專利名稱：在17.α位上具有環(huán)酯基的雄甾烷的17.β.-硫代羧酸酯衍生物的抗炎性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雄甾烷系列的新型抗炎和抗變態(tài)反應(yīng)化合物以及其制備方法。本發(fā)明還涉及包含該化合物的藥物制劑以及其治療應(yīng)用，特別是用于治療炎癥和過敏情況的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
具有抗炎性的糖皮質(zhì)激素是已知的并被廣泛用于治療炎性病癥或疾病如哮喘和鼻炎。例如，US 4335121公開了6α，9α-二氟-17α-(1-氧代丙氧基)-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯(其一般名稱為丙酸氟地松)及其衍生物。由于考慮到可能的副作用，所以糖皮質(zhì)激素的應(yīng)用常常在一些情況中受到限制，特別是在兒童的情況中尤其如此。所擔(dān)心的糖皮質(zhì)激素的副作用包括下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸的抑制、對兒童生長的作用和對老人骨密度的作用、眼并發(fā)癥(白內(nèi)障的形成和青光眼)以及皮膚萎縮。某些糖皮質(zhì)激素化合物還具有復(fù)雜的代謝途徑，在代謝中所產(chǎn)生的活性代謝物可能使得該類化合物的藥效學(xué)和藥動學(xué)難以理解。雖然新甾類化合物的安全性已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于開始所采用的這些物質(zhì)，但是制造出具有可預(yù)知的藥動學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)并且在副作用方面有吸引力并具有方便的治療方案的具有極佳抗炎性的新分子仍然是研究目標(biāo)。
WO02/12265和WO02/12266(Glaxo Group)公開了某些新型的雄甾烷衍生物，這兩片文獻(xiàn)都在本專利申請最早的優(yōu)先權(quán)日之后被公開。

發(fā)明內(nèi)容
我們已經(jīng)確定了一系列基本符合這些目的的新的糖皮質(zhì)激素。
因此，本發(fā)明的一個方面就是要提供一種式(I)的化合物
其中R1表示C1-6烷基或C1-6鹵代烷基；R2表示未被取代或被一個或多個選自氧、甲基、亞甲基和鹵素的基團(tuán)所取代的C3-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)鏈烯基；R3表示氫、甲基(其可以是α或β構(gòu)型)或亞甲基；R4和R5可以相同或不同并且分別表示氫或鹵素；和 表示單或雙鍵；以及其溶劑化物。
溶劑化合物的實例包括水合物。
在下文中涉及本發(fā)明的化合物時既包括式(I)的化合物，又包括其溶劑化物。
應(yīng)當(dāng)清楚的是本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括式(I)化合物的所有立體異構(gòu)體(包括對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體)及其混合物。
優(yōu)選地，絕對立體化學(xué)如式(I)的化合物所示。
R1可以表示的C1-6鹵代烷基的實例包括被1至3個鹵素原子，優(yōu)選地被1個鹵素原子所取代的C1-6烷基。優(yōu)選的鹵素原子選自溴、氯和氟。
R2可以表示的C3-8環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基以及被取代的衍生物如甲基環(huán)丙基(例如1-甲基環(huán)丙基或2-甲基環(huán)丙基)、二氯環(huán)丙基(例如2，2-二氯丙基)、甲基二氯環(huán)丙基(例如1-甲基-2，2-二氯環(huán)丙基)、外(exo)亞甲基環(huán)丁基(例如3-外亞甲基環(huán)丁基)、四甲基環(huán)丙基(例如2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基)和甲基環(huán)丁基(例如1-甲基環(huán)丁基)。其它實例包括二甲基環(huán)丁基(例如3，3-二甲基環(huán)丁基)、二氟環(huán)丁基(例如3，3-二氟環(huán)丁基)、甲基環(huán)戊基(例如1-甲基環(huán)戊基)。另外的實例包括氧代環(huán)丁基(例如3-氧代環(huán)丁基)。
R2可以表示的環(huán)鏈烯基的實例包括包含1或多個雙鍵的鏈烯基(不是芳族基團(tuán))如環(huán)己烯基例如環(huán)己-2，3-烯基。
R1優(yōu)選地表示氟甲基、氯甲基、溴甲基或2′-氟乙基，尤其是氟甲基。
優(yōu)選地，R2表示未被取代或被一個或多個選自甲基、亞甲基和鹵素的基團(tuán)所取代的C3-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)鏈烯基。另一方面，R2表示被氧取代的C3-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)鏈烯基例如3-氧代環(huán)丁基。
R2優(yōu)選地表示未被取代或被一個或多個甲基和/或鹵素所取代的C3-8環(huán)烷基。R2特別優(yōu)選地表示未被取代或被一個或多個甲基或氯所取代的C3-6環(huán)烷基，更優(yōu)選地為C3-4環(huán)烷基。
R2還優(yōu)選地表示被亞甲基所取代的C3-4環(huán)烷基。
在一組優(yōu)選化合物中，R2未被取代或最多被一個甲基或氯所取代。更優(yōu)選地，R2被一個甲基所取代，尤其是在1-位上被取代，例如1-甲基環(huán)丙基或1-甲基-環(huán)丁基。
在另一組優(yōu)選化合物中，R2被一個以上的甲基所取代，例如2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基。
R3優(yōu)選地表示甲基，尤其是為α構(gòu)型的甲基。
優(yōu)選其中R4和R5可以相同或不同并分別表示氫、氟或氯，特別是氫或氟的式(I)的化合物。尤其優(yōu)選的是其中R4和R5都是氟的化合物。
優(yōu)選地， 表示雙鍵。
應(yīng)當(dāng)清楚的是，本發(fā)明包括上文特別優(yōu)選和優(yōu)選組的所有組合。
式(I)的優(yōu)選化合物包括17α-(環(huán)丁基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(環(huán)戊基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(環(huán)己基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯；17α-(2，2-二氯-1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基)-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基)酯；17α-(2，2-二氯環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(3-亞甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(2-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-17α-(3，3-二甲基環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-17α-(3，3-二氟環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)戊基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(3-氧代環(huán)丁基羰基)氧雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯。
一種特別優(yōu)選的化合物是下面的化合物6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯。
另一種特別優(yōu)選的化合物是如下的化合物6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3四甲基環(huán)丙基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯。
另一種特別優(yōu)選的化合物是如下的化合物6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯。
通過例如其與糖皮質(zhì)激素受體結(jié)合的能力和通過抑制具有持續(xù)作用的受體的響應(yīng)而證明了式(I)的化合物可能具有有益的抗炎或抗變態(tài)反應(yīng)作用，特別是通過局部給藥可以獲得這些作用。因此，式(I)的化合物可用于炎癥和/或過敏性病癥的治療，特別是可用于每天一次的治療。
本發(fā)明的化合物有效的疾病狀態(tài)的實例包括皮膚疾病如濕疹、銀屑病、過敏性皮炎、神經(jīng)性皮炎、瘙氧(pruritis)和過敏性反應(yīng)；鼻子、咽喉或肺的炎癥情況，如哮喘(包括過敏原誘發(fā)的哮喘性反應(yīng))、鼻炎(包括枯草熱)、鼻息肉、慢性阻塞性肺疾病、間質(zhì)性肺疾病、以及纖維化；炎性腸病癥如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏??；以及自身免疫性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
本發(fā)明的化合物還可以用于結(jié)膜和結(jié)膜炎的治療。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識到，這里所涉及的治療包括所確認(rèn)情況的預(yù)防以及治療。
如上所述，式(I)的化合物可用于人或獸藥，特別是可用作抗炎劑和抗變態(tài)反應(yīng)劑，尤其是可用于每天一次的治療。
因此，本發(fā)明另一方面提供了用于人或獸藥，特別是用于對患有炎癥和/或過敏性情況的患者進(jìn)行治療的式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物。特別感興趣的是用于每天一次給藥的藥物組合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，其提供了式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物用于制備對患有炎癥和/或過敏性情況的患者進(jìn)行治療，尤其是用于進(jìn)行每天一次的治療的藥物的應(yīng)用。
在另一個或供選擇的方面，其提供了一種用于對患有炎癥和/或過敏性情況的人或動物個體進(jìn)行治療的方法，該方法包括給所說的人或動物個體使用有效量的式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物，尤其是每天一次地進(jìn)行給藥。
可以對本發(fā)明的化合物進(jìn)行制備以可以將其以任何方便的方式進(jìn)行給藥，因此，本發(fā)明在其范圍內(nèi)還包括包含式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物的藥物組合物，并且如果需要的話，該藥物組合還包括一種或多種生理學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
此外，其還提供了一種制備該類藥物組合物的方法，其包括將成分進(jìn)行混合。
本發(fā)明的化合物例如可以被制備成用于進(jìn)行口服給藥、頰給藥、舌下給藥、胃腸外給藥、局部給藥或直腸給藥的形式，尤其是局部給藥的形式。
這里所用的局部給藥包括通過吹入和吸入進(jìn)行給藥。用于局部給藥的各種類型的制劑的實例包括軟膏、洗劑、霜、凝膠、泡沫、用于通過經(jīng)皮貼片進(jìn)行傳遞的制劑、粉劑、噴霧、氣霧劑、用于吸入器或吹入器的膠囊或藥筒或滴劑(例如滴眼劑或滴鼻劑)、用于噴霧的溶液/混懸液、栓劑、陰道栓、滯留灌腸劑和可咀嚼或可吮吸的片劑或小丸(例如用于口瘡潰瘍的治療)或脂質(zhì)體或微囊包封制劑。
用于局部給藥于肺的制劑有利地包括干粉組合物和噴霧組合物。
用于局部傳遞到肺的干粉組合物可以以例如存在于用于例如明膠的吸入器或吹入器的膠囊和藥筒中。制劑一般包含用于將本發(fā)明化合物進(jìn)行吸入的粉末混合物和適宜的基質(zhì)如乳糖或淀粉。優(yōu)選地使用乳糖。各膠囊或藥筒一般可包含20μg-10mg式(I)的化合物，其可包含或不包含另一種活性成分?；蛘撸景l(fā)明的化合物可以沒有賦形劑地存在。該制劑的包裝可適于單位劑量或多劑量的傳遞。在多劑量傳遞的情況中，該制劑可以被預(yù)先計量(例如在Diskus中，見GB 2242134或Diskhaler，見GB 2178965，2129691和2169265)或在應(yīng)用時對其進(jìn)行計量(例如在Turbuhaler中，見EP 69715)。一種單位劑量裝置的實例是Rotahaler(見GB 2064336)。Diskus吸入裝置包括一種延長的條和一種蓋片，所說的延長條是由沿著其長度上間隔排列有多個凹穴的底片所形成的，所說的蓋片可以不漏氣但可剝離地對其進(jìn)行密封從而確定出多個容器，各容器中具有包含式(I)的化合物并優(yōu)選地含有乳糖的可吸入制劑。優(yōu)選地，該條具有足夠的柔韌性從而可以被卷成一卷。蓋片和底片優(yōu)選地具有不是彼此密封的前端部分并且所說前端部分中的至少一個被制造成可以與一種卷繞工具相連。在底和蓋片之間的不漏氣的封口還優(yōu)選地在其整個寬度上延伸。蓋片可以優(yōu)選地從所說基片的第一個末端上沿著縱向方向從該底片上被剝落下來。
特別感興趣的是未增壓的并適于以通過口腔局部給藥于肺的干粉形式進(jìn)行給藥的藥物制劑(尤其是這些不含賦形劑的制劑或可以用稀釋劑或載體如乳糖或淀粉，最優(yōu)選地是用乳糖進(jìn)行制備的這些制劑)。
噴霧組合物例如可以被制備成水性溶液或混懸液的形式或被制備成被包裝于加壓包裝如計量了劑量的吸入器中的使用了適宜液化推進(jìn)劑的氣霧劑形式。適于吸入的氣霧劑組合物可以是混懸液或溶液形式，并且一般包含式(I)的化合物和適宜的推進(jìn)劑如碳氟化合物或包含氫的氯氟烴或其混合物，特別是氫氟烷，尤其是1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-六氟-正-丙烷或其混合物。該氣霧劑組合物可以不包含或包含現(xiàn)有技術(shù)中眾所周知的附加制劑賦形劑如表面活性劑如油酸或卵磷脂和助溶劑例如乙醇。制劑的一個實例是不含賦形劑并基本由(例如由)式(I)的化合物(優(yōu)選未溶劑化的形式例如1型)和選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-六氟-正-丙烷及其混合物的推進(jìn)劑所組成(其可包含或不包含另一種活性成分)。制劑的另一個實例包含式微粒狀的式(I)的化合物、選自1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-六氟-正-丙烷及其混合物的推進(jìn)劑和可溶解于該推進(jìn)劑的混懸劑例如如WO94/21229所述的oligolactic acid或其衍生物。優(yōu)選的推進(jìn)劑是1，1，1，2-四氟乙烷。正如在本說明書中其它地方所示的那樣，看起來式(I)的化合物并沒有與1，1，1，2-四氟乙烷形成溶劑化物。增壓的制劑一般被保留在一種用閥(例如計量閥)閉合并被安裝于一種配有接口管的驅(qū)動器上的容器(例如鋁容器)。
用于通過吸入給藥的藥物理想地具有受控的粒度。用于吸入到支氣管系統(tǒng)中的最佳粒度通常為1-10μm，優(yōu)選地為2-5μm。當(dāng)被吸入時，粒度高于20μm的顆粒一般太大從而難以到達(dá)小氣管。為了獲得這些粒度，可以通過常規(guī)方法例如用微粉化來減少所制造的式(I)化合物的粒度。可以通過風(fēng)篩或篩分來將所需部分分離出來。優(yōu)選地，該顆粒是結(jié)晶性的，其例如是如下的方法來進(jìn)行制備的在存在超聲輻射的情況下，在連續(xù)流動的單元中將在液體溶劑中的作為藥物的式(I)化合物的流動溶液與流動的用于所說藥物的液態(tài)逆溶劑進(jìn)行混合(例如如國際專利申請PCT/GB99/04368所述的那樣來進(jìn)行)，或者將物質(zhì)在液體溶劑中的溶劑流和所說物質(zhì)的液態(tài)逆溶劑流正切地給料到一種具有軸出口孔的圓柱形混合室內(nèi)從而使得所說的液體流通過形成渦旋而密切混合，從而使得該物質(zhì)的結(jié)晶顆粒發(fā)生沉淀(例如如國際專利申請PCT/GB00/04327所述的那樣來進(jìn)行)。當(dāng)使用賦形劑如乳糖時，賦形劑的粒度一般遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于本發(fā)明中被吸入藥物的粒度。當(dāng)該賦形劑是乳糖時，其一般以進(jìn)行了研磨的乳糖的形式存在，其中至多85％的乳糖顆粒具有60-90μm的MMD并且至少15％的乳糖顆粒具有小于15μm的MMD。
局部給藥于鼻的制劑(例如用于治療鼻炎的制劑)包括通過加壓泵給藥于鼻的加壓氣霧劑和水性制劑。特別感興趣的是未加壓并適于局部給藥于鼻腔的制劑。該制劑優(yōu)選地包含用于此目的的作為稀釋劑或載體的水。用于給藥于肺或鼻的水性制劑可以用常規(guī)賦形劑如緩沖劑、張力改性劑等等來進(jìn)行制備。水性制劑還可以通過霧化被給藥于鼻。
其它可能的存在形式如下軟膏、霜和凝膠例如可以用水性或油性基質(zhì)通過加入適宜的增稠劑和/或膠凝劑和/或溶劑來進(jìn)行制備。因此，該類基質(zhì)例如包括水和/或油，如液體石蠟或植物油如花生油或蓖麻油；或溶劑如聚乙二醇?？梢愿鶕?jù)基質(zhì)的性質(zhì)使用的增稠劑和膠凝劑包括軟石蠟、硬脂酸鋁、十六十八烷醇、聚乙二醇、羊毛脂、蜂蠟、羧聚乙烯和纖維素衍生物、和/或甘油單硬脂酸酯和/或非離子乳化劑。
洗劑可以用水性或油性基質(zhì)來進(jìn)行制備，并且其一般還包含一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、混懸劑或增稠劑。
用于外部應(yīng)用的粉末可以借助于任何適宜的粉末基質(zhì)來形成，其中所說的適宜粉末例如滑石粉、乳糖或淀粉。滴劑可以用水性或非水性基質(zhì)來進(jìn)行制備，并且還包含一種或多種分散劑、增溶劑、混懸劑或防腐劑。
有利地，可以通過加入緩沖劑來對本發(fā)明的制劑進(jìn)行緩沖。
在本發(fā)明局部組合物中活性的式(I)化合物的比例取決于被制備制劑的確切類型，但是一般在0.001至10％重量的范圍內(nèi)。但是，一般而言，對于大多數(shù)制劑類型而言，所用比例有利地為0.005至1％并且優(yōu)選地為0.01至0.5％。但是，對于用于吸入或吹入的粉末而言，所用比例在0.1至5％的范圍內(nèi)。
優(yōu)選地將氣霧劑制劑安排成噴霧劑的各計量劑量或“噴氣”包含20μg-2000μg，優(yōu)選約20μg-500μg式(I)的化合物?？梢砸惶旖o藥一次或一天給藥幾次，例如2、3、4或8次，各次給藥例如1、2或3個劑量。該氣霧劑總的日劑量將在100μg-10mg之間，優(yōu)選地在200μg-2000μg之間。由吸入器或吹入器中的膠囊和藥筒所傳遞的總的日劑量和計量劑量一般是用氣霧劑傳遞的這些劑量的兩倍。
可以通過每天一次或幾次地將其應(yīng)用到受影響區(qū)域上來將局部制劑進(jìn)行給藥；在皮膚區(qū)域上可以有利地使用封閉敷裹?？梢酝ㄟ^粘附的儲庫系統(tǒng)來進(jìn)行連續(xù)或長期傳遞。
對于內(nèi)部給藥而言，本發(fā)明的化合物可以以常規(guī)規(guī)方式被制備成用于口服、胃腸外或直腸給藥的形式。用于口服給藥的制劑包括糖漿劑、酏劑、粉劑、顆粒劑、片劑和膠囊劑，其一般根據(jù)所需情況包含常規(guī)賦形劑如粘合劑、填充劑、潤滑劑、崩解劑、潤濕劑、混懸劑、乳化劑、防腐劑、緩沖鹽、矯味劑、著色劑和/或甜味劑。但是，劑量單位形式優(yōu)選地如下所述。
用于內(nèi)部給藥的優(yōu)選制劑形式是劑量單位形式，即片劑和膠囊劑。該類劑量單位形式包含0.1mg至20mg，優(yōu)選2.5至10mg本發(fā)明的化合物。
在需要進(jìn)行全身性的腎上腺-皮層治療的情況中，一般可以通過內(nèi)部給藥來給予本發(fā)明的化合物。
一般而言，用于內(nèi)部給藥的術(shù)語“制劑”可以根據(jù)所使用的制劑類型包含0.05至10％的活性成分。
根據(jù)所治療的情況和所需治療的持續(xù)作用時間，日劑量可以在0.1mg至60mg之間變化，例如為5-30mg。
緩釋或腸衣制劑可能是有利的，特別是對于炎癥性腸病癥而言更為有利。
本發(fā)明的藥物組合物還可以包含另一種治療活性物質(zhì)，例如β2腎上腺受體激動劑、抗組胺藥或抗變態(tài)反應(yīng)藥。因此，本發(fā)明還提供了一種包含式(I)的化合物或其生理上可接受的溶劑化物以及另一種治療活性物質(zhì)，例如β2-腎上腺受體激動劑、抗組胺藥、抗變態(tài)反應(yīng)藥或抗膽堿能藥的組合。
β2-腎上腺受體激動劑的實例包括沙美特羅(例如為xinafoate形式)，沙丁胺醇(例如為硫酸鹽形式)、福莫特羅(例如為富馬酸鹽形式)、酚丙喘寧或叔丁喘寧(例如為硫酸鹽形式)。優(yōu)選長效β2-腎上腺受體激動劑，尤其是這些在24小時的時間內(nèi)具有治療作用的物質(zhì)。
尤其優(yōu)選的長效β2-腎上腺受體激動劑是式(X)的化合物或其鹽或溶劑化物
其中m是從2至8的整數(shù)；n是從3至11的整數(shù)，優(yōu)選地是為從3至7的整數(shù)；前提是m+n為5至19，優(yōu)選地為5至12；R11是-XSO2NR16R17，其中X是-(CH2)p-或C2-6亞鏈烯基；R16和R17各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C(O)NR18R19、苯基、和苯基(C1-4烷基)-，或R16和R17和與其相結(jié)合的氮一起形成一種包含氮的5-、6-、或7-員環(huán)，并且R16和R17各自都可以未被取代或被一個或兩個選自鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷氧基、羥基取代的C1-6烷氧基、-CO2R18、-SO2NR18R19、-CONR18R19、-NR18C(O)R19、或5-、6-或7-員雜環(huán)的基團(tuán)所取代；R18和R19各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基、和苯基(C1-4烷基)-；和p是從0至6的整數(shù)，優(yōu)選地是從0至4的整數(shù)；R12和R13各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、苯基、和C1-6鹵代烷基；和R14和R15各自獨立地選自氫和C1-4烷基，前提是R14和R15中的碳原子總數(shù)不超過4。
在式(I)的化合物中，R11優(yōu)選地連接到相對于-O-(CH2)n-連接的間位上。
R11優(yōu)選地表示-SO2NR16R17，其中R16和R17各自獨立地選自氫和C1-6烷基，R11更優(yōu)選地是-SO2NH2。
R14和R15優(yōu)選地各自獨立地選自氫和甲基，更優(yōu)選地，R14和R15都是氫。
m適宜地是4、5、或6，并且n適宜地是3、4、5或6。優(yōu)選地m是5或6和n是3或4，使得m+n是8、9或10，優(yōu)選地為9。
更尤其優(yōu)選的式(X)的化合物是式(Xa)的化合物或其鹽或溶劑化物
其中R11的定義同上面式(X)的定義相同。
進(jìn)一步更尤其優(yōu)選的式(X)的化合物是式(Xb)的化合物或其鹽或溶劑化物 其中R11的定義同上面式(X)的定義相同。
在式(Xa)和(Xb)的化合物中，R1分別優(yōu)選地連接于相對于-O-(CH2)n-、-O-(CH2)4-或-O-(CH2)3-連接的間位上。
在式(Xa)和(Xb)的化合物中，R11優(yōu)選地是-SO2NR16R17，其中R16和R17各自獨立地選自氫和C1-6烷基，R11更優(yōu)選地是-SO2NH2。
在其中R16和R17和與其相連的氮原子一起形成一種包含氮的5-、6-、或7-員環(huán)的R11的定義中，術(shù)語“包含氮的5-、6-、或7-員環(huán)”指的是飽和或不飽和的5-、6-、或7-員環(huán)，其包括磺胺氮原子并不包含或包含1或2個獨立地選自氮、硫、和氧的雜原子。該類環(huán)的適宜實例包括哌啶基、嗎啉基、和哌嗪基。
在R11的定義中，特定地是在R16和R17上的任選取代基的定義中，術(shù)語“5-、6-、或7-員雜環(huán)”指的是完全或部分飽和或不飽和的5-、6-、或7-員環(huán)，其包括1、2、3或4個獨立地選自氮、硫、和氧的雜原子。該類環(huán)的適宜實例包括吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基、咪唑基、四唑基、四氫呋喃基、噁唑基、噻唑基、噻二唑基、哌啶基、嗎啉基、和哌嗪基。
在X的定義中，術(shù)語“亞鏈烯基”包括順和反式結(jié)構(gòu)。亞鏈烯基的適宜實例包括-CH＝CH-。
式(X)、(Xa)和(Xb)的化合物包括相同的不對稱中心，即
的碳原子。
本發(fā)明在基本純的形式或任何比例的混合物形式中都既包括(S)對映異構(gòu)體又包括(R)對映異構(gòu)體。
同樣，在其中R14和R15是不同基團(tuán)的情況中，其所連接的碳原子是不對稱中心，本發(fā)明在基本純的形式或任何比例的混合物的形式中都包括這種中心的(S)和(R)對映異構(gòu)體。
因此，式(X)、(Xa)和(Xb)的化合物包括所有的對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體以及其任何比例的混合物。
最優(yōu)選的式(X)的化合物式3-(4-{[6-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3-(羥基甲基)苯基]乙基}氨基)-己基]氧}丁基)苯磺胺或其鹽或溶劑化物。
適用于藥物的式(X)、(Xa)和(Xb)的化合物的鹽和溶劑化物是這些其中的反離子或有關(guān)溶劑是可藥用物質(zhì)的情況。但是，具有不可藥用的反離子或有關(guān)溶劑的鹽和溶劑化物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)，例如，其可在其它式(X)、(Xa)和(Xb)的化合物及其可藥用鹽或溶劑化物的制備中用作中間體。
本發(fā)明適宜的鹽包括這些與有機(jī)和無機(jī)酸或堿所形成的鹽。可藥用的酸附加鹽包括與鹽酸、氫溴酸、硫酸、枸櫞酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、醋酸、三氟醋酸、三苯基醋酸、氨基磺酸、對氨基苯磺酸、琥珀酸、草酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、谷氨酸、天門冬氨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙烷磺酸、芳基磺酸(例如對-甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸)、水楊酸、戊二酸、葡萄糖酸、丙三羧酸、肉桂酸、被取代的肉桂酸(例如，苯基、甲基、甲氧基或鹵素取代的肉桂酸，包括4-甲基和4-甲氧基肉桂酸)、抗壞血酸、油酸、萘甲酸、羥萘甲酸(例如1-或3-羥基-2-萘甲酸)、萘丙烯酸(例如萘-2-丙烯酸)、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-或4-羥基苯甲酸、4-氯苯甲酸、4-苯基苯甲酸、苯丙烯酸(例如1，4-苯二丙烯酸)和羥乙基磺酸所形成的鹽。可藥用的堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽、堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽以及與有機(jī)堿如二環(huán)己胺和N-甲基-D-葡糖胺所形成的鹽。
式(X)、(Xa)和(Xb)的化合物可以參考下面所列舉的實施例，用類似方法和其它本身已知的常規(guī)方法來進(jìn)行制備。
因為式(I)的化合物是長效的，所以包含式(I)化合物和長效β2腎上腺受體激動劑的組合物優(yōu)選地一天一次地進(jìn)行給藥，并且對各劑量進(jìn)行選擇以使得該組合物在呼吸病癥的治療中(例如哮喘或COPD，特別是哮喘的治療中)在24小時或更長的時間內(nèi)有療效。
抗組胺藥的實例包括美沙吡林或氯雷他定?？棺儜B(tài)反應(yīng)藥的實例包括色甘酸鹽(例如色甘酸鈉)、酮替芬和奈多羅米(如其鈉鹽形式)?？鼓憠A能藥的實例包括異丙阿托品(例如異丙托溴銨)、噻托溴銨(tiotropium)、阿托品或氧托溴銨(oxitropium)。任何上述物質(zhì)都可以以其供選擇的鹽或溶劑化物的形式被應(yīng)用。
其它適宜的組合包括例如其它抗炎劑，例如NSAIDs(例如PDE4抑制劑、白三烯拮抗劑、iNOS抑制劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整合蛋白拮抗劑和腺苷2a激動劑))或抗感染藥(例如抗生素、抗病毒藥)。
特別感興趣的是式(I)的化合物與磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑的聯(lián)合。用于本發(fā)明這一方面的特異性PDE4抑制劑可以是已知可以抑制PDE4酶的任何化合物或發(fā)現(xiàn)其可作為PDE4抑制劑的任何物質(zhì)，其僅是PDE4抑制劑，不是抑制PDE組以及PDE4其它成員的化合物。其一般優(yōu)選地使用具有約0.1或更高的IC50比例的PDE4抑制劑，所說的IC50比例為以高親和力與環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的PDE4催化形式的IC50除以與環(huán)戊苯吡酮以低親和力結(jié)合的形式的IC50。對于本公開物的目的而言，證明以低親和力與R和S環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的cAMP催化部位是“低親和力”結(jié)合部位(LPDE 4)，證明以高親和力與環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的這種催化部位的其它形式是“高親和力”結(jié)合部位(HPDE 4)。不能將這種“HPDE4”的術(shù)語與用于表示人PDE4的術(shù)語“hPDE”相混淆。進(jìn)行了初步實驗以確立并驗證[3H]-環(huán)戊苯吡酮結(jié)合試驗。在下面詳細(xì)描述的結(jié)合試驗中對這方面的工作進(jìn)行了詳細(xì)討論。
用于本發(fā)明的優(yōu)選的PDE4抑制劑是這些具有有益治療比例的化合物，即在酶以低親合力與環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的情況中優(yōu)選地抑制cAMP催化活性，從而降低了副作用的化合物，其顯然與抑制了與環(huán)戊苯吡酮具有高親合力的形式有關(guān)。另一種表明這種觀點的方法是該優(yōu)選的化合物具有約0.1或更高的IC50比例，所說的IC50比例為以高親和力與環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的PDE4催化形式的IC50除以與環(huán)戊苯吡酮以低親和力結(jié)合的形式的IC50。這種標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步明確表達(dá)為用1μM[3H]-cAMP作為底物，其中一種PDE4抑制劑具有約0.1或更高的IC50比例；所說比例是競爭地與1nM[3H]-環(huán)戊苯吡酮以高親合力結(jié)合的PDE4形式的IC50值與抑制以低親合力與環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的PDE4催化活性的形式的IC50值的比例。
有用的PDE4抑制劑的實例有(R)-(+)-1-(4-溴芐基)-4-[(3-環(huán)戊基氧)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮；(R)-(+)-1-(4-溴芐基)-4-[(3-環(huán)戊基氧)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮；3-(環(huán)戊基氧-4-甲氧基苯基)-1-(4-N′-[N2-氰基-S-甲基-異硫脲基]芐基)-2-吡咯烷酮；順式4-氰基-4-(3-環(huán)戊基氧-4-甲氧基苯基)環(huán)己-1-羧酸]；順式-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-醇]；[4-(3-環(huán)戊基氧-4-甲氧基苯基)吡咯烷-2-亞基]醋酸(R)-(+)-乙酯；和[4-(3-環(huán)戊基氧-4-甲氧基苯基)吡咯烷-2-亞基]醋酸(S)-(-)-乙酯。
最優(yōu)選的是這些具有高于0.5的IC50比例的PDE4抑制劑，并且特別是這些具有高于1.0的IC50比例的化合物。
優(yōu)選的化合物有順式4-氰基-4-(3-環(huán)戊基氧-4-甲氧基苯基)環(huán)己-1-羧酸、2-甲酯基-4-氰基-4-(3環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-酮和順式-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己-1-醇]；這些是優(yōu)選地與低親合力結(jié)合部位結(jié)合并具有0.1或更高的IC50比例的化合物。
其它有益的化合物包括在1996年9月3日出版的US 5,552,438中所述的化合物；該專利及其所公開的化合物在這里被全部引入作為參考。在US 5,552,438所公開的化合物中特別有益的是順式-4氰基-4-[3-(環(huán)戊基氧)-4-甲氧基苯基]環(huán)己烷-1-羧酸(也被稱為cilomalast)及其鹽、酯、前體藥物或物理形式；得自Astra的AWD-12-281(Hofgen，N.等人，第15版EFMC IntSymp Med Chem(Sept 6-10，Edinburgh)1998，Abst P.98)；被命名為NCS-613(INSERM)的9-芐基腺嘌呤衍生物；得自Chiroscience和Schering-Plough的D-4418；被確定為CI-1018的苯并二氮雜PDE4抑制劑(PD-168787；Parke-Davis/Warner-Lambert)；Kyowa Hakko在WO9916766中所公開的苯并間二氧雜環(huán)戊烯衍生物；得自Napp的V-11294ANapp(Landells，L.J.等人，Eur RespJ[Annu Cong Eur RespSoc(Sept 19-23，Geneva)1998]1998，12(Suppl.28)Abst P2393)；roflumilast(CAS參考號碼162401-32-3)和得自Byk-Gulden的pthalazinone(WO 9947505)；或被稱為T-440的化合物(TanabeSeiyaku；Fuji，K.等人，J Pharmacol Exp Ther，1998，284(1)162)。
磷酸二酯酶和環(huán)戊苯吡酮結(jié)合試驗試驗方法1A確定了分離出來的人單核細(xì)胞PDE4和hrPDE(人PDE4重組物)主要以低親和力的形式存在。因此，可以用使用1μM[3H]cAMP作為底物的用于PDE4催化活性的標(biāo)準(zhǔn)試驗來對試驗化合物對抗PDE4低親合力形式的活性進(jìn)行評估(Torphy等人，J.of Biol.Chem.，第267卷，第3期，1798-1804頁，1992)。
用大鼠腦高速上清液作為蛋白質(zhì)來源，將[3H]-環(huán)戊苯吡酮的兩種對映異構(gòu)體制備出25.6Ci/mmol的特異活性。除最后的cAMP50mMTris HCI(pH7.5)，5mM MgCl2、50μM 5′-AMP和1nM[3H]-環(huán)戊苯吡酮外，根據(jù)所公布的方法對標(biāo)準(zhǔn)試驗條件進(jìn)行修改以使得與PDE試驗條件相同(Torphy等人，J.of Biol.Chem.，第267卷，第3期，1798-1804頁，1992)。將該試驗在30℃下進(jìn)行1小時。結(jié)束反應(yīng)，然后用Brandel細(xì)胞收集器將結(jié)合的配體從游離配體上分離下來。在與測定低親合力PDE活性的條件相同的條件下對對于高親合力結(jié)合部位的競爭進(jìn)行評估，只是不存在[3H]-cAMP。
試驗方法1B磷酸二酯酶活性的測量用由供應(yīng)商(Amersham Life Sciences)所描述的[3H]cAMP SPA或[3H]cGMP SPA酶試驗對PDE活性進(jìn)行試驗。該反應(yīng)是在室溫下，在96孔板中，在0.1ml包含如下物質(zhì)(終濃度)的反應(yīng)緩沖劑中進(jìn)行的50mM Tris-HCl，pH7.5，8.3mM MgCl2，1.7mM EGTA，[3H]cAMP或[3H]cGMP(約2000dpm/pmol)，酶和各種濃度的抑制劑。使該試驗持續(xù)進(jìn)行1小時，然后通過在存在硫酸鋅的條件下加入50μl SPA硅酸釔小球來終止反應(yīng)。對該板進(jìn)行振搖并使其在室溫下放置20分鐘。通過閃爍光譜測定法對進(jìn)行了放射性標(biāo)記的產(chǎn)物形成進(jìn)行評估。
R-環(huán)戊苯吡酮結(jié)合試驗[3H]R-環(huán)戊苯吡酮結(jié)合試驗是通過對Schneider及其同事的方法進(jìn)行修改來進(jìn)行的，見Nicholson等人，Trends Pharmacol.Sci.，第12卷，19-27頁(1991)和McHale等人，Mol.Pharmacol.，第39卷，109-113頁(1991)。R-環(huán)戊苯吡酮與PDE4催化部位的結(jié)合見Torphy等人，Mol.Pharmacol.，第39卷，376-384頁(1991)。因此，對[3H]R-環(huán)戊苯吡酮結(jié)合的競爭為未標(biāo)記的競爭劑的PDE4效力提供了獨立的證明。該試驗是在30℃下，在0.5μl包含如下物質(zhì)(終濃度)的緩沖劑終進(jìn)行1小時來完成的50mM Tris-HCl，pH7.5，5mMMgCl2，0.05％牛血清白蛋白，2nM[3H]R-環(huán)戊苯吡酮(5.7×104dpm/pmol)和各種濃度的未進(jìn)行放射性標(biāo)記的抑制劑。通過加入2.5ml冰冷的反應(yīng)緩沖劑(不含[3H]-R-環(huán)戊苯吡酮)并使其通過已經(jīng)用0.3％聚乙烯亞胺浸濕了的Whatman GF/B過濾器進(jìn)行快速真空過濾(Brandel細(xì)胞收集器)來停止反應(yīng)。將過濾器用另外7.5ml冷緩沖劑進(jìn)行洗滌，干燥，然后用液體閃爍光譜測定法進(jìn)行計數(shù)。
因此，在另一方面本發(fā)明還提供了一種包含式(I)的化合物或其生理上可接受的溶劑化物以及PDE4抑制劑的組合。
上面所涉及的組合可以方便地以藥物制劑的形式應(yīng)用，因此包含如上所定義的組合和可藥用稀釋劑或載體的藥物制劑代表了本發(fā)明的另一個方面。
該類組合的各個化合物可以以獨立或組合藥物制劑的形式相繼或同時給藥。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地領(lǐng)會到已知治療物質(zhì)的適宜劑量。
可以用下文中所描述的構(gòu)成本發(fā)明另一方面的方法來制備式(I)的化合物及其溶劑化物。
本發(fā)明用于制備式(I)化合物的方法包括式(II)硫代酸的烷基化 其中R2、R3、R4、R5和 的定義如上所述。
在這種方法中，可以在標(biāo)準(zhǔn)條件下將式(II)的化合物與例如適宜的烷基或鹵代烷基鹵化物進(jìn)行反應(yīng)。
當(dāng)R1表示氟甲基時，優(yōu)選的鹵代烷基鹵化物試劑是溴氟甲烷。
式(II)的化合物可以由相應(yīng)的式(III)的17α-羥基衍生物，用例如G.H.Phillipps等人，(1994)Journal of MedicinalChemistry，37，3717-3729所描述的方法來進(jìn)行制備 其中R2、R3、R4、R5和 的定義如上所述。例如，可將式(III)的化合物與式R2COOH的化合物或其有活性的衍生物例如有活性的酯、酸酐或鹵化物(例如酰基鹵)進(jìn)行反應(yīng)。該反應(yīng)可以在存在有機(jī)溶劑例如三乙胺的條件下進(jìn)行，通常在存在二甲基氨基吡啶(DMPA)的條件下進(jìn)行。
式(III)的化合物可以根據(jù)GB 2088877B所述的方法來進(jìn)行制備。式(III)的化合物還可以通過包括如下步驟的方法來進(jìn)行制備
步驟(a)包括包含式(IV)化合物溶液的氧化。優(yōu)選地，步驟(a)將在存在一種溶劑的情況下進(jìn)行，所說的溶劑包括甲醇、水、四氫呋喃、二噁烷或二甘醇二甲醚。例如，為了提高收率和產(chǎn)量，優(yōu)選的溶劑是甲醇、水或四氫呋喃，更優(yōu)選地是水或四氫呋喃，尤其是用水和四氫呋喃作為溶劑。二噁烷和二甘醇二甲醚也是優(yōu)選的溶劑，其可以(或優(yōu)選地)與水一起使用，或者其可以不與水一起使用。優(yōu)選地，該溶劑的存在數(shù)量為起始材料數(shù)量(1wt)的3至10體積，更優(yōu)選地為4至6體積，尤其是5體積。優(yōu)選地，氧化劑的存在數(shù)量為起始材料數(shù)量的1-9摩爾當(dāng)量。例如，當(dāng)使用50％w/w的過碘酸水溶液時，相對于起始物質(zhì)的數(shù)量(1wt)而言，氧化物劑的存在量可以為1.1至10wt，更優(yōu)選地為1.1至3wt.，尤其是1.3wt。優(yōu)選地，氧化步驟包括使用一種化學(xué)氧化劑。更優(yōu)選地，該氧化劑是過碘酸或碘酸或其鹽。最優(yōu)選地，該氧化劑是過碘酸或過碘酸鈉，尤其是過碘酸。或者(或另外)，還意識到該氧化步驟可以包含任何適宜的氧化反應(yīng)，例如利用空氣和/或氧進(jìn)行的反應(yīng)。當(dāng)該氧化反應(yīng)使用空氣和/或氧時，在所說反應(yīng)中所用的溶劑優(yōu)選地是甲醇。優(yōu)選地，步驟(a)包括將反應(yīng)物在室溫或較溫暖的溫度比如說約25℃的溫度下培養(yǎng)例如2小時?？赏ㄟ^加入逆溶劑使式(V)的化合物從該反應(yīng)混合物中重結(jié)晶而將其分離出來。用于式(V)化合物的適宜的逆溶劑是水。我們已經(jīng)令人吃驚地發(fā)現(xiàn)，在通過加入逆溶劑例如水使式(V)的化合物沉淀時十分需要對該條件進(jìn)行控制。當(dāng)用冷卻水(例如0-5℃的水/冰混合物)來進(jìn)行重結(jié)晶時，雖然可以預(yù)期到較好的逆溶劑性，但是我們發(fā)現(xiàn)結(jié)晶產(chǎn)物體積十分大，與凝膠相似并且十分難過濾。不受理論的限制，我們相信這種低密度產(chǎn)品在晶體的晶格內(nèi)包含許多溶劑化物的溶劑。相反，當(dāng)使用約10℃或更高的溫度(例如室溫)條件時，制備出十分易于過濾的象沙子一樣堅硬的顆粒狀產(chǎn)品。在這些條件下，一般在約1小時后開始結(jié)晶并且一般在幾小時(例如2小時)內(nèi)完成結(jié)晶。不受理論限制，我們相信這種顆粒狀產(chǎn)品在結(jié)晶的晶格內(nèi)包含很少或不包含溶劑化物溶劑。
步驟(b)一般包括加入適于將羧酸轉(zhuǎn)換成硫代羧酸的試劑，例如在存在適宜溶劑例如二甲基甲酰胺的條件下用硫化氫氣體和適宜的偶聯(lián)劑例如羰二咪唑(CDI)來進(jìn)行。
生理學(xué)上不能接受的式(I)化合物的溶劑化物可以在式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物的制備中用作中間體。
式(I)的化合物和/或其溶劑化物的優(yōu)點包括證明該物質(zhì)表現(xiàn)出極佳的抗炎性，具有可預(yù)知的藥動學(xué)和藥效學(xué)行為，具有有吸引力的副作用面(例如通過使得對糖皮質(zhì)激素受體的選擇性高于對孕酮受體的選擇性和/或使得對糖皮質(zhì)激素受體介導(dǎo)的反式阻抑優(yōu)于反式激活而得到了證明)并且可以與人類患者的常規(guī)治療方案相容。另外的優(yōu)點包括該物質(zhì)具有使其易于制造和儲存的理想的理化性質(zhì)。
用下面的非限制性實例來對本發(fā)明進(jìn)行說明實施例常規(guī)LCMS是在Supelcosil LCABZ+PLUS柱(3.3cm×4.6mm ID)上進(jìn)行的，用在水中的0.1％HCO2H和0.01M醋酸銨(溶劑A)、和在乙腈中的0.05％HCO2H5％水(溶劑B)進(jìn)行洗脫，在洗脫時使用如下的洗脫梯度0-0.7分鐘0％B，0.7-4.2分鐘100％B，4.2-5.3分鐘0％B，5.3-5.5分鐘0％B，流速為3ml/分鐘。用Fisons VG Platform分光計，用正電和負(fù)電方式的電噴霧(ES+ve和ES-ve)來對質(zhì)譜進(jìn)行記錄。
中間體中間體117α-(環(huán)丁基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸將6α，9α-二氟-11β，17α-二羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸(是根據(jù)GB 2088877B所描述的方法來進(jìn)行制備的)(1g，2.42mmol)在無水二氯甲烷(20ml)和三乙胺(0.88ml，6.32mmol)中的溶液在氮氣下，在＜5℃的溫度下用環(huán)丁烷碳酰氯(0.72ml，6.31mmol)在無水二氯甲烷(5ml)中的溶液處理約2分鐘。將該溶液在＜5℃的溫度下攪拌45分鐘，然后將其用二氯甲烷(20ml)進(jìn)行稀釋，然后將其連續(xù)用5％碳酸氫鈉溶液(20ml)、1M鹽酸(20ml)和水(20ml)進(jìn)行洗滌。將有機(jī)溶液進(jìn)行干燥(Na2SO4)并將其蒸發(fā)從而得到乳白色泡沫(1.47g)中，將其溶解于丙酮(30ml)中并用1-甲基哌嗪(1ml，9mmol)對其進(jìn)行處理。在2.5h后，將該溶液緩慢加入到進(jìn)行著攪拌的2M鹽酸(55ml)和冰(55m)的混合物中，收集沉淀，在真空下進(jìn)行干燥，得到白色固態(tài)的標(biāo)題化合物(1.12g，93.5％)LCMS保留時間3.79分鐘，m/z 495MH+中間體217α-(環(huán)戊基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸。
用與制備中間體1時所述方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.00分鐘，m/z 509MH+中間體317α-(環(huán)己基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.17分鐘，m/z 523MH+中間體417α-(環(huán)丙基羰基)氧-6α.9a-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.65分鐘，m/z 481MH+中間體56α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.75分鐘，m/z 495MH+中間體66α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，33四甲基環(huán)丙基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.12分鐘，m/z 537MH+中間體717α-(2，2-二氯-1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.20分鐘，m/z 563，565MH+中間體817α-(2，2-二氯環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17α-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.14分鐘，m/z 549，551MH+中間體96α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(3-亞甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.10分鐘，m/z 507MH+中間體106α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(2-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.90分鐘，m/4 95MH+中間體116α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.13分鐘，m/z 509MH+中間體126α，9α-二氟-17α-(3，3-二甲基環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.09分鐘，m/z 523MH+中間體136α，9α-二氟-17α-(3，3-二氟環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.78分鐘，m/z 531MH+中間體146α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-11-甲基環(huán)戊基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.05分鐘，m/z 523MH+中間體156α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(3-氧代環(huán)丁基羰基)氧-雄-1，4-二烯-173-硫代羧酸用與制備中間體1時所述的方法相似的方法來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.41分鐘，m/z 509MH+實施例實施例117α-(環(huán)丁基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯將碳酸氫鈉(112mg，1.33mmol)加入到中間體1(600mg，1.21mmol)在無水N，N-二甲基甲酰胺(6ml)的溶液中并將該混合物在氮氣下冷卻至-20℃。向其中加入溴氟甲烷(0.15ml，2.7mmol)并將該混合物在-20℃下攪拌2小時。向其中加入二乙胺(0.6moi，5.8mmol)并將該混合物在-20℃下攪拌15分鐘，然后將其加入到強(qiáng)烈進(jìn)行著攪拌的2M鹽酸(25ml)中。向其中加入水(75ml)，在將其再攪拌30分鐘后收集白色沉淀并將其在真空的條件下進(jìn)干燥(606mg)。將這種物質(zhì)用使用硅膠的柱色譜進(jìn)行純化，得到白色固態(tài)的標(biāo)題化合物(520mg，81％)LCMS保留時間3.67分鐘，m/z 527MH+。
實施例217α-(環(huán)戊基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體2來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.92分鐘，m/z 541MH+實施例317α-(環(huán)己基羰基)氧-6α，9α-二氟-113-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體3來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.02分鐘，m/z 555MH+實施例417α-(環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體4來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.54分鐘，m/z 513MH+實施例56α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基carbony，氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17i-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體5來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.66分鐘，m/z 527MH+實施例66α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3-四甲基環(huán)丙基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體6來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間4.02分鐘，m/z 569MH+實施例717α-(2，2-二氯-1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體7來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.79分鐘，m/z 595，597，599MH+實施例817α-(2，2-二氯環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體8來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.68分鐘，m/z 581，583MH+實施例96α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(3-亞甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體9來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.68分鐘，m/z 539MH+實施例106α.9a-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(2-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體10來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.57分鐘，m/z 527MH+實施例116α.9a-二氟-11β--羥基-16α-甲基-17α-1-甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例1所述方法相似的方法由中間體11來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.73分鐘，m/z 541MH+實施例126α，9α-二氟-17α-(3，3-二甲基環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯將水(1.8ml)、芐基三丁基銨氯化物(35mg)和二異丙基乙基胺(0.21ml)加入到進(jìn)行著攪拌的中間體12(585mg，1.12mmol)在乙酸乙酯(15ml)中的冷溶液(0℃)中。向其中加入溴氟甲烷(0.075ml)在乙酸乙酯(0.75ml)中的溶液并將該混合物在室溫下攪拌18小時。向其中加入2％二乙胺在4∶1的乙腈∶水(1ml)中的溶液并將該混合物攪拌10分鐘。將有機(jī)相分離出來，將其相繼用0.5M鹽酸、水和1％碳酸氫鈉溶液進(jìn)行洗滌，干燥并將其進(jìn)行蒸發(fā)。將殘余物(570mg)用制備HPLC進(jìn)行純化，得到膏狀固態(tài)的標(biāo)題化合物(490mg，79％)LCMS保留時間3.75分鐘，m/z 555MH+。
實施例136α，9α-二氟-17α-(3，3-二氟環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例12所述方法相似的方法由中間體13來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.47分鐘，m/z 563MH+實施例146α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)戊基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯用與實施例12所述方法相似的方法由中間體14來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.71分鐘，m/z 555MH+實施例156α，9α-二氟-11β--羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(3-氧代環(huán)丁基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯用與實施例12所述方法相似的方法由中間體15來進(jìn)行制備。
LCMS保留時間3.24分鐘，m/z 541MH+長效腎上腺受體激動劑的制備實施例X3-(4-{[6-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3(羥基甲基)苯基]乙基}氨基)-己基]氧}丁基)苯磺胺醋酸酯i)2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代乙基亞胺二羧酸二(叔-丁基)酯在氮氣下，將碳酸銫(70.4g)加入到進(jìn)行著攪拌的2-溴-1-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)乙酮，(Glaxo，DE3513885，1985)(61.8g)和二-叔-丁基亞胺二羧酸酯(47.15g)在乙腈(600ml)中的混懸液中。在將其在21℃下強(qiáng)烈攪拌24小時后，將該混合物用水(約800ml)進(jìn)行稀釋，然后將該產(chǎn)物用二乙醚(1升，然后200ml)進(jìn)行萃取。將所合并的有機(jī)層用鹽水進(jìn)行洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮至約400ml。通過過濾收集白色結(jié)晶，將其用二乙醚進(jìn)行洗滌，然后進(jìn)行干燥，得到標(biāo)題化合物(24.4g)δ(CDCl3)7.78(1H，dd，J8，2Hz)，7.65(1H，brs)，6.87(1H，d，J 8Hz)，4.97(2H，s)，4.88(2H，s)，1.56(6H，s)h1.48(18H，s)。對母液進(jìn)行進(jìn)一步濃縮得到另外的產(chǎn)物(13.8g)。通過在硅膠上對母液進(jìn)行色譜分析，將適宜的洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)并用二乙醚進(jìn)行研磨而獲得第三種產(chǎn)物(7.1g)。
ii)2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代乙基氨基甲酸叔-丁酯在21℃下，將三氟醋酸(92ml)加入到進(jìn)行著攪拌的2-(2，2二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代乙基亞胺二羧酸二(叔-丁基)酯(352.55g)在二氯甲烷(3.6升)中的溶液中并將該反應(yīng)攪拌1.5小時。向其中加入NaOH水溶液(1.75升)，在10分鐘后，將各相分離開。將有機(jī)相用水進(jìn)行洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)至一種油狀物。將其在高真空下存儲一夜，然后將其用己烷∶醚(3∶1)進(jìn)行研磨，得到粗品(226.61g)。通過用二乙醚進(jìn)行重結(jié)晶對其進(jìn)行純化，得到標(biāo)題化合物(122.78g)。通過蒸發(fā)并用使用15％在乙烷中的乙酸乙酯的在Biotage上的色譜而從母液中得到更進(jìn)一步的產(chǎn)物(61.5g)。LCMS RT＝3.37分鐘。
iii)(2R)-2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-羥基乙基氨基甲酸叔-丁酯在0℃下，在氮氣下將2M硼烷-甲硫醚在THF(28ml)中的溶液緩慢地加入到1M(R)-四氫-1-甲基-3，3-二苯基-1H，3H-吡咯并[1，2c][1，3，2]oxazaborole在甲苯(56ml)中的溶液中。在將溫度保持在5℃時緩慢向其中加入2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代乙基氨基甲酸叔-丁基酯，(108.2g)在THF(1.3升)中的溶液，然后在50分鐘內(nèi)向其中加入2M硼烷-甲硫醚在THF(252ml)中的溶液。在1小時后，在冷卻的同時向其中加入2M冷HCl(170ml)，然后將該混合物在乙酸乙酯和水之間進(jìn)行分配。將有機(jī)層用飽和NaHCO3溶液和鹽水進(jìn)行洗滌，然后進(jìn)行干燥(MgSO4)。將該溶液進(jìn)行濃縮，將產(chǎn)品用使用硅膠的閃柱色譜進(jìn)行純化，連續(xù)用乙烷∶乙酸乙酯(4∶1，然后3∶1)進(jìn)行洗脫，得到標(biāo)題化合物(93.3g)，LCMS RT＝3.31分鐘。
iv)(5R)-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-1，3-噁唑烷-2-酮在氮氣下，在冷卻從而使得內(nèi)部溫度維持在0℃的條件下將(2R)-2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-羥基乙基氨基甲酸叔-丁基酯，(86.37g)在DMF(600ml)中的溶液滴加到進(jìn)行著攪拌的氫化鈉(60％油性分散體，11.9g)在DMF(160ml)中的混懸液中并將該混合物在21℃下攪拌2小時。將該混合物重新冷卻至0℃并向其中加入2M HCl(134ml)。將該混合物用水進(jìn)行稀釋，然后將該產(chǎn)品用乙酸乙酯萃取兩次。將溶液用鹽水洗滌兩次，干燥(MgSO4)并進(jìn)行蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(63.55g)LCMS RT＝2.66分鐘。
v)6-溴己基丁-3-炔基醚將3-丁炔-1-醇(42.4ml)和1，6-二溴己烷(260ml)和二硫酸四丁基銨(2.4g)在50％氫氧化鈉水溶液(200ml)中，在氮氣下強(qiáng)烈攪拌3天。向其中加入水(約700ml)，將有機(jī)層分離出來。將水層用二氯甲烷萃取兩次(2×100ml)并將所合并的有機(jī)層用水進(jìn)行洗滌，干燥并將其進(jìn)行濃縮。將在石油醚(bp40-60°)中的殘余物裝填到硅膠柱(1.5kg)上，并用石油醚(bp40-60℃)，然后用在石油醚(bp40-60℃)中的10％二乙醚進(jìn)行洗脫，得到標(biāo)題化合物(103.3g)，δ(CDCl3)3.56(2H，t，J 7Hz)，3.47(2H，t，J 7Hz)，3.42(2H，t，J7Hz)，2.45(2H，m)，1.99(1H，t，J 2Hz)，1.87(2H，m)，1.60(2H，m)和1.50至1.33(4H，m)。
vi)(5R)-3-[6-(丁-3-炔氧基)己基]-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-1，3噁唑烷-2-酮在將內(nèi)部溫度維持在0℃的條件下，在攪拌的同時將在DMF(100ml)中的(5R)-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-1，3-噁唑烷-2-酮(10g)在氮氣下滴加到進(jìn)行著攪拌的氫化鈉(60％油性分散體，2.33g)在DMF(50ml)中的混懸液中。在0-5℃下持續(xù)攪拌1小時。將該混合物重新冷卻至0℃并在1分鐘內(nèi)向其中加入6-溴己基丁-3-炔基醚(14.7g)在DMF(50ml)中的溶液。然后將該混合物在20-30℃下攪拌2小時。向其中加入2M HCl(9ml)并將該混合物在水和二乙醚之間進(jìn)行分配。將水層用更多的二乙醚進(jìn)行萃取，將所合并的有機(jī)層用鹽水洗滌兩次。在干燥(MgSO4)后，將溶液進(jìn)行濃縮并將其裝填到用二乙醚∶石油醚(bp40-60℃)(1∶2)裝填的硅膠柱上。將該柱連續(xù)用這種混合物，然后用(1∶1)的比例并然后用二乙醚進(jìn)行洗滌，得到標(biāo)題化合物(13.88g)LCMS RT＝3.45分鐘。
vii)3-[4-({6-[(5R)-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]己基}氧)丁-1-炔基]苯磺胺在氮氣下，將(5R)-3-[6-(丁-3-炔氧基)己基]-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-1，3噁唑烷-2-酮(1.79g)與3-碘苯磺胺(1.4g)在乙腈∶三乙胺(1∶1.42ml)中攪拌10分鐘。向其中加入碘化亞銅(0.083g)和二氯二(三苯基膦)鈀(0.192g)并將該混合物在21℃下攪拌17小時。將該混合物蒸發(fā)至干燥，將殘余物用硅膠(250g)進(jìn)行色譜分析，用30％乙酸乙酯∶石油醚(bp40-60)，然后用50％，然后用75％并最后用乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，得到標(biāo)題化合物(2.35g)，LCMS RT＝3.44分鐘。
viii)3-[4-({6-[(5R)-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]己基}氧)丁基]苯磺胺將3-[4-({6-[(5R)-5-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]己基}氧)丁-1-炔基]苯磺胺(2.35g)與氧化鉑(0.3g)在THF(30ml)中在氫氣下攪拌2小時。通過用過濾器過濾來除去催化劑，然后將濾餅用乙酸乙酯進(jìn)行浸濾。使所合并的濾液通過在乙酸乙酯中的硅膠(200g)，然后將洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物(2.32g)，LCMS RT＝3.49分鐘。
ix)3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2，2-二甲基)-4H-1，3-噁唑烷-6-基)-2-羥基乙基]氨基}己基]氧}丁基}苯磺胺在用強(qiáng)烈的氮氣氣流進(jìn)行吹氣的同時將3-[4-({6-[(5R)-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]己基}氧)丁基]苯磺胺(0.43g)在THF(10ml)中進(jìn)行攪拌。向其中加入三甲基硅酸(silanoate)鉀(0.43g)并將該混合物在氮氣下，在70℃下攪拌2.5小時。將該混合物在二氯甲烷和pH6.4的磷酸鹽緩沖液之間進(jìn)行分配。將水層用更多的二氯甲烷進(jìn)行萃取。將所合并的有機(jī)層用水進(jìn)行洗滌，干燥(MgSO4)并將其進(jìn)行濃縮。用硅膠(60g)對殘余物進(jìn)行純化，相繼用乙酸乙酯∶石油醚(bp40-60C)(1∶1)、乙酸乙酯、10％然后20％在乙酸乙酯中的甲醇進(jìn)行洗脫，得到標(biāo)題化合物(0.286g)，LCMS RT＝2.56分鐘。
x)3-(4-6-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3-(羥基甲基)苯基]乙基}氨基)-己基]氧}丁基)苯磺胺醋酸鹽在蒸發(fā)至干燥前，將3-{4-[(6-{[(2R)-2-(2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧雜環(huán)己烯-6-基)-2-羥基乙基]氨基}己基)氧]丁基}苯磺胺(0.283g)與醋酸和水在70℃下攪拌35分鐘。用甲醇將殘余物重新蒸發(fā)兩次，得到標(biāo)題化合物(0.318g)LCMS RT＝2.34分鐘，ES+ve495(MH)+。
藥理學(xué)活性用一般可對體內(nèi)抗炎或抗變態(tài)反應(yīng)活性進(jìn)行預(yù)測的糖皮質(zhì)激素激動劑活性的功能性體外試驗對藥理學(xué)活性進(jìn)行了評估。
該功能性試驗是以K.P.Ray等人，Biochem J.(1997)，328，707-715的描述為基礎(chǔ)的。將用得自與sPAP偶合的ELAM基因助催化劑(分泌性堿性磷酸酯酶)的用包含NF-KB效應(yīng)元件的受體基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的A549細(xì)胞用適宜劑量的化合物在37℃下處理1小時。然后用腫瘤壞死因子(TNF，10ng/ml)將該細(xì)胞刺激16小時，在此期間，用標(biāo)準(zhǔn)比色分析來測量所產(chǎn)生的堿性磷酸酯酶的數(shù)量。根據(jù)所估算的EC50值來構(gòu)造劑量響應(yīng)曲線。
在這種試驗中，實施例1至5的化合物表現(xiàn)出＜2nM的EC50值。
孕酮受體活性的篩選已經(jīng)有報道稱人乳癌細(xì)胞系T47D對孕酮有上調(diào)內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的反應(yīng)(Di Lorenzo等人，Cancer Research(1991)51，4470-4475。將T47D細(xì)胞以每孔1×105個細(xì)胞的密度接種到96孔板中并使其在37℃下生長一夜。將甾族化合物溶解于DMSO中，將其加入到細(xì)胞中(最終DMSO濃度為0.7％)，然后將其在37℃下培養(yǎng)24小時。然后將該細(xì)胞用PBS洗滌并用RIPA緩沖劑(在磷酸鹽緩沖液中包含1％IGEPAL，0.5％脫氧膽酸鈉，0.1％SDS)進(jìn)行溶解。用溶解于1M二乙醇胺、0.28M NaCl、0.5mM MgCl2中的作為底物的對-硝基苯磷酸酯(1.5mg/ml)用分光光度法(405nm)來對堿性磷酸酯酶的活性進(jìn)行測定。劑量響應(yīng)曲線是由所評估的EC50值得出的。
根據(jù)上述篩選對實施例5和11的孕酮活性進(jìn)行了試驗，并且通過將對孕酮受體的ED50除以對糖皮質(zhì)激素受體的ED50而對選擇性進(jìn)行了測定。實施例5的選擇性為353(對照丙酸氟地松∶選擇性＝57)，實施例11的選擇性為230(對照丙酸氟地松∶選擇性＝107)。
在整篇說明書和下面的權(quán)利要求中，除在上下文中有特定要求，否則“包括”(comprise，comprises，comprising)應(yīng)被理解為指的是包含所說的整數(shù)或步驟或有益基團(tuán)，但是其并不排除任何其它整數(shù)或步驟或有益基團(tuán)或一些步驟。在本申請中所描述的專利和專利申請在這里都被引入作為參考。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物及其溶劑化物 其中R1表示C1-6烷基或C1-6鹵代烷基；R2表示未被取代或被一個或多個選自氧、甲基、亞甲基和鹵素的基團(tuán)所取代的C3-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)鏈烯基；R3表示氫、甲基(其可以為α或β構(gòu)型)或亞甲基；R4和R5可以相同或不同并各自表示氫或鹵素；和 表示單或雙鍵。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中R2表示未被取代或被一個或多個選自甲基、亞甲基和鹵素的基團(tuán)所取代的C3-8環(huán)烷基或C3-8環(huán)鏈烯基。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中R2表示未被取代或被一個或多個甲基和/或氯所取代的C3-6環(huán)烷基。
4.如權(quán)利要求1至3中任意一項所述的化合物，其中R1表示氟甲基、氯甲基、溴甲基或2′-氟乙基。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物，其中R1表示氟甲基。
6.如權(quán)利要求1至5中任意一項所述的化合物，其中R3是甲基。
7.如權(quán)利要求1至6中任意一項所述的化合物，其中R4和R5可以相同或不同并各自表示氫、氟或氯。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中R4和R5可以相同或不同并各自表示氫或氟。
9.如權(quán)利要求8所述的化合物，其中R4和R5都是氟。
10.如權(quán)利要求1至9中任意一項所述的化合物，其中 表示雙鍵。
11.如權(quán)利要求1所述的化合物，其是17α-(環(huán)丁基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(環(huán)戊基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸.S-氟甲基酯；17α-(環(huán)己基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；或其任何一種的溶劑化物。
12.如權(quán)利要求1所述的化合物，其是6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(2，2，3，3四甲基環(huán)丙基羰基)氧-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S氟甲基酯；17α-(2，2-二氯-1-甲基環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；17α-(2，2-二氯環(huán)丙基羰基)氧-6α，9α-二氟-113-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(3-亞甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(2-甲基環(huán)丙基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；或其任何一種的溶劑化物。
13.如權(quán)利要求1所述的化合物，其是6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)丁基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；或其溶劑化物。
14.如權(quán)利要求1所述的化合物，其是6α，9α-二氟-17α-(3，3-二甲基環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-17α-(3，3-二氟環(huán)丁基羰基)氧-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-(1-甲基環(huán)戊基羰基)氧-3-氧代-雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-(3-氧代環(huán)丁基羰基)氧雄-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟甲基酯；或其任何一種的溶劑化物。
15.用于獸或人藥的權(quán)利要求1至14中任意一項所定義的式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物。
16.如權(quán)利要求1至14中任意一項所定義的式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽用于制備治療炎癥和/或過敏癥狀的藥物的應(yīng)用。
17.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1至14中任意一項所定義的式(I)化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物，必要時可與一種或多種生理學(xué)上可接受的稀釋劑或載體混合。
18.一種藥物氣霧劑，其包含權(quán)利要求1至14中任意一項所定義的式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的鹽和作為推進(jìn)劑的碳氟化合物或含氫的氯氟烴化合物以及任選組合的表面活性劑或溶劑。
19.如權(quán)利要求17所述的藥物組合物，其還包含另一種治療活性成分。
20.如權(quán)利要求19所述的藥物組合物，其中所說的另一種治療活性成分是β2-腎上腺受體激動劑。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其中所說的β2-腎上腺受體激動劑是下式(X)的化合物或其鹽或溶劑化物 其中m是從2至8的整數(shù)；n是從3至11的整數(shù)，前提是m+n為5至19，R11是-XSO2NR16R17，其中X是-(CH2)p-或C2-6亞鏈烯基；R16和R17各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C(O)NR18R19、苯基、和苯基(C1-4烷基)-，或者R16和R17和與其相連的氮一起形成一個5-、6-、或7-員含氮環(huán)，并且R16和R17各自都可未被取代或被一個或多個選自鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6烷氧基、羥基取代的C1-6烷氧基、-CO2R18、-SO2NR18R19、-CONR18R19、-NR18C(O)R19、或5-、6-或7-員雜環(huán)的基團(tuán)所取代；R18和R19各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基、和苯基(C1-4烷基)-；和p是從0至6的整數(shù)，優(yōu)選地為從0至4的整數(shù)；R12和R13各自獨立地選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、苯基、和C1-6鹵代烷基；和R14和R15各自獨立地選自氫和C1-4烷基，前提是R14和R15中的碳原子總數(shù)不高于4。
22.如權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中所說的式(X)化合物是3-(4-([6-({(2R)-2-羥基-2-[4-羥基-3-(羥基甲基)苯基]乙基}氨基)-己基]氧}丁基)苯磺酰胺、或其鹽或溶劑化物。
23.一種治療患有炎癥和/或過敏情況的人或動物個體的方法，該方法包括給所說的人或動物個體使用治療有效量的如權(quán)利要求1至14中任意一項所定義的式(I)的化合物或其生理學(xué)上可接受的溶劑化物。
24.一種制備如權(quán)利要求1所述的式(I)的化合物的方法，其包括將下式(II)化合物烷基化 其中R2、R3、R4、R5和 的定義同權(quán)利要求1中的定義。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中所說的烷基化是通過將式(II)的化合物與適宜的烷基或鹵代烷基鹵化物反應(yīng)來進(jìn)行的。
26.式(II)的化合物 其中R2、R3、R4、R5和 的定義同權(quán)利要求1中的定義。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的化合物和其溶劑化物、其制備方法以及其在治療中的應(yīng)用，式中R
文檔編號A61K31/568GK1527838SQ02811212
公開日2004年9月8日 申請日期2002年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月30日
發(fā)明者K·比格加迪科, P·瓊斯, J·J·帕內(nèi), K 比格加迪科, 帕內(nèi) 申請人:葛蘭素集團(tuán)有限公司