專利名稱：一種高分子抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是關(guān)于對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有抑制作用的含羧酸和酰亞胺環(huán)的高分子藥物及其制備方法。
目前，臨床治療惡性腫瘤的方法主要是采用手術(shù)切除，放射性治療合并化學(xué)藥物等療法。但接受該療法的患者的五年生存率不到50％。主要原因是由于治療前、后癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。大約30％新診斷的實(shí)體瘤患者已有臨床上可見的轉(zhuǎn)移灶。腫瘤轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤細(xì)胞借助血道、淋巴道等途徑，在非腫瘤原發(fā)部位的器官內(nèi)形成繼發(fā)瘤。目前發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤轉(zhuǎn)移劑，如維甲酰胺，能顯著抑制大鼠前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移；紫杉醇，對(duì)黑色素瘤高轉(zhuǎn)移株B16-BL6細(xì)胞的轉(zhuǎn)移有抑制；某些天然高分子，如阿拉伯半乳糖和肝素，都尚未未達(dá)到令人滿意的結(jié)果。
本發(fā)明的目的在于提供一種低毒性的能抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的高分子抗腫瘤藥物及其制備方法。
本發(fā)明通過在高分子鏈中引入羧酸和酰亞胺環(huán)基團(tuán)，化學(xué)通式可表示為 記為AiBjCk。1)A是含有羧酸基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R1CnH2n+1，這里n＝0-4或CmH2mOH，這里m＝1-3或C6H5。2)B是含有酰亞胺基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R2CnH2n+1，這里n＝0-4，或C6H5。3)C是含有羧酸酯基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R1同A，R3CnH2n+1，這里n＝0-4。
4)i，j，k分別是上述通式AiBjCk中A，B，C單元在聚合物鏈中的百分個(gè)數(shù)，i(A單元的摩爾含量)在5-60％間，j(B單元的摩爾含量)在5-85％間，k(C單元的摩爾含量)在0-50％間。
5)AiBjCk的分子量在1,000-100,000間。
上述藥物用于抑制Lewis肺癌的轉(zhuǎn)移。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果見實(shí)施例。
結(jié)果表明AiBjCk毒性很低，有較好的抗Lewis肺癌肺轉(zhuǎn)移效果。
上述抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中含有酰亞胺基團(tuán)的單元B的摩爾含量在15-65％之間則較好。
上述抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物共聚物AiBjCk分子量在1500-25000之間則更為合適。上述抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物是將含有羧酸酯基團(tuán)的單體A，含有酰亞胺基團(tuán)的單體B和含有羧酸酯基團(tuán)的單體C在自由基引發(fā)劑下引發(fā)共聚，聚合用溶劑是高沸點(diǎn)醚類溶劑，或四氫呋喃，或二甲基酰胺類等能夠溶解單體和共聚物的溶劑。例如二氧六環(huán)，四氫呋喃，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺等。反應(yīng)時(shí)將三種單體按摩爾比例投入，單體A占總投料摩爾數(shù)的5-70％(摩爾)，單體B占20-95％(摩爾)，單體C占0-60％(摩爾)，在50-90℃下反應(yīng)1-24小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，聚合物可用乙醚沉淀，然后用乙醚抽提20-24小時(shí)，然后再真空烘箱中50-60℃烘至衡重即可。
上述反應(yīng)物中B的摩爾量是25-90％時(shí)則較佳。反應(yīng)物中R1，R2，R3的變化，可以有多種共聚物出現(xiàn)，如含有羧酸酯基團(tuán)單元的單體有羥甲基丙烯酸，羥乙基丙烯酸等；含有酰亞胺基團(tuán)單元的單體有馬來酰亞胺，苯基馬來酰亞胺，甲基馬來酰亞胺，乙基馬來酰亞胺等；含有羧酸酯基團(tuán)單元的單體有α-乙基丙烯酸甲酯，α-乙基丙烯酸乙酯等；引發(fā)劑是自由基引發(fā)劑，如AIBN等。隨著R1，R2，R3基團(tuán)的變換選取，可獲得多種共聚物，從而可進(jìn)行高分子藥物分子設(shè)計(jì)，獲得多種高分子抗腫瘤藥物。本發(fā)明的藥物具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用，經(jīng)小鼠動(dòng)物試驗(yàn)，該藥物毒性小，抗腫瘤轉(zhuǎn)移效果明顯。具體效果可參見表一至表四。本發(fā)明的制藥方法工藝簡(jiǎn)捷，原料廣泛易得，制備過程中各項(xiàng)參數(shù)控制簡(jiǎn)單，易于工業(yè)化實(shí)現(xiàn)，是一種簡(jiǎn)捷的獲得低毒性的對(duì)抗腫瘤轉(zhuǎn)移有抑制作用的高分子藥物的方法。
(B)受試動(dòng)物為昆明種小鼠(由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組提供，合格證號(hào)為“滬動(dòng)合證字第107號(hào)”)；體重19±1克(B)性別急性毒性試驗(yàn)，雌雄各半。療效試驗(yàn)，雌雄皆可，每批實(shí)驗(yàn)使用同一種性別。
(D)動(dòng)物數(shù)急性毒性試驗(yàn)，每組20只昆明種小鼠。每一試驗(yàn)組和陽性對(duì)照組均為10只，陰性對(duì)照組為20只。急性毒性試驗(yàn)(A)劑量設(shè)置1號(hào)樣品設(shè)五個(gè)組，分別為1200、960、768、614、及491 mg/kg。
(B)給藥方案采用急性毒性ip×1。
(C)試驗(yàn)主要步驟實(shí)驗(yàn)設(shè)5個(gè)劑量組，劑量間距為0.8。動(dòng)物隨機(jī)分組，每組20只，雌雄各半。給藥后觀察即時(shí)反應(yīng)，記錄二周內(nèi)小鼠的死亡分布。對(duì)死亡小鼠數(shù)及二周后存活小鼠進(jìn)行解剖，肉眼尸檢。當(dāng)尸檢發(fā)現(xiàn)有病變組織時(shí)，對(duì)該組織進(jìn)行鏡檢。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以Bliss方法計(jì)算。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果以腹腔途徑一次給藥，對(duì)昆明種小鼠急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見表一。雌雄動(dòng)物之間無顯著性差異，P值＞0.05。腹腔途徑單次給藥后一般癥狀即時(shí)動(dòng)物行動(dòng)遲緩，呆滯，腹部略有收縮，與劑量成正相關(guān)，15分鐘左右低劑量組即恢復(fù)至常態(tài)。死亡大多出現(xiàn)在48小時(shí)內(nèi)，以24小時(shí)內(nèi)為死亡高峰。死亡動(dòng)物尸檢未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的、明顯的實(shí)質(zhì)性臟器病變。二周后存活動(dòng)物一般狀況良好。因此，高分子1號(hào)樣品以腹腔途徑一次給藥對(duì)昆明種小鼠急性毒性試驗(yàn)得到的LD50為798mg/kg。抗Lewis肺癌肺轉(zhuǎn)移療效試驗(yàn)進(jìn)行抗Lewis肺癌肺轉(zhuǎn)移功能的研究，瘤源為L(zhǎng)ewis肺癌模型，由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理室傳代維持?？鼓[瘤試驗(yàn)劑量分別為16，80(mg/kg)。陽性對(duì)照組為環(huán)磷酰胺(CTX)，30mg/kg；陰性對(duì)照組，給以相應(yīng)的溶劑。給藥方案試驗(yàn)組和對(duì)照組均為腹腔給藥，每天一次，連續(xù)七天。陰性對(duì)照給以相應(yīng)的溶劑；陽性對(duì)照環(huán)磷酰胺(CTX)，上海華聯(lián)制藥集團(tuán)公司生產(chǎn)的粉針劑，以生理鹽水配制。
主要步驟對(duì)Lewis肺癌的抗肺轉(zhuǎn)移試驗(yàn)取生長(zhǎng)旺盛的瘤源，無菌條件下以勻漿法制備成約1-2×107/ml細(xì)胞懸液，相應(yīng)宿主每鼠足趾皮下接種0.05ml/只，次日按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案給藥，四周后處死各組動(dòng)物，按組分別解剖每只小鼠，取出肺臟，計(jì)測(cè)各肺葉的肺癌轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)，按下列公式計(jì)算腫瘤轉(zhuǎn)移抑制率腫瘤轉(zhuǎn)移抑制率＝(對(duì)照組肺癌轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)平均數(shù)-給藥組肺癌轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)平均數(shù))/對(duì)照組肺癌轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)平均數(shù)×100％。表二高分子1號(hào)樣品對(duì)Lewis肺癌抗肺轉(zhuǎn)移試驗(yàn)組別 劑量 給藥 動(dòng)物數(shù) 體重 平均肺集落 抗轉(zhuǎn)移率mg/kg 方案 始/終 始/終 數(shù)(X±SD) ％1號(hào)80 Ip×7qd 10/1021.2/23.2 2.33±2.49 66.9916 Ip×7qd 10/1021.0/23.3 2.88±2.36 59.21陰性 相應(yīng)Ip×7qd 20/2021.2/24.0 7.06±3.33對(duì)照 溶劑
權(quán)利要求
1.一種高分子抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物，其特征是在高分子鏈中含有羧酸和酰亞胺環(huán)基團(tuán)，化學(xué)通式是 記為AiBjCk；1)A是含有羧酸基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R1CnH2n+1，這里n＝0-4或CmH2mOH，這里m＝1-3或C6H5。2)B是含有酰亞胺基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R2CnH2n+1，這里n＝0-4，或C6H5；3)C是含有羧酸酯基團(tuán)的單元，有如下化學(xué)通式 這里R1同A，R3CnH2n+1，這里n＝0-4；4)i，j，k分別是上述通式AiBjCk中A，B，C單元在聚合物鏈中的百分個(gè)數(shù)，i(A單元的摩爾含量)在5-60％間，j(B單元的摩爾含量)在5-85％間，k(C單元的摩爾含量)在0-50％間。5)AiBjCk的分子量在1,000-100,000間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高分子抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物，其特征是該藥物中含有酰亞胺基團(tuán)的單元B的摩爾含量是5-85％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高分子抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物，其特征是AiBjCk的分子量是1500-25000。
4.一種高分子抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物的制備方法，其特征是將含有羧酸基團(tuán)的單體A，含有酰亞胺基團(tuán)的單體B，含有羧酸酯基團(tuán)的單體C三者在引發(fā)劑引發(fā)下共聚反應(yīng)，具體的反應(yīng)條件是(1)A，B，C三單體的投料摩爾范圍分別是A占總投料摩爾數(shù)的5-70％，B占20-95％，C占0-60％；(2)反應(yīng)溫度50-90℃；(3)反應(yīng)時(shí)間1-24小時(shí)；(4)反應(yīng)用溶劑是高沸點(diǎn)醚類溶劑，或四氫呋喃，或二甲基酰胺類溶劑；反應(yīng)結(jié)束后，聚合物沉淀，抽提，烘至衡重即可。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的高分子抗腫瘤藥物的制備方法，其特征是投料時(shí)，B占總投料摩爾數(shù)的25-90％。
全文摘要
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是關(guān)于對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有抑制作用的含羧酸和酰亞胺環(huán)的高分子藥物及其制備方法。腫瘤細(xì)胞除破壞原發(fā)病灶的組織外,還常常向健康組織轉(zhuǎn)移造成繼發(fā)瘤,后者通常是造成腫瘤無法得到根治的重要原因之一。本發(fā)明采用一類含有羧酸基團(tuán)和酰亞胺基團(tuán)的聚合物,通過取代基團(tuán)的選取進(jìn)行藥物分子設(shè)計(jì),獲得低毒性的對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有明顯的抑制作用的高分子藥物。
文檔編號(hào)A61K31/74GK1283464SQ00119560
公開日2001年2月14日 申請(qǐng)日期2000年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2000年8月1日
發(fā)明者黃駿廉, 史聯(lián)軍, 萬德成 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)