專利名稱：稠合的三雜環(huán)化合物的制作方法
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背景腫瘤的治療可以通過幾種治療模式達(dá)到，包括手術(shù)、放射、化學(xué)治療和這些治療方法的綜合。其中，對(duì)于不能進(jìn)行手術(shù)的或者轉(zhuǎn)移型癌癥來說，化學(xué)治療必不可少的?？紤]到腫瘤在細(xì)胞類型、形態(tài)、生長(zhǎng)速率和其它細(xì)胞特征方面的多樣性，美國(guó)國(guó)家癌癥研究所(NCI)開發(fā)了一種“疾病定向的”方法來篩選抗腫瘤活性.Boyd，M.R.(1989)in Principle of Practice of OncologyDevita，J.T.，Hellman，S.，and Rosenberg，S.A.(Eds.)Vol.3，PPO Update，No.10。這個(gè)體外篩選體系是基于由大約60個(gè)主要的人類腫瘤腫瘤(例如白血病、肺癌、結(jié)腸癌、CNS癌、黑素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌和乳腺癌)的細(xì)胞線組成的人類腫瘤細(xì)胞線組而進(jìn)行的，并且作為鑒定具有抗腫瘤活性的化合物的工具。在這些化合物中，改性的核苷堿(nucleobase)是特別引起人們興趣。
概述本發(fā)明是基于發(fā)現(xiàn)了鳥苷—一種核苷堿的某些稠合的三環(huán)類似物可用于治療腫瘤而完成的。
本發(fā)明的一個(gè)方面涉及下式的稠合的三雜環(huán)化合物
R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基(cyclyl)或雜環(huán)基；R3和R4獨(dú)立地為H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。注意到，在上述的任何取代基中所列的左邊的原子與三雜環(huán)最靠近。剛才所述的一小組化合物的特征在于R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R1是H；R2是烷基或芳基；R3是烷基、鏈烯基或芳基；而R5是H。另一小組化合物的特征在于R4是烷基、鏈烯基或芳基；R1是H；R2是烷基或芳基；R3是烷基、鏈烯基或芳基；而R5是H。優(yōu)選地，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；X是O；而Y是OC(O)Re。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及上式所代表的稠合的三雜環(huán)化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。一小組化合物的特征在于R1是H；R2是烷基；其中R3是烷基、鏈烯基或芳基；而R5是H。優(yōu)選地，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；而X是O。
在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，還有上式所代表的稠合的三雜環(huán)化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3是H、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。一小組化合物的特征在于R1是H；R2是烷基或芳基；R3是鏈烯基或芳基；而R5是H；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；而X是O。
這里所說的烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基和雜環(huán)基包括取代的和未取代的基團(tuán)。術(shù)語“取代的”是指有一個(gè)或多個(gè)取代基(可以相同或不同)，每一個(gè)取代一個(gè)H原子。取代基的例子包括但是不限于鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、C1-C6烷氧基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中烷基、鏈烯基、烷氧基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基選擇性地被C1-C6烷基、芳基、雜芳基、鹵素、羥基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、二烷基氨基、二芳基氨基、氰基或硝基取代。注意，本發(fā)明所包含的取代基的組合及其變化僅僅是能形成穩(wěn)定的化合物的那些。這里所用的術(shù)語“穩(wěn)定的”是指其穩(wěn)定性足以允許生產(chǎn)的那些化合物以及能保持化合物的完整達(dá)足夠長(zhǎng)的時(shí)間從而可用于這里所詳細(xì)描述的目的(例如治療或預(yù)防性地給主體服藥或者防腐、傷口包扎、滅菌或防感染用途)的那些化合物。
術(shù)語“烷基”是指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈的和帶支鏈的烷基。術(shù)語“環(huán)基”是指含有4-8個(gè)碳原子的烴環(huán)。術(shù)語“雜環(huán)基”是指含有4-8個(gè)環(huán)原子其中至少有一個(gè)雜原子(例如S、N或O)作為環(huán)的組成部分的一種環(huán)。術(shù)語“芳基”是指含有至少一個(gè)芳香環(huán)的烴環(huán)體系。芳基的例子包括但是不限于苯基、萘基和芘基(pyrenyl)。術(shù)語“雜芳基”是指含有至少一個(gè)包含至少一個(gè)雜原子例如O、N或S的芳香環(huán)的烴環(huán)體系。雜芳基的例子包括但是不限于呋喃基、芴基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基(pyridinyl)、嘧啶基、喹唑啉基和吲哚基。
上述稠合的三雜環(huán)化合物包括它們自身及其可以使用的鹽和藥物前體。這樣的鹽例如可以在稠合的三雜環(huán)化合物的帶正電荷的取代基(例如氨基)與一種陰離子之間形成。合適地陰離子包括但是不限于氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根離子、硝酸根離子、磷酸根離子、檸檬酸根離子、甲磺酸根離子、三氟乙酸根離子和乙酸根離子。同樣地，在稠合的三雜環(huán)化合物的帶負(fù)電荷的取代基(例如羧酸根)可以與一種陽離子形成形成鹽。合適的陽離子包括但是不限于鈉離子、鉀離子、鎂離子、鈣離子和銨陽離子例如四甲基銨離子。藥物前體的離子包括酯和其它藥學(xué)上可接受的衍生物，這種藥物前體在服藥給主體后能提供前面所述的稠合的三雜環(huán)化合物。
本發(fā)明還涉及一種治療腫瘤(例如白血病、肺癌、結(jié)腸癌、CNS癌、黑素瘤(melanoma)、卵巢癌(ovarian cancer)、腎癌、前列腺癌或乳腺癌)的方法，該方法包括需要治療的主體服用有效量的上式的化合物，其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3和R4獨(dú)立地為H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是ORe、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、ReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；而m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。就上式來說，一小組化合物的特征在于R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R1是H；R5是H；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；X是O；而Y是ORe或OC(O)Re。另一小組化合物的特征在于R4是烷基、鏈烯基或芳基；R1是H；R5是H；而R3是烷基、鏈烯基或芳基。
在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)，還有一種含有前面所述的一種或多種稠合的三雜環(huán)化合物并且用于治療治療腫瘤的組合物，以及這樣的組合物在生產(chǎn)用于治療腫瘤的藥物中的用途。
根據(jù)下面對(duì)幾個(gè)實(shí)施例的詳細(xì)描述以及后面所附的權(quán)利要求書，本發(fā)明的其它特征或優(yōu)點(diǎn)將變得很明顯。
詳細(xì)描述本發(fā)明的稠合的三雜環(huán)化合物的七個(gè)實(shí)例是3-(2-羥基-乙氧基甲基-6-(2-甲基丙烷基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-s-引達(dá)省-8-酮(化合物1)(indacen-8-one)、3-(2-羥基-乙氧基甲基-6-(5-氯-噻吩-2-基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物2)、3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物3)、5-(4-甲氧基苯基甲基)-3-(2-羥基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物4)、5-(2-乙腈基(ethanitrilyl))-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物5)、5-(3，4-二氯苯基甲基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-(4-氯苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物6)和3，5-二芐基-6-(4-氯苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物7)。
上述的稠合的三雜環(huán)化合物可以通過本領(lǐng)域中熟知的方法以及這里所公開的合成路線制備。例如，可以使9-[(2-羥基乙氧基)甲基]胍(無環(huán)毒素(acyclovir))與一種鹵代的酮化合物反應(yīng)而制得本發(fā)明的化合物例如化合物1和2。所得的化合物可以與一種烷基鹵化物反應(yīng)而制得所要的化合物4。另外，所得的化合物可以與一種酸酐例如乙酸酐反應(yīng)而制得本發(fā)明的另一種化合物例如化合物3，然后用一種烷基鹵化物在不同的條件下處理而制得本發(fā)明的另外一種化合物例如化合物5、6和7。
下列是用來描述合成七個(gè)稠合的三雜環(huán)化合物的一個(gè)方案。 在下列實(shí)施例1-7中分別詳細(xì)描述了化合物1-7的合成。
上述合成路線中所用的化學(xué)試劑可以包括例如溶劑、試劑、催化劑、保護(hù)基團(tuán)和脫保護(hù)基試劑。上述方法還可以在這里所具體描述的步驟之前或之后包含其它步驟以加上或除去合適的保護(hù)基團(tuán)以便最終合成三雜環(huán)化合物。另外，可以以不同的順序或次序來進(jìn)行各個(gè)合成步驟而得到所要的化合物。用于合成實(shí)用的三雜環(huán)化合物的合成化學(xué)轉(zhuǎn)變和保護(hù)基團(tuán)方法學(xué)(保護(hù)和脫保護(hù))是本領(lǐng)域中已知的，并且包括例如R.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd Ed.，John Wiley and Sons(1991)；L.Fieser and M.Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser’s Reagents for Organic Synthesis，JohnWiley and Sons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents forOrganic Synthesis，John Wiley and Sons(19915)及其后續(xù)的版本中所描述的那些。
可以使用一種方法例如柱色譜、高壓液相色譜或重結(jié)晶把這樣合成的三雜環(huán)化合物進(jìn)一步純化。
在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)的還有一種包含有效量的一種或多種上述稠合的三雜環(huán)化合物和一種藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。另外，本發(fā)明還包括一種給需要進(jìn)行腫瘤治療的主體服用有效量的這種化合物的方法。術(shù)語“治療”被定義為給患有腫瘤、腫瘤癥狀、因腫瘤而產(chǎn)生的次級(jí)疾病或發(fā)生腫瘤的前兆的主體使用或服用一種包含三雜環(huán)化合物的組合物，其目的是為了治愈、減輕、醫(yī)治或改善腫瘤、腫瘤的癥狀、因腫瘤而產(chǎn)生的次級(jí)疾病或發(fā)生腫瘤的前兆?！坝行Я俊笔侵敢谥委煹闹黧w上達(dá)到治療效果所需要的化合物的數(shù)量。在Freireich等人的(1996)Cancer Chemother Rep 50219中描述了動(dòng)物和人的劑量相關(guān)性(基于mg/m2的體表面)。體表面積可以根據(jù)病人的身高和體重而大致地進(jìn)行確定，參見例如Scientific Tables，GeigyPharmaceuticals，Ardley，N.Y.，1970，537。稠合的三雜環(huán)化合物的有效量可以在大約5mg/Kg-600mg/Kg的范圍。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，有效劑量也會(huì)隨被治療的腫瘤的類型、給藥方式、所用的賦形劑和有可能一起使用其它治療手段例如使用其它抗腫瘤劑或輻射治療而發(fā)生變化。
為了實(shí)施本發(fā)明的方法，可以以口服方式、非腸胃給藥方式、吸入噴劑(inhalation spray)、表面給藥、直腸給藥、鼻腔給藥、面頰給藥(bucally)、陰道給藥或通過植入藥庫(kù)方式服用作為藥物組合物的組份的稠合的三雜環(huán)化合物。這里所用的術(shù)語“非腸胃的”包括皮下的、內(nèi)皮的、靜脈內(nèi)的、肌肉內(nèi)的、關(guān)節(jié)內(nèi)的、動(dòng)脈內(nèi)的、滑液內(nèi)的、胸骨內(nèi)的、鞘內(nèi)的、受害部位內(nèi)的和頭蓋內(nèi)的注射或灌注技術(shù)。
可以按照本領(lǐng)域中的已知技術(shù)，使用合適的分散劑或增濕劑(例如吐溫80)和懸浮劑來配制無菌的注射用組合物例如無菌的注射用水懸浮液或油懸浮液。無菌的注射用制劑可以是在無毒的非腸胃方式可以接受的稀釋劑或溶劑中的無菌的注射溶液或懸浮液，例如是1，3-丁二醇的溶液?？梢允褂玫目梢越邮艿妮d體和溶劑有甘露醇、水、林格(Ringer)溶液和等滲的氯化鈉溶液。另外，無菌的固定油常用作溶劑或懸浮介質(zhì)(例如合成的單或雙酸甘油酯)。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射液，因?yàn)樗鼈兪翘烊坏乃帉W(xué)上可接受的植物油，例如橄欖油或蓖麻油，特別是它們的聚氧乙基化形式。這些油溶液或懸浮液也可以包含一種長(zhǎng)鏈的醇稀釋劑或分散劑或羧甲基纖維素或類似的分散劑。其它常用的表面活性劑例如吐溫或斯班(Span)或其它類似的乳化劑或常用于生產(chǎn)藥學(xué)上可接受的固體、液體或其它劑型的可促進(jìn)生物利用的試劑也可以用于制劑的目的。
口服用的組合物可以是任何可以接受的口服劑型，包括但是不限于膠囊、片劑、乳液和水性懸浮液、分散液和溶液。就口服用的片劑來說，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。典型地還加入潤(rùn)滑劑例如硬脂酸鎂。以膠囊形式口服時(shí)，可以使用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)口服水性懸浮液或乳液時(shí)，可以把活性組份懸浮或溶于摻有乳化劑或懸浮劑的油相中?？梢园凑罩扑庮I(lǐng)域中熟知的技術(shù)來制備鼻腔用氣溶膠或吸入組合物，并且可以使用苯甲醇或其它合適的防腐劑、用來促進(jìn)生物可利用度的吸收促進(jìn)劑、氟代烴和/或本領(lǐng)域中已知的其它助溶劑或分散劑把它們配制成鹽水溶液。也可以以直腸給藥用的栓劑形式給藥稠合的三雜環(huán)化合物。
藥物組合物中所用的載體在與配方中活性組份的相容性(優(yōu)選能夠穩(wěn)定活性組份)方面必須是“可以接受的”，并且不會(huì)對(duì)被治療的主體產(chǎn)生危害。例如，可以把助溶劑例如能與稠合的三雜環(huán)化合物形成特異性的溶解度更大的配合物的環(huán)糊精或一種或多種助溶劑用作輸送稠合的三雜環(huán)化合物的制藥用的賦形劑。其它載體的例子包括膠體二氧化硅、硬脂酸鎂、纖維素、月桂基硫酸鈉和D&C Yellow#10。
可以通過體外試驗(yàn)，基于NCI篩選體系，使用大約60種主要的人類腫瘤的細(xì)胞線，針對(duì)稠合的三雜環(huán)化合物在治療腫瘤方面的效率進(jìn)行初步篩選。參見Monks等人(1991)JNCI，J.Natl.Cancer Inst.83757-766；Alley等人(1988)Cancer Res.48589-601；Shoemaker等人，(1988)Prog.Clin.Biol.Res.276265-286；和Stinson等人，(1989)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.30613。簡(jiǎn)單來說，把按照特定細(xì)胞類型和預(yù)定達(dá)到的細(xì)胞密度(5,000-40,000個(gè)細(xì)胞/孔，基于細(xì)胞的生長(zhǎng)特性)稀釋后的細(xì)胞懸浮液加入(100μL)一個(gè)96-孔的微量滴定板上，在37℃下預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)。在0時(shí)，以每份100μL的量向微量滴定板的每個(gè)孔中加入相當(dāng)于最終濃度兩倍的稀釋液。通常，以5份10-倍稀釋液對(duì)試驗(yàn)化合物進(jìn)行評(píng)估。在一個(gè)常規(guī)試驗(yàn)中，試驗(yàn)化合物的最高濃度是10-4M。在5％CO2的大氣和100％的濕度下培養(yǎng)48小時(shí)。使用Rubinstein等人(1990，JNCI，J.Natl.Cancer Inst.821113-1118)和Skehan等人(1990，JNCI，J.Natl.Cancer Inst.821107-1112)中描述的磺基羅丹明B(sulforhodamine B)試驗(yàn)法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)。使用板式讀數(shù)計(jì)讀取光密度，用微機(jī)把光密度加工成特種濃度參數(shù)。NCI已經(jīng)重新命名了IC50值—能引起50％的生長(zhǎng)抑制的濃度，GI50值強(qiáng)調(diào)對(duì)0時(shí)計(jì)數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行校正，因此，GI50值測(cè)定試驗(yàn)化合物的生長(zhǎng)抑制能力。參見Boyd等人(1992)，Cytotoxic Anticancer DrugModels andConcepys for Drug Discovery and Development；Vleriote，F(xiàn).A.；Corbett，T.H.；Baker，L.H.(Eds.)；Kluwer AcademicHingham，MA，pp11-34。
不必進(jìn)一步精心描述，相信上述描述已經(jīng)充分地保證了本發(fā)明實(shí)施。因此，下列的具體實(shí)施例只是解釋為用于詳細(xì)說明，而不應(yīng)以任何方式把它們解釋為對(duì)說明書其它部分的限定，在此通過參考文獻(xiàn)把這里所引用的所有文獻(xiàn)全部引入。
實(shí)施例13-(2-羥基-乙氧基甲基-6-(2-甲基丙烷基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物1)的合成在室溫下，把676g 9-[(2-羥基乙氧基)甲基]胍(無環(huán)毒素)、18ml N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和200mg氫化鈉(80％)的溶液攪拌15分鐘，然后滴加0.7ml4-甲基-1-溴戊烷-2-酮。溶液變?yōu)榘底厣?，在室溫下攪?小時(shí)，加入15ml氨，連續(xù)攪拌過夜。除去溶劑，得到一種殘留物，通過柱色譜(硅膠)純化殘留物，用氯仿/甲醇(6/1)洗脫，得到一種油，使油重結(jié)晶，得到化合物1。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.01(1H，s，NCH＝N)；δ7.73(1H，s，N＝CH-C)；δ5.60(2H，s，NCH2O)；δ4.65(1H，broad，OH)；δ3.42～3.49(4H，m，CH2CH2)；δ2.40～2.52(2H，m，CH2)；δ1.80～1.84(1H，m，CH)；and δ0.92(6H，m，2CH3).
實(shí)施例23-(2-羥基-乙氧基甲基-6-(5-氯-噻吩-2-基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物2)的合成在室溫下，把720mg無環(huán)毒素、20ml DMF和300mg氫化鈉(80％)的溶液攪拌30分鐘，然后加入2.63g(11mmol)2’-溴-乙酰基(5-氯苯硫酮)5-chloro-(thiophenone)。在室溫下攪拌3.5小時(shí)，加入50ml氨，連續(xù)攪拌過夜。除去溶劑，得到一種殘留物，用10ml水洗滌，再次用水洗滌得到的殘留物，溶于乙醚中。把乙醚溶液干燥，通過柱色譜(硅膠)純化殘留物，用氯仿/甲醇(4/1)洗脫，得到400mg產(chǎn)物。合并后的固體化合物2為1.4g(產(chǎn)率38.5％，熔點(diǎn)226-228℃)。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.03(1H，S，N-CH＝N)；δ8.01(1H，S，N-CH＝C)；δ7.45(1H，d，J＝4.0Hz，thiophene ring)；δ7.20(1H，d，J＝4.0Hz，thiophene ring)；δ5.48(2H，S，N-CH2-O)；and δ3.54～3.34(4H，m，-O-CH2-CH2-O-).
HRMS C14H12ClN5O3S計(jì)算值365.03464，測(cè)定值365.034922。
實(shí)施例33-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物3)的合成在室溫下，把1.4g無環(huán)毒素(6.22mmol)、30ml DMF和400mg氫化鈉(80％)的溶液攪拌30分鐘，然后滴加0.7mL 2-溴-4’-氯乙酰苯。溶液變?yōu)槌壬?，向溶液中加?7ml氨，連續(xù)攪拌5小時(shí)。除去溶劑，得到一種殘留物，用水洗滌，得到重量為1.62g(白色固體，產(chǎn)率72％)的產(chǎn)物3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基-6-(4-氯-苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮。
在室溫下攪拌1.25g(3.49mmol)這樣得到的化合物、3.5ml乙酸酐和17.5mL吡啶的溶液過夜，然后濃縮。加入26.5mL吡啶/水/甲醇(1/1/1)的混合物，在室溫下攪拌4小時(shí)。除去溶劑后，加入60mL甲苯，濃縮。加入氯仿，濃縮，得到一種殘留物。殘留物在乙酸乙酯/乙醇(2/1)中重結(jié)晶，得到一種白色產(chǎn)物—化合物3，1.36g(產(chǎn)率97.4％)。
實(shí)施例45-(4-甲氧基苯基甲基)-3-(2-羥基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物4)的合成在室溫下，把2.7g無環(huán)毒素、70ml DMF和800mg氫化鈉(80％)的溶液攪拌15分鐘，然后加入4g 2’，4’-二溴-乙酰苯。在室溫下攪拌溶液3小時(shí)，加入15ml氨，連續(xù)攪拌過夜。除去溶劑，得到一種殘留物，用50ml水和丙酮洗滌，得到一種產(chǎn)物3-(2-羥基-乙氧基甲基)-6-(4-溴苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮，2.55g(黃色，產(chǎn)率53％)。
在100℃下，把800mg這樣得到的化合物、400mg碳酸鉀、50mL DMF和0.35mL 4-甲氧基芐基氯的溶液攪拌18小時(shí)。濃縮溶液，得到一種殘留物，把殘留物溶于甲醇中，通過柱色譜(硅膠)純化，用氯仿/甲醇(20/1)洗脫，得到50mg化合物4(產(chǎn)率9.6％)。
元素分析計(jì)算值(％)C53.15；H4.46；N12.91測(cè)定值(％)C53.19；H3.99；N12.85實(shí)施例55-(2-乙腈基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物5)的合成在室溫下，把9.0g(40mmol)無環(huán)毒素、200ml DMF和2.8g氫化鈉(80％)的溶液攪拌30分鐘，然后向溶液中加入9.6g 2-溴-乙酰苯。在室溫下攪拌溶液5小時(shí)，加入160ml氨，攪拌過夜。除去溶劑，得到一種殘留物固體，用50ml水和30mL乙醇洗滌。把固體過濾出來，用丙酮洗滌，稱得重量為8.0g(產(chǎn)率64％)。
在室溫下，把8.0g(22.5mmol)這樣得到的化合物[3-(2-羥基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮]、24ml乙酸酐和120ml吡啶的溶液攪拌5小時(shí)，然后濃縮，得到一種固體，用80ml甲苯洗滌。把固體過濾出來，用乙酸乙酯和少量的乙醇洗滌，稱得重量為8.47g(產(chǎn)率99％)。
在75℃下，把732mg這樣得到的化合物(3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-苯基-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮)、552mg碳酸鉀、60ml DMF和0.5mL氯代乙腈的溶液攪拌3.5小時(shí)。除去溶劑后，加入100mL氯仿，生成沉淀。把沉淀過濾出來，除去溶劑，得到一種殘留物，通過柱色譜(硅膠)純化，用氯仿/甲醇(50/1)洗脫，得到310mg化合物5。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.08(1H，s NCH＝N)；δ7.73(1H，s，N＝CH-C)；δ7.68～7.55(5H，m，benzen ring)；δ5.67(2H，s，NCH2O)；δ5.14(2H，s，NCH2CN)；δ4.22～3.84(4H，m，CH2CH2)；and δ2.04(3H，s，CH3).
元素分析計(jì)算值(％)C57.83；H4.58；N20.24測(cè)定值(％)C57.61；H4.33；N20.46實(shí)施例65-(3，4-二氯苯基甲基)-3-(2-乙酰氧基-乙氧基甲基)-6-(4-氯苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物6)的合成在100℃下，把800mg化合物3、400mg碳酸鉀、50mL DMF和423mg 3，4-二氯芐基氯的溶液攪拌18小時(shí)。除去溶劑，得到一種產(chǎn)物—化合物6，150mg(產(chǎn)率13.4％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.84(1H，s NCH＝N)，δ7.72(1H，s，N＝CH-C)，δ7.47(2H，d，benzen ring，J＝8.5Hz)，δ7.36(2H，d，benzen ring，J＝8.5Hz)，δ7.29(1H，d，benzenring，J＝2.5Hz)，δ7.22(1H，d，benzen ring，J＝2.0Hz)，δ6.87(1H，dd，benzen ring，J＝2.5Hz，J＝2.0Hz)，δ5.55(2H，s，NCH2O)，δ5.23(2H，s，CH2C6H5)，δ4.22～3.84(4H，m，CH2CH2)，and δ2.04(3H，s，CH3).
實(shí)施例73，5-二芐基-6-(4-氯苯基)-3，5-二氫-1，3，4，5，7a-五氮雜-對(duì)稱引達(dá)省-8-酮(化合物7)在室溫下，把1.6g(4.0mmol)化合物3、700mg碳酸鉀和140mL DMF的溶液攪拌30分鐘，然后加入1.3mL芐基溴。在75℃下攪拌溶液3.5小時(shí)，濃縮。加入150ml氯仿，攪拌15分鐘。除去不溶性顆粒，用另外的氯仿洗滌。濃縮合并后的氯仿溶液，得到一種殘留物，殘留物通過柱色譜(硅膠)純化，用氯仿/甲苯/丙酮/甲醇(60/20/3/1)洗脫。得到100mg化合物7，產(chǎn)率5％。
HRMS C27H20ClN5O計(jì)算值465.1351，測(cè)定值465.0349221356。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.11(1H，s NCH＝N)；δ7.60(1H，s，N＝CH-C)；δ7.43～7.04(9H，d，benzen ring，)；δ5.55(2H，s，CH2C6H5)；and δ5.34(2H，s，CH2C6H5).
實(shí)施例8抗腫瘤活性的篩選(NCI細(xì)胞線)針對(duì)由60種不同的NCI人類腫瘤細(xì)胞線組成的試驗(yàn)組，測(cè)定了上述稠合的三雜環(huán)化合物的細(xì)胞毒性活性。
發(fā)現(xiàn)，所有的試驗(yàn)化合物都對(duì)一種以上的細(xì)胞線有活性。確實(shí)，活性最小的化合物針對(duì)多達(dá)50種細(xì)胞線的GI50值＜10-4M?；钚宰顝?qiáng)的化合物針對(duì)多達(dá)50種細(xì)胞線的GI50值＜大約10-6M。
其它實(shí)施方式本說明書中所公開的所有特征可以以任何組合方式組合。本說明書中公開的每個(gè)特征可以被能發(fā)揮同樣、等同或相似目的的其它特征替換。因此，除非另外明確指出，公開的每個(gè)特征僅僅是一類等同的或相似的特征的一個(gè)實(shí)例。
根據(jù)上述描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地確定本發(fā)明的基本特征而不會(huì)偏離本發(fā)明的精神和保護(hù)范圍，本領(lǐng)域技術(shù)人員還可以對(duì)本發(fā)明作各種改變和改良以使其適應(yīng)各種用途和情況。例如，也可以對(duì)與本發(fā)明的稠合的三雜環(huán)化合物結(jié)構(gòu)相似的化合物的抗腫瘤活性進(jìn)行篩選，使用它們來實(shí)施本發(fā)明，因此，其它實(shí)施方式也在權(quán)利要求書的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3和R4獨(dú)立地為H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；X是O；而Y是OC(O)Re。
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R2是烷基或芳基。
5.權(quán)利要求2的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基。
6.權(quán)利要求2的化合物，其中R5是H。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R1是H。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R2是烷基或芳基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H，X是O，而Y是OC(O)Re。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是烷基、鏈烯基或芳基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R2是烷基或芳基。
12.權(quán)利要求10的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基。
13.權(quán)利要求10的化合物，其中R5是H。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R1是H。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R2是烷基或芳基。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基。
17.權(quán)利要求14的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基。
18.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。
19.權(quán)利要求18的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；而X是O。
20.權(quán)利要求18的化合物，其中R5是H。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中R1是H。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中R2是烷基。
23.權(quán)利要求22的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H，而X是O。
24.下式的化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3是H、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY，其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是OH；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；而X是O。
26.權(quán)利要求24的化合物，其中R5是H。
27.權(quán)利要求26的化合物，其中R1是H。
28.權(quán)利要求27的化合物，其中R2是烷基或芳基。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中R3是鏈烯基或芳基，Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H，而X是O。
30.一種治療腫瘤的方法，包括給需要治療的患者服用有效量的下式化合物 其中R1是H或烷基；R2是H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；R3和R4獨(dú)立地為H、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、環(huán)基、雜環(huán)基或(CRaRb)mX(CRcRd)nY；其中X是一條鍵、O、S或NRe；Y是ORe、OC(O)Re、C(O)Re、N(ReRe’)、NReC(O)Re’、S(O)2Re或SRe；m和n中的每一個(gè)獨(dú)立地為1、2、3、4或5；Ra、Rb、Rc、Rd、Re和Re’中的每一個(gè)獨(dú)立地為H、烷基、芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基；而R5是H或鹵素。
31.權(quán)利要求30的方法，其中R4是(CRaRb)mX(CRcRd)nY。
32.權(quán)利要求31的方法，其中Ra、Rb、Rc和Rd中的每一個(gè)是H；X是O；而Y是ORe或OC(O)Re。
33.權(quán)利要求31的方法，其中R5是H。
34.權(quán)利要求33的方法，其中R1是H。
35.權(quán)利要求30的方法，其中R4是烷基、鏈烯基或芳基。
36.權(quán)利要求35的方法，其中R5是H。
37.權(quán)利要求36的化合物，其中R21是H。
38.權(quán)利要求37的化合物，其中R3是烷基、鏈烯基或芳基。
全文摘要
下式的稠合的三雜環(huán)化合物:R
文檔編號(hào)A61K31/505GK1389463SQ0212215
公開日2003年1月8日 申請(qǐng)日期2002年5月31日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月31日
發(fā)明者李芳裕, 李芳全, 楊章安, 馬維勇, 徐愛武, 吳秋業(yè), 蕭旭華 申請(qǐng)人:永信藥品工業(yè)股份有限公司