述營(yíng)養(yǎng)組合物的重量摩爾滲透壓濃度低于500m0smol/kg，更優(yōu)選低于 450。優(yōu)選地，所述重量摩爾滲透壓濃度高于150。太高的重量摩爾滲透壓濃度或太低的重 量摩爾滲透壓濃度將不利地影響小腸內(nèi)的腔中液體的量。
[0038] 應(yīng)甩
[0039] 用于本發(fā)明方法或用途的本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物特別適用于人類(lèi)受試者，優(yōu)選用于 嬰兒和/或幼兒。嬰兒的年齡為0-12個(gè)月，幼兒的年齡為12-36個(gè)月。更優(yōu)選地，所述營(yíng) 養(yǎng)組合物適用于年齡為0至6個(gè)月的嬰兒。在這樣年幼的受試者中，小腸是未成熟的并且 正在發(fā)育。因此，在該目標(biāo)群體中，本發(fā)明的有利效果對(duì)小腸健康是特別重要的。在所述方 法或用途或根據(jù)本發(fā)明使用的營(yíng)養(yǎng)組合物的一個(gè)實(shí)施方案中，所述營(yíng)養(yǎng)組合物用于向嬰兒 和/或幼兒提供營(yíng)養(yǎng)。
[0040] 本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物優(yōu)選經(jīng)腸內(nèi)給予，更優(yōu)選經(jīng)口服給予。本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物 可有利地作為嬰兒的完全營(yíng)養(yǎng)物使用。本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物優(yōu)選包含脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和碳水 化合物，并優(yōu)選地以液體形式給予。本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物優(yōu)選為一種營(yíng)養(yǎng)配方物，優(yōu)選為一 種嬰兒配方物或后續(xù)配方物（follow on formula)。關(guān)于這種嬰兒配方物或后續(xù)配方物的 組成已知于國(guó)際條例。本發(fā)明包括干營(yíng)養(yǎng)組合物，例如粉末，其附有關(guān)于將所述干組合物、 特別是營(yíng)養(yǎng)配方物與合適的液體例如水混合的說(shuō)明書(shū)。因此，在所述方法或用途或根據(jù)本 發(fā)明使用的營(yíng)養(yǎng)組合物的一個(gè)實(shí)施方案中，所述營(yíng)養(yǎng)組合物為液體形式或適于用水復(fù)溶的 粉末形式。
[0041] 使用插有套管的小豬的動(dòng)物模型，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，營(yíng)養(yǎng)組合物中非消化性寡糖的存 在增加了小腸中的腔液的量，所述非消化性寡糖的濃度為，基于該營(yíng)養(yǎng)組合物的干重計(jì)，至 少2重量％，和/或基于100ml該營(yíng)養(yǎng)組合物計(jì)，至少0. 4g。低于此濃度，沒(méi)有觀(guān)察到這 種作用。發(fā)現(xiàn)存在NDO的直接作用，因?yàn)椴淮嬖谟蓀H的變化指示的微生物群或SCFA的作 用。由于小豬暴露于所述營(yíng)養(yǎng)組合物僅一天，還發(fā)現(xiàn)該作用為急性作用，且不是對(duì)腸的發(fā)育 (例如增加絨毛高度）或回腸黏膜組織的作用。
[0042] 非消化性寡糖對(duì)小腸的作用有益地模擬了母乳喂養(yǎng)嬰兒的情形并通過(guò)稀釋毒素、 病原微生物和蛋白酶活性（例如胰蛋白酶、糜蛋白酶和彈性蛋白酶活性）對(duì)小腸健康具有 有益效果。
[0043] 小腸在有毒化合物、病原體或內(nèi)源性蛋白酶（如消化蛋白酶）中的暴露，可通過(guò)激 活PAR2受體引起上皮損傷、感染，或增加的痛知覺(jué)和/或受損的屏障功能。這對(duì)胃腸健康 具有不利的影響并引起感染和炎癥。因此，當(dāng)給予高于閾值濃度的非消化性寡糖時(shí)，將會(huì)對(duì) 腸道健康舒適、優(yōu)選小腸健康產(chǎn)生有益效果，特別是在年幼的嬰兒中，因?yàn)樗麄兊男∧c尚未 完全發(fā)育。
[0044] 因此，本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物優(yōu)選用于增加受試者小腸內(nèi)的腔液量。隨著這一作用， 腸道健康得到改善，因此，在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述營(yíng)養(yǎng)組合物用于改善腸道健康。
[0045] 增加受試者小腸內(nèi)的腔液量的另一個(gè)優(yōu)勢(shì)為，可降低腸中的腔蛋白酶的活性和密 度、可預(yù)防小腸細(xì)菌的過(guò)度生長(zhǎng)、可增加胃腸的通過(guò)時(shí)間和/或可降低腸內(nèi)毒素的活性。因 此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)組合物優(yōu)選用于降低受試者腸內(nèi)的腔蛋白酶活性或 密度、用于治療和/或預(yù)防受試者的小腸細(xì)菌的過(guò)度生長(zhǎng)、用于增加受試者的胃腸的通過(guò) 時(shí)間和/或用于降低受試者的腸內(nèi)毒素的活性。
[0046] 在一個(gè)實(shí)施方案中，增加受試者的小腸內(nèi)的腔液量的用途是非醫(yī)學(xué)用途。在一個(gè) 優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的非醫(yī)學(xué)用途或非醫(yī)學(xué)方法用于降低受試者的腸內(nèi)的腔蛋白酶活 性或密度和/或增加受試者的胃腸通過(guò)時(shí)間。
[0047] 實(shí)施例
[0048] 實(shí)施例1:含有非消化性寡糖的嬰兒配方物增加小豬的腸容量
[0049] 在出生后14天從8個(gè)不同窩中選擇十八只年齡和重量匹配（Pi6train X(大白豬 X長(zhǎng)白豬））的雄性小豬（平均BW 5. 1±0. 03kg)。將小豬單獨(dú)地置于保持在28°C的溫控室 中。在第26天，禁食過(guò)夜后，在小豬末端回腸的遠(yuǎn)端進(jìn)行T-插管。在試驗(yàn)開(kāi)始之前，允許 小豬恢復(fù)7天。在小豬中測(cè)試6種飲食。將所述飲食溶于軟化水（demineralized water) (37°C)中，使最終的干物質(zhì)含量為20% (w/v)。
[0050] 飲食1為包含短鏈反式半乳寡糖GOS2 (0連接，主要為M，3連接）的嬰兒配方 物，基于總組合物的干重計(jì)，其濃度為1. 0重量％，〇. 2g/100ml。所述配方物的重量摩爾滲 透壓濃度為453±2. 4m0sm/kg。
[0051] 飲食2為不含非消化性寡糖的嬰兒配方物。所述配方物的重量摩爾滲透壓濃度為 421±23. ImOsm/kg。
[0052] 飲食3為包含非消化性寡糖的嬰兒配方物，基于總組合物的干重計(jì)，其濃度為5. 7 重量％，1. 14g/100ml，所述非消化性寡糖為重量比為9:1的短鏈反式半乳寡糖G0S1 (來(lái) 源 Vivinal GOS，F(xiàn)rieslandCampina D0M0，0 連接，主要為 0 1,4 和 0 1,6 連接）和長(zhǎng) 鏈果寡糖（RaftilinHP，Orafti)的混合物的形式。所述配方物的重量摩爾滲透壓濃度為 467±4. 3mOsm/kg〇
[0053] 飲食4為包含與飲食1相同的非消化性寡糖的嬰兒配方物，但基于總組合物 的干重計(jì)，其濃度為0. 5重量％，0. lg/100ml。所述配方物的重量摩爾滲透壓濃度為 427± L 5m0sm/kg〇
[0054] 飲食5為包含飲食3和4的非消化性寡糖的嬰兒配方物，基于總組合物的干 重計(jì)，其總濃度為6. 2重量％，1. 24g/100ml。所述配方物的重量摩爾滲透壓濃度為 481±3. 6m0sm/kg。
[0055] 所述飲食的重量摩爾滲透壓濃度沒(méi)有顯著區(qū)別。應(yīng)當(dāng)注意，由于EU條例，G0S1或 G0S2中的非消化性二糖不能作為膳食纖維。因此，嬰兒配方物上的纖維含量可能被標(biāo)記得 更低。
[0056] 其他細(xì)節(jié)見(jiàn)表1。
[0057] 從出生至第14天，小豬和母豬在一起并僅接受母豬的奶。從第14天直至插管試 驗(yàn)開(kāi)始（第33天），小豬通過(guò)電腦自動(dòng)控制的飼喂系統(tǒng)任意接受所述飲食的混合物。為了 適宜生長(zhǎng)，開(kāi)始時(shí)一天飼喂小豬8次，之后，從第21天開(kāi)始，將進(jìn)食次數(shù)逐步降低至一天4 次，分別在上午7. 00、上午10. 00、下午13. 00和下午16. 00。
[0058] 在插管試驗(yàn)的過(guò)程中（第33天至第44天），根據(jù)拉丁方設(shè)計(jì)（Latin Square design)，十二個(gè)小豬在上午7. 00、上午10. 00、下午13. 00和下午16. 00接受不同飲食，持 續(xù)2天。小豬接受1400kJ/kg體重（代謝體重）。在第33、35、37、39、41和43天改變飲食 之前對(duì)小豬稱(chēng)重。將氧化鉻（〇.25g/kg)作為不可消化的內(nèi)標(biāo)物加入至IF粉末中以測(cè)量消 化物流入回腸收集袋中的量。
[0059] 表1:測(cè)試飲食的組成
[0060]
[0061] 在T-插管試驗(yàn)期間，在第34、36、38、40、42和44天的9. 00至17. OOh連續(xù)收集各 個(gè)飲食的回腸消化物。將每2小時(shí)的消化物收集在小袋中，當(dāng)所述小袋裝滿(mǎn)時(shí)立即排空并 儲(chǔ)存在冰上。將所有樣品儲(chǔ)存在_80°C直至下一步操作。
[0062] 分析冷凍干燥的消化物樣品和飲食粉末中的干物質(zhì)（DM) (80°C下重量分析 法）、氧化絡(luò)（Cr)(電感親合等離子體質(zhì)譜法（inductively coupled plasma mass spectrometry))和粗蛋白（CP) (Kjeldahl method, N x 6.25)〇
[0063] 為了檢測(cè)金屬蛋白酶、絲氨酸蛋白酶和疏基蛋白酶，用基于EnzCheck蛋白酶25焚 光的檢測(cè)試劑盒（E6638, Invitrogen，Carlsbad，Ca，USA)測(cè)定回腸消化物的總蛋白水解活 性。使用豬胰酶（Sigma，P17