專利名稱：微交變生物電場(chǎng)調(diào)制的人體免疫調(diào)節(jié)劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及一種利用微交變生物電場(chǎng)(Micro-Alternating-fieldBiotechnology，簡(jiǎn)稱MAB)技術(shù)生產(chǎn)的人體免疫調(diào)節(jié)劑及其制備方法。所述免疫調(diào)節(jié)劑用于患病的機(jī)體、虛弱機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)，使破壞的免疫功能得到恢復(fù)，從而達(dá)到抗病、治病的目的。
生物技術(shù)是當(dāng)今世界科學(xué)技術(shù)研究的熱門(mén)課題?？v觀世界生物技術(shù)的研究，主要課題是集中在如何防治人類疑難病癥方面。但至今能夠應(yīng)用在人類疑難病癥治療上的產(chǎn)品十分罕見(jiàn)。一個(gè)基因雖然了解到了它的序列，但基因所表達(dá)酶機(jī)制、酶催化底物的機(jī)制，以及酶催化底物的活性依然是當(dāng)今生物技術(shù)研究的難題，極大的限制著生物技術(shù)的發(fā)展。
如上所述，為什么生物技術(shù)研究處于這種不利局面呢？本發(fā)明認(rèn)為關(guān)鍵是一個(gè)研究方法的問(wèn)題。常規(guī)生物技術(shù)研究采用的是生物化學(xué)、生物分子學(xué)等方法，這些方法都是由常規(guī)的化學(xué)方法衍變過(guò)來(lái)的?；瘜W(xué)方法基本上是研究非生命物質(zhì)的化合、分解、氧化還原等變化。生物則是有生命的物質(zhì)，這些生命物質(zhì)每時(shí)每分每秒都在不停地變化著，老一代死去新一代復(fù)生，交替不變。僅是在組成機(jī)體的最小單位—細(xì)胞中物質(zhì)的代謝、物質(zhì)的轉(zhuǎn)換有序的進(jìn)行著，從不會(huì)停止。當(dāng)今生物技術(shù)研究把肉體這種有形的物質(zhì)作為生命全部實(shí)際上是十分不完全的。本發(fā)明的研究認(rèn)為，一個(gè)有生命的生物體最基本地應(yīng)由兩大部分組成，一部分是看得見(jiàn)、摸得著的肉體，即有形物質(zhì)；另一部分是常規(guī)理論認(rèn)為看不見(jiàn)、摸不著的無(wú)形物質(zhì)一“靈魂”。這里所指的“靈魂”并不是那種封建迷信所說(shuō)的“幽靈”，而是存在于每一個(gè)生物體上的“生命電波”。在一個(gè)活的生命體上，這種生命電波不停的發(fā)射，當(dāng)這種無(wú)形的“生命電波”失去以后，生命也就停止了，肉體也就成為死的物質(zhì)—尸首(肉體)。當(dāng)今世界的所有研究都是只研究死的物質(zhì)—肉體，而從沒(méi)有人研究“生命電波”。從某種意義上說(shuō)肉體是一種死的物質(zhì)，“生命電波”才是活的物質(zhì)，肉體只是“生命電波”的宿主，即發(fā)射源。只有當(dāng)肉體和“生命電波”有機(jī)地結(jié)合在一起才能稱之為生命的物質(zhì)—生物。綜上所述，在生命科學(xué)的研究上，“生命電波”的研究比肉體的研究更為重要！當(dāng)然“生命電波”的研究一定要結(jié)合肉體才能是一個(gè)完整的生物研究。
近200年來(lái)是化學(xué)技術(shù)高度發(fā)展的時(shí)代，特別是20世紀(jì)后70年來(lái)化學(xué)、生物化學(xué)、生物工程等有了突飛猛進(jìn)的發(fā)展，因而創(chuàng)造了數(shù)以萬(wàn)計(jì)的化學(xué)產(chǎn)品。從人類使用的工具、穿著的衣服、食用的食品、裝飾用的化妝品以及建筑材料等都是化學(xué)產(chǎn)品；化學(xué)品使傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)變成了化學(xué)農(nóng)業(yè)，無(wú)論是使用的肥料，還是防病、殺蟲(chóng)、除草都是化學(xué)物質(zhì)；為了獲得高產(chǎn)使用化學(xué)物質(zhì)刺激作物快速生長(zhǎng)也是使用的化學(xué)物質(zhì)。在醫(yī)學(xué)上，特別是在西方國(guó)家占據(jù)100％的市場(chǎng)，就是在中國(guó)也占領(lǐng)了近82％的市場(chǎng)。大量的抗生素、激素、干擾素等各種各樣的化學(xué)藥物無(wú)處不在。今日的世界無(wú)論是在自己的家庭還是繁華的世界每一個(gè)角落，到處是玲瑯滿目的化學(xué)品。近年來(lái)許多科學(xué)家認(rèn)為，化學(xué)工業(yè)為人類帶來(lái)了高度的發(fā)展，但也同時(shí)給人類帶來(lái)了健康的危害。這是因?yàn)榇罅康幕瘜W(xué)品造成了環(huán)境的污染，無(wú)論是人類食用的食物，還是飲用的水，都不同程度地受到化學(xué)品的污染；大量的化學(xué)藥物，特別是抗生素類、干擾素類、激素類藥物危害更大；就連從來(lái)不使用抗生素，甚至從來(lái)不吃藥的人也無(wú)法逃避從農(nóng)產(chǎn)品、肉、蛋、奶以及它們的制品帶來(lái)的化學(xué)物質(zhì)對(duì)身體的危害。人類攝取了大量的化學(xué)物質(zhì)，造成了奇奇怪怪的疑難病癥無(wú)法醫(yī)治。這是因?yàn)楦鞣N各樣的化學(xué)物質(zhì)造成了人體免疫系統(tǒng)的損傷、降低甚至缺失。另外大量的各種各樣的化學(xué)物質(zhì)對(duì)環(huán)境的污染，誘發(fā)了各種各樣的病原微生物，從近年來(lái)世界上各種各樣的報(bào)道可知，當(dāng)今病原微生物無(wú)論從品種上，還是從致病能力上都有了很大的提高。因此造成了人類的疾病越來(lái)越多，越來(lái)越奇怪，越來(lái)越難治療。比如各種各樣的腫瘤、肝炎、糖尿病、尿毒癥等十分普遍，但時(shí)至今日還沒(méi)有一個(gè)有效的醫(yī)治辦法?？v觀世界各種各樣的研究機(jī)構(gòu)，大量的科學(xué)家從事醫(yī)學(xué)的研究，各國(guó)政府投入了無(wú)數(shù)的資金支持醫(yī)學(xué)的研究，各種各樣的化學(xué)藥物推向市場(chǎng)然而不但傳統(tǒng)的疾病沒(méi)有得到有效地控制，反而新產(chǎn)生了各種各樣的奇難雜癥不停的向醫(yī)學(xué)界發(fā)出挑戰(zhàn)！如艾滋病、瘋牛病等相繼出臺(tái)，醫(yī)學(xué)界束手無(wú)策！綜上所述，按照世界目前的醫(yī)學(xué)研究方向和方法發(fā)展下去，不但傳統(tǒng)的疾病得不到有效地預(yù)防與治療，反而還會(huì)誘發(fā)更多、更新、更難治療的疾病。如何找到一個(gè)有效的、安全的控制疾病的辦法是當(dāng)今世界急不可待的大事。
本發(fā)明的目的為解決上述問(wèn)題而提供一種用特定的無(wú)線電波處理酵母細(xì)胞以制備具有免疫調(diào)節(jié)活性的酵母細(xì)胞的方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供用上述方法獲得的酵母細(xì)胞。
本發(fā)明進(jìn)一步的目的是提供含有上述酵母細(xì)胞作為活性成分的免疫調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明再進(jìn)一步的目的是提供上述酵母細(xì)胞在制備用于調(diào)節(jié)、矯正或激活免疫細(xì)胞的藥物以及治療腫瘤的藥物中的用途。
本發(fā)明采用微交變生物電場(chǎng)(MAB)調(diào)制的“生命電波”激活酵母“隱性功能基因”，使這些酵母變成具有激活人體免疫細(xì)胞功能的特異性酵母。再經(jīng)過(guò)本發(fā)明微交變電場(chǎng)的“生命電波”條件下的馴化培養(yǎng)，然后制成高效調(diào)節(jié)人體免疫功能的生物制劑，并將這些生物制劑應(yīng)用到人體免疫調(diào)節(jié)上，使免疫功能下降、損傷或缺失的機(jī)體快速恢復(fù)，從而達(dá)到治病防病之目的。
本發(fā)明之所以能夠成功地獲得用于多種疾病防治的免疫調(diào)節(jié)劑生物制品，關(guān)鍵是采用與常規(guī)生物技術(shù)研究完全不同的方法。本發(fā)明所涉及的方法，研究“生命電波”能夠寄宿在肉體上的必要條件，同時(shí)利用“生命電波”對(duì)宿主物質(zhì)的組成的調(diào)控。通過(guò)這種利用成功地獲得了世界首創(chuàng)的生物免疫調(diào)節(jié)劑。實(shí)驗(yàn)表明，這種免疫調(diào)節(jié)劑具有安全、無(wú)毒副作用、效果顯著。對(duì)那些由于患多種腫瘤、腎功能衰竭、尿毒癥、乙型肝炎等疾病，造成的免疫功能減弱、損傷或缺失，具有快速恢復(fù)的功能，從而使患病的機(jī)體得到康復(fù)。本發(fā)明生物制劑的特點(diǎn)是通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明生物制劑，具有以下特性1.采用模擬免疫基因特異性“生命電波”的微交變電波(MAB)方法，與傳統(tǒng)生命科學(xué)研究完全不同；2.創(chuàng)造出全面調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的生命活性物質(zhì)；3.這種生命活性物質(zhì)具有快速調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用；4.通過(guò)免疫功能的快速調(diào)節(jié)，達(dá)到患有多種癌癥、尿毒癥、肝炎、糖尿病等患者快速恢復(fù)機(jī)體健康之效能；5.本發(fā)明生物制劑不是中藥，也不是西藥，更不是抗生素類、干擾素類、激素類等，而是一種安全無(wú)毒副作用的生物制劑；6.具有極強(qiáng)的專一性，對(duì)于不同疾患造成的免疫力下降、損傷或缺失必須使用不同的生物免疫調(diào)節(jié)劑。
本說(shuō)明書(shū)包括如下附1是基因結(jié)構(gòu)的示意圖。圖2是人工模擬“生命電波”激活酵母“隱性功能基因”方法示意圖。圖3是特異性酵母環(huán)境適應(yīng)性培養(yǎng)的示意圖。圖4是激活后特異性酵母擴(kuò)大培養(yǎng)工藝的示意圖。圖5是特異性酵母液混合工藝的示意圖。圖6是特異性酵母液的濃縮工藝的示意圖。圖7是成品冷卻包裝工藝示意圖。圖8是隱性功能基因激活裝置(2)的又一實(shí)施例說(shuō)明圖。
下面結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明的各個(gè)特征作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，參閱

圖1，圖1是基因結(jié)構(gòu)示意圖。在此，先說(shuō)明本發(fā)明的機(jī)理。
各種各樣的疾病是人類健康的大敵，也是造成人類死亡的最主要因素。大量的研究表明，無(wú)論是什么樣的疾病都與機(jī)體的免疫力有關(guān)。當(dāng)機(jī)體的免疫力較強(qiáng)時(shí)各種疾病都不會(huì)發(fā)生。但隨著年齡的增加和機(jī)體的老化，特別是各種各樣的化學(xué)物質(zhì)、各種各樣的抗生素、激素等造成機(jī)體免疫力細(xì)胞的損傷，免疫細(xì)胞代謝紊亂，免疫基因不能正常的表達(dá)，致使免疫功能衰退。免疫力衰退的機(jī)體很容易受到各種各樣病原菌的侵襲，也會(huì)受到各種各樣有毒物質(zhì)的危害，從而造成各種各樣的疾病發(fā)生。機(jī)體免疫力的下降按照常規(guī)的檢測(cè)方法是很難發(fā)現(xiàn)的。因?yàn)槌Ｒ?guī)方法檢測(cè)機(jī)體會(huì)發(fā)現(xiàn)機(jī)體內(nèi)的B、T、K、NK等免疫細(xì)胞數(shù)量正常。本發(fā)明的研究認(rèn)為，免疫細(xì)胞的數(shù)量正常與否只能是機(jī)體免疫功能指標(biāo)之一，但并不表示免疫基因表達(dá)正常，更不能標(biāo)志免疫酶的性質(zhì)、活性也是正常的。這就是說(shuō)免疫細(xì)胞的免疫功能不應(yīng)只是B、T、K、NK細(xì)胞數(shù)量的多少，還要辨認(rèn)這些免疫細(xì)胞中的免疫基因所表達(dá)免疫酶的性質(zhì)是否正常，免疫酶的催化活性是否足夠。本發(fā)明認(rèn)為，免疫基因所表達(dá)的免疫酶不但數(shù)量要足，而且必須有足夠的催化效力，也就是說(shuō)，當(dāng)機(jī)體B、T、K、NK細(xì)胞數(shù)量正常時(shí)，所表達(dá)的免疫酶數(shù)量并不一定足量，當(dāng)免疫酶數(shù)量足夠時(shí)，也并不一定有良好的催化活性。免疫基因和其他基因一樣，按照其作用分為兩大部分，見(jiàn)圖1中所示，圖的左側(cè)部分為免疫基因的啟動(dòng)子部分，其中包括啟動(dòng)基因。啟動(dòng)基因擔(dān)負(fù)著啟動(dòng)右側(cè)功能結(jié)構(gòu)基因表達(dá)免疫酶的數(shù)量、表達(dá)的時(shí)間等功能。圖的右側(cè)稱為功能結(jié)構(gòu)基因部分，其中主要是結(jié)構(gòu)基因，結(jié)構(gòu)基因決定了該基因所表達(dá)酶的結(jié)構(gòu)，即酶性質(zhì)，也就是說(shuō)只要結(jié)構(gòu)基因堿基序列和基因鏈的卷曲結(jié)構(gòu)不變，其所表達(dá)酶結(jié)構(gòu)及性質(zhì)就不會(huì)發(fā)生變化，但其所表達(dá)的數(shù)量和表達(dá)時(shí)間、何時(shí)表達(dá)酶量少一些、何時(shí)表達(dá)酶量多一些、何時(shí)表達(dá)酶到最高峰等，完全受啟動(dòng)基因的控制。當(dāng)B、T、K、NK免疫細(xì)胞的免疫基因的啟動(dòng)子部分受到各種有害因子的影響，造成表達(dá)異常時(shí)，直接影響到功能結(jié)構(gòu)基因所表達(dá)免疫酶數(shù)量、表達(dá)時(shí)間曲線。當(dāng)免疫基因的功能結(jié)構(gòu)基因部分受到外因子干擾，造成其堿基或卷曲形狀發(fā)生變化時(shí)，會(huì)影響功能結(jié)構(gòu)基因所表達(dá)免疫酶的性質(zhì)或者是活性，機(jī)體的免疫力已經(jīng)遭到了嚴(yán)重破壞，但常規(guī)的檢測(cè)并不容易發(fā)現(xiàn)。另外當(dāng)免疫基因所表達(dá)的免疫酶數(shù)量、性質(zhì)不變時(shí)，免疫基因?qū)τ泻σ蜃佑绊?，作出表達(dá)反應(yīng)的時(shí)間是否相一致也是十分重要的，這就是所說(shuō)的免疫基因應(yīng)答能力，當(dāng)免疫基因的應(yīng)答能力下降，或應(yīng)答時(shí)間提前或滯后時(shí)都會(huì)表現(xiàn)出免疫力的下降，造成機(jī)體患病。為什么機(jī)體的B、T、K、NK細(xì)胞的免疫基因會(huì)有上述問(wèn)題呢？本發(fā)明的研究發(fā)現(xiàn)許多帶有陰離子或陽(yáng)離子的“自由基”、各種各樣的病原微生物所產(chǎn)生的毒素類物質(zhì)，以及多種神經(jīng)障礙、各種輻射源等都可能造成B、T、K、NK免疫細(xì)胞基因變異或“僵化”，對(duì)這種僵化的基因，在本發(fā)明中稱之為“隱性基因”，這種隱性基因不能及時(shí)、準(zhǔn)確的表達(dá)，對(duì)外界病原微生物和多種致病因子不能及時(shí)的抵御，造成機(jī)體患病。
本發(fā)明多年的研究發(fā)現(xiàn)，各種免疫基因在各自的生命活動(dòng)過(guò)程中，都會(huì)發(fā)射出一種特異性的“生命電波”，不同的免疫基因所發(fā)射的“生命電波”不同，免疫基因靠這些“生命電波”傳輸免疫信息對(duì)侵害機(jī)體的有害因子作出免疫反應(yīng)。因此當(dāng)免疫基因發(fā)生變化時(shí)，所發(fā)射的“生命電波”就會(huì)發(fā)生變化，那管是一種微小的變化都會(huì)造成“生命電波”的變化。本發(fā)明的關(guān)鍵在于發(fā)現(xiàn)了基因的“生命電波”會(huì)因有害因子造成改變，但也可以在帶有有益電波物質(zhì)的調(diào)控下恢復(fù)正常，被有害因子造成“僵化”的“隱性基因”，可使用有益因子激活。可用于本發(fā)明的電波(MAB)的頻率范圍是1800MHz-56000MHz，優(yōu)選3500-36000MHz，更優(yōu)選7000-11500MHz。電波的強(qiáng)度為115-445mv/cm。
本發(fā)明根據(jù)以上原理，采用模擬機(jī)體免疫基因“生命電波”的人工電波，創(chuàng)造一種“有益因子”，并將這種有益因子物質(zhì)制成生物制劑，使用這種生物制劑來(lái)調(diào)控變異的免疫基因，從而達(dá)到調(diào)節(jié)免疫功能的作用。通過(guò)調(diào)控免疫功能，使機(jī)體增強(qiáng)抵御疾病的能力，使患多種病患的機(jī)體快速恢復(fù)。
本發(fā)明通過(guò)大量的研究認(rèn)為，要通過(guò)人工模擬(MAB)“生命電波”獲得一種能夠調(diào)控免疫基因的活性物質(zhì)，是一件十分困難的工作。本發(fā)明經(jīng)過(guò)20多年的探索發(fā)現(xiàn)，自然界無(wú)處不在的微生物中人類利用的僅是“九牛一毛”，這是因?yàn)槿藗儗?duì)微生物基因功能了解得不多。時(shí)至今日，人類所了解全部基因組成和功能的微生物僅有26種，而且這26種微生物也僅是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的種類，對(duì)于復(fù)雜的真核微生物人類還不了解。特別是人類經(jīng)常使用的酵母微生物中，含有大量沒(méi)被利用的基因，這些基因由于長(zhǎng)期得不到應(yīng)用已經(jīng)變成了“僵化基因”，本發(fā)明稱這些“僵化基因”為“隱性功能基因”。更為重要的是在這些“隱性功能基因”中存在著本發(fā)明所需要的，能夠用于調(diào)控人類機(jī)體免疫功能的有益蛋白類物質(zhì)。本發(fā)明就是利用人工模擬生命電波的方法激活酵母中能夠表達(dá)調(diào)控機(jī)體免疫功能蛋白物質(zhì)的“隱性功能基因”實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明采用(MAB)模擬生命電波方法激活酵母“隱性功能基因”，培育出了4種分別激活B、T、K、NK4種免疫細(xì)胞的特異性酵母，制成了調(diào)控機(jī)體免疫功能的生物制劑。本發(fā)明為了使這4種特異性的酵母在食用后順利通過(guò)胃，并保證在胃中不會(huì)被大量的酸性物質(zhì)殺死，本發(fā)明又將這4種特異性酵母做了耐pH≤2.5的條件培養(yǎng)。培養(yǎng)后的酵母細(xì)胞將會(huì)順利通過(guò)胃器官到達(dá)小腸。在小腸多種酶的作用下特異性酵母細(xì)胞被裂解，釋放出包裝在細(xì)胞內(nèi)的特異性免疫功能調(diào)節(jié)酶(蛋白)。這些特異性免疫功能調(diào)節(jié)酶“專一性”的激活、調(diào)控機(jī)體相對(duì)應(yīng)免疫細(xì)胞中免疫基因的表達(dá)。本發(fā)明所涉及的4種機(jī)體免疫調(diào)節(jié)特異性酵母，由于它們都是人類長(zhǎng)期食用或生產(chǎn)上使用的微生物，不會(huì)產(chǎn)生任何毒副作用。這些特異性酵母細(xì)胞內(nèi)釋放出的活性酶，具有瞬間激活、調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)免疫基因正確、高效表達(dá)的作用，然后將會(huì)隨著機(jī)體內(nèi)的代謝很快失掉活性轉(zhuǎn)變成機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被吸收，不會(huì)造成在機(jī)體中內(nèi)殘留。
本發(fā)明所涉及的(MAB)調(diào)控機(jī)體免疫功能生物制劑的作用機(jī)理簡(jiǎn)要說(shuō)明如下調(diào)控機(jī)體免疫功能生物制劑中的核心成分是4種具有分別激活機(jī)體B、T、K、NK“隱性免疫基因”的蛋白，這4種蛋白又分別包藏在4種特異性酵母中。這4種酵母就是本發(fā)明采用人工模擬“生命電波”激活的微生物，在本發(fā)明中稱這4種被模擬“生命電波”激活“隱性功能基因”的酵母為特異性酵母。這4種特異性酵母細(xì)胞中分別含有被激活免疫調(diào)節(jié)功能酶，這些免疫調(diào)節(jié)功能酶專一性地激活機(jī)體內(nèi)免疫B細(xì)胞、免疫T細(xì)胞、免疫T細(xì)胞和免疫NK細(xì)胞免疫基因恢復(fù)、活化，使這些免疫基因正確高效表達(dá)。這些特異性的酵母是通過(guò)各自特異性的模擬“生命電波”條件培養(yǎng)出來(lái)的。本發(fā)明所使用的激活機(jī)體B細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的(MAB)人工模擬電波頻率和電波強(qiáng)度，是由免疫B細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機(jī)體T細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的(MAB)人工模擬電波頻率和電波強(qiáng)度，是由免疫T細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機(jī)體K細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的(MAB)人工模擬電波頻率和電波強(qiáng)度，是由免疫K細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機(jī)體NK細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的(MAB)人工模擬電波頻率和電波強(qiáng)度，是由免疫NK細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的。這4種不同功能的特異性酵母，經(jīng)過(guò)隱性基因激活、(MAB)模擬“生命電波”條件培養(yǎng)，使細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了具有激活、調(diào)控上述4種免疫基因的活性酶(蛋白)。使用這4種特異性酵母制劑時(shí)，特異性酵母進(jìn)入機(jī)體的小腸內(nèi)，在小腸多種酶的作用下細(xì)胞裂解，裂解后的細(xì)胞釋放出免疫基因激活調(diào)控酶。這些免疫基因激活調(diào)控酶立即被小腸吸收進(jìn)入血液，通過(guò)血液分別運(yùn)送到4種免疫細(xì)胞內(nèi)，從而達(dá)到激活、調(diào)控4種免疫基因正確表達(dá)提高免疫力的目的。
本發(fā)明免疫功能生物調(diào)節(jié)劑，是通過(guò)以下兩個(gè)方面的步驟實(shí)現(xiàn)的。第一個(gè)步驟是采用特異性的(MAB)模擬“生命電波”激活普通酵母，使這些酵母變成具有調(diào)節(jié)B、T、K、NK細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，并將這些酵母作耐低pH條件培養(yǎng)；第二步驟是在特異(MAB)模擬生命電波的條件下，擴(kuò)大培育這些特異性酵母，然后將這些特異性酵母制成調(diào)控免疫功能使用的生物制品。這兩個(gè)方面的實(shí)施過(guò)程是通過(guò)以下的步驟實(shí)現(xiàn)的。一.激活酵母功能“隱性基因”在以上的敘述中，說(shuō)明了本發(fā)明采用微交變生物電場(chǎng)(MAB)模擬“生命電波”方法激活普通酵母，使酵母中隱性功能基因復(fù)活，分別表達(dá)出具有激活、調(diào)控B細(xì)胞免疫基因、T細(xì)胞免疫基因、K細(xì)胞免疫基因和NK細(xì)胞免疫基因功能的蛋白。眾所周知，普通酵母是一類發(fā)酵淀粉、糖類、蛋白類等多種物質(zhì)的發(fā)酵菌，多用于造酒、制作面包、制造各種食品、制造醫(yī)藥及其多種產(chǎn)品的菌種，雖然酵母菌的品種繁多，功能各異，但從沒(méi)有人利用酵母所表達(dá)的特異性蛋白，分別激活、調(diào)節(jié)B、T、K、NK免疫基因功能，當(dāng)然這些酵母細(xì)胞在沒(méi)有使用本發(fā)明專利之方法進(jìn)行隱性基因激活之前是不具備上述功能的。
(一)激活用于調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法步驟大量的基因技術(shù)研究證明，一個(gè)完整B細(xì)胞免疫功能基因由兩大部分組成(見(jiàn)圖1)，一部分為B細(xì)胞免疫功能基因的啟動(dòng)基因，另一部分為B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因。B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因決定了它所表達(dá)免疫酶的性質(zhì)；B細(xì)胞免疫功能基因的啟動(dòng)基因控制B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因所表達(dá)免疫酶的數(shù)量、免疫活性和免疫應(yīng)答能力，即免疫酶的效價(jià)。因此，要保持B細(xì)胞免疫功能基因所表達(dá)酶的性質(zhì)不變，必須設(shè)法保持B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因DNA序列不變；要達(dá)到B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因高效表達(dá)，并保持所表達(dá)免疫酶最佳免疫活性和及時(shí)的免疫應(yīng)答能力，必須設(shè)法使B細(xì)胞免疫功能基因的啟動(dòng)基因高效啟動(dòng)。本發(fā)明通過(guò)人工模擬“生命電波”方法，激活酵母“隱性功能基因”，獲得具有表達(dá)調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因蛋白的特異性酵母。
參閱圖2，本發(fā)明所涉及采用人工模擬“生命電波”激活調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”采用本圖或圖8所示的微交變生物電場(chǎng)(MAB)裝置，具體的方法步驟如下1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.選擇適當(dāng)?shù)慕湍阜N類(可選擇酵母見(jiàn)表3)，按照活酵母細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度為T(mén)1，培養(yǎng)H1小時(shí)，
4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F1，5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1，6.將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率調(diào)節(jié)到與發(fā)射儀所發(fā)射頻率相一致的頻點(diǎn)上。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)1，并根據(jù)所確定的距離按照115-445mv/cm要求計(jì)算出發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度{如距離為100cm，其發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度為(115-445mv/cm)×100＝11.5-44.5v}，7.在上述條件下，并保持T2溫度條件，激活H2小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，然后采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。
(二)激活用于調(diào)控T細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法步驟同調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母原理與步驟類似，即參閱圖2，1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.選擇適當(dāng)?shù)慕湍阜N類(可選擇酵母見(jiàn)表3)，按照活酵母細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度為T(mén)1，培養(yǎng)H1小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F2，5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1，6.將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率調(diào)節(jié)到與發(fā)射儀所發(fā)射頻率相一致的頻點(diǎn)上。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)1，并根據(jù)所確定的距離按照115-445mv/cm要求計(jì)算出發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度{如距離為100cm，其發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度為(115-445mv/cm)×100＝11.5-44.5v}，7.在上述條件下，并保持T2溫度條件，激活H2小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，然后采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存，這就是具有表達(dá)T細(xì)胞免疫功能基因酵母。
(三)激活用于調(diào)控K細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法步驟同(MAB)調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母原理輿步驟類似，即參閱圖2，1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.選擇適當(dāng)?shù)慕湍阜N類(可選擇酵母見(jiàn)表3)，按照活酵母細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度為T(mén)1，培養(yǎng)H1小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F3，5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1，6.將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率調(diào)節(jié)到與發(fā)射儀所發(fā)射頻率相一致的頻點(diǎn)上。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)1，并根據(jù)所確定的距離按照115-445mv/cm要求計(jì)算出發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度{如距離為100cm，其發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度為(115-445mv/cm)×100＝11.5-44.5v}，7.在上述條件下，并保持T2溫度條件，激活H2小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，然后采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存，這就是所要的具有表達(dá)調(diào)控K細(xì)胞免疫功能基因酵母。
(四)激活用于調(diào)控NK細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法步驟同(MAB)調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母原理與步驟類似，即參閱圖2，1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.選擇適當(dāng)?shù)慕湍阜N類(可選擇酵母見(jiàn)表3)，按照活酵母細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度為T(mén)1，培養(yǎng)H1小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F4，5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1，
6.將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率調(diào)節(jié)到與發(fā)射儀所發(fā)射頻率相一致的頻點(diǎn)上。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)1，并根據(jù)所確定的距離按照115-445mv/cm要求計(jì)算出發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度{如距離為100cm，其發(fā)射機(jī)的輸出電波強(qiáng)度為(115-445mv/cm)×100＝11.5-44.5v}，7.在上述條件下，并保持T2溫度條件，激活H2小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，然后采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存，這就是所要的表達(dá)調(diào)控NK免疫功能基因蛋白的特異性酵母。二.特異性酵母耐酸(耐低pH)的馴化以上說(shuō)明了本發(fā)明采用人工模擬“生命電波”的方法，分別激活酵母不同“隱性功能基因”，獲得4種分別用于激活、調(diào)控B細(xì)胞免疫基因、T細(xì)胞免疫基因、K細(xì)胞免疫基因和NK細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母。但這4種特異性酵母還不能直接用于調(diào)控各種免疫基因，這是因?yàn)樗鼈冞€不能適應(yīng)機(jī)體內(nèi)的環(huán)境。眾所周知，機(jī)體內(nèi)是一個(gè)十分復(fù)雜的環(huán)境，而且各種環(huán)境因子每時(shí)每刻都在變化著。當(dāng)這4種特異性的酵母通過(guò)口腔、胃進(jìn)入小腸的途徑時(shí)，很難保障其細(xì)胞的完整性，更難保障酵母細(xì)胞內(nèi)目的酶的活性，因此保障酵母細(xì)胞活性是十分關(guān)鍵的。本發(fā)明采用了對(duì)4種特異性酵母的環(huán)境因子(MAB)馴化培養(yǎng)，馴化培養(yǎng)采用圖3的微交變電場(chǎng)裝置(MAB)，具體方法步驟如下本發(fā)明4種功能微生物的環(huán)境適應(yīng)性馴化是通過(guò)如圖3所示的方法實(shí)現(xiàn)的參閱圖3，本發(fā)明4種特異性酵母環(huán)境適應(yīng)性馴化的方法步驟分別說(shuō)明如下(一)馴化調(diào)控B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母步驟1.按照表2的方法配置好培養(yǎng)基，并滅菌處理，
2.取步驟1中的培養(yǎng)基1000ml注入到圖3的容器中，3.取調(diào)控B細(xì)胞的特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥1×108個(gè)/ml)，注入圖3所示的容器中，4.打開(kāi)如圖3所示的電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性頻率F1上，5.調(diào)節(jié)如圖3所示的電波輸出電壓為V2＝5-10mv/ml(1000ml培養(yǎng)基所使用的電波強(qiáng)度為5-10v)，6.保持上述電波頻率和電波強(qiáng)度不變，在2-90℃的溫度條件培養(yǎng)H3＝48-96小時(shí)后，分離保存在T3＝-2-15℃的條件下備用。(二)馴化調(diào)控T細(xì)胞免疫基因的特異性酵母步驟1.按照表2的方法配置好培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.取步驟1中的培養(yǎng)基1000ml注入到圖3的容器中，3.取調(diào)控T細(xì)胞的特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥1×108個(gè)/ml)，注入圖3所示的容器中，4.打開(kāi)如圖3所示的電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控T細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性頻率F2上，5.調(diào)節(jié)如圖3所示的電波輸出電壓為V2＝5-10mv/ml(1000ml培養(yǎng)基所使用的電波強(qiáng)度為5-10v)，6.保持上述電波頻率和電波強(qiáng)度不變，在2-90℃的溫度條件培養(yǎng)H3＝48-96小時(shí)后，分離保存在T3＝-2-15℃的條件下備用。(三)馴化調(diào)控K細(xì)胞免疫基因的特異性酵母步驟1.按照表2的方法配置好培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.取步驟1中的培養(yǎng)基1000ml注入到圖3的容器中，3.取調(diào)控K細(xì)胞的特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥1×108個(gè)/ml)，注入圖3所示的容器中，4.打開(kāi)如圖3所示的電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控K細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性頻率F3上，5.調(diào)節(jié)如圖3所示的電波輸出電壓為V2＝5-10mv/ml(1000ml培養(yǎng)基所使用的電波強(qiáng)度為5-10v)，6.保持上述電波頻率和電波強(qiáng)度不變，在2-90℃的溫度條件培養(yǎng)H3＝48-96小時(shí)后，分離保存在T3＝-2-15℃的條件下備用。(四)、馴化調(diào)控NK細(xì)胞免疫基因的特異性酵母步驟1.按照表2的方法配置好培養(yǎng)基，并滅菌處理，2.取步驟1中的培養(yǎng)基1000ml注入到圖3的容器中，3.取調(diào)控NK細(xì)胞的特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥1×108個(gè)/ml)，注入圖3所示的容器中，4.打開(kāi)如圖3所示的電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控NK細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性(MAB)頻率F4上，5.調(diào)節(jié)如圖3所示的電波輸出電壓為V2＝5-10mv/ml(1000ml培養(yǎng)基所使用的電波強(qiáng)度為5-10v)，6.保持上述電波頻率和電波強(qiáng)度不變，在2-90℃的溫度條件培養(yǎng)H3＝48-96小時(shí)后，分離保存在T3＝-2-15℃的條件下備用。三.本發(fā)明免疫功能調(diào)節(jié)劑的制法本發(fā)明生物制劑的制法主要分為特異性酵母的培養(yǎng)、混合、濃縮、罐裝等主要工序，示意如下(一)4種特異性酵母的培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及的特異性酵母培養(yǎng)共4種。這4種特異性酵母經(jīng)過(guò)上述方法獲得后僅是獲得了種子，要制成大量的本發(fā)明生物制劑，必須有足量的特異性酵母，因此需要擴(kuò)大培養(yǎng)。本發(fā)明分別經(jīng)過(guò)以上特異性酵母培養(yǎng)工藝獲得的4種特異性酵母液，送入4種酵母液的混合工藝。4種特異性酵母培養(yǎng)是分別通過(guò)以下方法步驟實(shí)現(xiàn)的A、調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝工程正如圖4所示。
參閱本發(fā)明說(shuō)明書(shū)圖4，本發(fā)明所涉及的調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝步驟如下1.按照表4的成分配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到圖4的A、B、C罐中。
2.將經(jīng)人工模擬(MAB)生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到圖4所示的種子罐A中，作為種子液。然后按照一定的比例將A罐種子液注入到B罐的培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，注入的比例為A種子液/B培養(yǎng)液＝5ml/1000ml。
3.調(diào)節(jié)電波發(fā)生器，使其輸出(MAB)生物電波為F1，并同時(shí)按照0.5-1.0v/L的要求計(jì)算，設(shè)定電波強(qiáng)度(如假設(shè)B罐中培養(yǎng)液的數(shù)量為50L，單磁波強(qiáng)度應(yīng)為0.5-1.0v/L×50L＝25v-50v)。
4.保持上述(MAB)電波頻率和電波強(qiáng)度不變情況下，T4＝2-80℃條件下培養(yǎng)H4＝12-96小時(shí)。
5.當(dāng)B罐中調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母活細(xì)胞達(dá)到20億個(gè)/ml時(shí)，將B罐酵母液輸入C罐中，準(zhǔn)備輸送到下道混合工藝。
B、調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝工程正如圖4所示。
參閱本發(fā)明說(shuō)明書(shū)圖4，本發(fā)明所涉及的調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝步驟如下1.按照表4的成分配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到圖4的A、B、C罐中。
2.將經(jīng)人工模擬(MAB)生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到圖4所示的種子罐A中，作為種子液。然后按照一定的比例將A罐種子液注入到B罐的培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，注入的比例為A種子液/B培養(yǎng)液＝5ml/1000ml。
3.調(diào)節(jié)電波發(fā)生器，使其輸出(MAB)生物電波為F2，并同時(shí)按照0.5-1.0v/L的要求計(jì)算，設(shè)定電波強(qiáng)度(如假設(shè)B罐中培養(yǎng)液的數(shù)量為50L，單磁波強(qiáng)度應(yīng)為0.5-1.0v/L×50L＝25v-50v)。
4.保持上述(MAB)電波頻率和電波強(qiáng)度不變情況下，T4＝2-80℃條件下培養(yǎng)H4＝12-96小時(shí)。
5.當(dāng)B罐中調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫基因的特異性酵母活細(xì)胞達(dá)到20億個(gè)/ml時(shí)，將B罐酵母液輸入C罐中，準(zhǔn)備輸送到下道混合工藝。
C、調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝工程正如圖4所示。
參閱本發(fā)明說(shuō)明書(shū)圖4，本發(fā)明所涉及的調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝步驟如下1.按照表4的成分配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到圖4的A、B、C罐中。
2.將經(jīng)人工模擬(MAB)生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到圖4所示的種子罐A中，作為種子液。然后按照一定的比例將A罐種子液注入到B罐的培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，注入的比例為A種子液/B培養(yǎng)液＝5ml/1000ml。
3.調(diào)節(jié)電波發(fā)生器，使其輸出(MAB)生物電波為F3，并同時(shí)按照0.5-1.0v/L的要求計(jì)算，設(shè)定電波強(qiáng)度(如假設(shè)B罐中培養(yǎng)液的數(shù)量為50L，單磁波強(qiáng)度應(yīng)為0.5-1.0v/L×50L＝25v-50v)。
4.保持上述(MAB)電波頻率和電波強(qiáng)度不變情況下，T4＝2-80℃條件下培養(yǎng)H4＝12-96小時(shí)。
5.當(dāng)B罐中調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫基因的特異性酵母活細(xì)胞達(dá)到20億個(gè)/ml時(shí)，將B罐酵母液輸入C罐中，準(zhǔn)備輸送到下道混合工藝。
D、調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝工程正如圖4所示。
參閱本發(fā)明說(shuō)明書(shū)圖4，本發(fā)明所涉及的調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝步驟如下1.按照表4的成分配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到圖4的A、B、C罐中。
2.將經(jīng)人工模擬(MAB)生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到圖4所示的種子罐A中，作為種子液。然后按照一定的比例將A罐種子液注入到B罐的培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，注入的比例為A種子液/B培養(yǎng)液＝5ml/1000ml。
3.調(diào)節(jié)電波發(fā)生器，使其輸出(MAB)生物電波為F4，并同時(shí)按照0.5-1.0v/L的要求計(jì)算，設(shè)定電波強(qiáng)度(如假設(shè)B罐中培養(yǎng)液的數(shù)量為50L，單磁波強(qiáng)度應(yīng)為0.5-1.0v/L×50L＝25v-50v)。
4.保持上述(MAB)電波頻率和電波強(qiáng)度不變情況下，T4＝2-80℃條件下培養(yǎng)H4＝12-96小時(shí)。
5.當(dāng)B罐中調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫基因的特異性酵母活細(xì)胞達(dá)到20億個(gè)/ml時(shí)，將B罐酵母液輸入C罐中，準(zhǔn)備輸送到下道混合工藝。(二)4種特異性酵母的混合工藝本發(fā)明所涉及的4種特異性酵母液混合工藝，是按照下表的比例進(jìn)行的。特異性酵母液混合比例一覽表(以4000L混合液計(jì))
本發(fā)明特異性酵母液的混合是按照?qǐng)D5的方式進(jìn)行的。參閱圖5，本工藝是通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)的
1.將4種特異性酵母液分別輸入到A、B、C、D罐中。
2.將A、B、C、D罐中的4種特異性酵母液按照等量的比例輸入到混合罐M中進(jìn)行混合。
3.將混合后的酵母液注入到圖6所示的濃縮工藝中，準(zhǔn)備濃縮。(三)特異性酵母濃縮工藝，用圖6說(shuō)明，參閱圖6，濃縮工藝是將上述混合工藝中4種特異性酵母液混合后的液體濃縮，濃縮的目的是達(dá)到灌封成品時(shí)的要求設(shè)定的。濃縮工藝分為兩級(jí)，第一級(jí)濃縮后再輸送到第二級(jí)濃縮，最終達(dá)到濃縮度為64％左右。
本發(fā)明所涉及特異性酵母液的濃縮，是按照以下步驟實(shí)現(xiàn)的1.將經(jīng)上述混合工藝混合后的混合液，輸送到圖6所示的濃縮工藝第一級(jí)濃縮機(jī)設(shè)備。
2.在第一級(jí)濃縮罐中將特異性酵母混合液，濃縮至80％(以容積計(jì)算)，然后輸送到第二級(jí)濃縮機(jī)中濃縮。濃縮可采用冷凍真空濃縮、常溫半真空濃縮或加溫濃縮等方法，但無(wú)論哪種濃縮方式都必須以保持特異性酵母細(xì)胞的活性為基準(zhǔn)。
3.在第二級(jí)濃縮罐中再次濃縮至80％，有關(guān)濃縮的要求依然同步驟2中的條件。濃縮后立即輸送到灌封工藝準(zhǔn)備罐封。(四)灌封工藝，用圖7說(shuō)明，參閱圖7，本發(fā)明所涉及的灌封工藝分為冷卻、計(jì)量和灌封三個(gè)過(guò)程。冷卻的目的是將濃縮過(guò)程中造成的溫升將下來(lái)，以免灌封后產(chǎn)生氣體；計(jì)量是為了檢驗(yàn)濃縮是否達(dá)到總量的控制要求，并為灌封所用的瓶子數(shù)量做準(zhǔn)備；灌封是將特異性酵母液制成成品主要工藝的最后一步。本工藝是按照?qǐng)D7所示的步驟實(shí)現(xiàn)的1.將濃縮后的特異性酵母混合液輸送到圖7所示的冷卻罐中，冷卻到12-15℃。
2.將經(jīng)過(guò)冷卻罐冷卻的混合液，輸送到計(jì)量罐中計(jì)量。將計(jì)量后的混合液輸送到灌封機(jī)種灌封，制成成品。
以下將通過(guò)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行具體描述。雖然在每一個(gè)實(shí)施例中僅涉及一種具體的酵母菌，但發(fā)明人通過(guò)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)用其他的酵母菌菌株也可以獲得相同的結(jié)果。
3.保持容器中的溫度在T1＝2-80℃之間，培養(yǎng)H1＝12-96小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的(MAB)電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F2＝7500-10500MHz范圍內(nèi)，5.將(MAB)電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1＝115-445mv/cm，6.將裝有酵母IFFI1212培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率與發(fā)射儀的發(fā)射頻率調(diào)節(jié)到相同的F2范圍內(nèi)。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離L1＝1-10米，7.在上述條件下，并保持T2＝2-80℃的溫度條件，激活H2＝12-96小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后IFFI1212酵母細(xì)胞，采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。實(shí)施例3激活用于調(diào)控K細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法舉例如下1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基1000-2000ml，并滅菌處理，2.選擇IFFI1301酵母種類，按照活I(lǐng)FFI1301細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度在T1＝2-80℃，培養(yǎng)H1＝12-96小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F3＝8000-11500MHz范圍內(nèi)，5.將(MAB)電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1＝115-445mv/cm，6.將裝有酵母IFFI1301培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率與發(fā)射儀的發(fā)射頻率調(diào)節(jié)到相同的F3范圍內(nèi)。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離L1＝1-10米，7.在上述條件下，并保持T2＝2-80℃的溫度條件，激活H2＝12-96小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后IFFI1301酵母細(xì)胞，采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。實(shí)施例4激活用于調(diào)控NK細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法舉例如下1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基1000-2000ml，并滅菌處理，2.選擇IFFI1048酵母種類，按照活I(lǐng)FFI1048細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，3.保持容器中的溫度在T1＝2-80℃之間，培養(yǎng)H1＝12-96小時(shí)，4.打開(kāi)圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到F4＝7300-10800MHz范圍內(nèi)，5.將(MAB)電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1＝115-445mv/cm，6.將裝有酵母IFFI1048培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照?qǐng)D2所示的模式安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率與發(fā)射儀的發(fā)射頻率調(diào)節(jié)到相同的F4范圍內(nèi)。同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)＝1-10米，7.在上述條件下，并保持T2＝2-8℃的溫度條件，激活H2＝12-96小時(shí)，8.經(jīng)以上條件激活后IFFI1048酵母細(xì)胞，采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。實(shí)施例5.免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)180腹水瘤的抑制效果a.取wates大鼠60只，分成A、B、C共3組，每組20只大鼠。A組為實(shí)驗(yàn)組，B組為使用環(huán)磷酰胺對(duì)照組，C為空白對(duì)照組。
b.采用180腹水瘤，分別接種各組大白鼠。
c.從接種后的第二天開(kāi)始，A組給本生物制劑液(4種特異性酵母細(xì)胞均≥1×108個(gè)/ml)，劑量為0.6ml/kg；B組給環(huán)磷酰胺，劑量為20ug/kg；C組給生理鹽水0.6ml/kg。每天一次。
d.七天后解剖檢測(cè)腹水瘤的大小，如下表
實(shí)施例6.免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)U-14實(shí)體瘤的抑制效果a.取wates大鼠90只，分成A、B、C共3組，每組30只大鼠。A組為實(shí)驗(yàn)組，B組為使用環(huán)磷酰胺對(duì)照組，C為空白對(duì)照組。
b.采用U-14實(shí)體瘤，分別接種各組大白鼠。
c.從接種后的第二天開(kāi)始，A組給本生物制劑液(4種特異性酵母細(xì)胞均≥1×108個(gè)/ml)，劑量為0.6ml/kg；B組給環(huán)磷酰胺，劑量為20ug/kg；C組給生理鹽水0.6ml/kg。每天一次。
d.服用14天后解剖檢測(cè)腹水瘤的大小，如下表
實(shí)施例七，本產(chǎn)品簡(jiǎn)稱本制劑經(jīng)中國(guó)北京的醫(yī)科院腫瘤醫(yī)院等4所醫(yī)院的197例15種癌癥癌變患者的服用，情況如下全組患者男性111例(56.34％)，女性86例(43.66％)。全組平均年齡54.92歲(范圍16-87歲)。收治全部患者的病種如下表(5)試驗(yàn)觀察病種表(5)病種例數(shù)病種例數(shù)肺癌 45 惡性淋巴瘤 12
食管癌 24 腦瘤 9乳癌 47 軟組織肉瘤 4鼻咽癌 12 頭頸腫瘤 18胃癌 3 皮膚癌 3前列腺癌 2 子宮體癌 4大腸癌 7 泌尿系統(tǒng)腫瘤 3其他 4總計(jì) 197方法口服本制劑，每日三次，每次30ml，連服30天為一療程。全部患者均服用一療程以上?；颊咄瑫r(shí)放療170例(86.29％)，放療劑量在60Gy以上79例(48.2％)；50Gy以上145例(88.4％)；40Gy以上160例(97.6％)；40Gy以下只有4例(2.4％)；6例劑量不明。同時(shí)化療27例(14.1％)?；煼桨妇鶠镈DP、BLM、ADM等為基本藥組成的聯(lián)合化療方案。一般均用化療方案2個(gè)周期以上。結(jié)果 臨床觀察口服本制劑的療效如下紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)，均以治療前及治療后的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。紅細(xì)胞增加10萬(wàn)/ml以上，白細(xì)胞增加100/ml以上，血小板增加1萬(wàn)/ml以上均為有效。治療后數(shù)值分別下降上述相應(yīng)數(shù)值時(shí)為無(wú)效。治療前后數(shù)值改變?cè)谏仙c下降之間的范圍內(nèi)為不變。臨床觀察的各項(xiàng)指標(biāo)，在輔助放、化療用藥前后的病例改變見(jiàn)表6。腫瘤大小CR+PR+SD為有效，ND為無(wú)效。KPS值上升、下降10分為“增加”或“減少”，波動(dòng)在10分之內(nèi)為穩(wěn)定，體重增加和減少1Kg記錄為“增加”或“減少”，波動(dòng)在1Kg之內(nèi)為不變?？陀^觀察指標(biāo)如食欲、睡眠、體力、大小便等，均按附表規(guī)定填寫(xiě)療效。表6 口服本制劑后觀察指標(biāo)的改變觀察項(xiàng)目 例數(shù) 提高 不變 下降紅細(xì)胞196103 18 75白細(xì)胞196102 490血小板19581 30 84腫瘤大小 16471 93 0體重 19576 74 45KPS 19343 144 6食欲 19745 128 24睡眠 19734 143 20體力 19745 120 32大小便1968184 4本制劑口服液為生物制品，在抗癌作用上，應(yīng)屬細(xì)胞平穩(wěn)類藥物，因此服用本制劑作為放、化療輔助治療藥物，應(yīng)將有效及“不變”(平穩(wěn))均列為有效，“降低”列為無(wú)效。臨床觀察項(xiàng)目的有效與無(wú)效比例例表7。表7 口服本制劑臨床觀察項(xiàng)目有效率觀察項(xiàng)目例數(shù)有效例數(shù)及有效率(95％可信區(qū)間) 無(wú)效例數(shù)及無(wú)效率(95％可信區(qū)間)紅細(xì)胞 196 124，63.3％(56.5％，70.0％) 72，36.7％(30.0％，43.5％)白細(xì)胞 196 108，55.1％(48.1％，62.1％) 88，44.9％(37.9％，51.9％)血小板 195 112，57.4％(50.5％，64.4％) 83，42.6％(35.6％，49.5％)腫瘤大小164 164，100％0，0％體重195 152，78.0％(72.1％，83.8％) 43，22.0％(16.2％，27.9％)KPS 193 188，97.4％(95.2％，99.7％) 5，2.6％(0.3％，4.0％)食欲197 173，87.8％(83.2％，92.4％) 24，12.2％(7.6％，16.8％)睡眠197 177，89.9％(85.6％，94.1％) 20，10.2％(5.9％，14.4％)體力197 165，83.8％(78.7％，88.9％) 32，16.2％(11.1％，21.3％)大小便 196 192，98.0％(96.0％，99.9％) 4，2.0％(0.1％，4.0％)口服本制劑的197例，均無(wú)毒副作用發(fā)生。實(shí)施例8，本制劑對(duì)愛(ài)滋病的防治，已在北京的佑安醫(yī)院進(jìn)行，對(duì)愛(ài)滋病患者有良好的治療作用。負(fù)責(zé)醫(yī)生為閔佳和吳昊醫(yī)師。實(shí)施例9，本制劑正在某地某醫(yī)院中對(duì)30名乙肝病患者進(jìn)行治療。皆為有效。參閱圖8，圖8是隱性功能基因激活裝置(8)的又一個(gè)實(shí)施例說(shuō)明圖，所述裝置也叫做微交變生物電場(chǎng)(MAB)裝置，和圖2相比，本圖所示為有線激活裝置，而圖2為無(wú)線激活裝置，作用相同，圖8中示出，本實(shí)施例的裝置主要包括有電波發(fā)生器(81)、放大器(82)、基因激活箱(83)，其中，電波發(fā)生器(81)與放大器(82)相電訊連接，通常是通過(guò)傳輸線的有線方式連接，基因激活箱(83)中設(shè)置有放射板(831)、放大器(82)通過(guò)輸出線接入到基因激活箱(83)中的放射板(831)上，準(zhǔn)備被激活的菌種被置入于基因激活箱(83)內(nèi)，開(kāi)啟電波發(fā)生器(81)到所要求的頻率F，放大器(82)將輸入的頻率為F的生命電波加以放大，按予定要求的功率進(jìn)行輸出，傳輸?shù)椒派浒?831)上，放射板(831)即產(chǎn)生微交變生物電場(chǎng)，按頻率F輻射電波，激活在基因激活箱(83)中的菌種的隱性功能基因。頻率發(fā)生器(81)和放大器(82)是常用電子產(chǎn)品，可直接在市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)或自行制作，放射板(831)是無(wú)線電波發(fā)射天線，可以采用板狀、桿狀、網(wǎng)狀等結(jié)構(gòu)。表1.激活調(diào)控(B、T、K、NK)細(xì)胞所用酵母“隱性功能基因”培養(yǎng)基成分表
表2.環(huán)境條件適應(yīng)性培養(yǎng)基成分表(以1000ml為例)
表3.本專利所涉及的微生物種類(但不僅限于本表所列微生物)
表4.特異性酵母擴(kuò)大培養(yǎng)基成分表(以1000L培養(yǎng)液計(jì))
注1.上表中各種液體均是按照物料/水＝1/10的比例加工制成的。
2.上表培養(yǎng)液要調(diào)整到pH2.5±0.2范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種將酵母菌制成具有特定免疫功能的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的方法，其特征在于，采用如下步驟，第一步驟，在微交變生物電場(chǎng)(MAB)中，采用每種酵母菌的特征無(wú)線電波，激活其隱性功能基因，第二步驟將激活了隱性功能基因的酵母菌進(jìn)行環(huán)境因子(MAB)馴化培養(yǎng)，第三步驟，將經(jīng)過(guò)環(huán)境因子馴化的酵母菌經(jīng)(MAB)擴(kuò)大培養(yǎng)，按預(yù)定種類混合濃縮，調(diào)制，即制成所要求的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑。
2.如權(quán)利要求1所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于，在微交變生物電場(chǎng)(MAB)中采用每種酵母菌的特征無(wú)線電波激活其隱性功能基因的步驟，包括有(1)配制培養(yǎng)基500-5000ml，并滅菌處理，(2)選擇酵母種類，按照活細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個(gè)/1000ml的比例，注入培養(yǎng)容器內(nèi)的培養(yǎng)基中，(3)保持容器中的溫度在T1范圍，培養(yǎng)H1小時(shí)，(4)利用圖2或圖8的微交變生物電場(chǎng)裝置，打開(kāi)電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到各F范圍內(nèi)，(5)將電波發(fā)射儀輸出電磁場(chǎng)強(qiáng)度調(diào)節(jié)到V1(以距離為100cm為例)范圍內(nèi)，(6)將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶安裝到接收機(jī)放大器輸出端，將接收頻率與發(fā)射儀的發(fā)射頻率調(diào)節(jié)到相同的F范圍內(nèi)，同時(shí)調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為L(zhǎng)1，(7)在上述條件下，并保持T2的溫度條件，激活H2小時(shí)，(8)經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。
3.如權(quán)利要求1所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于將激活了隱性功能基因的酵母菌進(jìn)行環(huán)境因子(MAB)馴化培養(yǎng)的步驟，包括有(1)配置培養(yǎng)基，并滅菌處理，(2)取1.中培養(yǎng)基1000ml注入到附圖三的容器中，(3)取調(diào)控某細(xì)胞的一種特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥LT)，注入附圖三所示的容器中，(4)打開(kāi)如圖三所示的(MAB)電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控該種細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性頻率F上，(5)調(diào)節(jié)如圖三所示的電波輸出電壓為V2(100ml培養(yǎng)基所使用的電波強(qiáng)度為5-10v)，(6)保持上述(MAB)電波頻率和波強(qiáng)度不變，在2-90℃的溫度條件培養(yǎng)H3小時(shí)后，分離保存在T3的條件下備用。
4.如權(quán)利要求1所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于將經(jīng)過(guò)環(huán)境因子(MAB)馴化的酵母菌經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)的步驟，包括如下步驟(1)配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到培養(yǎng)罐中，(2)將經(jīng)人工模擬(MAB)生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)該細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到種子罐中，作為種子液，然后按照一定的比例將種子液注入到培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，(3)調(diào)節(jié)(MAB)電波發(fā)生器，使其輸出生物電波為F，電波強(qiáng)度為115-445mv/cm，(4)保持上述(MAB)電波頻率和電波強(qiáng)度不變情況下，在T4條件下培養(yǎng)H4小時(shí)，(5)培養(yǎng)特異性酵母活細(xì)胞達(dá)到20億個(gè)/ml；以及，選定所需要的酵母菌的種類，以及各種酵母菌的配合比例，按如下步驟進(jìn)行混合，濃縮，制成成品，封裝(1)將特異性酵母液分別輸入到各罐中，(2)將各自罐中的該種特異性酵母液按照等量的比例輸入到混合罐中進(jìn)行混合，(3)將混合后的酵母液濃縮，(4)將濃縮后的特異性酵母混合液輸送到冷卻罐中，冷卻到2-20℃，(5)將經(jīng)過(guò)冷卻罐冷卻的混合液，輸送到計(jì)量罐中計(jì)量，將計(jì)量后的混合液輸送到罐封機(jī)中灌封，制成成品。
5.如權(quán)利要求1或2所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于，采用4種不同的(MAB)特征無(wú)線電波頻率F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3，F(xiàn)4，可形成分別激活B、T、K、NK細(xì)胞的隱性免疫基因的4種特異性酵母。
6.如權(quán)利要求1或2所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于，當(dāng)特征頻率F1為7200-10700MHz范圍時(shí)，激活用于調(diào)控B細(xì)胞免疫功能因酵母。
7.如權(quán)利要求1或2所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于，采用(MAB)特征無(wú)線電波激活酵母菌的隱性功能基因時(shí)的容器保持溫度T1范圍是2-80℃。
8.如權(quán)利要求1所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑的制造方法，其特征在于，本方法適用全部酵母菌。
9.一種酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑，其特征在于，它是由 1所述的方法所制造出的。
10.如權(quán)利要求9所述的酵母菌人體免疫調(diào)節(jié)劑，其特征在于，它可以含有如下特異性酵母菌中的任意一種，任意兩種，任意三種，任意四種調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母菌，調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫基因的特異性酵母菌，調(diào)節(jié)K細(xì)胞免疫基因的特異性酵母菌，調(diào)節(jié)NK細(xì)胞免疫基因的特異性酵母菌。
全文摘要
本發(fā)明采用微交燮生物電場(chǎng)(Micro－Alternating－field Biotechnology,簡(jiǎn)稱MAB)模擬生命電波的技術(shù),使酵母所表達(dá)的特性蛋白,分別具有激活調(diào)控校正免疫能力低下B、T、K和NK細(xì)胞免異基因功能,使用這些特異性酵母制成生物制劑用于調(diào)控機(jī)體免疫基因達(dá)到重建機(jī)體免疫功能的作用。本生物制劑可用于多種腫瘤、尿毒癥、肝炎、老年癡呆、各種胃腸疾病、糖尿病、神經(jīng)障礙等多種疾病的防治,無(wú)毒副作用。
文檔編號(hào)A61P37/00GK1380099SQ0111063
公開(kāi)日2002年11月20日 申請(qǐng)日期2001年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月13日
發(fā)明者黃金富 申請(qǐng)人:黃金富