專利名稱：5－氰基－2－氨基嘧啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及取代的5-氰基-2-氨基嘧啶，涉及它們的制備方法，涉及包含它們的藥用組合物和它們?cè)卺t(yī)學(xué)中的用途。
血管發(fā)生，現(xiàn)存血管的毛細(xì)血管生長(zhǎng)，為正常胚胎發(fā)育、組織修復(fù)和一些女性生殖功能方面的必需過程。它也與幾種包括實(shí)體瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、牛皮癬和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及糖尿病性視網(wǎng)膜病和與年齡有關(guān)的黃斑變性在內(nèi)的病理性疾病的發(fā)展有關(guān)[Folkman，NatureMedicine，(1995)1，27-310]。
幾種生長(zhǎng)因子已顯示通過改變血管通透性介導(dǎo)血管發(fā)生，包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子[VEGF；G.Breier等，Trends in Cell Biology，(1996)，6，454-6]、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)以及酸性和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(a和b FGF)。
以二聚體形式存在的VEGF為一種結(jié)合于僅在增殖內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的兩種與跨膜酪氨酸激酶有關(guān)的受體的配體，所述兩種受體為KDR(小鼠Flk-1)也稱作VEGFR-2，和Flt-1也稱作VEGFR-1。VEGF結(jié)合于KDR/Flk和Flt導(dǎo)致受體二聚體形成、激酶活化、受體自身磷酸化和胞內(nèi)底物磷酸化。類似的一系列事件在配體占據(jù)由a FGF或bFGF更廣泛表達(dá)的與酪氨酸激酶有關(guān)的FGFr受體后發(fā)生。因此，受體酪氨酸激酶活性起始細(xì)胞信號(hào)途徑導(dǎo)致增殖。
用抗體拮抗VEGF完全抑制人橫紋肌肉瘤A673 speroids在無胸腺小鼠上的新血管形成和生長(zhǎng)[Borgstrom等，Cancer Res.，(1996)，564032-4039]。干擾素a和b抑制bFGF基因表達(dá)可抑制小鼠毛細(xì)血管密度，導(dǎo)致胰腺眼孔腫瘤(pancreatic eyelet tumour)抑制[Folkman等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1996)，93，2002和Singh等，Proc.Natl.Acad.Sci.(1995)，92，10457]。與激酶例如PDGF和EGFr有關(guān)的其它受體在介導(dǎo)血管發(fā)生上也可具有一些作用。
目前我們發(fā)現(xiàn)一系列為有效和選擇性的涉及血管發(fā)生的受體酪氨酸激酶，特別是KDR激酶和/或FGFr激酶的抑制劑的取代的5-氰基-2-氨基嘧啶。選擇性抑制這些激酶能夠期待具有有益的作用且因此所述化合物用于預(yù)防和治療與如下文描述的血管發(fā)生有關(guān)的病癥。
因此，按照本發(fā)明的一個(gè)方面，提供式(1)化合物及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物， 其中Ar為任選取代的芳族或雜芳族基團(tuán)；R1為氫原子或直形或分支鏈的烷基；R2為-X1-R3基團(tuán)，其中X1為直接鍵或連接原子或基團(tuán)，且R3為任選取代的脂族、脂環(huán)族、雜脂族、雜脂環(huán)族、芳族或雜芳族基團(tuán)。
當(dāng)式(1)化合物中的Ar為芳族基團(tuán)時(shí)，它可以例如為任選取代的單環(huán)或雙環(huán)稠環(huán)C6-12芳族基團(tuán)，例如任選取代的苯基、1-或2-萘基、1-或2-四氫萘基、2，3-二氫化茚基或茚基。
當(dāng)本發(fā)明化合物中的基團(tuán)Ar為雜芳族基團(tuán)時(shí)，它可以為任選取代的C1-13雜芳族基團(tuán)，例如包含例如一、二、三或四個(gè)選自氧、硫或氮原子的雜原子的C1-9雜芳族基團(tuán)。
通常，雜芳族基團(tuán)可以為例如任選取代的單環(huán)雜芳族、或者雙環(huán)或三環(huán)稠環(huán)的雜芳族基團(tuán)。單環(huán)雜芳族基團(tuán)包括例如包含一、二、三或四個(gè)選自氧、硫或氮原子的雜原子的5-或6-元雜芳族基團(tuán)。雙環(huán)雜芳族基團(tuán)包括例如包含一、二或更多個(gè)選自氧、硫或氮原子的雜原子的9-至13-元稠環(huán)的雜芳族基團(tuán)。三環(huán)雜芳族基團(tuán)包括例如包含一、二或更多個(gè)選自氧、硫或氮原子的雜原子的10-至14-元稠環(huán)的雜芳族基團(tuán)。所述雜芳族基團(tuán)通過式(1)的任何一個(gè)環(huán)碳原子連接于式(1)化合物的剩余部分。
由Ar表示的雜芳族基團(tuán)的具體實(shí)例包括任選取代的吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，3，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、1，2，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、[2，3-二氫]苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、異苯并噻吩基、吲哚基、異吲哚基、3H-吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹嗪基、喹唑啉基、2，3-二氮雜萘基、喹喔啉基、噌啉基、1，5-二氮雜萘基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、異喹啉基、四唑基、5，6，7，8-四氫喹啉基、5，6，7，8-四氫異喹啉基、嘌呤基、蝶啶基、咔唑基、呫噸基或苯并喹啉基。
可存在于由Ar表示的芳族或雜芳族基團(tuán)上的任選取代基包括一、二、三或更多個(gè)取代基，每一個(gè)取代基由一個(gè)原子或基團(tuán)-R4或-Alk(R4)m表示，其中R4為鹵素原子、或氨基(-NH2)、取代氨基、硝基、氰基、羥基(-OH)、取代羥基、甲?；?、羧基(-CO2H)、酯化羧基、硫羥基(-SH)、取代硫羥基、-COR5[其中R5為-Alk(R4)m、芳基或雜芳基]、-CSR5、-SO3H、-SO2R5、-SO2NH2、-SO2NHR5、-SO2N[R5]2、-CONH2、-CSNH2、-CONHR5、-CSNHR5、-CON[R5]2、-CSN[R5]2、-NHSO2H、-NHSO2R5、-N[SO2R5]2、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR5、-NHSO2N[R5]2、-NHCOR5、-NHCONH2、-NHCONHR5、-NHCON[R5]2、-NHCSR5、-NHC(O)OR5、或任選取代的脂環(huán)族、雜脂環(huán)族、芳基或雜芳基；Alk為直形或分支的C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基或C2-6亞炔基鏈，該鏈任選由一、二或三個(gè)-O-或-S-原子或選自-S(O)-、-S(O)2-或-N(R6)-(其中R6為氫原子或直形或分支鏈的C1-6烷基)的基團(tuán)間隔；且m為0或1、2或3的整數(shù)。
當(dāng)基團(tuán)-Alk(R4)m中m為1、2或3的整數(shù)時(shí)，應(yīng)理解一個(gè)或多個(gè)取代基R4可存在于-Alk中的任何適宜的碳原子上。當(dāng)存在一個(gè)以上的R4取代基時(shí)，這些基團(tuán)可為相同或不同的且合適時(shí)可存在于-A1k或R4的相同或不同的原子上。因此，例如-Alk(R4)m可表示-CH(R4)2基團(tuán)，例如-CH(OH)Ar1基團(tuán)，其中Ar1為如下定義的芳基或雜芳基。很明顯，當(dāng)m為0時(shí)且不存在取代基R4時(shí)，由Alk表示的亞烷基、亞鏈烯基或亞炔基鏈變成烷基、鏈烯基或炔基。
當(dāng)R4為取代氨基時(shí)，它可以為例如基團(tuán)-NHR5[其中R5如上定義]或基團(tuán)-N[R5]2，其中每一個(gè)R5基團(tuán)為相同或不同的。
當(dāng)R4為鹵素原子時(shí)，它可以為例如氟、氯、溴或碘原子。
當(dāng)R4為取代羥基或取代硫羥基時(shí)，它可以分別為例如基團(tuán)-OR5或-SR5。
由基團(tuán)R4表示的酯化羧基包括式-CO2Alk1的基團(tuán)，其中Alk1為直形或分支的、任選取代的C1-8烷基例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，C6-12芳基C1-8烷基例如任選取代的芐基、苯基乙基、苯基丙基、1-萘基甲基或2-萘基甲基，C6-12芳基例如任選取代的苯基、1-萘基或2-萘基，C6-12芳氧基C1-8烷基例如任選取代的苯氧基甲基、苯氧基乙基、1-萘氧基甲基或2-萘氧基甲基，任選取代的C1-8鏈烷酰氧基C1-8烷基例如新戊酰氧基甲基、丙酰氧基乙基或丙酰氧基丙基，或C6-12芳酰氧基C1-8烷基例如任選取代的苯甲酰氧基乙基或苯甲?；?氧基丙基。存在于Alk1基團(tuán)上的任選取代基包括如上描述的R4取代基。
當(dāng)Alk存在于取代基中或作為取代基時(shí)，它可以例如為亞甲基、亞乙基、亞正丙基、亞異丙基、亞正丁基、亞異丁基、亞仲丁基、亞叔丁基、亞乙烯基、2-亞丙烯基、2-亞丁烯基、3-亞丁烯基、亞乙炔基、2-亞丙炔基、2-亞丁炔基或3-亞丁炔基鏈，任選由一、二或三個(gè)-O-或-S-原子或-S(O)-、-S(O)2-或-N(R6)-(其中R6為氫原子或直形或分支的C1-6烷基)的基團(tuán)間隔。
當(dāng)R4作為任選取代的脂環(huán)基存在于式(1)化合物中時(shí)，它可以為任選取代的C3-10脂環(huán)基。具體實(shí)例包括任選取代的C3-10環(huán)烷基，例如C3-7環(huán)烷基，或C3-10環(huán)烯基，例如C3-7環(huán)烯基。
由R4表示的雜脂環(huán)基包括正如對(duì)R4描述的脂族基或脂環(huán)基但每一個(gè)基團(tuán)另外包含一、二、三或四個(gè)雜原子或含有雜原子的基團(tuán)，選自-O-或-S-原子或者-N(R6)-、-C(O)、-C(S)-、-S(O)-或-S(O2)-基團(tuán)。
R4脂環(huán)和雜脂環(huán)基的具體實(shí)例包括任選取代的環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、2-環(huán)丁烯-1-基、2-環(huán)戊烯-1-基、3-環(huán)戊烯-1-基、2，4-環(huán)戊二烯-1-基、3，5-環(huán)己二烯-1-基、四氫呋喃基、吡咯啉基，例如2-或3-吡咯啉基、吡咯烷基、二氧戊環(huán)基，例如1，3-二氧戊環(huán)基、咪唑啉基，例如2-咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑啉基，例如2-吡唑啉基、吡唑烷基、吡喃基，例如2-或4-吡喃基、哌啶基、1，4-二噁烷基、嗎啉基、1，4-二噻烷基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3，5-三噻烷基、噁嗪基，例如2H-1，3-、6H-1，3-、6H-1，2-、2H-1，2-或4H-1，4-噁嗪基、1，2，5-噁噻嗪基、異噁嗪基、噁噻嗪基，例如1，2，5-或1，2，6-噁噻嗪基或1，3，5-噁二嗪基。
可存在于R4脂環(huán)和雜脂環(huán)基上的任選取代基包括一、二、三或更多個(gè)選自以下的取代基，包括鹵素，例如氟、氯、溴或碘原子、或羥基、C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基、硫羥基、C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基、羥基、C1-6烷基，例如羥基甲基、羥基乙基、-CN、-NO2、-NHR5或-N(R5)2基團(tuán)。
由基團(tuán)R4、R5或Ar1表示的芳基和雜芳基包括例如任選取代的單環(huán)或雙環(huán)C6-12芳族基團(tuán)例如苯基、或C1-9雜芳族基團(tuán)例如以上描述的那些與Ar有關(guān)的基團(tuán)?？纱嬖谟谶@些基團(tuán)上的任選取代基包括一、二或三個(gè)R4a原子或以下描述的基團(tuán)。
合適由R4、-Alk(R4)m或R4a表示的特別有用的原子或基團(tuán)包括氟、氯、溴或碘原子、或C1-6烷基，例如甲基或乙基、C1-6烷基氨基，例如甲基氨基或乙基氨基、羥基C1-6烷基，例如羥基甲基或羥基乙基、羥基C2-6烷氧基，例如2-羥基乙氧基或3-羥基乙氧基、C1-6烷基硫羥基，例如甲基硫羥基或乙基硫羥基、C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基、C5-7環(huán)烷氧基，例如環(huán)戊氧基、鹵代C1-6烷基，例如三氟甲基、氨基(-NH2)、氨基C1-6烷基，例如氨基甲基或氨基乙基、C1-6二烷基氨基，例如二甲基氨基或二乙基氨基、氨基C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基C1-6烷氧基、二C1-6烷基氨基C1-6烷氧基、酰亞氨基，例如苯二甲酰亞氨基或萘二甲酰亞氨基，例如1，8-萘二甲酰亞氨基、1，1，3-三氧代苯并[d]噻唑烷基、硝基、氰基、羥基(-OH)、甲酰基[HC(O)-]、羧基(-CO2H)、-CO2A1k1[其中Alk1如上定義]、C1-6鏈烷酰基，例如乙?；?、硫羥基(-SH)、硫代C1-6烷基，例如硫代甲基或硫代乙基、-SC(NH2+)NH2、磺酰基(-SO3H)、C1-6烷基-磺酰基，例如甲磺酰基、氨基磺?；?-SO2NH2)、C1-6烷基氨基磺?；?，例如甲基氨基磺酰基或乙基氨基磺?；?、C1-6二烷基氨基磺?；缍谆被酋；蚨一被酋；?、苯基氨基磺?；?、甲酰胺基(-CONH2)、C1-6烷基氨基羰基，例如甲基氨基羰基或乙基氨基羰基、C1-6二烷基氨基羰基，例如二甲基氨基羰基或二乙基氨基羰基、磺?；被?-NHSO2H)、C1-6烷基磺?；被?，例如甲基磺酰基氨基或乙基磺?；被?、C1-6二烷基磺?；被?，例如二甲基磺酰基氨基或二乙基磺?；被?、任選取代的苯基磺?；被?，例如2-、3-或4-取代苯磺酰基氨基如2-硝基苯磺?；被?、氨基磺?；被?-NHSO2NH2)、C1-6烷基氨基磺?；被?，例如甲基氨基磺?；被蛞一被酋；被?、C1-6二烷基氨基磺?；被?，例如二甲基氨基磺?；被蚨一被酋；被?、苯基氨基磺?；被?、氨基羰基氨基、C1-6烷基氨基羰基氨基，例如甲基氨基羰基氨基或乙基氨基羰基氨基、C1-6二烷基氨基羰基氨基，例如二甲基氨基羰基氨基或二乙基氨基羰基氨基、苯基氨基羰基氨基、C1-6鏈烷酰基氨基，例如乙酰氨基、任選取代的苯基羰基氨基、C1-6鏈烷?；被鵆1-6烷基，例如乙酰氨基甲基、C1-6烷氧基羰基氨基，例如甲氧基羰基氨基、乙氧基羰基氨基或叔丁氧基羰基氨基、任選取代的雜C3-6環(huán)烷基，例如哌啶基、哌嗪基、4-(C1-6烷基)哌嗪基，例如4-甲基哌嗪基、高哌嗪基、或嗎啉基、任選取代的雜C3-6環(huán)烷基C1-6烷基，例如哌啶基C1-6烷基、哌嗪基C1-6烷基、4-(C1-6烷基)哌嗪基C1-6烷基，例如4-甲基哌嗪基甲基或嗎啉基C1-6烷基、任選取代的雜C3-6環(huán)烷基C1-6烷氧基，例如嗎啉基C1-6烷氧基、任選取代的雜C3-6烷基C1-6烷基氨基、任選取代的雜C3-6環(huán)烷基氨基、四唑基、任選取代的咪唑基、任選取代的三唑基，例如1，2，4-、1，2，3-、1，3，4-或1，2，5-三唑基、任選取代的咪唑基C1-6烷基、任選取代的咪唑基C1-6烷氧基、任選取代的三唑基C1-6烷氧基、任選取代的咪唑基氨基C1-6烷氧基、任選取代的苯基氨基、任選取代的芐基氨基、任選取代的芐氧基、或任選取代的吡啶基甲基氨基。
當(dāng)需要時(shí)，兩個(gè)R4或-Alk(R4)m取代基可連接在一起形成環(huán)狀基團(tuán)例如環(huán)醚，例如C2-6亞烷二氧基如亞乙二氧基。
可以理解當(dāng)存在兩個(gè)或更多個(gè)R4、-Alk(R4)m或R4a取代基時(shí)，這些取代基不必在相同的原子和/或基團(tuán)上。
特別有用的R4、-Alk(R4)m或R4a取代基包括例如氟、氯、溴或碘原子、或甲基氨基、乙基氨基、羥基甲基、羥基乙基、甲基硫羥基、乙基硫羥基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、2-羥基乙氧基、3-羥基丙氧基、4-羥基丁氧基、2-氨基乙氧基、3-氨基丙氧基、2-(甲基氨基)乙氧基、2-(二甲基氨基)乙氧基、3-(二甲基-氨基)丙氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己基、環(huán)己基氨基、2-羥基環(huán)己基氨基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲基氨基、乙基氨基、氨基(-NH2)、氨基甲基、氨基乙基、二甲基氨基、二乙基氨基、乙基(甲基)氨基、丙基(甲基)氨基、2-羥基乙基氨基、3-羥基丙基氨基、4-羥基丁基氨基、2-氨基乙基氨基、3-氨基丙基氨基、4-氨基丁基氨基、2-(甲基氨基)乙基氨基、2-(乙基氨基)乙基氨基、2-(異丙基氨基)乙基氨基、3-(異丙基氨基)丙基氨基、2-(二甲基氨基)乙基氨基、3-(二甲基氨基)丙基氨基、2-(二乙基氨基)乙基氨基、3-(二乙基氨基)丙基氨基、2-(甲基氨基)乙基(甲基)氨基、3-(甲基氨基)丙基(甲基)氨基、2-(二甲基氨基)乙基(甲基)氨基、2-(二甲基氨基)乙基(乙基)氨基、二甲基氨基乙氧基、硝基、氰基、羥基(-OH)、甲?；鵞HC(O)-]、小羧基(-CO2H)、-CH2CO2H、-OCH2CO2H、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-CH2CO2CH3、-CH2CO2CH2CH3、-CH2CO2CH2苯基、叔丁氧基羰基甲氧基、乙?；?、苯基乙酰基、硫羥基(-SH)、硫代甲基、硫代乙基、-SC(NH)NH2、磺?；?-SO2H)、甲基磺?；⒓谆被酋；⒁一被酋；?、二甲基氨基磺酰基、二乙基氨基磺?；⒓柞０坊?-CONH2)、甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、二甲基氨基羰基、二乙基氨基羰基、甲基氨基羰基甲基、-NHC(S)NH2、磺酰基氨基(-NHSO2H)、甲磺酰基氨基、乙磺?；被?、二甲基磺?；被?、二乙基磺酰基氨基、磺?；被?-NHSO2NH2)、甲基氨基磺酰基氨基、乙基氨基磺酰基氨基、二甲基氨基磺?；被?、二乙基氨基磺酰基氨基、甲基氨基羰基氨基、乙基氨基羰基氨基、二甲基氨基羰基氨基、二乙基氨基羰基氨基、乙酰氨基、苯基羰基氨基、氨基甲基羰基氨基、乙酰氨基甲基、甲氧基羰基氨基、乙氧基羰基氨基、叔丁氧基羰基氨基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基、4-甲基哌嗪基C1-6烷基苯基羰基氨基、高哌嗪基、嗎啉基、吡咯烷基C1-6烷基、哌啶基C1-6烷基、哌嗪基C1-6烷基、4-(C1-6烷基)哌嗪基C1-6烷基、嗎啉基C1-6烷基、嗎啉基乙氧基、2-吡咯烷基乙基氨基、2-(1-甲基吡咯烷基)乙基氨基、1-乙基吡咯烷基甲基氨基、哌啶基氨基、1-芐基哌啶基氨基、咪唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、1，2，5-三唑基、C1-6烷基咪唑基C1-6烷基、咪唑基C1-6烷氧基、三唑基C1-6烷基、三唑基C1-6烷氧基、咪唑基C1-6烷基，例如咪唑基甲基或咪唑基乙基、4-(甲氧基)苯基氨基、4-(3-羥基丙基)苯基氨基、芐基氨基、芐氧基或吡啶基甲基氨基。
在式(1)化合物中，當(dāng)基團(tuán)R1或基團(tuán)R6[當(dāng)作為-N(R6)-存在時(shí)]為直形或分支鏈的烷基時(shí)，它可以為例如C1-6直形或分支鏈的烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
當(dāng)存在于式(1)化合物中時(shí)，由X1表示的連接原子包括-O-或-S-原子。當(dāng)X1為連接基團(tuán)時(shí)，它可以為例如-C(O)-、-C(S)-、-S(O)-、-S(O2)-、-N(R7)-[其中R7為氫原子或C1-6烷基，例如甲基或乙基]、C(R7)2-、-CON(R7)-、-OC(O)N(R7)-、-CSN(R7)-、-N(R7)CO-、-N(R7)C(O)O-、-N(R7)CS-、-SON(R7)、-SO2N(R7)、-N(R7)SO2-、-N(R7)CON(R7)-、-N(R7)CSN(R7)-、-N(R7)SON(R7)-或-N(R7)SO2N(R7)基團(tuán)。
在式(1)化合物中，當(dāng)R2為-X1R3且R3為任選取代的脂族基團(tuán)時(shí)，R3可為任選取代的C1-10脂族基團(tuán)，例如任選取代的直形或分支鏈的C1-6烷基如C1-3烷基、C2-6鏈烯基如C2-4鏈烯基、或C2-6炔基如C2-4炔基。每一個(gè)所述基團(tuán)可被一或兩個(gè)由X2[其中X2正如對(duì)X1定義的原子或基團(tuán)]表示的雜原子或包含雜原子的基團(tuán)任選間隔，形成任選取代的R3雜脂族基團(tuán)。
由R3表示的脂族基團(tuán)的具體實(shí)例包括任選取代的-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-(CH2)3CH3、-CH(CH3)CH2CH3、-CH2CH(CH3)2、-C(CH3)3、-(CH2)4CH3、-(CH2)5CH3、-CHCH2、-CHCHCH3、-CH2CHCH2、-CHCHCH2CH3、-CH2CHCHCH3、-(CH2)2CHCH2、-CCH、-CCCH3、-CH2CCH、-CCCH2CH3、-CH2CCCH3或-(CH2)2CCH基團(tuán)。合適時(shí)，每一個(gè)所述基團(tuán)可由一或兩個(gè)原子和/或基團(tuán)X2任選間隔，形成任選取代的雜脂族基團(tuán)。具體實(shí)例包括-CH2X2CH3、-CH2X2CH2CH3、-(CH2)2X2CH3和-(CH2)2X2CH2CH3基團(tuán)。
可以存在于這些脂族和/或雜脂族基團(tuán)上的任選取代基包括一、二、三或更多個(gè)選自以下的取代基，包括鹵原子例如氟、氯、溴或碘原子、或羥基、C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基、硫羥基、C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基、-SC(NH)NH2、-CH2C(NH)NH2、氨基、取代氨基或環(huán)氨基。
取代氨基包括例如式-NR8R9[其中R8為被一或兩個(gè)由X3(其中X3為如上對(duì)X1描述的原子或基團(tuán))表示的雜原子或包含雜原子的基團(tuán)任選間隔的任選取代的C1-6烷基、C2-6鏈烯基或C2-6炔基且R9為氫原子或正如對(duì)R8定義的基團(tuán)]、-N(R9)COR8、-N(R9)CSR8、-N(R9)SOR8、-N(R9)SO2R8、-N(R9)CONH2、-N(R9)CONR8R9、-N(R9)C(O)OR8、-N(R9)C(NH)NH2、-N(R9)C(NH)NR8NR9、-N(R9)CSNH2、-N(R9)CSNR8R9、-N(R9)SONH2、-N(R9)SONR8R9、-N(R9)SONH2、-N(R9)SO2NH2、-N(R9)SONR8R9或-N(R9)Cyc1[其中Cyc1為任選包含一或更多個(gè)-O-或-S-原子或-N(R6)-、-C(O)-、-C(S)-、-S(O)-或-S(O2)-基團(tuán)的任選取代的C3-7單環(huán)碳環(huán)基團(tuán)]的基團(tuán)。
可以存在于R3脂族或雜脂族基團(tuán)上的環(huán)氨基取代基包括式-NHet1基團(tuán)，其中-NHet1為任選取代的C3-7環(huán)氨基，它任選包含一或更多個(gè)其它的雜原子或包含雜原子的基團(tuán)，選自-O-或-S-原子或-N(R6)-、-C(O)、-C(S)-、-S(O)-或-S(O2)-基團(tuán)。
氨基、取代氨基和環(huán)氨基的具體實(shí)例包括-NH2、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、-NHCyc1，其中Cyc1為任選取代的環(huán)戊基、環(huán)己基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基或硫代嗎啉基、或-NHet1，其中-NHet1為任選取代的吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基或硫代嗎啉基。可以存在于這些基團(tuán)和取代的和環(huán)氨基上的任選取代基一般包括一、二或三個(gè)鹵素原子，例如氟、氯、溴或碘原子、或C1-4烷基，例如甲基或乙基、-NH2-、-NHCH3-、-N(CH3)2、羥基、或C1-4烷氧基，例如甲氧基或乙氧基。
當(dāng)R3作為任選取代的脂環(huán)基存在于式(1)化合物中時(shí)，它可以為任選取代的C3-10脂環(huán)基。具體實(shí)例包括任選取代的C3-10環(huán)烷基，例如C3-7環(huán)烷基、或C3-10環(huán)烯基，例如C3-7環(huán)烯基。
由R3表示的雜脂族基或雜脂環(huán)基包括正如對(duì)R3描述的脂族基或脂環(huán)基但每一個(gè)基團(tuán)另外包含一、二、三或四個(gè)由X2表示的雜原子或包含雜原子的基團(tuán)，其中X2如上描述。
R3脂環(huán)基和雜脂環(huán)基的具體實(shí)例包括任選取代的環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、2-環(huán)丁烯-1-基、2-環(huán)戊烯-1-基、3-環(huán)戊烯-1-基、2，4-環(huán)戊二烯-1-基、3，5-環(huán)己二烯-1-基、四氫呋喃基、吡咯啉，例如2-或3-吡咯啉基、吡咯烷基、二氧戊環(huán)基，例如1，3-二氧戊環(huán)基、咪唑啉基，例如2-咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑啉基，例如2-吡唑啉基、吡唑烷基、吡喃基，例如2-或4-吡喃基、哌啶基、1，4-二噁烷基、嗎啉基、1，4-二噻烷基、硫代嗎啉基、哌嗪基、1，3，5-三噻烷基、噁嗪基，例如2H-1，3-、6H-1，3-、6H-1，2-、2H-1，2-或4H-1，4-噁嗪基、1，2，5-噁噻嗪基、異噁嗪基、噁噻嗪基，例如1，2，5-或1，2，6-噁噻嗪基或1，3，5-噁二嗪基。
可存在于R3脂環(huán)基和雜脂環(huán)基上的任選取代基包括C1-6烷基和如上對(duì)當(dāng)R3為脂族基團(tuán)時(shí)對(duì)其描述的那些任選取代基。通過任何合適的環(huán)碳或雜原子，可將該雜脂環(huán)基連接于式(1)分子的剩余部分上。
當(dāng)R3作為芳族或雜芳族基團(tuán)存在于式(1)化合物中時(shí)，它可以為與Ar有關(guān)的例如如上描述的任選取代的芳族或雜芳族基團(tuán)?？梢源嬖谟谶@些芳族或雜芳族基團(tuán)上的任選取代基包括一、二或三個(gè)R4b或-Alk(R4b)m取代基，其中R4b為如上對(duì)R4描述的原子或基團(tuán)，且Alk和m如先前那樣描述。具體的取代基包括任選取代的C1-6烷基[其中任選取代基包括一、二或三個(gè)如上對(duì)R3描述的那些任選取代基(當(dāng)它為脂族基團(tuán)時(shí))和鹵素原子，例如氟、氯、溴或碘原子、或羥基、C1-6烷氧基，例如甲氧基或乙氧基、硫羥基、C1-6烷硫基，例如甲硫基或乙硫基、-SC(NH)NH2、-CH2C(NH)NH2、氨基、如上對(duì)脂族R3基團(tuán)上的任選取代基描述的取代氨基或環(huán)氨基]。
存在于式(1)化合物中的一些取代基可使該化合物形成鹽。適宜的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽，例如衍生于無機(jī)或有機(jī)酸的酸加成鹽，和衍生于無機(jī)和有機(jī)堿的鹽。
酸加成鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、烷基磺酸鹽，例如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽或羥乙磺酸鹽、芳基磺酸鹽，例如對(duì)甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽或萘磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽和苯甲酸鹽。
衍生于無機(jī)或有機(jī)堿的鹽包括堿金屬鹽例如鈉或鉀鹽、堿土金屬鹽例如鎂或鈣鹽，和有機(jī)胺鹽例如嗎啉、哌啶、哌嗪、二甲胺或二乙胺鹽。
本發(fā)明特別有用的鹽包括藥學(xué)上可接受的鹽，特別是藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。
可以理解依基團(tuán)Ar和取代基R2的性質(zhì)而定，式(1)化合物可作為互變異構(gòu)體和/或幾何異構(gòu)體存在和/或可具有一或更多個(gè)手性中心以至于可存在對(duì)映體或非對(duì)映體。人們應(yīng)理解本發(fā)明擴(kuò)展至式(1)化合物的所有這樣的互變異構(gòu)體和異構(gòu)體和它們的混合物，包括外消旋體。
在本發(fā)明化合物中，由Ar表示的芳族基團(tuán)優(yōu)選為取代的苯基。由Ar表示的雜芳族基團(tuán)優(yōu)選為取代的5-或6-元單環(huán)雜芳族基團(tuán)或9-或10-元稠環(huán)雜芳族基團(tuán)，每一個(gè)所述基團(tuán)包含一或兩個(gè)氧、硫和/或氮原子。這些類型的特別有用的基團(tuán)包括取代的吡啶基、吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基和苯并噁唑基。取代喹啉基、吲唑基或苯并噻唑基為特別有用的。存在于任何以上提及的優(yōu)選Ar基團(tuán)上的取代基可為任何上述-R4或-Alk(R4)m的原子或基團(tuán)，特別是一、二或三個(gè)在實(shí)例中上文或下文中一般或具體描述的-R4和/或-Alk(R4)m原子或基團(tuán)。特別有用的取代基為那些如在下文中描述的包含一或更多個(gè)堿性中心的取代基。在一個(gè)選擇中，至少一個(gè)-R4或-Alk(R4)m取代基將包含堿性中心。
通常在本發(fā)明化合物中，R1優(yōu)選為氫原子。
在一個(gè)通常的選擇中，式(1)化合物中的R2為其中X1為直接鍵的基團(tuán)-X1R3。在這些化合物中，R3優(yōu)選為任選取代的芳族基團(tuán)或包含一或兩個(gè)環(huán)氧、硫和/或氮原子的任選取代的雜芳族基團(tuán)且特別為單環(huán)雜芳族基團(tuán)。因此，R3尤其可為任選取代的苯基、噻吩基、噻唑基、吲哚基或吡啶基。通過任何可以利用的環(huán)碳原子，吡啶基通?？蛇B接于式(1)化合物的剩余部分上且相對(duì)于該碳原子為2-、3-或4-吡啶基。取代的3-吡啶基為特別有用的?？梢源嬖谟谶@些R3芳族基團(tuán)和雜芳族基團(tuán)上的取代基包括一、二或三個(gè)在實(shí)施例上文或下文中一般或具體描述的-R4b或-Alk(R4b)m取代基。在一個(gè)選擇中，至少一個(gè)-R4b或-Alk(R4b)m取代基將包含如下文所述的堿性中心。
特別有用的一組本發(fā)明化合物具有式(1)，其中Ar為取代苯基、6-元單環(huán)雜芳族基團(tuán)或9-或10-元稠環(huán)雜芳族基團(tuán)，每一個(gè)所述基團(tuán)包含一或兩個(gè)氧、硫和/或氮原子；R1為氫原子且R2為任選取代的苯基、噻吩基、噻唑基或包含一或兩個(gè)氧、硫和/或氮原子的單環(huán)或雙環(huán)雜芳族基團(tuán)。
在該類型的化合物中，Ar特別為取代的苯基、吡啶基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基或苯并噁唑基。取代的苯基為特別有用的?；鶊F(tuán)R2優(yōu)選為任選取代的噻吩基、苯基、吲哚基或吡啶基。
可存在于這些類型的Ar或R2基團(tuán)上的取代基包括一、二或三個(gè)如上一般或具體描述的與式(1)化合物有關(guān)的那些-R4、-Alk(R4)m、-R4b和/或-Alk(R4b)m取代基，特別是包含一或更多個(gè)堿性中心的取代基。特別有用的包含堿性中心的取代基包括如上描述的與存在于R3脂族基團(tuán)上的任選取代基有關(guān)的含氮基團(tuán)，例如氨基、取代氨基和環(huán)氨基、任選取代且含氮雜芳族基團(tuán)，具體是5-或6-元含氮單環(huán)雜芳族基團(tuán)，例如任選取代的咪唑基。
包含堿性中心的具體基團(tuán)包括-X1a(Alka)pNR7aR7b(其中X1a為直接鍵或如上對(duì)X1定義的連接原子或基團(tuán)，Alka如上對(duì)Alk定義，p為0或整數(shù)1)且可為相同或不同的R7a和R7b每一個(gè)為氫原子或直形或分支的C1-6烷基、-X1a(Alka)pNHet1(其中-NHet1如上定義)和-X1a(Alka)pAr2(其中Ar2為如上對(duì)Ar描述的含氮雜芳族基團(tuán))。在這些基團(tuán)中，NR7aR7b可具體為-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCH2CH3、-N(CH3)(CH2CH3)或-N(CH2CH3)2，-NHet1可具體為任選取代的吡咯烷基、哌啶基、咪唑烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基或吡唑烷基；Ar2可具體為任選取代的咪唑基。當(dāng)X1a存在時(shí)，它可以具體為氧原子或-NH-基團(tuán)。
本發(fā)明化合物中特別有用的-R4b和-Alk(R4b)m取代基包括-NH2、-(CH2)2NH2、-C(CH3)2NH2、-C(CH3)2NHCH3、-C(CH3)2N(CH3)2、-CH2N(CH2CH3)2、-CONH(CH2)2N(CH2CH3)2、-C(CH3)2-吡咯烷基、二甲基氨基吡咯烷基、咪唑基、咪唑基甲基、咪唑基乙基和哌啶基乙基。特別有用的-R4和-Alk(R4)m取代基包括氟和氯原子和甲基、乙基、甲氧基、-CF3、-CH2F2、-CH2F、-OH、-OCF3、-OCHF3、-OCHF2、-OCH2F、-NO2、-CN、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、Ar2a，其中Ar2a為咪唑基、C1-3烷基咪唑基、三唑基或C1-3烷基-三唑基、-C1-3烷基Ar2a、-OC1-3烷基Ar2a、-NHet1a，其中-NHet1a為哌啶基、C1-3烷基哌啶基、嗎啉基、C1-3烷基嗎啉基、吡咯烷基、C1-3烷基吡咯烷基、哌嗪基、C1-3烷基哌嗪基、咪唑烷基、C1-3烷基咪唑烷基、吡唑烷基或C1-3烷基吡唑烷基、-C1-3烷基NHet1a、-OC1-3烷基NHet1a和-NHCOAr3，其中Ar3為由Ar2a、-C1-3烷基Ar2a、-OC1-3烷基Ar2a、-NHet1、-C1-3烷基NHet1和-OC1-3烷基NHet1任選取代的苯基。
在以上優(yōu)選的基團(tuán)中，術(shù)語三唑基意指如上描述的與基團(tuán)Ar有關(guān)的所有可能的異構(gòu)體且特別包括1，2，3-和1，2，4-三唑基。
本發(fā)明特別有用的化合物包括5-氰基-4-苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]-4-(4-甲氧基羰基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-(4-羥基甲基苯基)-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4[(4-N，N-二乙基氨基甲基)苯基]-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[2-(3(R)-二甲基氨基吡咯烷-1-基)吡啶-5-基]-N-(吲唑-5-基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(吲唑-5-基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(2-N，N-二乙基氨基乙基氨基羧基)苯基]-4-苯基嘧啶-2-胺；5-氰基-4-苯基-N-{4-[2-(2-乙基咪唑-1-基)乙基]苯基}-嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-4(1，2，3-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-(2-乙基咪唑-1-基)乙基]苯基}嘧啶-2-胺；N-[3-(5-氰基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-基氨基)苯基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺；4-[3-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-(2-甲基咪唑-1-基)乙基]苯基}嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[4-(咪唑-1-基)甲基]苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物。
本發(fā)明特別有用的化合物包括4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4(1，2，4-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(1，2，4-三唑-1-基)苯基]-4-[4-(1-二甲基氨基-1-甲基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-哌啶-1-基乙基]苯基}嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[4-(1-甲基-1-吡咯烷-1-基乙基)苯基]-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-{2-([2-(二乙基氨基)乙基]氨基)吡啶-5-基}-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3-氟苯基)嘧啶-2-胺；及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物。
如當(dāng)與抑制其它的蛋白激酶例如EGFr激酶、p56lck激酶、ZAP-70激酶、蛋白激酶C、Csk激酶和p59fyn激酶相比較時(shí)，由不同程度抑制這些酶所證實(shí)的那樣，本發(fā)明化合物為有效和選擇性的KDR和/或FGFr激酶抑制劑。通過使用試驗(yàn)，例如在下文實(shí)施例中描述的那些試驗(yàn)，可簡(jiǎn)便測(cè)定以這種方式起作用的化合物的能力。
因此，本發(fā)明化合物尤其用于預(yù)防和治療其中不合適的KDR激酶作用在例如與血管發(fā)生有關(guān)的病癥中起作用的疾病。因此，所述化合物用于例如預(yù)防和治療癌癥、牛皮癬、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、卡波西肉瘤、局部缺血性心臟病、動(dòng)脈粥樣硬化和眼疾病，例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、涉及視網(wǎng)膜血管增生且應(yīng)理解本發(fā)明擴(kuò)展至這類用途和擴(kuò)展至式(1)化合物在制備預(yù)防和治療這類疾病的藥物中的用途。
為預(yù)防或治療疾病，本發(fā)明化合物可作為藥用組合物給藥，且本發(fā)明另一方面提供藥用組合物，它包含與一或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑一起的式(1)化合物。
本發(fā)明的藥用組合物可采用適于口服、頰、非腸道、鼻腔、局部或直腸給藥的形式，或采用適于吸入或吹入給藥的形式。
對(duì)于口服給藥而言，所述藥用組合物可采用例如片劑、錠劑或膠囊劑的形式，它們通過常規(guī)方法用藥學(xué)上可接受的賦形劑例如粘合劑(例如預(yù)膠凝玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥基丙基甲基纖維素)、填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)、潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石粉或二氧化硅)、崩解劑(例如馬鈴薯淀粉或乙醇酸淀粉鈉)或潤(rùn)濕劑(例如十二烷基硫酸鈉)制備。通過本領(lǐng)域熟知的方法，可將片劑包衣。用于口服給藥的液體制劑可采用例如溶液劑、糖漿劑或混懸劑的形式，或它們可作為臨用前采用水或其它適宜的媒介物復(fù)制的干燥產(chǎn)品提供。通過常規(guī)方法用藥學(xué)上可接受的添加劑例如懸浮劑、乳化劑、非水媒介物和防腐劑，可制備這樣的液體制劑。合適時(shí)，所述制劑也可包含緩沖鹽、矯味劑、著色劑和甜味劑。
用于口服給藥的制劑可適宜配制以便得到控制釋放的活性化合物。
對(duì)于頰給藥而言，所述組合物可采用以常規(guī)方法配制的片劑或錠劑的形式。
式(1)化合物可配制用于經(jīng)注射非腸道給藥，包括大劑量注射或輸注或顆粒介導(dǎo)注射(particle mediated injection)。注射制劑可以單位劑型如以玻璃安瓿或以多劑量容器如玻璃管形瓶或用于顆粒介導(dǎo)給藥含有壓縮氣體例如氦的裝置提供。用于大劑量注射或輸注的組合物可采用這樣的形式例如在油性或水性媒介物中的混懸劑、溶液劑或乳劑，且可包含配方劑例如懸浮劑、穩(wěn)定劑、防腐劑和/或分散劑?；蛘撸钚猿煞挚梢耘R用前用適宜的媒介物例如滅菌無熱原水復(fù)制的粉末形式提供。對(duì)于顆粒介導(dǎo)給藥而言，在顆粒例如顯微金顆粒上可包裹復(fù)合物。
除以上描述的制劑以外，式(1)化合物也可配制為儲(chǔ)存型制劑。通過植入或通過肌內(nèi)注射，可給予這類長(zhǎng)效制劑。當(dāng)需要時(shí)，本發(fā)明化合物也可結(jié)合于聚合物，例如天然來源的聚合物如白蛋白，使用時(shí)以延長(zhǎng)化合物的半衰期?？膳渲七@樣的結(jié)合物且如上描述那樣供應(yīng)。
對(duì)于鼻內(nèi)給藥或經(jīng)吸入給藥而言，本發(fā)明使用的化合物便利以用于加壓容器或霧化器的氣溶膠噴霧的傳遞形式提供，伴隨使用適宜的拋射劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它的適宜的氣體或氣體混合物。
如果需要，所述組合物可以包含一種或更多種含有活性成分的單位劑型的填充或分散裝置的形式提供。該填充或分散裝置可帶有用藥說明書。
本發(fā)明化合物用于預(yù)防或治療具體癥狀所需要的量將依所選擇的化合物和受治療患者的癥狀而變化。然而，通常日劑量可在大約100ng/kg-100mg/kg范圍內(nèi)，對(duì)于口服或頰給藥大約為0.01mg/kg-40mg/kg體重，對(duì)于非腸道給藥大約為10ng/kg-50mg/kg體重，且對(duì)于鼻腔給藥或經(jīng)吸入或吹入給藥為大約0.05mg-大約1000mg，例如大約為0.5mg-大約1000mg。
通過以下一般描述的且更具體地講是在下文的實(shí)施例中描述的多種方法，可制備本發(fā)明的化合物。在以下方法描述中，當(dāng)在本文或式中使用時(shí)，符號(hào)R1、R2、Alk、Alk1和Ar能夠理解為代表以上描述的與式(1)有關(guān)的那些基團(tuán)，除非另外指明。在以下描述的反應(yīng)中，保護(hù)反應(yīng)官能團(tuán)例如羥基、氨基、硫代或羧基可為必要的，而這些反應(yīng)官能團(tuán)在最終產(chǎn)物中是需要的，以避免反應(yīng)中它們的不合乎需要的參與作用。
按照標(biāo)準(zhǔn)實(shí)踐，可使用常規(guī)保護(hù)基團(tuán)[例如參見Green，T.W.，“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”，John Wiely and Sons，(1991)]。在一些例子中，脫除保護(hù)可以是式(1)化合物合成中的最終步驟且在下文中描述的本發(fā)明方法應(yīng)理解可擴(kuò)展至這類保護(hù)基團(tuán)的除去。
因此，本發(fā)明另一方面，通過使式(2)的胍或其鹽與式(3)的烯胺酮(enaminone)反應(yīng)，可制備式(1)的化合物， R2COC(CN)CHN(R10)(R11) (3)其中R10和R11可相同或不同，各為C1-6烷基。
在升高的溫度例如回流溫度下，任選在堿例如堿金屬堿如氫氧化鈉或碳酸鉀存在下，在溶劑例如質(zhì)子溶劑如醇，例如乙醇、甲氧基乙醇或丙-2-醇中，可進(jìn)行該反應(yīng)。
式(2)化合物的鹽包括酸的鹽如無機(jī)酸鹽，例如鹽酸鹽或硝酸鹽。
通過在升高的溫度下相應(yīng)的胺ArNH2與氨腈反應(yīng)，可制備式(2)的中間體胍。在升高的溫度下，例如最高可達(dá)回流溫度下，該反應(yīng)可在溶劑例如乙醇中進(jìn)行。當(dāng)需要得到式(2)的胍鹽時(shí)，該反應(yīng)可在濃酸例如鹽酸或硝酸存在下進(jìn)行。
胺ArNH2為已知化合物，或經(jīng)以下常規(guī)方法可以得到，例如如在以下討論的互變反應(yīng)中更具體描述的那樣，在適宜的溶劑中，使用例如在金屬催化劑存在下的氫，通過氫化相應(yīng)的硝基衍生物得到。用于該具體反應(yīng)的硝基苯為已知化合物或可使用與用于制備已知化合物相似的方法來制備。
式(3)中間體烯胺酮為已知化合物，或在升高的溫度下，可通過乙酰基衍生物R2COCH2CN與縮醛(R10)(R11)NCH(OR12)2(其中R12為C1-6烷基，例如甲基或乙基)反應(yīng)制備。該反應(yīng)的起始原料為已知化合物或可通過與那些用于制備已知化合物的類似方法來制備。
制備乙酰基衍生物R2COCH2CN的一個(gè)特別有用的方法包括在環(huán)境溫度下，在溶劑例如醇如乙醇中，用堿例如醇鹽如乙醇鈉處理相應(yīng)的式(4)異噁唑。通過在環(huán)境溫度下，在溶劑例如醇如MeOH中，相應(yīng)氨基丙烯酮(R2COCHCHN(R10)(R11))與羥胺反應(yīng)可得到式(4)的中間體異噁唑。如上所述，通過相應(yīng)的甲基酮R2COCH3與縮醛(R10)(R11)NCH(OR12)2反應(yīng)，可得到用于該反應(yīng)的氨基丙烯酮起始原料。 在本發(fā)明的另一方法中，通過用胺ArNH2置換式(5)嘧啶中的氯原子，可制備式(1)化合物。 任選在堿例如有機(jī)胺如吡啶存在下，必要時(shí)在溶劑例如醇如2-乙氧基乙醇或異丙醇、環(huán)醚如二噁烷或取代酰胺如二甲基甲酰胺存在下，在升高的溫度，例如回流溫度下，可進(jìn)行該反應(yīng)。
在升高的溫度，例如回流溫度下，任選在溶劑例如取代酰胺如二甲基甲酰胺中，通過相應(yīng)的式(6)嘧啶與三氯氧化磷反應(yīng)，可得到式(5)的中間體嘧啶。 在大約環(huán)境溫度下，在酸水溶液例如硫酸水溶液中，用亞硝酸鈉從相應(yīng)的式(7)胺可制備式(6)中間體。 如以上對(duì)制備式(1)化合物描述的那樣，通過式(3)烯胺酮與胍鹽例如碳酸胍反應(yīng)，可制備式(7)的胺。
通過其它的式(1)化合物的互變，也可制備式(1)化合物且應(yīng)理解本發(fā)明擴(kuò)展至這樣的互變方法。因此，使用如烷基化、芳基化、雜芳基化、?；⒘虼；?、磺?；⒓柞；蚺己戏磻?yīng)的標(biāo)準(zhǔn)取代方法可用于在式(1)化合物中引入新的取代基和/或延長(zhǎng)已有的取代基。或者，通過如氧化、還原或裂解反應(yīng)，可修飾式(1)化合物中已有的取代基，得到其它的式(1)化合物。
以下用通用術(shù)語介紹多種方法，它們能夠用于修飾式(1)化合物中已有的Ar和/或R2基團(tuán)?？梢岳斫猓?dāng)合適的官能團(tuán)存在于式(1)化合物中時(shí)，這些反應(yīng)中的一個(gè)將僅是可能的。當(dāng)需要時(shí)，這些反應(yīng)也可在式(1)化合物的中間體上進(jìn)行，例如在制備中間體胺ArNH2或乙?；苌颮2COCH2CN中，且隨后的描述打算用于這些中間體，即使僅提到了式(1)化合物。
因此，通過所述化合物與試劑AlkL或Ar2L反應(yīng)，其中Alk為烷基且Ar3為與式(1)化合物相關(guān)的如上定義的芳基或雜芳基且L為離去原子或基團(tuán)如鹵素原子，例如氯或溴原子、或磺酰氧基，例如芳基磺酰氧基如對(duì)甲苯磺酰氧基，可完成式(1)化合物的例如烷基化、芳基化或雜芳基化。
在大約0℃至大約40℃下，在偶極非質(zhì)子溶劑如酰胺，例如取代酰胺如二甲基甲酰胺或醚例如環(huán)醚如四氫呋喃中，在堿例如無機(jī)堿如碳酸鹽如碳酸銫或碳酸鉀、醇鹽如叔丁醇鉀或氫化物如氫化鈉存在下，可進(jìn)行烷基化、芳基化或雜芳基化反應(yīng)。
在該方法的一種變體中，離去基團(tuán)L或者可為式(1)化合物的一部分且在升高的溫度下與合適的親核試劑進(jìn)行反應(yīng)。具體的親核試劑包括環(huán)胺例如哌嗪或咪唑。適當(dāng)時(shí)，可在溶劑例如非質(zhì)子試劑如取代酰胺，例如二甲基甲酰胺中進(jìn)行反應(yīng)。
在另一個(gè)一般性互變方法的實(shí)例中，式(1)化合物可?；蛄虼；?。例如在環(huán)境溫度下，在溶劑例如鹵代烴如二氯甲烷或氯仿中，在堿如叔胺例如三乙胺存在下，采用酰鹵或酸酐，或在低溫例如大約0℃下，在惰性溶劑如四氫呋喃中，通過與硫代酸酯反應(yīng)，可進(jìn)行該反應(yīng)?；蛘撸欣卦趬A例如環(huán)胺如N-甲基嗎啉存在下，在催化劑例如N-羥基化合物如N-羥基三唑例如1-羥基苯并三唑存在下，在縮合劑例如二酰亞胺(diimide)如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺存在下，可用酸進(jìn)行該反應(yīng)。該反應(yīng)特別適用于包含伯或仲氨基的式(1)化合物。
在另一個(gè)一般性互變方法的實(shí)例中，例如通過所述化合物與混合酸酐HCOOCOCH3或與甲酸和乙酸酐的混合物反應(yīng)，可將式(1)化合物甲酰化。
在另一個(gè)一般性互變反應(yīng)中，通過磺?；?，例如在如環(huán)境溫度下，在堿如無機(jī)堿例如氫化鈉存在下，在溶劑如酰胺，例如取代酰胺如二甲基甲酰胺中，通過所述化合物與試劑AlkS(O)2L或Ar2S(O)2L反應(yīng)，可制備式(1)化合物。特別是用具有伯或仲氨基的式(1)化合物可進(jìn)行該反應(yīng)。
在本發(fā)明互變反應(yīng)的另一個(gè)實(shí)例中，通過修飾后者中已有的官能團(tuán)，從其它的式(1)化合物可制備式(1)化合物。
因此，在一個(gè)實(shí)例中，依基團(tuán)Alk1的性質(zhì)而定，通過酸或堿催化水解或通過催化氫化，可將式(1)化合物中的酯基-CO2Alk1轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酸[-CO2H]。例如通過在含水溶劑中用有機(jī)酸或無機(jī)酸如TFA酸，或在溶劑如二噁烷中用無機(jī)酸例如鹽酸，或在含水醇或醚如MeOH水溶液或四氫呋喃的水溶液中用堿金屬氫氧化物如氫氧化鋰處理，可完成酸或堿催化水解。在溶劑例如醚如四氫呋喃或醇如MeOH中，在金屬催化劑如負(fù)載于載體例如炭上的鈀存在下用氫，可進(jìn)行催化氫化。
在第二個(gè)實(shí)例中，在低溫例如大約-78℃下，在溶劑如鹵代烴，例如二氯甲烷中，通過與三溴化硼反應(yīng)，式(1)化合物中的-OAlk2[其中Alk2表示烷基，例如甲基]基團(tuán)可裂解為相應(yīng)的醇-OH。
在另一個(gè)實(shí)例中，在膦例如三苯基膦和活化劑如偶氮二羧酸二乙基-、二異丙基-或二甲基酯存在下，在溶劑例如四氫呋喃中，通過與試劑AlkOH或ArOH偶合，式(1)化合物中的醇-OH基團(tuán)可轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的-OAlk或-OAr基團(tuán)。
在另一個(gè)實(shí)例中，通過在升高的溫度例如回流溫度下，在有機(jī)堿例如吡啶存在下，相應(yīng)的胺[-NH2]與磺酰胺反應(yīng)，可得到式(1)化合物中的氨基磺酰氨基[-NH2SONH2]。
在互變方法的另一個(gè)實(shí)例中，使用醇如乙醇和催化氫化，例如使用在金屬催化劑如負(fù)載于載體例如炭上的鈀存在下的氫，可將式(1)化合物中的仲胺基團(tuán)烷基化。
在另一個(gè)實(shí)例中，在環(huán)境溫度下，經(jīng)與肼在溶劑如醇例如乙醇中反應(yīng)，從相應(yīng)的二酰亞胺水解，可得到式(1)化合物中的胺[-NH2]基團(tuán)。在另外一個(gè)方法中，例如使用還原劑如硼氫化物，例如硼氫化鈉或三氯化鈰，通過還原相應(yīng)的腈，也可生成胺基?；蛘?，在溶劑例如乙腈中，使用例如硝酸鈰銨，通過對(duì)相應(yīng)對(duì)-茴香基或?qū)?茴香基甲基胺的CeIV氧化，也可得到胺基。
在另一個(gè)實(shí)例中，通過使相應(yīng)含胺基[-NH2]的化合物與試劑L1AlkL2環(huán)合，其中L1和L2可相同或不同，各為如上對(duì)L所述的離去原子或基團(tuán)且可例如各為鹵素原子如溴原子，可制備式(1)化合物中的環(huán)氨基。在升高的溫度下，在堿例如無機(jī)堿如碳酸鉀存在下，可有利地進(jìn)行該反應(yīng)。
在另一個(gè)實(shí)例中，例如通過如上所述的催化氫化，或通過在酸如鹽酸存在下，使用例如金屬如錫或鐵化學(xué)還原，可將硝基[-NO2]還原為胺[-NH2]。
在升高的溫度例如大約70℃-80℃下，例如在酸如乙酸存在下，經(jīng)使用氧化劑例如過氧化氫氧化相應(yīng)的氮堿，或通過在環(huán)境溫度下，在溶劑如二氯甲烷中與過酸例如過乙酸反應(yīng)，可制備式(1)化合物的N-氧化物。
當(dāng)需要式(1)化合物的鹽時(shí)，通過常規(guī)方法，例如在適宜的溶劑或溶劑混合物中，例如有機(jī)溶劑如醚，例如乙醚，或醇如乙醇中，通過式(1)化合物與合適的酸或堿反應(yīng)，可制備這些鹽。
以下實(shí)施例闡明本發(fā)明。除非另外指明，在實(shí)施例中所有1Hnmr在300 MHz下進(jìn)行。所有溫度以℃表示。
使用以下縮寫THF-四氫呋喃； DMF-二甲基甲酰胺；DMSO-二甲基亞砜； TFA-三氟乙酸；DIBAL-H-氫化二異丁基鋁；MeOH-甲醇。中間體14-[2-(1，2，3-三唑-1-基)乙氧基]苯基胍(quanidinium)硝酸鹽以與實(shí)施例1的胍相似的方法，從4-[2-(1，2，3-三唑-1-基)乙氧基]苯胺(4.91g，24.07mmol)、氨腈(1.56g，40.97mmol)和濃HNO3(1.58mL，26.47mmol)制備標(biāo)題化合物，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(4.7g)，m.p.＞250°。δ H(d6DMSO)9.33(1H，s)，8.20(1H，s)，7.74(1H，s)，7.17-7.14(6H，m)，7.00-6.97(2H，m)，4.79(2H，t，J 4.95 Hz)和4.41(2H，t，J 4.95 Hz)。
以與實(shí)施例12的苯胺中間體相似的方法，從4-[2-(1，2，3-三唑-1-基)乙氧基]硝基苯(5.98g，25.5mmol)和10％披鈀木炭(1.5g)制備4-[2-(1，2，3-三唑-1-基)乙氧基]苯胺，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(4.91g)，m.p.141°。δ H(CDCl3)7.69(1H，d，J 0.5 Hz)，7.62(1H，d，J 0.5 Hz)，6.65(2H，d，J 5.8 Hz)，6.58(2H，d，J 5.8 Hz)，4.71(2H，t，J 5.0 Hz)，4.24(2H，t，J 5.0 Hz)和3.43(2H，s)。
以與實(shí)施例24的類似反應(yīng)相似的方法，從4-[(2-對(duì)甲苯磺酰氧基)乙氧基]硝基苯(10g，29.7mmol)和1，2，3-三唑鈉鹽(2.46mmol)制備4-[2-(1，2，3-三唑-1-基)乙氧基]硝基苯，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(2.25g)，m.p.123°。δH(d6DMSO)8.21(1H，s)，8.20(2H，d，J 2.3 Hz)，7.74(1H，d，J 0.5 Hz)，7.14(2H，d，J 2.4 Hz)，4.84(2H，t，J 4.9 Hz)和4.57(2H，t，J 4.9 Hz)。該反應(yīng)也得到為黃色固體的4-[2-(1，2，3-三唑-2-基)乙氧基]硝基苯(4.36 g)，m.p.111°。δH(d6DMSO)8.17(2H，d，J 9.3 Hz)，7.80(2H，s)，7.11(2H，d，J 9.3 Hz)，4.86(2H，t，J 4.8 Hz)和4.64(2H，t，J4.8 Hz)。中間體24-[2-(1，2，3-三唑-2-基)乙氧基]苯基胍硝酸鹽以與實(shí)施例1的胍相似的方法，從4-[2-(1，2，3-三唑-2-基)乙氧基]苯胺(8.85g，434mmol)、氨腈(2.82g，73.78mmol)和濃HNO3(1.58mL，26.47mmol)制備標(biāo)題化合物，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(7.95g)，m.p.＞250°。δH(d6DMSO)9.32(1H，s)，7.80(2H，s)，7.16-7.13(6H，m)，7.00-6.97(2H，m)，4.79(2H，t，J 4.95mmol)和4.41(2H，t，J 4.95mmol)。
以與實(shí)施例12的苯胺中間體相似的方法，從4-[2-(1，2，3-三唑-2-基)乙氧基]硝基苯(10.5g，44.8mmol)和10％披鈀木炭(1.5g)制備4-[2-(1，2，3-三唑-2-基)乙氧基]苯胺，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(4.91g)，m.p.159°。δH(CDCl3)7.62(2H，s)，6.73-6.58(4H，m)，4.77(2H，t，J 5.8 Hz)，4.40(2H，t，J 5.8 Hz)，3.43(2H，s)。中間體34-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙氧基]苯基胍硝酸鹽以與實(shí)施例1的胍相似的方法，從4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙氧基]苯胺(5.30g，25.9mmol)、氨腈(1.86g，44.11mmol)和濃HNO3(1.88mL，28.54mmol)制備標(biāo)題化合物，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(6.62g)，m.p.280-282°。δH(d6DMSO)9.33(1H，bs)，8.56(1H，s)，7.97(1H，s)，7.17(4H，bs)，7.16-7.12(2H，s)，6.98-6.94(2H，m)，4.58(2H，t，J 5.0Hz)和4.34(2H，t，J 2.0 Hz)。
以與實(shí)施例12的苯胺中間體相似的方法，從4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙氧基]硝基苯(6.28g，26.8mmol)和10％披鈀木炭(0.5g)制備4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙氧基]苯胺，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(5.31g)，m.p.85-86°。δH(CDCl3)8.21(1H，s)，7.94(1H，s)，6.69-6.58(4H，m)，4.51(2H，t，J 5.0 Hz)，4.24(2H，t，J 5.2 Hz)和3.45(2H，bs)。
以與實(shí)施例24的類似反應(yīng)相似的方法，從4-[(2-對(duì)甲苯磺酰氧基)乙氧基]硝基苯(10g，30.7mmol)和1，2，4-三唑鈉鹽(3.36g，36.8mmol)制備4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙氧基]硝基苯，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(6.45g)，m.p.118-120°。δH(CDCl3)8.21-8.17(3H，m)，7.97(1H，s)，6.93-6.90(2H，m)，4.62(2H，t，J 5.2 Hz)和4.45(2H，t，J 5.3Hz)。中間體42-氰基-3-二甲基氨基-1-吡啶-3-基丙烯-1-酮將2-羥基-2-吡啶-3-基丙烯腈鈉鹽(1.0g，5.95mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入二甲基甲酰胺縮二乙醇(1.2mL，7.0mmol)，隨后加入1M在乙醚中的鹽酸(5.95mL)。在室溫下，將反應(yīng)物攪拌1.5h，然后減壓下濃縮。將生成的殘余物經(jīng)歷柱層析法(硅膠，3％在二氯甲烷中的甲醇)，得到為黃色固體的所需的產(chǎn)物(560mg)。δH(CDCl3)8.98(1H，dd，J 2.3，0.8 Hz)，8.69(1H，dd，J 4.8，1.6 Hz)，8.08(1H，dt，J 7.9，2.2 Hz)，7.98(1H，s)，7.37-7.33(1H，m)，3.50(3H，s)和(3H，s)。
通過將在甲苯(100mL)和DMF(25mL)中的煙酸乙酯(22.67g，0.15mol)和乙腈(15.6mol，0.3mol)溶液加入到乙醇鈉(9.70g，0.143mol)的懸浮液中且回流下伴隨劇烈攪拌將生成的混合物加熱2h，制備2-羥基-2-吡啶-3-基丙烯腈。冷卻下，用乙醚(400mL)稀釋反應(yīng)液且收集生成的沉淀并進(jìn)一步用乙醚洗滌，得到所需的物質(zhì)(20.1g)，其未經(jīng)純化即可使用。
通過將苯甲酰基乙腈(4.50g，31.0mmol)在二甲基甲酰胺縮二乙醇(20ml)中回流12h，制備用作原料的丙烯酮。冷卻下，收集生成的固體并用乙醚洗滌，得到為米黃色固體的所需的產(chǎn)物(4.50g)，m.p.98°。
經(jīng)加熱3，4，5-三甲氧基苯胺(5.49g，30.0mmol)、氨腈[Aldrich，在水中的50％溶液w/v](3.50ml，34.5mmol)和濃HNO3(2.1ml，30.0mmol)在乙醇(30ml)中的溶液，制備3，4，5-三甲氧基苯基胍硝酸鹽。經(jīng)過濾收集冷卻至室溫下形成的固體，用乙醇洗滌并干燥，得到為灰色固體的所需的物質(zhì)(4.60g)，m.p.187°。
以與實(shí)施例1的類似化合物相似的方法，制備在以上方法中用作原料的丙烯酮，得到黃色固體，m.p.118°。
以與實(shí)施例1的胍相似的方法，制備為灰白色固體的4-(2-羥基乙基)苯基胍硝酸鹽。
從吲唑-5-基胍硝酸鹽(1.51g，6.36mmol)、1-(2-氯吡啶-5-基)-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(1.50g，6.36mmol)和氫氧化鈉(254mg，6.36mmol)，制備用作原料的氯代吡啶，得到為白色固體的所需的產(chǎn)物(1.49g)，m.p.＞285°(分解)。
從3-(2-氯吡啶-5-基)-3-氧代丙腈(4.2g，23.3mmol)和二甲基甲酰胺縮二乙醇(13ml)，制備丙烯酮，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(5.05g)，m.p.130-132°。
在氮?dú)夥障?，通過滴加正丁基鋰(85.6ml，214mmol的2.5M己烷溶液)處理冷卻至-70°的氰基乙酸(9.10g，53.5mmol)和2，2’-聯(lián)吡啶(5mg)在干燥THF(500ml)中的溶液，制備3-(2-氯吡啶-5-基)-3-氧代丙腈。在1h期間內(nèi)，使反應(yīng)物溫?zé)嶂?°，然后再次冷卻至-70°，此時(shí)，向產(chǎn)生的紅色漿狀物中加入6-氯代煙酰氯(9.42g，53.5mmol)在THF(7ml)中的溶液。加入完成后，在-70°下，攪拌反應(yīng)物另外1h，然后使之達(dá)到0°，加入2M鹽酸(250ml)。用氯仿(2×400ml)提取反應(yīng)物且然后用飽和NaHCO3水溶液(1×250ml)和飽和鹽水(1×250ml)洗滌合并的有機(jī)相，干燥(MgSO4)并減壓濃縮。用乙醚/正己烷(1∶5)研磨生成的固體，得到為淺黃色粉末的所需的物質(zhì)(4.20g)，m.p.122-123°。
從5-氨基吲唑(4.0g，mmol)、氨腈(1.89g，45.1mmol)和濃HNO3(2.8ml)制備吲唑-5-基胍硝酸鹽，得到為固體的所需的物質(zhì)，m.p.252-254°。
按如下方法制備在以上方法中使用的1-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮
將4-乙?；S腈(51.84g，0.357mol)和N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇(142ml，1.07mol)的混合物加熱至回流1.5h。把反應(yīng)物冷卻至室溫且經(jīng)過濾收集生成的結(jié)晶體并用乙醚(4×100ml)洗滌，得到為橙色固體的1-(4-氰基苯基)-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(44.56g)。通過部分濃縮濾液可得到另一份該產(chǎn)物(11.40g)。δH(d6DMSO)8.01(2H，d，J 8.2Hz)，7.87(2H，d，J 8.2 Hz)，7.75(1H，d，J 12.2 Hz)，5.83(1H，d，J 12.2Hz)，3.15(3H，bs)，2.92(3H，bs)。MS(ESI)201(MH+，100％)。
將羥胺鹽酸鹽(21.40g，308mmol)加入到1-(4-氰基苯基)-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(55.96g，280mmol)在MeOH(450ml)中的懸浮液中且在室溫下攪拌反應(yīng)物24h。用水(400ml)稀釋反應(yīng)物且經(jīng)過濾收集生成的沉淀，用水(5×150ml)洗滌且真空干燥，得到為淺黃色固體的4-(5-異噁唑基)-芐腈(42.53g)，m.p.148-149°。δH(CDCl3)8.35(1H，d，J 1.8 Hz)，7.91(2H，d，J 8.3 Hz)，7.77(2H，d，J 8.3 Hz)，6.66(1H，d，J1.8 Hz)。
在140-150°(油浴)下，于真空(0.6毫巴)中，在配備有大的磁力攪拌棒的燒瓶中，將三氯化鈰七水合物(112.6g，302mmol)干燥4h。燒瓶中再充入氮?dú)?，用冰浴冷卻至0°，伴隨攪拌下加入無水THF(500ml)。加入完成后，除去冰浴且在室溫下攪拌乳狀懸浮液16h。把反應(yīng)物冷卻至-78°且伴隨攪拌下滴加甲基鋰(188ml在乙醚中的1.6M溶液，300mmol)。45分鐘后，加入4-(5-異噁唑基)-芐腈(17.0g，100mmol)在無水THF(100ml)中的溶液并于3h內(nèi)在冷卻浴上使反應(yīng)混合物從-78°溫?zé)嶂?10°。用33％氫氧化銨(250ml)猝滅反應(yīng)物且通過Celite墊過濾以除去生成的固體。用乙酸乙酯(4×100ml)徹底洗滌Celite墊并把合并的濾液濃縮為大約200ml。用鹽水(200ml)稀釋這些濾液且用乙酸乙酯(2×150ml)提取，干燥(MgSO4)有機(jī)提取液并真空濃縮，得到為黃色固體的1-[4-(5-異噁唑基)苯基]-1-甲基乙基胺(19.53g)。δH(CDCl3)8.27(1H，d，J 1.9 Hz)，7.76(2H，dt，J 8.7，2.0 Hz)，7.62(2H，d，dt，J 8.7，2.0 Hz)，6.49(1H，d，J 1.9 Hz)，1.94(2H，bs)，1.53(6H，s)。該化合物無須純化即可用于以下步驟。將1-[4-(5-異噁唑基)苯基]-1-甲基乙基胺(23.87g，118.2mmol)和二碳酸二叔丁基酯(28.37g，130mmol)在甲苯(200ml)中的混合物加熱至回流1h，之后，真空除去溶劑。把生成的固體從乙醇中重結(jié)晶，得到為亮黃色結(jié)晶的N-{1-[4-(5-異噁唑基)苯基]-1-甲基乙基}氨基甲酸叔丁酯(24.90g)，m.p.145-146°。δH(CDCl3)8.27(1H，d，J 1.8 Hz)，7.75(2H，d t，J 8.7，2.1Hz)，7.50(2H，d t，J 8.7，2.1 Hz)，6.49(1H，d，J 1.8 Hz)，4.97(1H，bs)，1.64(6H，s)，1.37(9H，bs)。MS(ESI)325(MNa+，42％)，303(MH+，56％)，186(100％)。
將新制備的乙醇鈉溶液(3.77g，164mmol的鈉在150ml的乙醇之中)加入到N-{1-[4-(5-異噁唑基)苯基]-1-甲基乙基}氨基甲酸叔丁基酯(24.76g，82mmol)在乙醇(150ml)中的懸浮液中且在室溫下攪拌反應(yīng)物1h。真空除去乙醇且在乙酸乙酯(150ml)和冷的1M鹽酸(250ml)之間分配殘余物。用乙酸乙酯(2×80ml)再次提取水層且用鹽水(100ml)洗滌合并的乙酸乙酯提取液，干燥(MgSO4)并真空濃縮，得到為灰白色固體的N-{1-[4-(2-氰基乙?；?苯基]-1-甲基乙基}氨基甲酸叔丁基酯，m.p.122-123°。將該粗品產(chǎn)物溶于THF(150ml)中，加入N，N-二甲基甲酰胺縮二乙醇(14.48g，98.4mmol)且把混合物加熱至50°1h。真空除去溶劑且經(jīng)柱層析法(硅膠，2-4％MeOH在CH2Cl2中)純化殘余物，得到為淺黃色固體的1-[4-(1-叔丁氧基羰基-氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基-丙烯-1-酮(24.46g)，m.p.160-162°。δH(CDCl3)7.94(1H，s)，7.77(2H，dt，J 8.6，1.9 Hz)，7.45(2H，dt，J8.6，1.9 Hz)，5.08(1H，bs)，3.48(3H，s)，3.28(3H，s)，1.63(6H，s)，1.32(9H，bs)。MS(ESI)380(MNa+，63％)，358(MH+，32％)，302(96％)，241(100％)。實(shí)施例94-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺按照對(duì)于實(shí)施例8的化合物描述的方法，從3，4，5-三甲氧基苯基胍硝酸鹽(576mg，2.0mmol)、1-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(660mg，1.8mmol)和粉末氫氧化鈉(89mg，2.2mmol)，制備標(biāo)題化合物。在柱層析(硅膠，40％在己烷中的乙酸乙酯)后，得到為黃色固體的中間體4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺(769mg)。如對(duì)于實(shí)施例8的類似化合物描述的那樣，用在CH2Cl2中的TFA酸處理該化合物，得到為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(597mg)，m.p.167-168°。δH(d6DMSO)10.34(1H，bs)，8.90(1H，s)，7.96(2H，bd，J7.8 Hz)，7.73(2H，d，J 8.2 Hz)，7.24(2H，bs)，3.76(6H，s)，3.63(3H，s)，3.18(2H，bs)，1.42(6H，s)。MS(ESI)442(MNa+，16％)，420(MH+，57％)，403(100％)。
除非另外指明，按照實(shí)施例8的化合物和它的中間體的方法，制備以下實(shí)施例10-23的化合物和它們各自的中間體。
以與實(shí)施例1的相應(yīng)原料相似的方法，從4-(1，2，4-三唑-1-基)苯胺(1.60g，10.0mmol)、cyanimide(715mg，17mmol)和濃HNO3(725ml，11mmol)，制備為米黃色固體的在以上方法中用作原料的胍(1.50g)，m.p.＞310°(分解)。
通過將4-(1，2，4-三唑-1-基)硝基苯(nitobenzene)(2.25g，11.83mmol)與10％披鈀木炭懸浮于含有4M鹽酸(75ml)的乙醇(125ml)中，制備4-(1，2，4-三唑-1-基)苯胺。在常壓和室溫下，于氫氣氛中，攪拌生成的混合物16h。通過Celite墊過濾反應(yīng)物，用乙醇徹底洗滌。濃縮濾液至50mL體積并加入2M NaOH直到pH＞10。再次濃縮該溶液至50mL且冷卻至0°。經(jīng)過濾收集生成的固體且用水稍洗滌，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(1.65g)，m.p.150-152°。
通過在80°下加熱4-氟硝基苯(40g，28.3mmol)和1，2，4-三唑鈉鹽(28.4g，31.2mmol)在DMF(250mL)中的混合物4h，制備在以上方法中使用的硝基苯。冷卻下，把反應(yīng)物傾入到冷卻的飽和鹽水(600mL)和2M NaOH(400mL)中。經(jīng)過濾收集生成的固體，先后用2MNaOH(2×150mL)、水(3×100mL)和乙醇(2×75mL)洗滌，高真空下干燥。經(jīng)柱層析(硅膠，3％MeOH在二氯甲烷中)純化產(chǎn)物，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(9.05g)。實(shí)施例124-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(1，2，3-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺從4-(1，2，3-三唑-1-基)苯基胍硝酸鹽(750mg，2.8mmol)、1-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯酮(1.0g，2.8mmol)和粉末氫氧化鈉(150mg，3.75mmol)，在柱層析(硅膠，2％MeOH在二氯甲烷中)后，得到為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(1，2，4-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺(380mg)。如對(duì)實(shí)施例8描述的那樣，用在CH2Cl2中的TFA酸處理該化合物，得到為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(224mg)，m.p.208-209°。δH(d6DMSO)10.67(1H，bs)，9.21(1H，s)，8.97(1H，s)，8.20(1H，s)，7.97-7.94(4H，m)，7.82(2H，d，J 9.1 Hz)，7.76(2H，d，J 8.9 Hz)，2.09(2H，bs)和1.41(6H，s)。
以與實(shí)施例1的相應(yīng)原料相似的方法，從4-(1，2，3-三唑-1-基)苯胺(1.42g，8.87mmol)、氨腈(635mg，15.1mmol)和濃HNO3(645ml，9.67mmol)，制備為白色固體的4-(1，2，3-三唑-1-基)苯基胍硝酸鹽(1.0g)，m.p.＞320°。
在常壓和室溫下，通過在乙醇(75ml)中經(jīng)10％披鈀木炭(500mg)將4-(1，2，3-三唑-1-基)硝基苯(1.86g，9.78mmol)氫化20h，制備在以上方法中使用的苯胺。通過Celite過濾除去催化劑且濃縮濾液，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(1.43g)，m.p.139-140°。實(shí)施例134-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3，5-二氟苯基)嘧啶-2-胺從3，5-二氟苯基胍硝酸鹽(983mg，2mmol)、1-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯酮(1.5g，4.2mmol)和粉末氫氧化鈉(176mg，4.3mmol)，在柱層析(硅膠，2％MeOH在二氯甲烷中)后，得到為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3，5-二氟苯基]嘧啶-2-胺(510mg)。如對(duì)于實(shí)施例8描述的那樣，用在CH2Cl2中的TFA酸處理該化合物，得到為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(332mg)，m.p.209°。δH(d6DMSO)9.06(1H，s)，8.00(2H，d，J 8.5 Hz)，7.78(2H，d，J 8.5 Hz)，7.62-7.54(2H，m)，6.93-6.86(1H，m)和1.60(6H，s)。
在70°下，通過將4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-對(duì)甲苯-磺酰基氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(500mg，0.8mmol)與哌啶(400ml，4mmol)在DMF(5mL)中攪拌4h，制備在以上方法中使用的嘧啶。然后，減壓下除去溶劑且把生成的殘余物再次溶于CH2Cl2中，用飽和NaHCO3水溶液、飽和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并減壓下濃縮。使生成的殘余物經(jīng)歷柱層析法(硅膠7％MeOH在二氯甲烷中)，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(392mg)，m.p.142°。δH(CDCl3)8.67(1H，s)，8.05(2H，d，J 8.3 Hz)，7.58-7.55(4H，m)，7.22(2H，d，J 8.5 Hz)，5.00(1H，s)，2.88-2.82(2H，m)，2.63-2.52(6H，m)，1.66(12H，bs)和1.48-1.39(9H，m)。
在環(huán)境溫度下，通過將4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-羥基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(4.02g，8.5mmol)、4-甲苯磺酰氯(2.43g，12.7mmol)和4-二甲基氨基吡啶(150mg)在二氯甲烷(70ml)中攪拌12h，制備在以上方法中使用的甲苯磺酸酯。用二氯甲烷(70ml)稀釋反應(yīng)物，且用2M鹽酸(150mL)洗滌。分離有機(jī)相且用2M鹽酸、鹽水和水洗滌，干燥(MgSO4)且減壓下濃縮。使生成的殘余物經(jīng)歷柱層析法(硅膠40％乙酸乙酯-己烷)，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(3.6g)，134°。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.05(2H，m)，7.72(2H，d，J 8.4 Hz)，7.57(4H，t，J 8.5 Hz)，7.29(2H，d，J 8.0 Hz)，7.15(2H，d，J 8.5 Hz)，5.00(1H，s)，4.22(2H，t，J 7.1 Hz)，2.96(2H，t，J 7.1 Hz)，2.42(3H，s)，1.67(6H，bs)和1.56(9H)。
從4-(2-羥基乙基)苯基胍硝酸鹽(3.73g，15.4mmol)、1-[4-(1-叔丁氧基-羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯酮(5.0g，14.0mmol)和粉末氫氧化鈉(672mg，16.8mmol)，制備在以上方法中使用的嘧啶，得到為淺黃色固體的所需的產(chǎn)物(7.7g)，m.p.114°。
除非另外指明，以與實(shí)施例24的方法類似的方法，制備以下實(shí)施例25-41的化合物和其相應(yīng)的中間體實(shí)施例254-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]嘧啶-2-胺從4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(370mg，0.71mmol)，得到為淺黃色固體的標(biāo)題化合物(290mg)，m.p.184°。δH(d6DMSO)10.51(1H，s)，8.90(1H，s)，8.02(2H，d，J 8.0 Hz)，7.73(2H，d，J 8.0 Hz)，7.62(2H，d，J8.0 Hz)，7.41(1H，s)，7.13(3H，m)，6.81(1H，s)，4.22(2H，t，J 7.0 Hz)，3.0(2H，t，J 7.0 Hz)和1.6(6H，s)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(500mg，0.8mmol)和咪唑(272mg，4.0mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(380mg)，m.p.124°。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.04(2H，m)，7.66-7.56(4H，m)，7.32(1H，s)，7.04(3H，m)，6.85(1H，t，J 1.3 Hz)，5.03(1H，s)，4.18(2H，t，J 7.0 Hz)，3.05(2H，t，J 7.0 Hz)，1.66(6H，bs)和1.39(9H，bs)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(500mg，0.8mmol)和嗎啉(350μL，4.0mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(440mg)，m.p.200°。δH(CDCl3)8.66(1H，s)，8.05(2H，d，J 8.3 Hz)，7.69(1H，s)，7.58-7.55(4H，m)，7.21(2H，d，J 8.5 Hz)，5.04(1H，s)，3.74(4H，t，J 4.7Hz)，2.83-2.78(2H，m)，2.63-2.57(2H，m)，2.53(4H，t，J 4.7 Hz)，1.65(6H，bs)和1.38(9H，bs)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(500mg，0.80mmol)和2-乙基咪唑(383mg)，制備4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-(2-乙基咪唑-1-基)乙基]苯基}嘧啶-2-胺，得到為黃色固體的標(biāo)題化合物(400mg)，m.p.210°。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.05(2H，d，J 8.4 Hz)，7.60-7.56(5H，bm)，7.05(2H，d，J 8.4 Hz)，6.94(1H，d，J 1.3Hz)，6.76(1H，d，J 1.3 Hz)，5.00(1H，s)，4.07(2H，t，J 7.1 Hz)，3.00(2H，t，J 7.1 Hz)，2.49(2H，q，J 7.5 Hz)，1.67(6H，bs)，1.39-1.23(9H，bm)和0.88(3H，t，J 7.0 Hz)。實(shí)施例284-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-4-(2-咪唑-1-基乙氧基)苯基嘧啶-2-胺從4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙氧基)苯基]嘧啶-2-胺(857mg，1.59mmol)，得到為黃色固體的標(biāo)題化合物(566mg)，m.p.208-209°。δH(d6DMSO)10.32(1H，bs)，8.86(1H，s)，7.89(2H，d，J 8.5 Hz)，7.73(2H，d，J 8.5 Hz)，7.67-7.63(3H，m)，7.23(1H，s)，6.94-6.88(3H，m)，4.33(2H，t，J 5.0 Hz)，4.22(2H，t，J 5.1 Hz)，2.01(2H，bs)和1.40(6H，s)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基-乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[(2-對(duì)甲苯-磺酰氧基)乙氧基]苯基}嘧啶-2-胺(2.0g，3.1mmol)和咪唑(1.02g，15mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基-乙氧基)苯基]嘧啶-2-胺(870mg)。δH(d6DMSO)10.34(1H，s)，8.88(1H，s)，7.90(2H，d，J 8.5 Hz)，7.68-7.64(3H，m)，7.53(2H，d，J 8.5 Hz)，7.31(1H，bs)，7.24(1H，t，J 1.1 Hz)，6.93(2H，d，J 9.0 Hz)，6.89(1H，t，J 1.0 Hz)，4.35(2H，t，J 5.2 Hz)，4.23(2H，t，J 5.2 Hz)，1.54(6H，s)和1.34(9H，bs)。
從4-[4-(1-叔丁氧基-羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-嘧啶-2-胺(2.1g，4.29mmol)和4-甲苯磺酰氯(1.24g，6.5mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[(2-對(duì)甲苯磺酰氧基)乙氧基]苯基}嘧啶-2-胺(2.10g)，m.p.145-146°。
從1-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-3-二甲基氨基丙烯酮(2.16g，8.0mmol)、4-(2-羥基乙氧基)苯基胍硝酸鹽(2.08g，8.0mmol)和氫氧化鈉(320mg，8.0mmol)，制備為淺綠色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-嘧啶-2-胺(2.28g)，m.p.126-127°。δH(CDCl3)8.64(1H，s)，8.06-8.02(2H，m)，7.58-7.51(5H，m)，6.97-6.94(2H，m)，5.03(1H，bs)，4.14(2H，t，J 5.2 Hz)，4.00-3.95(2H，bm)，2.12(1H，bs)，1.68(6H，s)和1.38(9H，bs)。
通過將4-(2-羥基乙氧基)苯胺(38.0g，0.25mmol)、在25mL水中的氨腈(17.67g，0.421g)和濃HNO3(17.8mL，0.27mmol)在乙醇(350mL)中的溶液加熱24h，制備在以上方法中使用的胍。把反應(yīng)物冷卻至0°并用乙醚(350mL)稀釋。經(jīng)過濾收集生成的固體并干燥，得到為紅紫色固體的所需的物質(zhì)(42.45g)。δH(d6DMSO)9.34(1H，s)，7.18(4H，bs)，7.16-7.12(2H，m)，7.01-6.96(2H，m)，4.85(1H，t，J 5.3 Hz)，3.98(2H，t，J 5.2 Hz)和3.70(2H，t，J 5.0 Hz)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(500mg，0.84mmol)和嗎啉(293μL，3.36mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(413mg)。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.06(2H，d，J 8.2 Hz)，7.58-7.51(5H，m)，7.30(1H，t，J 7.8 Hz)，7.00(1H，d，J 7.7 Hz)，5.04(1H，bs)，3.76-3.73(4H，m)，2.86-2.81(2H，m)，2.66-2.61(2H，m)，2.55-2.52(4H，m)，1.65(6H，s)和1.39(9H，bs)。
從4-[4-(1-叔丁氧基-羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-羥基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(880mg)和4-甲苯磺酰氯(572mg，3.0mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(945mg)。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.06(2H，d，J 7.9 Hz)，8.06(2H，d，J 7.9 Hz)，7.60-7.53(4H，m)，7.43(1H，bs)，7.29-7.24(3H，m)，6.90(1H，d，J 7.0 Hz)，5.04(1H，bs)，4.26(2H，t，J 6.8 Hz)，2.98(2H，t，J 7.0 Hz)，2.39(3H，s)，1.66(6H，s)和1.39(9H，bs)。
從4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基-乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(羥基乙氧基)苯基]嘧啶-2-胺(2.0g，5.6mmol)、3-(2-羥基乙基)苯基胍硝酸鹽(1.6g，5.6mmol)和氫氧化鈉(336mg，8.4mmol)，制備為黃色固體的4-[4-(1-叔丁氧基羰基氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-羥基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(980mg)，m.p.164-164°。δH(CDCl3)8.66(1H，s)，8.05(2H，d，J 8.4 Hz)，7.71(1H，bs)，7.59-7.51(4H，m)，7.32(1H，t，J7.9 Hz)，7.01(1H，d，J 7.7 Hz)，5.06(1H，bs)，3.89(2H，t，J 6.5 Hz)，2.89(2H，t，J 6.5 Hz)，1.65(6H，s)和1.39(9H，bs)。
從5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-羥基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(3.30g，10.43mmol)和4-甲苯磺酰氯(2.19g，11.47mmol)，制備為淺黃色固體的5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(3.91g)，m.p.134-135°。δH(d6DMSO)8.69(1H，s)，8.05(2H，dd，J 6.0，2.0 Hz)，7.72(2H，d，J 8.3 Hz)，7.61-7.51(6H，m)，7.29(2H，d，J 8.1 Hz)，7.14(2H，d，J 8.5 Hz)，4.21(2H，t，J 7.0 Hz)，2.95(2H，t，J 7.0 Hz)和2.41(3H，s)。
從1-苯基-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(4.0g，20mmol)、4-(2-羥基乙基)苯基-胍硝酸鹽(4.24g，20mmol)和氫氧化鈉(800mg，20.0mmol)，制備為黃色固體的5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-羥基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(3.50g)，m.p.142-143°。δH(CDCl3)8.68(1H，s)，8.03(2H，dd，J 6.0，2.0 Hz)，7.66(1H，bs)，7.59-7.51(5H，m)，7.23(2H，m)，3.88(2H，t，J 6.5 Hz)，2.87(2H，t，J 6.5 Hz)和1.62(2H，bs)。
從5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-嘧啶-2-胺(1.42g，4.28mmol)和4-甲苯磺酰氯(1.23g，6.4mmol)，制備為黃色固體的5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙氧基)苯基]嘧啶-2-胺，m.p.147°。δH(CDCl3)8.67(1H，s)，8.05-8.03(2H，m)，7.83(2H，dd，J 6.5，1.8Hz)，7.58-7.49(6H，m)，7.35(2H，dd，J 8.6，0.9 Hz)，6.83(2H，d，J 0.9 Hz)，4.38-4.36(2H，m)，4.18-4.16(2H，m)和2.45(3H，s)。
從1-苯基-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(1.41g，7.0mmol)、4-(2-羥基-乙氧基)苯基胍硝酸鹽(2.0g，7.7mmol)和氫氧化鈉(340mg，8.4mmol)，制備5-氰基-4-苯基-N-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]嘧啶-2-胺，得到黃色固體(1.54g)，m.p.151°。δH(CDCl)8.67(1H，s)，8.04(2H，d，J 7.7 Hz)，7.58-7.52(5H，m)，7.45(1H，s)，6.95(2H，dd，J 6.7，23 Hz)，4.12-4.09(2H，m)，4.00-3.97(2H，m)和2.05-2.01(1H，m)。
從5-氰基-N-[4-(2-羥基乙氧基)苯基]-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺(8.02g，23.7mmol)和4-甲苯磺酰氯(9.0g，47.4mmol)，制備5-氰基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙氧基)苯基]-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺，得到黃色固體(4.97g)，m.p.160°。δH(d6DMSO)10.32(1H，s)，8.84(1H，s)，8.26(1H，d，J 3.9 Hz)，7.99(1H，d，J 5.0 Hz)，7.80(2H，d，J 8.3 Hz)，7.64(2H，m)，7.47(2H，d，J 8.3 hz)，7.33(1H，t，J 4.5 Hz)，6.85(2H，d，J 9.0 Hz)，4.33(2H，t，J 4.0 Hz)，4.15(2H，m)和2.41(3H，s)。
從5-氰基-N-[4-(2-羥基乙基)苯基]-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺(1.39g，4.30mmol)和4-甲苯磺酰氯(1.23g，6.5mmol)，制備為黃色固體的5-氰基-4-噻吩-2-基-N-[4-(2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基)苯基]嘧啶-2-胺(1.15g)，m.p.190°。δH(CDCl3)8.62(1H，s)，8.43(1H，dd，J 3.1，1.0 Hz)，7.66-7.61(3H，m)，7.45(1H，s)，7.28-7.22(3H，m)，3.73(2H，t，J 7.3 Hz)和3.09(2H，t，J 7.3 Hz)。
從1-噻吩-2-基-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(2.17g，10.5mmol)、4-(2-羥基-乙基)苯基胍硝酸鹽(2.8g，11.6mmol)和粉末氫氧化鈉(505mg)，制備為黃色固體的5-氰基-N-[4-(2-羥基乙基)苯基]-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺，m.p.178°。δH(d6DMSO)10.36(1H，s)，8.86(1H，s)，8.26(1H，m)，8.00(1H，d，J 4.1 Hz)，7.64(2H，m)，7.33(1H，dd，J 4.0，1.0 Hz)，7.20(2H，d，J 8.4 Hz)，4.60(1H，t，J 5.2 Hz)，3.58(2H，t，J 7.0 Hz)和2.69(2H，t，J 7.0 Hz)。
以與實(shí)施例1化合物相似的方法，制備以下實(shí)施例42-71的化合物
從3-(氰基乙?；?吲哚(4.0g，mmol)和二甲基甲酰胺縮二甲醇(4.1mL，23.9mmol)，制備為黃色固體的1-吲哚-3-基-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(2.4g)，m.p.187-188°。δH(d6DMSO)11.73(1H，bs)，8.26(1H，s)，8.12(1H，dd，J 6.8，1.3 Hz)，7.98(1H，s)，7.47-7.44(1H，m)，7.20-7.09(2H，m)，3.35(3H，s)和3.26(3H，s)。
通過將吲哚(11.71g，0.10mmol)和氰基乙酸鉀(24.6g，0.2mmol)懸浮于乙腈(300mL)中，并向其中加入甲磺酰氯(7.7mL，0.1mmol)，制備3-(氰基乙?；?吲哚。在環(huán)境溫度下，攪拌生成的混合物1h，然后加入碳酸鈉(10g在50mL水中)。5分鐘后，分離有機(jī)相，干燥(Na2SO4)并減壓下濃縮。將殘余物從乙醇(100mL)中重結(jié)晶，得到為橙色固體的所需的物質(zhì)(4.31g)，m.p.226-227°。δH(d6DMSO)12.20(1H，bs)，8.38(1H，d，J 2.8 Hz)，8.14-8.10(1H，m)，7.53-7.50(1H，m)，7.25-7.21(2H，m)和4.49(2H，s)。
從2-氰基乙?；邕?400mg，2.94mmol)和二甲基甲酰胺縮二甲醇(1.5mL)，制備為黃色固體的2-氰基-3-二甲基氨基-1-噻唑-2-基丙烯-1-酮，m.p.126°。δH(CDCl3)8.89(1H，s)，7.96(1H，d，J 3.3 Hz)，7.60(1H，d，J 3.1 Hz)，3.54(3H，s)和3.35(3H，s)。
在80°下，通過將2-乙氧基羰基-噻唑(1.08g，6.88mmol)、乙腈(360mL，7.57mmol)和氫化鈉[60％于油中的懸浮液](303mg，7.57mmol)在苯(20mL)和DMF(2mL)中的溶液加熱90分鐘，制備2-氰基乙?；邕?。冷卻下，經(jīng)過濾收集生成的沉淀并溶于水(60mL)中。把溶液傾入到冷的2M鹽酸(100mL)中且經(jīng)過濾收集生成的沉淀，得到為黃色固體的所需的產(chǎn)物(200mg)，m.p.109°。δH(CDCl3)8.06(1H，d，J 2.9 Hz)，7.82(1H，d，J 2.9 Hz)和4.32(2H，s)。
從3-氰基乙?；绶?7.64g，50.56mmol)和二甲基甲酰胺縮二甲醇(20mL，152mmol)，制備為黃色固體的2-氰基-3-二甲基氨基-1-噻吩-3-基丙烯-1-酮(6.6g)，m.p.134°。δH(CDCl3)8.27(1H，dd，J 3.0，1.3 Hz)，8.00(1H，s)，7.61(1H，dd，J 5.0 Hz)，7.27(1H，dd，J 5.0，3.0 Hz)，3.48(3H，s)和3.29(3H，s)。
以與實(shí)施例8的類似原料相似的方法，從3-異噁唑-5-基噻吩(8.15g，53.9mmol)和新鮮制備的乙醇鈉溶液[1.24g，53.9mmol鈉在乙醇(100mL)中]，制備3-氰基乙?；绶?，得到為橙色固體的所需的物質(zhì)(7.76g)，δH(CDCl3)8.16(1H，dd，J 5.0，1.3 Hz)，7.55(1H，dd，J 5.0，2.3 Hz)，7.40(1H，dd，J 5.0，2.3 Hz)和3.96(2H，m)。
以與實(shí)施例8的類似原料相似的方法，從3-二甲基氨基-1-噻吩-3-基丙烯-1-酮(10g，55.2mmol)和羥胺鹽酸鹽(4.2g，60.7mmol)，制備3-異噁唑-5-基噻吩，得到為無色油的所需的產(chǎn)物(8.15g)，δH(CDCl3)8.18(1H，d，J 1.9 Hz)，7.72(1H，t，J 2.1 Hz)，7.34(2H，d，J 2.1 Hz)和6.29(1H，d，J 1.8 Hz)。
從3-乙?；绶?15.0g)和二甲基甲酰胺縮二甲醇(47.5mL，357mmol)，制備為黃色固體的3-二甲基氨基-1-噻吩-3-基丙烯-1-酮(14g)，m.p.98°。δH(CDCl3)7.90(1H，dd，J 3.0，1.0 Hz)，7.76(1H，d，J12.4 Hz)，7.53(1H，dd，J 5.9，1.0 Hz)，7.28-7.25(1H，m)，5.57(1H，d，J12.4 Hz)和3.03(6H，bs)。
從4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙基]苯胺(5.75g，30.4mmol)、氨腈(2.17g，51.7mmol在水[2mL]中)和濃HNO3(2.2mL，33.3mmol)，制備為桃紅色固體的4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙基]苯基胍硝酸鹽，m.p.183°。δH(d6DMSO)9.40(1H，bs)，8.33(1H，s)，7.94(1H，s)，7.27-7.19(4H，m)，7.14-7.11(2H，m)，4.42(2H，t，J 7.2 Hz)和3.11(2H，t，J 7.2 Hz)。
以與實(shí)施例12的類似中間體相似的方法，從4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙基]-硝基苯(7.0g，32.1mmol)，制備為灰白色固體的4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙基]苯胺(5.8g)，m.p.79°。δH 7.93(1H，s)，7.73(1H，s)，6.79(2H，d，J 8.5 Hz)，6.58(2H，d，J 8.5 Hz)，4.31(2H，t，J 7.0 Hz)，3.30(2H，bs)和3.03(2H，t，J 7.0 Hz)。
從4-[2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基]硝基苯(2.77g，8.6mmol)和1，2，4-三唑鈉鹽(942mg，10.3mmol)，制備為桃紅色固體的4-[2-(1，2，4-三唑-1-基)乙基]硝基苯(2.0g)，m.p.97°。δH(CDCl3)8.12(2H，d，J 9.0 Hz)，8.00(1H，s)，7.80(1H，s)，7.20(2H，m)，4.44(2H，t，J 7.0 Hz)和3.32(2H，t，J 7.0 Hz)。
從4-硝基苯乙醇(20.0g，120mmol)和4-甲苯磺酰氯(34.2g，180mmol)，制備為黃色固體的4-[2-對(duì)甲苯磺酰氧基乙基]硝基苯(3.0g)，m.p.133°。δH(CDCl3)8.10(2H，d，J 9.0 Hz)，7.66(2H，d，J 9.0 Hz)，7.26(4H，m)，4.29(2H，t，J 6.0 Hz)，3.07(2H，t，J 6.0 Hz)和2.43(3H，s)。
以與實(shí)施例7的標(biāo)題化合物相似的方法，從4-(2-氯吡啶-5-基)-5-氰基-N-(4-氟苯基)-嘧啶-2-胺(764mg，2.3mmol)和對(duì)-甲氧基芐基胺(644mg，4.6mmol)，制備為黃色固體的5-氰基-N-(4-氟苯基)-4-[2-(4-甲氧基芐基氨基)吡啶-5-基]嘧啶-2-胺(432mg)。δH(d6DMSO)10.35(1H，s)，8.82(1H，s)，8.77(1H，d，J 2.3 Hz)，8.04(1H，dd，J 8.9，2.3 Hz)，7.84(1H，t，J 5.6 Hz)，7.77-7.74(1H，m)，7.28(2H，d，J 8.6 Hz)，7.21(2H，t，J 8.9 Hz)，6.90(2H，d，J 8.6 Hz)，6.66(1H，d，J 8.9 Hz)，4.51(2H，s)和3.73(3H，s)。
從1-(2-氯吡啶-5-基)-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(8.0g，36mmol)、4-氟苯基胍硝酸鹽(8.23g，37.8mmol)和氫氧化鈉(1.49g，37.8mmol)，制備為黃色固體的4-[2-氯吡啶-5-基]-5-氰基-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺(7.23g)。δH(d6DMSO)10.66(1H，bs)，9.00(1H，s)，8.95(1H，d，J 2.3 Hz)，8.38(1H，dd，J 8.4，2.5 Hz)，7.80(1H，d，J 8.4 Hz)，7.77-7.74(2H，m)和7.24-7.20(2H，m)。
通過將3-羥基-3-(4-(咪唑-1-基甲基)苯基)丙烯腈鋰鹽(2.16g，10.0mmol)加入到MeOH-乙酰氯(15mL-1mL)溶液中，隨后加入二甲基甲酰胺縮二甲醇(1.3mL)，制備2-氰基-3-二甲基氨基-1-[(4-咪唑-1-基甲基)苯基]丙烯-1-酮。在室溫下攪拌反應(yīng)物1h，然后減壓下濃縮。在乙酸乙酯和飽和Na2CO3之間分配生成的殘余物。干燥(MgSO4)有機(jī)相且減壓下濃縮。將殘余物層析(硅膠，5-8％MeOH-CH2C12)后，得到為黃色油的所需的物質(zhì)(260mg)。δH(300 MHz)7.94(1H，s)，7.75(2H，dt，J 8.3，1.8 Hz)，7.54(1H，s)，7.16(2H，d，J 8.5 Hz)，7.08(1H，t，J1.0 Hz)，6.89(1H，t，J 1.3 Hz)，5.14(2H，s)，3.46(3H，s)和3.28(3H，s)。
3-羥基-3-(4-(咪唑-1-基甲基)苯基)丙烯腈鋰鹽的制備如下在氮?dú)夥障拢?78°下，將乙腈(1.04mL，20.0mmol)加入到雙三甲基氨化鋰(20mL 1.0M在THF中，20.0mmol)中，且將生成的混合物攪拌20分鐘。滴加4-(咪唑-1-基甲基)苯甲酸甲酯(2.16g，10mmol)在THF中的溶液，然后在3h期間內(nèi)，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝?。用乙?30mL)稀釋反應(yīng)物且經(jīng)過濾收集生成的固體，用乙醚(3×30mL)進(jìn)一步洗滌。真空干燥固體，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(2.65g)并且無須純化即可使用。δH(d6DMSO)7.72(1H，s)，7.59(2H，d，J 8.1 Hz)，7.15(1H，s)，7.10(2H，d，J 8.2 Hz)，6.88(1H，s)，5.13(2H，s)和3.93(1H，s)。實(shí)施例795-氰基-N-[3-氟苯基]-4-[4-(咪唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺以與實(shí)施例1的化合物相似的方法，從2-氰基-3-二甲基氨基-1-(4-咪唑-1-基苯基)丙烯-1-酮(480mg，1.8mmol)、3-氟苯基胍硝酸鹽(480mg，1.98mmol)和氫氧化鈉(87mg)，得到為黃色固體的標(biāo)題化合物(412mg)，m.p.300°。δH(d6DMSO)10.73(1H，s)，9.03(1H，s)，8.44(1H，s)，8.12(2H，d，J 9.0 Hz)，7.96-7.90(3H，m)，7.80(1H，d，1 Hz)，7.55(1H，d，J 8.0 hz)，7.35(1H，q，J 9.0 Hz)，7.16(1H，d，J 1.0 Hz)和6.90(1H，m)。
以與實(shí)施例79的類似原料相似的方法，制備為黃色固體的2-氰基-3-二甲基氨基-1-(4-咪唑-1-基苯基)丙烯-1-酮(970mg)，m.p.165°。δH(CDCl3)8.01(1H，s)，7.96-7.92(3H，m)，7.48-7.45(2H，m)，7.33(1H，t，J 1.4 hz)，7.23(1H，d，J 1.0 Hz)，3.52(3H，s)和3.34(3H，s)。
以與實(shí)施例8的類似原料相似的方法，從5-(4-咪唑-1-基苯基)異噁唑(1.22g，5.78mmol)和在乙醇(15mL)中的鈉(133mg，5.78mmol)，制備為米黃色固體的3-羥基-3-(4-咪唑-1-基苯基)丙烯腈鈉鹽(1.14g)，m.p.286°。
在環(huán)境溫度下，通過用羥胺-O-磺酸(831mg，7.35mmol)處理3-二甲基氨基-1-[(4-咪唑-1-基)苯基]丙烯-1-酮(1.64g，6.8mmol)在MeOH中的溶液16h，制備5-(4-咪唑-1-基苯基)異噁唑。加入另外量的羥胺-O-磺酸(831mg，7.35mmol)并繼續(xù)攪拌3h。然后，用飽和NaHCO3溶液處理反應(yīng)物，經(jīng)過濾收集生成的溶液并用水和乙醚洗滌，得到為桃紅色固體的所需的物質(zhì)(1.08g)，m.p.168°。δH(d6DMSO)8.67(1H，d，J 1.8 Hz)，3.89(1H，s)，8.03-7.99(2H，m)，7.86-7.84(3H，m)，7.14(1H，s)和7.10(1H，d，J 1.9 Hz)。實(shí)施例80N-[3-(5-氰基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-基氨基)苯基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺將N-3-氨基苯基-5-氰基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺(300mg，1.0mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基苯甲酸鋰鹽(300mg，1.0mmol)在DMF(10mL)中的溶液用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(307mg，1.6mmol)、1-羥基苯并三唑(216mg，1.6mmol)和N-甲基嗎啉(350ml，3.2μmol)處理并在環(huán)境溫度下攪拌生成的混合物48h。然后，減壓下濃縮反應(yīng)物并在乙酸乙酯和飽和鹽水之間分配生成的殘余物。干燥(MgSO4)有機(jī)相，在減壓下濃縮并把生成的殘余物從乙酸乙酯-乙醚-MeOH(4∶4∶1)中重結(jié)晶，得到為無色固體的標(biāo)題化合物(312mg)，m.p.208-209°。δH(d6DMSO)10.48(1H，bs)，10.23(1H，s)，8.89(1h，s)，8.28(1H，d，J 3.5 Hz)，8.13(1H，m)，7.98(1H，d，J 4.8 Hz)，7.90(2H，d，J8.2 Hz)，7.60(1H，bs)，7.43(3H，d，J 8.2 Hz)，7.36-7.30(2H，s)，3.52(2H，s)，2.37(8H，bs)和2.15(3H，s)。
回流下，通過加熱5-氰基-N-3-硝基苯基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺(2.77g，8.57mmol)和氯化錫(II)二水合物(7.73g，34.05mmol)在乙醇(160mL)中的溶液18h，制備N-3-氨基苯基-5-氰基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺。冷卻下，減壓下濃縮反應(yīng)物且在CH2Cl2和2M NaOH之間分配。干燥(MgSO4)有機(jī)相且蒸發(fā)，得到為黃色固體的所需的物質(zhì)(320mg)，m.p.221-222°。δH(d6DMSO)10.16(1H，s)，8.83(1H，s)，8.24(1H，d，J 3.9 Hz)，7.97(1H，d，J 5.1 Hz)，7.32(1H，dd，J 5.0，4.0 Hz)，6.97(3H，bm)，6.31(1H，m)和5.04(2H，bs)。
從2-氰基-3-二甲基氨基-1-噻吩-2-基丙烯-1-酮(3.20g，15.51mmol)、3-硝基苯基胍硝酸鹽(3.74g，15.53mmol)和氫氧化鈉(652mg，7.82mmol)，制備5-氰基-N-3-硝基苯基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-胺，得到為灰白色固體的所需的物質(zhì)(841mg)，m.p.275-277°。δH(d6DMSO)10.87(1H，bs)，8.98(1H，s)，8.90(1H，bs)，8.31-8.29(1H，m)，8.09-8.05(2H，m)，7.91(1H，dd，J 7.7，2.0 Hz)，7.64(1H，t，J 8.1 Hz)和7.37-7.35(1H，m)。
在室溫下，通過將4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基苯甲酸甲酯(845mg，3.41mmol)和氫氧化鋰單水合物(300mg，7.15mmol)在THF-H2O[50％v/v](14mL)中攪拌16h，制備4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基苯甲酸鋰。減壓下除去溶劑，得到為白色固體的所需的物質(zhì)(799mg)，m.p.230°。δH(d6DMSO)7.80(2H，d，J 8.1 Hz)，7.16(2H，d，J 8.1 Hz)，3.41(2H，s)，2.30(8H，bs)和2.12(3H，s)。
通過將(4-溴甲基)苯甲酸甲酯(2.3g，10.0mmol)和1-甲基哌嗪(1.0g，10.0mmol)在DMF(10mL)中加熱3h，制備4-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基苯甲酸甲酯。減壓下濃縮反應(yīng)物且高真空下干燥殘余物，得到為白色固體的所需的產(chǎn)物(1.2g)，m.p.152°。δH(d6DMSO)7.90(2H，d，J 8.2 Hz)，7.43(2H，d，J 8.2 Hz)，3.83(3H，s)，2.67(4H，bs)，2.47(4H，bs)和2.40(3H，s)。
在室溫下，于1h內(nèi)，通過用亞硝酸鈉(2.82g，40.8mmol)在水(30ml)中的溶液處理2-氨基-5-氰基-4-苯基嘧啶(2.0g，10.2mmol)在50％濃H2SO4-水(v/v)中的溶液，制備嘧啶-2-酮。在室溫下，攪拌反應(yīng)物過夜，之后加入另外的亞硝酸鈉(2.82g，10.2mmol)并繼續(xù)攪拌3h。之后，加入氫氧化銨(33％水溶液)至pH9，并收集生成的沉淀且干燥，得到為白色固體的所需的物質(zhì)(2.2g)，m.p.220-222°。
以與實(shí)施例1的化合物相似的方法，從碳酸胍(1.57g，17.5mmol)、1-苯基-2-氰基-3-二甲基氨基丙烯-1-酮(3.5g，17.5mmol)和氫氧化鈉(720mg，19.3mmol)，制備為灰白色固體的2-氨基-5-氰基-4-苯基嘧啶，m.p.147°。
用于兩種激酶的試驗(yàn)方法是相同的，只是在KDR激酶試驗(yàn)中整個(gè)過程所使用的稀釋劑為包含2mM MnCl2、2mM MnCl2、5mM DTT和0.05％Brij 35的20mM HEPES(pH7.25)，而在FGFr2試驗(yàn)中用10mM MnCl2替代2mM MnCl2和2mM MnCl2。
在包含1-10ng激酶、5μg/ml pEY(4∶1)(Sigma，UK)、1μM包含～50,000cpm[33P]ATP的ATP(Amersham Interational，UK)(Sigma，UK)和合適濃度下的受試抑制劑的總體積202μl中進(jìn)行試驗(yàn)。將受試抑制劑溶于DMSO中且加至以使試驗(yàn)中DMSO最終濃度不超過2％(v/v)。經(jīng)加入激酶起始試驗(yàn)并在室溫下孵育10分鐘后經(jīng)加入50μl的包含0.125M EDTA和10mM ATP的20mM HEPES(pH7.25)終止試驗(yàn)。將200μl等分試樣施加于包含100μl的30％(w/v)三氟乙酸(TCA)的微孔(UK)MAFC濾板的孔中。然后，將該板置于適宜的多支管中且連接于真空。完全除去液體后，真空下使用5體積(每次洗滌100μl)的10％(w/v)TCA和最終2體積(每次洗滌100μl)乙醇洗滌每個(gè)孔。然后封閉濾板的底部且將每孔100μl的Ultima Gold(Beckham，UK)閃爍體加入到每孔中。使用合適的閃爍計(jì)數(shù)器例如Wallac Trilux或Packard TopCount，測(cè)量放射活性。從與四參數(shù)邏輯斯諦方程擬合的對(duì)數(shù)劑量抑制曲線得到每一種抑制劑的IC50值。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明化合物具有大約1μM及以下的IC50值，最具有活性的化合物具有100nM及以下的IC50值。
在以下試驗(yàn)中，能夠測(cè)定本發(fā)明化合物的選擇性p56lck激酶試驗(yàn)使用RR-src肽(RRLIEDNEYTARG)和[γ-33P]ATP作為底物，測(cè)定p56lck的酪氨酸激酶活性。使用Geissler等(J.Biol.Chem.(1990)265，22255-22261)方法的改進(jìn)方法，完成對(duì)經(jīng)p56lck作用形成的33P-磷酸化肽的定量。
在包含10mM MgCl2、10mM MnCl2、0.05％Brij、1μM ATP(0.5μCi[γ-33P]ATP)和0.8mg/ml RR-src的20mM HEPES(pH7.5)中進(jìn)行所有試驗(yàn)。加入在二甲基亞砜(DMSO)中的抑制劑以使DMSO的最終濃度不超過1％且加入酶以使ATP消耗低于10％。在30℃下孵育15分鐘后，經(jīng)加入三分之一體積的終止劑(在dH2O中的0.25mMEDTA和33mM ATP)終止反應(yīng)。移出15μl等分試樣，在P-30濾板(filtermat)(Wallac，Milton，Keynes，UK)上點(diǎn)樣，且用1％乙酸和去離子水順序洗滌以除去ATP。加入Meltilex閃爍體(Wallac，Milton，Keynes，UK)后，在Betaplate閃爍計(jì)數(shù)器(Wallac，Milton，Keynes，UK)上經(jīng)對(duì)濾板閃爍計(jì)數(shù)，將已結(jié)合的33P-RR-src定量。
所得到的dpm，與p56lck產(chǎn)生的33P-RR-src的量成正比，用于測(cè)定每個(gè)化合物的IC50。IC50定義為減少33P-RR-src生成達(dá)到50％所需要的化合物濃度。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明化合物具有10μM及以上的IC50值。Zap-70激酶試驗(yàn)使用基于以上用于p56lck的捕捉試驗(yàn)，測(cè)定Zap-70的酪氨酸激酶活性。在最終濃度17μg/ml下，用聚Glu-Tyr(Sigma；Poole，UK)替代RR-src肽。將終止反應(yīng)液加入到濾板上后，使用三氟乙酸10％(w/v)替代乙酸作為洗滌試劑且閃爍計(jì)數(shù)前也在無水乙醇中進(jìn)行最終洗滌。如在以上p56lck試驗(yàn)中描述的那樣測(cè)定IC50值。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明化合物具有約10μM及以上的IC50值。EGFr激酶試驗(yàn)使用與p56lck激酶試驗(yàn)類似的方法，測(cè)定EGF受體(EGFr)的酪氨酸激酶活性，只是用由Amersham International plc(Little Chalfont，UK)得到的EGFr的肽底物替代RR-src肽且在制造商推薦的濃度下使用。如先前在p56lck試驗(yàn)中描述的那樣，測(cè)定IC50值。蛋白激酶C試驗(yàn)使用從Sigma化學(xué)公司(Poole，UK)得到的PKC和市場(chǎng)上可得到的試驗(yàn)系統(tǒng)(Amersham International plc，Amersham，UK)，測(cè)定對(duì)蛋白激酶C(PKC)的抑制劑活性。簡(jiǎn)言之，PKC催化ATP的γ-磷酸酯(32p)轉(zhuǎn)化為對(duì)PKC特異的肽上的蘇氨酸基團(tuán)。磷酸化的肽結(jié)合于磷酸纖維素紙且隨后經(jīng)閃爍計(jì)數(shù)定量。抑制劑的效力表達(dá)為(i)抑制50％所述酶活性需要的濃度(IC50)或(ii)由10μM抑制劑達(dá)到的百分抑制率。
在該試驗(yàn)中，本發(fā)明化合物具有大約10μM及以上的IC50值。
權(quán)利要求
1.一種式(1)的化合物及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物 其中Ar為任選取代的芳族或雜芳族基團(tuán)；R1為氫原子或直形或分支鏈的烷基；R2為-X1-R3基團(tuán)，其中X1為直接鍵或連接原子或基團(tuán)，且R3為任選取代的脂族、脂環(huán)族、雜脂族、雜脂環(huán)族、芳族或雜芳族基團(tuán)。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中R1為氫原子。
3.一種權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中R2為其中X1為直接鍵的基團(tuán)-X1R3。
4.一種權(quán)利要求3的化合物，其中R3為任選取代的芳族或雜芳族基團(tuán)，所述雜芳族基團(tuán)包含一或二個(gè)環(huán)內(nèi)氧、硫和/或氮原子。
5.一種權(quán)利要求4的化合物，其中R3為由一、二或三個(gè)-R4b或-Alk(R4b)m取代基任選取代的苯基、噻吩基、噻唑基、吲哚基或吡啶基，其中R4b為鹵素原子、或氨基(-NH2)、取代氨基、硝基、氰基、羥基(-OH)、取代羥基、甲?；Ⅳ然?-CO2H)、酯化羧基、硫羥基(-SH)、取代硫羥基、-COR5[其中R5為-Alk(R4)m、芳基或雜芳基]、-CSR5、-SO3H、-SO2R5、-SO2NH2、-SO2NHR5、-SO2N[R5]2、-CONH2、-CSNH2、-CONHR5、-CSNHR5、-CON[R5]2、-CSN[R5]2、-NHSO2H、-NHSO2R5、-N[SO2R5]2、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR5、-NHSO2N[R5]2、-NHCOR5、-NHCONH2、-NHCONHR5、-NHCON[R5]2、-NHCSR5、-NHC(O)OR5、或任選取代的脂環(huán)族、雜脂環(huán)族、芳基或雜芳基；Alk為直形或分支的C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基或C2-6亞炔基鏈，該鏈任選由一、二或三個(gè)-O-或-S-原子或選自-S(O)-、-S(O)2-或-N(R6)-[其中R6為氫原子或直形或分支鏈的C1-6烷基]的基團(tuán)間隔；且m為0或1、2或3的整數(shù)。
6.權(quán)利要求1至權(quán)利要求5中任何一項(xiàng)的化合物，其中Ar為苯基、吡啶基、吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹啉基、異喹啉基或苯并噁唑基，每個(gè)基團(tuán)由一、二或三個(gè)-R4或-Alk(R4)m取代基取代，其中R4為鹵原子、或氨基(-NH2)、取代氨基、硝基、氰基、羥基(-OH)、取代羥基、甲?；Ⅳ然?-CO2H)、酯化羧基、硫羥基(-SH)、取代硫羥基、-COR5[其中R5為-Alk(R4)m、芳基或雜芳基]、-CSR5、-SO3H、-SO2R5、-SO2NH2、-SO2NHR5、-SO2N[R5]2、-CONH2、-CSNH2、-CONHR5、-CSNHR5、-CON[R5]2、-CSN[R5]2、-NHSO2H、-NHSO2R5、-N[SO2R5]2、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR5、-NHSO2N[R5]2、-NHCOR5、-NHCONH2、-NHCONHR5、-NHCON[R5]2、-NHCSR5、-NHC(O)OR5、或任選取代的脂環(huán)族、雜脂環(huán)族、芳基或雜芳基；Alk為直形或分支的C1-6亞烷基、C2-6亞鏈烯基或C2-6亞炔基鏈，該鏈任選由一、二或三個(gè)-O-或-S-原子或選自-S(O)-、-S(O)2-或-N(R6)-[其中R6為氫原子或直形或分支鏈的C1-6烷基]的基團(tuán)間隔；且m為0或1、2或3的整數(shù)
7.一種權(quán)利要求6的化合物，其中Ar為由一、二或三個(gè)-R4或-Alk(R4)m取代基取代的苯基。
8.一種權(quán)利要求5至權(quán)利要求7中任何一項(xiàng)的化合物，其中-R4、-Alk(R4)m、-R4b或-Alk(R4b)m中的至少一個(gè)為-X1a(Alka)pNR7aR7b(其中X1a為直接鍵或連接原子或基團(tuán)，Alka如對(duì)Alk那樣定義，p為0或整數(shù)1且R7a和R7b可以相同或不同，各為氫原子或直形或分支的C1-6烷基)、-X1a(Alka)pNHet1(其中-NHet1為任選包含一個(gè)或更多個(gè)-O-或-S-原子或-N(R6)[其中R6為氫原子或直形或分支鏈的C1-6烷基]的任選取代的C3-7環(huán)氨基)或-X1a(Alka)pAr2基團(tuán)(其中Ar2為含氮雜芳族基團(tuán))。
9.一種化合物，它是5-氰基-4-苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]-4-(4-甲氧基羰基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-(4-羥基甲基苯基)-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4[(4-N，N-二乙基氨基甲基)苯基]-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[2-(3(R)-二甲基氨基吡咯烷-1-基)吡啶-5-基]-N-(吲唑-5-基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(吲唑-5-基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(2-N，N-二乙基氨基乙基氨基羧基)苯基]-4-苯基嘧啶-2-胺；5-氰基-4-苯基-N-{4-[2-(2-乙基咪唑-1-基)乙基]苯基}-嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-4(1，2，3-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-(2-乙基咪唑-1-基)乙基]苯基}嘧啶-2-胺；N-[3-(5-氰基-4-噻吩-2-基嘧啶-2-基氨基)苯基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯甲酰胺；4-[3-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-(2-甲基咪唑-1-基)乙基]苯基}嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[4-(咪唑-1-基)甲基]苯基-N-(3，4，5-三甲氧基苯基)嘧啶-2-胺；及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物。
10.一種化合物，它是4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4(1，2，4-三唑-1-基)苯基]嘧啶-2-胺；5-氰基-N-[4-(1，2，4-三唑-1-基)苯基]-4-[4-(1-二甲基氨基-1-甲基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-{4-[2-哌啶-1-基乙基]苯基}嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-咪唑-1-基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[4-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-[3-(2-嗎啉基乙基)苯基]嘧啶-2-胺；5-氰基-4-[4-(1-甲基-1-吡咯烷-1-基乙基)苯基]-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；5-氰基-4-{2-([2-(二乙基氨基)乙基]氨基)吡啶-5-基}-N-(4-氟苯基)嘧啶-2-胺；4-[4-(1-氨基-1-甲基乙基)苯基]-5-氰基-N-(3-氟苯基)嘧啶-2-胺；及其鹽、溶劑合物、水合物和N-氧化物。
11.一種藥用組合物，它包含與一種或更多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑一起的上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的化合物。
全文摘要
介紹式(1)嘧啶化合物及其鹽、溶劑合物、水合物和N－氧化物,其中Ar為任選取代的芳族或雜芳族基團(tuán);R
文檔編號(hào)A61P19/02GK1370152SQ0081180
公開日2002年9月18日 申請(qǐng)日期2000年6月19日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月18日
發(fā)明者M·J·巴徹勒, D·F·C·莫法特, J·M·達(dá)維斯, M·C·哈欽斯 申請(qǐng)人:細(xì)胞技術(shù)研究及開發(fā)有限公司