專利名稱：可用作蛋白激酶抑制劑的吲唑化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域，涉及蛋白激酶抑制劑化合物、含有這類化合物的組合物和使用方法。更確切地，這些化合物是AKT、PKA、PDK1、p70S6K和ROCK激酶的抑制劑，可用于治療疾病，例如癌癥。
背景技術(shù)：
近年來，更好地理解與目標(biāo)疾病有關(guān)的酶和其他生物分子的結(jié)構(gòu)，大大有助于尋求新的治療劑。已經(jīng)成為廣泛研究的主體的一類重要的酶是蛋白激酶。
蛋白激酶介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。它們通過影響磷?；鶑娜姿岷塑辙D(zhuǎn)移至參與發(fā)信號途徑的蛋白質(zhì)接納體而做到這一點(diǎn)。通過大量激酶和途徑，細(xì)胞外與其他刺激導(dǎo)致各種細(xì)胞應(yīng)答發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)部。這類刺激的實(shí)例包括環(huán)境與化學(xué)應(yīng)激反應(yīng)信號(例如滲壓休克、熱休克、紫外輻射、細(xì)菌內(nèi)毒素、H2O2)、細(xì)胞因子(例如白介素-1(IL-1)和腫瘤壞死因子α(TNF-α))和生長因子(例如粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纖維細(xì)胞生長因子(FGF))。細(xì)胞外刺激可以影響一種或多種細(xì)胞應(yīng)答，涉及細(xì)胞生長、移行、分化、激素分泌、轉(zhuǎn)錄因子活化、肌肉收縮、糖代謝、蛋白質(zhì)合成控制和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)。
很多疾病與由蛋白激酶介導(dǎo)的事件激發(fā)的異常細(xì)胞應(yīng)答有關(guān)。這些疾病包括自體免疫疾病、炎性疾病、神經(jīng)病學(xué)與神經(jīng)變性疾病、癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)與氣喘、阿爾茨海默氏病或涉及激素的疾病。因此，醫(yī)藥化學(xué)界一直努力發(fā)現(xiàn)蛋白激酶抑制劑，它們作為治療劑是有效。發(fā)現(xiàn)以選擇性方式發(fā)揮作用的蛋白激酶抑制劑已經(jīng)成為一項(xiàng)挑戰(zhàn)。由于有大量蛋白激酶參與多種細(xì)胞應(yīng)答，非選擇性抑制劑可能引起所不希望的副作用。
AKT(已知也稱PKB或Rac-PKβ)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，已經(jīng)顯示在若干類型癌癥中被過度表達(dá)，是正常細(xì)胞功能的介質(zhì)[(Khwaja，A.，Nature，401，pp.33-34，1999)；(Yuan，Z.Q.，et al.，Oncogene，19，pp.2324-2330，2000)；(Namikawa，K.，et al.，J Neurosci.，20，pp.2875-2886，2000)]。AKT包含N-末端血小板-白細(xì)胞C激酶底物同源性(PH)結(jié)構(gòu)域、激酶結(jié)構(gòu)域和C-末端“尾”區(qū)。迄今已經(jīng)報(bào)道了人AKT激酶的三種同種型(AKT-1，-2和-3)[(Cheng，J.Q.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89，pp.9267-9271，1992)；(Brodbeck，D.et al.，J.Biol.Chem.274，pp.9133-9136，1999)]。PH結(jié)構(gòu)域與3-磷酸肌醇結(jié)合，一旦受生長因子的刺激，例如血小板衍生生長因子(PDGF)、神經(jīng)生長因子(NGF)和胰島素樣生長因子(IGF-1)，由磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)合成3-磷酸肌醇[(Kulik et al.，Mol.Cell.Biol.，17，pp.1595-1606，1997)；(Hemmings，B.A.，Science，275，pp.628-630，1997)]。與PH結(jié)構(gòu)域結(jié)合的脂質(zhì)促進(jìn)AKT易位于血漿膜，有利于另一種含PH結(jié)構(gòu)域蛋白激酶PDK1分別在AKT同種型1、2和3的Thr308、Thr309和Thr305的磷酸化。AKT-1、-2和-3的C-末端尾區(qū)中分別在Ser473、Ser474或Ser472的磷酸化都需要第二種尚未知曉的激酶，目的是產(chǎn)生完全活化的AKT酶。
一旦定位于膜，AKT介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的若干功能，包括胰島素的代謝效應(yīng)(Calera，M.R.et al.，J.Biol.Chem.，273，pp.7201-7204，1998)、分化和/或增殖的誘導(dǎo)、蛋白質(zhì)合成應(yīng)激反應(yīng)(Alessi，D.R.et al.，Curr.Opin.Genet.Dev.，8，pp.55-62，1998)。
AKT調(diào)節(jié)作用改變的表現(xiàn)出現(xiàn)在損傷和疾病中，最重要的角色是在癌癥中。對AKT的第一次解釋與人卵巢癌有關(guān)，發(fā)現(xiàn)AKT的表達(dá)在15％的病例中有所增加(Cheng，J.Q.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，89，pp.9267-9271，1992)。還已發(fā)現(xiàn)在12％的胰腺癌中被過度表達(dá)(Cheng，J.Q.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，93，pp.3636-3641，1996)。經(jīng)過證明，AKT-2在12％的卵巢癌中被過度表達(dá)，AKT的增加在50％的未分化腫瘤中尤其頻繁，提示了AKT也可能與腫瘤侵襲有關(guān)(Bellacosa，et al.，Int.J.Cancer，64，pp.280-285，1995)。
已經(jīng)顯示PKA(已知也稱cAMP-依賴性蛋白激酶)調(diào)節(jié)很多極重要功能，包括能量代謝、基因轉(zhuǎn)錄、增殖、分化、生殖功能、分泌、神經(jīng)元活動(dòng)、記憶、收縮性和運(yùn)動(dòng)性(Beebe，S.J.，Semin.Cancer Biol.，5，pp.285-294，1994)。PKA是一種四元全酶，它含有兩個(gè)催化性亞單位，與一個(gè)均二聚的調(diào)節(jié)性亞單位結(jié)合(它起到抑制催化性亞單位的作用)。一旦與cAMP結(jié)合(酶的活化)，催化性亞單位從調(diào)節(jié)性亞單位上離解下來，產(chǎn)生活性絲氨酸/蘇氨酸激酶(McKnight，G.S.et al.，Recent Prog.Horm.Res.，44，pp.307，1988)。迄今已經(jīng)報(bào)道過催化性亞單位的三種同工型(C-α，C-β和C-γ)(Beebe，S.J.et al.，J.Biol.Chem.，267，pp.25505-25512，1992)，其中C-α亞單位得到最為廣泛的研究，主要因?yàn)樗谠l(fā)性和轉(zhuǎn)移性黑瘤中的表達(dá)升高(Becker，D.etal.，Oncogene，5，pp.1133，1990)。迄今，調(diào)制C-α亞單位活性的策略牽涉抗體的使用，這些分子借助定向于調(diào)節(jié)性二聚物和反義寡核苷酸表達(dá)而阻滯PKA活性。
與Rho締合的卷曲螺旋生成激酶(ROCK)(Ishizaki，T.et al.，EMBO J.，15，pp.1885-1893，1996)是一種160kDa的絲氨酸/蘇氨酸激酶，它激活小的G-蛋白RhoA。ROCK在大量疾病中都有牽連，包括高血壓[(Chitaley，et al.，Curr.Hypertens.Rep.2001 Apr.，3(2)，pp.139-144)；(Uehata，M.et al.，Nature，389，pp.990-994，1997)]、勃起功能障礙(Chitaley，K.et al.，Nature Medicine，7，pp.119-122，2001)、血管生成(Uchida，S.et al.，Biochem.Biophys.Res.Commun.，269(2)，pp.633-40，2000)、神經(jīng)變性(Bito，H.et al.，Neuron，26，pp.431-441，2000)、轉(zhuǎn)移瘤[(Takamura，M.et al.，Hepatology，33，pp.577-581，2001)；(Genda，T.et al.，Hepatology，30，pp.1027-1036，1999)]、青光眼(Rao，et al.，Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.，42，pp.1029-37，2001)、炎癥(Ishizuka，T.et al.，J.Immunol.，167，pp.2298-2304，2001)、動(dòng)脈硬化(Smimokawa，et al.，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.，11，pp.2351-2358，2000)、免疫抑制(Lou，Z.et al.，J.Immunol.，167，pp.5749-5757，2001)、再狹窄(Seaholtz，et al.，Circ.Res.，84，pp.1186-1193，1999)、氣喘(Yoshii，et al.，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.，20，pp.1190-1200，1999)、心肥大(Kuwahara，K.et al.，F(xiàn)EBS Lett.，452，pp.314-318，1999)。
核糖體蛋白激酶p70S6K-1與-2是AGC亞家族蛋白激酶的成員，該亞家族主要由PKB和MSK組成。p70S6激酶催化核糖體蛋白S6的磷酸化和隨后的活化，該蛋白質(zhì)在編碼蛋白合成裝置成份的mRNA的翻譯上調(diào)中有所牽連。
這些mRNA在它們的5’轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)含有寡嘧啶道，稱為5’TOP，已經(jīng)顯示這是它們在翻譯水平上的調(diào)節(jié)作用所必需的(Volarevic，S.et al.，Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.65，pp 101-186，2001)。p70S6K依賴性S6磷酸化響應(yīng)于多種激素和生長因子而受到刺激，主要經(jīng)由PI3K途徑(Coffer，P.J.et al.，Biochem.Biophys.Res.Commun，198，7 pp 780-786，1994)，這也許是在mTOR的調(diào)節(jié)之下，因?yàn)槔着撩顾仄鸬揭种苝70S6K活性和阻滯蛋白質(zhì)合成的作用，具體而言是編碼核糖體蛋白質(zhì)的這些mRNA翻譯下調(diào)的結(jié)果(Kuo，C.J.etal.，Nature，358，pp 70-73，1992)。
體外PDK1催化p70催化性結(jié)構(gòu)域活化袢中Thr252的磷酸化，它是p70活性所不可缺少的(Alessi，D.R.，Curr.Biol.，8，pp 69-81，1998)。雷帕霉素的使用和果蠅屬dp70S6K與小鼠p70S6K1的基因缺失研究已經(jīng)確立了p70在細(xì)胞生長和增殖信號中所扮演的核心角色。
3-磷酸肌醇-依賴性蛋白激酶-1(PDK-1)在調(diào)節(jié)屬于AGC亞家族蛋白激酶中的大量激酶活性中扮演關(guān)鍵角色(Alessi，D.et al.，Biochem.Soc.Trans，29，pp.1，2001)。它們包括蛋白激酶B(PKB，已知也稱AKT)、p70核糖體S6激酶(S6K)(Avruch，J.et al.，prog.Mol.Subcell.Biol.，2001，26，pp.115，2001)和p90核糖體S6激酶(Frodin，M.et al.，EMBO J.，19，pp.2924-2934，2000)的同工型。PDK1介導(dǎo)的信號響應(yīng)于胰島素和生長因子而受到活化，是細(xì)胞附著于細(xì)胞外基質(zhì)的后果(整聯(lián)蛋白信號)。一旦被活化，這些酶借助使關(guān)鍵的調(diào)節(jié)性蛋白質(zhì)磷酸化而介導(dǎo)很多不同的細(xì)胞事件，這些蛋白質(zhì)扮演重要的角色，控制著細(xì)胞存活、生長、增殖和葡萄糖調(diào)節(jié)等過程[(Lawlor，M.A.et al.，J.CellSci.，114，pp.2903-2910，2001)，(Lawlor，M.A.et al.，EMBO J.，21，pp.3728-3738，2002)]。PDK1是一種556個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，具有一個(gè)N-末端催化性結(jié)構(gòu)域和一個(gè)C-末端血小板-白細(xì)胞C激酶底物同源性(PH)結(jié)構(gòu)域，它借助在它們的活化袢使這些激酶磷酸化而激活它的底物(Belham，C.et al.，Curr.Biol.，9，pp.R93-R96，1999)。很多人類癌癥、包括前列腺癌和NSCL，已經(jīng)提高了PDK1信號途徑功能，這是由大量不同的遺傳事件所引起的，例如PTEN突變或某些關(guān)鍵調(diào)節(jié)性蛋白質(zhì)的過度表達(dá)[(Graff，J.R.，Expert Opin.Ther.Targets，6，pp.103-113，2002)，(Brognard，J.，et al.，Cancer Res.，61，pp.3986-3997，2001)]。作為一種治療癌癥的潛在機(jī)理，PDK1的抑制得到PTEN陰性人癌細(xì)胞系(U87MG)用指向PDK1的反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染的證明。所得PDK1蛋白水平的降低引起細(xì)胞增殖和存活的減少(Flynn，P.，et al.，Curr.Biol.，10，pp.1439-1442，2000)。所以，PDK1的ATP結(jié)合位點(diǎn)抑制劑的設(shè)計(jì)尤其為癌癥化療提供了誘人的目標(biāo)。
不同的癌細(xì)胞基因型范圍已被歸因于下列細(xì)胞生理學(xué)上的六種實(shí)質(zhì)性改變的表現(xiàn)生長信號發(fā)送的自我充足、細(xì)胞凋亡的回避、對生長抑制性信號發(fā)送的不敏感、無限的復(fù)制潛力、持續(xù)的血管生成和引起轉(zhuǎn)移的組織侵入(Hanahan，D.et al.，Cell，100，pp.57-70，2000)。PDK1是PI3K信號途徑的關(guān)鍵介質(zhì)，它調(diào)節(jié)多數(shù)細(xì)胞功能，包括生長、增殖和存活。所以，抑制這種途徑能夠影響癌癥進(jìn)展的六個(gè)確定條件中的四種或更多，因此預(yù)期PDK1抑制劑將對多種人類癌癥的生長都有影響。
具體而言，增加了的PI3K途徑活性水平與大量人類癌癥的形成、向侵襲性頑固性狀態(tài)的進(jìn)展(對化學(xué)療法的獲得性耐受性)和預(yù)后不良直接相關(guān)。這種增加了的活性已被歸因于一系列關(guān)鍵事件，包括降低了的負(fù)性途徑調(diào)節(jié)劑(例如磷酸酶PTEN)的活性，正性途徑調(diào)節(jié)劑(例如Ras)的活化突變，和該途徑本身組分(例如PKB)的過度表達(dá)，實(shí)例包括腦(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、乳腺、結(jié)腸、頭頸、腎、肺、肝、黑瘤、卵巢、胰腺、前列腺、肉瘤、甲狀腺[(Teng，D.H.et al.，CancerRes.，57，pp.5221-5225，1997)，(Brognard，J.et al.，Cancer Res.，61，pp.3986-3997，2001)，(Cheng，J.Q.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，93，pp.3636-3641，1996)，Int.J.Cancer，64，pp.280，1995)，(Graff，J.R.，Expert Opin.Ther. Targets，6，pp.103-113，2002)，Am.J.Pathol.，159，pp.431，2001)]。
另外，通過該途徑的基因knockout、基因knockdown、優(yōu)勢負(fù)性研究和小分子抑制劑降低途徑功能已被證明體外逆轉(zhuǎn)很多癌癥表型(有些研究還已證明有相似的體內(nèi)作用)，例如在一系列細(xì)胞系中阻滯增殖，減少活力和使癌細(xì)胞敏感于已知的化學(xué)療法，代表了下列癌癥胰腺[(Cheng，J.Q.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，93，pp.3636-3641，1996)，Neoplasia，3，pp.278，2001)]、肺[(Brognard，J.et al.，CancerRes.，61，pp.3986-3997，2001)，Neoplasia，3，pp.278，2001)]、卵巢[(Hayakawa，J.et al.，Cancer Res.，60，pp.5988-5994，2000)，Neoplasia，3，pp.278，2001)]、乳腺(Mol.Cancer Ther.，1，pp.707，2002)、結(jié)腸[(Neoplasia，3，pp.278，2001)，(Arico，S.et al.，J.Biol.Chem.，277，pp.27613-27621，2002)]、子宮頸(Neoplasia，3，pp.278，2001)、前列腺[(Endocrinology，142，pp.4795，2001)，(Thakkar，H.et al.J.Biol.Chem.，276，pp.38361-38369，2001)，(Chen，X.et al.，Oncogene，20，pp.6073-6083，2001)]和腦(成膠質(zhì)細(xì)胞瘤)[(Flynn，P.et al.，Curr.Biol.，10，pp.1439-1442，2000)]。
因此，迫切需要開發(fā)AKT、PKA、PDK1、p70S6K和ROCK蛋白激酶的抑制劑，它們可用于治療各種與AKT、PKA、PDK1、p70S6K和ROCK活化有關(guān)的疾病或病癥，特別是鑒于目前大多數(shù)這些障礙不能得到足夠的治療。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的組合物是有效的AKT、PKA、PDK1、p70S6K和ROCK蛋白激酶的抑制劑。這些化合物具有式I 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中V1、V2、V3、R1和R2是如下所定義的。
這些化合物及其藥學(xué)上可接受的組合物可用于治療或減輕多種障礙的嚴(yán)重性，包括變應(yīng)性障礙(例如氣喘)、炎性疾病、增殖性障礙和神經(jīng)病學(xué)障礙。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式I化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2、T-R或T-Ar；每個(gè)T獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2選自Q-Ar、Q-N(R5)2或Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若V1、V2和V3各自是CH，T是價(jià)鍵，R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中Ar是可選被取代的苯基環(huán)，則R3不是Q-OR5或C(O)NH2；若V1、V2和V3各自是CH，R1是氫，則R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R3不是R’、Q-OC(O)R5或OCH2苯基。
正如本文所用的，應(yīng)當(dāng)適用下列定義，另有指示除外。短語“可選被取代的”與短語“取代或未取代的”是可互換使用的。除非另有指示，可選被取代的基團(tuán)可以在該基團(tuán)每個(gè)可取代的位置具有取代基，并且每個(gè)取代是彼此獨(dú)立的。
本文所用的術(shù)語“脂族”或“脂族基團(tuán)”表示直鏈或支鏈C1-C12烴鏈，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，或者表示單環(huán)C3-C8烴或二環(huán)C8-C12烴，它是完全飽和的或者含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，但是它不是芳族的(本文也稱為“碳環(huán)”或“環(huán)烷基”)，它具有單一的與分子其余部分連接的點(diǎn)，其中所述二環(huán)系統(tǒng)中任意個(gè)別的環(huán)具有3-7個(gè)成員。例如，適合的脂族基團(tuán)包括但不限于直鏈或支鏈烷基、烯基、炔基及其雜種，例如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基或(環(huán)烷基)烯基。
術(shù)語“烷基”、“烷氧基”、“羥基烷基”、“烷氧基烷基”和“烷氧基羰基”——單用或者作為更大部分的一部分——包括含有一至十二個(gè)碳原子的直鏈和支鏈。術(shù)語“烯基”和“炔基”——單用或者作為更大部分的一部分——應(yīng)當(dāng)包括含有二至十二個(gè)碳原子的直鏈和支鏈。
術(shù)語“鹵代烷基”、“鹵代烯基”和“鹵代烷氧基”表示被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代的烷基、烯基或烷氧基，視情況而定。術(shù)語“鹵素”表示F、Cl、Br或I。
術(shù)語“雜原子”表示氮、氧或硫，包括氮和硫的任意氧化形式和任意堿性氮的季銨形式。術(shù)語“氮”還包括雜環(huán)的可取代氮。舉例而言，在具有0-4個(gè)選自氧、硫或氮的雜原子的飽和或部分不飽和環(huán)中，氮可以是N(如在3，4-二氫-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代的吡咯烷基中)。
術(shù)語“芳基”——單用或者作為更大部分的一部分，例如在“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中——表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中的至少一個(gè)環(huán)是芳族的，其中該系統(tǒng)中的每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語“芳基”可以與術(shù)語“芳基環(huán)”互換使用。
本文所用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”表示具有五至十四個(gè)環(huán)成員的非芳族單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)環(huán)系，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是雜原子，其中該系統(tǒng)中的每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。
術(shù)語“雜芳基”——單用或者作為更大部分的一部分，例如在“雜芳烷基”或“雜芳基烷氧基”中——表示具有總計(jì)五至十四個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)和三環(huán)環(huán)系，其中該系統(tǒng)中的至少一個(gè)環(huán)是芳族的，該系統(tǒng)中的至少一個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)雜原子，其中該系統(tǒng)中的每個(gè)環(huán)含有3至7個(gè)環(huán)成員。術(shù)語“雜芳基”可以與術(shù)語“雜芳基環(huán)”或術(shù)語“雜芳族”互換使用。
芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等)或雜芳基(包括雜芳烷基和雜芳基烷氧基等)可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基。在芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基的不飽和碳原子上，適合的取代基選自鹵素、氧代、N3、-R°、-OR°、-SR°、1，2-亞甲二氧基、1，2-亞乙二氧基、被保護(hù)的OH(例如酰氧基)、苯基(Ph)、被R°取代的Ph、-O(Ph)、被R°取代的-O(Ph)、-CH2(Ph)、被R°取代的-CH2(Ph)、-CH2CH2(Ph)、被R°取代的-CH2CH2(Ph)、-NO2、-CN、-N(R°)2、-NR°C(O)R°、-NR°C(O)N(R°)2、-NR°CO2R°、-NR°NR°C(O)R°、-NR°NR°C(O)N(R°)2、-NR°NR°CO2R°、-C(O)C(O)R°、-C(O)CH2C(O)R°、-CO2R°、-C(O)R°、-C(O)N(R°)2、-OC(O)N(R°)2、-S(O)2R°、-SO2N(R°)2、-S(O)R°、-NR°SO2N(R°)2、-NR°SO2R°、-C(＝S)N(R°)2、-C(＝NH)-N(R°)2或-(CH2)yNHC(O)R°，其中y是0-4，每個(gè)R°獨(dú)立地選自氫、可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)、具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫雜原子的未取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)、苯基(Ph)、-O(Ph)或-CH2(Ph)-CH2(Ph)。R°的脂族基團(tuán)上的取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基團(tuán))、N(C1-4脂族基團(tuán))2、鹵素、C1-4脂族基團(tuán)、OH、O-(C1-4脂族基團(tuán))、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基團(tuán))、-O(鹵代C1-4脂族基團(tuán))或鹵代C1-4脂族基團(tuán)。
脂族基團(tuán)或非芳族雜環(huán)可以含有一個(gè)或多個(gè)取代基。在脂族基團(tuán)或非芳族雜環(huán)的飽和碳上，適合的取代基選自如上關(guān)于芳基或雜芳基的不飽和碳所列舉的那些和下列＝O、＝S、＝NNHR*、＝NN(R*)2、＝N-、＝NNHC(O)R*、＝NNHCO2(烷基)、＝NNHSO2(烷基)或＝NR*，其中每個(gè)R*獨(dú)立地選自氫和可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)。R*的脂族基團(tuán)上的取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基團(tuán))、N(C1-4脂族基團(tuán))2、鹵素、C1-4脂族基團(tuán)、OH、O-(C1-4脂族基團(tuán))、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基團(tuán))、-O(鹵代C1-4脂族基團(tuán))或鹵代C1-4脂族基團(tuán)。
非芳族雜環(huán)氮上的取代基選自選自-R+、-N(R+)2、-C(O)R+、-CO2R+、-C(O)C(O)R+、-C(O)CH2C(O)R+、-SO2R+、-SO2N(R+)2、-C(＝S)N(R+)2、-C(＝NH)-N(R+)2或-NR+SO2R+，其中R+是氫、可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)、可選被取代的苯基(Ph)、可選被取代的-O(Ph)、可選被取代的-CH2(Pb)、可選被取代的-CH2CH2(Ph)或者未取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)。R+的脂族基團(tuán)或苯基環(huán)上的取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基團(tuán))、N(C1-4脂族基團(tuán))2、鹵素、C1-4脂族基團(tuán)、OH、O-(C1-4脂族基團(tuán))、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基團(tuán))、-O(鹵代C1-4脂族基團(tuán))或鹵代C1-4脂族基團(tuán)。
術(shù)語“亞烷基鏈”表示直鏈或支鏈碳鏈，它可以是完全飽和的或者具有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元，并且具有兩個(gè)與分子其余部分連接的點(diǎn)。
本發(fā)明化合物限于化學(xué)上可行的和穩(wěn)定的那些。因此，上述化合物中取代基或變量的組合僅當(dāng)這樣一種組合導(dǎo)致穩(wěn)定的或化學(xué)上可行的化合物時(shí)才是可允許的。穩(wěn)定的化合物或化學(xué)上可行的化合物是這樣的，當(dāng)在沒有水分或其他化學(xué)反應(yīng)條件下保持在40℃或以下的溫度下達(dá)至少一周，其化學(xué)結(jié)構(gòu)沒有實(shí)質(zhì)性改變。
除非另有規(guī)定，本文所述結(jié)構(gòu)也表示包括該結(jié)構(gòu)的全部立體化學(xué)形式；也就是就每一不對稱中心的R和S構(gòu)型。因此，本發(fā)明化合物的單一立體化學(xué)異構(gòu)體以及對映體與非對映體混合物都屬于本發(fā)明的范圍。除非另有規(guī)定，本文所述結(jié)構(gòu)也表示包括僅在一個(gè)或多個(gè)同位素富集原子的存在上有差異的化合物。例如，具有本發(fā)明結(jié)構(gòu)、但是氫被氘或氚代替或者碳被13C-或14C-富集的碳代替的化合物也屬于本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明化合物可以存在交替的互變異構(gòu)形式。除非另有指示，一種互變體的表示法也表示包括另一種。
本發(fā)明的一種實(shí)施方式涉及式Ia化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1和R2是如上關(guān)于式I化合物所定義的。
按照一種優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明涉及這樣的式I化合物，其中V1是N，V2是CH，V3是CH。
優(yōu)選的式I化合物包括這些，其中V1是C-R6，V2是CH，V3是CH或N。
本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式涉及這樣的式I化合物，其中V1是C-R6，V2是CH，V3是N。
本發(fā)明的另一種優(yōu)選實(shí)施方式涉及這樣的式I化合物，其中V1是C-R6，V2是CH，V3是CH。
按照另一種優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明涉及這樣的式Ia化合物，其中V2是CH，V3是CH。
按照另一種優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明涉及這樣的式Ia化合物，其中V2和V3各自是N。
式I或Ia的優(yōu)選R1基團(tuán)包括氫、鹵素、CN、N(R4)2和可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)。這類R1基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴、氟、NH2、NHMe、NHEt、NH-(可選被取代的苯基)、NH-環(huán)己基、NHCH2(可選被取代的苯基)、NHC(O)(可選被取代的苯基)、NHC(O)NH(可選被取代的苯基)、NHC(O)CH2(可選被取代的苯基)、NHC(O)CH2CH2(可選被取代的苯基)、N(R)C(O)(可選被取代的苯基)、NHC(O)萘基、NHC(O)噻吩基、NRC(O)噻吩基、SC(O)噻吩基、CH2C(O)噻吩基、NHC(O)吡啶基、NHC(O)呋喃基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、乙炔基和叔丁基。
當(dāng)存在時(shí)，式I或Ia的R1的苯基環(huán)的可選取代基是可選被取代的R°、鹵素、硝基、CN、OR°、SR°、N(R°)2、SO2R°、C(O)R°、C(O)OR和C(O)N(R°)2，其中每個(gè)R°定義同上。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴、氟、CN、硝基、OMe、OPh、OCF3、OCH2Ph、OEt、SCHF2、甲基、乙基、異丙基、丙基、乙烯基、CF3、乙炔基、CH2Ph、CH2NH2、CH2N(Et)2、CH2嗎啉-4-基、CH2哌啶-1-基、CH2咪唑-1-基、CH2哌嗪-1-基、C(O)NH2、C(O)Me、SO2Me、NHEt和NHMe。
當(dāng)式I或Ia的R1是T-Ar時(shí)，優(yōu)選的Ar基團(tuán)選自可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類Ar環(huán)的實(shí)例包括可選被取代的苯基、噻吩基、呋喃和吡啶基環(huán)。R1的T-Ar基團(tuán)的優(yōu)選T部分選自價(jià)鍵、-N(R)C(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-、-CH2NH-、-SC(O)-、-CH2C(O)-、-C≡C-、-CH2-或-CH2CH2-。R1的T-Ar基團(tuán)的更優(yōu)選T部分選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-CH2-、-C≡C-或-CH2CH2-。R1的T-Ar基團(tuán)的最優(yōu)選T部分選自-N(R)C(O)-、-NH-或-NHCH2-。當(dāng)存在時(shí)，Ar基團(tuán)上的優(yōu)選取代基包括氟與CF3、Me、Et、iPr、乙烯基、乙炔、Ar、Cl、CF3、硝基、CN、OMe、OPh、OCF3、SO2NH2、C(O)OEt、C(O)OH、CH2CO2H、CH2CH2CO2H、CH2NH2與C(O)NH2、噻吩基、噁唑基、異噁唑基和四唑基。
式I或Ia的優(yōu)選Q基團(tuán)選自價(jià)鍵、-CH2-或-CH2CH2-。
當(dāng)式I或Ia的R2是Q-Ar時(shí)，優(yōu)選的Ar基團(tuán)是可選被取代的環(huán)，選自5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類單環(huán)的實(shí)例包括苯基、吡啶基、嘧啶基、吡啶酮基、呋喃基、四唑基、噻吩基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。這類二環(huán)的實(shí)例包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、二氫茚-1-酮基、萘基、苯并噻吩基、2，3-二氫-1H-異吲哚基、二氫茚基、苯并呋喃基和吲哚基。
當(dāng)存在時(shí)，R2的Ar環(huán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、氧代、OR°、苯基、可選被取代的二烷基氨基、鹵代烷基、C(O)R°、NHC(O)R或SR°。這類優(yōu)選取代基的實(shí)例包括氯、溴、氟、OH、OMe、NHC(O)CH3、OEt、C(O)苯基、O苯基、N(CH2CH2Cl)2、N(Me)2、CF3和SCF3。式I或Ia的優(yōu)選Ar基團(tuán)的其他實(shí)例包括如下表1所示那些。
當(dāng)式I或Ia的R2基團(tuán)是Q-C(R)(Q-Ar)R3時(shí)，優(yōu)選的R3基團(tuán)包括R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2和N(R)Q-N(R4)2。這類R3基團(tuán)的實(shí)例包括CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、H(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
更優(yōu)選地，式I或Ia的R3基團(tuán)選自O(shè)H、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe 、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2叔丁基、苯基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
最優(yōu)選地，式I或Ia的R3基團(tuán)選自CH2CH2NH2。
由R2的Q-C(R)(Q-Ar)R3基團(tuán)的R與R3部分所生成的優(yōu)選環(huán)選自5-6元飽和的環(huán)，具有0-2個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。由R與R3所生成的這類環(huán)的實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基和硫代嗎啉基。
當(dāng)式I或Ia的R2基團(tuán)是Q-C(R)(Q-Ar)R3時(shí)，Q-C(R)(Q-Ar)R3部分的優(yōu)選Ar基團(tuán)選自可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類單環(huán)的實(shí)例包括苯基、吡啶基、呋喃基、吡啶酮和噻吩基。這類二環(huán)的實(shí)例包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、萘基、二氫茚基和吲哚基。當(dāng)存在時(shí)，R2的Q-C(R)(Q-Ar)R3基團(tuán)的Ar環(huán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、OR°、苯基、N(R°)2、NHC(O)R°或SR°。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氟、氯、溴、CF3、OH、OMe、OPh、OCH2Ph、SMe、NH2、NHC(O)Me、甲基、乙基、異丙基、異丁基和環(huán)丙基。
當(dāng)存在時(shí)，式I或Ia的優(yōu)選R6基團(tuán)選自鹵素、R和Ar1。當(dāng)存在時(shí)，式I或Ia的更優(yōu)選R6基團(tuán)選自鹵素、可選被取代的C1-4脂族基團(tuán)、或可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴、甲基、乙基、叔丁基、環(huán)丙基、異丙基、苯基和吡啶基。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及式I’化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2、T-R或T’-Ar；T選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；T’是C1-6亞烷基鏈，其中T’的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2選自Q-Ar、Q-N(R5)2或Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中
R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若V1、V2和V3各自是CH，R1是氫，則R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R3不是R’、Q-OC(O)R5或OCH2苯基。
式I’的優(yōu)選R1和R2基團(tuán)是如上關(guān)于式I和Ia化合物所述那些。當(dāng)R1是T’-Ar時(shí)，式I’的優(yōu)選T’基團(tuán)選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-、-CH2NH-、-CH2-、-C≡C-或-CH2CH2-。式I’的更優(yōu)選T’基團(tuán)選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-或-CH2NH-。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及式Ib化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R3、Q和Ar如上關(guān)于式I化合物所定義的。
式Ib的優(yōu)選R1基團(tuán)包括如上關(guān)于式I和Ia化合物所述那些。
式Ib的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)是如上關(guān)于式I化合物所述的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)。
式Ib的優(yōu)選Q基團(tuán)包括如上關(guān)于式I和Ia化合物所述那些。
式Ib的優(yōu)選Ar基團(tuán)包括可選被取代的環(huán)，選自5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類單環(huán)的實(shí)例包括苯基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。這類二環(huán)的實(shí)例包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、二氫茚-1-酮基、萘基、苯并噻吩基、2，3-二氫-1H-異吲哚基、二氫茚基、苯并呋喃基和吲哚基。當(dāng)存在時(shí)，式Ib的Ar基團(tuán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、OR°、苯基、可選被取代的二烷基氨基、鹵代烷基、C(O)R°或SR°。這類優(yōu)選取代基的實(shí)例包括四唑基、噁唑基、異噁唑基、氯、溴、氟、OH、OMe、OEt、C(O)苯基、O苯基、N(CH2CH2Cl)2、N(Me)2、CF3和SCF3。
式Ib的優(yōu)選R3基團(tuán)包括R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2和N(R)Q-N(R4)2。這類R3基團(tuán)的實(shí)例包括CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
更優(yōu)選地，式Ib的R3基團(tuán)選自O(shè)H、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2叔丁基、苯基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
最優(yōu)選地，式Ib的R3基團(tuán)選自CH2CH2NH2。
由式Ib的Q-C(R)(Q-Ar)R3基團(tuán)的R與R3部分所生成的優(yōu)選環(huán)選自5-6元飽和的環(huán)，具有0-2個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。由R與R3所生成的這類環(huán)的實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基和硫代嗎啉基。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式涉及式IIa化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2或T-R；T選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR、CO2R、CON(R)2、SO2R、SO2N(R)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若R1是氫，則R3不是R’、Q-OC(O)R5或OCH2苯基。
式IIa的優(yōu)選R1基團(tuán)包括鹵素、N(R4)2和可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴、氟、NH2、NHMe、NHEt、NH-環(huán)己基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、乙炔基和叔丁基。
式IIa的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)是如上關(guān)于式I化合物所述的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)。
式IIa的優(yōu)選Q基團(tuán)選自價(jià)鍵、-CH2-或-CH2CH2-。
式IIa的優(yōu)選R3基團(tuán)包括R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2和N(R)Q-N(R4)2。這類R3基團(tuán)的實(shí)例包括CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
更優(yōu)選地，式IIa的R3基團(tuán)選自O(shè)H、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2叔丁基、苯基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
最優(yōu)選地，式IIa的R3基團(tuán)選自CH2CH2NH2。
由式IIa的R2的R與R3部分所生成的優(yōu)選環(huán)選自5-6元飽和的環(huán)，具有0-2個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。由R與R3所生成的這類環(huán)的實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基和硫代嗎啉基。
式IIa的R2的優(yōu)選Ar基團(tuán)選自可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類單環(huán)的實(shí)例包括苯基、吡啶基、呋喃基和噻吩基。這類二環(huán)的實(shí)例包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、萘基、二氫茚基和吲哚基。當(dāng)存在時(shí)，式IIa的R2的Q-C(R)(Q-Ar)R3基團(tuán)的Ar環(huán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、OR°、苯基、N(R°)2、NHC(O)R°或SR°。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氟、氯、溴、CF3、OH、OMe、OPh、OCH2Ph、SMe、NH2、NHC(O)Me、甲基、乙基、異丙基、異丁基和環(huán)丙基。
本發(fā)明的另一種實(shí)施方式涉及式IIb化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中
R1是T-Ar；每個(gè)T獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；
其條件是若V1、V2和V3各自是CH，T是價(jià)鍵，R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中Ar是可選被取代的苯基環(huán)，則R3不是Q-OR5或C(O)NH2。
式IIb的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)是如上關(guān)于式I化合物所述那些。
式IIb的R1的優(yōu)選Ar基團(tuán)選自可選被取代的5-6元芳基環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。式IIb的R1的T-Ar基團(tuán)的優(yōu)選T部分選自價(jià)鍵、-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-、-CH2NH-、-C≡C-、-CH2-或-CH2CH2-。R1的T-Ar基團(tuán)的最優(yōu)選T部分選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-CH2-或-CH2CH2-。式IIb的R1基團(tuán)的實(shí)例包括NHCH2(可選被取代的苯基)、NHC(O)(可選被取代的苯基)、NHC(O)NH(可選被取代的苯基)、NHC(O)CH2(可選被取代的苯基)、NHC(O)CH2CH2(可選被取代的苯基)、NHC(O)(可選被取代的苯基)、NHC(O)萘基、NHC(O)噻吩基、NHC(O)吡啶基、NHC(O)呋喃基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、乙炔基和叔丁基。
當(dāng)存在時(shí)，式IIb的R1的Ar基團(tuán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、硝基、CN、OR°、SR°、N(R°)2、SO2R°、C(O)R°、C(O)OR和C(O)N(R°)2，其中每個(gè)R°定義同上。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氯、溴、氟、CN、硝基、OMe、OPh、OCF3、OCH2Ph、OEt、SCHF2、甲基、乙基、異丙基、丙基、乙烯基、CF3、乙炔基、CH2Ph、CH2NH2、CH2N(Et)2、CH2嗎啉-4-基、CH2哌啶-1-基、CH2咪唑-1-基、CH2哌嗪-1-基、C(O)NH2、C(O)Me、SO2Me、NHEt和NHMe。
式IIb的優(yōu)選Q基團(tuán)是如上關(guān)于式I和Ib化合物所述那些。
式IIb的優(yōu)選R3基團(tuán)包括R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2和N(R)Q-N(R4)2。這類R3基團(tuán)的實(shí)例包括CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
更優(yōu)選地，式IIb的R3基團(tuán)選自CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2叔丁基、苯基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
最優(yōu)選地，式IIb的R3基團(tuán)選自CH2CH2NH2。
由式IIb的R2的R與R3部分所生成的優(yōu)選環(huán)選自5-6元飽和的環(huán)，具有0-2個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。由R與R3所生成的這類環(huán)的實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基和硫代嗎啉基。
式IIb的R2的優(yōu)選Ar基團(tuán)選自可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。這類單環(huán)的實(shí)例包括苯基、吡啶基、嘧啶基、吡啶酮基、呋喃基、四唑基、噻吩基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。這類二環(huán)的實(shí)例包括苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、二氫茚-1-酮基、萘基、苯并噻吩基、2，3-二氫-1H-異吲哚基、二氫茚基、苯并呋喃基和吲哚基。當(dāng)存在時(shí)，式IIb的R2的Q-C(R)(Q-Ar)R3基團(tuán)的Ar環(huán)上的優(yōu)選取代基包括R°、鹵素、OR°、苯基、N(R°)2、NHC(O)R°或SR°。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氟、氯、溴、CF3、OH、OMe、OPh、OCH2Ph、SMe、NH2、NHC(O)Me、甲基、乙基、異丙基、異丁基和環(huán)丙基。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及式III化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R3、Q和Ar是如上關(guān)于式I化合物所定義的。式III的優(yōu)選V1、V2、V3、R1、R3、Q和Ar基團(tuán)是如上關(guān)于式I或Ib化合物所述那些。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及式IV化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1、R3、Q和Ar是如上關(guān)于式I化合物所定義的。式IV的優(yōu)選V1、V2、V3、R1、R3、Q和Ar基團(tuán)是如上關(guān)于式I或Ib化合物所述那些。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及式V化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
式V的優(yōu)選Ar基團(tuán)是如上關(guān)于式I或Ib化合物所述那些。
式V的優(yōu)選V1、V2和V3基團(tuán)是如上關(guān)于式I或Ib化合物所述那些。
式V的優(yōu)選R2基團(tuán)是如上關(guān)于式I或Ib化合物所述那些。
代表性式I化合物如下表1所述。
表1



















本發(fā)明化合物可以如下流程I-XVII、本文所述合成實(shí)施例和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的一般方法所述加以制備。
流程I 試劑(a)N2H4·H2O，BuOH，回流；(b)SnCl2·2H2O，BuOH，回流。
上述流程I顯示制備其中R1不是氫的氨基吲唑化合物3的一般方法。當(dāng)R1是烷基或芳基時(shí)，可以制備硝基吲唑化合物2，方法基本上與Henke，et al，J.Med.Chem.，1997，40，2706所述相似。在步驟(b)還原硝基得到化合物3，方法如Bellamy，et al，Tetrahedron Lett.，1984，25，839所述。作為替代選擇，可以在Pd/C的存在下將化合物2用氫氣處理，實(shí)現(xiàn)2的硝基的還原，方法基本上與Boyer，et al，J Chem.Res.Miniprint，1990，11，2601所述相似。另一種實(shí)現(xiàn)化合物2硝基的還原的方法是水解，方法基本上與Lee，et al，Synthesis，2001，1，81所述相似。
流程II 試劑(a)N2H4·H2O，BuOH，回流；(b)SnCl2·2H2O，BuOH，回流。
上述流程II顯示制備其中R1是氨基或烷基氨基的氨基吲唑化合物3的一般方法?？梢詮?-氟-5-硝基芐腈(1)制備硝基吲唑化合物2，方法基本上與Parnell，et al，J.Chem.Soc.，1959，2363所述相似。然后可以從化合物2制備氨基吲唑化合物3，如上流程I所述。
流程III
試劑(a)Cl2，乙酸；(b)H2，Pd/C。
上述流程III顯示制備其中R1是鹵素的式I化合物的方法。例如，可以使5-硝基-1H-吲唑(5)氯化，得到3-氯-5-硝基-1H-吲唑6，方法采用v.Auwers，et al，Justus Liebigs Ann.Chem.，1927，451，295。作為替代選擇，可以將硝基吲唑5用N-氯琥珀酰亞胺處理，生成3-氯硝基吲唑6。還原6可以生成氨基化合物7，方法如Boyer，et al.，J Chem.Res.Miniprint，1990，11，2601所述。
流程IV 上述流程IV概括制備式I化合物的合成途徑。利用本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)條件，使起始的氨基吲唑3與羧酸化合物8偶聯(lián)，生成式I化合物。在必要時(shí)，可以在偶聯(lián)之前保護(hù)R2的反應(yīng)性官能團(tuán)。在某些情況下，用Boc基團(tuán)保護(hù)吲唑環(huán)NH可以提高偶聯(lián)反應(yīng)的收率。
流程V 試劑(a)KHMDS，THF，-78℃；(b)LiOH，MeOH，H2O.
上述流程V顯示制備α-羥基酸12的一般方法，12用于按照流程IV所述方法制備其中R3是OH的式Ib化合物。從9和10生成α-羥基酯化合物11，方法基本上與Hernandez，et al，J.Org.Chem.，1995，60，2683所述相似。氧氮雜環(huán)丙烷試劑10可以按照Davies，et al.，J.Org.Chem.，1988，53，2087所述工藝加以制備。
流程VI 試劑(a)MsCl，吡啶，THF；(b)NHR，吡啶，THF；(c)TFA，CH2Cl2.
上述流程VI顯示從如上流程V所述其中R3是羥基的式Ib化合物制備其中R3是多種氨基的式Ib化合物的一般方法?？梢詫⒒衔?3在THF中用甲磺酰氯和吡啶處理，得到甲磺?；苌?4。甲磺酰基然后可以被所需的氨基置換，得到化合物15。除去Boc保護(hù)基團(tuán)，得到化合物16。每一步都是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。
流程VII 試劑(a)NBS，hv，CCl4；(b)NHR，K2CO3，THF；(c)LiOH，THF，H2O.
上述流程VII顯示制備羧酸中間體的方法，該中間體可用于制備其中R3是氨基的式Ib化合物。這種方法可以用于制備其中R3是式N(R4)2、N(R)COTnN(R4)2或N(R)TnN(R4)2多種氨基的式Ib化合物。上述步驟每一步都是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。然后可以按照流程IV使羧酸化合物20與氨基吲唑偶聯(lián)，得到式Ib化合物。
流程VIII
試劑(a)I2，KOH，DMF，室溫上述流程VIII顯示從5-硝基吲唑(5)制備3-碘-5-硝基吲唑(21)，方法基本上與已公布的PCT申請WO 02/10137所述相似。
流程IX 試劑(a)Br2，AcOH，回流。
上述流程IX顯示3-溴-5-硝基吲唑的制備方法，方法基本上與Benchidimi，et al，J Het.Chem.，1979，16，1599所述相似。
流程IX 試劑(a)Pd(PPh3)2Cl2，CuI，Et3N，DMF，50℃。
上述流程IX顯示其中R1是炔基的式I化合物的一般制備方法。借助Sonograshira偶聯(lián)法，使溴吲唑(22)與丙炔(23)偶聯(lián)，得到5-硝基-3-丙-1-炔基-1H-吲唑(24)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，多種炔烴可進(jìn)行上述反應(yīng)，可用于制備多種其中R1基團(tuán)的T部分是炔基的式I化合物。
流程X
試劑(a)MEMCl，NaHMDS，THF，室溫；(b)RB(OH)2，Pd(dppf)2Cl2，K2PO4，DME，室溫.
上述流程X顯示硝基吲唑(2)的替代制備方法?？梢员Ｗo(hù)碘吲唑化合物21的NH-基團(tuán)。盡管上面描繪了MEM-保護(hù)基團(tuán)的使用，不過本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到多種保護(hù)基團(tuán)都將適合于上述反應(yīng)。其他氨基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域熟知的，詳細(xì)描述在Protecting Groups inOrganic Synthesis，Theodora W. Greene and Peter G.M.Wuts，1991，published by John Wiley and Sons中。利用本領(lǐng)域熟知的Suzuki偶聯(lián)法使氨基被保護(hù)的碘吲唑(25)與烴基代硼酸偶聯(lián)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到多種烴基代硼酸都可以用在Suzuki偶聯(lián)中，從而得到多種其中R1是烷基或芳基的吲唑(26)。
流程XI 試劑(a)NaNO2，AcOH，回流。
上述流程XI顯示7-氯-5-硝基吲唑(28)的一般制備方法，在乙酸的存在下將2-氯-6-甲基-4-硝基苯基胺(27)用硝酸鈉處理。
流程XII 試劑(a)R6B(OH)2，Pd(PPh3)4，Na2CO3，DME，aq.EtOH；(b)NaNO2，AcOH，回流。
上述流程XII顯示制備在7-位具有R6取代基的式I化合物(31)的一般方法。在步驟(a)，利用Suzuki偶聯(lián)條件使2-溴-6-甲基-4-硝基苯基胺(29)與烴基代硼酸偶聯(lián)，生成中間體化合物(30)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到多種烴基代硼酸都適合于上述反應(yīng)，將可用于制備多種在吲唑環(huán)7-位具有R6取代基的式I化合物(31)。在步驟(b)將中間體(30)用硝酸鈉和乙酸在回流下處理，生成吲唑環(huán)。
流程XIV 試劑(i)LDA，-78℃；(ii)ICH2CN，-78℃至環(huán)境溫度，THF；(b)H2，PtO2，HCl，MeOH；(C)8M HCl，回流；(d)(Boc)2O，Na2CO3，aq.THF，環(huán)境溫度。
上述流程XIV顯示制備被保護(hù)的氨基酸中間體(36)的一般方法，該中間體可用于制備其中R3是TnN(R4)2的式Ib化合物。氰基化合物(33)是這樣制備的，將酯(17)用二異丙氨基化鋰(LDA)在-78℃下處理，然后加入碘乙腈。在鈀催化劑的存在下用氫還原腈，方法基本上與Prager，et al，Aust.J.Chem.，1997，50，813所述相似。水解所得胺(34)，生成酸化合物35。然后如下用BOC基團(tuán)保護(hù)氨基，在含水碳酸鈉的存在下，在四氫呋喃中，將35用BOC-酸酐處理。其他氨基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域熟知的，詳細(xì)描述在Protecting Groups in OrganicSynthesis，Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts，1991，publishedby John Wiley and Sons中。
流程XV 試劑(a)丙烯酸叔丁基酯，KOtBu，THF，-78℃至室溫；(b)TFA，DCM；(c)DPPA，PhMe，室溫；(d)tBuOH，SnCl2(cat)，80℃；(e)LiOH，aq.THF.
上述流程XV顯示制備被保護(hù)的氨基酸中間體36的替代方法，該中間體可用于制備其中R3是TnN(R4)2的式Ib化合物。丙烯酸叔丁基酯向酯17陰離子的Michael加成得到二酯37。選擇性裂解化合物37的叔丁基酯，得到酸中間體38。然后將單酯38先后用疊氮化二苯基磷酰和叔丁醇處理，得到BOC-保護(hù)的氨基酯39。酯的水解得到所需被保護(hù)的氨基酸中間體(36)。
流程XVI 試劑(a)H2，Pd/C；(b)Ac2O；(c)NOCl；(d)苯，回流；(e)KOH，乙醇，回流。
上述流程XVI顯示制備其中V3是N的本發(fā)明化合物的一般方法。從氨基被保護(hù)的吡啶化合物40制備吡啶并吡唑中間體41，該中間體可用于制備其中V3是N的本發(fā)明化合物，方法基本上與Foster，H.E.et.al.，J.Chem.Soc.，Perkin Trans 1，1973，2901所述相似。
流程XVII 試劑(a)P2S5，二甲苯，回流；(b)NaNH2，RCl上述流程XVI顯示制備其中式I的R1基團(tuán)的T部分的亞甲基單位被-O-或-S-代替的本發(fā)明化合物的一般方法。生成吲唑42的方法基本上與Pfannstiel，K.et.al.，Ber1942，75B，1096和Vicente，J et al.，Heterocycles，1997，45(1)，129所述相似。按照Kuroda，T.et al.JP50130759所述工藝，從化合物42合成吲唑45。
流程XVIII 上述流程XVIII顯示制備其中V1是氮的式I化合物的一般流程，方法基本上與Fanta，Org.Synth.Coll.，4，844所述相似。
流程XIX
試劑(a)N2H4·H2O，BuOH，回流；(b)(Boc)2O，EtiPr2N，DMAP(cat)，THF，室溫；(c)RC(O)Cl，Py；(d)H2，Pd/C，MeOH，室溫；(e)R2CO2H，PyBroP，DCM；(f)RC(O)Cl，EtiPr2N，DCM；(g)TFA，DCM.
上述流程XVIII顯示制備其中R1是NH2、NHC(O)R或NHC(O)Ar的本發(fā)明化合物的合成途徑?？梢詫㈦?用肼處理，得到3-氨基吲唑49。內(nèi)環(huán)氮的選擇性Boc-保護(hù)、繼之以外環(huán)氮的酰化，得到5-硝基吲唑51。硝基可以被氫化作用還原(流程III)，使所得氨基與酸8偶聯(lián)(流程IV)。作為替代選擇，5-硝基吲唑50的氫化作用得到3，5-二氨基吲唑52。用酸8選擇性酰化，得到吲唑53，后者可以被加工得到吲唑54。所有所用方法都是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
按照本領(lǐng)域已知的方法，可以體外、體內(nèi)或者在細(xì)胞系中測定用在本發(fā)明中的化合物作為AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶抑制劑的活性。體外測定法包括測定活化AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK的磷酸化活性或ATP酶活性的抑制作用。可供替代的體外測定法量化抑制劑與AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK結(jié)合的能力。抑制劑的結(jié)合可以這樣測量，在結(jié)合之前放射性標(biāo)記抑制劑，分離抑制劑/AKT、抑制劑/PKA、抑制劑/PDK1、抑制劑/p70S6K或抑制劑/ROCK復(fù)合體，測定所結(jié)合的放射性標(biāo)記的量。作為替代選擇，抑制劑的結(jié)合可以這樣測定，進(jìn)行競爭實(shí)驗(yàn)，其中將化合物與AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK一起培育，這些激酶與已知的放射性配體結(jié)合。測定用在本發(fā)明中的化合物作為AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶抑制劑的詳細(xì)條件如下實(shí)施例所述。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供組合物，包含本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物和藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑。化合物在本發(fā)明組合物中的量是這樣的，它有效可測量地抑制生物樣本或患者中的蛋白激酶，確切為AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物被配制成用于對需要這類組合物的患者給藥。最優(yōu)選地，本發(fā)明組合物被配制成用于對患者口服給藥。
本文所用的術(shù)語“患者”表示動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選人類。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑”表示無毒的載體、助劑或賦形劑，它不破壞與之配制的化合物的藥理活性?？梢杂迷诒景l(fā)明組合物中的藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、緩沖物質(zhì)(例如磷酸鹽)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)(例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽)、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
本文所用的術(shù)語“可測量地抑制”表示在包含所述組合物和AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶的樣本與包含AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶而沒有所述組合物的等價(jià)樣本之間，AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK活性的可測量的變化。
“藥學(xué)上可接受的鹽”表示本發(fā)明化合物的任何無毒的鹽或酯的鹽，一旦對接受者給藥，即能夠直接或間接提供本發(fā)明化合物或其抑制性的活性代謝產(chǎn)物或殘余物。本文所用的術(shù)語“其抑制活性代謝產(chǎn)物或殘余物”意味著其代謝產(chǎn)物或殘余物也是AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK家族激酶的抑制劑。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括從藥學(xué)上可接受的無機(jī)與有機(jī)酸和堿衍生的那些。適合的酸鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、乙醇酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽、果膠酯酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其他的酸、例如草酸，盡管本身不是藥學(xué)上可接受的，不過在獲得本發(fā)明化合物和它們的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽時(shí)可以用于制備可用作中間體的鹽。
從適當(dāng)?shù)膲A衍生的鹽包括堿金屬(例如鈉和鉀)、堿土金屬(例如鎂)、銨和N+(C1-4烷基)4鹽。本發(fā)明也涵蓋本文所公開的化合物的任何含堿性氮基團(tuán)的季銨化。借助這類季銨化可以得到水或油可溶性或可分散性產(chǎn)物。
本發(fā)明組合物可以被口服、腸胃外、吸入噴霧、局部、直腸、鼻、頰、陰道或者經(jīng)由植入藥庫給藥。本文所用的術(shù)語“腸胃外”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損傷內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。優(yōu)選地，組合物是口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥的。本發(fā)明組合物的無菌可注射形式可以是水性或油性混懸液。這些混懸液可以按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)加以配制，使用適合的分散或濕潤劑和懸浮劑。無菌可注射的制備物也可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射的溶液或混懸液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢圆捎玫目山邮艿妮d體和溶劑有水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，習(xí)慣上采用無菌的不揮發(fā)油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。
為此，可以采用任意品牌的不揮發(fā)油，包括合成的單-或二-甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物，可用于制備注射劑，因?yàn)樗鼈兪翘烊坏乃帉W(xué)上可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化形式。這些油溶液或懸液還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或相似的分散劑，它們常用于配制藥學(xué)上可接受的劑型，包括乳劑和懸液。出于配制的目的，還可以使用其他常用的表面活性劑，例如吐溫類、司盤類和其他乳化劑或生物利用度增強(qiáng)劑，它們常用于制造藥學(xué)上可接受的固體、液體或其他劑型。
本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物可以被口服給藥，任意口服可接受的劑型包括但不限于膠囊劑、片劑、水懸液或溶液。在口用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。也通常加入潤滑劑，例如硬脂酸鎂。關(guān)于膠囊劑型口服給藥，有用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)口用需要水懸液時(shí)，將活性成分與乳化及懸浮劑混合。如果需要的話，還可以加入某些甜味劑、矯味劑或著色劑。
作為替代選擇，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物可以是栓劑的形式，用于直腸給藥。它們可以這樣制備，將藥物與適合的無刺激性賦形劑混合，后者在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸內(nèi)熔化，釋放藥物。這類材料包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物還可以被局部給藥，尤其當(dāng)治療目標(biāo)包括局部用藥容易達(dá)到的部位或器官時(shí)，包括眼、皮膚或下腸道的疾病。適合的局部制劑容易根據(jù)每個(gè)這些部位或器官加以制備。
下腸道局部用藥可以利用直腸栓劑(見上)或適合的灌腸劑進(jìn)行。還可以使用局部透皮貼劑。
就局部用藥而言，藥學(xué)上可接受的組合物可以配制在適合的軟膏中，其中含有懸浮或溶解在一種或多種載體中的活性組分。本發(fā)明化合物的局部給藥載體包括但不限于礦物油、液體礦脂、白礦脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。作為替代選擇，藥物組合物可以配制成適合的洗劑或霜?jiǎng)?，其中含有懸浮或溶解在一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中的活性組分。適合的載體包括但不限于礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
就眼用而言，藥學(xué)上可接受的組合物可以被配制成在等滲的pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的微粉化懸液或者優(yōu)選地在等滲的pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中的溶液，二者都含有或沒有防腐劑，例如苯扎氯銨。作為替代選擇，關(guān)于眼用，藥物組合物可以配制在軟膏中，例如礦脂。
本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物還可以借助鼻氣霧劑或吸入給藥。這類組合物是按照藥物制劑領(lǐng)域熟知的技術(shù)制備的，可以制成鹽水溶液，采用苯甲醇或其他適合的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物和/或其他常規(guī)的增溶劑或分散劑。
最優(yōu)選地，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的組合物被配制成用于口服給藥。
可以與載體材料混合制備單一劑型的本發(fā)明化合物的量將因所治療的患者和特定的給藥方式而異。優(yōu)選地，組合物應(yīng)當(dāng)是這樣配制的，以便可以對接受這些組合物的患者給以劑量在0.01-100mg/kg體重/天的抑制劑。
還應(yīng)當(dāng)理解的是就任意特定患者而言的具體劑量和治療方案將依賴于各種因素，包括所采用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄速率、藥物組合、主治醫(yī)師的判斷和所治療特定疾病的嚴(yán)重性。本發(fā)明化合物在組合物中的量還將依賴于組合物中的特定化合物。
依賴于所要治療或預(yù)防的特定病癥或疾病，在本發(fā)明組合物中還可以存在通常為治療或預(yù)防該病癥而給藥的另外的治療劑。本文所用的通常為治療或預(yù)防特定疾病或病癥而給藥的另外的治療劑已知也稱“就所治療的疾病或病癥而言是適當(dāng)?shù)摹薄?br> 例如，可以將化學(xué)治療劑或其他抗增殖劑與本發(fā)明化合物聯(lián)合治療增殖性疾病和癌癥。已知化學(xué)治療劑的實(shí)例包括但不限于GleevecTM、阿霉素、地塞米松、長春新堿、環(huán)磷酰胺、氟尿嘧啶、托泊替康、紫杉醇、干擾素和鉑衍生物。
其他可以與本發(fā)明抑制劑聯(lián)合的藥物的實(shí)例非限制性地包括治療阿爾茨海默氏病的，例如Aricept和Excelon；治療帕金森氏病的，例如L-多巴/卡比多巴、恩他卡朋、羅匹尼羅、普拉克索、溴隱亭、培高利特、苯海索和金剛烷胺；治療多發(fā)性硬化(MS)的藥物，例如β-干擾素(例如Avonex和Rebif)、Copaxone和米托蒽醌；治療氣喘的，例如沙丁胺醇和Singulair；治療精神分裂癥的藥物，例如再普樂(zyprexa)、維思通(risperdal)、思瑞康(seroquel)和氟哌啶醇；抗炎劑，例如皮質(zhì)類固醇、TNF阻滯劑、IL-1 RA、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺和柳氮磺胺吡啶；免疫調(diào)制與免疫制劑劑，例如環(huán)孢菌素、他克莫司、雷帕霉素、麥考酚酸嗎乙酯(mycophenolate mofetil)、干擾素、皮質(zhì)類固醇、環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤和柳氮磺胺吡啶；神經(jīng)營養(yǎng)因子，例如乙酰膽堿酯酶抑制劑、MAO抑制劑、干擾素、抗驚厥劑、離子通道阻滯劑、利魯唑和治帕金森氏病藥；治療心血管疾病的藥物，例如β-阻滯劑、ACE抑制劑、利尿劑、硝酸酯、鈣通道阻滯劑和他汀類；治療肝疾病的藥物，例如皮質(zhì)類固醇、考來烯胺、干擾素和抗病毒劑；治療血液障礙的藥物，例如皮質(zhì)類固醇、治白血病藥和生長因子；和治療免疫缺陷障礙的藥物，例如γ-球蛋白。
另外的治療劑在本發(fā)明組合物中的含量將不多于通常在包含該治療劑作為唯一活性成分的組合物中給藥的量。優(yōu)選地，另外的治療劑在本文所公開的組合物中的量將是通常在包含該治療劑作為唯一治療活性成分的組合物中的含量的約50％至100％。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及抑制生物樣本中AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶活性的方法，包含使所述生物樣本與本發(fā)明化合物或包含所述化合物的組合物接觸的步驟。優(yōu)選地，該方法包含使所述生物樣本與如上所述的本發(fā)明的優(yōu)選化合物接觸的步驟。
本文所用的術(shù)語“生物樣本”非限制性地包括細(xì)胞培養(yǎng)物或其提取物；從哺乳動(dòng)物得到的活組織檢查材料或其提取物；和血液、唾液、尿、糞、精液、淚或其他體液或其提取物。
生物樣本中AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶活性的抑制作用可用于本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種目的。這類目的的實(shí)例包括但不限于輸血、器官移植、生物樣本貯存和生物測定。
本發(fā)明的另一方面涉及治療AKT-、PKA-、PDK1-、p70S6K-或ROCK-介導(dǎo)的患者疾病的方法，該方法包含對需要的患者給以治療有效量的本發(fā)明化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。按照優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明涉及給以式I’化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。更優(yōu)選的實(shí)施方式涉及給以如上所述的式I’優(yōu)選化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及治療AKT-、PKA-、PDK1-、p70S6K-或ROCK-介導(dǎo)的患者疾病的方法，該方法包含對需要的患者給以治療有效量的式IIa、IIb或V化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。按照另一種實(shí)施方式，所述方法包含對需要的患者給以治療有效量的如上所述的式IIa、IIb或V優(yōu)選化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及治療AKT-、PKA-、PDK1-、p70S6K-或ROCK-介導(dǎo)的患者疾病的方法，該方法包含對需要的患者給以治療有效量的式III或IV化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。按照另一種實(shí)施方式，所述方法包含對需要的患者給以治療有效量的如上所述的式III或IV優(yōu)選化合物或包含所述化合物的藥學(xué)上可接受的組合物。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或減輕AKT-介導(dǎo)的患者疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，包含對所述患者給以根據(jù)本發(fā)明的組合物的步驟。
本文所用的術(shù)語“AKT-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”表示已知AKT在其中扮演角色的任何疾病或其他有害病癥。術(shù)語“AKT-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”還表示因AKT抑制劑治療而緩解的那些疾病或病癥。AKT-介導(dǎo)的疾病或病癥包括但不限于增殖性障礙、癌癥、心血管障礙、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和神經(jīng)變性障礙。優(yōu)選地，所述癌癥選自胰腺癌、前列腺癌或卵巢癌。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或減輕PKA-介導(dǎo)的患者疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，包含對所述患者給以根據(jù)本發(fā)明的組合物的步驟。
本文所用的術(shù)語“PKA-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”表示已知PKA在其中扮演角色的任何疾病或其他有害病癥。術(shù)語“PKA-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”還表示因PKA抑制劑治療而緩解的那些疾病或病癥。PKA-介導(dǎo)的疾病或病癥包括但不限于增殖性障礙和癌癥。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或減輕PDK1-介導(dǎo)的患者疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，包含對所述患者給以根據(jù)本發(fā)明的組合物的步驟。
本文所用的術(shù)語“PDK1-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”表示已知PDK1在其中扮演角色的任何疾病或其他有害病癥。術(shù)語“PDK1-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”還表示因PDK1抑制劑治療而緩解的那些疾病或病癥。PDK1-介導(dǎo)的疾病或病癥包括但不限于增殖性障礙和癌癥。優(yōu)選地，所述癌癥選自胰腺癌、前列腺癌或卵巢癌。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或減輕p70S6K-介導(dǎo)的患者疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，包含對所述患者給以根據(jù)本發(fā)明的組合物的步驟。
本文所用的術(shù)語“p70S6K-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”表示已知p70S6K在其中扮演角色的任何疾病或其他有害病癥。術(shù)語“p70S6K-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”還表示因p70S6K抑制劑治療而緩解的那些疾病或病癥。p70S6K-介導(dǎo)的疾病或病癥包括但不限于增殖性障礙，例如癌癥和結(jié)節(jié)狀硬化。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明提供治療或減輕ROCK-介導(dǎo)的患者疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，包含對所述患者給以根據(jù)本發(fā)明的組合物的步驟。
本文所用的術(shù)語“ROCK-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”表示已知ROCK在其中扮演角色的任何疾病或其他有害病癥。術(shù)語“ROCK-介導(dǎo)的病癥”或“疾病”還表示因ROCK抑制劑治療而緩解的那些疾病或病癥。這類病癥非限制性地包括高血壓、心絞痛、腦血管收縮、氣喘、外周循環(huán)障礙、早產(chǎn)、癌癥、動(dòng)脈硬化、痙攣、視網(wǎng)膜病、炎癥、自體免疫障礙、AIDS和骨質(zhì)疏松。
按照另一種實(shí)施方式，本發(fā)明涉及治療或減輕疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，選自增殖性障礙、心臟障礙、炎癥、自體免疫障礙、病毒疾病或骨障礙，其中所述方法包含給以有效量本發(fā)明化合物的步驟。優(yōu)選地，所述方法包含給以有效量本發(fā)明優(yōu)選化合物的步驟。
按照優(yōu)選的實(shí)施方式，本發(fā)明涉及治療或減輕疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，選自癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、氣喘、HIV、心絞痛、外周循環(huán)障礙、高血壓、動(dòng)脈硬化或骨質(zhì)疏松。
優(yōu)選地，本發(fā)明涉及治療或減輕癌癥嚴(yán)重性的方法。
更優(yōu)選地，本發(fā)明涉及治療或減輕癌癥嚴(yán)重性的方法，選自腦(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、乳腺、結(jié)腸、頭頸、腎、肺、肝、黑瘤、卵巢、胰腺、前列腺、肉瘤或甲狀腺的癌癥。
最優(yōu)選地，本發(fā)明涉及治療或減輕胰腺、前列腺或卵巢癌癥的嚴(yán)重性的方法。
在可供替代的實(shí)施方式中，采用不含另外的治療劑的組合物的本發(fā)明方法包含對所述患者分開給以另外的治療劑的另外的步驟。當(dāng)這些附加治療劑被分開給藥時(shí)，它們可以在本發(fā)明組合物的給藥之前、同時(shí)或之后對患者給藥。
本發(fā)明化合物或其藥物組合物還可以被摻入到用于涂覆可植入醫(yī)藥裝置的組合物中，例如假體、人工瓣膜、血管移植物、斯滕特氏印模和導(dǎo)管。血管斯滕特氏印模例如已經(jīng)用于克服再狹窄(血管壁在損傷之后的再狹窄)。不過，采用斯滕特氏印?；蚱渌芍踩胙b置的患者面臨凝塊形成或血小板活化的危險(xiǎn)。用包含本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的組合物預(yù)先涂覆該裝置，可以防止或緩和這些副作用。美國專利6,099,562、5,886,026和5,304,121描述了適合的涂層和涂覆可植入裝置的一般制備。涂層通常是生物相容性聚合材料，例如水凝膠聚合物、聚甲基二硅氧烷、聚己內(nèi)酯、聚乙二醇、聚乳酸、乙烯乙酸亞乙酯和它們的混合物。涂層可以可選地進(jìn)一步被適合的氟硅酮、多糖、聚乙二醇、磷脂或其組合的表層所覆蓋，以賦予組合物以控制釋放特征。涂有本發(fā)明組合物的可植入裝置是本發(fā)明的另一種實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式
為了可以更加充分地理解本文所述發(fā)明，闡述下列實(shí)施例。應(yīng)當(dāng)理解的是這些實(shí)施例僅供例證，決不被解釋為限制本發(fā)明。
合成實(shí)施例本文所用的術(shù)語“Rt(min)”表示HPLC保留時(shí)間，以分鐘計(jì)，與化合物有關(guān)。除非另有指示，用于獲得所報(bào)道的保留時(shí)間的HPLC方法如下柱子XTerra C8柱，4.6×150mm梯度0-100％乙腈+甲醇60∶40(20mM Tris磷酸鹽)流速1.51mL/分鐘檢測225nm實(shí)施例1 2-(3-氯-苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-乙酰胺(I-6)向5-氨基吲唑(1mmol)、HOBt(1mmol)與3-氯苯基乙酸(1.1mmol)的DMF(4mL)溶液加入N-甲基嗎啉(1.1mmol)。攪拌10分鐘后，加入EDC HCl(1.1mmol)，將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。濃縮反應(yīng)混合物，殘余物經(jīng)過反相制備型HPLC純化[Waters Delta-Pak C18，15uM，100A柱，梯度10％-100％B(溶劑A含0.05％TFA的水；溶劑BCH3CN)，歷經(jīng)10分鐘，流速25mL/min]，得到化合物I-6(79mg，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.68(2H，s)，7.12-7.73(6H，m)，8.00(1H，s)，8.11(1H，s)，10.10(1H，s)，12.97(1H，bs)；MS(ES+)m/e＝(M+H)286.
實(shí)施例2我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例1所述那些相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表2中，包括HPLC、LC/MS(觀測)和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表2中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表2所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)






實(shí)施例3 5-[2-(3-氯-苯基)-2-甲磺酰氧基-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯按照S.J.Brickner，WO 90/02744所概括的工藝制備5-氨基-吲唑-1-羧酸叔丁基酯。然后按照實(shí)施例1所述工藝使5-氨基-吲唑-1-羧酸叔丁基酯與2-(3-氯苯基)-2-羥基乙酸偶聯(lián)，得到5-[2-(3-氯-苯基)-2-羥基-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯。在0℃下向5-[2-(3-氯-苯基)-2-羥基-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(7.47mmol)的無水THF(20mL)溶液加入吡啶(37.33mmol，5當(dāng)量)，繼之以按逐滴方式加入甲磺酰氯(22.40mmol，3當(dāng)量)。將所得溶液在環(huán)境溫度下攪拌過夜。然后在真空中濃縮反應(yīng)混合物，使所得油在EtOAc與鹽水之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌(三次)，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物(3.58g，定量收率)，無需進(jìn)一步純化即可使用。
實(shí)施例4 5-[2-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-2-(3-氯-苯基)-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯向5-[2-(3-氯-苯基)-2-甲磺酰氧基-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(1.49mmol)的無水THF(4mL)溶液加入吡啶(4.48mmol，3當(dāng)量)繼之以(2-氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁基酯的無水THF溶液(3當(dāng)量，～0.5mL/mmol)。將所得溶液在60℃下回流過夜。然后在真空中濃縮反應(yīng)混合物，使所得油在EtOAc與鹽水之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌(三次)，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，在減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用EtOAc∶己烷(60∶40)洗脫，得到標(biāo)題化合物，收率85％。
實(shí)施例5 2-(2-氨基-乙基氨基)-2-(3-氯-苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-乙酰胺(I-59)向5-[2-(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-2-(3-氯-苯基)-乙酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(1.26mmol)加入三氟乙酸(5mL)，將反應(yīng)混合物攪拌1.5小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，殘余物經(jīng)過反相制備型HPLC純化[Waters Delta-Pak C18，15uM，100A柱，梯度10％-100％B(溶劑A含0.05％TFA的水；溶劑BCH3CN)，歷經(jīng)10分鐘，流速25mL/min]，得到標(biāo)題化合物(172mg，82％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.5-5.5(9H，br m)，6.9-7.3(1H，m)，7.4-8.2(8H，m)，9.2-10.8(1H，br m)，13.0(1H，br s)；MS(ES+)m/e＝344.4(100％)，346.4(40％).
實(shí)施例6我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例1、3、4和5所述那些相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表3中，包括HPLC、LC/MS(觀測)和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表3中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表3所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)

實(shí)施例7 ({[(3-氯-苯基)-(1H-吲唑-5-基氨甲?；?-甲基]-氨甲酰基}-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯向2-氨基-2-(3-氯-苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-乙酰胺(0.17mmol)與叔丁氧羰基氨基-乙酸(0.17mmol)的THF(2mL)溶液加入HOBt(0.18mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入EDC(0.18mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌過夜。然后在真空中濃縮反應(yīng)混合物，使殘余物在EtOAc與鹽水之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，在減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠色譜純化，用EtOAc∶己烷(80∶20)洗脫，得到標(biāo)題化合物，收率55％。
實(shí)施例8 2-(2-氨基-乙酰氨基)-2-(3-氯-苯基)-N-(1H-吲唑-5-基)-乙酰胺(I-74)在0℃下，向({[(3-氯-苯基)-(1H-吲唑-5-基氨甲酰基)-甲基]-氨甲?；鶀-甲基)-氨基甲酸叔丁基酯(0.09mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液加入三氟乙酸(2.5mL)，將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，得到標(biāo)題化合物(9mg，24％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.8(2H，m)，5.8(1H，m)，7.4-7.7(5H，m)，7.9-8.2(4H，m)，9.3-9.4(1H，m)，10.6(1H，s)，13.0(1H，br s)；MS(ES+)m/e＝358.3(40％)，134.3(100％).
實(shí)施例9
我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例7和8所述那些相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表4中，包括HPLC、LC/MS(觀測)和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表4中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表4所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)

實(shí)施例10

(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-(3-甲氧基-苯基)-乙酸甲基酯向(3-甲氧基-苯基)-乙酸甲基酯(19.6mmol)的CCl4溶液加入N-琥珀酰亞胺(19.6mmol)，向反應(yīng)混合物照射2小時(shí)。然后在真空中濃縮反應(yīng)混合物，得到中間體溴-(3-甲氧基-苯基)-乙酸甲基酯。在氮?dú)夥障孪蜾?(3-甲氧基苯基)-乙酸甲基酯的THF(30mL)溶液加入(2-氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁基酯(20.6mmol)的THF(20mL)溶液繼之以K2CO3(39.2mmol，2當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。使反應(yīng)混合物在水(50mL)與EtOAc(2×50mL)之間分配，合并有機(jī)層，干燥(硫酸鈉)，在真空中濃縮，得到油。該油經(jīng)過硅膠柱色譜純化，使用EtOAc∶汽油(1∶1)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物，為油，收率53％。
實(shí)施例11 (2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-(3-甲氧基-苯基)-乙酸向(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-(3-甲氧基-苯基)-乙酸甲基酯(10.4mmol)的THF∶H2O(3∶1，40mL)溶液加入LiOH(10.9mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，用H2O稀釋，用2M HCl溶液中和，過濾收集所得沉淀，得到標(biāo)題化合物，收率46％。
實(shí)施例12 2-(2-氨基-乙基氨基)-N-(1H-吲唑-5-基)-2-(3-甲氧基-苯基)-乙酰胺(I-1017)按照實(shí)施例1所述方法使5-氨基吲唑與(2-叔丁氧羰基氨基-乙基氨基)-(3-甲氧基-苯基)-乙酸偶聯(lián)。然后按照實(shí)施例8所述方法除去BOC保護(hù)基團(tuán)，得到化合物I-1017。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.02-3.14(4H，m)，3.80(3H，s)，4-5(1H，vbr s)，5.11(1H，brs)，7.05(1H，d)，7.20(2H，m)，7.40(2H，m)，7.52(1H，d)，7.5-8(2H，brs)，8.05(1H，s)，8.07(1H，s)，8.2-10.1(1H，brs)，10.68(1H，brs)，13.15(1H，brs)；MS(ES+)m/e＝340.
實(shí)施例13 5-硝基-1H-吲唑-3-基胺將一水合肼(17.5mL，362mmol)加入到熱的(50℃)2-氟-5-硝基芐腈(30g，181mmol)的EtOH(500mL)溶液中。將混合物在回流下加熱4小時(shí)，然后冷卻至室溫，由此產(chǎn)物從溶液中沉淀出來。濃縮濾液，使殘余物在EtOAc與飽和氯化銨溶液之間分配。分離有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮，得到進(jìn)一步的產(chǎn)物。合并產(chǎn)物(32.2g，quant.)，無需進(jìn)一步純化即可進(jìn)行下一步。
實(shí)施例14 3-氨基-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁基酯在室溫氮下，將二甲氨基吡啶(4g，36mmol)加入到5-硝基-1H-吲唑-3-基胺(32.2g，181mmol)、二碳酸二叔丁基酯(39.4g，181mmol)與三乙胺(25mL，181mmol)的THF(1L)溶液中。攪拌30分鐘后，濃縮反應(yīng)混合物，使殘余物在EtOAc與飽和氯化銨溶液之間分配。分離各層，將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮為橙色固體。從乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(25g，50％)。1H NMR(400MHz，DMSO)1.60(9H，s)，6.75(2H，brs)，8.10(1H，d)，8.36(1H，d)，8.96(1H，s)；MS(ES-)m/e＝277.
實(shí)施例15 3，5-二氨基-吲唑-1-羧酸叔丁基酯將3-氨基-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁基酯(3g，10.8mmol)溶于MeOH(50mL)，使溶液脫氣(3x交替的真空/氮凈化)。加入披鈀碳10％w/w(300mg)，用氫代替氮?dú)夥铡?小時(shí)后，通過C鹽墊過濾混合物，濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物，為高粘性的油(2.17g，81％)。1H NMR(400MHz，DMSO)1.55(9H，s)，5.07(2H，brs)，6.04(2H，brs)，6.79-6.82(2H，m)，7.62(1H，brs).MS(ES+)m/e＝249.
實(shí)施例16 3-氨基-5-[4-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯-苯基)-丁酰氨基]-吲唑-1-羧酸叔丁基酯在0℃下，向攪拌著的3，5-二氨基吲唑-1-羧酸叔丁基酯(2.17g，8.75mmol)、PyBroP(4.1g，8.75mmol)與4-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯-苯基)-丁酸(3g，8.75mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液加入二異丙基乙胺(3.0mL，17.5mmol)。使所得混合物歷經(jīng)4小時(shí)溫?zé)嶂潦覝兀缓鬂饪s，使殘余物在EtOAc與氯化銨(飽和水溶液)之間分配。分離有機(jī)相，用碳酸氫鈉(飽和水溶液)洗滌，然后干燥(硫酸鈉)，濃縮為褐色泡沫。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，20％石油醚-EtOAc)，得到標(biāo)題化合物，為淺褐色固體(2.92g，58％)；1H NMR(400MHz，DMSO)1.36(9H，s)，1.56(9H，s)，1.80-1.90(1H，m)，2.10-2.20(1H，m)，2.89(2H，m)，6.29(2H，brs)，6.87(1H，t)，7.38(1H，d)，7.45(1H，d)，7.61-7.65(2H，m)，7.90(1H，m)，8.19(1H，s)，10.30(1H，s)；MS(ES+)m/e＝578.
實(shí)施例17 3-(3-氯苯甲酰氨基)-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁基酯在氮下，將3-氨基-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁基酯(600mg，2mmol)溶于無水吡啶(15mL)。將溶液在冰浴上冷卻，加入3-氯苯甲酰氯(0.3mL，2mmol)。6小時(shí)后，將混合物用EtOAc稀釋，用1M鹽酸溶液(x3)和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮為固體。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，7∶3汽油-EtOAc)，得到標(biāo)題化合物，為固體(300mg，39％)；1H NMR(400MHz，CDCl3)1.77(9H，s)，7.52(1H，t)，7.62(1H，d)，7.90(1H，d)，8.07(1H，m)，8.32(1H，d)，8.45(1H，d)，9.22(1H，brs)，9.32(1H，s)；MS(ES+)m/e＝417.
實(shí)施例18 (5-硝基-1H-吲唑-3-基)-苯基胺將2-氟-5-硝基-N-苯基苯甲酰胺(100mg，0.38mmol)懸浮在EtOH(10mL)中，將混合物加熱至50℃。向所得溶液加入一水合肼(0.1mL，1.9mmol)。將混合物在回流下加熱30分鐘，此時(shí)LC-MS顯示完全轉(zhuǎn)化為芳基肼(ES+m/e＝273)。使混合物冷卻至室溫，濃縮，使殘余物在EtOAc與飽和氯化銨溶液之間分配。分離各層，將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮為黃色泡沫。將殘余物溶于磷酰氯(5mL)，將混合物在90℃下加熱30分鐘，然后冷卻至室溫，攪拌過夜。濃縮反應(yīng)混合物，使殘余物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉之間分配。將有機(jī)相經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮，得到標(biāo)題化合物，為紅色固體(80mg，83％)；1H NMR(400MHz，DMSO)6.88(1H，t)，7.31(2H，t)，7.51(1H，d)，7.74(2H，t)，8.17(1H，dd)，9.24(1H，s)，9.42(1H，s)，12.74(1H，s)；MS(ES+)m/e＝255.
實(shí)施例19 N-(3-氰基-苯基)-2-氟-5-硝基-硫代苯甲酰胺向N-(3-氰基-苯基)-2-氟-5-硝基-苯甲酰胺(10.0g；0.035mol)的甲苯(100mL)溶液加入Lawson試劑(7.84g；0.019mol)，將溶液回流16小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，經(jīng)過快速色譜純化，用30％乙酸乙酯/石油醚洗脫，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(8.56g；81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δH7.60-7.75(2H，m)，7.80(1H，m)，8.15(1H，d)，8.40-8.50(1H，m)，8.50(1H，s)，8.50-8.55(1H，m)，12.45(1H，br).質(zhì)譜(ES-)m/e＝300.22.
實(shí)施例20 3-(5-硝基-1H-吲唑-3-基氨基)-芐腈向N-(3-氰基-苯基)-2-氟-5-硝基-硫代苯甲酰胺(8.56g；0.028mol)的正丁醇(300mL)溶液加入水合肼(2.54mL；0.053mol)，將溶液回流3小時(shí)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，用熱乙醇研制，得到標(biāo)題化合物，為紅色固體(4.93g；62％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δH7.30(1H，d)，7.45-7.60(2H，m)，7.90(1H，d)，8.20(1H，d)，8.25(1H，s)，9.20(1H，s)，9.85(1H，s).質(zhì)譜(ES-)m/e＝278.28.
實(shí)施例21 3-氯-5-硝基吲唑?qū)?-硝基吲唑(5g，30.7mmol)懸浮在冰AcOH(150mL)中，將混合物加熱至50℃。加入N-氯琥珀酰亞胺(4.9g，36.8mmol)，將混合物在回流下(形成溶液)加熱1小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，在EtOAc與鹽水之間分配。將有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，濃縮為黃色固體。從EtOH中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(2.63g，43％)；1H NMR(400MHz，DMSO)δ7.73(1H，d)，8.21(1H，dd)，8.51(1H，d)，13.97(1H，brs)；MS(ES-)m/e＝196.
實(shí)施例22
3-溴-5-硝基吲唑?qū)?-硝基吲唑(10g，61.3mmol)溶于乙酸(170mL)，將混合物加熱至80℃。緩慢加入溴(3.1mL，60.7mmol)，將混合物加熱至回流。2小時(shí)后，使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濾出所得沉淀。濃縮濾液，使殘余物在氯仿與飽和碳酸氫鈉溶液之間分配，分離有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥，分離到額外的產(chǎn)物。濃縮，得到固體，與最初的沉淀合并，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(11.4g，77％)。1H NMRδ7.74(1H，d)，8.21(1H，dd)，8.40(1H，d)，14.06(1H，brs)；MS(ES-)m/e＝240.
實(shí)施例23 3-碘-5-硝基-1H-吲唑向5-硝基-1H-吲唑(10.0g，62.3mmol)的DMF(120mL)溶液加入氫氧化鉀(12.9g，230.4mmol)，繼之以歷經(jīng)5分鐘逐批加入碘(31.1g，122.6mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌14小時(shí)，然后倒在10％焦亞硫酸鈉(100mL)上，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)萃取液，用鹽水(50mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到標(biāo)題化合物，為淡橙色固體(17.5g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.77(1H，d)，8.26(1H，d)，8.34(1H，s)，14.15(1H，s).MS(ES+)m/e＝290.
實(shí)施例24
5-硝基-3-(三甲代甲硅烷基乙炔基)-吲唑-1-羧酸叔丁基酯在氮下，將3-溴-5-硝基-吲唑-1-羧酸叔丁基酯(2g，5.8mmol)溶于無水DMF(30mL)，加入三乙胺(1.6mL，1.6mmol)。加入碘化銅(20mg，0.12mmol)、三甲代甲硅烷基乙炔(2.5mL，17.4mmol)、二氯化雙三苯膦鈀(84mg，0.12mmol)和另外1.6mL三乙胺，將混合物在50℃下加熱過夜。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濃縮。將殘余物溶于EtOAc，通過C鹽塞過濾。將濾液用飽和氯化銨溶液洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，然后濃縮，得到黑色泡沫。經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，1∶1汽油-EtOAc)，得到標(biāo)題化合物，為黑色固體(940mg，45％)；MS(ES+)m/e＝360.
實(shí)施例25 3-碘-1-(2-甲氧基乙氧基甲基)-5-硝基-1H-吲唑向3-碘-5-硝基-1H-吲唑(10.0g，34.6mmol)的THF(50mL)溶液加入雙(三甲代甲硅烷基)氨基化鈉(1M THF溶液，48.4mmol，48.4mL)，將溶液在室溫下攪拌20分鐘。加入2-甲氧基乙氧基甲基氯(4.9g，39.1mmol，4.5mL)，將溶液在室溫下攪拌15小時(shí)。將反應(yīng)用氯化銨(30mL，飽和水溶液)猝滅，用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。合并有機(jī)萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。所得殘余物經(jīng)過硅膠快速柱色譜純化(1∶1EtOAc∶己烷)，得到標(biāo)題化合物，為橙色固體(6.0g)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.35(3H，s)，3.50-3.52(2H，m)，3.68-3.70(2H，m)，5.86(1H，s)，7.69(1H，d)，8.38(1H，d)，8.53(1H，s).MS(ES+)m/e＝378.
實(shí)施例26
3-碘-1-(2-甲氧基乙氧基甲基)-5-硝基-3-苯基-1H-吲唑向3-碘-1-(2-甲氧基乙氧基甲基)-5-硝基-1H-吲唑(0.50g，1.32mmol)、苯基代硼酸(0.22g，1.80mmol)、磷酸鉀(1.26g，5.94mmol)與1，1′-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)-二氯甲烷配合物(0.15g，0.18mmol)的混合物加入無水二甲氧基乙烷(8.0mL)，在85℃下加熱18小時(shí)。加入氯化銨溶液(30mL，飽和水溶液)，用乙酸乙酯萃取(3×30mL)。合并有機(jī)萃取液，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。殘余物經(jīng)過硅膠快速柱色譜純化(含3％MeOH的DCM)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.35g，81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.37(3H，s)，3.51-3.53(2H，m)，3.73-3.75(2H，m)，5.93(1H，s)，7.50-7.54(1H，m)，7.57-7.61(2H，m)，7.73(1H，d)，7.98(2H，dd)，8.37(1H，dd)，9.00(1H，s).
實(shí)施例27 7-氯-5-硝基-1H-吲唑向2-氯-6-甲基-4-硝基苯胺(5.49g，29.4mmol)的乙酸(150mL)溶液加入預(yù)溶于水(5ml)的亞硝酸鈉(2.03g，29.4mmol)的水(5mL)溶液。將所得褐色漿液在室溫下攪拌過夜，然后在60℃下攪拌另外4小時(shí)。借助真空蒸發(fā)除去大部分溶劑，將所得黑色殘余物重新溶于EtOAc(100mL)，用鹽水洗滌(2×70mL)。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾，濃縮，得到原料與產(chǎn)物91mg的混合物(1.49g)。粗混合物直接用于下一步。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.25(1H，s)，8.50(1H，s)，8.85(1H，s)，14.30(1H，br s).MS(ES+)m/e＝198(減去Boc).
實(shí)施例28
3-甲基-5-硝基-聯(lián)苯-2-基胺將2-溴-6-甲基-4-硝基苯胺(100mg，0.43mmol)、苯基代硼酸(81mg，0.66mmol)、2M Na2CO3(aq)(660μL)、Pd(PPh3)4(4mg，0.0033mmol)在含有1.0∶1.3 EtOH/H2O(1.4mL)的DME(2.4mL)中的混合物置于微波試管中，脫氣5分鐘。然后將試管密封，在110℃下用微波(CEM Discover)照射20分鐘。將粗反應(yīng)混合物用二氯甲烷(10mL)稀釋，用飽和NaHCO3溶液洗滌(3×20mL)。將有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，得到粗的固體，然后經(jīng)過快速色譜進(jìn)一步純化(100％二氯甲烷)，得到所需純產(chǎn)物(91mg)，為淺黃色固體。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.25(3H，s)，4.42(2H，br s)，7.39(3H，m)，7.50(2H，m)，7.97(1H，s)，8.12(1H，s).MS(ES+)m/e＝229，(ES-)m/e＝227.
實(shí)施例29 5-硝基-7-苯基-1H-吲唑向3-甲基-5-硝基-聯(lián)苯-2-基胺(91mg，0.39mmol)在預(yù)先加熱的冰乙酸(4mL)中的溶液以逐滴方式加入0.44M亞硝酸鈉溶液(1mL)。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。在真空中濃縮粗產(chǎn)物，將殘余物重新溶于EtOAc(20mL)，用飽和NaHCO3(2×20mL)和鹽水(1×20mL)洗滌。分離有機(jī)層，干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，得到所需產(chǎn)物(67mg)，為黃色粉末。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.50(1H，m)，7.58(2H，m)，7.69(2H，m)，8.33(2H，m)，8.75(1H，s)，10.55(br s).MS(ES+)m/e＝240，(ES-)m/e＝238.
實(shí)施例30
2-(3-氯-2，6-二氟苯基)-3-氰基丙酸甲基酯在0℃氮下，將丁基鋰(4.1mL 2.5M己烷溶液，10.3mmol)加入到二異丙胺(1.4mL，10.3mmol)的THF(15mL)溶液中。15分鐘后，將反應(yīng)混合物冷卻至-78℃，加入3-氯-2，6-二氟苯基乙酸甲基酯(2.15g，9.8mm0l)的THF(15mL)溶液。30分鐘后，向反應(yīng)混合物迅速加入碘乙腈(3.5mL，49mmol)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，加入氯化銨溶液(10mL，飽和水溶液)。濃縮反應(yīng)混合物，使殘余物在EtOAc與鹽水之間分配。水相用EtOAc萃取，合并有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后濃縮，得到黑色的油。粗產(chǎn)物經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，25％EtOAc-汽油至EtOAc)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油(1.51g，59％)；1H NMR(400MHz，DMSO)δ3.06(1H，dd)，3.19(1H，dd)，3.67(3H，s)，4.64(1H，dd)，7.29(1H，t)，7.70(1H，m).
實(shí)施例31 4-氨基-2-(3-氯-2，6-二氟苯基)-丁酸甲基酯鹽酸鹽在氮下，向2-(3-氯-2，6-二氟苯基)-3-氰基丙酸甲基酯(784mg，3.0mmol)與濃鹽酸(0.63mL，7.55mmol)的MeOH(5mL)溶液加入二氧化鉑(69mg，0.3mmol)。將反應(yīng)混合物脫氣(5x真空循環(huán))，用氫代替氮?dú)夥?5x真空循環(huán))。將混合物攪拌3.5小時(shí)，然后通過C鹽墊過濾，用MeOH洗滌。濃縮濾液，無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
實(shí)施例32 4-叔丁基羰基氨基-2-(3-氯-2，6-二氟苯基)-丁酸將4-氨基-2-(3-氯-2，6-二氟苯基)-丁酸甲基酯鹽酸鹽(685mg，2.28mmol)溶于8M鹽酸溶液(10mL)，將混合物在回流下加熱過夜。使混合物冷卻至室溫，然后濃縮。將殘余物溶于碳酸氫鈉(1.2g，11.4mmol)的水(15mL)溶液，加入THF(15mL)。將混合物冷卻至0℃，加入二碳酸二叔丁基酯(648mg，2.97mmol)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪?.5小時(shí)，然后濃縮。用水稀釋后，混合物用乙醚萃取，然后將水相用2M HCl酸化至pH 4.5。經(jīng)過酸化的水相用EtOAc萃取(x3)，合并萃取液，干燥(硫酸鎂)，濃縮，殘余物經(jīng)過色譜純化(二氧化硅，5％MeOH-DCM)，得到標(biāo)題化合物，為蠟(512mg，兩步收率65％)；MS(ES-)m/e＝348.
實(shí)施例33 2-(2，4-二氯苯基)-戊烷二酸5-叔丁基酯1-甲基酯在0℃氮下，將叔丁醇鉀(767mg，6.85mmol)加入到3，4-二氯苯基乙酸甲基酯(15g，68mmol)的THF(100mL)溶液中。15分鐘后，將所得黃色溶液冷卻至-78℃，歷經(jīng)10分鐘加入丙烯酸叔丁基酯(11.0mL，75mmol)。使反應(yīng)混合物達(dá)到室溫，攪拌過夜。將混合物濃縮，在EtOAc與飽和氯化銨溶液之間分配。水相用EtOAc萃取，合并有機(jī)相，用鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)，濃縮為黃色的油。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，5％乙醚-汽油)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色油(15.5g，65％)。
實(shí)施例34 4-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯苯基)-丁酸甲基酯在0℃氮下，將2-(2，4-二氯苯基)-戊烷二酸5-叔丁基酯1-甲基酯(13g，45mmol)溶于甲苯(130mL)。加入疊氮化二苯基磷酰(10.6mL，49mmol)和三乙胺(6.8mL，49mmol)，使混合物歷經(jīng)3小時(shí)溫?zé)嶂潦覝亍Ａ硗?小時(shí)后，濃縮反應(yīng)混合物，將殘余物溶于EtOAc。將有機(jī)相用1w/w％檸檬酸溶液和鹽水洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。在30℃下濃縮，得到?；B氮化物，為黃色的油，立即在室溫下溶于叔丁醇(130mL)。加入四氯化錫(0.31mL，2.68mmol)，將混合物在80℃下加熱45分鐘，在此期間有氮?dú)夥懦?。一旦冷卻至室溫，加入飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)，濃縮反應(yīng)混合物。殘余物用EtOAc萃取(x3)，合并萃取液，用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，濃縮為黃色的油。經(jīng)過柱色譜純化(二氧化硅，20％EtOAc-汽油)，得到標(biāo)題化合物，為無色的油(12.8g，79％)；MS(ES-)m/e＝360.
實(shí)施例35 4-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯苯基)-丁酸在0℃下，向4-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯苯基)-丁酸甲基酯(12.3g，34mmol)的THF(80mL)/水(20mL)溶液加入氫氧化鋰(1.63g，68mmol)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過夜。濃縮反應(yīng)混合物，殘余物用水稀釋。用EtOAc萃取后，向水相加入2M鹽酸水溶液酸化至pH 5。水相用EtOAc萃取，萃取液經(jīng)硫酸鎂干燥。濃縮得到標(biāo)題化合物，為淡褐色泡沫(11.54g，98％)；1H NMR(400MHz，DMSO)δ1.35(9H，s)，1.74-1.81(1H，m)，2.03-2.10(1H，m)，2.81(2H，m)，3.61(1H，t)，6.86(1H，m)，7.28(1H，dd)，7.54(1H，dd)，7.59(1H，d)，12.60(1H，brs)；MS(ES-)m/e＝346.
實(shí)施例36 (3，4-二氯-苯基)-琥珀酸4-叔丁基酯1-甲基酯在0℃下，將2.5M正丁基鋰的己烷溶液(37.5mL，0.094mol)以逐滴方式加入到二異丙胺(14.45mL，0.103mol)的四氫呋喃(300mL)溶液中。將溶液在0℃下攪拌20分鐘。然后將混合物冷卻至-70℃，經(jīng)由套管滴加(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(20.54g，0.094mol)的四氫呋喃(50mL)溶液。將反應(yīng)混合物在-70℃下攪拌30分鐘。此后，以逐滴方式加入溴乙酸叔丁基酯(45.42mL，0.281mol)。除去冷卻浴，使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亍⒎磻?yīng)混合物用飽和NH4Cl溶液(100mL)猝滅。在真空中部分除去THF，混合物用EtOAc萃取(3×200mL)。合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗混合物經(jīng)過硅膠柱色譜純化，使用汽油∶乙醚(9∶1)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物，收率92％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.34(9H，s)，2.65(1H，dd)，2.98(1H，dd)，3.60(3H，s)，4.08(1H，m)，7.31(1H，m)，7.58-7.62(2H，m)；MS(ES+)m/e＝333.2(5％)；MS(ES-)m/e＝331.2(100％)，333.2(65％)，335.2(10％).
實(shí)施例37 2-(3，4-二氯-苯基)-琥珀酸1-甲基酯將三氟乙酸(100mL)加入到2-(3，4-二氯-苯基)-琥珀酸4-叔丁基酯1-甲基酯(23.64g，0.071mol)與二氯甲烷(100mL)的混合物中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后在真空中濃縮。將粗混合物在真空下保持若干小時(shí)，然后無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.66(1H，dd)，3.01(1H，dd)，3.59(3H，s)，4.08(1H，m)，7.30(1H，m)，7.56-7.61(2H，m)；MS(ES+)m/e＝277.1(100％)，279.1(65％)，281.0(10％)；MS(ES-)m/e＝275.1(50％)，277.1(30％)，279.1(5％).
實(shí)施例38 3-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯-苯基)-丙酸甲基酯在0℃下，向2-(3，4-二氯-苯基)-琥珀酸1-甲基酯(0.071mol)的甲苯(200mL)溶液連續(xù)加入疊氮化二苯基磷酰(16.82mL，0.078mol)和三乙胺(14.83mL，0.106mol)。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1％檸檬酸(100mL)稀釋，用EtOAc萃取(3×150mL)。合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。將所得油溶于叔丁醇(200mL)。加入氯化錫(IV)(0.5mL，0.004mol)，將混合起加熱至80℃達(dá)1小時(shí)(N2放出)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用飽和NaHCO3溶液猝滅。在真空中除去叔丁醇，混合物用EtOAc萃取(3×150mL)。合并有機(jī)萃取液，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。粗混合物經(jīng)過硅膠柱色譜純化，使用汽油∶EtOAc(9∶1)作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(17.35g)，收率70％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.31(9H，s)，3.25-3.40(1H，m)，3.41-3.52(1H，m)，3.61(3H，s)，3.90(1H，t)，6.95(1H，t)，7.26(1H，m)，7.52(1H，s)，7.60(1H，d)；MS(ES+)m/e＝348.2(7％)；MS(ES-)m/e＝457.2(100％)，459.2(70％)，461.2(15％).
實(shí)施例39 3-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯-苯基)-丙酸向3-叔丁氧羰基氨基-2-(3，4-二氯-苯基)-丙酸甲基酯(17.11g，0.049mol)的四氫呋喃-水(各200mL)溶液加入氫氧化鋰(1.18g，0.049mol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。在真空中除去THF，用2M鹽酸調(diào)節(jié)pH至pH 4。水相用EtOAc萃取(3×100mL)。合并有機(jī)相，干燥(MgSO4)，在真空中濃縮。得到標(biāo)題化合物，為泡沫，收率89％(14.67g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.30(9H，s)，3.22-3.35(1H，m)，3.35-3.50(1H，m)，3.76(1H，t)，6.84(1H，t)，7.24(1H，m)，7.48(1H，s)，7.58(1H，d)，12.85(1H，s)；MS(ES+)m/e＝334.2(8％)；MS(ES-)m/e＝332.2(100％)，334.1(65％)，336.1(10％).
實(shí)施例40我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例1至39所述那些相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表5中，包括HPLC、LC/MS(觀測)和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表5中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致。化合物編號對應(yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表5所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)


實(shí)施例41我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例1至39所述那些和一般合成流程I-XV相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表6中，包括HPLC、LC/MS(觀測)、IR和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表6中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表6所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)

















實(shí)施例42我們已經(jīng)制備了其他式I化合物，方法基本上與實(shí)施例1至39所述那些和一般合成流程I-VII相似。這些化合物的特征數(shù)據(jù)總結(jié)在下表7中，包括HPLC、LC/MS(觀測)、IR和1H NMR數(shù)據(jù)。
1H NMR數(shù)據(jù)總結(jié)在下表7中，其中1H NMR數(shù)據(jù)是在400MHz下、在氘代DMSO中獲得的，另有指示除外，并且發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列舉的化合物編號。
表7所選擇的式I化合物的特征數(shù)據(jù)







實(shí)施例43AKT-3抑制測定法利用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)酶測定法，根據(jù)抑制AKT的能力篩選化合物(Foxet al.，Protein Sci.，(1998)7，2249)。測定是在100mM HEPES 7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT與3％DMSO的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為170μM ATP(Sigma Chemicals)和200μM肽(RPRAATF，American Peptide，Sunnyvale，CA)。測定是在30℃和45nM AKT下進(jìn)行的。偶聯(lián)酶系統(tǒng)組分的最終濃度為2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μM/mL丙酮酸激酶和10μg/mL乳酸脫氫酶。
制備測定儲備緩沖溶液，含有上面所列舉的全部試劑，AKT、DTT和目的供試化合物除外。將55μL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入含有供試化合物的2μL 1mM DMSO儲備溶液(最終化合物濃度為30μM)。將平板在30℃下預(yù)培育約10分鐘，加入10μL酶(最終濃度為45nM)和1mM DTT引發(fā)反應(yīng)。利用Molecular DevicesSpectraMax Plus平板讀數(shù)器獲得反應(yīng)速率，讀取時(shí)間15分鐘，溫度30℃。將相對于含有測定混合物和DMSO而沒有供試化合物的標(biāo)準(zhǔn)孔而言顯示50％以上抑制作用的化合物進(jìn)行滴定，以測定IC50值。
下列化合物顯示對Akt-3具有小于1μM之間的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-59、I-60、I-61、I-62、I-64、I-67、I-70、I-73、I-74、I-97至I-106、I-108至I-110、I-112、I-115至I-122、I-124至I-127、I-129至I-136、I-138至I-141、I-141至I-145、I-147、I-149、I-153、I-155、I-160至I-175、I-177至I-189、I-193至I-210、I-212至I-227、I-231至I-234、I-242、I-243、I-245、I-247、I-251至I-254、I-256至1-258、I-1005、I-1006、I-1014、I-1022、I-1043至I-1047、I-1049和I-1054。
下列化合物顯示對AKT-3具有1.0至10.0μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-5、I-16、I-35、I-40、I-43、I-48至I-51、I-53至I-56、I-58、I-63、I-68、I-71、I-72、I-76、I-77、I-78、I-83、I-85、I-107、I-111、I-113、I-114、I-123、I-128、I-137、I-142、I-150至I-152、I-154、I-156至I-159、I-176、I-191、I-192、I-235、I-236、I-241、I-250、I-255、I-259、I-1017、I-1018、I-1023、I-1028、I-1038、I-1039、I-1041、I-1048、I-1050至I-1052、I-1055和I-1056。
下列化合物顯示對AKT-3具有10.0至20.0μM之間的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-2、I-37、I-52、I-65、I-66、I-79、I-82、I-94、I-95、I-146、I-190、I-1040、I-1053和I-1057。
實(shí)施例44PDK-1抑制測定法利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法，根據(jù)抑制PDK-1的能力篩選化合物(Pitt and Lee，J.Biomol.Screen.，(1996)1，47)。測定是在100mMHEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、25mM NaCl、2mM DTT的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為40μM ATP(Sigma Chemicals)和65μM肽(PDKtide，Upstate，Lake Placid，NY)。測定是在30℃和25nMPDK-1下進(jìn)行的，并且在～27.5nCi/μL[γ-32P]ATP(AmershamPharmacia Biotech，Amersham，UK)的存在下。制備測定儲備緩沖溶液，含有上面所列舉的全部試劑，ATP和目的供試化合物除外。將15μL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入含有供試化合物的1μL 0.5mMDMSO儲備溶液(最終化合物濃度為25μM，最終DMSO濃度為5％)。將平板在30℃下預(yù)培育約10分鐘，加入4μL ATP(最終濃度為40μM)引發(fā)反應(yīng)。
10分鐘后加入100μL 100mM磷酸、0.01％吐溫-20終止反應(yīng)。將磷酸纖維素96孔平板(Millipore，Cat no.MAPHNOB50)用100μL100mM磷酸、0.01％吐溫-20預(yù)處理，然后加入反應(yīng)混合物(100μL)。使斑點(diǎn)浸泡至少5分鐘，然后洗滌(4×200μL 100mM磷酸，0.01％吐溫-20)。干燥后，向小孔加入20μL Optiphase“SuperMix”液體閃爍雞尾酒試劑(Perkin Elmer)，然后進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)(1450Microbeta LiquidScintillation Counter，Wallac)。
將相對于含有測定混合物和DMSO而沒有供試化合物的標(biāo)準(zhǔn)孔而言顯示50％以上抑制作用的化合物進(jìn)行滴定，以測定IC50值。
下列化合物顯示對PDK-1具有小于1μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-100、I-106、I-109、I-110、I-117、I-119、I-120、I-121、I-123、I-125、I-126、I-127、I-130、I-132、I-136、I-138、I-139、I-141、I-162、I-165、I-167、I-168、I-169、I-171、I-172、I-173、I-174、I-179、I-181、I-182、I-189、I-193、I-194、I-195、I-197、I-198、I-206、I-207、I-230、I-231、I-234至I-238、I-240、I-241、I-242、I-248至I-251、I-253、I-259至I-265、I-272、I-1006、I-1022、I-1023、I-1026、I-1027、I-1028、I-1032、I-1034、I-1035、I-1041、I-1043至I-1046、I-1048、I-1049、I-1052、I-1053、I-1056和I-1057。
下列化合物顯示對PDK-1具有1μM至3μM之間的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-98、I-101、I-107、I-112、I-115、I-118、I-122、I-124、I-129、I-137、I-140、I-147、I-158、I-160、I-164、I-166、I-170、I-175、I-176、I-177、I-180、I-185、I-186、I-187、I-188、I-199、I-108、I-212、I-213、I-225、I-228、I-233、I-239、I-1000、I-1005、I-1007、I-1018、I-1036、I-1038、I-1040、I-1054和I-1055。
下列化合物顯示對PDK-1具有大于3μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-16、I-33、I-54、I-99、I-102、I-105、I-111、I-113、I-114、I-128、I-131、I-133、I-134、I-135、I-142、I-145、I-148、I-150、I-153、I-154、I-155、I-156、I-159、I-161、I-163、I-178、I-183、I-184、I-190、I-191、I-196、I-200、I-201至I-204、I-222、I-226、I-227、I-229、I-232、I-233、I-247、I-254、I-257、I-258、I-1000、I-1014至I-1021、I-1024、I-1025、I-1029、I-1030、I-1031、I-1033、I-1037、I-1039、I-1039、I-1042、I-1047、I-1050、I-1051和I-1054。
實(shí)施例45ROCK抑制測定法利用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)酶測定法，根據(jù)抑制ROCK的能力篩選化合物(Fox et al.(1998)，Protein Sci.，7，2249)。反應(yīng)是在100mM HEPES pH7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT與1.5％DMSO的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為13μM ATP(Sigma Chemicals)和200μM肽(KKRNRTLSV，American Peptide，Sunnyvale，CA)。測定是在30℃和200nM ROCK下進(jìn)行的。偶聯(lián)酶系統(tǒng)組分的最終濃度為2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、400μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶和10μg/mL乳酸脫氫酶。
制備測定儲備緩沖溶液，含有上面所列舉的全部試劑，ROCK、DTT和目的供試化合物除外。將56μL供試反應(yīng)物置于384孔平板中，繼之以加入含有供試化合物的1μL 2mM DMSO儲備溶液(最終化合物濃度為30μM)。將平板在30℃下預(yù)培育約10分鐘，加入10μL酶(最終濃度為100nM)引發(fā)反應(yīng)。利用BioRad Ultramark平板讀數(shù)器(Hercules，CA)獲得反應(yīng)速率，讀取時(shí)間5分鐘，溫度30℃。將相對于含有DMSO而沒有化合物的標(biāo)準(zhǔn)孔而言顯示＞50％抑制作用的化合物進(jìn)行滴定，利用相似方案測定IC50值。
下列化合物顯示對ROCK具有小于1μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-5、I-6、I-8、I-20、I-25、I-35、I-54、I-69、I-98、I-99、I-100、I-103至I-107、I-109、I-110、I-120、I-123、I-125、I-126、I-129、I-132、I-137、I-136、I-141、I-142、I-144、I-145、I-153、I-1002、I-1005、I-1006、I-1007、I-1008和I-1018。
下列化合物顯示對ROCK具有1μM至3μM之間的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-4、I-7、I-9、I-24、I-26、I-27、I-31至I-34、I-38和I-41。
下列化合物顯示對ROCK具有大于3μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-12、I-13、I-15、I-16、I-23、I-28、I-29、I-30、I-102、I-118、I-139、I-140、I-1003、I-1014和I-1019。
實(shí)施例46PKA抑制測定法利用標(biāo)準(zhǔn)的偶聯(lián)酶測定法，根據(jù)抑制PKA的能力篩選化合物(Foxet al.(1998)，Protein Sci.，7，2249)。反應(yīng)是在100mM HEPES 7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT與3％DMSO的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為50μM ATP(Sigma Chemicals)和80μM肽(Kemptide，American Peptide，Sunnyvale，CA)。測定是在30℃和18nM PKA下進(jìn)行的。偶聯(lián)酶系統(tǒng)組分的最終濃度為2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶和10μg/mL乳酸脫氫酶。
制備測定儲備緩沖溶液，含有上面所列舉的全部試劑，ATP和目的供試化合物除外。將55μL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入含有供試化合物系列稀釋液的2μL DMSO儲備溶液(通常開始于5μM的最終濃度)。將平板在30℃下預(yù)培育約10分鐘，加入5μLATP(最終濃度為50μM)引發(fā)反應(yīng)。利用Molecular Devices SpectraMax Plus平板讀數(shù)器測定最初反應(yīng)速率，讀取時(shí)間15分鐘。利用Prism軟件包，從非線性回歸分析計(jì)算IC50和Ki數(shù)據(jù)(GraphPad Prism version 3.0afor Macintosh，GraphPad Software，San Diego California，USA)。
下列化合物顯示對PKA具有小于1μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-2、I-35、I-40、I-43、I-48、I-51、I-52、I-54、I-55、I-56、I-59、I60、I-67、I-69、I-73、I-76至I-78、I-85、I-93、I-97、I-98至I-110、I-113、I-116至I-136、I-138至I-141、I-143至I-145、I-147、I-149、I-153、I-155至I-169、I-172、I-174、I-175、I-177至I-189、I-193至I-201、I-203至I-210、I-226、I-227、I-230至I-237、I-240、I-242至I-247、I-249、I-252、I-254、I-260、I-261、I-263、I-1006、I-1022、I-1023、I-1026、I-1028、I-1033、I-1034、I-1039、I-1041、I-1043和I-1044。
下列化合物顯示對PKA具有1μM至5μM的Ki值(化合物編號對應(yīng)于表1所列舉的化合物編號)I-6、I-24、I-84、I-92、I-202和I-1053。
實(shí)施例47p70S6K抑制測定法在Upstate Biotechnology利用放射性磷酸鹽結(jié)合測定法，根據(jù)抑制p70S6K的能力篩選化合物(Pitt and Lee，J.Biomol.Screen.，(1996)1，47)。測定是在8mM MOPS(pH 7.0)、10mM乙酸鎂、0.2mM EDTA的混合物中進(jìn)行的。測定中的最終底物濃度為15μM ATP(SigmaChemicals)和100μM肽(KKRNRTLTV，Upstate Ltd.，Dundee，UK)。測定是在30℃下進(jìn)行的，并且在p70S6K(5-10mU，Upstate Ltd.，Dundee，UK)和[γ-33P]ATP(比活性約500cpm/pmol，AmershamPharmacia Biotech，Amersham，UK)的存在下。制備測定儲備緩沖溶液，含有上面所列舉的全部試劑，ATP和目的供試化合物除外。將15μL儲備溶液置于96孔平板中，繼之以加入含有供試化合物的1μL40μM或8μM DMSO儲備溶液，一式兩份(最終化合物濃度分別為2μM或0.4μM，最終DMSO濃度為5％)。將平板在30℃下預(yù)培育約10分鐘，加入4μL ATP(最終濃度為15μM)引發(fā)反應(yīng)。
10分鐘后加入5μL3％磷酸溶液終止反應(yīng)。將磷酸纖維素96孔平板(Millipore，Cat no.MAPHNOB50)用100μL 100mM磷酸、0.01％吐溫-20預(yù)處理，然后加入反應(yīng)混合物(20μL)。使斑點(diǎn)浸泡至少5分鐘，然后洗滌(4×200μL 100mM磷酸，0.01％吐溫-20)。干燥后，向小孔加入20μL Optiphase“SuperMix”液體閃爍雞尾酒試劑(Perkin Elmer)，然后進(jìn)行閃爍計(jì)數(shù)(1450 Microbeta Liquid Scintillation Counter，Wallac)。
與含有測定混合物和DMSO而沒有供試化合物的標(biāo)準(zhǔn)小孔比較p70S6K活性，計(jì)算化合物在2μM和0.4μM下的百分比抑制。
將相對標(biāo)準(zhǔn)孔而言顯示高抑制作用的化合物進(jìn)行滴定，以測定IC50值。
盡管我們已經(jīng)描述了本發(fā)明的大量實(shí)施方式，不過顯然可以改變我們的基本實(shí)施例，以提供其他采用本發(fā)明化合物和方法的實(shí)施方式。因此，將被領(lǐng)會(huì)到的是本發(fā)明的范圍是由權(quán)利要求所限定的，而不是僅代表實(shí)例的具體實(shí)施方式
。
權(quán)利要求
1.抑制(a)患者或(b)生物樣本中AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶的方法，該方法包含對所述患者給以式I’化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或者使所述生物樣本與式I’化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸 其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2、T-R或T’-Ar；T選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；T’是C1-6亞烷基鏈，其中T’的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2選自Q-Ar、Q-N(R5)2或Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若V1、V2和V3各自是CH，R1是氫，則R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R3不是R’、Q-OC(O)R5或OCH2苯基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；R2選自Q-Ar或Q-N(R5)2，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；Ar是可選被取代的環(huán)，選自5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2或T-R；R2選自Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R1是T’-Ar，其中Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；T’選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-、-CH2NH-、-C≡C-、-CH2-或-CH2CH2-。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3是R，、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或5的方法，其中所述化合物具有式III或IV 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述化合物具有式V 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
8.式IIa化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1選自鹵素、CN、N(R4)2或T-R；T選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR、CO2R、CON(R)2、SO2R、SO2N(R)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若V1、V2和V3各自是CH并且R1是氫，則R3不是R’、Q-OC(O)R5或OCH2苯基。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中R1選自鹵素、N(R4)2或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的化合物，其中R1選自氯、溴、氟、NH2、NHMe、NHEt、NH-環(huán)己基、甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、乙炔基或叔丁基；R3選自CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3或NHCH2-咪唑-4-基。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中R1是氫；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的化合物，其中R3選自O(shè)H、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、NHCO2叔丁基、苯基、NH(CH2)3NH2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3或NHCH2-咪唑-4-基。
13.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中所述化合物選自下組
14.式IIb化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1是T-Ar；T選自價(jià)鍵或C1-6亞烷基鏈，其中T的至多兩個(gè)亞甲基單位可選地和獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-N(R)C(O)-、-C(O)N(R)-、-C(O)-或-SO2-代替；每個(gè)R獨(dú)立地選自氫或可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；或者同一氮上的兩個(gè)R基團(tuán)與其所連接的氮原子一起構(gòu)成5-7元飽和、部分不飽和或芳香的環(huán)，所述環(huán)具有1-3個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵或C1-4亞烷基鏈；每個(gè)Ar獨(dú)立地是可選被取代的環(huán)，選自5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者8-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3選自R’、Ar1、Q-OR5、Q-OC(O)R5、Q-CONHR5、Q-OC(O)NHR5、Q-SR5、Q-N(R4)2、N(R)(Q-Ar)、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；R’是可選被取代的C1-6脂族基團(tuán)；每個(gè)R4獨(dú)立地選自R、COR5、CO2R5、CON(R5)2、SO2R5、SO2N(R5)2或Ar1；每個(gè)R5獨(dú)立地選自R或Ar；V1、V2和V3各自獨(dú)立地選自氮或C(R6)；每個(gè)R6獨(dú)立地選自R、Ar1、鹵素、CN、NO2、OR、SR、N(R4)2、N(R)COR、N(R)CON(R4)2、N(R)C(O)OR、CON(R4)2、OC(O)N(R4)2、CO2R、OC(O)R、N(R)SO2R、N(R)SO2N(R4)2、SO2R或SO2N(R4)2；每個(gè)Ar1獨(dú)立地選自可選被取代的5-7元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；其條件是若V1、V2和V3各自是CH，T是價(jià)鍵，R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中Ar是可選被取代的苯基環(huán)，則R3不是Q-OR5或C(O)NH2。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中R1是T-Ar，其中T選自-NHC(O)-、-NH-、-NHCH2-、-NHSO2-、-CH2NH-、-C≡C-、-CH2-或-CH2CH2-；Ar是可選被取代的5-6元芳基環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元芳基環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R3是R’、Q-OR5、Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；每個(gè)Q獨(dú)立地選自價(jià)鍵、-CH2-或-CH2CH2-；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的化合物，其中R3是CH2OH、OH、NH2、CH2NH2、CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、NHCO2叔丁基、苯基、環(huán)戊基、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中T是價(jià)鍵；R2是Q-C(R)(Q-Ar)R3，其中R和R3可選地構(gòu)成5-7元飽和或部分不飽和的環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子；R3是Q-N(R4)2、Ar1、N(R)C(O)Q-N(R4)2或N(R)Q-N(R4)2；Ar是可選被取代的5-6元飽和、部分不飽和或完全不飽和的單環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子，或者可選被取代的9-10元飽和、部分不飽和或完全不飽和的二環(huán)，所述環(huán)具有0-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧或硫的雜原子。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的化合物，其中R3是CH2NHMe、CH2N(Me)2、CH2CH2NH2、CH2CH2NHMe、CH2CH2N(Me)2、CH2C(Me)2NH2、CH2C(Me)2CHMe、NHCO2(叔丁基)、苯基、NH(CH2)3NH2、NH(CH2)2NH2、NH(CH2)2NHEt、NHCH2吡啶基、NHSO2苯基、NHC(O)CH2C(O)O叔丁基、NHC(O)CH2NH3和NHCH2-咪唑-4-基。
19.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物選自下組
20.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中所述化合物具有式V 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中
20.組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求8或14的化合物和藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的組合物，另外包含一種治療劑，選自抗增殖劑、抗炎劑、免疫調(diào)節(jié)劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子、治療心血管疾病的藥物、治療肝疾病的藥物、抗病毒劑、治療血液障礙的藥物、治療糖尿病的藥物或治療免疫缺陷障礙的藥物。
22.抑制生物樣本中AKT、PKA、PDK1、p70S6K或ROCK激酶活性的方法，包含使所述生物樣本與(a)根據(jù)權(quán)利要求8的化合物、(b)根據(jù)權(quán)利要求14的化合物或(c)根據(jù)權(quán)利要求20的組合物接觸的步驟。
23.治療或減輕疾病或病癥嚴(yán)重性的方法，該疾病或病癥選自增殖性障礙、心臟障礙、炎癥、自體免疫障礙、神經(jīng)變性障礙、病毒疾病或骨障礙，其中所述方法包含給以有效量根據(jù)權(quán)利要求20的組合物的步驟。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述疾病或病癥選自癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、氣喘、HIV、心絞痛、外周循環(huán)障礙、高血壓、動(dòng)脈硬化、結(jié)節(jié)狀硬化或骨質(zhì)疏松。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中所述疾病或病癥選自癌癥。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中所述癌癥選自腦(神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、乳腺、結(jié)腸、頭頸、腎、肺、肝、黑瘤、卵巢、胰腺、前列腺、肉瘤或甲狀腺的癌癥。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中所述癌癥選自胰腺、前列腺或卵巢的癌癥。
28.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，包含對所述患者給以另外的治療劑的另外步驟，所述另外的治療劑選自抗增殖劑、抗炎劑、免疫調(diào)節(jié)劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子、治療心血管疾病的藥物、治療肝疾病的藥物、抗病毒劑、治療血液障礙的藥物、治療糖尿病的藥物或治療免疫缺陷障礙的藥物，其中所述另外的治療劑就所治療的疾病而言是適當(dāng)?shù)?；所述另外的治療劑是與所述組合物一起作為單一劑量形式給藥的，或者作為多劑量形式的一部分與所述組合物分開給藥。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R
文檔編號A61P35/00GK1812973SQ03805612
公開日2006年8月2日 申請日期2003年1月23日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月25日
發(fā)明者H·賓奇, G·布倫奇利, J·M·C·戈利克, R·尼格特爾, M·莫蒂默爾, S·帕特爾, A·拉瑟福德 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司