茜草科類型環(huán)肽用作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑和其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供用茜草科類型環(huán)肽化合物RA‐V(1)及其配糖體RA‐XII(2)作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑，以其為活性成分的藥物組合物，此類化合物的制備方法及其在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的方法能快捷分離得到環(huán)肽，樣品損失少，成本較低，操作方便，可控性和重現(xiàn)性好，溶劑可以反復(fù)回收利用，適用于工業(yè)生產(chǎn)。
【專利說明】茜草科類型環(huán)肽用作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑和其制備方法與應(yīng)
用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地，涉及一類茜草科類型環(huán)肽用作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑，以其為有效成分的藥物組合物，其制備方法及其在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]腫瘤是機(jī)體在各種致瘤因素下，局部組織的細(xì)胞在基因水平上失去了對(duì)其生長(zhǎng)的正常調(diào)控，導(dǎo)致細(xì)胞異常增生而形成的新生物。一般將腫瘤分為良性和惡性兩大類。惡性腫瘤包括癌和肉瘤，是嚴(yán)重威脅人類生命健康的主要疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，我國(guó)惡性腫瘤的發(fā)病率為299.12/10萬，城市高于農(nóng)村；死亡率為184.67/10萬，農(nóng)村高于城市；但無論城市還是農(nóng)村，惡性腫瘤都是人類死亡的主要原因之一。因此，抗癌藥物的研究已成為本世紀(jì)新藥研發(fā)的重要方向。
[0003]腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的最本質(zhì)的生物學(xué)行為，表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞從原發(fā)部位遷徙至新的場(chǎng)所并克隆性增生的過程，是一個(gè)高選擇的系列事件動(dòng)態(tài)變化的階梯式生物過程，主要包括以下幾個(gè)步驟:①原發(fā)瘤擴(kuò)張性生長(zhǎng)；②腫瘤細(xì)胞黏附，降解腫瘤細(xì)胞周圍基底膜；③穿透血管進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，隨血液到達(dá)靶部位并黏附外滲進(jìn)入組織實(shí)質(zhì)腫瘤細(xì)胞在繼發(fā)位點(diǎn)存活和生長(zhǎng)，形成轉(zhuǎn)移灶。大多數(shù)癌癥患者死于轉(zhuǎn)移性癌而并非原發(fā)性癌。據(jù)統(tǒng)計(jì)，惡性腫瘤患者初次診斷時(shí)轉(zhuǎn)移率達(dá)60%，臨床上80-90%腫瘤患者因腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移而死，腫瘤轉(zhuǎn)移已成為引起癌癥患者死亡的首要因素。目前，雖有一些抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物在臨床上應(yīng)用，如阿瓦斯汀、恩度等，但毒副作用大、易產(chǎn)生耐藥等問題而導(dǎo)致治療效率降低；因此，開發(fā)抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物具有極為重要的現(xiàn)實(shí)意義。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)中未見有茜草科類型環(huán)肽作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑的報(bào)道。
[0005]茜草科類型環(huán)肽的分離純化較為困難，具有一定的特點(diǎn)，主要是因?yàn)檐绮輰俚闹参锔缓祯惿厍覙O性分布范圍廣，很難得到純度較高的環(huán)肽類成分。在現(xiàn)有技術(shù)中，從茜草屬植物中分離環(huán)肽類成分已公開發(fā)表若干種方法，這些方法普遍存在樣品損失量大，溶劑成本高、可控性和重復(fù)性差等缺點(diǎn)，如Lee，J.E等報(bào)道，用甲醇提取茜草科茜草的根后，得甲醇浸膏，加水混懸后用氯仿萃取，氯仿部分依次用硅膠、氧化鋁、氨丙基鍵和硅膠色譜柱層析得到環(huán)肽富集部分，重結(jié)晶富集環(huán)肽，再結(jié)合各種手段對(duì)結(jié)晶或母液進(jìn)行分離純化，得到一系列環(huán)肽，包括大量和微量環(huán)肽[Lee, J.E.et al.Structures of cytotoxicbicyclic hexapeptides，RA - XIX，-XX，- XXI，and - XXII，from Rubia cordifolia LTetrahedron.，2008, 64，4117 -4125]，其缺點(diǎn)在于樣品損失量大，過程過于復(fù)雜，分離成本高且重結(jié)晶技術(shù)可控性和重現(xiàn)性不好。

【發(fā)明內(nèi)容】
:
[0006]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足之處，本發(fā)明的目的在于提供一類茜草科類型環(huán)肽化合物；提供制備該類化合物的方法，該方法能快捷分離得到環(huán)肽，樣品損失少，成本較低，操作方便，可控性和重現(xiàn)性好，溶劑可以反復(fù)回收利用，也適用于工業(yè)生產(chǎn)；本發(fā)明的目的還在于提供以茜草科類型環(huán)肽化合物為有效成分的藥物組合物；該類化合物及其組合物在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
[0007]為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案:
[0008]以下述結(jié)構(gòu)式所示的茜草科類型環(huán)肽RA - V(1)和RA - XII (2)或其藥理學(xué)上容許
的鹽為有效成分的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑，
[0009]
【權(quán)利要求】
1.以下述結(jié)構(gòu)式所示的茜草科類型環(huán)肽RA-V(I)和RA-XII(2)或其藥理學(xué)上容許的鹽為有效成分的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑，

2.用權(quán)利要求1中的茜草科植物中的茜草科類型環(huán)肽RA-V(I)和RA-XII(2)作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑。
3.抗腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的茜草科類型環(huán)肽或其藥理學(xué)上容許的鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
4.權(quán)利要求1所述的茜草科類型環(huán)肽或其藥理學(xué)上容許的鹽在制備腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1所述的茜草科類型環(huán)肽或其藥理學(xué)上容許的鹽在制備抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
6.制備權(quán)利要求1所述的茜草科類型環(huán)肽化合物的方法，取茜草屬植物的根莖，經(jīng)干燥、粉碎后，通過甲醇回流充分提取，得甲醇浸膏；結(jié)合環(huán)肽的TLC檢測(cè)方法，利用硅膠、Sephadex LH - 20和HPLC等各種分離材料和技術(shù)進(jìn)行分離純化，即得到茜草科類型環(huán)肽。
7.制備權(quán)利要求1所述的茜草科類型環(huán)肽化合物RA- V(I)和RA - XII (2)的方法，取茜草科植物茜草(Rubia cordifolia L.)的根莖，經(jīng)干燥、粉碎后，利用甲醇熱回流提取3次，每次時(shí)間為3-4小時(shí)，提取液經(jīng)減壓濃縮得甲醇浸膏；甲醇浸膏經(jīng)硅膠柱層析，用氯仿/甲醇(100:0，9:1，8:2，7:3，1:1，0:100)梯度洗脫，通過環(huán)肽TLC檢測(cè)方法合并各餾分得總環(huán)肽部位；以下的每一步驟都須結(jié)合環(huán)肽TLC檢測(cè)方法來進(jìn)行分離純化；總環(huán)肽部位經(jīng)硅膠柱層析，用70:1-8:2的氯仿/甲醇梯度洗脫，根據(jù)環(huán)肽點(diǎn)的不同合并為三個(gè)組分Fr.1-Fr.3 ;對(duì)Fr.1組分經(jīng)硅膠柱層析，用7:3-0:1石油醚/丙酮為洗脫劑分離得到三個(gè)亞組分Fr.1 -1 - Fr.1 - 3 ;其中Fr.1-3亞組分經(jīng)Sephadex LH - 20凝膠柱層析，1:1的氯仿/甲醇為洗脫劑，所富集的含有環(huán)肽的部分再經(jīng)硅膠柱層析，用1:1的石油醚/丙酮洗脫分離得到化合物RA-V (I) ;Fr.3組分經(jīng)硅膠柱層析，10:1-8:2乙酸乙酯/甲醇進(jìn)行梯度洗脫，合并得到四個(gè)亞組分Fr.4 -1 - Fr.4 - 4 ；Fr.4 - 3亞組分以1:1的氯仿/甲醇為洗脫劑直接經(jīng)Sephadex LH - 20進(jìn)行環(huán)肽富集；再經(jīng)硅膠柱層析，95:5_0:1氯仿/甲醇梯度洗脫，合并得到三個(gè)亞組分Fr.4 - 3 -1 - Fr.4 - 3 - 3 ;利用HPLC對(duì)Fr.4 - 3 - 3亞組分進(jìn)行分離，即可得到化合物RA-XII ⑵。
【文檔編號(hào)】A61K38/12GK103880929SQ201410133237
【公開日】2014年6月25日 申請(qǐng)日期:2014年4月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月3日
【發(fā)明者】譚寧華, 劉碧珊, 汪哲, 趙思蒙, 余嘉莉, 梁愷穎, 陳小強(qiáng), 馮國(guó)培, 梁秉中 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所, 香港中文大學(xué)中醫(yī)中藥研究所