專利名稱：混合使用含有中鏈脂肪酸和外源脂肪分解酶的甘油三酸酯作為飼料添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有中鏈脂肪酸(MCFA；C4至C12)的甘油三酸酯(TG)與外源脂肪分解酶相混合作為用于動(dòng)物的飼料添加劑的用途，所述動(dòng)物尤其是早期斷奶豬，以防止和/或減輕在這時(shí)經(jīng)常遇到的問(wèn)題。在不使用經(jīng)典但有爭(zhēng)議的飼料添加劑的情況下，這導(dǎo)致了明顯的生長(zhǎng)性能的改進(jìn)。
背景技術(shù)：
為增加生產(chǎn)率和保持利益率，在養(yǎng)豬體系中仔豬的早期斷奶(3至4周齡)已成為一般性的作法。但早期斷奶卻給仔豬帶來(lái)了許多應(yīng)激反應(yīng)負(fù)擔(dān)，主要是環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)和免疫方面的，伴之有或多或少的飼料攝入量的明顯降低和身體儲(chǔ)備的動(dòng)用。消化不良和吸收不良時(shí)常使這種情況加劇，由于細(xì)菌的過(guò)度生長(zhǎng)和/或病毒感染導(dǎo)致消化不良。這些現(xiàn)象極大地影響了企業(yè)的利益率。有眾多的文獻(xiàn)涉及到這些問(wèn)題(例如VAN DER PEET，1992；PARTRIDGE，1993)。
處理這些問(wèn)題目前所采用的方法其目的在于使飼料適應(yīng)仔豬的消化能力，和/或通過(guò)使用特殊的組分(例如奶粉和衍生物，如乳清和乳糖、干燥血清、調(diào)味劑)來(lái)改進(jìn)飼料的可接受性。尤其通過(guò)加入易于消化或代謝的脂肪可獲得能量含量的增加。對(duì)于新生(ODLE，1999)和斷奶仔豬(CERA等，1989)均有文獻(xiàn)記載在這種背景下中鏈甘油三酸酯(MCTG)的效用。MCTG有效性的原因是它們的特別的消化和代謝性(fate)，這由BACH & BABAYAN.(1982)進(jìn)行了綜述。
通過(guò)在飼料中添加殺菌藥物(抗生素、化學(xué)療法，還稱為抗生素)可防止和/或處理消化不良。上述干預(yù)的結(jié)合效應(yīng)大多導(dǎo)致生長(zhǎng)性能有明顯改進(jìn)(也稱為“促進(jìn)生長(zhǎng)”)。根據(jù)具體情況，這種促進(jìn)生長(zhǎng)主要得力于改進(jìn)的飼料攝入量與更佳的飼料轉(zhuǎn)化率(＝kg飼料/kg增重)之間的結(jié)合。但在動(dòng)物生產(chǎn)體系中對(duì)使用抗素素來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)的擔(dān)憂日益增加。尤其是深切恐懼出現(xiàn)對(duì)在人類藥物中使用的某些做為最后手段的抗生素產(chǎn)生交叉抗藥性的危險(xiǎn)(CORPET，1996；WEGENER等，1998)。因而在歐盟這些抗生素(所謂的生長(zhǎng)促進(jìn)劑)多數(shù)均已被禁止或不久將被禁止，從而提出了對(duì)替代品的緊急需求。
因?yàn)橐话阏J(rèn)為在早期斷奶豬中消化病變主要由Gram細(xì)菌(尤其是大腸桿菌(E.coli)引起，而Gram+乳酸菌(雙歧桿菌、乳桿菌)對(duì)它們具有防護(hù)和/或拮抗作用，目前提出的替代品根據(jù)它們的抗大腸桿菌活性來(lái)選擇例如銅和鋅化合物，選擇的有機(jī)酸(短鏈脂肪酸(SCFA，甲酸、乙酸、丙酸)乳酸、富馬酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、山梨酸)，probiotics(主要為乳酸菌)和/或prebiotics(主要為雙歧因子(bifidogenic)低聚糖，所謂的NDO`S)。Cu和/或Zn化合物是有效的，但卻因其對(duì)環(huán)境的影響(污染)而是不可接受的。由pro-和/或prebiotics所得到原結(jié)果是不可預(yù)料的，一般來(lái)說(shuō)是失望的(CHESSON，1994)。
在其它動(dòng)物類及其它年齡組的動(dòng)物中存在相似的問(wèn)題。
目前而言，僅有SCFA和“傳統(tǒng)的”有機(jī)酸是最有希望的替代品(ROTH等，1998)。但需要相當(dāng)高的劑量，因而由于其高的費(fèi)用、腐蝕性和大大干擾仔豬飼料攝入量的不適口味而使它們的有效性受到限制。
脂肪酸(FA)總體及其鹽(肥皂)的抗菌作用已公知有數(shù)十年了。在KABARA(1978)中綜述中給出了對(duì)所選擇的FA(和衍生物)的抗菌作用的重新評(píng)價(jià)。其對(duì)月桂酸(C12，MCFA族成員)和衍生物給予了特別的關(guān)注。
其它的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)涉及MCFA在某些動(dòng)物類(如兔、山羊、馬)的奶的類脂物中的相對(duì)重要作用，而在其它種類中所述濃度是低的或甚至如在母豬奶中是不存在的(DIERICK，1998，文獻(xiàn)匯編，個(gè)人通信)。在多數(shù)哺乳動(dòng)物中存在源于舌或胃分泌的明顯程度或多或少的前十二指腸(preduodenal)(＝非胰腺來(lái)源)脂肪分解活性。這些脂肪酶的活性與共脂肪酶和膽汁酸的存在無(wú)關(guān)，在寬的pH值范圍內(nèi)具有活性且保持穩(wěn)定，并對(duì)乳脂中的MCFA具有優(yōu)先性(preference)。在反芻前小牛和兔中前十二指腸脂肪酶活性高，在仔豬中有中等活性，而在家禽中不存在該活性(MOREAU等，1988)。過(guò)量的MCFA可具有重要的副作用確實(shí)，有數(shù)據(jù)表明，在新生豬中它們可為催眠性的(ODLE，1999)，并是CCK的強(qiáng)刺激物，所述CCK是一種可干擾飼料攝入量的具有明顯飽腹活性的腸內(nèi)激素(LEPINE等，1989)。較低的飼料攝入量還可為游離MCFA的強(qiáng)烈(似山羊的)氣味和不良口味所致，但這方面的數(shù)據(jù)不足，是非結(jié)論性的。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明的目的在于提供用于動(dòng)物飼料的新的飼料添加劑，特別是用于早期斷奶的豬，所述添加劑可取代通用的(且有爭(zhēng)議的)抗生素和其它促生物劑。
本發(fā)明涉及飼料添加劑或飼料組合物，所述飼料添加劑是飼料添加劑(尤其是維生素、礦物質(zhì)、抗生素)與載體的預(yù)混物，用作全價(jià)飼料的部分(通常1至5％)，而飼料組合物是全價(jià)飼料中所用不同飼料組分的全部系列常用的另一名稱是“飼料配方”。
本發(fā)明提供了含有中鏈脂肪酸(MCFAC4至C12)的至少一種甘油三酸酯(TG)與至少一種外源脂肪分解酶(酯酶或脂肪酶)相結(jié)合用作動(dòng)物飼料的飼料添加劑的用途，特別是用于早期斷奶的豬，以防止和/或減輕在這種情況下時(shí)常遇到的喂養(yǎng)問(wèn)題。在飼料中添加TG與外源脂肪分解酶的這種組合物意外地導(dǎo)致可調(diào)節(jié)和穩(wěn)定胃腸微生物群落的胃中生理環(huán)境。這種作用加之以提供了易消化和代謝的能量源的事實(shí)，意外地導(dǎo)致明顯改進(jìn)了生長(zhǎng)，其與通用抗生素和其它促生長(zhǎng)劑所得到的促生長(zhǎng)作用相當(dāng)，而對(duì)動(dòng)物、飼料工業(yè)和消費(fèi)者無(wú)負(fù)面的副作用。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明

圖1涉及的是由實(shí)施例1得到的結(jié)果，對(duì)不同檢測(cè)的TG`s(圖1.a.椰子油，圖1.b.MCTG1，圖1.c.MCTG2，圖1.d.乳脂)和所選擇的酶表示了離體釋出的MCFA(以g/100gTG來(lái)表示)。對(duì)于TG基物使用了劑量為10000ppm的編號(hào)為L(zhǎng)1至L6的酶。在pH為2、3、4和5的緩沖介質(zhì)中對(duì)釋出的FA進(jìn)行了研究，所述pH值為在胃中活體內(nèi)常見(jiàn)的pH條件的代表。
圖2涉及的是在實(shí)施例2中得到的結(jié)果，并表示了在插入了導(dǎo)管的豬的胃內(nèi)容物中的總體和所選擇的細(xì)菌計(jì)數(shù)(以log10菌落形成單位、每g新鮮內(nèi)容物中CFU來(lái)表示)。圖2.a，2.b.和2.c.給出了分別含有5％椰子油、MCTG1和乳脂的飼料的結(jié)果。在各圖中的第一組分表示無(wú)脂肪分解酶所得到的結(jié)果，第二和第三組為分別添加L2和L5(以飼料計(jì)1000ppm)的結(jié)果。第一柱為總計(jì)數(shù)，接著的柱是乳酸菌、鏈球菌和大腸桿菌的菌數(shù)。該結(jié)果表明，對(duì)于各種TG，所述酶引起了總計(jì)數(shù)和乳酸菌菌數(shù)的下降。
圖3涉及的是在實(shí)施例2中所用的插入了導(dǎo)管的豬的胃內(nèi)容物中脂肪份數(shù)的分析。針對(duì)不含酶(V1椰子油，V4MCTG1；V7乳脂)或添加了L2或L5(以飼料計(jì)1000ppm)的使用不同TG`s的飼料，給出了游離FA與FA總量的比值。不含酶所釋出的游離FA由內(nèi)生的前十二指腸脂肪酶的活性所導(dǎo)致。該結(jié)果表明，所使用的脂肪分解酶大大增加了由各種測(cè)試TG釋出的游離FA。
發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明涉及含有中鏈脂肪酸(MCFA)的至少一種甘油三酸酯(TG)與至少一種外生脂肪分解酶(酯酶或脂肪酶)相結(jié)合用作動(dòng)物飼料的飼料添加劑的用途，以防止和/或減輕在這種情況下時(shí)常遇到的問(wèn)題。
因而本發(fā)明還涉及一種飼料添加劑組合物，它包括含有中鏈脂肪酸(MCFA)的至少一種甘油三酸酯(TG)和至少一種外生脂肪分解酶(酯酶或脂肪酶)。
本發(fā)明的中鏈脂肪酸包括偶數(shù)和奇數(shù)的脂肪酸，如含C4(丁酸)、C5(戊酸)、C6(己酸)、C7(庚酸)、C8(辛酸)、C9(壬酸)、C10(癸酸)、C11(十一烷酸)或C12(月桂酸、十二烷酸)的脂肪酸。本發(fā)明的MCFA甘油三酸酯組分可為天然存在的含有甘油三酸酯的組合物，如乳脂和椰子油。所述甘油三酸酯另外也可包含一或多種工業(yè)制備的甘油三酸酯或天然存在的和工業(yè)制備的甘油三酸酯的混合物。所述甘油三酸酯可通過(guò)C4至C12鏈脂肪酸的酯交換來(lái)制備。
富含含有甘油三酸酯的中鏈脂肪酸的天然存在的物質(zhì)的實(shí)例包括但非僅限于得自植物種子的椰子油、棕櫚仁油、巴巴蘇油、羽葉棕櫚油(cohune oil)、tacum oil、cuphea oil，哺乳動(dòng)物類的奶，如馬、鼠、山羊和兔的奶，或乳脂。
化學(xué)合成構(gòu)成或特制的含有中鏈脂肪酸的甘油三酸酯的市售來(lái)源的實(shí)例包括但非僅限于表10中所給出的那些或在實(shí)施例的材料一節(jié)中所列舉的那些。
本發(fā)明的脂肪分解酶組分可包括脂肪酶或酯酶、脂肪酶混合物或酯酶混合物或脂肪酶與酯酶的混合物。所述脂肪酶或酯酶可是天然存在的或工業(yè)制備的。所述脂肪分解酶可是微生物、哺乳動(dòng)物或植物來(lái)源的。
市售植物脂肪酶的實(shí)例包括但非僅限于來(lái)自小麥、蓖麻子、油菜、芥子(mustard)和羽扇豆的脂肪酶。
市售微生物脂肪酶的實(shí)施例包括但非僅限于在表11中所給出的脂肪酶或在實(shí)施例的材料一節(jié)中所列舉的那些。
市售酯酶的實(shí)例包括但非僅限于來(lái)自小牛、小山羊和羔羊舌下組織的前胃(pregastric)酯酶(PGE)、來(lái)自小牛、小山羊和羔羊的充血皺胃的凝乳酶膏(rennet paste)、來(lái)自兔肝或豬肝的酯酶。
優(yōu)選以上定義的本發(fā)明所述甘油三酸酯組分在飼料中以約0.25％至約10％的濃度添加。
優(yōu)選所述脂肪分解酶組分在飼料中以約100至約10000ppm的濃度添加。
本發(fā)明飼料添加劑組合物的用途優(yōu)選用作動(dòng)物飼料的飼料添加劑，特別是用于早期斷奶的豬。本發(fā)明飼料添加劑組合物的用途不排除這種組合物作為其它年齡組的豬的飼料添加劑或作為其它類型動(dòng)物的飼料添加劑的用途。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的至少一種MCFA TG和至少一種脂肪分解酶的組合物用于制備優(yōu)選用于早期斷奶仔豬的飼料添加劑的用途。
本發(fā)明還涉及制備本發(fā)明飼料添加劑的方法，包括將對(duì)應(yīng)于本發(fā)明的不同MCFA TG與脂肪分解酶組分進(jìn)行混合的步驟。
在文獻(xiàn)中詳細(xì)記載了SCFA、MCFA和其它有機(jī)酸產(chǎn)生抗菌劑活性的機(jī)理。目前認(rèn)為，未離解的(RCOOH＝非離子化的)酸在脂類中有滲透性，以這種途徑，它可穿過(guò)微生物細(xì)胞膜并在微生物的堿性更大的內(nèi)部解離()。這導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)pH酸化降至低于存活可滲透的水平。換言之，有機(jī)酸起到protonophores的作用，這增加了H+向內(nèi)的滲漏，使得流出不能達(dá)到使細(xì)胞質(zhì)重新堿化的那樣快速。有機(jī)酸的物化特性大大影響了它們作為protonophores的能力(分子量、pKa(離解常數(shù))、溶解度)。它們所處的生理環(huán)境(尤其是胃腸道不同部位的pH)也是很重要的因素。另外，微生物包膜(envelope)的類型(在Gram+中主要為肽聚糖，在Gram-細(xì)菌中為脂多糖)大大影響酸經(jīng)過(guò)膜的穿透。
首先，在初步(preliminary)體外實(shí)驗(yàn)中，其中對(duì)寬范圍的有機(jī)酸(SCFA，MCFA和其它在飼料和食品工業(yè)中通用的有機(jī)酸)測(cè)試其對(duì)小腸微生物群落的優(yōu)勢(shì)菌的抗菌活性，本發(fā)明人意外發(fā)現(xiàn)，SCFA和通用的有機(jī)酸僅在較高濃度下(0.02至0.04M)對(duì)Gram-菌叢(flora)(和較低程度上對(duì)鏈球菌)有抑菌作用。但對(duì)于MCFA發(fā)現(xiàn)了其對(duì)Gram+和Gram-細(xì)菌的意外的高的抑菌和殺菌活性。所述抗菌活性與pH有關(guān)，在較低pH、即當(dāng)較高比例的FA呈未解離形態(tài)時(shí)該活性最大。在同一實(shí)驗(yàn)中，提出的試驗(yàn)性最小殺菌濃度為0.005至0.01M。
另外意外的是，通過(guò)使用MCFA的組合物，可完全模仿在集約化動(dòng)物生產(chǎn)中使用的抗菌促生長(zhǎng)劑的抗菌譜。
文獻(xiàn)詳細(xì)記載了MCTG作為易得能量源的特別特性。它們的作用可概括如下(BACH & BABAYAN，1982)-MCTG呈無(wú)序狀態(tài)快速消化、吸收和傳送，其中消化和吸收并非最佳。在新斷奶的仔豬中時(shí)常觀察到消化不良和吸收不良，這歸因于大多數(shù)消化酶的活性的急劇下降。在斷奶后不久脂肪分解酶的缺乏很明顯。
-MCTG在有機(jī)體中快速氧化，并是豐富和快速易得的能量源。但MCTG是生酮的(ketogenic)，其在給出高劑量時(shí)可具有麻醉劑的副作用。這種副作用在仔豬中當(dāng)然是不希望的。
再有，通過(guò)CCK激活的對(duì)飼料主動(dòng)攝入的抑制作用也是不需要的。另外，還對(duì)(生產(chǎn)者和/或動(dòng)物)有害的是較易蒸發(fā)的MCFA的強(qiáng)烈的不適氣味。
為獲得積極的效果并避免MCFA的負(fù)面特性，本發(fā)明人的原始想法是使用含有足夠MCFA的TG與脂肪分解酶的組合物來(lái)作為飼料添加劑，目的在于在胃中應(yīng)釋出足夠的MCFA以具有滅菌作用，導(dǎo)致在小腸中的較小的細(xì)菌接種量(bacterial load)并防止消化不良。這種作用結(jié)合以MCFA的額外的易得能量，以及由外生脂肪分解酶在胃和腸頂部(upper intestine)中添加的天然脂肪酶活性，意外導(dǎo)致促生長(zhǎng)作用，使得無(wú)必要來(lái)使用抗生素。游離MCFA的預(yù)期的緩釋和吸收意外地避免了副作用。
簡(jiǎn)要來(lái)說(shuō)，本發(fā)明敘述了用于動(dòng)物的自然促生長(zhǎng)飼料添加劑的組合物。
如下實(shí)施例和附圖僅用來(lái)說(shuō)明本發(fā)明而不是要以任何方式對(duì)其限制。
實(shí)施例材料作為實(shí)例選擇如下脂肪來(lái)說(shuō)明本發(fā)明乳脂，椰子油，及MCTG的兩種市售來(lái)源MCTG1(Aldo MCT Kosher Fosher Food Grade)和MCTG2(Stabiox-860)，分別由LONZA Inc.(FairLawn，NJ070410，USA)和LODERS-CROKAAAN BV(NL-1521 AZWormerveer)出售。作為實(shí)例選擇如下脂肪分解酶來(lái)說(shuō)明本發(fā)明L1Lipozyme 10.000L，NOVO Nordisk A/S，2880 Bagsvaerd，Denmark；L2Lipase 10.000P，Biocatalysts Ltd.，CF37 5UT Pontypridd，Wales，UK；L3TP 516P，Biocatalysts Ltd.，CF37 5UT Pontypridd，Wales，UK；L4LIPOMOD 224P，Biocatalysts Ltd.，CF37 5UTPontypridd，Wales，UK；L5Lipase SAIKEN，NAGASE & Co，Chuo-ku，103 Tokyo，Japan；L6Lipase ITALASE C，SBI，Systems Bio-Industries，Inc.，WI 53187-1609 Waukesha，USA。編碼L1至L6后面還將使用。在這些實(shí)施例中敘述的TG和脂肪分解酶的選擇不排除可能應(yīng)用其它TG和脂肪分解酶及其組合來(lái)用于說(shuō)明本發(fā)明。
萃取方法和不同脂類化合物的分析采用使用己烷/異丙醇(3/2，v/v)的脂類萃取步驟，避免任何溶劑蒸發(fā)步驟，從而防止由于其巨大揮發(fā)性而造成的MCFA的任何損失。
使用在相同萃取介質(zhì)中的FA的酸(H2SO4)催化酯化，生成異丙酯(FAIPE)，不損失較短的酯或改變有多個(gè)不飽和度的較高級(jí)的FA。FAIPE出現(xiàn)在頂部己烷相中。
為計(jì)算濃度，采用使用兩種內(nèi)標(biāo)物(C9用于C4至C12酸，C17用于C14至C183酸)的各種FAIPE的定量毛細(xì)管柱(DB-225，30m，ID0,25mm，膜0,25μm)GLC色譜法。對(duì)響應(yīng)因子的變化系數(shù)對(duì)C9達(dá)0.94％，對(duì)C17達(dá)2.51％。
在同一介質(zhì)中進(jìn)行酯化之前用強(qiáng)陰離子交換樹(shù)脂Amberlyst 26從脂類萃取物中萃取出各種游離FA，并通過(guò)添加游離FA達(dá)101.9％的毛細(xì)GLC平均回收進(jìn)行分析。
實(shí)施例1在不同pH下含有TG`s和脂肪分解酶的MCFA用于脂解的體外篩選(模擬胃中條件)基于其在市場(chǎng)環(huán)境下的商業(yè)可得性和可行價(jià)格來(lái)選擇所要測(cè)試的脂肪分解酶，編碼為L(zhǎng)1至L6?；谌绫?所標(biāo)出的其在脂肪中的具體MCFA含量來(lái)選擇含MCFA的TG`s。
表1.在所選擇的TG`s中MCFA的濃度(g/100gFA)C4 C6 C8 C10C12乳脂3.42.11.22.63.0椰子油 0 0.78.56.248.8MCTG1 0 2.869.1 27.7 0.4MCTG2 0 0.257.5 42.3 0.0在不同pH下在緩沖環(huán)境下進(jìn)行體外培養(yǎng)；在pH2和pH3下使用氨基乙酸進(jìn)行培養(yǎng)；在pH4和pH5下使用乙酸鹽進(jìn)行培養(yǎng)。在搖動(dòng)水浴中在37℃下進(jìn)行180分鐘的培養(yǎng)。對(duì)培養(yǎng)所用參數(shù)進(jìn)行選擇以盡可能接近地模擬在胃內(nèi)容物中活體內(nèi)條件。培養(yǎng)所用介質(zhì)由如下組分組成0.250g所選擇的TG+2.250g合成飼料(其中淀粉、右旋糖、酪蛋白和維生素-礦物質(zhì)預(yù)混物)+10ml緩沖溶液+0.5ml胃液素溶液(在100ml aqua deste中50mg)+10000mg/kg所選擇的市售脂肪分解酶制劑的脂肪(＝ppm)。如必要，將脂肪熔化，否則沒(méi)有脂肪的特殊制劑(分散液或emulgation)。
在圖1a至1d中給出了培養(yǎng)結(jié)果，其中示出了對(duì)于所檢測(cè)的不同TG`s所釋出的MCFA，以g/100g TG計(jì)。對(duì)于各種酶，在pH3至5時(shí)水解活性最高，這正與在豬的胃中活體通常的pH相吻合。釋出的游離MCFA的數(shù)量看起來(lái)與在TG的原始來(lái)源中存在的數(shù)量無(wú)關(guān)。對(duì)椰子油所釋出的MCFA的數(shù)量為±3.5％，對(duì)兩種MCTG`s為10-15％，對(duì)乳脂為±0.5％。
實(shí)施例2
用胃中插入導(dǎo)管的豬進(jìn)行活體內(nèi)實(shí)驗(yàn)以研究通過(guò)內(nèi)生和外生脂肪分解酶所致的MCFA的現(xiàn)場(chǎng)釋出使用DECUYPERE等人的技術(shù)用胃套管來(lái)對(duì)初始重量為±8.5kg的三頭豬進(jìn)行制備。將所述套管置于主要在底區(qū)的彎曲部的中間位置。
選擇三種TG`s(各為椰子油、MCTG1和乳脂)和2種脂肪酶(L2和L5)來(lái)進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)。
使用95％的市售仔豬飼料及5％的所選擇的(最終熔融)TG`s來(lái)制備九種飼料，并有部分添加了所選擇的酶(參見(jiàn)表2隨后還使用的編碼)。將脂肪簡(jiǎn)單地傾倒在粉狀物上并在水平混合器中徹底混合。在飼料中脂肪酶的濃度為1000ppm市售制劑。
表2.在實(shí)驗(yàn)中使用的飼料椰子油V195％仔豬飼料+5％椰子油V2同上+1000ppm L2V3同上+1000ppm L5MCTG1V495％仔豬飼料+5％MCTG1V5同上+1000ppm L2V6同上+1000ppm L5乳脂V795％仔豬飼料+5％乳脂V8同上+1000ppm L2V9同上+1000ppm L5仔豬飼料組合物是基于玉米、大麥、干燥酸乳清、木薯(cassave)、鯡魚(yú)粉、大豆油，并添加有維生素-礦物質(zhì)預(yù)混物。所述飼料不含促生長(zhǎng)添加劑。以％給出的飼料的近似分析如下DM90.6，90.7和90.8；總灰分7.8，7.9和8.5；粗蛋白15.1，15.4和14.8；粗脂肪8.5，8.3和8.3。
分三等餐(9、13和17小時(shí))呈干燥物給予所述飼料，以相當(dāng)重量的豬的隨意攝取量的85％來(lái)給予。
所述實(shí)驗(yàn)按3×3拉丁方設(shè)計(jì)。
所述實(shí)驗(yàn)過(guò)程是成功的。沒(méi)有健康問(wèn)題也沒(méi)有飼料拒食。使用ANOVA(1997)來(lái)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，差異為P＜0.01至P＜0.05(**)或P＜0.1(*)。
在連續(xù)2天中、每天2次、在9小時(shí)和13小時(shí)進(jìn)食30分鐘后對(duì)胃內(nèi)容物進(jìn)行采樣以進(jìn)行化學(xué)分析。直接測(cè)量pH值，隨后將試樣在-20℃下貯存直到進(jìn)行進(jìn)一步的分析。
在1天中在9小時(shí)和13小時(shí)進(jìn)食90分鐘后對(duì)胃內(nèi)容物進(jìn)行采樣以進(jìn)行細(xì)菌學(xué)分析。使用VAN DER HEYDE等人的技術(shù)(1964)進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。所使用的介質(zhì)(均來(lái)自O(shè)XOID UK)為RCM瓊脂+血晶質(zhì)用于總計(jì)數(shù)(48小時(shí)，厭氧)，Rogosa瓊脂用于乳酸菌(48小時(shí)，厭氧)，Slanetz & Bartley瓊脂用于糞鏈球菌(24小時(shí)，厭氧)，EMB瓊脂用于大腸桿菌(24小時(shí)，厭氧)。所有培養(yǎng)均在37℃下進(jìn)行。結(jié)果以log10CFU/g新鮮含量(菌落形成單元)表示。
所述結(jié)果可總結(jié)如下在飼喂后30和90分鐘后測(cè)量的胃內(nèi)容物的pH值在所述處置(飼料)之間沒(méi)有區(qū)別，其范圍為4.2至5.01。這一范圍處于L2和L5的脂肪分解活性的最佳范圍內(nèi)，與第一實(shí)驗(yàn)中所見(jiàn)相同。
細(xì)菌學(xué)計(jì)數(shù)示于表3和圖2中。
表3.在飼喂日糧1至9的仔豬的胃內(nèi)容物中的細(xì)菌學(xué)計(jì)數(shù)(log10CFU/g新鮮內(nèi)容物平均值±s.d) (n＝6).
乳酸菌鏈球菌 大腸桿菌椰子油V1 6.4±0.8 6.0±0.8 4.3±1.0 2.3±1.2V2 5.2±0.3**5.0±0.3**4.1±0.6 2.4±1.4V3 5.3±0.6**4.9±0.7**2.7±1.6*2.6±2.1MCTG1V4 6.1±0.2 5.7±0.5 5.2±0.4 2.9±1.6V5 4.2±0.5**3.7±0.5**0.0**1.0±1.5**V6 3.4±1.7**2.7±1.4**0.5±1.2** 0.5±1.2**乳脂V7 6.4±0.4 5.7±0.8 5.0±0.6 4.1±0.5V8 5.6±0.9* 5.5±0.3 4.0±0.7*3.4±0.1*V9 5.7±0.5* 5.5±0.5 4.0±0.7*4.5±1.4*，**欄內(nèi)每個(gè)TG的差異最重要的結(jié)果是-對(duì)于椰子油，L2和L5均使總計(jì)數(shù)和乳酸菌數(shù)降低了10倍對(duì)于MCTG1，兩種酶均具有很明顯的(大多p＜0.001)效果，并使總計(jì)數(shù)和乳酸菌以100和1000因子降低；鏈球菌和大腸桿菌多數(shù)降至不可檢測(cè)出的水平-對(duì)于乳脂，總計(jì)數(shù)和鏈球菌數(shù)有10倍的降低。
所述結(jié)果得出的結(jié)論是，在飼料中含有MCFA的TG與脂肪分解酶的結(jié)合能夠抑制總菌數(shù)和占多數(shù)的菌落。這一效果很可能是由所使用的TG`s釋出的游離MCFA所導(dǎo)致。
這一結(jié)論由在本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中收集的胃內(nèi)容物中的不同脂肪組分的化學(xué)分析克確認(rèn)。所述分析結(jié)果在圖3中給出，其中示出了每100g新鮮胃內(nèi)容物的總數(shù)和游離FA。
在表4中給出了以每100g在胃內(nèi)容物中的總FA的游離FA的g數(shù)來(lái)表示的所述結(jié)果，或換言之，TG的水解度(％)。
表4.由L2或L5所影響的在本實(shí)驗(yàn)中使用的不同TG`s的水解度(g游離FA/100g在新鮮胃內(nèi)容物中的總FA)對(duì)照 +L2+L5椰子油 V1 V2 V316.5 43.2 44.8MCTG1V4 V5 V618.9 58.5 60.9乳脂 V7 V8 V916.8 46.8 45.8對(duì)于單獨(dú)FA的結(jié)果(這里未示出)表明，沒(méi)有特別FA的優(yōu)先釋出；換言之，單獨(dú)的FA的釋出與其在使用的TG中的含量約成比例。由圖3和表1所示結(jié)果可得出結(jié)論，在仔豬的胃中的內(nèi)生脂肪分解活性水解了±16-19％的TG。添加外生脂肪分解酶使水解增加了三倍。
令人吃驚和意外的是，MCFA的釋出與在胃中的細(xì)菌量的抑制程度平行MCTG1+L5的結(jié)合觀察到最有效的抑制，其使在胃中的TG水解60.9％(與±1％游離FA和0.6％MCFA的濃度相對(duì)應(yīng))，隨后是椰子油+L5(0.8％FA酸和0.3MCFA)和乳脂+L5(0.8％FA酸和0.06MCFA)。
實(shí)施例3在市場(chǎng)環(huán)境中的畜牧學(xué)實(shí)驗(yàn)生長(zhǎng)性能與對(duì)胃內(nèi)容物的ex vivo觀察相結(jié)合本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證以上所述的概念是否可應(yīng)用及適用于市場(chǎng)環(huán)境，并驗(yàn)證當(dāng)?shù)玫酱偕L(zhǎng)作用時(shí)，其是否與用具有已證實(shí)效果的抗生素或有機(jī)酸組合物在早期斷奶的仔豬的中得到的促生長(zhǎng)作用相當(dāng)。
在這一實(shí)驗(yàn)中，將244頭新斷奶的仔豬(Seghers Hybrid F1，初始重量±6.5kg)按照窩別(litter)、性別和體重分為4組A68；B＝61；C＝60和D＝55頭仔豬。在控溫設(shè)施中在市場(chǎng)環(huán)境下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
所使用的飼料組合物是基于大麥、小麥、玉米片、擠壓過(guò)的玉米、擠壓過(guò)的大豆、大豆粉、鯡魚(yú)粉、2.5％的TG、和用于早期斷奶的仔豬的市售預(yù)混物(主要基于奶產(chǎn)物、維生素+礦物質(zhì))(12.5％)。各處置組(A至D)所使用的TG`s和所使用的添加劑不同(見(jiàn)表5)。所述飼料不含促生長(zhǎng)的抗生素。飼料A是陰性對(duì)照物，飼料D是含有通用的有機(jī)酸混合物的陽(yáng)性對(duì)照物。所使用的飼料的計(jì)算近似分析進(jìn)行均衡(equalized)。配方含量為(％新鮮)DM90.0à88.8，粗蛋白18.7à18.9，粗脂肪6.9，總灰分5.1-5.3。能量含量為(Nef97)2463-2475kcal/kg，理想消化氨基酸設(shè)置為L(zhǎng)ys1.07％，Met+Cys0.65，Thre0.66，Try 0.19。
表5.在畜牧學(xué)實(shí)驗(yàn)中所使用的處置處置組 A B CDTG(2.5％) 大豆油MCTG2*MCTG2大豆油脂肪酶(L5) - - 1000ppm**-添加的有機(jī)酸***- - -1.5％*MCTG2根據(jù)市場(chǎng)易得性來(lái)選擇**基于新鮮飼料***0.25％檸檬酸+0.75％富馬酸，0.5％甲酸鈉(如飼料制造者所標(biāo)示)
所述飼料由商業(yè)飼料公司使用脂肪和其它液體添加劑噴霧設(shè)備來(lái)制備。所述飼料呈干燥物形態(tài)來(lái)提供，隨意食用；經(jīng)噴嘴使水可連續(xù)供給。
該實(shí)驗(yàn)持續(xù)3周。仔豬分別在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)和之后每周稱重；每日記錄每?jī)蓹陲暳蠑z取量(每欄±15頭仔豬的兩欄共用飼料給料斗)。因而僅可對(duì)重量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。每日檢測(cè)每欄豬的外觀健康狀況，并按級(jí)別0(極壞)至10(極好)來(lái)編碼。每周的畜牧學(xué)結(jié)果示于表6中。
表6.由所述處置影響的仔豬的畜牧學(xué)性能(平均值±s.d.)處置類別 1周2周3周 1至3周％對(duì)照飼料攝取量(g/d)飼料A156365472 331100飼料B191376536 368111飼料C180391533 361110飼料D189355469 338102每日增長(zhǎng)(g/d)飼料A127±57127±57300±133 185±81100飼料B164±73** 160±70** 301±144 208±95* 112飼料C165±90** 161±88** 297±173 207±116* 111飼料D141±81** 123±73280±111 181±7198飼料轉(zhuǎn)化率(kg飼料/kg增長(zhǎng))飼料A1.23 2.88 1.57 1.79 100飼料B1.16 2.35 1.78 1.77 99飼料C1.09 2.43 1.79 1.74 97飼料D1.34 2.89 1.68 1.87 104外觀健康分組(未詳細(xì)給出)對(duì)處置組A為4至9；對(duì)其它處置組為8à9，無(wú)明顯差異。
在處置組A和D之間及B和C之間每日增長(zhǎng)無(wú)差異。在斷奶后的頭兩周獲得了最明顯的差，其間由處置組B和C得到了最佳的生長(zhǎng)性能(在對(duì)照組的±30％以上)。由飼料B和C得到的較好結(jié)果(MCTG2，無(wú)或含脂肪酶)是由于飼料攝取量增加所致。但由含MCTG2+脂肪酶的飼料獲得了最佳的飼料轉(zhuǎn)化率。使用MCFA TG(MCTG2)和脂肪酶的組合物所獲得的生長(zhǎng)的改進(jìn)與由喹啉(同時(shí)Gram+和Gram-譜的添加劑)所得到的范圍(Decuypere，文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的meta分析，未出版的結(jié)果)相同。
在斷奶兩周后，對(duì)各實(shí)驗(yàn)組中的5只去勢(shì)公豬進(jìn)行無(wú)痛致死。由于所述豬隨意飼喂，沒(méi)有飼料攝取量的對(duì)照。在胃腸道解剖后，從胃、和頂部(十二指腸)小腸中采取試樣。以在先前實(shí)驗(yàn)中所述的相同方式對(duì)所述試樣進(jìn)行化學(xué)和細(xì)菌學(xué)分析。這里僅列出了總的厭氧計(jì)數(shù)。
在十二指腸中內(nèi)容物的pH為±3.5、和±5.7；所述處置組之間沒(méi)有差異?？偟膮捬跤?jì)數(shù)示出表7中。
表7.在斷奶兩周后受不同處置(n＝5)影響的在仔豬的胃和頂部小腸中的總的厭氧計(jì)數(shù)(log10CFU/g新鮮內(nèi)容物，±s.d.)。
處置組 胃 十二指腸A 7.0±0.2 6.4±0.5B 7.0±0.2 6.1±0.8C 5.9±0.5** 5.6±0.5**D 6.9±0.2 5.9±0.4該結(jié)果表明，具有MCFA TG(MCTG2)和脂肪酶(L5)的組合物的飼料在胃和頂部腸中均產(chǎn)生顯著的±10倍的細(xì)菌量的降低。該效果略低于先前的胃插導(dǎo)管豬的實(shí)驗(yàn)，可能是由在本實(shí)驗(yàn)中所使用的MCTG的較低數(shù)量(2.5％相對(duì)于5％)和/或不同喂養(yǎng)和采樣步驟所致。盡管如此，本實(shí)驗(yàn)確證了在實(shí)施例3中提及的插入導(dǎo)管的豬得到的結(jié)果。對(duì)于在胃內(nèi)容物中的脂肪(g/100g新鮮內(nèi)容物)與水解度(g游離FA/100g總FA)的不同比例的分析結(jié)果也是同樣，所述分析結(jié)果示于表8中。
表8.在斷奶兩周后受所述處置影響的豬(n＝5)的胃內(nèi)容物中游離FA和總FA的濃度(g/100g新鮮內(nèi)容物，平均±s.d.)和水解度(游離FA/總FA，以％計(jì))處置組 A B C D游離FA 0.28±0.060.44±0.100.95±0.220.31±0.09總FA1.05±0.081.25±0.221.35±0.281.07±0.17％水解 26.7 35.2 70.4 28.9
由所述％水解結(jié)果可分別計(jì)算出，對(duì)于飼料B(MCTG2)和C(MCTG2+L5)，在胃中存在的游離MCFA為0.3和0.4％。在插入導(dǎo)管的豬的實(shí)驗(yàn)中，由MCTG1+L5和椰子油+L5得到了分別為0.06和0.30％的最高的游離MCFA濃度(和最強(qiáng)的細(xì)菌量抑制，±100倍)。
實(shí)驗(yàn)2和3的組合結(jié)果清楚表明，釋出的游離MCFA的數(shù)量與胃菌落抑制效果相關(guān)。
實(shí)驗(yàn)4不同MCTG濃度與不同劑量的所選擇的脂肪分解酶的最佳組合的活體外評(píng)價(jià)由于促進(jìn)生長(zhǎng)與在小腸中總菌數(shù)的抑制成比例是我們的見(jiàn)解，所以進(jìn)行了如下的活體外實(shí)驗(yàn)，其中確定含有TG(MCTG1，MCTG2和椰子油)的MCFA的含量與證實(shí)的有效脂肪酶(L5)的最佳組合。
使用了四種TG濃度0、2.5、5和10％；對(duì)于各種TG濃度，脂肪酶的添加量為10.000、1000或100ppm。每個(gè)培養(yǎng)瓶中的所述介質(zhì)還含有2.5g的與實(shí)驗(yàn)1中相同的合成飼料(基于淀粉、右旋糖、酪蛋白和維生素-礦物質(zhì)預(yù)混物)。但在本實(shí)驗(yàn)中，在添加到介質(zhì)中之前，對(duì)所述TG進(jìn)行分散(使用阿拉伯樹(shù)膠和黃蓍樹(shù)膠)。使用知當(dāng)?shù)囊宜猁}緩沖劑在pH5下進(jìn)行培養(yǎng)。最后，將所述介質(zhì)(15ml)接種來(lái)自用不含促生長(zhǎng)添加劑的飲食飼喂的插入導(dǎo)管的兩頭豬的回腸內(nèi)容物的菌的懸浮液1ml。在搖動(dòng)水浴中在37℃下培養(yǎng)180分鐘。所述培養(yǎng)均是雙重的。
脂肪分析方法和細(xì)菌計(jì)數(shù)方法均與前述實(shí)驗(yàn)所用相同。這里僅列出了總的厭氧菌計(jì)數(shù)。由于需要得到FA的抗菌活性與分子量之間的相關(guān)性，還以摩爾計(jì)來(lái)表示了游離脂肪酸的結(jié)果。所述結(jié)果示出表9中。
表9.活體外釋出的游離脂肪酸(在介質(zhì)中的g％或摩爾)和總的厭氧菌計(jì)數(shù)(log10CFU/ml介質(zhì))與不同TG`s(MCTG1，MCTG2和椰子油)及不同劑量(10.000、1000和100ppm)脂肪分解酶(L5)之間的相關(guān)性游離FA游離FA 總計(jì)數(shù)g％M log10CFU/mlMCTG1起始 0 0 6.2180分鐘，對(duì)照 0 0 6.8180分鐘，10.000ppm L52.5％MCTG10.17 0.012 5.95％MCTG1 0.34 0.024 ＜110％MCTG1 0.63 0.044 ＜1180分鐘，1000ppm L52.5％MCTG10.11 0.008 6.15％MCTG1 0.20 0.014 4.810％MCTG1 0.39 0.027 3.8180分鐘，100ppm L52.5％MCTG10.09 0.006 6.55％MCTG1 0.13 0.009 6.510％MCTG1 0.22 0.015 6.2MCTG2起始 0 0 6.3180分鐘，對(duì)照 0 0 7.0180分鐘，10.000ppm L52.5％MCTG20.17 0.012 5.55％MCTG2 0.30 0.021 3.410％MCTG2 0.58 0.040 1.8180分鐘，1000ppm L52.5％MCTG20.13 0.009 6.35％MCTG2 0.21 0.015 6.310％MCTG20.36 0.025 5.6180分鐘，100ppm L52.5％MCTG2 0.11 0.008 6.55％MCTG2 0.16 0.011 6.610％MCTG20.23 0.016 6.7椰子油起始 00 6.3180分鐘，對(duì)照00 7.1180分鐘，10.000ppm L52.5％椰子油 0.10 0.007 7.25％椰子油0.16 0.011 6.210％椰子油 0.36 0.025 6.2180分鐘，1000ppm L52.5％椰子油 0.07 0.005 6.45％椰子油0.13 0.009 6.510％椰子油 0.22 0.015 6.4180分鐘，100ppm L52.5％椰子油 0.05 0.003 6.95％椰子油0.08 0.006 7.010％椰子油 0.13 0.009 7.0所述結(jié)果可總結(jié)如下-釋出的FA的數(shù)量明顯與TG濃度成比例，當(dāng)使用的脂肪分解酶的劑量增加10倍時(shí)僅使游離FA濃度達(dá)到雙倍。對(duì)于TG％與給定ppm的脂肪分解酶的各種組合，釋出的FA的次序如下MCTG1＞MCTG2＞椰子油。
-游離FA濃度越高，菌數(shù)的抑制越明顯。對(duì)于明顯抑制菌落來(lái)說(shuō)，看起來(lái)介質(zhì)中±0.35％的最小FA濃度是必需的；這對(duì)應(yīng)于0.025M/升。MCTG1＞MCTG2＞椰子油的次序?qū)?yīng)于在TG中數(shù)量最重要的MCFA的分子量的增加MCTG1＝C8，MCTG2＝C10，椰子油＝C12。
-所使用的活體外規(guī)程提供了對(duì)于含有TG`s的MCFA與適用脂肪分解酶的眾多組合的極好的篩選工具，以確定其作為對(duì)胃腸微生物菌落具有穩(wěn)定或抑制作用的飼料添加劑適用性。這種作用一般認(rèn)為是獲得促生長(zhǎng)的基礎(chǔ)。
表10.化學(xué)合成結(jié)構(gòu)的脂類的商業(yè)來(lái)源的實(shí)例(1)產(chǎn)品 組成 公司Aldo MCT C8，C10 Lonza Inc.，F(xiàn)air Lawn，USAStabilox-860 C8，C10 Loders-Croklaan BV，NLWormerveerCapreni C60，C80，C220 Proctor & Gamble，Cincinatti，OHSalatrim C30，C40，C180 Nabisco Foods Group，EastHanover，NJCaptex C80，C100，C182Abitec，Columbus，OHCaptex 300 C8，C10 Capital City Products，OHColumbusCaptex 810B C8，C18 Capital City Products，OHColumbusTripelargonate C9 Capital City Products，OHColumbusMixed odd chain C7，C9 Abbott Laboratories，Chicago，IL NorthNeobee C80，C100，LCFA Stepan Co，Maywood，NjNeobee M5C80，C100Stepan Co，Maywood，NjNeobee 1095 C100 Stepan Co，Maywood，NjCoconado C80Kao Co，Wakayama，JapanCoconado-RK C8，C10，C12 Kao Co，Wakayama，JapanMCTG C4，C5，C6，C7，C8，C10 Karlshamns LipidSpecialtiesColumbus，OHMCTG C8，C10 Mead Johnson & Co，
EvansvilleIN(1)來(lái)源試驗(yàn)產(chǎn)品+文獻(xiàn)匯編表11.實(shí)驗(yàn)或市售微生物脂肪酶實(shí)例(1)來(lái)源生物體 公司酵母假絲酵母類(Candida sp.)Candida rugosa* Amano，Biocatalysts，Boehringer MannheimFluka，Genzyme，Sigma，Meito SankyoCandida antartica A/B Boehringer MannheimNovo Nordisk念珠菌屬(Candida lipolytica)Candida paralipolyticaSaccharomyces lipolytica真菌Thermocyces lanuginosus** Novo Nordisk，Boehringer Mannheim，AmanoRhizomucor Miehei Novo Nordisk，Biocatalysts，Amano根霉屬菌類(Rhizopus sp.)Nagase，Tokyo，JapanRhizopus delemarRhizopus oryzaeRhizopus niveus Alltech，Rhizopus arrhizus SigmaRhizopus javanicusAmano曲霉屬類(Aspergillus sp.)Aspergillus niger FinnfeedsInternational，AmanoAspergillus usamii
Aspergillus oryzae Novo Nordisk毛霉菌類(Mucor sp.)Mucor javanicusMucor lipolyticus青霉菌類(Penicillium sp.)Penicillium roquefortiiAmanoPenicillium cyclopium AmanoPenicillium simplissimumPenicillium camembertiiGeotrichum candidumAmanoNeurospora crassaUstilago maydisFusarium solani細(xì)菌 洋蔥伯克氏菌(BurkholderiaAmano，F(xiàn)luks，cepacia***) Boehringer Mannheim假單胞菌(Pseudomonas sp.)產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonas Genencoralcaligenes)門(mén)多薩假單胞菌 Genencor(Pseudomonas mendocina)熒光假單胞菌(Pseudomonasfluorescens)銅綠假單胞菌(Pseudomonas Amanoaeroginosa)Pseudomonas spp. FinnfeedsInternational；Karlan，CA，USA粘稠色桿菌(Chromobacterium Asahi，Tokyo，Japan；viscosum****)Biocatalysts；KarlanCA，USA；Toyo JozoShizuoka，Japan葡萄狀球菌類(Staphylococcus
sp.)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)豬葡萄球菌(Staphylococcushyicus)溶脂無(wú)色桿菌(Achromobacterlipolyticum)不動(dòng)桿菌(Acinetobacter)瘡皰丙酸桿菌(Propionibacterium acnes)桿狀菌類(Bacillus sp.)*先前稱為Candida cylindracea**先前稱為Humicola lanuginosus***先前稱為Pseudomas cepacia****C.viscosum與Burkholderia glumae相同(1)來(lái)源試驗(yàn)產(chǎn)品+文獻(xiàn)匯編參考文獻(xiàn)Bach，A.C.& Babayan，V.K.，1982，Medium-chain Trigfyceridesan Update，TheAmerican Journal of Clinical Nutrition，36950-962Cera，K.R.et al.，1989，Postweaning Swine Performance and Serum Profile Responsesto Supplemented Medium-chain Free Fatty Acids and Tallow，Journal of AnimalScience，67，2048-2055Chesson，A.，1994，Probiotics and other Intestinal Mediators，InPrinciples of PigScience，D.J.A.Cole，J.Wiseman & M.A.Varley，Editors，Nottingham University Press，UK，pp.197-214Corpet，D.E.，1996，Microbial Hazards for Humans of Antimicrobial Growth PromotorUse in Animal Production，Revue Médicine Vétérinaire，147851-862Decuypere，J.A.et al.，1977，Gastro-intestinal Cannulation in Pigsa Simple Techniqueallowing multiple Replacements，Journal of Animal Science，46，463-468Kabara，J.J.，1978，F(xiàn)atty Acids and Derivates as Antimicrobial Agents-a Review，InThe Pharmacological Effects of Lipids，J.J.Kabara，Editor，The American Oil ChemistsAssociation，Champaign，II，USA，pp.1-14Odle，J.，1999，Medium-chain Triglyceridesa Unique Energy Source for Neonatal Pigs，Pig News and Information，2025N-32NLepine，A.J.et al.，1989，Effect of Colostrum or Medium-chain TriglycerideSupplementation on the Pattem of Plasma Glucose，Non-esterified Fatty Acids andSurvival of Neonatal Pigs，Journal of Animal Science，67，983-990Moreau，H.et al.，1988，Screening of Preduodenal Lipases in several Mammals，Biochemica Et Biophysica Acta，959，247-252Partridge，G.G.，1993，New Approaches with Pig Weaner Diets，InRecent Advances inAnimal Nutrition，P.C.Gansworthy & Cole，.J.A.，Editors.，Nottingham University Press，UK，pp.221-248Roth，F(xiàn).X.& Kirchgessner，1998，Organic Acids as Feed Additives for young PigsNutritional and Gastrointestinal Effects，Journal of Animal and Feed Sciences，723-33SPSS for WINDOWS，1997，User’s Guide(Release 7.5)，SPSS Inc.，Chocogo，IL60611Van der Heyde，H.& Henderickx，H.，1963，Zur Vereinfachung der quantitativen undqualitativen Bestimmung der Bakterien unter Verwendung von＂Ringplatten＂，Zentralblatt Für Bakteriologie，I Orig.，189，224-228Van der Peet，G.F.V.，1992，Voeding van jonge Biggen，CVB-Documentatierapport N°5Wegener，H.C.et al.，1998，The Association between the Use of Antimicrobial GrowthPromoters and Development of Resistance in Pathogenic Bacteria towards GrowthPromoting and Therapeutic Antimicrobials，Journal of Animal and Feed Science，77-1權(quán)利要求
1.飼料添加劑或飼料組合物，含有至少一種含中鏈脂肪酸的甘油三酸酯和至少一種脂肪分解酶。
2.如權(quán)利要求1的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯含有C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11和/或C12中鏈脂肪酸。
3.如權(quán)利要求1或2的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯是天然存在的甘油三酸酯，如乳脂和椰子油。
4.如權(quán)利要求1或2的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯是制備的甘油三酸酯組合物。
5.如權(quán)利要求1或2的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯是由C4至C12鏈脂肪酸進(jìn)行酯交換而制備的。
6.如權(quán)利要求1或2的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述脂肪分解酶是脂肪酶。
7.如權(quán)利要求1或2的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述脂肪分解酶是酯酶。
8.如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯呈天然或制備的含中鏈脂肪酸的甘油三酸酯組合物形態(tài)存在，所述脂肪分解酶呈市售脂肪分解酶組合物形態(tài)存在。
9.如權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述甘油三酸酯組分的添加濃度為所述飼料的約0.05約20％，優(yōu)選為約0.25％至10％，所述脂肪分解酶組分的添加濃度為所述飼料的約5至10000ppm，優(yōu)選約100至10000ppm。
10.如權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的飼料添加劑或飼料組合物用作藥物。
11.如權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的飼料添加劑或飼料組合物用作殺菌劑。
12.如權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)的飼料添加劑或飼料組合物用作促生長(zhǎng)劑。
13.如權(quán)利要求1至12任一項(xiàng)的動(dòng)物飼料添加劑或飼料組合物用于在胃腸道控制脂解以便穩(wěn)定、選擇性活化和/或抑制胃腸微生物菌落。
14.如權(quán)利要求1至13任一項(xiàng)的用于動(dòng)物生產(chǎn)和成雙的飼料添加劑或飼料組合物，其中所述動(dòng)物是早期斷奶的仔豬。
15.如權(quán)利要求14的用途，其中所述生產(chǎn)的動(dòng)物是早期斷奶的仔豬。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有中鏈脂肪酸(C4至C12)的甘油三酸酯(TG)與外源脂肪分解酶(酯酶或脂肪酶)相混合作為用于動(dòng)物的飼料添加劑的用途,以防止和/或減輕在這時(shí)經(jīng)常遇到的問(wèn)題。在不使用經(jīng)典但有爭(zhēng)議的飼料添加劑的情況下,這導(dǎo)致了明顯的生長(zhǎng)性能的改進(jìn)。
文檔編號(hào)A61K31/215GK1367653SQ00811148
公開(kāi)日2002年9月4日 申請(qǐng)日期2000年6月6日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月7日
發(fā)明者J·德庫(kù)伊佩雷, N·迪里克 申請(qǐng)人:阿維夫有限公司, 維塔美克斯有限公司