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菜籽蛋白微膠囊的超聲波制備方法及作為功能食品的應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):11392176閱讀:695來(lái)源:國(guó)知局
菜籽蛋白微膠囊的超聲波制備方法及作為功能食品的應(yīng)用與流程

本發(fā)明涉及功能食品微膠囊技術(shù)領(lǐng)域,特指一種以油菜籽活性蛋白為原料、采用逆流超聲處理制備微膠囊并對(duì)姜黃素進(jìn)行包埋的的方法,并將其開發(fā)為功能食品。



背景技術(shù):

維生素、不飽和脂肪酸、多酚類化合物或益生菌等生物活性成分,具有調(diào)節(jié)人體生理機(jī)能的功能,可以延緩和預(yù)防慢性疾病的發(fā)生。然而,上述活性成分對(duì)食品加工和儲(chǔ)藏過(guò)程中溫度、氧、光、ph和金屬離子等因素敏感,易于發(fā)生氧化、異構(gòu)化、聚集或降解等結(jié)構(gòu)改變,導(dǎo)致生物活性降低或丟失。而且,疏水性和兩親性活性成分在水中溶解度非常低。這些在很大程度上限制了生物活性成分在食品和醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用。如姜黃素(curcumin),從姜科植物.(curcumalongal)中提取的一種相對(duì)分子質(zhì)量小的多酚類物質(zhì),通常認(rèn)為它是姜黃中最有效的成分。研究表明,姜黃素具有抗炎癥、抗腫瘤、清除自由基、抗癌作、抗氧化、降低血糖、血脂等多種生理活性。然而姜黃素易受環(huán)境因素的影響,如在酸、中性環(huán)境中溶解性低;在堿液中容易降解,性質(zhì)不穩(wěn)定,;在光照、加熱及鐵離子的存在下易分解;口服用藥吸收性差等問(wèn)題。研究發(fā)現(xiàn)對(duì)生物活性成分進(jìn)行包埋是食品加工和儲(chǔ)藏過(guò)程中對(duì)其保護(hù)、消化以及增加生物利用度的一種有效手段。天然的生物大分子(如蛋白質(zhì)、多糖等)不但具有高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,而且具有多種功能特性,已被廣泛用作包埋技術(shù)中的原料。

油菜籽因含有豐富的油脂和優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)而成為世界及我國(guó)重要的油料作物之一。我國(guó)歷來(lái)是油菜生產(chǎn)大國(guó),目前種植面積和產(chǎn)量均居世界之首,其種植面積占全國(guó)油料作物總種植面積的30%以上;菜籽油產(chǎn)量占主要食用植物油總產(chǎn)量的35%以上;2016年全國(guó)油菜籽總產(chǎn)量已達(dá)到1400萬(wàn)噸。油菜籽含有40-45%的油脂,20-25%的蛋白質(zhì)和25%的碳水化合物,不僅是主要的油料作物,也是巨大的植物蛋白資源,菜籽蛋白的氨基酸組成合理,其賴氨酸含量與大豆相當(dāng),而蛋氨酸等含硫氨基酸的含量則高于大豆蛋白,是我國(guó)有待開發(fā)利用的最大優(yōu)質(zhì)實(shí)用蛋白,具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

目前菜籽蛋白并沒有能像大豆蛋白那樣得到廣泛的應(yīng)用,主要有兩個(gè)原因:一是菜籽粕中含有硫苷、植酸等有毒有害物質(zhì),主要還是用作肥料,產(chǎn)品附加值低,資源浪費(fèi)嚴(yán)重;二是對(duì)菜籽蛋白的研究力度、深度和廣度遠(yuǎn)不及對(duì)大豆蛋白的研究。隨著“雙低”油菜的推廣種植,菜籽蛋白作為大宗植物蛋白成為可能,對(duì)菜籽蛋白的研究也隨之變得更加重要。國(guó)內(nèi)外對(duì)菜籽蛋白的提取工藝、結(jié)構(gòu)特性以及功能性質(zhì)進(jìn)行了相應(yīng)研究,但都存在一些諸如提取率不高和工藝復(fù)雜等缺陷,并未實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化,目前國(guó)內(nèi)外都很重視菜籽粕的加工潛質(zhì),積極采用現(xiàn)代加工技術(shù),進(jìn)行綜合加工,以實(shí)現(xiàn)更好的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。目前菜籽粕的深加工主要集中于加工制備菜籽蛋白、菜籽蛋白活性肽以及采用微生物發(fā)酵制備菜籽餅粕飼料。

研究發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)微膠囊可以對(duì)生物活性成分起到很好的包埋和保護(hù)作用。因此國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的蛋白質(zhì)對(duì)生物活性成分包埋的研究。乳化法是蛋白質(zhì)微膠囊包埋生物活性成分的常用方法,此法的不足表現(xiàn)在蛋白質(zhì)微膠囊包埋生物活性成分的過(guò)程中需要添加有機(jī)溶劑、表面活性劑、戊二醛交聯(lián)劑等,這些試劑的殘留使蛋白質(zhì)微膠囊的具有一定毒性;去溶劑法和化學(xué)交聯(lián)法也涉及有毒交聯(lián)劑的引入;因此這三種方法不是蛋白質(zhì)微膠囊包埋生物活性成分的理想方法。離子交聯(lián)法和自組裝法制備蛋白質(zhì)微膠囊,條件溫和,不需要有毒的交聯(lián)劑,不生成化合鍵,僅依靠非共價(jià)鍵進(jìn)行連接,因而被廣泛使用。特別是自組裝法,對(duì)于營(yíng)養(yǎng)遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)而言,安全性等相對(duì)更佳。然而蛋白質(zhì)畢竟是具體獨(dú)特性質(zhì)的生物大分子,僅僅通過(guò)簡(jiǎn)單自組裝法包埋生物活性成分,蛋白質(zhì)分子對(duì)生物活性成分的包埋效率低。

為了解決這一問(wèn)題,本發(fā)明引進(jìn)先進(jìn)的逆流超聲波技術(shù),希望超聲波能激發(fā)蛋白質(zhì)與多酚兩種生物大分子溶液產(chǎn)生與其自身固有頻率相匹配的共振頻率,產(chǎn)生交聯(lián),獲得了一種包埋效率高、ph穩(wěn)定、粒徑均一的蛋白質(zhì)微膠囊,利用所得的蛋白質(zhì)微膠囊對(duì)生物活性成分進(jìn)行包埋和保護(hù)。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

為解決上述問(wèn)題,該發(fā)明主要是通過(guò)掃頻超聲波和逆流超聲波處理等技術(shù)手段制備菜籽活性蛋白微膠囊,并研究其對(duì)姜黃素的包埋作用。

本發(fā)明負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊,是由以下重量份的原料制備而成:

油菜籽活性蛋白:10-25份;

姜黃素:1-5份。

優(yōu)選以下重量份的原料制備而成:

油菜籽活性蛋白:5份;

姜黃素:1份。

其中所述的油菜籽活性蛋白按照下述步驟進(jìn)行制備:

(1)脫脂后的油菜籽餅粕采用粉碎機(jī)粉碎后過(guò)60篩,按照料液比1:10(mg/ml)加入蒸餾水;調(diào)ph到4,在室溫下攪拌2h,4℃下經(jīng)10000r/min離心20min,留離心殘?jiān)?/p>

(2)將離心殘?jiān)凑樟弦罕?:10(mg/ml)加入蒸餾水;調(diào)ph到12,于室溫下攪拌1h,同時(shí)進(jìn)行多頻模式超聲處理,超聲處理結(jié)束后,于4℃下經(jīng)10000r/min離心20min,保留上清液,

(3)將上清液ph調(diào)到4,充分?jǐn)嚢韬箪o置30min;4℃溫度下經(jīng)10000r/min離心20min,收集沉淀,然后將沉淀按照料液比1:10(mg/ml)的比例用ph=4的蒸餾水清洗兩次,經(jīng)冷凍干燥獲得菜籽活性蛋白粉末。

其中步驟(2)中所述的多頻超聲處理模式為:三頻同步或者雙頻同步或者單頻超聲處理,超聲功率密度80~120w/l;超聲脈沖工作時(shí)間10s;脈沖間歇時(shí)間3s,超聲處理時(shí)間為1h。

其中步驟(2)中三頻同步或者雙頻同步或者單頻超聲處理的超聲波頻率組合為:20khz、35khz、35/40khz或者20/35/40khz,優(yōu)選20/35/40khz。

油菜籽活性蛋白微膠囊負(fù)載姜黃素的制備方法,按照下述步驟進(jìn)行:

(1)將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中,磁力攪拌的同時(shí)調(diào)節(jié)ph=12,至蛋白完全溶解;得到油菜籽活性蛋白濃度為(10-25)mg/ml溶液;

(2)將濃度為(10-20)mg/ml的葉黃素乙醇溶液快速注入步驟(1)制備的油菜籽活性蛋白溶液中,使得油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比為(10-25):(1-5);調(diào)節(jié)溶液體系的ph=8~12;

(3)室溫下將步驟(2)得到的混合溶液進(jìn)行逆流超聲波處理,具體參數(shù)為脈沖寬度1~5s、脈沖間隔1~5s、超聲功率密度50~80w/l;超聲頻率20khz,料液以逆流循環(huán)的方式通過(guò)超聲探頭。

(4)超聲結(jié)束后,靜置1h即得負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,噴霧干燥或者冷凍干燥后得到負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊。

其中步驟(2)中所述的油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比例優(yōu)選為5:1。

其中步驟(3)中優(yōu)選調(diào)節(jié)混合溶液的ph=10。

其中步驟(3)中優(yōu)選超聲參數(shù)為脈沖寬度5s、脈沖間隔5s、超聲功率密度80w/l;超聲頻率20khz,料液以逆流循環(huán)的方式通過(guò)超聲探頭。

油菜籽活性蛋白微膠囊負(fù)載姜黃素的制備方法,或者按照下述步驟進(jìn)行:

(1)將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中,磁力攪拌的同時(shí)調(diào)節(jié)ph=12,至蛋白完全溶解;得到油菜籽活性蛋白濃度為(10-25)mg/ml溶液;

(2)將濃度為(10-20)mg/ml的葉黃素乙醇溶液快速注入步驟(1)制備的油菜籽活性蛋白溶液中,使得油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比為(10-25):(1-5);調(diào)節(jié)溶液體系的ph=8~12;

(3)室溫下將步驟(2)得到的混合溶液進(jìn)行雙頻掃頻超聲波處理,雙頻掃頻超聲處理時(shí)固定上下板間距為10cm,掃頻周期300s,間歇比1:1.2(超聲10s,間歇12s),上下每塊振板功率為600w;

(4)超聲結(jié)束后,靜置1h即得負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,噴霧干燥或者冷凍干燥后得到負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊。

其中步驟(2)中所述的油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比例優(yōu)選為5:1。

其中步驟(3)中優(yōu)選調(diào)節(jié)混合溶液的ph=10。

其中步驟(3)中所述的雙頻頻率組合為:33khz/68khz、33khz/40khz、33khz/28khz、28khz/40khz;最優(yōu)選佳頻率組合為33khz/68khz。

包埋姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊具有穩(wěn)定性好、生物相容性好、緩釋時(shí)間長(zhǎng)、包載率高等優(yōu)點(diǎn),可應(yīng)用于食品、保健品、藥品。

本發(fā)明的有益效果在于:

(1)本發(fā)明在油菜籽活性蛋白包埋姜黃素的過(guò)程中施加了逆流超聲波和掃頻超聲波,改變油菜籽活性蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu),使其結(jié)構(gòu)打開,暴露活性基團(tuán),蛋白質(zhì)形成小的聚集體,從而促進(jìn)各聚集體通過(guò)疏水相互作用形成微膠囊為包埋生物活性成分提供基礎(chǔ)。

(2)本發(fā)明在油菜籽活性蛋白包埋姜黃素的過(guò)程中施加了逆流超聲波和掃頻超聲波,,取代傳統(tǒng)制備蛋白微膠囊過(guò)程中的加熱和金屬離子,減少了加熱和金屬離子對(duì)活性成分姜黃素的破壞作用,提高了生物活性成分的包埋效率和負(fù)載率。

(3)本發(fā)明中包埋姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊的制備方法,工藝操作簡(jiǎn)單,制備過(guò)程中未涉及有機(jī)試劑,適宜工業(yè)化生產(chǎn),且油菜籽活性蛋白原料價(jià)格便宜,制備工藝簡(jiǎn)單。

(4)本發(fā)明的包埋姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊具有穩(wěn)定性好、生物相容性好、緩釋時(shí)間長(zhǎng)、包載率高等優(yōu)點(diǎn),可應(yīng)用于食品、保健品、藥品及化妝品等多個(gè)領(lǐng)域。

(5)本發(fā)明以菜籽油加工的下腳料菜籽餅粕為原料,提取其中的油菜籽活性蛋白并用作制備包埋姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊的原料,有利于菜籽加工副產(chǎn)物的綜合利用,同時(shí)提高菜籽餅粕的附加值。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明的多模式超聲波生物處理設(shè)備結(jié)構(gòu)圖,其中1、2、3為超聲振板,4為盛液器,5為水浴鍋,6為溫度探頭,7為循環(huán)泵,8為電腦程序控制器,9、10、11為超聲控制器。

圖2是掃頻雙頻超聲預(yù)處理裝置的設(shè)備圖,1-超聲池,2-溫度計(jì),3-恒溫水浴池,4-超聲波上振板,5-超聲波下振板,6-樣品處理區(qū)域,7-電腦控制器,8-超聲波發(fā)生器。

圖3是逆流超聲處理設(shè)備結(jié)構(gòu)示意圖,1為聚能式超聲波探頭,2為超聲波控制器,3為超聲杯型腔,4為進(jìn)料口,5為循環(huán)泵,6為盛液器,7為出料口。

具體實(shí)施方式

在本發(fā)明中所使用的術(shù)語(yǔ),除非有另外說(shuō)明,一般具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的含義。下面結(jié)合具體的實(shí)施例,并參照數(shù)據(jù)進(jìn)一步詳細(xì)地描述本發(fā)明。應(yīng)理解,這些實(shí)施例只是為了舉例說(shuō)明本發(fā)明,而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。

圖1為本發(fā)明的多模式超聲波生物處理設(shè)備,該設(shè)備配有一臺(tái)電腦程序控制器8,可設(shè)定超聲工作參數(shù)(超聲功率密度、頻率、脈沖工作時(shí)間、間歇時(shí)間和處理總時(shí)間)分別控制三個(gè)超聲控制器9、10、11,分別連接三支不同頻率的超聲振板1、2、3,可實(shí)現(xiàn)單一頻率/兩個(gè)頻率/三個(gè)頻率超聲波處理;將需要處理的溶液投入盛液器4中進(jìn)行單頻/雙頻/多頻超聲處理,啟動(dòng)循環(huán)泵7對(duì)溶液進(jìn)行循環(huán)。通過(guò)水浴鍋5和溫度探頭6實(shí)現(xiàn)溶液溫度的自動(dòng)控制。

圖2為本發(fā)明使用的掃頻雙頻超聲預(yù)處理裝置的設(shè)備圖,為江蘇大學(xué)自主研制。超聲發(fā)生器8能發(fā)出定頻和掃頻兩種模式的超聲波,單臺(tái)超聲波發(fā)生器功率為600w。在超聲池1中上下對(duì)稱放置超聲波振板上板4和超聲波下板5,通過(guò)超聲波發(fā)生器8控制超聲波振板上板4和超聲波下板5;電腦控制器7設(shè)定超聲波各參數(shù)后,控制超聲波發(fā)生器8,發(fā)出符合要求的超聲波;3為本發(fā)明中設(shè)備的恒溫水浴池,通過(guò)溫度計(jì)2實(shí)時(shí)監(jiān)控溫度,并根據(jù)工作需要調(diào)節(jié)介質(zhì)溫度;將需要處理的液原料置于樣品袋中置于處理液區(qū)域6中進(jìn)行超聲波處理。

圖3為本發(fā)明的逆流超聲處理設(shè)備,該設(shè)備配有超聲波控制器2,控制超聲參數(shù),聚能式超聲波探頭1對(duì)進(jìn)料口4進(jìn)入超聲杯型腔3的物料進(jìn)行處理,超聲的同時(shí)啟動(dòng)循環(huán)泵5對(duì)料液進(jìn)行循環(huán),6為盛液器,7為出料口。

本發(fā)明中的油菜籽活性蛋白或者按照下述步驟進(jìn)行制備:

(1)脫脂后的油菜籽餅粕粉碎過(guò)60篩,按照料液比1:10(mg/ml)加入蒸餾水;調(diào)ph到4,在室溫下攪拌2h,4℃10000r/min離心20min,留離心殘?jiān)?/p>

(2)將離心殘?jiān)凑樟弦罕?:10(mg/ml)加入蒸餾水;調(diào)ph到12,于室溫下攪拌1h,同時(shí)進(jìn)行多頻模式超聲處理,超聲處理結(jié)束后于4℃10000r/min離心20min,保留上清液。多頻超聲處理模式為:三頻同步或者雙頻同步或者單頻超聲處理,超聲功率密度80~120w/l;超聲脈沖工作時(shí)間10s;脈沖間歇時(shí)間3s,超聲處理時(shí)間為1h。三頻同步超聲處理的超聲波頻率組合為:20/35/40khz。

(3)將上清液ph調(diào)到4,充分?jǐn)嚢韬箪o置30min;4℃10000r/min離心20min,收集沉淀,然后將沉淀按照料液比1:10(mg/ml)的比例用ph=4的蒸餾水清洗兩次,經(jīng)冷凍干燥獲得菜籽活性蛋白粉末,經(jīng)測(cè)定油菜籽蛋白的純度為86%,油菜籽蛋白的得率為26%。

實(shí)施例1-4(不加超聲)

(1)將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中,磁力攪拌的同時(shí)調(diào)節(jié)ph=12,至蛋白完全溶解;得到油菜籽活性蛋白濃度為(10-25)mg/ml溶液;

(2)將濃度為(10-20)mg/ml的葉黃素乙醇溶液快速注入步驟(1)制備的油菜籽活性蛋白溶液中,使得油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比見表1;調(diào)節(jié)溶液體系的ph=10;

(3)靜置1h后,即得負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,噴霧干燥或者冷凍干燥后得到負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊。

(4)葉黃素包封率和負(fù)載率的測(cè)定

取負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復(fù)合納米顆粒溶液,經(jīng)超濾管(截留分子量12kd)在8000×g下離心30min,取濾液500μl定容至25ml,測(cè)其在波長(zhǎng)為450nm處的吸光值,并計(jì)算游離姜黃素質(zhì)量。根據(jù)下式計(jì)算姜黃素的包封率和負(fù)載率:

姜黃素的包封率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/姜黃素總質(zhì)量;

姜黃素的負(fù)載率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/樣品總質(zhì)量。

實(shí)施例1-4制備過(guò)程相同,只是油菜籽活性蛋白/姜黃素質(zhì)量不同,具體見表1不同油菜籽活性蛋白/姜黃素質(zhì)量比對(duì)姜黃素包封率和負(fù)載率的影響。

通過(guò)表1中對(duì)比實(shí)施例1-4不同油菜籽活性蛋白/姜黃素質(zhì)量比對(duì)姜黃素包封率和負(fù)載率的影響可以看出,隨著油菜籽活性蛋白的量增加,姜黃素的包封率逐步降低,但是當(dāng)油菜籽活性蛋白/姜黃素質(zhì)量比為20:1時(shí),姜黃素的包封率又升高了,達(dá)到了34.8%。

表1不同油菜籽活性蛋白/姜黃素質(zhì)量比對(duì)姜黃素包封率和負(fù)載率的影響

實(shí)施例5-8(加雙頻掃頻超聲處理)

(1)將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中,磁力攪拌的同時(shí)調(diào)節(jié)ph=12,至蛋白完全溶解;得到油菜籽活性蛋白濃度為20mg/ml溶液;

(2)將濃度為(10-20)mg/ml的葉黃素乙醇溶液快速注入步驟(1)制備的油菜籽活性蛋白溶液中,使得油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比為10:1;調(diào)節(jié)溶液體系的ph=10;

(3)室溫下將步驟(2)得到的混合溶液進(jìn)行雙頻掃頻超聲波處理,雙頻掃頻超聲處理時(shí)固定上下板間距為10cm,掃頻周期300s,間歇比1:1.2(超聲10s,間歇12s),上下每塊振板功率為600w;掃頻雙頻頻率組合為:見表2;

(4)超聲結(jié)束后,靜置1h,即得負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,噴霧干燥或者冷凍干燥后得到負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊。

(5)葉黃素包封率和負(fù)載率的測(cè)定

取負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白-殼聚糖復(fù)合納米顆粒溶液,經(jīng)超濾管(截留分子量12kd)在8000×g下離心30min,取濾液500μl定容至25ml,測(cè)其在波長(zhǎng)為450nm處的吸光值,并計(jì)算游離姜黃素質(zhì)量。根據(jù)下式計(jì)算姜黃素的包封率和負(fù)載率:

姜黃素的包封率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/姜黃素總質(zhì)量;

姜黃素的負(fù)載率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/樣品總質(zhì)量。

實(shí)施例9-10(加逆流超聲處理)

(1)將油菜籽活性蛋白溶解到蒸餾水中,磁力攪拌的同時(shí)調(diào)節(jié)ph=12,至蛋白完全溶解;得到油菜籽活性蛋白濃度為20mg/ml溶液;

(2)將濃度為(10-20)mg/ml的葉黃素乙醇溶液快速注入步驟(1)制備的油菜籽活性蛋白溶液中,使得油菜籽活性蛋白和姜黃素的質(zhì)量比為10:1;調(diào)節(jié)溶液體系的ph=10;

(3)室溫下將步驟(2)得到的混合溶液進(jìn)行逆流超聲波處理,具體超聲參數(shù)為脈沖寬度1~5s、脈沖間隔1~5s、超聲功率密度50~80w/l;超聲頻率20khz,料液以逆流循環(huán)的方式通過(guò)超聲探頭。

(4)超聲結(jié)束后,靜置1h即得負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,噴霧干燥或者冷凍干燥后得到負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊。

(5)葉黃素包封率和負(fù)載率的測(cè)定

取負(fù)載姜黃素的油菜籽活性蛋白微膠囊溶液,經(jīng)超濾管(截留分子量12kd)在8000×g下離心30min,取濾液500μl于25ml容量瓶中定容,測(cè)定a450處的吸光值,并計(jì)算游離姜黃素質(zhì)量。根據(jù)下式計(jì)算姜黃素的包封率和負(fù)載率:

姜黃素的包封率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/姜黃素總質(zhì)量;

姜黃素的負(fù)載率(%)=(姜黃素總質(zhì)量-游離姜黃素質(zhì)量)×100/樣品總質(zhì)量。

實(shí)施例5-10制備過(guò)程相同,只是超聲參數(shù)略有改變,表2不同超聲波模式對(duì)姜黃素包封率和負(fù)載率的影響。

表2不同超聲波模式對(duì)姜黃素包封率和負(fù)載率的影響

通過(guò)表2中對(duì)比實(shí)施例5-10不同超聲波模式對(duì)油菜籽活性蛋白微膠囊包埋姜黃素的包封率和負(fù)載率的影響,可以發(fā)現(xiàn)超聲波處理可以顯著提高油菜籽活性蛋白微膠囊包埋姜黃素的包封率,與對(duì)照相比(不超聲),逆流超聲波處理使姜黃素的包封率提高62.7%~70.9%,而33khz/68khz的雙頻掃頻超聲波處理則使姜黃素的包封率提高了77.1%。

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