一種水產(chǎn)品抑菌劑的制備方法及應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其設及一種水產(chǎn)品抑菌劑的制備方法及應用。
【背景技術(shù)】 陽00引卡拉膠（Carrageenan),又稱角叉菜膠、鹿角菜膠，是自紅藻中提取的一種酸性多 糖，具有1，4-D-半乳化喃糖和1，3-D-半乳化喃糖（或3, 6-內(nèi)酸-D-半乳化喃糖）二糖單 元骨架結(jié)構(gòu)。研究發(fā)現(xiàn)卡拉膠具有降血脂、抗凝血、抗血栓、免疫調(diào)節(jié)、刺激結(jié)締組織生長等 多種生物學活性，但由于卡拉膠分子量較大，溶解性和可吸收性較差，限制了其應用。
[0003] 卡拉膠寡糖由卡拉膠降解酶降解卡拉膠得到，相對卡拉膠而言，卡拉膠寡糖分子 量較小、溶解性較好、穩(wěn)定性和安全性都有所改善，同時因分子鏈上的活性基團充分暴露， 其原有的活性得到提高，甚至產(chǎn)生了新的活性。卡拉膠寡糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗福射、 抗菌和抗病毒等作用?？ɡz寡糖的凝膠化作用和增厚作用可顯著增加免疫器官的重量， 提高機體免疫IL-2(白細胞介素）和TNF-a(腫瘤壞死因子）的含量；卡拉膠寡糖能夠明顯 減輕福射引起的脾臟NK細胞活性的降低，造血功能受抑制、血細胞來源減少等癥狀，提高 機體免疫功能，對福射損傷有明顯的防護作用；卡拉膠寡糖對單純瘤疹病毒1型化SV-1)的 吸附有抑制作用，并且呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系，卡拉膠寡糖對肉仔雞腸道菌增殖的抑制作用、 促進小腸微絨毛生長發(fā)育和提高免疫反應及生產(chǎn)性能的實驗中發(fā)現(xiàn)，卡拉膠寡糖對肉仔雞 盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌有抑制作用。
[0004] 卡拉膠寡糖抗菌活性的應用已有報道，如申請?zhí)枮?01410043525. 3 (申請公布號 CN103789241A)的中國發(fā)明專利《一株I-卡拉膠降解酶及其發(fā)酵方法和應用》中披露了 酶解得到的t-卡拉膠寡糖在制備抗菌藥物、抗病毒藥物、免疫調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑等中的應 用；又如申請?zhí)枮?01510062479. 6(申請公布號為CN104606659A)的中國發(fā)明專利《一種 抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)代謝、增強免疫的口服液》中一種具有抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)代謝、增強免疫 功效的口服液，卡拉膠寡糖為其主要有效原料之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的第一個技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)而提供一種水產(chǎn)品抑菌劑的 制備方法，該制備方法成本低、工藝簡單，且制備的水產(chǎn)品抑菌劑具有較好的抑菌效果。
[0006] 本發(fā)明所要解決的第二個技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)而提供一種上述抗菌劑在水 產(chǎn)品保鮮中的應用。
[0007] 本發(fā)明解決第一個技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種水產(chǎn)品抑菌劑的制備方 法，其特征在于包括W下步驟：
[0008] (1)取適量卡拉膠寡糖溶解于去離子水中，調(diào)節(jié)抑至5. 5~6. 5,加入質(zhì)量比為 1:2~4氯化亞鐵和氯化鋒混合物，卡拉膠寡糖、氯化亞鐵和氯化鋒混合物的質(zhì)量比為5~ 8:1，同時加入Vc加W保護，Vc加入量與氯化亞鐵的質(zhì)量比為1:8~10,反應溫度25~ 30°C，反應時間為2~化；
[0009] 似反應結(jié)束后，乙醇沉淀、離屯、后，獲得的殼寡糖-金屬衍生物沉淀物，經(jīng)冷凍干 燥后獲得卡拉膠寡糖-金屬衍生物；
[0010] (3)將制得的卡拉膠寡糖-金屬衍生物與卡拉膠寡糖W1~2. 5:1混合均勻即得 所需的水產(chǎn)品抑菌劑。
[0011] 作為優(yōu)選，所述卡拉膠寡糖-金屬衍生物中卡拉膠寡糖-亞鐵衍生物與卡拉膠寡 糖-鋒衍生物的質(zhì)量比為2~4:1~3。
[0012] 作為優(yōu)選，所述卡拉膠寡糖的分子量為1000~3000化。
[0013] 本發(fā)明解決第=個技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：上述抑菌劑在水產(chǎn)品保鮮中的 應用。
[0014] 作為優(yōu)選，上述抑菌劑在水產(chǎn)品保鮮中的應用包括W下步驟：取上述抑菌劑溶于 無菌水中制成溶度為0. 5~1. 5%的抑菌劑溶液，將新鮮水產(chǎn)品經(jīng)前處理后進行快速冷凍， 在冷凍的水產(chǎn)品表面噴涂所述抑菌劑溶液，最后將水產(chǎn)品包裝并于-20~-18°C下儲藏；或 取上述抑菌劑溶于無菌水中制成溶度為0. 5~1. 5%的抑菌劑溶液，將新鮮水產(chǎn)品經(jīng)前處 理后浸沒于抑菌劑溶液中3~5s后，進行快速凍結(jié)，最后將水產(chǎn)品包裝并于-20~-18°C下 儲藏。
[0015] 進一步，所述快速冷凍的溫度為-30°C~-35°C。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明由卡拉膠寡糖制備卡拉膠寡糖-金 屬衍生物（卡拉膠寡糖-亞鐵衍生物和卡拉膠寡糖-鋒衍生物），該卡拉膠寡糖-金屬衍生 物與卡拉膠寡糖混合溶于無菌水制得水產(chǎn)品抑菌劑，該水產(chǎn)品抑菌劑制備工藝簡單，當用 于水產(chǎn)品保鮮時，卡拉膠寡糖-金屬衍生物和卡拉膠寡糖能協(xié)同發(fā)揮抑菌效應，且該抑菌 劑的質(zhì)地均勻，噴灑于冰凍水產(chǎn)品表面時能較好地滲透擴散于冰凍層中，從而對水產(chǎn)品進 行較好地抑菌保護，且食用時易清洗無殘留，在抑菌保鮮的同時能有效保證水產(chǎn)品的食用 安全性。
【具體實施方式】
[0017]W下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。 陽01引實施例1 :
[0019] 取卡拉膠寡糖（分子量為lOOODa)溶解于去離子水中，調(diào)節(jié)抑至5. 5,加入質(zhì)量比 為1:2的氯化亞鐵和氯化鋒混合物，其中卡拉膠寡糖、氯化亞鐵和氯化鋒混合物的質(zhì)量比 為5:1，同時加入Vc加W保護，Vc加入量與氯化亞鐵的質(zhì)量比為1:8,反應溫度25°C，反應 時間為化。反應結(jié)束后，乙醇沉淀、離屯、后，獲得的殼寡糖-金屬衍生物沉淀物，經(jīng)冷凍干燥 后獲得卡拉膠寡糖-金屬衍生物，該卡拉膠寡糖-金屬衍生物由卡拉膠寡糖-亞鐵衍生物 和卡拉膠寡糖-鋒衍生物組成。
[0020] 將制得的卡拉膠寡糖-金屬衍生物與卡拉膠寡糖W質(zhì)量比1:1混合形成混合物得 所需水產(chǎn)品抑菌劑，其中卡拉膠寡糖-金屬衍生物中卡拉膠寡糖-亞鐵衍生物與卡拉膠寡 糖-鋒衍生物的質(zhì)量比為2:1。 陽OW 實施例2:
[0022]取卡拉膠寡糖（分子量為2500Da)溶解于去離子水中，調(diào)節(jié)抑至6,加入質(zhì)量比 為1:3的氯化亞鐵和氯