專利名稱：環(huán)戊烯酮衍生物的制作方法
本申請涉及一些環(huán)戊烯酮衍生物、其制備以及在醫(yī)藥和其它領(lǐng)域中的應(yīng)用。
多種包含環(huán)戊烯酮環(huán)結(jié)構(gòu)(也稱為環(huán)戊烯酮核)的化合物能夠引起熱激反應(yīng)。熱激反應(yīng)是精細(xì)控制和高度保守的保護(hù)細(xì)胞抗不同類型損傷的機(jī)制，這些損傷包括極端溫度、氧化應(yīng)力、暴露于毒素和病毒感染(1)。在人細(xì)胞中，引發(fā)熱激反應(yīng)需要激活反式調(diào)節(jié)蛋白-1型熱激轉(zhuǎn)錄因子(HSF1)，其控制細(xì)胞保護(hù)熱激蛋白(HSPs)的表達(dá)(1)。HSP誘導(dǎo)最初是為了檢測生理學(xué)應(yīng)力而作為信號解譯的，現(xiàn)在一般公認(rèn)的是，HSPs在不同類型損傷后為了防止由無活性蛋白積聚和聚集導(dǎo)致的損害而進(jìn)行的修復(fù)過程中作為分子伴侶為細(xì)胞所利用(1)。特別是，據(jù)描述心臟熱激蛋白在多種人類疾病中有細(xì)胞保護(hù)作用，包括局部缺血、炎癥和病毒感染(2-5)。出于這些原因，HSF1被認(rèn)為是新的、有吸引力的細(xì)胞保護(hù)和抗病毒藥物的作用目標(biāo)。對于病毒感染，Santoro等人已顯示了經(jīng)由HSF1激活作為HSP70誘導(dǎo)劑的具有有效抗病毒活性的一類前列腺素(PGs)(6，7)。
A型前列腺素(PGAs)抑制病毒復(fù)制和預(yù)防持續(xù)感染的能力最早在1980年報(bào)道(8)?，F(xiàn)在已很好地確定的是，在體外和體內(nèi)模型中，在環(huán)戊烷環(huán)結(jié)構(gòu)中具有α，β-不飽和羰基的PG(環(huán)戊烯酮PG，cyPG)具有抗多種DNA和RNA病毒的活性，這些病毒包括皰疹病毒、副粘病毒、正粘病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒(9)。其抗病毒活性的機(jī)制與其它任何已知的抗病毒劑不同，并且涉及在感染的細(xì)胞中誘導(dǎo)熱激蛋白和抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB(核因子-κB)。
NF-κB是誘導(dǎo)真核轉(zhuǎn)錄因子，其在促進(jìn)炎癥和病毒復(fù)制方面起著關(guān)鍵作用(11)。在大多數(shù)細(xì)胞中，NF-κB存在于非活性胞質(zhì)復(fù)合物中，該復(fù)合物的主要形式是由p50和p65亞單位構(gòu)成的異二聚體，結(jié)合在IκB族抑制蛋白—通常是IκBα上，并且在對原發(fā)(病毒、細(xì)菌、UV)或繼發(fā)(炎性細(xì)胞因子)病原刺激起反應(yīng)時(shí)被激活(12)。刺激引發(fā)了IκBα的快速磷酸化和降解，導(dǎo)致NF-κB移位到細(xì)胞核上，在細(xì)胞核上該因子在特異性κB-位點(diǎn)與DNA結(jié)合，誘導(dǎo)編碼信號蛋白的多種基因。靶基因包括炎性和趨化性的細(xì)胞因子、細(xì)胞因子受體和病毒基因。NF-κB參與多種病理事件，包括通過增強(qiáng)HIV-1轉(zhuǎn)錄來參與AIDS進(jìn)展，并且被認(rèn)為是新的抗病毒和抗炎藥物的有吸引力的治療靶目標(biāo)(12)。Santoro等人已表明，環(huán)戊烯酮前列腺素通過阻止IκBα磷酸化和降解來抑制人細(xì)胞中的NF-κB激活和NF-κB依賴性HIV-1轉(zhuǎn)錄，并且該作用與HSF1激活非常相關(guān)(11)。
Santoro等人已確定了能激活HSF和抑制NF-κB的天然前列腺素的分子結(jié)構(gòu)(13)。據(jù)表明，PGA分子的一個(gè)組分環(huán)戊-2-烯-1-酮(還稱為2-環(huán)戊烯-1-酮)在125-500μM的濃度下能夠激活HSF1，并且能迅速且選擇性地引發(fā)細(xì)胞保護(hù)性HSP70的合成。還據(jù)表明，在相同濃度下，環(huán)戊-2-烯-1-酮能夠阻斷化學(xué)和生理誘導(dǎo)劑的NF-κB激活作用。這些作用與彈狀病毒感染期間的抗病毒活動(dòng)有關(guān)(13)。
本發(fā)明化合物包含環(huán)戊-2-烯-1-酮環(huán)，并具有與該環(huán)直接相連的雙鍵(除了環(huán)戊-2-烯-1-酮環(huán)的C＝O鍵)。本發(fā)明化合物還具有經(jīng)由單鍵與環(huán)直接相連的氧原子。
本發(fā)明提供了式I化合物 其中R1是H、或取代或未取代的含有1-3個(gè)碳原子的烷基或烯基；R2是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基或芳炔基，所述基團(tuán)在碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子，并含有1-12個(gè)碳原子；R3是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基或芳炔基，所述基團(tuán)在碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子，并含有1-12個(gè)碳原子，或者是甲硅烷基；R4是H、或含有1-3個(gè)碳原子的烷基；X和Y獨(dú)立地為H、鹵素、含有1-3個(gè)碳原子的烷基；且相對于環(huán)戊烯環(huán)上的羰基碳，R2可以是順式或反式。
為了避免出現(xiàn)疑問，術(shù)語“烯基”是指在其碳骨架中有一個(gè)或多個(gè)雙鍵的基團(tuán)，術(shù)語“炔基”是指在其碳骨架中有一個(gè)或多個(gè)三鍵的基團(tuán)。還應(yīng)當(dāng)理解，對于本說明書，炔基可能在其碳骨架中既包含雙鍵也包含單鍵。
R2和R3可獨(dú)立地被一個(gè)或多個(gè)選自＝O、-OR5、-COOR5和/或鹵素(優(yōu)選氟)的基團(tuán)或原子取代，其中R5獨(dú)立地為氫、或含有最高達(dá)4個(gè)碳原子的烷基。R5優(yōu)選為氫或甲基。
R2和R3可獨(dú)立地未取代。
當(dāng)存在時(shí)，在R2和/或R3的碳骨架中的雜原子優(yōu)選為氧、氮或硫。
R1優(yōu)選為氫或未取代的烷基(優(yōu)選甲基)；氫是更優(yōu)選的。
R4優(yōu)選為氫或甲基；氫是更優(yōu)選的。
每個(gè)R2和R3可獨(dú)立地為取代或未取代的直鏈、支鏈和/或環(huán)狀烷基、烯基或炔基。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2是取代或未取代的雜環(huán)基、芳烷基或芳基。因此，R2可以是取代或未取代的苯基、噻吩基、或吡啶基。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2是未取代的噻吩基、吡啶基、苯基、二甲基苯基、鹵代苯基或烷氧基苯基。鹵代苯基優(yōu)選為氟苯基，烷氧基苯基優(yōu)選為甲氧基苯基。
當(dāng)R2是取代或未取代的烷基、烯基或炔基時(shí)，其優(yōu)選包含最多為10、9、8、7、6、5、4、或3個(gè)碳原子。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2含有7、3或2個(gè)碳原子，并優(yōu)選為烷基。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2是C7H15、異丙基、或乙基。
R3可以是取代或未取代的烷基或芳烷基，并且在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3包含羧基和/或羰基。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3是取代或未取代的直鏈、支鏈和/或環(huán)狀烷基。當(dāng)包含或者是環(huán)烷基時(shí)，R3優(yōu)選含有5、6、7、或8個(gè)碳原子，當(dāng)是直鏈或支鏈烷基時(shí)，其含有5個(gè)或5個(gè)以下碳原子。在其它實(shí)施方案中，R3是芳烷基，并優(yōu)選含有6、7、或8個(gè)碳原子。當(dāng)R3是直鏈或支鏈烷基時(shí)，其更優(yōu)選含有4或5個(gè)碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基是環(huán)己基，優(yōu)選的芳基是苯基。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3是琥珀?；?即1-氧代-3-羧基丙-1-基)或其衍生基團(tuán)。其衍生基團(tuán)可以是2-甲基琥珀酰基(即1-氧代2-甲基-3-羧基丙-1-基)，或者其中琥珀酰基的兩個(gè)碳原子形成飽和或不飽和環(huán)的一部分的基團(tuán)。因此，衍生基團(tuán)可以是2-羧基苯基羰基或2-羧基環(huán)己基羰基。
在其它實(shí)施方案中，R3包括在連接于環(huán)戊烯酮環(huán)上的氧原子的α位的羰基。
當(dāng)R3是甲硅烷基時(shí)，其優(yōu)選為三(有機(jī))甲硅烷基。每個(gè)有機(jī)基團(tuán)可以是取代或未取代的烷基、芳基和/或芳烷基，在其碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子?？梢源嬖谌我饨M合的三個(gè)這樣的基團(tuán)(例如一個(gè)烷基、一個(gè)芳烷基和一個(gè)芳基；與兩個(gè)或一個(gè)芳基或芳烷基組合的一個(gè)或兩個(gè)烷基；等)。當(dāng)存在烷基時(shí)，它們優(yōu)選具有1-5個(gè)碳原子。當(dāng)存在芳基或烷芳基時(shí)，它們分別優(yōu)選具有至少6或7個(gè)碳原子。優(yōu)選的芳基包括苯基，優(yōu)選的芳烷基包括芐基。如果需要的話，烷基、甲硅烷基、或三(有機(jī))甲硅烷基、芐基或苯基可包含不同的雜原子和/或基團(tuán)(例如其中可存在一個(gè)或多個(gè)羥基和/或鹵素原子)。由此，有機(jī)基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)＝O、-OR5、-COOR5和/或鹵素(優(yōu)選氟)取代，其中R5獨(dú)立地為氫或含有最高達(dá)4個(gè)碳原子的烷基。R5優(yōu)選為氫或甲基。
本發(fā)明化合物以至少兩種對映體的形式存在，并且所有這樣的對映體、其非等量混合物和外消旋體都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物的R-和S-對映體都是有用的。它們可分別以基本上不含有其它對映體的形式提供(例如至少75％、85％、90％、95％或99％(w/w)對映體純度)。然而，也可以使用對映體混合物(例如外消旋混合物)。
許多本發(fā)明化合物以E和Z形式存在，即相對于環(huán)戊烯酮環(huán)上的羰基碳，R2可以是順式或反式。本發(fā)明化合物包括所有這樣的單獨(dú)異構(gòu)體及其混合物。
本發(fā)明化合物與現(xiàn)有技術(shù)公開的具有治療用途的punaglandins和前列腺素有顯著不同。特別是，可以指出，本發(fā)明化合物不需要存在連接在環(huán)戊烯酮環(huán)結(jié)構(gòu)上的兩個(gè)長的脂族側(cè)鏈(通常分別包含7個(gè)以上碳原子)。因此，雖然如果需要的話可以包含兩個(gè)這樣的鏈，但是優(yōu)選的本發(fā)明化合物不包含與前列腺素有關(guān)的兩個(gè)長的脂族側(cè)鏈。
R2和R3的優(yōu)選實(shí)施方案是在下式中舉例說明的那些，尤其是在式CTC-31、32、33、34、35、36和45中舉例說明的那些。每個(gè)在下面給出的R2的實(shí)施方案可以與R3的另一實(shí)施方案一起使用，反之亦然。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括下列化合物 在上述式以及說明書中，提供如wv所示的鍵所連接的基團(tuán)可以呈順式或反式構(gòu)型，并且這兩種形式(即E和Z形式)的所示化合物都在本發(fā)明范圍內(nèi)。
在第二個(gè)方面，本發(fā)明提供了制備依據(jù)本發(fā)明第一個(gè)方面的化合物的方法。這樣的方法包括將式II化合物 與甲硅烷基氯、琥珀酸酐、或琥珀酸酐衍生物或琥珀酸酐發(fā)生反應(yīng)，優(yōu)選在堿存在下反應(yīng)，更優(yōu)選還在烷基氨基吡啶存在下反應(yīng)。烷基氨基吡啶優(yōu)選為二甲基氨基吡啶。
在式II中，R1和R2如上所定義，并且甲硅烷基氯中的甲硅烷基也如上所定義。選擇琥珀酸酐衍生物以提供所需的基團(tuán)R3。
式II化合物可通過在下文實(shí)施例7中描述的方法制得，或者通過在下文實(shí)施例1中描述的一般方法(b)制得，其中Q是羥基，或者在使用前將Q還原成羥基。
依據(jù)本發(fā)明第三個(gè)方面，提供了制備式III化合物的方法 包括下述步驟(a)將式IV化合物 與甲硅烷基氯、琥珀酸酐、或琥珀酸酐衍生物反應(yīng)，優(yōu)選在堿存在下反應(yīng)，更優(yōu)選還在烷基氨基吡啶(烷基氨基吡啶優(yōu)選為二甲基氨基吡啶)存在下反應(yīng)，以制得式V化合物 和(b)將式VI化合物 與R2CHO在堿存在下反應(yīng)，以生成式VII化合物 其中當(dāng)步驟(a)在步驟(b)之前進(jìn)行時(shí)，Z是氫，Q是OR3，且Z、Q和環(huán)戊烯環(huán)之間的鍵是單鍵；當(dāng)步驟(b)在步驟(a)之前進(jìn)行時(shí)，Q是氧原子或羥基，Z是CR2，且CR2中的碳原子通過雙鍵與環(huán)戊烯環(huán)鍵合；當(dāng)Q是氧時(shí)，氧原子與環(huán)戊烯環(huán)之間的鍵是雙鍵，并且在進(jìn)行步驟(a)之前將其還原成羥基；X、Y、R2、R3和甲硅烷基氯中的甲硅烷基如上所定義；并選擇琥珀酸酐衍生物以提供所需的基團(tuán)R3。
在其它方面，本發(fā)明提供了用于醫(yī)藥，特別是用于治療人體或動(dòng)物體，或用于在人體或動(dòng)物體上實(shí)施的診斷方法的依據(jù)本發(fā)明第一個(gè)方面的化合物。涉及使用本發(fā)明化合物的治療和診斷方法也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
依據(jù)本發(fā)明第一個(gè)方面的化合物在制備用于在人體或動(dòng)物體上實(shí)施的治療或診斷方法的藥物中的應(yīng)用在本發(fā)明另一方面的范圍內(nèi)。
下面討論本發(fā)明化合物的優(yōu)選的治療和診斷應(yīng)用。
本發(fā)明化合物優(yōu)選具有在一個(gè)或多個(gè)下述方面的活性(a)激活HSF(b)抑制NF-κB(c)抑制HSV-1復(fù)制(d)抑制仙臺(tái)病毒復(fù)制(e)抑制流感病毒。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可易于測定上述活性。實(shí)施例9、10、11、和12描述了合適的測定方法的實(shí)例。
活性大于環(huán)戊-2-烯-1-酮(至少在一定濃度下)的化合物是最優(yōu)選的。這樣的化合物的活性水平可能是環(huán)戊-2-烯-1-酮活性水平的至少2倍。其活性水平更優(yōu)選是環(huán)戊-2-烯-1-酮的至少10倍。
在本發(fā)明另一方面，依據(jù)本發(fā)明第一個(gè)方面的化合物可用于治療植物疾病、特別是病毒感染。醫(yī)藥應(yīng)用本發(fā)明化合物可用于任何所需的治療目的。優(yōu)選的治療是人治療，但是獸醫(yī)治療也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。治療可以是預(yù)防性的，或者可以針對已有的病癥。
治療是針對宿主中可通過激活熱激轉(zhuǎn)錄因子(例如HSF1)、通過誘導(dǎo)熱激蛋白(例如hsp70)和/或通過抑制NF-κB來治療的病癥。
下面討論多種不同的優(yōu)選治療(應(yīng)當(dāng)理解，一些疾病—例如癌癥—可能是由病毒或非病毒因子介導(dǎo)的。除非另外指出，否則包括任何給定疾病的治療，無論該疾病是不是由病毒介導(dǎo)的。還應(yīng)當(dāng)理解，在所討論的不同的治療分類中有一些重疊，即這些分類不是彼此排他的)。1.治療病毒介導(dǎo)的疾病NF-κB涉及一些病毒感染的發(fā)病機(jī)理。已知熱激蛋白(例如HSP70)可提供抗病毒感染致病的保護(hù)作用。本發(fā)明化合物可以在減少病毒復(fù)制方面有活性。
本發(fā)明化合物可用于治療病毒介導(dǎo)的病癥。包括RNA病毒介導(dǎo)的病癥以及DNA病毒介導(dǎo)的病癥。
可用本發(fā)明化合物治療的病毒疾病的實(shí)例包括由下列病毒介導(dǎo)的病癥逆轉(zhuǎn)錄病毒(例如HIV1)、皰疹病毒(例如HSV-1、CMV、HHV8、HSV-2)、副粘病毒和正粘病毒(例如仙臺(tái)病毒，并包括流感病毒)、彈狀病毒(例如水皰性口炎病毒、狂犬病病毒)、小RNA病毒(例如鼻病毒、甲肝病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒)、嗜肝DNA病毒(例如乙肝病毒)、披膜病毒(例如風(fēng)疹病毒)、痘病毒(例如觸染性軟疣病毒)。
可用本發(fā)明化合物治療的其它病毒疾病包括線狀病毒(例如Ebola病毒)、布尼亞病毒(例如漢坦病毒)、沙粒病毒(例如拉沙熱病毒)、黃病毒(例如黃熱病病毒和丙肝病毒)。
本發(fā)明化合物可特別用于治療影響水生生物(例如魚類、甲殼綱動(dòng)物等)的病毒性和其它病癥。這樣的病癥包括由鼻潰瘍病毒、虹彩病毒、淋巴囊腫病病毒等介導(dǎo)的病癥。
本發(fā)明化合物可因此用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。它們可用于水生生物的飼料。這樣的飼料在本發(fā)明范圍內(nèi)。其一般在容器中銷售，并適當(dāng)?shù)刭N標(biāo)簽標(biāo)注(例如魚飼料、甲殼綱動(dòng)物的飼料、水生生物的飼料等)。或者，本發(fā)明化合物可用于水治療或直接用于水生生物。因此，為了用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，本發(fā)明化合物并不必須存在于飼料中。2.治療細(xì)菌介導(dǎo)的病癥NF-κB為了對細(xì)菌感染起反應(yīng)而激活。
本發(fā)明化合物可用于治療由于這樣的感染引起的病癥，例如治療NF-κB刺激的炎癥。大多數(shù)情況下這是由于革蘭氏陰性菌感染引起的。然而，也可能是由于革蘭氏陽性菌(例如金黃色釀膿葡萄球菌)感染引起的。3.治療放射引起的病癥NF-κB為了對放射(例如UV-放射)起反應(yīng)而激活。
本發(fā)明化合物可用于治療由放射引起的病癥。這樣的病癥包括細(xì)胞和組織創(chuàng)傷、細(xì)胞和組織老化以及癌癥(例如皮膚癌)。4.治療炎癥和免疫系統(tǒng)疾病NF-κB為了對炎性細(xì)胞因子起反應(yīng)而激活。據(jù)信其是免疫和炎癥反應(yīng)的早期介質(zhì)。
本發(fā)明化合物可用于治療免疫疾病(例如自身免疫性疾病)和治療炎性疾病。
可用本發(fā)明化合物治療的具體炎性疾病和自身免疫性疾病的實(shí)例包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、成人呼吸窘迫綜合征、肝炎和/或肝硬化、血管炎癥(包括播散性紅斑狼瘡)、和胃腸道炎性病癥(例如潰瘍)。5.治療局部缺血和動(dòng)脈硬化NF-κB殘余細(xì)胞增殖。
本發(fā)明化合物可用作抗增殖劑。它們因此可用于治療炎性風(fēng)濕性肉芽腫、動(dòng)脈和靜脈再狹窄中的新內(nèi)膜增殖、以及癌癥(包括淋巴瘤、白血病、肉瘤、癌和黑瘤)。6.治療涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥已知熱激蛋白能提供細(xì)胞保護(hù)作用。
本發(fā)明化合物可用于治療涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥。
這些病癥包括化學(xué)中毒(例如由于食入毒素如百草枯、或用藥過量例如撲熱息痛使用過量所導(dǎo)致的中毒)、氧化性細(xì)胞損害、細(xì)胞和組織老化性創(chuàng)傷、肝炎性糖尿病和燒傷的影響。本發(fā)明化合物還可用于對抗人或動(dòng)物中的衰老、以及促進(jìn)傷口愈合。
可用本發(fā)明化合物治療的其它這種性質(zhì)的疾病包括氧化應(yīng)力和變性疾病，尤其是神經(jīng)變性疾病例如BSE、新的CJD變型和阿爾茨海默氏病。7.其它治療環(huán)戊烯酮前列腺素已知可用于刺激過氧物酶體增殖子激活受體(PPARs)。因此，本發(fā)明化合物可用于治療糖尿病(包括糖尿病的并發(fā)癥)。本發(fā)明化合物還可用于治療其中涉及或發(fā)生鈣損失或不足的病癥(包括骨病癥、骨骼病癥、牙齒病癥、發(fā)育病癥等)。給藥途徑藥物通常作為藥物組合物的一部分提供，藥物組合物可包含可藥用載體。藥物組合物一般以無菌形式提供。其可以以單位劑型提供。其一般在密封的容器中提供，并且可作為藥盒的一部分提供。這樣的藥盒在本發(fā)明范圍內(nèi)。其通常(雖然不是必須)包括使用說明書?？商峁┒鄠€(gè)單位劑型。
在本發(fā)明范圍內(nèi)的藥物組合物可包含一種或多種下列組分防腐劑、助溶劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、鹽(本發(fā)明化合物自身可以以可藥用鹽的形式提供，下文中對此有詳細(xì)描述)、緩沖劑、包衣劑或抗氧化劑。除了本發(fā)明化合物以外，它們還可以含有其它治療活性劑。
本發(fā)明化合物自身可以以任意合適的形式提供，即它們可以以本身的形式使用，或者可以以藥物有效衍生物的形式使用。例如，它們可以以可藥用鹽或水合物的形式使用。可藥用鹽包括堿金屬鹽(例如鈉鹽或鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鈣鹽或鎂鹽)、鋁鹽、鋅鹽、銨鹽(例如四烷基銨鹽)等。可使用無機(jī)酸加成鹽(例如鹽酸鹽、硫酸鹽、或磷酸鹽)或有機(jī)酸加成鹽(例如檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、丙酸鹽或酒石酸鹽)。
本發(fā)明藥物組合物可以以控制釋放的形式提供?？赏ㄟ^將藥物活性劑與能在生理?xiàng)l件下以預(yù)定方式降解的物質(zhì)一起制成藥物組合物來實(shí)現(xiàn)控制釋放。降解可以是酶解或者可以是pH依賴性的。
可設(shè)計(jì)藥物組合物以穿越血腦屏障(BBB)。例如，載體如脂肪酸、肌醇或膽固醇能夠穿越BBB。載體可以是能經(jīng)由腦內(nèi)皮細(xì)胞中的特定運(yùn)輸系統(tǒng)進(jìn)入腦中的物質(zhì)，例如胰島素樣生長因子I或II?？蓪⑤d體與活性劑偶聯(lián)，或者載體含有活性劑/與活性劑混合?？墒褂弥|(zhì)體來越過BBB。WO91/04014描述了一種脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)，其中可將活性劑包封/包埋，并且通常越過BBB而運(yùn)輸?shù)姆肿?例如胰島素或胰島素樣生長因子I或II)存在于脂質(zhì)體外表面上。US專利4704355中也公開了脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)。
可改變本發(fā)明藥物組合物以適應(yīng)通過任意合適的途徑給藥，例如通過口服(包括頰或舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或透皮)、陰道或非胃腸道(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或真皮內(nèi))途徑施用。這樣的組合物可通過藥物領(lǐng)域的已知方法制得，例如通過將一種或多種活性組分與合適的載體混合而制得。
根據(jù)所需的給藥途徑，可使用不同的藥物遞送系統(tǒng)來施用本發(fā)明藥物組合物。例如Langer(Science 249，1527-1533(1991))以及Illum和Davis(Current Opinions in Biotechnology 2m 254-259(1991))描述了藥物遞送系統(tǒng)。下面更詳細(xì)地描述遞送藥物的不同給藥途徑。(i)口服給藥適于口服給藥的藥物組合物可以作為下列劑型提供膠囊或片劑；粉劑或粒劑；溶液、糖漿劑或懸浮液(在水或非水液體中)；可食用泡沫劑或鞭形制劑(whips)；或乳劑。片劑或硬明膠膠囊可包含乳糖、玉米淀粉或其衍生物、硬脂酸或其鹽。軟明膠膠囊可包含植物油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇等。溶液和糖漿劑可包含水、多元醇和糖。為了制備懸浮劑，可使用油(例如植物油)來提供水包油或油包水懸浮液。
可將欲口服施用的活性組分包衣或者與能延遲活性組分在胃腸道中結(jié)合和/或吸收的物質(zhì)(例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯)混合。
因此，可在多個(gè)小時(shí)期間內(nèi)實(shí)現(xiàn)活性劑的持續(xù)釋放，并且如果需要的話，可將活性劑保護(hù)以防止在胃中降解。可配制口服施用的藥物組合物以促進(jìn)活性劑在特定胃腸道位置(由于特殊pH或酶條件)的釋放。(ii)透皮給藥適于透皮給藥的藥物組合物可作為不連續(xù)的貼劑提供，這樣的貼劑是在受治療者的表皮上長時(shí)間緊密接觸。例如，活性組分可通過離子電滲從貼劑中釋放出來(離子電滲描述在PharmacaticalResearch，3(6)318(1986)中)。(iii)局部給藥適于局部給藥的藥物組合物可作為膏劑、霜?jiǎng)?、懸浮液、洗劑、粉劑、溶液、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑或油提供。為了局部施用給皮膚、口腔、眼睛或其它外部組織，優(yōu)選使用局部膏劑或霜?jiǎng)．?dāng)配制成膏劑時(shí)，可將活性組分與石蠟或水可混溶基質(zhì)一起使用。或者，可用水包油基質(zhì)或油包水基質(zhì)將活性組分配制成霜?jiǎng)?。適于局部施用給眼睛的藥物組合物包括滴眼劑?？蓪⒒钚越M分溶解或懸浮在合適的載體例如含水溶劑中。適于在口腔中局部施用的藥物組合物包括錠劑、軟錠劑和漱口劑。(iv)直腸給藥適于直腸給藥的藥物組合物可以作為栓劑或灌腸劑提供。(v)經(jīng)鼻給藥這不僅包括施用給鼻腔，還包括經(jīng)由鼻腔施用到其它部位例如肺中。
適于經(jīng)鼻給藥的藥物組合物可使用固體載體例如粉劑(粒徑優(yōu)選為20-500微米)。粉劑可以以鼻吸藥的反式施用，即通過鼻子從緊挨著鼻子的粉劑容器中迅速吸入。適于經(jīng)鼻給藥的組合物還可以使用液體載體，例如包括鼻用噴霧劑或滴鼻劑。這些制劑可包含活性組分的水或油溶液。
通過吸入施用的組合物可以在特殊裝置中提供，例如在加壓氣霧器、噴霧器或吹入器中提供。這些裝置可以具有使得能提供預(yù)定劑量活性組分的構(gòu)造。(vi)陰道給藥適于陰道給藥的藥物組合物可以作為子宮托、塞子、霜?jiǎng)?、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑提供。(vii)非胃腸道給藥適于非胃腸道給藥的藥物組合物包括水和非水無菌注射溶液或懸浮液。它們可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、和使得組合物與受治療者的血液基本上等滲的溶質(zhì)。可存在于這類組合物中的其它組分包括例如水、醇、多元醇、甘油和植物油。適于非胃腸道給藥的組合物可以在單位劑量或多劑量容器例如密封的安瓿和小瓶中提供，并且可以在凍干(冷凍干燥)條件下貯存，對于這種情況，在臨用前僅需迅速加入無菌液體載體例如無菌注射用水。可用無菌粉劑、粒劑和片劑制備臨時(shí)的注射溶液和懸浮液。
通過上述描述可以理解，本發(fā)明組合物可以以多種不同方式配制。然而，優(yōu)選的本發(fā)明組合物是局部制劑形式。劑量本發(fā)明化合物的劑量可以在寬的限度內(nèi)改變，其取決于治療的性質(zhì)、所治療個(gè)體的年齡和身體狀況等，并且最終由醫(yī)師決定合適的使用劑量。
然而，雖然不想束縛于任何特定劑量，但是10μg-100mg/kg體重的本發(fā)明化合物的日劑量可能是合適的。
更優(yōu)選的劑量為5-50mg/kg體重/天?？梢园凑招枰磸?fù)給予這樣的劑量。如果出現(xiàn)了副作用，可依據(jù)良好的臨床實(shí)踐降低劑量和/或給藥頻率。研究應(yīng)用本發(fā)明化合物可用于研究。例如，它們可作為研究工具用于分析一種或多種下列指標(biāo)HSF、NF-κB、熱激反應(yīng)、病毒復(fù)制、病毒介導(dǎo)的病癥、細(xì)菌介導(dǎo)的病癥、放射(例如UV-放射)引起的病癥、炎性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、局部缺血、動(dòng)脈硬化、涉及細(xì)胞增殖的病癥(例如癌癥)、涉及損傷或殺死細(xì)胞(例如氧化性細(xì)胞損害)的病癥、和糖尿病。其它應(yīng)用本發(fā)明化合物還可用于治療植物病毒疾病。因?yàn)閾?jù)信熱激反應(yīng)的基本機(jī)制以類似方式在植物和動(dòng)物中起作用，能合理地預(yù)計(jì)本發(fā)明化合物以類似方式在植物和動(dòng)物中產(chǎn)生直接的抗病毒作用，本發(fā)明化合物治療植物病毒感染的應(yīng)用在本發(fā)明范圍內(nèi)。這些感染包括但不限于雙粒病毒、彈狀病毒、花椰菜花葉病毒、雀麥草花葉病毒、煙草花葉病毒、馬鈴薯Y病毒和馬鈴薯X病毒引起的植物感染。本發(fā)明化合物治療類病毒(包括但不限于馬鈴薯紡錘體腫瘤類病毒、啤酒花矮化(hop stunt)類病毒、和coconut cadang類病毒)感染的應(yīng)用也在本發(fā)明范圍內(nèi)。
實(shí)施例實(shí)施例1取代的環(huán)戊烯酮類似物的合成(a)通用路線1 1類R3選自 2類R3選自 i)R2CHO(5eq)，BF3OEt2(20eq)，Et2O，回流，2小時(shí)。ii)CeCl37H2O(1eq)，NaBH4(0.5eq)，THF/MeOH，-40℃，30分鐘。iii)R3SiCl或琥珀酸酐(1eq)，DIEA，DMAP，DMF，RT，18小時(shí)(過夜)。
步驟(i)5-亞芳基(arylidene)-2-環(huán)戊烯-1，4-二酮(A-D)的制備首先通過溶解于無水二氯甲烷并濾除聚合的副產(chǎn)物來純化市售的2-環(huán)戊烯-1，4-二酮。蒸發(fā)濾液得到黃色結(jié)晶固體的純凈化合物。將三氟化硼的乙醚復(fù)合物(20eq)加到上述二酮(1g)和乙醛(5eq)在無水乙醚(25ml)中的溶液中。根據(jù)R1的性質(zhì)，將該混合物加熱回流1-2小時(shí)。通過TLC監(jiān)測反應(yīng)。待反應(yīng)完全后，使反應(yīng)物冷卻1小時(shí)并加入乙醚(25ml)。將該混合物傾入冷的飽和氯化鈉溶液(30ml)中并加入乙酸乙酯以溶解有機(jī)層中的任何固體。分離有機(jī)層并用飽和氯化鈉溶液洗滌(2×25ml)，經(jīng)硫酸鎂干燥并在真空下除去溶劑。殘余物連續(xù)用數(shù)份異己烷洗滌，以除去過量乙醛。通過高真空除去殘留的溶劑，得到純凈產(chǎn)物。
A1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ7.21-7.3(3H，m)；7.76(1H，s)；7.82(1H，dd)；8.00(1H，d).
B1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ2.39(3H，s)；2.5(3H，s)；7.10-7.20(2H，m)；7.26-7.3(2H，m)；7.95(1H，s)；8.4(1H，d).
C1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ7.2(2H，dd)；7.3(2H，dd)；7.6(1H，s)；8.4(2H，dd).
D1H NMR(25-MHz.，CDCl3)δ3.92(3H，s)；7.0(2H，dd)；7.3(2H，dd)；7.6(1H，s)；8.4(2H，dd).
步驟(ii)5-亞芳基-2-環(huán)戊烯酮-4-醇(A-D)的制備將氯化鈰七水合物(1eq)的甲醇溶液(濃度為0.5mol 1-1)加到5-亞芳基-2-環(huán)戊烯酮-1，4-二酮(1g)的THF溶液(濃度為2mol 1-1)。用水/乙腈浴使該反應(yīng)物冷卻到-40℃。用10分鐘滴加NaBH4(0.5eq)并將反應(yīng)物再攪拌20分鐘。待反應(yīng)完全后，加入乙醚(50ml)并將反應(yīng)物在-40℃下再攪拌10分鐘。使反應(yīng)物冷過濾通過二氧化硅短柱并真空除去溶劑。將該粗產(chǎn)物溶于甲醇并預(yù)先吸附在二氧化硅上。通過快速色譜純化(1∶1乙酸乙酯∶己烷)，得到純凈的產(chǎn)物。A1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ5.23(1H，s)；6.45(1H，d)；7.12(1H，dd)；7.28(1H，s)；7.42(1H，dd)；7.57(1H，d)；7.68(1H，d).B1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ2.40(6H，s)；5.28(1H，d)；6.43(1H，d)；7.00(2H，d)；7.27(1H，d)；7.43(1H，dd)；7.71(1H，d).D1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ3.86(3H，s_；5.22(1H，d)；6.42(1H，d)；6.89(2H，d)；7.02(1H，s)；7.39(1H，dd)；8.17(2H，d).
注醇C不能由原料純化，因此在最后的步驟中使用粗品。
步驟(iii)采用1類R3實(shí)例的靶分子的制備將醇(50mg)溶于無水DMF(1ml)中。使該溶液冷卻到0℃并加入DIEA(2eq)、DMAP(0.05eq)和甲硅烷基氯(1eq)。使反應(yīng)物溫?zé)岬绞覝剡^夜并加入1ml蒸餾水和1.5ml乙醚。振蕩反應(yīng)物，分離有機(jī)層，用水(2ml)、飽和氯化銨溶液(2ml)和鹽水(2ml)洗滌。有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。反應(yīng)物用制備性HPLC純化。
用該途徑合成的化合物包括上面提及的化合物A1、2、3、4、11、12和14。
步驟(iv)采用2類R3實(shí)例的靶分子的制備將醇(50mg)溶于無水DMF(1ml)。加入DIEA(1.5eq)、DMAP(0.05eq)和琥珀酸酊(1eq)。使反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。加入水(1ml)和2M HCl(0.5ml)并振蕩反應(yīng)物。水層用2ml乙酸乙酯萃取。該有機(jī)萃取液經(jīng)硫酸鎂干燥并真空萃取溶劑。反應(yīng)物用制備性HPLC純化。
用該途徑合成的化合物包括上面提及的化合物A5、6、7、8、9、10和15。
(b)通用路線2 i)CeCl3.7H2O(1eq)，NaBH4(0.5eq)，MeOH，-40℃，30分鐘。ii)TBDMSCl(1eq)，DIEA(2eq)，DMAP(0.05eq)，DMF，0℃-RT，O.N.iii)LDA(1.1eq)，苯甲醛(1eq)，THF，-78℃，1小時(shí)。iv)PTSA(0.05eq)，甲苯，回流，15小時(shí)。
步驟(i)4-羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的制備將氯化鈰七水合物(7.76g)的甲醇(30ml)溶液加到2-環(huán)戊烯-1，4-二酮(2g)的甲醇(10ml)溶液中。使該反應(yīng)物冷卻到0℃。用20分鐘滴加NaBH4(400mg)并將反應(yīng)物再攪拌1.5小時(shí)。待反應(yīng)完全后，加入乙醚(50ml)并將反應(yīng)物在0℃下再攪拌10分鐘。使反應(yīng)物冷過濾通過二氧化硅短柱并真空蒸發(fā)。將該粗產(chǎn)物溶于甲醇并預(yù)先吸附在二氧化硅上。通過快速色譜純化(1∶1乙酸乙酯∶己烷)，得到620mg產(chǎn)物(30％)。
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ2.33(1H，dd)；2.80(1H，dd)；5.0(1H，m)；6.23(1H，dd)；7.6(1H，dd).
步驟(ii)4-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧]-2-環(huán)戊烯-1-酮的制備將醇(620mg)溶于無水DMF(6ml)并氬氣氛下在0℃下攪拌。加入DIEA(2eq)、TBDMSCl(1eq)和DMAP(0.05eq)并使反應(yīng)物攪拌過夜，同時(shí)使其緩慢溫?zé)岬绞覝?。該混合物用乙?50ml)稀釋，用水(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。真空蒸發(fā)溶劑，得到紅色的油(1g)。該粗產(chǎn)物通過在100℃、0.06mm Hg下真空蒸餾純化，得到淺黃色的油(705mg，52％)。
1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ0.00(6H，d)；0.65(9H，s)；2.1(1H，dd)；2.6(1H，dd)；4.84(1H，m)；6.04(1H，dd)；7.35(1H，dd).
步驟(iii)和(iv)5-苯亞甲基-4-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧]-2-環(huán)戊烯-1-酮(CTC-33)的制備在氬氣氛下，將2.3M二異丙基氨基鋰溶液(450μl)冷卻到-78℃。往其中加入4-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧]-2-環(huán)戊烯-1-酮(200mg)的無水THF(1ml)溶液。將該反應(yīng)物在-78℃攪拌10分鐘以形成烯醇化物。滴加苯甲醛(100mg)的THF(1ml)溶液。移走冷卻浴并用40分鐘使反應(yīng)混合物溫?zé)岬绞覝亍Ｍㄟ^加入飽和碳酸氫鈉(5ml)處理該反應(yīng)物，并用乙酸乙酯萃取(5ml)。該有機(jī)萃取液用硫酸鎂干燥并真空蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化(2∶8乙酸乙酯/己烷)，得到水合的產(chǎn)物(52mg，17％產(chǎn)率)。
1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ-0.3(3H，s)；0.00(3H，s)；0.79(9H，s)；1.6(1H，s)；2.43(1H，d)；2.77(1H，t)；5.0(1H，m)；5.47(1H，m)；6.26(1H，d)；7.3-7.5(5H，m).
將該水合產(chǎn)物溶于甲苯(20ml)并加入PTSA(0.05eq)。將該混合物加熱回流過夜。使該溶液冷卻，用飽和碳酸氫鈉溶液(2ml)、鹽水(2ml)洗滌，并經(jīng)硫酸鎂干燥。真空蒸發(fā)溶劑，獲得澄明的油，該油狀物經(jīng)放置結(jié)晶，得到純凈的產(chǎn)物(25mg，51％)。
1H NMR(250MHz.，CDCl3)δ5.83(1H，m)；6.6(1H，dd)；7.5(4H，m)；7.63(1H，m)；7.89(2H，m).
實(shí)施例24-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5-(丙-1-烯)-環(huán)戊-2-烯-1-酮(CTC-31)的合成 如上所述，按照本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)已知的文獻(xiàn)方法制備原料4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-環(huán)戊-2-烯-1-酮。在100ml的3頸園底燒瓶中，在氮?dú)夥障拢?78℃下，加入5ml四氫呋喃(THF)，然后加入15ml二異丙基氨基鋰*。往該反應(yīng)混合物中，緩慢加入6.36gm 4-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-環(huán)戊-2-烯-1-酮在10ml THF中的溶液并攪拌30分鐘，期間使溫度保持在-78℃下?？焖偌尤?.96gm丙醛并攪拌3小時(shí)。在攪拌下，用預(yù)冷的飽和氯化銨水溶液緩緩處理反應(yīng)混合物。該混合物用乙醚萃取(3×100ml)。合并的有機(jī)層用冷的0.1NHCl(2×100ml)和鹽水(2×100ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鈉干燥并減壓濃縮。濾過硅膠后，將該化合物加到吡啶(5ml)中并往其中加入乙酸酐(1.2gm)。往該反應(yīng)混合物中加入4-二甲基氨基吡啶(60mg)的吡啶(5ml)溶液。使該反應(yīng)混合物在60℃下加熱3小時(shí)后，冷卻到室溫。將反應(yīng)混合物傾入冷水(100ml)中并用乙醚萃取(2×100ml)。分離有機(jī)層并用0.1N HCl(2×75ml)和鹽水(2×100ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)無水硫酸鎂干燥并減壓濃縮。經(jīng)柱色譜純化，得到67mg油狀的標(biāo)題化合物。
IR(KBr，Cm-1)2957，2930，2887，2857，1712和1666.
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.38(2H，m)，6.65(1H，t，J＝7.72Hz)，6.40(1H，d，J＝5.92Hz)，5.38(1H，s)，2.0-2.5(2H，m)，1.13(3H，t，J＝7.52)，0.94(9H，s)，0.19(3H，s)，0.18(3H，s)Mass(M/z)253(M++1)，121(M+--OTBS)*二異丙基氨基鋰是2.0M庚烷/四氫呋喃/乙苯溶液，來自AldrichChemical Catalog No.36，179-8。
本說明書中使用的術(shù)語“OTBS”是指叔丁基二甲基甲硅烷氧基。
實(shí)施例34-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5-[甲烯基-(2-吡啶基)]環(huán)戊-2-烯-1-酮(CTC-32)的合成 采用上面實(shí)施例2中描述的方法制備該化合物，不同的是用吡啶-2-甲醛替代后來使用的丙醛。
IR(KBr，Cm-1)2954，2929，2887，2857，1701和16421H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.73(1H，d，J＝4.38Hz)，7.75(1H，t，J＝7.7Hz)，7.67(1H，d，J＝7.7Hz)，7.60(1H，d，J＝5.98Hz)，7.43(1H，s)，7.26(1H，m)，6.5(1H，d，J＝5.88Hz)，6.07(1H，s)，0.78(9H，s)，0.08(3H，s)，0.01(3H，s)Mass(M/z)302(M++1)
實(shí)施例44-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5-[甲烯基-(苯基)]-環(huán)戊-2-烯-1-酮(CTC-33)的合成 采用上面實(shí)施例2中描述的方法制備該化合物，不同的是用苯甲醛替代后來使用的丙醛。
IR(KBr，Cm-1)2953，2931，2854，2683，1695和1635.
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.82(2H，d，J＝1.76Hz)，7.60(1H，d，J＝7.76Hz)，7.35-7.48(4H，m)，6.52(1H，d，J＝6.0Hz)，5.75(1H，s)，0.81(9H，s)，0.09(3H，s)，0.08(3H，s).
Mass(M/z)301(M++1)，169(M+--OTBS)實(shí)施例54-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-5-(辛-1-烯)-環(huán)戊-2-烯-1-酮(CTC-34)的合成 采用上面實(shí)施例2中描述的方法制備該化合物，不同的是用辛醛替代后來使用的丙醛。
IR(KBr，Cm-1)2955，2926，2898，1713，16661H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.39(1H，d，J＝6.0Hz)，6.7(1H，t，J＝7.69)，6.40(1H，d，J＝6.0Hz)，5.37(1H，s)，2.3-2.5(2H，m)，1.45-1.56(2H，m)，1.2-1.4(8H，m)，0.92(9H，s)，0.87(3H，t)，0.19(3H，s)，0.16(3H，s).
Mass(M/z)323(M++1)，191(M+--OTBS)實(shí)施例6丁基二甲基甲硅烷氧基-5-(丁-1-烯)-環(huán)戊-2-烯-1-酮(CTC-45)的合成 采用上面實(shí)施例2中描述的方法制備該化合物，不同的是用丁醛替代后來使用的丙醛。
IR(KBr，Cm-1)2958，2931，2858，1711和16651H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.39(1H，m)，6.68(1H，t，J＝4.3Hz)，6.40(1H，d，J＝5.88Hz)，5.37(1H，s)，2.25-2.46(2H，m)，1.51-1.58(2H，m)，0.99(3H，t，J＝7.36Hz)0.93(9H，s)，0.19(3H，s)，0.16(3H，s)實(shí)施例7(a)6-異丙基亞甲基環(huán)戊二烯18的制備
往新鮮裂化的環(huán)戊二烯(8.5cm3，104mmol)和異丁醛(3.8cm3，41.6mmol)在試劑級甲醇42cm3中的溶液中加入吡咯烷(5.2cm3，62.4mmol)。加入吡咯烷后，該溶液變成黃色，在氮?dú)夥障?，將該混合物在室溫?cái)嚢?分鐘。一旦反應(yīng)完全，往該黃色溶液中加入冰醋酸(3.8cm3)。然后該反應(yīng)混合物用乙醚(180cm3)和水(180cm3)稀釋。水層進(jìn)一步用乙醚洗滌(2×100cm3)，合并的有機(jī)層用水(20cm3)和鹽水(20cm3)洗滌，干燥(MgSO4)并真空濃縮，得到黃色油狀的1(5.0g，100％)。
δH(300MHz；CDCl3；Me4Si)1.13(6H，d，J6.9，C(8)H)，2.95-3.07(1H，m，C(7)H)，6.18-6.26(1H，m，C(6)H)，6.44-6.55(4H，m，環(huán)質(zhì)子)；δC(75MHz；CDCl3；Me4Si) 23.1 CH3)，30.4，119.3，126.0，130.8，133.0，149.8(CH)，143.7(C).
(b)4-羥基-5-亞異丁基-環(huán)戊-2-烯酮19的制備 在通入穩(wěn)定的氧氣流下，攪拌1(1.0g，8.30mmol)與玫瑰紅(10mg，0.01mmol)在試劑級甲醇(200cm3)中的溶液直至溶液飽和。20分鐘后，在繼續(xù)通入氧氣流下，進(jìn)行照射(250W IR燈泡)。13小時(shí)后，停止照射并減壓除去甲醇。該粗產(chǎn)物經(jīng)快速柱色譜純化(SiO2；EtOAc∶石油醚，1∶1)，得到(110mg，9％)橙色油狀的和兩種幾何異構(gòu)體的混合物形式的2。
Vmax(膜)cm-1，3399br(OH)，2963，1701，1657(雙共軛的5-環(huán)酮2)；δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)1.04和1.11(6h，dd，J10.6，4.0和6.7，9.0(C(8)H)，1.84(1H，寬峰，-OH)，2.93-2.99，3.84-3.87(1H，m，C(7)H)，5.07，5.31(1H，s，C(4)H)，6.17，6.50(1H，d，J10.0和10.4，C(6)H)，6.35，6.40(1H，d，J6.0和6.1，C(2)H)，7.38，7.46(1H，dd，J2.5，6.0和2.3，6.0，C(3)H)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)22.1，22.3，(CH3)，25.9，28.7，70.4，72.3，136.5，138.1，145.7，149.7，156.8，157.9(CH)，134.3，134.4，195.2，195.3(C)；m/z(EI)152(M+，29％)，109(100).(c)叔丁基二甲基甲硅烷基衍生物(CTC-35)的制備 在0℃下，將2(0.45g，2.96mmol)在無水二氯甲烷(3.0cm3)中的溶液滴加到攪拌的叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.58g，3.80mmol)、三乙胺(1.4cm3，10.36mmol)和催化量的二乙基氨基吡啶(50mg，0.38mmol)在無水二氯甲烷(3.0cm3)中的溶液中。然后，在氮?dú)夥障?，使該反?yīng)混合物溫?zé)岬绞覝夭⑵鋽嚢柽^夜。70小時(shí)后，該反應(yīng)混合物用水(5cm3)處理，產(chǎn)物用二氯甲烷萃取(2×5cm3)。然后干燥(MgSO4)合并的有機(jī)層并真空濃縮。反應(yīng)混合物粗品經(jīng)快速柱色譜純化(SiO2；EtOAc∶石油醚，1∶10)，得到一種黃色油狀的幾何異構(gòu)體3(0.25g，32％)和另一種黃色油狀的異構(gòu)體(80mg，10％)。
Vmax(膜)/cm-12959，1712，1663，1111，1072(Si-O)；δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)0.10(6H，s，SiMe2)，0.91，(9H，s，SiMe3)，1.08(6H，dd，J6.6和8.5，C(8)H)，2.84-2.90(1H，m，C(7)H)，5.36(1H，s，C(4)H)，6.38(1H，dd，J6.1和1.1，C(2)H)，6.46(1H，d，J10.6，C(6)H)，7.37(1H，dd，J6.1和3.3，C(3)H)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)-3.6，22.0，25.7，(CH3)，28.3，70.7，136.2，144.7，157.9(CH)，18.0，134.4，195.2(C)；m/z(EI)266(M+，1％)，209(100).(實(shí)測值C，67.70；H，9.93.C15H26O2Si計(jì)算值C，67.62；H，9.84％)；Vmax(膜)/cm-12958，1704，1659，1122，1079(Si-O)；δH(300Mhz；CDCl3；Me4Si)0.14(6H，s，SiMe2)，0.93(9H，s，SiMe3)，1.01-1.06(6H，m，C(8)H)，3.79-3.91(1H，m，C(7)H)，5.13(1H，s，C(4)H)，5.97(1H，d，J9.9，C(6)H)，6.31(1H，d，J6.0，C(2)H)，7.28(1H，dd，J2.4和6.0，C(3)H)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)-4.1，22.4，25.7(CH3)，72.7，137.6，148.6，157.1(CH)，18.1，134.8，195.3(C)；m/z 266(M+，21％)，209(90).
δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)，0.88(3H，t，J6.9，烷基Me)，1.27-1.32(8H，m，脂族鏈)，1.52-1.59(2H，m，與丙烯型CH2相鄰的CH2)，2.20(3H，s，丙烯型Me)，2.52(2H，t，J7.5，丙烯型CH2)，6.45-6.52(4H，m，環(huán)質(zhì)子).
δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)14.1(CH3)，20.9(CH3)，22.7(CH2)，29.2(CH2)，29.6(CH2)，29.7(CH2)，31.8(CH2)，36.9(CH2)，120.4(CH)，120.7(CH)，130.4(CH)，130.7(CH)，142.5(C)，154.5(C).
(b)制備4-羥基-5-[1-甲基-亞辛-E/Z-基]-環(huán)戊-2-烯酮，2 向1(2.50g，13.1mmol)和玫瑰紅(30mg，0.03mmol)在試劑級甲醇(250cm3)內(nèi)的溶液中通15分鐘的穩(wěn)定的氧氣流以使該溶液飽和。用500W鹵素光源將該溶液照射12.5小時(shí)。將該反應(yīng)混合物過濾，并減壓除去甲醇。通過快速柱色譜(SiO2，EtOAc∶石油醚，3∶7)純化，獲得了2和3的混合物(0.87g，30％)，為棕色油狀物，和異構(gòu)產(chǎn)物單獨(dú)的3(0.19g，6％)，為棕色油狀物。
混合產(chǎn)物vmax(膜)/cm-13410寬峰，2926，2856，1698，1635；δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)0.88(3H，t，J6.6，烷基Me)，1.28-1.51(10H，m，烷基鏈)，2.08-2.12(2H，m，烯丙型CH2產(chǎn)物3)，2.29(3H，s烯丙型Me)，2.79(2H，t，J7.9，烯丙型CH2產(chǎn)物2)，3.30(1H，d，J6.4，C(5)H產(chǎn)物3)，4.97(1H，寬峰，C(4)H產(chǎn)物3)，4.73(1H，s)和5.18(1H，s)(3的末端烯烴質(zhì)子)6.28-6.35(2H，m，兩種產(chǎn)物的C(2)H)，7.31(1H，dd，J2.6和6.0，C(3)H產(chǎn)物2)，7.63(1H，dd，J2.4和5.7，C(3)H產(chǎn)物3)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)產(chǎn)物2；133.2，137.9，155.0(CH)，131.2，156.5，195.0(C)；產(chǎn)物3；14.1(CH3)，22.6，27.2，29.2，31.8，37.8，114.6(CH2)，56.5，71.3，135.6，163.3(CH)，145.3，206.8(C)；m/z(EI)222(M+，20％)和151(45)；HRMS實(shí)測值222.16202，C11H22O2的計(jì)算值222.16199。單一產(chǎn)物Vmax(膜)/cm-13419寬峰，2927，2856，1704；δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)0.88(3H，t，J 6.6，烷基Me)，1.28-1.50(10H，m，烷基鏈)，2.06-2.12(2H，m，丙烯型CH2)，3.30(1H，d，J6.5，C(5)H)，4.97(1H，寬峰，C(4)H)，4.73和5.18(2H，s，末端烯烴質(zhì)子)，6.34(1H，d，J5.8，C(2)H)，7.63(1H，dd，J2.4和5.7，C(3)H)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)14.1(CH3)，22.6，27.2，29.2，31.8，37.8，114.6(CH2)，56.5，71.3，135.6，163.3(CH)，145.3，206.8(C)；m/z(EI)222(M，12％)；HRMS實(shí)測值222.16158 C11H22O2的計(jì)算值222.16199。
(c)制備2和3的叔丁基衍生物 在0℃，向醇(338mg，1.52mmol)在無水二氯甲烷(2cm3)內(nèi)的溶液中加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.3g，1.98mmol)、二甲基氨基吡啶(0.02g，0.20mmol)和三乙胺(0.75cm3，5.32mmol)在二氯甲烷(3cm3)中的溶液。在氮?dú)夥障聦⒃撊芤簻責(zé)嶂潦覝亍?0小時(shí)后，在0℃向該反應(yīng)混合物中再滴加一部分在二氯甲烷(1cm3)中的叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.11g，0.76mmol)和三乙胺(0.3cm3，2.1mmol)，溫?zé)嶂潦覝亍?4小時(shí)后，用水(5cm3)中止該反應(yīng)，用二氯甲烷(3×5cm3)萃取產(chǎn)物，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)。通過快速柱色譜(SiO2；0.6∶10 EtOAc∶石油醚，然后是0.75∶10 EtOAc∶石油醚)純化產(chǎn)物，獲得了4(37.6mg，7.3％)，為黃色油狀物，是一種幾何異構(gòu)體。
vmax(膜)/cm-12929，2857，1698，1643；δH(400MHz；CDCl3；Me4Si)0.06(3H，s，SiMe)，0.11(3H，s，SiMe)，0.89(9H，s，tBuSi)，1.24-1.48(13H，m，脂族H’s)，2.00(3H，s，烯丙型Me)，2.75-2.80(2H，m，烯丙型CH2)，5.29(1H，s，C(4)H)，6.26(1H，d，J6.0，C(2)H)，7.23(1H，dd，J2.5和6.0，C(3)H)；δC(100MHz；CDCl3；Me4Si)-3.4，-2.8，14.4，22.1，26.1(CH3)，23.0，28.6，29.5，30.1，32.2，33.6(CH2)，73.1，137.9，155.2，(CH)，18.4，131.9，155.5，195.4(C)；m/z(EI)336(M+，29％)，279(87，失去tBu)本發(fā)明化合物的活性優(yōu)選的本發(fā)明化合物在下文實(shí)施例9-14描述的一個(gè)或多個(gè)測定中有活性?？扇〉氖牵摶钚源笥诃h(huán)戊-2-烯-1-酮(可測定以進(jìn)行比較)的活性。
一些本發(fā)明化合物可有利地防止與多種前列腺素有關(guān)的降低血壓的作用。實(shí)施例15中描述了關(guān)于這方面的測定。
實(shí)施例9本發(fā)明化合物對轉(zhuǎn)錄因子HSF和NF-κB的反應(yīng)性的影響方法按照A.Rossi等人(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94746-750，1997)描述的方法，將人成淋巴Jurkat T細(xì)胞在補(bǔ)充10％胎牛血清(FCS，HycloneEurope Ltd，UK)、2mM谷酰胺和抗生素的RPM1 1640培養(yǎng)基(GIBCO BRL，Gaithersburg，MD)中于37℃和5％CO2氣氛下生長。測試化合物作為100％乙醇貯備液(100mM)或者在DMSO中(100mM)貯存，并在使用時(shí)用培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度。用不同濃度的測試化合物將細(xì)胞處理1小時(shí)，然后用12-O-十四烷?；鸩ù?13-乙酸酯(TPA，25ng/ml)刺激，該化合物是NF-κB的強(qiáng)誘導(dǎo)劑。對照細(xì)胞接受等量的對照稀釋劑。3小時(shí)后，制備全細(xì)胞提取物，并按照A.Rossi等人(Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94∶746-750，1997)描述的方法，通過EMSA(電泳移動(dòng)率變化測定)分析DNA結(jié)合活性以檢測HSF或NF-κB激活。
分別用對p65(Rel A)或HSF-1、NF-κB和HSF有特異性的多克隆抗體通過免疫反應(yīng)法證實(shí)蛋白-DNA復(fù)合物的特異性。通過分子動(dòng)力學(xué)磷圖象(MDP)分析法定量評價(jià)NF-κB-和HSF-DNA復(fù)合物的形成，并按照A.Rossi等人(J.Biol.Chem.27316446-16452，1998)描述的方法以任意單位表示。關(guān)于上文確定的化合物CTC-31、CTC-32、CTC-33、CTC-34、CTC-35、CTC-36和CTC-45的代表性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如附

圖1(b)、2(b)、3(b)、4(b)、5(b)、6和7(b)所示。這些結(jié)果表明，所有這些較后的化合物都是NF-κB的強(qiáng)效抑制劑。
實(shí)施例10CTC-35對1型單純性皰疹病毒復(fù)制的影響方法將人Hep-2喉癌細(xì)胞和猴子VERO細(xì)胞在實(shí)施例9所述的生長T細(xì)胞所用的條件下于37℃生長。按照F.Denizot和R.Lang(J.Immunol.Methods89271-277，1986)描述的方法，通過染色排除技術(shù)或通過3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物(MTT，Sigma Chemical Co.)到MTT甲簪測定法來確定細(xì)胞存活力。以10個(gè)蝕斑形成單位(PFU)/細(xì)胞的感染多重性使用在VERO細(xì)胞中生長的1型單純性皰疹病毒(HSV-1)F株。用HSV-1將融合的Hep-2細(xì)胞單層在37℃感染1小時(shí)。然后除去病毒接種物，并將細(xì)胞在含有2％FCS的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。吸附1小時(shí)后，向培養(yǎng)物中加入不同濃度的CTC-35，并在實(shí)驗(yàn)期間在培養(yǎng)基中保持。對照培養(yǎng)基含有相同濃度的不影響細(xì)胞代謝或病毒復(fù)制的乙醇稀釋劑。感染24小時(shí)后，按照F.Pica等人(Antiviral Res.20193-208，1993)描述的方法，在96孔組織培養(yǎng)平板(對于每個(gè)樣本有6個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度有8個(gè)孔)中的融合的VERO細(xì)胞單層上通過細(xì)胞病變作用50％(CPE50％)測定HSV-1病毒效價(jià)。按照E.Rodriguez-Boulan(Methods Enzymol.98486-501，1983)描述的方法，通過Reed和Muensch的插值方法測定給出50％細(xì)胞病變作用的稀釋度。代表性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如附圖8所示，并且表明CTC-35是HSV-1病毒復(fù)制的強(qiáng)效抑制劑，ID50＝1.5μm(ID50＝50％抑制劑量/濃度)。
實(shí)施例11本發(fā)明化合物對仙臺(tái)病毒的作用方法將猴子腎37RC細(xì)胞在實(shí)施例10描述的T細(xì)胞所用的條件下于37℃生長。將副流感仙臺(tái)病毒(SV)在10天大小的胚胎卵的尿囊腔中生長。病毒效價(jià)以血凝集單位(HAU)/ml表示；如C.Amici等人(J.Virol. 686890-6899，1994)所述，按照使用人0Rh+紅細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行血凝集滴定。用SV病毒(5HAU/105個(gè)細(xì)胞)將融合的單層37RC細(xì)胞在37℃感染1小時(shí)，然后用不同濃度的測試化合物處理。感染24小時(shí)后，通過HAU滴定法在感染細(xì)胞上清液中測定病毒產(chǎn)率。關(guān)于上文確定的化合物CTC-31、CTC-32、CTC-33、CTC-34、CTC-35、和CTC-45的代表性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如附圖1(a)、2(a)、3(a)、4(a)、5(a)、7(a)所示。這些結(jié)果表明，所有這些較后的化合物都是仙臺(tái)病毒復(fù)制的強(qiáng)效抑制劑。
關(guān)于測試化合物的在24小時(shí)的ID50(50％抑制劑量/濃度)值和TD100(通過顯微鏡憑視力檢查所確定的對未感染細(xì)胞有100％毒性的測試化合物的劑量或濃度)在下面給出，并且表明測試化合物在其對37RC細(xì)胞沒有毒性的濃度下具有抗病毒作用。
化合物 ID50/μMTD100/μMCTC-31 150CTC-32 210CTC-33 1.5 50CTC-34 350CTC-35 0.4 50CTC-45 350實(shí)施例12CTC-35對流感病毒感染的作用將人肺腺癌A549細(xì)胞在補(bǔ)充10％胎牛血清(FCS，Gibco)和抗生素的RPMI-1640培養(yǎng)基中于37℃生長。將流感A病毒A/WSN/33(H1N1)(WSN病毒)在10天大小的胚胎卵的尿囊腔中生長。按照標(biāo)準(zhǔn)方法通過血凝集滴定測定病毒效價(jià)(Pica F，Palamara AT，Rossi A，De Marco A，Amici C和Santoro MGΔ12-前列腺素J2是流感A病毒復(fù)制的強(qiáng)效抑制劑。Antimicrob.AgentsChanother.，44200-204，2000)。用WSN病毒(10HAU/105個(gè)細(xì)胞)將A549單層在37℃感染1小時(shí)。然后除去病毒接種物，并用不同濃度的CTC35或乙醇稀釋劑處理細(xì)胞。感染(p.i.)后24和48小時(shí)，測定病毒產(chǎn)率，并以HAU/ml表示(每個(gè)點(diǎn)代表一式兩份樣本的平均值)。這些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如附圖9所示，并且表明CTC-35是流感病毒感染的強(qiáng)效抑制劑，暴露24小時(shí)時(shí)ID50(50％抑制劑量/濃度為)5μM。
實(shí)施例13MTT測定通過3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑溴化物(MTT)測定法測定細(xì)胞存活力。用不同濃度的CTC35或乙醇稀釋劑將未感染的A549(7.5×104個(gè)細(xì)胞/孔，在96孔平板中)或37RC細(xì)胞(2.5×104個(gè)細(xì)胞/孔，在96孔平板中)處理24小時(shí)。然后向單層中加入10ml 0.5％MTT在PBS中的溶液，并將該混合物在37℃培養(yǎng)2小時(shí)。通過加入100μl含有10％Triton X-100的酸性異丙醇來從細(xì)胞中提取還原的MTT(甲簪)，并在ELISA微量滴定板讀數(shù)計(jì)上在兩個(gè)不同的波長(540和690nm)測定甲簪吸收度。
該一式四份樣本的結(jié)果如附圖10所示，并且表明在對細(xì)胞沒有毒性的CTC-35濃度下發(fā)生了如實(shí)施例11和12所示的抗病毒活性，因?yàn)榻?jīng)測定，對于A549細(xì)胞，LD50(致死劑量/濃度50％)為90μM，對于37RC細(xì)胞，是30μM，因此，對于兩種化合物，LD50都顯著地高于ID50(50％抑制劑量/濃度)。
免疫細(xì)胞激活中的關(guān)鍵步驟是轉(zhuǎn)錄因子細(xì)胞核因子κB(NF-κB)(16)。NF-κB調(diào)控一系列促炎性基因例如IL-1、IL-2、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1、和E-選擇蛋白以及誘導(dǎo)形式的一氧化氮合酶(iNOS)和環(huán)加氧酶II的轉(zhuǎn)錄。
因此，NF-κB的激活在炎性級聯(lián)中占有重要地位?？稍谛∈缶奘杉?xì)胞模型中測定測試化合物對iNOS誘導(dǎo)的影響。
可在96-孔平板中用γ-干擾素和0.1U/ml細(xì)菌脂多糖(LPS)刺激細(xì)胞系RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞(17)。iNOS的誘導(dǎo)可通過使用格里斯試劑確定在上清液中形成的亞硝酸鹽(NO2-)水平來測定。
可以確定化合物X對于亞硝酸鹽形成是否有抑制作用(優(yōu)選在亞微摩爾濃度)?？墒褂锰烊画h(huán)戊烯酮前列腺素PG-J2來進(jìn)行比較(可以比較所獲得的PGJ2和測試化合物的IC50值)。
如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明γ-干擾素和LPS處理誘導(dǎo)促炎性iNOS基因的作用被化合物X抑制了，則最可能的解釋是該測試化合物抑制了NF-κB路徑的激活。
將雄性Wistar大鼠麻醉，并可以靜脈內(nèi)輸注測試化合物?？蓮墓蓜?dòng)脈記錄血壓和心搏率。
劑量為30μg/kg/分鐘的前列腺素A1和E1引起血壓的劑量依賴性下降?？梢源_定不同劑量的測試化合物是否影響血壓?？蓛H使用溶劑作為比較。
如果化合物不引起血壓顯著改變，則可以證明其沒有天然環(huán)戊烯酮前列腺素所具有的對平滑肌的一般作用。一般注釋本發(fā)明先前的描述只是其舉例說明，并且應(yīng)當(dāng)理解，可在不背離由權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的情況下對其作各種改變和改進(jìn)。
當(dāng)描述與本發(fā)明特定方面有關(guān)的優(yōu)選或任選的特征時(shí)，應(yīng)當(dāng)認(rèn)為，除非本文另外指出，否則它們是對本發(fā)明的其它方面在細(xì)節(jié)上作必要的修改。
本文引用的所有文件都引入本發(fā)明以作參考，就象在所述文件中提及的任何引用一樣。
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權(quán)利要求
1.一種式I化合物 其中R1是H、或取代或未取代的含有1-3個(gè)碳原子的烷基或烯基；R2是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基或芳炔基，所述基團(tuán)在碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子，并含有1-12個(gè)碳原子；R3是取代或未取代的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基或芳炔基，所述基團(tuán)在碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子，并含有1-12個(gè)碳原子，或者是甲硅烷基；R4是H、或含有1-3個(gè)碳原子的烷基；X和Y獨(dú)立地為H、鹵素、含有1-3個(gè)碳原子的烷基；且相對于環(huán)戊烯環(huán)上的羰基碳，R2可以是順式或反式。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中R2和/或R3被至少一個(gè)＝O、-OR5、-COOR5和/或鹵素原子或基團(tuán)取代，其中R5是氫、或含有最高達(dá)4個(gè)碳原子的烷基。
3.一種權(quán)利要求2的化合物，其中R5是氫或甲基。
4.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R2和/或R3在其碳骨架中包含氧、氮或硫原子。
5.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R1是氫或未取代的烷基。
6.一種權(quán)利要求5的化合物，其中R1是氫或甲基。
7.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R4是氫或甲基。
8.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R2和/或R3是取代或未取代的直鏈、支鏈和/或環(huán)狀烷基、烯基、或炔基。
9.一種權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的化合物，其中R2是取代或未取代的雜環(huán)基、芳烷基或芳基。
10.一種權(quán)利要求9的化合物，其中R2是取代或未取代的苯基、噻吩基或吡啶基。
11.一種權(quán)利要求10的化合物，其中R2是未取代的噻吩基、吡啶基、苯基、二甲基苯基、鹵代苯基或烷氧基苯基。
12.一種權(quán)利要求11的化合物，其中R2是氟苯基或甲氧基苯基。
13.一種權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物，其中R2是包含最高達(dá)10、9、8、7、6、5、4、或3個(gè)碳原子的取代或未取代的烷基或烯基。
14.一種權(quán)利要求13的化合物，其中R2含有7、3或2個(gè)碳原子，并且是烷基。
15.一種權(quán)利要求14的化合物，其中R2是C7H15、異丙基、或乙基。
16.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3是取代或未取代的烷基或芳烷基。
17.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3包含羧基和/或羰基。
18.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3是取代或未取代的直鏈、支鏈和/或環(huán)狀烷基，當(dāng)包含或者是環(huán)烷基時(shí)，其含有5、6、7、或8個(gè)碳原子，當(dāng)是直鏈或支鏈烷基時(shí)，其含有5個(gè)或5個(gè)以下碳原子。
19.一種權(quán)利要求16的化合物，其中R3是含有6、7或8個(gè)碳原子的取代或未取代的芳烷基。
20.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3包括環(huán)己基或苯基。
21.一種權(quán)利要求1-17任一項(xiàng)的化合物，其中R3是琥珀?；蚱溲苌鶊F(tuán)。
22.一種權(quán)利要求22的化合物，其中R3是2-甲基琥珀?；?、2-羧基苯基羰基、或2-羧基環(huán)己基羰基。
23.一種權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)的化合物，其中R3是三(有機(jī)基團(tuán))甲硅烷基。
24.一種權(quán)利要求23的化合物，其中每個(gè)有機(jī)基團(tuán)可以是取代或未取代的烷基、芳基和/或芳烷基，在其碳骨架中任選包含至少一個(gè)雜原子。
25.一種權(quán)利要求24的化合物，其中每個(gè)烷基含有1-5個(gè)碳原子。
26.一種權(quán)利要求24的化合物，其中每個(gè)芳基或芳烷基分別含有至少6或7個(gè)碳原子。
27.一種權(quán)利要求26的化合物，其中每個(gè)芳基是苯基，且每個(gè)芳烷基是芐基。
28.一種權(quán)利要求23-27任一項(xiàng)的化合物，其中至少一個(gè)所述有機(jī)基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)＝O、-OR5、-COOR5和/或鹵素(優(yōu)選氟)基團(tuán)或原子取代，其中R5是氫或含有最高達(dá)4個(gè)碳原子的烷基。
29.一種前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物，其中R3是叔丁基二甲基甲硅烷基。
30.一種在一個(gè)或多個(gè)下述方面有活性的前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物(a)激活HSF(b)抑制NF-κB(c)抑制HSV-1復(fù)制(d)抑制仙臺(tái)病毒復(fù)制(e)抑制流感病毒。
31.一種在一個(gè)或多個(gè)a)、b)、c)、d)或e)方面具有大于環(huán)戊-2-烯-1-酮的活性的權(quán)利要求30的化合物。
32.一種用于醫(yī)藥的前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的化合物。
33.一種用于治療病毒介導(dǎo)的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
34.一種用于治療細(xì)菌介導(dǎo)的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
35.一種用于治療由放射引起的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
36.一種用于治療炎性疾病的權(quán)利要求32的化合物。
37.一種用于治療免疫系統(tǒng)疾病的權(quán)利要求32的化合物。
38.一種用于治療局部缺血的權(quán)利要求32的化合物。
39.一種用于治療動(dòng)脈硬化的權(quán)利要求32的化合物。
40.一種用于治療涉及細(xì)胞增殖的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
41.一種權(quán)利要求40的化合物，其中所述病癥是癌癥。
42.一種用于治療涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
43.一種用于治療糖尿病的權(quán)利要求32的化合物。
44.一種用于治療影響水生生物的病癥的權(quán)利要求32的化合物。
45.一種用于治療氧化性應(yīng)力、用作抗氧化劑、用于對抗衰老、或治療變性疾病的權(quán)利要求32的化合物。
46.一種權(quán)利要求45的化合物，其中所述變性疾病是神經(jīng)變性，優(yōu)選BSE、新的CJD變型或阿爾茨海默氏病。
47.一種用于治療燒傷、涉及鈣損失或不足的病癥、或用于促進(jìn)傷口愈合的權(quán)利要求32的化合物。
48.權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物作為用于分析一種或多種下列指標(biāo)的研究工具的應(yīng)用HSF、NF-κB、熱激反應(yīng)、病毒復(fù)制、病毒介導(dǎo)的病癥、細(xì)菌介導(dǎo)的病癥、放射(例如UV-放射)引起的病癥、炎性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、局部缺血、動(dòng)脈硬化、涉及細(xì)胞增殖的病癥、涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥、和糖尿病。
49.一種含有權(quán)利要求1-47任一項(xiàng)的化合物，并任選含有可藥用載體的藥物組合物。
50.一種用于醫(yī)藥，優(yōu)選用于治療在權(quán)利要求33-47任一項(xiàng)中列舉的病癥的權(quán)利要求49的組合物。
51.一種包含權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物的水生生物的飼料。
52.一種包含權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物的水生環(huán)境(例如水產(chǎn)養(yǎng)殖)。
53.權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療下列病癥的藥物中的應(yīng)用病毒介導(dǎo)的病癥、細(xì)菌介導(dǎo)的病癥、放射引起的病癥、炎性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、局部缺血、動(dòng)脈硬化、涉及細(xì)胞增殖的病癥、癌癥、涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥、糖尿病、氧化性應(yīng)力、變性疾病、燒傷、涉及鈣損失或不足的病癥、或影響水生生物的病癥。
54.權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物在制備用作抗氧化劑、用于促進(jìn)傷口愈合或用于對抗衰老影響的藥物中的應(yīng)用。
55.權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療神經(jīng)變性疾病，優(yōu)選BSE、新的CJD變型或阿爾茨海默氏病的藥物中的應(yīng)用。
56.一種治療下列疾病的方法病毒介導(dǎo)的病癥、細(xì)菌介導(dǎo)的病癥、放射引起的病癥、炎性疾病、免疫系統(tǒng)疾病、局部缺血、動(dòng)脈硬化、涉及細(xì)胞增殖的病癥、癌癥、涉及損傷或殺死細(xì)胞的病癥、糖尿病、氧化性應(yīng)力、變性疾病、衰老影響、燒傷、涉及鈣損失或不足的病癥、或影響水生生物的病癥，包括給患有一種或多種所述病癥的個(gè)體施用其量能有效地至少改善至少一種所述病癥的權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求49的組合物。
57.一種促進(jìn)傷口愈合的方法，包括給受傷的個(gè)體施用其量能有效地促進(jìn)傷口愈合的權(quán)利要求1-31任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求49的組合物。
58.一種權(quán)利要求56的方法，其中所述變性疾病是神經(jīng)變性疾病，優(yōu)選BSE、新的CJD變型或阿爾茨海默氏病。
59.制備權(quán)利要求1-47任一項(xiàng)的化合物的方法，包括將式II化合物 與甲硅烷基氯、琥珀酸酐、或琥珀酸酐衍生物反應(yīng)，優(yōu)選在堿存在下反應(yīng)，更優(yōu)選還在烷基氨基吡啶存在下反應(yīng)，其中R1和R2如權(quán)利要求1-44任一項(xiàng)所定義，甲硅烷基氯中的甲硅烷基優(yōu)選如權(quán)利要求23-29任一項(xiàng)所定義，并選擇琥珀酸酐衍生物以提供所需的基團(tuán)R3。
60.制備式III化合物的方法 包括下述步驟(a)將式IV化合物 與甲硅烷基氯、琥珀酸酐、或琥珀酸酐衍生物反應(yīng)，優(yōu)選在堿存在下反應(yīng)，更優(yōu)選還在烷基氨基吡啶存在下反應(yīng)，以制得式V化合物 和(b)將式VI化合物 與R2CHO在堿存在下反應(yīng)，以生成式VII化合物 其中當(dāng)步驟(a)在步驟(b)之前進(jìn)行時(shí)，Z是氫，Q是OR3，且Z、Q和環(huán)戊烯環(huán)之間的鍵是單鍵；當(dāng)步驟(b)在步驟(a)之前進(jìn)行時(shí)，Q是氧原子或羥基，Z是CR2，且CR2中的碳原子通過雙鍵與環(huán)戊烯環(huán)鍵合；當(dāng)Q是氧時(shí)，氧原子與環(huán)戊烯環(huán)之間的鍵是雙鍵，并且在進(jìn)行步驟(a)之前將其還原成羥基；X、Y、R2、R3和甲硅烷基氯中的甲硅烷基如權(quán)利要求1-29任一項(xiàng)所定義；并選擇琥珀酸酐衍生物以提供所需的基團(tuán)R3。
61.一種通過或者可通過權(quán)利要求59或60的方法制得的優(yōu)選用于醫(yī)藥的化合物。
62.一種含有權(quán)利要求61的化合物和可藥用載體的組合物。
63.一種具有在說明書中給出的式CTC-35的權(quán)利要求1-47任一項(xiàng)的化合物。
64.一種權(quán)利要求49、50、51和60任一項(xiàng)的組合物，其中所述化合物具有在說明書中給出的式CTC-35。
65.一種包含權(quán)利要求1-31、61和63任一項(xiàng)的化合物和適當(dāng)載體的植物治療組合物。
66.一種權(quán)利要求65任一項(xiàng)的組合物，其中選擇載體以可通過噴霧施用組合物。
67.一種治療植物的方法，包括將植物與權(quán)利要求1-31、61和63任一項(xiàng)的化合物或者權(quán)利要求65或66的組合物接觸，以治療或預(yù)防植物中的病癥。
68.一種權(quán)利要求67的方法，其中所述病癥是病毒性疾病。
全文摘要
一種具有環(huán)戊－2－烯－1－酮環(huán)和直接與該環(huán)連接的雙鍵(除了環(huán)戊－2－烯－1－酮環(huán)的C=O鍵)的化合物可用于治療多種病癥，包括病毒性疾病、癌癥、炎癥等。
文檔編號A61P31/04GK1409715SQ00817160
公開日2003年4月9日 申請日期2000年12月18日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月16日
發(fā)明者斯坦利·邁克爾·羅伯茨, 瑪麗亞·加布里埃拉·桑托羅, 埃里克·埃米爾·安格德 申請人:查特豪斯治療有限公司