專利名稱：氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及安全性高、作為醫(yī)藥品有用的新穎的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽。
背景技術(shù)：
谷氨酸在哺乳類的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中作為神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮作用(Mayer M.L.和Westbrook G.L.，Prog.Neurobiol.，28(1987)197-276)。由最近的研究明確了谷氨酸在高級(jí)腦神經(jīng)機(jī)能中的重要性。谷氨酸由神經(jīng)末梢釋放，通過存在于突觸后膜或神經(jīng)末梢的谷氨酸受體，調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞活性或神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。谷氨酸受體從各種藥理學(xué)和生理學(xué)上的研究來看，目前大體分為兩種類型。其中一種為離子通道內(nèi)藏型受體，另一種為代謝調(diào)節(jié)型(促代謝的，metabotropic)受體(Hollmann M.和Heinemann S.，Annu.Rev.Neurosci.，17(1994)31-108)。
由分子生物學(xué)的研究報(bào)道，促代謝的谷氨酸受體(以下有時(shí)簡(jiǎn)稱為mGluR)目前至少存在mGluR1至mGluR8的不同的8種亞型。mGluR分為通過G蛋白質(zhì)與磷脂酶偶聯(lián)、產(chǎn)生肌醇三磷酸(IP3)并促進(jìn)鈣離子向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移的受體(組ImGluR1以及mGluR5)，與Gi蛋白質(zhì)偶聯(lián)、抑制cAMP產(chǎn)生的受體(組IImGluR2、mGluR3，組IIImGluR4、mGluR6、mGluR7及mGluR8)。這些受體分別顯示不同的腦內(nèi)分布，例如，mGluR6不存在于腦內(nèi)而僅存在于視網(wǎng)膜上等，由此推斷各種受體擔(dān)當(dāng)著不同的生理作用(Nakanishi S.，Neuron 13(1995)1031-037)。
目前，報(bào)道了與離子通道內(nèi)藏型谷氨酸受體相比較、對(duì)于mGluR有選擇性的化合物(Hayashi Y.等.，Br.J.Pharmacol.107(1992)539-543；Hayashi Y.等.，Neurosci.14(1995)3370-3377)；通過使用這些化合物的研究，對(duì)于mGluR與各種病癥之間的相關(guān)性作了如下①至⑥的報(bào)道。
①通過給予作為mGluR激動(dòng)劑的(1S，3R)-1-氨基環(huán)戊烷-1，3-二羧酸(以下稱為(1S，3R)-ACPD)，癲癇被誘發(fā)(Tizzano J.P.等.，Neurosci.Lett.，162(1993)12-16；McDonald J.W.等.，J.Neurosci.，13(1993)4445-4455)。另外，報(bào)道了作為mGluR1的拮抗劑和mGluR2的激動(dòng)劑的(S)-4-羧基-3-羥基苯基甘氨酸(以下稱為(S)-CHPG)在各種癲癇模型中的有效性(Dalby，N.O.和Thomsen，C.J.Pharmacol.Exp.Ther.，276(1996)516-522)。
②由電生理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明痛覺剌激向脊髓后角神經(jīng)細(xì)胞的傳導(dǎo)與mGluR有關(guān)(Young，M.R.等.，Neuropharmacology，33(1994)141-144；ibid，34(1995)1033-1041)。據(jù)報(bào)道，在大鼠的實(shí)驗(yàn)中，(S)-CHPG具有延緩熱及機(jī)械性痛覺剌激的回避反應(yīng)的作用(Young，M.R.等.，Br.J.Pharmacol.，114(1995)316P)。
③據(jù)報(bào)道，對(duì)大鼠和小鼠的腦實(shí)質(zhì)微量給藥或全身給藥作為(1S，3R)-ACPD和作為mGluR激動(dòng)劑的(RS)-3，5-二羥基苯基甘氨酸(以下稱為3，5-DHPG)，伴著痙攣引起了神經(jīng)細(xì)胞的死亡(Lipartit，M.等.，Life Sci.，52(1993)PL85-90；McDonald，J.W.等.，J.Neurosci.，13(1993)4445-4455；Tizzano，J.P.，等.，Neuropharmacology，34(1995)1063-3067)。推斷是因?yàn)閙GluR1及mGluR5被活化的結(jié)果。
④眾所周知，苯并二氮的長(zhǎng)期給藥可形成依賴性。有報(bào)道在苯并二氮連續(xù)給藥7天后的第2天和第3天，(1S，3R)-ACPD通過mGluR的肌醇/磷脂的代謝周轉(zhuǎn)上升，這暗示了苯并二氮的戒斷綜合征的出現(xiàn)與mGluR有關(guān)(Mortensen，M.等.，J.Pharmacol.Exp.Ther.，274(1995)155-163)。
⑤另?yè)?jù)報(bào)道，在腦室內(nèi)給予作為mGluR組I的拮抗劑的1-氨基茚滿-1，5-二羧酸，可抑制N-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶誘發(fā)的黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)細(xì)胞的死亡(Aguirre，J.A.等.，Neuroreport.12(2001)2615-2617)。
⑥另?yè)?jù)報(bào)道，mGluR1的拮抗劑通過三叉神經(jīng)節(jié)的電刺激可抑制蛋白向硬膜血管外漏出(WO 01/32632)。
即，以上報(bào)道顯示了作用于mGluR1的化合物對(duì)癲癇、疼痛、神經(jīng)細(xì)胞死亡的抑制、苯并二氮的戒斷綜合征和偏頭痛有效。
又，在大鼠腦梗塞模型中，確認(rèn)了mGluR1拮抗劑的有效性，所以，mGluR1拮抗劑可作為腦梗塞的預(yù)防·治療劑使用(專利文獻(xiàn)1)。
又，mGluR1拮抗劑在神經(jīng)因性疼痛模型中具有改善痛覺閾值的下降的作用，因此可作為帶狀皰疹后的神經(jīng)痛、伴隨著糖尿病性神經(jīng)障礙的疼痛、癌癥疼痛、術(shù)后慢性疼痛等神經(jīng)因性疼痛的治療劑使用(專利文獻(xiàn)2)。
作為具有mGluR1拮抗作用的化合物，在上述專利文獻(xiàn)1、2、3及專利文獻(xiàn)4中揭示了噻唑并苯并咪唑衍生物。
但是，上述專利文獻(xiàn)1、3及4中揭示的噻唑并苯并咪唑衍生物是以非口服給藥為主要給藥形式、腦梗塞為主要適應(yīng)癥的化合物。
又，專利文獻(xiàn)2中報(bào)道了噻唑并苯并咪唑環(huán)的苯環(huán)部分取代了有取代或無取代的氨基的噻唑并苯并咪唑衍生物經(jīng)口服給藥具有神經(jīng)因性疼痛的治療效果。
PCT國(guó)際公開WO 99/44639[專利文獻(xiàn)2]PCT國(guó)際公開WO 01/08705[專利文獻(xiàn)3]PCT國(guó)際公開WO 00/59913[專利文獻(xiàn)4]特開2000-351782號(hào)公報(bào)發(fā)明的揭示本發(fā)明的目的是提供作為具有優(yōu)異口服活性的促代謝的谷氨酸受體拮抗劑，在臨床上有用的新穎的噻唑并苯并咪唑衍生物及其鹽。
上述專利文獻(xiàn)2的化合物雖然具有口服活性，但本會(huì)社的研究確認(rèn)其具有基因突變誘發(fā)性，所以具有致癌作用。該基因突變誘發(fā)性通過具有苯胺性氨基的結(jié)構(gòu)上的特征而顯現(xiàn)，具有苯胺性氨基的化合物是具有口服活性的化合物，但存在不能夠作為醫(yī)藥品用于臨床的缺點(diǎn)。
本發(fā)明者對(duì)上述課題進(jìn)行認(rèn)真研究后發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的被氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物作為促代謝的谷氨酸受體拮抗劑具有較強(qiáng)的口服活性，且沒有誘變性，是臨床上有用的化合物，從而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明化合物是在噻唑并苯并咪唑環(huán)的苯環(huán)部分具有作為取代基的含氧飽和雜環(huán)或含硫飽和雜環(huán)等或被這些飽和雜環(huán)取代的烷基取代的氨基甲基這點(diǎn)上，上述專利文獻(xiàn)1及3未具體揭示的化合物。
即，本發(fā)明涉及以下通式(I)表示的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽，以及以它們?yōu)橛行С煞值尼t(yī)藥品。
具體涉及以下通式(I)表示的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽。
式中符號(hào)的含義如下所述。
R1可取代的含氧飽和雜環(huán)-、可取代的含硫飽和雜環(huán)-、可取代的環(huán)烷基、-O-R6或-S-R7，Alk1低級(jí)亞烷基，m0或1，Alk2可被氧代基取代的低級(jí)亞烷基，n0或1，X鍵、O、S或NR5，R3H、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、可取代的環(huán)烷基、氰基或飽和雜環(huán)-，R2、R4、R5、R6及R7可相同或不同，表示H或低級(jí)烷基，但X為鍵且n為1時(shí)，R3不表示低級(jí)烷基或鹵代低級(jí)烷基；此外，m為1、R1為OH或甲氧基、Alk1為C1-3亞烷基，且1)X為鍵、n為1、且R3為H時(shí)，或2)X為鍵、n為0、且R3為環(huán)己基時(shí)，R4表示甲基以外的基團(tuán)。
通式(I)中，較好的是R1為可取代的含氧飽和雜環(huán)-、R3為低級(jí)烷基或飽和雜環(huán)-的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽。
更好的是N-甲基-N-新戊基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺、6-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺、N-新戊基-6-({[(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺或其鹽。
本發(fā)明還涉及以上述通式(I)表示的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽為有效成分的醫(yī)藥品，較好的是涉及mGluR1受體拮抗劑。
更好的是涉及具備含有上述氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽的mGluR1受體結(jié)合抑制量的mGluR1受體拮抗作用的醫(yī)藥組合物。
更好的是涉及以上述氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽為有效成分的與mGluR1受體的活化有關(guān)的疾病的治療劑，具體涉及神經(jīng)因性疼痛的治療劑。
實(shí)施發(fā)明的最佳方式對(duì)本發(fā)明化合物的具體說明如下。
本說明書的通式的定義中，如無特別限定，“低級(jí)”一詞表示碳原子數(shù)1～6個(gè)的直鏈或支鏈狀的碳鏈。
“低級(jí)烷基”表示C1-6烷基，較好為甲基、乙基、丙基、異丙基、叔丁基等直鏈或支鏈狀的C1-4烷基，更好的是C1-3烷基。
“低級(jí)亞烷基”表示C1-6亞烷基，較好為亞甲基、亞乙基、甲基亞甲基、1，3-亞丙基、1，2-亞丙基、乙基亞乙基、四亞丁基等直鏈或支鏈狀的C1-4亞烷基，更好的是C1-3亞烷基。
“可被氧代基取代的低級(jí)亞烷基”表示用氧代基取代了上述低級(jí)亞烷基中的直鏈或支鏈狀的C2-6亞烷基的任意的碳原子的基團(tuán)，較好為-CH2-C(O)-、-C(O)-CH2-、-CH2-C(O)-CH2-、-(CH2)2-C(O)-、-C(O)-(CH2)2-。
“低級(jí)鏈烯基”表示C2-6鏈烯基，較好為乙烯基、丙烯基、丁烯基等直鏈或支鏈狀的C2-4鏈烯基，更好為C2-3鏈烯基。
“低級(jí)炔基”表示C2-6炔基，較好為乙炔基、丙炔基、丁炔基等直鏈或支鏈狀的C2-4炔基，更好為C2-3炔基。
“鹵素”表示鹵原子，例如，氟、氯、溴、碘原子。
“鹵代低級(jí)烷基”表示前述低級(jí)烷基的任意的1個(gè)以上的氫原子被上述鹵原子取代的基團(tuán)，較好為三氟甲基。
“環(huán)烷基”表示3～8元環(huán)烷基，較好為環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。
“飽和雜環(huán)”表示含有1～4個(gè)選自氮原子、氧原子或硫原子的雜原子的3～8元飽和雜環(huán)，可例舉吡咯烷、哌啶、哌嗪、高哌嗪(homopiperazine)、咪唑烷、嗎啉、硫代嗎啉、環(huán)氧乙烷、氧雜環(huán)丁烷、硫雜環(huán)丁烷、四氫呋喃、四氫吡喃、[1，3]二氧戊環(huán)、[1，4]二噁烷、四氫噻吩、[1，4]二噻烷、六氫氮雜、六氫-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪等。
較好的是5元含氧飽和雜環(huán)及含硫飽和雜環(huán)。
“含氧飽和雜環(huán)”表示上述飽和雜環(huán)中作為環(huán)中雜原子必須含有氧原子的飽和雜環(huán)。即，除了1～3個(gè)氧原子，還可含有1～2個(gè)氮原子或硫原子的3～8元飽和雜環(huán)。較好的是4～6元含氧飽和雜環(huán)，更好的是氧雜環(huán)丁烷、四氫呋喃、1，3-二氧戊環(huán)、四氫吡喃、嗎啉。
“含硫飽和雜環(huán)”表示上述飽和雜環(huán)中作為環(huán)中雜原子必須含有硫原子的飽和雜環(huán)。即，除了1～3個(gè)硫原子之外，還可含有1～2個(gè)氮原子或氧原子的3～8元飽和雜環(huán)。較好的是4～6元飽和雜環(huán)，更好的是硫雜環(huán)丁烷、1，3-二硫雜環(huán)戊烷、四氫噻吩、噻唑烷、硫代嗎啉。
可取代的含氧飽和雜環(huán)、可取代的含硫飽和雜環(huán)、可取代的環(huán)烷基的環(huán)上的任意的碳原子或雜原子上可帶有1～3個(gè)取代基。
取代基表示被取代的基團(tuán)的領(lǐng)域中慣用的一般的取代基，最好的取代基可例舉鹵原子、氰基、鹵代低級(jí)烷基、低級(jí)烷基、OH、低級(jí)烷基-O-、氧代基、低級(jí)烷基-C(O)-、羧基、低級(jí)烷基-O-C(O)-、低級(jí)烷基-O-低級(jí)烷基-、硝基、可被1或2個(gè)低級(jí)烷基取代的氨基等。
較好的是低級(jí)烷基、低級(jí)烷基-O-。
本發(fā)明化合物因不同種類的基團(tuán)而存在光學(xué)異構(gòu)體(光學(xué)活性體、非對(duì)映異構(gòu)體等)。本發(fā)明化合物還有具有酰胺鍵和雙鍵的化合物，也存在互變異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體。本發(fā)明包含這些異構(gòu)體的分離體或它們的混合物。
本發(fā)明化合物可與酸或堿形成鹽。作為與酸形成的鹽，可例舉與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機(jī)酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、谷氨酸等有機(jī)酸形成的酸加成鹽。
作為與堿形成的鹽，可例舉與鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等無機(jī)堿，甲胺、乙胺、葡甲胺、乙醇胺等有機(jī)堿或賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸等堿性氨基酸形成的鹽和銨鹽。此外，本發(fā)明化合物可形成水合物、與乙醇等形成溶劑合物或多晶形物質(zhì)。
此外，本發(fā)明化合物還包含藥理學(xué)允許的前體藥物。作為形成本發(fā)明化合物的藥理學(xué)允許的前體藥物的基團(tuán)，可例舉Prog.Med.52157-2161(1985)記載的基團(tuán)，或廣川書店1990年刊《醫(yī)藥品的開發(fā)》第7卷，分子設(shè)計(jì)163頁(yè)～198頁(yè)記載的基團(tuán)。具體包括利用水解、溶劑分解或在生理學(xué)條件下可轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的伯胺或仲胺、OH、COOH等的基團(tuán)，以O(shè)H基的前體藥物為例，可例舉-OC(O)-可被取代的低級(jí)亞烷基-C(O)OR(R為H或低級(jí)烷基，下同)、-OC(O)-可被取代的低級(jí)亞鏈烯基-C(O)OR、-OC(O)-可被取代的芳基、-OC(O)-低級(jí)亞烷基-O-低級(jí)亞烷基-C(O)OR、-OC(O)-C(O)R、-OC(O)-可被取代的低級(jí)烷基、-OSO2-可被取代的低級(jí)亞烷基-C(O)OR、-O-酞酮基、5-甲基-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-2-酮-4-基-甲氧基等。
本發(fā)明化合物還可與鎮(zhèn)痛劑、抗病毒劑或糖尿病治療劑等并用。
作為鎮(zhèn)痛劑，可例舉吡唑酮類或非吡唑酮類等非甾體類消炎鎮(zhèn)痛劑(NSAIDnon-steroid anti-inflammatory drugs)、中樞性鎮(zhèn)痛劑(鎮(zhèn)痛新等)、鴉片類鎮(zhèn)痛劑(嗎啡等)。
作為糖尿病治療劑可例舉磺酰脲類藥物(甲苯磺丁脲等)、α-葡糖苷酶抑制劑(阿卡波糖等)、噻唑烷二酮類藥物(曲格列酮等)、雙胍類藥物(二甲雙胍等)。
抗病毒劑可例舉無環(huán)鳥苷、伐昔洛韋、泛昔洛韋等。
其它可并用的藥物制劑如下所述。
卡馬西平等抗痙攣劑、丙咪嗪等抗抑郁藥、美西律等抗心律失常藥、利多卡因等局麻藥、黃嘌呤制劑(咖啡因等)、麥角胺類藥物、鈣拮抗劑(鹽酸洛美利嗪等)。
制備方法本說明書中，一般的制法、參考例、實(shí)施例及表中的符號(hào)含義如下所述。
DMF二甲基甲酰胺，DMSO二甲亞砜，THF四氫呋喃。
制法1還原胺化 式中，Ra表示OH或低級(jí)烷基-O-，或N(R4)(Alk2)n-X-R3。除此以外的符號(hào)含義如前所述下同。
由(II)至(I-a)是通常的還原胺化反應(yīng)。即，在二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、THF、甲醇、乙醇等溶劑中，根據(jù)需要在乙酸、鹽酸等酸催化劑，或四異丙醇鈦等路易斯酸存在下，用三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、硼氫化鈉等還原劑使醛(II)和對(duì)應(yīng)的胺反應(yīng)，獲得所希望的(I-a)。在甲苯、苯等惰性溶劑中，根據(jù)需要在分子篩等脫水劑或Dean-Stark脫水裝置等脫水反應(yīng)條件下，在10℃至150℃使(II)和對(duì)應(yīng)的胺反應(yīng)，形成亞胺，然后在甲醇、乙醇等溶劑中，用硼氫化鈉等還原劑對(duì)其進(jìn)行處理也可合成(I-a)。此外，用通常的接觸還原條件，具體包括在氫氣氛中、使用鈀等金屬催化劑替代上述還原劑也可合成(I-a)。
制法2烷基化
式中，A表示鹵原子或磺酰氧基等離去基。
由(III)至(I-a)為通常的N-烷基化反應(yīng)。即，在DMF、乙腈、氯仿、THF等惰性溶劑中，在碳酸鉀、碳酸氫鈉、三乙胺、乙基二異丙胺等堿存在下，在冰冷卻下至200℃使(III)和對(duì)應(yīng)的胺進(jìn)行反應(yīng)，獲得所希望的(I-a)。該反應(yīng)也可使用過量的對(duì)應(yīng)的胺。
制法3酰胺化 式中，B表示OH或N(R2′)(Alk1)m-R1，R2′表示H、可取代的低級(jí)烷基或氨基的一般的保護(hù)基。
由(IV)至(I-b)是通常的酰胺化反應(yīng)。即，在DMF、THF、1，2-二氯乙烷、氯仿等惰性溶劑中，利用二環(huán)己基碳二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺、二苯基磷?；B氮、1，1′-羰基-1H-咪唑、1-羥基苯并三唑等縮合劑使羧酸(IV)活化，然后使該活性體和對(duì)應(yīng)的胺反應(yīng)，獲得所希望的(I-b)。羧酸的活化也可采用利用亞硫酰二氯或草酰氯等的酰氯化物法，混合酸酐法、利用氯氧化磷等的活性磷酸酯法等。
制法4N-烷基化 由(I-c)至(I)是通常的N-烷基化反應(yīng)。即，在DMF、DMSO、THF、丙酮、乙腈等惰性溶劑中，使用碳酸鉀、碳酸銫、氫化鈉、氫氧化鉀等堿，在冰冷卻下至加溫條件下，與對(duì)應(yīng)的鹵烷、磺酸烷基酯等烷基化劑反應(yīng)，獲得所希望的(I)。
羥基、氨基及酯基等一般的保護(hù)基等，在THEODORA W.GREENE和PETERG.M.WUTS著的PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS中有詳細(xì)記載，本說明書引用了該文獻(xiàn)所揭示的內(nèi)容。
上述制備方法廣泛適用于對(duì)式中的取代基無特別限定、具有與本發(fā)明化合物同樣的取代基的情況或反應(yīng)物和反應(yīng)試劑相反的情況。
以上制得的本發(fā)明化合物可以游離體使用，也可以其鹽的形式被分離精制。
分離、精制可采用萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶、過濾、重結(jié)晶、各種色譜法等通常的化學(xué)操作進(jìn)行。
各種異構(gòu)體可通過選擇適當(dāng)?shù)脑匣衔锘蚶卯悩?gòu)體間的物理性質(zhì)差異分離。例如，光學(xué)異構(gòu)體可通過選擇適當(dāng)?shù)脑希蚶猛庀衔锏南鸱址?例如，與一般的具有光學(xué)活性的堿形成非對(duì)映異構(gòu)體鹽的光學(xué)拆分法)獲得立體化學(xué)純的異構(gòu)體。
含有1種或2種以上的本發(fā)明化合物或其鹽為有效成分的制劑，采用通常制劑化所用的載體、賦形劑及其它添加劑制得。
制劑用載體和賦形劑可以是固體或液體中的任一種，可例舉乳糖、硬脂酸鎂、淀粉、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、橄欖油、蓖麻油、可可油、乙二醇等及其它常用材料。
給藥時(shí)可采用片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、溶液劑等經(jīng)口給藥，或靜注、肌注等注射劑，栓劑，經(jīng)皮等非經(jīng)口給藥中的任一種方式。給藥量可考慮癥狀、給藥對(duì)象的年齡和性別等根據(jù)不同情況適當(dāng)決定，通常1個(gè)成人1天為1～1000mg，較好為50～200mg，1天1次或分?jǐn)?shù)次經(jīng)口給藥，或1個(gè)成人1天1～500mg，1天1次或分?jǐn)?shù)次靜脈注射給藥，或者1天1小時(shí)～24小時(shí)靜脈內(nèi)持續(xù)給藥。當(dāng)然如前所述，給藥量可根據(jù)不同條件改變，也有以少于上述給藥量范圍的量就足夠的情況。
本發(fā)明的口服固體組合物采用片劑、散劑和顆粒劑等劑型。該固體組合物中，1種或1種以上的活性物質(zhì)與至少1種惰性稀釋劑，例如乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硅鋁酸鎂混合。根據(jù)常規(guī)方法，組合物中除了惰性稀釋劑以外，還可含有硬脂酸鎂等潤(rùn)滑劑，淀粉、纖維素乙醇酸鈣等崩解劑，乳糖等穩(wěn)定劑，谷氨酸或天冬氨酸等助溶劑。片劑或丸劑根據(jù)需要可用蔗糖、明膠、羥丙纖維素、羥丙甲基纖維素鄰苯二甲酸酯等糖衣或胃溶性或腸溶性物質(zhì)的薄膜包衣。
口服液體組合物含有藥物制劑中允許的乳濁劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等，包含常用的惰性稀釋劑，例如精制水和乙醇。該組合物除了惰性稀釋劑以外還可含有濕潤(rùn)劑、懸浮劑等助劑，甜味劑，矯味劑，芳香劑和防腐劑。
非口服的注射劑含有無菌的水性或非水性溶液劑、懸浮劑、乳濁劑。水性溶液劑、懸浮劑例如含有注射用蒸餾水及生理食鹽水。非水性溶液劑、懸浮劑例如有丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油、乙醇等醇類、多乙氧基醚等。該組合物還可含有防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑(例如，乳糖)、助溶劑(例如，谷氨酸、天冬氨酸)等助劑。它們例如可通過除菌濾器過濾、配合殺菌劑或照射而滅菌。此外，也可制造無菌的固體組合物，在使用前以無菌水或無菌的注射用溶劑溶解后使用。
實(shí)施例以下，基于實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說明，但本發(fā)明并不僅限于這些實(shí)施例。此外，實(shí)施例所用的原料化合物的制備方法作為參考例進(jìn)行說明。(以下所用的略號(hào)與制備方法所述下同)。
1H-NMR1H-核磁共振光譜(以DMSO-d6或氘化氯仿(以下稱為CDCl3)為測(cè)定溶劑，以四甲基硅烷為內(nèi)標(biāo)，以300MHz或400MHz進(jìn)行測(cè)定，用ppm表示化學(xué)位移。brbroad，寬峰，ssinglet，單峰，ddoublet，二重峰，ttriplet，三重峰，qquartet，四重峰，mmultiplet，多重峰)。
MS質(zhì)譜(FAB+陽(yáng)離子快速原子轟擊質(zhì)譜。M分子量)Ex實(shí)施例編號(hào)，Salt鹽，Data物理化學(xué)性狀(質(zhì)譜)。
精制時(shí)所用的柱色譜采用硅膠作為填充劑。
參考例16-羥基甲基-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺冰浴中，在6-羥基甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸(2.48g)的DMF(25ml)懸浮液中，加入1-羥基苯并三唑(2.03g)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(5.75g)。將反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌30分鐘后，撤走冰浴再攪拌2小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入甲基新戊基胺鹽酸鹽(2.75g)和三乙胺(2.8ml)，在相同溫度下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入1M的氫氧化鈉水溶液(50ml)中。濾取不溶物，用水(150ml)洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得淡黃色標(biāo)題化合物(1.98g)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.96(s，9H)，3.41(br，2H)，3.46(br，3H)，4.67(d.2H)，5.33(t，1H)，7.31(d，2H)，7.62(d，2H)，8.10(s，1H)，9.09(s，1H)。
參考例26-甲?；?N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在參考例1的化合物(3.31g)的DMSO(50ml)溶液中加入三乙胺(5.58ml)及三氧化硫·吡啶混合物(7.96g)。對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行6小時(shí)的攪拌，其間伴隨反應(yīng)混合物的放熱。攪拌結(jié)束后，小心地將反應(yīng)混合物注入碳酸氫鈉水溶液中。濾取不溶物，用水(500ml)洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得淡象牙色的標(biāo)題化合物(3.21g)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，3.42(br，2H)，3.48(br，3H)，7.85(d，1H)，7.95(dd，1H)，8.69(d，1H)，9.22(s，1H)，10.09(s，1H)。
參考例36-氯甲基-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺鹽酸鹽在參考例1的化合物(994mg)的亞硫酰二氯(5ml)的溶液中加入DMF(1滴)。對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行30分鐘的攪拌，其間伴隨反應(yīng)化合物的放熱和發(fā)泡。攪拌結(jié)束后，用甲苯(40ml)稀釋反應(yīng)混合物。濾取析出物，用甲苯洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得標(biāo)題化合物(1105mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，3.42(br，2H)，3.48(br，3H)，4.98(s，2H)，7.51(d，1H)，7.74(d，1H)，8.27(s，1H)，9.20(s，1H)。
參考例46-甲?；邕虿3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸乙酯在6-羥基甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸乙酯(19.34g)的DMSO(300ml)溶液中加入三乙胺(39.02ml)及三氧化硫·吡啶混合物(55.71g)。對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行2小時(shí)的攪拌，其間伴隨反應(yīng)混合物的放熱。攪拌結(jié)束后，小心地將反應(yīng)混合物注入飽和碳酸氫鈉水溶液中。濾取不溶物，用水洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得淡象牙色的標(biāo)題化合物(19.10g)。
1H-NMR(DMS0-d6)1.36(t，3H)，4.39(q，2H)，7.87(d，1H)，7.97(dd，1H)，8.76(d，1H)，9.51(s，1H)，10.08(s，1H)。
參考例56-({[((R)-四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸乙酯在參考例4的化合物(5.49g)的二氯乙烷(200ml)溶液中加入(R)-四氫糠胺(3.1ml)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(8.49g)，室溫下攪拌一晝夜。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用氯仿萃取。收集有機(jī)層，用飽和碳酸氫鈉水溶液、水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液先用乙酸乙酯，再用乙酸乙酯∶甲醇＝95∶5，然后用氯仿∶甲醇＝10∶1)精制，獲得標(biāo)題化合物(6.10g)。
1H-NMR(CDCl3)1.42(t，3H)，1.52-1.61(m，1H)，1.85-2.02(m，3H)，2.68(dd，1H)，2.75(dd，1H)，3.72-3.79(m，1H)，3.82-3.88(m，1H)，4.00(s，2H)，4.02-4.09(m，1H)，4.42(q，2H)，7.37(dd，1H)，7.72(d，1H)，7.75(d，1H)，8.41(s，1H)。
參考例66-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸乙酯在參考例5的化合物(6.10g)的氯仿(60ml)溶液中加入焦碳酸二叔丁酯(3.71g)的氯仿(30ml)溶液，室溫下攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物，獲得淡茶色的標(biāo)題化合物(7.74g)。
1H-NMR(CDCl3)1.43(t，3H)，1.36-1.57(m，9H)，1.81-2.02(m，3H)，3.02-3.22(m，1H)，3.28-3.65(m，1H)，3.73-3.80(m，1H)，3.81-3.91(m，1H)，4.10-4.18(m，1H)，4.43(t，2H)，4.64(d，1H)，4.84(d，1H)，7.33(br，1H)，7.61(br，1H)，7.73(d，1H)，8.41(s，1H)。
參考例76-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸在參考例6的化合物(7.74g)的甲醇(100ml)懸浮液中加入1M的氫氧化鈉水溶液(40ml)，室溫下攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入1M的鹽酸水溶液(40ml)。濾取析出物，用水洗滌后，加熱減壓下干燥，獲得無色標(biāo)題化合物(6.57g)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.37(br，3H)，1.45(br，6H)，1.73-1.93(m，3H)，3.06-3.48(m，3H)，3.65(dd，1H)，3.77(dd，1H)，3.98-4.07(m，1H)，4.55(d，1H)，4.69(d，1H)，7.27(dd，1H)，7.67(d，1H)，8.01(d，1H)，9.31(s，1H)，13.84(br，1H)。
參考例86-羥基甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在6-羥基甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸(12.4g)的DMF(500ml)懸浮液中加入1-羥基苯并三唑(10.1g)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(28.8g)，室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入新戊胺(17.7ml)，相同溫度下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入0.5M的氫氧化鈉水溶液(2L)中。濾取不溶物，依次用水、己烷和乙醚的混合溶劑(混合比為3∶1)洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得標(biāo)題化合物(12.0g)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.94(s，9H)，3.13(d，2H)，4.68(d，2H)，5.33(t，1H)，7.33(d，1H)，7.65(d，2H)，7.88(br，1H)，8.52(t，1H)，9.14(s，1H)。
參考例96-甲酰基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在參考例8的化合物(12.0g)的DMSO(200ml)溶液中加入三乙胺(21.1ml)，然后室溫下慢慢添加三氧化硫·吡啶混合物(30.0g)。添加結(jié)束后，室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌1個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物加入到0.1M的氫氧化鈉水溶液(2L)中。濾取析出物，用水和乙醚依次洗滌后，加熱減壓下干燥，獲得標(biāo)題化合物(10.3g)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.94(s，9H)，3.14(d，2H)，7.87(d，1H)，7.96(d，2H)，8.51(br，1H)，8.67(t，1H)，9.25(s，1H)，10.11(s，1H)。
參考例10N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-6-羥基甲基-N-甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在6-羥基甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-羧酸(12.4g)的DMF(500ml)懸浮液中加入1-羥基苯并三唑(10.1g)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(28.8g)，室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌1個(gè)半小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲胺(17.1ml)，相同溫度下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入0.5M的氫氧化鈉水溶液(2L)中。濾取不溶物，依次用水、己烷和乙醚的混合溶劑(混合比為3∶1)洗滌后，減壓加熱下干燥，獲得標(biāo)題化合物(8.62g)。
1H-NMR(DMSO-d6)3.07-3.98(m，9H)，4.67(d，2H)，5.08(br，1H)，5.32(t，1H)，7.31(d，1H)，7.62(d，1H)，8.09(br，1H)，9.04(br，1H)。
參考例11N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-6-甲酰基-N-甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在參考例10的化合物(8.6g)的DMSO(180ml)溶液中加入三乙胺(13.8ml)，然后在室溫下慢慢添加三氧化硫·吡啶混合物(19.7g)。添加結(jié)束后，室溫下對(duì)反應(yīng)混合物攪拌1個(gè)半小時(shí)。添加結(jié)束后，將反應(yīng)混合物加入到0.07M的氫氧化鈉水溶液(2.15L)中。濾取析出物，依次用水和乙醚洗滌后，加熱減壓下干燥，獲得標(biāo)題化合物(4.41g)。
1H-NMR(DMSO-d6)3.30-3.98(m，9H)，5.09(br，1H)，7.86(d，1H)，7.96(d，1H)，8.71(br，1H)，9.20(br，1H)，10.01(s，1H)。
參考例12(4-甲氧基四氫吡喃-4-基)甲胺冰冷卻下，用20分鐘將4-氰基-4-甲氧基四氫吡喃(600mg，ChemistryLetters，pp.937-940，1984)的乙醚(5ml)溶液滴入到氫化鋁鋰(242mg)的乙醚(10ml)懸浮液中，滴加結(jié)束后，室溫下攪拌4小時(shí)。攪拌結(jié)束后，用冰冷卻反應(yīng)混合物，將硫酸鈉十水合物慢慢添加到反應(yīng)混合物中直至不出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象。添加結(jié)束后過濾不溶物，用乙醚洗滌過濾物。合并濾液和洗液，減壓下濃縮，獲得標(biāo)題化合物(597mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.17(br，2H)，1.40-1.47(m，2H)，1.57-1.62(m，2H)，2.53(br，2H)，3.07(s，3H)，3.47-3.66(m，4H)。
參考例132-(叔丁氧基羰基)氨基甲基-1，3-二硫雜環(huán)戊烷室溫下，在1，3-二硫雜環(huán)戊環(huán)-2-基甲胺(1.0g)的乙酸乙酯(15ml)溶液中加入焦碳酸二叔丁酯(1.69g)，攪拌一晝夜。攪拌結(jié)束后，使反應(yīng)溶液在乙酸乙酯和水的混合液中進(jìn)行分配，有機(jī)層用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮，獲得標(biāo)題化合物(1.85g)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.38(s，9H)，3.10(t，2H)，3.18(br，4H)，4.49(t，1H)，7,11(br，1H)。
參考例142-甲基氨基甲基-1，3-二硫雜環(huán)戊烷冰冷卻下，用20分鐘將參考例13的化合物(1.85g)的四氫呋喃(20ml)溶液滴入氫化鋁鋰(597mg)的四氫呋喃(20ml)懸浮液中，滴加結(jié)束后加熱回流一晝夜?；亓鹘Y(jié)束后，用冰冷卻反應(yīng)混合物，在反應(yīng)混合物中慢慢添加硫酸鈉十水合物直至不出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象。添加結(jié)束后過濾不溶物，用乙醚洗滌過濾物。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，加熱減壓下干燥，獲得標(biāo)題化合物(782mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.75(br，1H)，2.28(d，3H)，2.67(dd，2H)，3.14-3.19(m，4H)，4.55(t，1H)。
參考例15N-甲基-6-[(2-嗎啉-4-基乙氧基)甲基]-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽冰浴中，在參考例3的化合物(566mg)的DMF(10ml)懸浮液中加入氫化鈉(68mg)，在冰浴中攪拌5分鐘(反應(yīng)混合物1)。此外，冰浴中，在2-嗎啉-4-基乙醇(0.178ml)的DMF(10ml)溶液中加入氫化鈉(68mg)，在冰浴中攪拌35分鐘(反應(yīng)混合物2)。然后，在冰浴中，在反應(yīng)混合物1中滴入反應(yīng)混合物2，升溫至室溫后，慢慢添加氫化鈉(51mg)，在室溫下攪拌一晝夜。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液先用氯仿，然后用氯仿∶甲醇＝90∶10，接著用氯仿∶甲醇＝85∶15)精制。按照常規(guī)方法形成生成物的鹽酸鹽，結(jié)晶化的殘?jiān)靡掖己鸵宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(92mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，3.09-3.18(m，2H)，3.38-3.49(m，9H)，3.85-3.96(m，6H)，4.72(s，2H)，7.41(dd，1H)，7.72(d，1H)，8.35(br，1H)，9.27(s，1H)，11.19(br，1H)。
實(shí)施例5N-甲基-6-甲氧基丁基氨基甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在實(shí)施例4的化合物(304mg)的THF(10ml)溶液中加入焦碳酸二叔丁酯(166mg)，室溫下攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物，所得殘?jiān)弥V(洗脫液為己烷∶乙酸乙酯＝50∶50～0∶100)精制，獲得N-甲基-6-[(N-叔丁氧基羰基)-4-羥基丁基]氨基甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(380mg)。冰浴中，在該化合物(380mg)的DMF(5ml)溶液中加入甲基碘(71μl)及氫化鈉(36mg)，冰浴中攪拌1小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中再加入甲基碘(213μl)，室溫下攪拌一晝夜。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入冰的飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為己烷∶乙酸乙酯＝70∶30～10∶90)精制，獲得N-甲基-6-[(N-叔丁氧基羰基)-6-甲氧基丁基]氨基甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(50mg)。冰浴中，在該化合物(50mg)的乙酸乙酯(2ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(6ml)，撤走冰浴攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物溶于乙醇后，減壓下濃縮。殘?jiān)脺氐囊掖?乙酸乙酯的混合溶劑洗滌后，獲得標(biāo)題化合物(40mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，1H)，1.50-1.58(m，2H)，1.67-1.77(m，2H)，2.91(br，2H)，3.31(t，1H)，3.42(br，2H)，3.48(br，3H)，4.22-4.28(m，2H)，6.52(br，2H)，7.69(dd，1H)，7.79(d，1H)，8.25(s，1H)，9.16(s，1H)，9.44(br，2H)。
MS(FAB+)417(M+1)。
實(shí)施例6N-甲基-N-新戊基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺1.5富馬酸鹽在參考例3的化合物(386mg)的DMF(40ml)溶液中加入氧雜環(huán)丁烷-3-基胺鹽酸鹽(548mg)、碳酸鉀(691mg)及三乙胺(0.67ml)，在50℃的油浴中攪拌一晝夜。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入乙酸乙酯和水的混合液中，濾出不溶物，水層用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥苽浔由V(展開液為氯仿∶甲醇＝9∶1)精制。利用常規(guī)方法使生成物形成富馬酸鹽，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(65mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，3.42(br，2H)，3.47(br，3H)，3.84(s，2H)，3.93-4.01(m，1H)，4.35(t，2H)，4.59(t，2H)，6.62(s，3H)，7.34(dd，1H)，7.62(d，1H)，8.07(br，1H)，9.06(s，1H)。
MS(FAB+)387(M+1)。
實(shí)施例8、9、16、19采用與實(shí)施例6同樣的方法合成。
實(shí)施例6(另一種方法)N-甲基-N-新戊基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺1.5富馬酸鹽在參考例2的化合物(329mg)的二氯乙烷(10ml)溶液中加入氧雜環(huán)丁烷-3-基胺鹽酸鹽(329mg)、三乙胺(418μl)及乙酸(171μl)，室溫下攪拌2小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(1060mg)，室溫下再攪拌22小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入水及1M的氫氧化鈉水溶液，用含有5％甲醇的氯仿萃取。收集有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇＝100∶0～100∶10)精制，獲得N-甲基-N-新戊基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(343mg)。將所得化合物溶于乙醇，在其中加入富馬酸(165mg)后，減壓下濃縮混合物。所得殘?jiān)靡掖己鸵宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(298mg)。
實(shí)施例7N-甲基-6-({[(3-甲基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲基]氨基}甲基)-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在參考例3的化合物(1.62g)的DMF(10ml)溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺鉀(2.31g)及碳酸鉀(2.87g)，室溫下攪拌14小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入水(100ml)中，室溫下攪拌30分鐘。濾取析出物，用水、己烷和乙醚的混合溶劑(混合比為3∶1)洗滌后，加熱減壓下干燥，獲得N-甲基-N-新戊基-6-[(鄰苯二甲酰亞胺基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(1.76g)。冰冷卻下，在該化合物(1.75g)的甲醇(20ml)溶液中滴加40％甲胺-甲醇溶液(2.4ml)，滴加結(jié)束后加熱回流1小時(shí)?；亓鹘Y(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制，獲得6-氨基甲基-N-甲基-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(702mg)。在該化合物(524mg)的甲醇(30ml)溶液中加入甲烷磺酸(3-甲基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲基酯(286mg)及碳酸鈉(496mg)，在100℃的油浴中攪拌6天。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加水，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)眉和楹鸵宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(316mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.96(s，9H)，1.25(s，3H)，2.27(br，1H)，2.67(br，2H)，3.41(br，2H)，3.47(br，3H)，3.88(br，2H)，4.17(d，2H)，4.34(d，2H)，7.39(dd，1H)，7.63(d，1H)，8.05(s，1H)，9.05(s，1H)。
MS(FAB+)415(M+1)實(shí)施例10N-甲基-N-新戊基-6-({[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例3的化合物(386mg)的DMF(5ml)溶液中加入碳酸鉀(691mg)及(R)-四氫糠胺(506mg)，室溫下攪拌3小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入乙酸乙酯和水的混合液中。濾出不溶物，水層用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液先用乙酸乙酯，再用氯仿∶甲醇＝10∶1)精制。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽，再用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(192mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，1.52-1.62(m，1H)，1.77-1.89(m，2H)，1.95-2.05(m，1H)，2.80-2.92(m，1H)，2.98-3.08(m，1H)，3.42(br，2H)，3.48(br，3H)，3.71(dd，1H)，3.80(dd，1H)，4.17-4.36(m，3H)，7.69(d，1H)，7.79(d，1H)，8.27(s，1H)，9.18(s，1H)，9.34(br，1H)，9.68(br，1H)。
MS(FAB+)415(M+1)實(shí)施例11N-甲基-N-新戊基-6-({[((S)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例3的化合物(340mg)的DMF(12ml)溶液中加入(S)-四氫糠胺(492mg)及碳酸鉀(672mg)，于50℃的油浴中攪拌13小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加水，用乙酸乙酯萃取。濾出不溶物，水層用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水洗滌后，用1M的鹽酸水溶液萃取。水層用氯仿洗滌后，用飽和碳酸氫鈉水溶液使水層呈堿性(pH9～11)，再用氯仿萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽，再用2-丙醇重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(165mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，1.51-1.60(m，1H)，1.79-1.86(m，2H)，1.96-2.04(m，1H)，2.86-2.91(m，1H)，3.04-3.07(m，1H)，3.42(br，2H)，3.47(br，3H)，3.72(dd，1H)，3.80(dd，1H)，4.19-4.31(m，3H)，7.62(d，1H)，7.78(d，1H)，8.20(s，1H)，9.10(s，1H)，9.20-9.46(m，2H)。
MS(FAB+)415(M+1)實(shí)施例126-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例3的化合物(340mg)的DMF(12ml)溶液中加入1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲胺(167mg)及碳酸鉀(672mg)，于50℃的油浴中攪拌12個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加水，用乙酸乙酯萃取。濾出不溶物，水層用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水洗滌后，用1M的鹽酸水溶液萃取。水層用氯仿洗滌后，用飽和碳酸氫鈉水溶液使水層呈堿性(pH9～11)，再用氯仿萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥后，減壓下濃縮。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽，再用2-丙醇重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(104mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，3.12-3.13(m，2H)，3.42(br，2H)，3.47(br，3H)，3.85-3.93(m，2H)，3.96-4.04(m，2H)，4.33(br，2H)，5.19(t，1H)，7.59(dd，1H)，7.77(d，1H)，8.19(s，1H)，9.08(s，1H)，9.30(br，1H)，9.37(br，1H)。
MS(FAB+)417(M+1)實(shí)施例12(另一種方法)在參考例2的化合物(1364mg)的二氯乙烷(40ml)溶液中加入1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲胺(1281mg)及乙酸(711μl)，室溫下攪拌2小時(shí)。然后，在反應(yīng)混合物中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(4387mg)，室溫下再攪拌20小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入1M的氫氧化鈉水溶液，用含有5％甲醇的氯仿萃取。收集有機(jī)層，用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇＝95∶5)精制，獲得6-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(1564mg)。將所得化合物溶于乙醇中，在其中加入1M的鹽酸水溶液后，減壓下濃縮混合物。所得殘?jiān)靡掖己鸵宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(1410mg)。
實(shí)施例13N-甲基-N-新戊基-6-({甲基[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽冰冷卻下，在實(shí)施例24的化合物(448mg)的DMF(20ml)溶液中加入甲基碘(146μl)和氫化鈉(88mg)。同樣在冰冷卻下攪拌2個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液先用氯仿，再用氯仿∶甲醇＝90∶10，然后用氯仿∶甲醇＝85∶15)精制。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯對(duì)結(jié)晶化的殘?jiān)M(jìn)行重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(140mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，1.48-1.55(m，1H)，1.79-1.86(m，2H)，2.01-2.07(m，1H)，2.74-2.75(m，3H)，3.03-3.37(m，2H)，3.42(brs，2H)，3.49(brs，3H)，3.71-3.86(m，2H)，4.39-4.47(m，2H)，4.53-4.63(m，1H)，7.72(ddd，1H)，7.81(d，1H)，8.36(d，1H)，9.22(s，1H)，10.67(br，1H)，11.06(br，1H)。
MS(FAB+)429(M+1)實(shí)施例15N-甲基-N-新戊基-6-{[(四氫-2H-吡喃-4-基)氨基]甲基}噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例3的化合物(340mg)的DMF(12ml)溶液中加入四氫吡喃-4-基胺鹽酸鹽(367mg)及碳酸鉀(672mg)，于50℃的油浴中攪拌36小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加水，用乙酸乙酯萃取。濾出不溶物，水層用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水洗滌后，用1M的鹽酸水溶液萃取。水層用氯仿洗滌后，用飽和碳酸氫鈉水溶液使水層呈堿性(pH9～11)，再用氯仿萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽，再用乙醇重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(77mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，1.71(ddd，2H)，2.06-2.12(m，2H)，3.27-3.38(m，3H)，3.43(br，2H)，3.47(br，3H)，3.94(dd，2H)，4.28-4.32(m，2H)，7.66(d，1H)，7.79(d，1H)，8.24(s，1H)，9.11(s，1H)，9.32-9.54(m，2H)。
MS(FAB+)415(M+1)實(shí)施例17N-甲基-N-新戊基-6-({[(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例2的化合物(230mg)的二氯乙烷(10ml)溶液中加入乙酸(208μl)和(四氫吡喃-4-基)甲胺(252mg)，室溫下攪拌1個(gè)半小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(278mg)，室溫下再攪拌1個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)溶液中加入1M鹽酸水溶液(30ml)，使反應(yīng)液呈酸性(pH1～3)后，用1M的鹽酸水溶液萃取，再用氯仿洗滌。用3M的氫氧化鈉水溶液使水層呈堿性(pH11～13)后，用氯仿萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(220mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.97(s，9H)，1.14-1.26(m，2H)，1.67-1.75(m，2H)，1.97-2.10(m，1H)，2.76-2.83(m，2H)，3.26(dt，2H)，3.42(br，2H)，3.48(br，3H)，3.83(dd，2H)，4.23-4.32(m，2H)，7.76(d，1H)，7.80(d，1H)，8.31(s，1H)，9.21(s，1H)，9.48-9.70(m，2H)。
MS(FAB+)429(M+1)實(shí)施例14、18采用與實(shí)施例17同樣的方法合成。
實(shí)施例23(R)-N-新戊基-6-{[(四氫-3-呋喃基)氨基]甲基}噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例9的化合物(400mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(362μl)、(R)-(四氫呋喃-3-基)胺對(duì)甲苯磺酸鹽(988mg)、三乙胺(530μl)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(485mg)，室溫下再攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后，濾出不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物用氯仿萃取，用1M的氫氧化鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌后，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯的混合溶劑洗滌，獲得標(biāo)題化合物(346mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.92(s，9H)，2.09-2.25(m，2H)，3.12(d，2H)，3.66(dd，1H)，3.74-3.85(m，2H)，3.81-3.98(m，2H)，4.25-4.40(m，2H)，7.68(d，1H)，7.78(d，1H)，8.20(s，1H)，9.08(t，1H)，9.44(s，1H)，9.92(br，2H)。
MS(FAB+)387(M+1)實(shí)施例1、2、3、4、20、21、22、25、27、29、32、81采用與實(shí)施例23同樣的方法合成。
實(shí)施例24(R)-N-新戊基-6-({[(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例7的化合物(3.10g)的DMF(70ml)溶液中加入1-羥基苯并三唑(1.42g)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(4.03g)，室溫下攪拌2小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入新戊胺(2.47ml)，室溫下再攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物在水和乙酸乙酯的混合物中進(jìn)行分配，水層用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用5％檸檬酸水溶液、水和1M的氫氧化鈉水溶液、水及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為己烷∶乙酸乙酯＝7∶3～3∶7)精制，獲得(R)-N-新戊基-6-({叔丁氧基羰基-[(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(3.40g)。冰浴中，在該化合物(250mg)的乙酸乙酯(5ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(15ml)，撤走冰浴再攪拌1小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入乙醇，溶解后減壓下濃縮。所得結(jié)晶用乙醇和乙酸乙酯的混合溶劑洗滌，獲得標(biāo)題化合物(175mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.94(s，9H)，1.50-1.60(m，1H)，1.77-1.88(m，2H)，1.94-2.04(m，1H)，2.80-2.89(m，1H)，2.97-3.06(m，1H)，3.14(d，2H)，3.68-3.74(m，1H)，3.77-3.83(m，1H)，3.15-4.23(m，1H)，7.60(dd，1H)，7.78(d，1H)，8.11(s，1H)，8.89-8.96(m，1H)，9.34(s，1H)。
MS(FAB+)401(M+1)實(shí)施例48、49、50、52、53、55、57、58、59、69、70、72、73、77、78、80采用與實(shí)施例24同樣的方法合成。
實(shí)施例266-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例9的化合物(315mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(285μl)、1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲胺(282μl)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(382mg)，室溫下再攪拌1個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(364mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.94(s，9H)，3.04-3.11(m，2H)，3.14(d，2H)，3.85-3.92(m，2H)，3.96-4.02(m，2H)，4.33-4.41(m，2H)，5.24(t，1H)，7.63(dd，1H)，7.79(d，1H)，8.15(d，1H)，9.07(t，1H)，9.46(s，1H)，9.64(br，2H)。
MS(FAB+)403(M+1)實(shí)施例28N-新戊基-6-({[(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例9的化合物(315mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(285μl)、(四氫吡喃-4-基)甲胺(346mg)，室溫下攪拌2小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(382mg)，室溫下再攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(260mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)0.94(s，9H)，1.14-1.26(m，2H)，1.70(d，2H)，1.95-2.10(m，1H)，2.73-2.84(m，2H)，3.13(d，2H)，3.26(t，2H)，3.83(dd，2H)，4.32(br，2H)，7.67(br，1H)，7.96(br，1H)，8.46(br，1H)，9.01(br，1H)，9.52(br，3H)。
MS(FAB+)415(M+1)實(shí)施例31N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺在參考例11的化合物(440mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(362μl)、3-氨基氧雜環(huán)丁烷鹽酸鹽(417mg)、三乙胺(530μl)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(485mg)，室溫下再攪拌4小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物用2-丙醇和二異丙醚重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(132mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)3.25-4.00(m，12H)，4.33(t，2H)，4.58(t，2H)，5.08(br，1H)，7.33(dd，1H)，7.61(d，1H)，8.05(br，1H)，9.01(br，1H)。
MS(FAB+)403(M+1)實(shí)施例30、33、36、38、40、41、42、43、44、45、46、47采用與實(shí)施例31同樣的方法合成。
實(shí)施例34N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲基-6-{[(R)-(四氫-3-呋喃基)氨基]甲基}噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例11的化合物(439mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(362μl)、(R)-(四氫呋喃-3-基)胺對(duì)甲苯磺酸鹽(988mg)、三乙胺(530μl)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(485mg)，室溫下再攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物按照常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(400mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)2.10-2.30(m，2H)，3.00-4.00(m，14H)，4.25-4.35(m，2H)，5.09(br，1H)，7.76(d，1H)，7.81(d，1H)，8.36(s，1H)，9.20(br，1H)，9.95(br，2H)。
MS(FAB+)417(M+1)實(shí)施例35N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲基-6-({[((R)-四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例7的化合物(800mg)的乙醇(50ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(70ml)，攪拌3小時(shí)。攪拌結(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物，減壓下干燥，獲得6-({[(R)-(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽(753mg)。在該化合物(375mg)的DMF(20ml)懸浮液中加入1-羥基苯并三唑(163mg)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(533mg)，室溫下攪拌2小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲胺(317μl)，室溫下再攪拌2個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入水中，水層用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇＝100∶0～90∶10～85∶15)精制。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙腈重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(28mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.51-1.60(m，1H)，1.76-1.92(m，2H)，1.95-2.04(m，1H)，2.84-2.74(m，1H)，3.00-3.09(m，1H)，3.68-4.10(m，11H)，4.15-4.24(m，1H)，4.25-4.36(m，2H)，5.09(br，1H)，7.61(dd，1H)，7.76(d，1H)，8.20(br，1H)，8.95-9.50(m，3H)。
MS(FAB+)431(M+1)實(shí)施例37N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-6-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例11的化合物(345mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(285μl)、2-氨基甲基-1，3-二氧戊環(huán)(282μl)，室溫下攪拌1小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(382mg)，室溫下再攪拌1個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(363mg)。
1H-NMR(DMS0-d6)3.06-3.13(m，2H)，3.30-4.03(m，13H)，4.33(br，2H)，5.10(br，1H)，5.25(t，1H)，7.67(d，1H)，7.79(d，1H)，8.27(s，1H)，9.13(br，1H)，9.58(br，2H)。
MS(FAB+)433(M+1)實(shí)施例39N-(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)-N-甲基-6-({[(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例11的化合物(345mg)的二氯乙烷(15ml)溶液中加入乙酸(285μl)、(四氫吡喃-4-基)甲胺(346mg)，室溫下攪拌2小時(shí)。然后，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(382mg)，室溫下再攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌后過濾不溶物，用氯仿洗滌。合并濾液和洗液，減壓下濃縮后，殘?jiān)弥V(洗脫液為氯仿∶甲醇∶29％氨水＝100∶0∶0～93∶7∶0.7～90∶10∶1)精制。生成物用常規(guī)方法形成鹽酸鹽后，用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(309mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.15-1.25(m，2H)，1.71(d，2H)，1.96-2.10(m，1H)，2.76-2.84(m，2H)，3.26-4.06(m，18H)，4.25-4.30(m，2H)，5.10(br，1H)，7.73(d，1H)，7.79(d，1H)，8.29(s，1H)，9.14(br，1H)，9.44-9.62(m，2H)。
MS(FAB+)445(M+1)實(shí)施例61N-(4-甲氧基丁基)-N-甲基-6-({[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽實(shí)施例64N-(4-羥基丁基)-N-甲基-6-({[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在參考例7的化合物(400mg)的DMF(5ml)溶液中加入1-羥基苯并三唑(163mg)及1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(535mg)，室溫下攪拌40分鐘。在反應(yīng)混合物中加入4-氨基-1-丁醇(257μl)，室溫下再攪拌20分鐘。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物加入到水和乙酸乙酯的混合物中，水層用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，用水、1M氫氧化鈉水溶液及飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)眉和楹鸵宜嵋阴ブ亟Y(jié)晶，獲得N-(4-羥基丁基)-6-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺(380mg)。冰冷卻下，在該化合物(360mg)的DMF(10ml)溶液中加入甲基碘(223μl)和氫化鈉(60～72％，油性)(52mg)，冰冷卻下攪拌1個(gè)半小時(shí)。攪拌結(jié)束后，將反應(yīng)混合物注入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用水和飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液氯仿∶甲醇＝100∶0～90∶10～85∶15)精制，獲得N-(4-甲氧基丁基)-N-甲基-6-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺(214mg)及N-(4-羥基丁基)-N-甲基-6-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺(165mg)。室溫下，在N-(4-甲氧基丁基)-N-甲基-6-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺(200mg)的乙醇(10ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(10ml)，室溫下攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物。殘?jiān)凑粘Ｒ?guī)方法形成鹽酸鹽，再用乙醇和乙腈重結(jié)晶，獲得實(shí)施例61的化合物(86.0mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.49-1.70(m，5H)，1.76-1.90(m，2H)，1.95-2.04(m，1H)，2.80-2.92(m，1H)，2.98-3.08(m，1H)，3.22-3.54(m，10H)，3.71(dd，1H)，3.80(dd，1H)，4.17-4.35(m，3H)，7.67(dd，1H)，7.77(d，1H)，8.25(br，1H)，9.06(br，1H)，9.34(br，1H)，9.67(br，1H)。
MS(FAB+)431(M+1)然后，室溫下在N-(4-羥基丁基)-N-甲基-6-({叔丁氧基羰基-[((R)-四氫-2-糠基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3.2-a]苯并咪唑-2-酰胺(150mg)的乙醇(10ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(10ml)，室溫下攪拌2小時(shí)。攪拌結(jié)束后，減壓下濃縮反應(yīng)混合物。殘?jiān)凑粘Ｒ?guī)方法形成鹽酸鹽，再用乙醇和乙腈重結(jié)晶，獲得實(shí)施例64的化合物(42.0mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.41-2.03(m，8H)，2.82-2.92(m，1H)，2.99-3.08(m，1H)，3.35-3.54(m，7H)，3.70(dd，1H)，3.80(dd，1H)，4.19-4.37(m，3H)，7.68(d，1H)，7.78(d，1H)，8.28(s，1H)，9.09(br，1H)，9.35(br，1H)，9.68(br，1H)。
MS(FAB+)417(M+1)實(shí)施例62、65、63、66、67采用與實(shí)施例61、64同樣的方法合成。
實(shí)施例76(R)-N-甲基-N-(2-甲基-2-甲硫基丙基)-6-({[(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺二鹽酸鹽在可通過與實(shí)施例24同樣的方法、由參考例7的化合物和2-甲基-2-甲硫基丙胺合成的(R)-N-(2-甲基-2-甲硫基丙基)-6-({叔丁氧基羰基-[(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(413mg)的DMF(5ml)溶液中加入甲基碘(73μl)。然后，在冰浴中，在其中加入氫化鈉(60～72％，油性)(35mg)，在冰浴中攪拌1小時(shí)。攪拌結(jié)束后，在反應(yīng)混合物中加入冰的飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。收集有機(jī)層，先用水再用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘?jiān)弥V(洗脫液為己烷∶乙酸乙酯＝75∶25～25∶75)精制，獲得(R)-N-甲基-N-(2-甲基-2-甲硫基丙基)-6-({叔丁氧基羰基-[(四氫-2-呋喃基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(398mg)。冰浴中，在該化合物(398mg)的乙酸乙酯(5ml)溶液中加入4M鹽酸-乙酸乙酯溶液(15ml)，撤走冰浴再攪拌2小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入乙醇，溶解后減壓下濃縮。所得結(jié)晶用乙醇和乙酸乙酯重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物(318mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)1.29(s，6H)，1.51-1.61(m，1H)，1.78-1.89(m，2H)，1.95-2.09(m，4H)，2.81-2.92(m，1H)，3.00-3.09(m，1H)，3.52(br，3H)，3.67-3.74(m，3H)，3.77-3.84(m，1H)，4.16-4.24(m，1H)，4.27-4.33(m，2H)，7.65(dd，1H)，7.78(d，1H)，8.24(br，1H)，9.15(s，1H)。
MS(FAB+)447(M+1)實(shí)施例51、54、56、68、71、74、75、79采用與實(shí)施例76同樣的方法合成。
下表所示為上述實(shí)施例的結(jié)構(gòu)及物性值。
表(1)
(試驗(yàn)法)1.mGluR1結(jié)合活性本發(fā)明化合物對(duì)mGluR1的效果基于專利文獻(xiàn)3揭示的方法加以確認(rèn)。
本發(fā)明化合物的作用通過使用了對(duì)于mGluR1具有選擇性、且具有強(qiáng)力作用的(6-氨基-N-環(huán)己基-N，3-二甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺)的氚標(biāo)記物(比活性81Ci/mmol(Amersham))的結(jié)合實(shí)驗(yàn)加以確認(rèn)。
上述化合物在使用mGluR1α表達(dá)細(xì)胞的磷脂酰肌醇(P1)水解系統(tǒng)(Nature，383，89-92，1996)中，對(duì)于谷氨酸的反應(yīng)具有IC50＝24nM這樣高的抑制活性。
(大鼠小腦P2膜部分的制作)將大鼠(Wistar，雄性，9-12周齡)斷頭，取出小腦。測(cè)定其重量，用7～10倍量的0.32M蔗糖溶液均質(zhì)化。以900×g進(jìn)行15分鐘的離心，將上清液保留在另一容器中(冰中)。沉淀物用與第一次等量的0.32M的蔗糖溶液再次進(jìn)行均質(zhì)化，以900×g進(jìn)行15分鐘的離心。將此時(shí)獲得的上清液與前一次獲得的上清液合并，以15000×g離心20分鐘。然后，用5mM Tris-HCl、pH7.4對(duì)沉淀物進(jìn)行均質(zhì)化處理，再以15000×g離心15分鐘。將該操作重復(fù)一次。接著，用50mM Tris-HCl、pH7.4對(duì)沉淀物進(jìn)行均質(zhì)化處理，再以15000×g離心15分鐘。沉淀物用適量的50mM Tris-HCl、pH7.4進(jìn)行均質(zhì)化處理，分成小份，保存于-80℃。
(結(jié)合實(shí)驗(yàn))試驗(yàn)緩沖液使用50mM Tris-HCl，2.5mM CaCl2，pH7.4。將[3H]-(6-氨基-N-環(huán)己基-N，3-二甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺)(比活性81Ci/mmol，Amersham)、試驗(yàn)化合物及約0.1mg的大鼠小腦P2膜部分懸浮于96孔微孔板中，全量為100μl，室溫下(約25℃)培養(yǎng)45分鐘。通過使用了Whatman GF/B濾紙的過濾法結(jié)束培養(yǎng)。放射性用液體閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定。競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)使用約20nM的[3H]-6-氨基-N-環(huán)己基-N，3-二甲基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺，特異結(jié)合是全結(jié)合量中被10μM的6-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺(專利文獻(xiàn)3，實(shí)施例75記載的化合物)置換的部分。試驗(yàn)化合物的評(píng)價(jià)通過求得影響特異結(jié)合的結(jié)合抑制率進(jìn)行。
蛋白定量采用BIO-RAD DC蛋白質(zhì)鑒定(BIO-RAD)試劑盒進(jìn)行。作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用牛血清白蛋白。
結(jié)果見表4。
參考文獻(xiàn)Thomsen-C；Mulvihill-ER；Haldeman-B；Pickering-DS；Hampson-DR；Suzdak-PD，A pharmacological characterization of the mGluR1alpha subtype of the metabotropic glutamate receptor expressed in acloned baby hamster kidney cell line.，Brain-Res.1993 Aug 13；619(1-2)22-82.對(duì)神經(jīng)因性疼痛的抑制效果1)鏈佐星(Streptozotocin，以下稱為STZ)誘發(fā)的糖尿病模型改變部分現(xiàn)有技術(shù)(Pharmacol Biochem Behav 39，541-544，1991)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。以STZ 200mg/kg對(duì)4周齡的ICR小鼠腹腔內(nèi)給藥。給藥2周后的下午進(jìn)行夾尾實(shí)驗(yàn)(tail pinch test)的預(yù)實(shí)驗(yàn)，僅將反應(yīng)延遲3秒以下的動(dòng)物用于次日的實(shí)驗(yàn)。給供試動(dòng)物口服負(fù)荷量10mg/kg的藥物，給藥后30分鐘進(jìn)行夾尾實(shí)驗(yàn)，求出與預(yù)實(shí)驗(yàn)中測(cè)定的延遲時(shí)間之差。
本實(shí)驗(yàn)中，未給予STZ的正常小鼠顯現(xiàn)出平均6～7秒的反應(yīng)延遲。用于本次實(shí)驗(yàn)的給予了STZ的小鼠采用出現(xiàn)明顯的痛覺閾值下降的反應(yīng)延遲在3秒以下的小鼠。
結(jié)果示于表4。平均反應(yīng)延遲時(shí)間之差在2秒以上的記為+(有作用)，在1.5秒以上未滿2秒的記為±，未滿1.5秒的記為-(無作用)。
表4
對(duì)照化合物A專利文獻(xiàn)4、實(shí)施例112揭示的化合物對(duì)照化合物B專利文獻(xiàn)4、實(shí)施例116揭示的化合物對(duì)照化合物C專利文獻(xiàn)4、實(shí)施例126揭示的化合物對(duì)照化合物D專利文獻(xiàn)4、實(shí)施例133揭示的化合物根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)本發(fā)明化合物是與mGluR1特異性結(jié)合的化合物。
此外，確認(rèn)本發(fā)明化合物通過口服對(duì)糖尿病引起的神經(jīng)因性疼痛具有治療效果。
本發(fā)明化合物與不具有苯胺性氨基的結(jié)構(gòu)近似的對(duì)照化合物相比，是口服活性在10倍以上的很好的化合物，確認(rèn)其是可作為口服劑使用的化合物。
2)L5/L6脊神經(jīng)結(jié)扎大鼠改變現(xiàn)有技術(shù)(PAIN 50，355-363，1992)的一部分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用SD大鼠，在戊巴比妥麻醉下用絲線結(jié)扎其左側(cè)腰神經(jīng)(L5及L6)。術(shù)后第7天到第14天間實(shí)施以下實(shí)驗(yàn)。
口服藥物，30分鐘后進(jìn)行von Frey hair(VFH)實(shí)驗(yàn)，求得機(jī)械傷害刺激的痛覺閾值。測(cè)定在左右后肢實(shí)施。
假手術(shù)大鼠的痛覺閾值在左右無差別，為17～20g(log(g)1.23～1.30)，確認(rèn)L5/L6脊神經(jīng)結(jié)扎大鼠的手術(shù)側(cè)足對(duì)機(jī)械傷害刺激的痛覺閾值下降。
采用Dunnett法測(cè)定差異顯著性，在對(duì)照組和給藥組間分別對(duì)左右足進(jìn)行。
結(jié)果實(shí)施例15、17、28的化合物以30mg/kg口服對(duì)手術(shù)側(cè)的閾值下降顯現(xiàn)出有效性。
這樣可確認(rèn)具有mGluR1拮抗作用的化合物對(duì)因?yàn)樯窠?jīng)壓迫而造成的神經(jīng)因性疼痛的治療有效。
3.遺傳毒性本發(fā)明化合物的基因突變誘發(fā)性通過使用細(xì)菌的回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。
實(shí)驗(yàn)方法是按照醫(yī)藥品的遺傳毒性實(shí)驗(yàn)指南(醫(yī)藥審，第1604號(hào)，平成11年11月1日)，在代謝活化系的存在下及不存在下，采用預(yù)培養(yǎng)法實(shí)施。但是，實(shí)驗(yàn)菌株僅使用鼠傷寒沙門氏菌TA98及TA100。
(使用細(xì)菌的回復(fù)突變實(shí)驗(yàn))在試管內(nèi)裝入0.1M磷酸鈉緩沖液(pH7.4)0.5ml和培養(yǎng)了一晚的試驗(yàn)菌懸浮液0.1ml及試驗(yàn)物質(zhì)溶液0.1ml，于37℃振蕩20分鐘(60次往復(fù)/分鐘)后，加入保溫于約45℃的軟瓊脂2ml，將其擴(kuò)大到最低葡萄糖瓊脂平板培養(yǎng)基(板)中，于37℃培養(yǎng)約48小時(shí)。在進(jìn)行代謝活化試驗(yàn)時(shí)，加入等量的S9Mix代替0.1M的磷酸鈉緩沖液，同樣進(jìn)行操作。
結(jié)果用于代謝活化試驗(yàn)的S9Mix使用S-9/cofactor A組(用苯巴比妥及5，6-苯并黃酮誘導(dǎo)了藥物代謝酶的大鼠肝勻漿的9000×g上清液和Cofactor，Ames試驗(yàn)用，オリエンタル酵母株式會(huì)社)調(diào)制。S9Mix中的S9量為0.1ml/ml，溶劑使用硫酸二甲酯。
培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)生長(zhǎng)于平板上的菌落數(shù)目。經(jīng)供試物質(zhì)處理過的平板的回復(fù)變異菌落數(shù)(平均值)增加到作為對(duì)照的溶劑的回復(fù)變異菌落數(shù)(平均值)的2倍以上，確認(rèn)其有劑量依賴性。在確認(rèn)再現(xiàn)性的情況下，判斷具有基因突變誘發(fā)性。
另一方面，確認(rèn)本發(fā)明的實(shí)施例12的化合物具有與專利文獻(xiàn)2記載的化合物同等或以上的口服活性(在STZ誘發(fā)糖尿病模型中10mg/kg有效)，而且，其基因突變誘發(fā)性呈陰性。
因此，確認(rèn)本發(fā)明化合物具有良好的口服活性，且無基因突變誘發(fā)性，是在臨床上有用的化合物。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性本發(fā)明化合物是對(duì)促代謝的谷氨酸受體顯現(xiàn)出較強(qiáng)作用、口服活性良好的化合物，對(duì)糖尿病性或神經(jīng)壓迫造成的神經(jīng)因性疼痛也具有良好的治療效果，是作為醫(yī)藥品有用的化合物。
此外，本發(fā)明化合物是無苯胺性氨基的、口服活性得到了改善的化合物，由于沒有基于苯胺性氨基的基因突變誘發(fā)性，所以在臨床上有用。
因此，本發(fā)明化合物作為與mGluR1受體有關(guān)的疾病，例如，癲癇、疼痛、神經(jīng)細(xì)胞死亡的抑制、苯并二氮類的戒斷綜合征、帕金森病、偏頭痛、焦慮性障礙、腦梗塞(較好是在腦梗塞急性期使用的防止梗塞病灶發(fā)展的藥物)或神經(jīng)因性疼痛(較好是伴隨糖尿病性神經(jīng)障礙的疼痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、癌性疼痛、術(shù)后慢性疼痛)的預(yù)防·治療劑有用。
權(quán)利要求
1.以下通式(I)表示的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽，其特征在于， 式中符號(hào)的含義如下所述R1可取代的含氧飽和雜環(huán)-、可取代的含硫飽和雜環(huán)-、可取代的環(huán)烷基、-O-R6或-S-R7，Alk1低級(jí)亞烷基，m0或1，Alk2可被氧代基取代的低級(jí)亞烷基，n0或1，X鍵、O、S或NR5，R3H、低級(jí)烷基、鹵代低級(jí)烷基、低級(jí)鏈烯基、低級(jí)炔基、可取代的環(huán)烷基、氰基或飽和雜環(huán)-，R2、R4、R5、R6及R7可相同或不同，表示H或低級(jí)烷基，但X為鍵且n為1時(shí)，R3不表示低級(jí)烷基或鹵代低級(jí)烷基；此外，m為1、R1為OH或甲氧基、Alk1為C1-3亞烷基，且1)X為鍵、n為1、且R3為H時(shí)，或2)X為鍵、n為0、且R3為環(huán)己基時(shí)，R4表示甲基以外的基團(tuán)。
2.如權(quán)利要求1所述的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽，其特征還在于，通式(I)中，R1為可取代的含氧飽和雜環(huán)-、R3為低級(jí)烷基或飽和雜環(huán)-。
3.N-甲基-N-新戊基-6-[(氧雜環(huán)丁烷-3-基氨基)甲基]噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺、6-{[(1，3-二氧戊環(huán)-2-基甲基)氨基]甲基}-N-甲基-N-新戊基噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺、N-新戊基-6-({[(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基}甲基)噻唑并[3，2-a]苯并咪唑-2-酰胺或其鹽。
4.醫(yī)藥品，其特征在于，以權(quán)利要求1所述的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽為有效成分。
全文摘要
本發(fā)明提供了以下通式(I)表示的新穎的氨基甲基取代的噻唑并苯并咪唑衍生物或其鹽。前述衍生物或其鹽具有促代謝的谷氨酸受體活性，作為口服活性優(yōu)良的醫(yī)藥品有用。式中，R
文檔編號(hào)A61P9/10GK1642961SQ0380624
公開日2005年7月20日 申請(qǐng)日期2003年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2002年3月20日
發(fā)明者板鼻弘恒, 藤安次郎, 林邊敏, 渡邊俊博, 岡田正路, 戶谷充志 申請(qǐng)人:山之內(nèi)制藥株式會(huì)社