌萦谕颠?、咪康唑、氟康唑、瑞扶康唑、伏立康唑、沙康唑、艾伯康唑、genaconazole、和泊沙康唑。
實(shí)施例8非三唑類抗真菌劑的預(yù)示性實(shí)施例本發(fā)明期望使用實(shí)施例1所述的方法制備亞微米或微米大小的非三唑類抗真菌劑的1％懸浮液和實(shí)施例2所述的制劑，除了該抗真菌劑是除伊曲康唑以外的兩性霉素B或氟胞嘧啶。
如上所述可以觀察到，可以實(shí)施許多變化和修改而不背離本發(fā)明的精神和范圍。應(yīng)理解，對(duì)于本文說明的具體儀器沒有任何限制，或應(yīng)推斷出對(duì)其沒有任何限制。當(dāng)然，旨在通過附加的權(quán)利要求書包括在該權(quán)利要求范圍內(nèi)的所有這些修改。
權(quán)利要求
1.一種包括亞微米到微米尺寸粒子的水懸浮液的組合物，所述粒子包含抗真菌劑，該抗真菌劑被至少一種選自如下類型的表面活性劑所包裹離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑、生物學(xué)來源表面活性劑、和氨基酸及它們的衍生物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于50μm。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于約7μm。
3.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于約2μm。
4.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于約400nm。
5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于100nm。
6.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗真菌劑是三唑類抗真菌劑。
7.如權(quán)利要求6所述的組合物，其中三唑類抗真菌劑選自伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、氟康唑、瑞扶康唑、伏立康唑、沙康唑、艾伯康唑、genaconazole、和泊沙康唑。
8.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗真菌劑是伊曲康唑。
9.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中離子型表面活性劑選自陰離子型表面活性劑和陽離子型表面活性劑。
10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中陰離子型表面活性劑選自月桂酸鉀、三乙醇胺硬脂酸脂、月桂基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、烷基聚氧乙烯硫酸酯、藻酸鈉、琥珀酸二辛酯磺酸鈉、丙三酯、羧甲基纖維素鈉、膽汁酸和它們的鹽、和羧甲基纖維素鈣。
11.如權(quán)利要求10所述的組合物，其中膽汁酸選自膽酸、脫氧膽酸、甘氨膽酸、?；悄懰岷透拭撗跄懰?。
12.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中陽離子型表面活性劑選自季銨化合物、苯扎氯銨、十六烷基三甲基溴化銨、殼聚糖和月桂基二甲基芐基氯化銨。
13.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中非離子型表面活性劑選自聚氧乙烯脂肪醇醚、山梨聚糖脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、山梨聚糖酯、甘油單硬脂酸酯、聚乙二醇、十六醇、十六醇十八醇混合物、十八醇、poloxomers、poloxamines、甲基纖維素、羥基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、非結(jié)晶纖維素、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮。
14.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中生物學(xué)來源表面活性劑選自清蛋白、肝素、酪蛋白和水蛭素。
15.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中氨基酸選自亮氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甲硫氨酸、和苯丙氨酸。
16.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中氨基酸衍生物是酰胺、酯、或多肽。
17.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑是膽汁鹽。
18.如權(quán)利要求17所述的組合物，其中膽汁鹽是脫氧膽酸鹽。
19.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑是聚烷氧醚。
20.如權(quán)利要求19所述的組合物，其中聚烷氧醚是Poloxamer188。
21.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑是羥乙基淀粉。
22.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑是聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯。
23.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑是清蛋白。
24.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中水介質(zhì)還包括pH調(diào)節(jié)劑。
25.如權(quán)利要求24所述的組合物，其中pH調(diào)節(jié)劑選自三羥甲基氨基甲烷緩沖液、磷酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、葡甲胺(N-甲基葡萄糖胺)、檸檬酸鹽、氫氧化鈉、鹽酸和氨基酸。
26.如權(quán)利要求25所述的組合物，其中氨基酸選自甘氨酸、精氨酸、賴氨酸、丙氨酸、和亮氨酸。
27.如權(quán)利要求1所述的組合物，還包括滲透壓調(diào)節(jié)劑。
28.如權(quán)利要求27所述的組合物，其中滲透壓調(diào)節(jié)劑選自丙三醇、單糖和糖醇。
29.如權(quán)利要求28所述的組合物，其中單糖是右旋糖。
30.如權(quán)利要求28所述的組合物，其中糖醇是甘露醇或山梨糖醇。
31.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗真菌劑的含量為從約0.01％至約50％w/v。
32.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗真菌劑的含量為從約0.05％至約30％w/v。
33.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中抗真菌劑的含量為從約0.1％至約20％w/v。
34.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑的含量為從約0.001％至約5％w/v。
35.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑的含量為從約0.005％至約5％w/v。
36.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中表面活性劑的含量為從約0.01％至約5％w/v。
37.如權(quán)利要求1所述的組合物通過如下途徑給藥，該途徑選自腸道外、口服、面頰、牙周、直腸、鼻、肺和局部。
38.如權(quán)利要求1所述的組合物通過腸道外給藥。
39.如權(quán)利要求38所述的組合物，其中腸道外給藥選自靜脈內(nèi)注射、動(dòng)脈內(nèi)注射、鞘內(nèi)注射、腹膜內(nèi)注射、眼內(nèi)注射、關(guān)節(jié)內(nèi)注射、肌肉注射和皮下注射。
40.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中水介質(zhì)被除去以得到干粒子。
41.如權(quán)利要求40所述的組合物，其中除去水介質(zhì)的方法選自蒸發(fā)和冷凍干燥。
42.如權(quán)利要求40所述的組合物，其中除去水介質(zhì)的方法是冷凍干燥。
43.如權(quán)利要求40所述的組合物，其中干粒子被制成可接受的藥劑形式。
44.如權(quán)利要求43所述的組合物，其中藥劑形式選自腸溶液、片劑、膠囊、懸浮液、乳膏、洗劑、乳劑、肺制劑、局部制劑、控制或持續(xù)釋放制劑、和組織特異性靶向遞送制劑。
45.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中該組合物被冷凍。
46.一種包括亞微米到微米尺寸的伊曲康唑粒子的水懸浮液的組合物，該粒子被至少一種表面活性劑和一種滲透壓調(diào)節(jié)劑所包裹，其中由激光衍射法測(cè)得納米粒子的容重平均粒子尺寸小于50μm，且其中伊曲康唑的含量為約0.01％至約50％w/v，表面活性劑的含量為約0.001％至約5％。
47.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中表面活性劑選自膽汁鹽、聚烷氧醚、羥乙基淀粉、聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯、和清蛋白。
48.如權(quán)利要求47所述的組合物，其中膽汁鹽是脫氧膽酸鹽。
49.如權(quán)利要求47所述的組合物，其中聚烷氧醚是Poloxamer188。
50.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中表面活性劑是羥乙基淀粉。
51.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中表面活性劑是聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯。
52.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中表面活性劑是清蛋白。
53.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中滲透壓調(diào)節(jié)劑是丙三醇。
54.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于7μm。
55.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于2μm。
56.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于400nm。
57.如權(quán)利要求46所述的組合物，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于100nm。
58.一種包含亞微米到微米尺寸伊曲康唑粒子的水懸浮液的組合物，該粒子被至少一種表面活性劑和一種滲透壓調(diào)節(jié)劑所包裹，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于2μm，該表面活性劑選自膽汁鹽、聚烷氧醚、羥乙基淀粉、聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯、和清蛋白，伊曲康唑的含量為約0.01％至約50％w/v，表面活性劑的含量為約0.001％至約5％。
59.如權(quán)利要求58所述的組合物，其中滲透壓調(diào)節(jié)劑是丙三醇。
60.一種包含亞微米到微米尺寸伊曲康唑粒子的水懸浮液的組合物，該粒子被包括膽汁鹽和聚烷氧醚的表面活性劑、和以丙三醇為滲透壓調(diào)節(jié)劑的混合物所包裹，其中由激光衍射法測(cè)得粒子的容重平均粒子尺寸小于約2μm，且其中伊曲康唑的含量為約0.01％至約50％w/v，膽汁鹽的含量為約0.001％至約5％w/v，聚烷氧醚的含量為約0.001％至約5％w/v，丙三醇的含量為約2.2％w/v。
61.如權(quán)利要求60所述的組合物，其中膽汁鹽是脫氧膽酸鹽。
62.如權(quán)利要求60所述的組合物，其中聚烷氧醚是Poloxamer188。
63.一種包含亞微米到微米尺寸伊曲康唑粒子的水懸浮液組合物，該粒子被包括膽汁鹽和聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯的表面活性劑、和以丙三醇為滲透壓調(diào)節(jié)劑的混合物所包裹，其中由激光衍射測(cè)得粒子的容重平均尺寸小于2μm，且其中伊曲康唑的含量為約0.01％至約50％w/v，膽汁鹽的含量為約0.001％至約5％w/v，聚乙烯-660-羥基硬脂酸酯的含量為約0.001％至約5％w/v，丙三醇的含量為約2.2％w/v。
64.一種制備抗真菌劑粒子的組合物的方法，包括如下步驟(i)在與水混溶的第一溶劑中溶解抗真菌劑得到一種溶液，該第一溶劑選自N-甲基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、二甲亞砜、二甲基乙酰胺、乳酸、醋酸和其它液體羧酸、甲醇、乙醇、異丙醇、3-戊醇、正丙醇、甘油、丁二醇、乙二醇、丙二醇、單?；投；膯嗡岣视王?、二甲基異山梨醇、丙酮、二甲基甲酰胺、1，4-二惡烷、聚乙二醇、聚乙二醇酯、聚乙二醇山梨聚糖、聚乙二醇單烷基醚、聚丙二醇、聚藻酸亞丙酯、PPG-10丁二醇、PPG-10甲基葡萄糖醚、PPG-20甲基葡萄糖醚、PPG-15硬脂醚、丙二醇二辛酸酯、丙二醇二癸酸酯、丙二醇月桂酸酯；(ii)把上述溶液和第二水性溶劑混合，得到預(yù)懸浮液；和(iii)向預(yù)懸浮液中加入能量以形成如下粒子，其平均有效粒子尺寸小于50μm；其中抗真菌劑在第一溶劑中的溶解度比在第二溶劑中的溶解度大，并且該第二溶劑包括一種或多種表面活性劑，其選自非離子型表面活性劑、離子型表面活性劑、生物學(xué)來源表面活性劑、和氨基酸及它們的衍生物。
65.如權(quán)利要求64所述的組合物，其中平均有效粒子尺寸小于約7μm。
66.如權(quán)利要求64所述的組合物，其中平均有效粒子尺寸小于約2μm。
67.如權(quán)利要求64所述的組合物，其中平均有效粒子尺寸小于約400nm。
68.如權(quán)利要求64所述的組合物，其中平均有效粒子尺寸小于約100nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及亞微米到微米尺寸的抗真菌劑粒子組合物。更具體地，本發(fā)明涉及用于醫(yī)藥用途的抗真菌劑水懸浮液。
文檔編號(hào)A61K31/495GK1703201SQ200380101226
公開日2005年11月30日 申請(qǐng)日期2003年10月2日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月11日
發(fā)明者約瑟夫·鐘·塔克·翁, 詹姆斯·E·基普, 馬克·J·多蒂, 克里斯蒂娜·L·里貝克, 帕夫洛斯·帕帕佐普洛斯 申請(qǐng)人:巴克斯特國(guó)際公司