本發(fā)明涉及從魚類的加工副產(chǎn)物中制備多糖和鈣的技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及從鱘魚骨中制備硫酸軟骨素和鈣的技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

鱘魚卵是加工魚子醬的原料，具有很高的價值，而鱘魚的肉和骨通常作為副產(chǎn)物處理。研究發(fā)現(xiàn)鱘魚骨中的硫酸軟骨素具有防治動脈粥樣硬化、促進(jìn)細(xì)胞代謝、抗凝血、抗腫瘤的作用，而魚骨中的鈣作為有機(jī)鈣是補(bǔ)鈣的最佳選擇，具有很高的開發(fā)價值。

如何高效利用生物資源、提高鱘魚骨的綜合利用率，是值得關(guān)注的問題。鑒于鱘魚骨中含有較高的硫酸軟骨素和活性鈣，充分利用各種成分可明顯提高鱘魚骨的應(yīng)用價值。在硫酸軟骨素提取方面，劉乃山等公開了一種酶法提取軟骨中硫酸軟骨素的工藝(cn104448039a)，是將軟骨粉碎加入堿液，調(diào)ph9.0～9.5，加入一定比例胰酶和胃蛋白酶提取，加入活性炭和高嶺土吸附雜質(zhì)，添加乙醇獲得沉淀，離心抽濾烘干得到硫酸軟骨素；石國宗等公開了一種從鱘魚骨制備低分子量硫酸軟骨素的方法(cn104498564a)，技術(shù)工藝包括一鱘魚骨為原料，通過煮沸、乙醚乙醇處理、烘干粉碎、2次酶提取、吸附、梯度洗脫、沉淀、離心干燥等步驟制備低分子量的硫酸軟骨素。在骨鈣的提取方面，郁正剛等公開了一種脫脂發(fā)酵提取骨鈣的方法(cn102871122a)，步驟包括三次脫脂、兩次離心、發(fā)酵和蛋白酶水解；林麗艷公開了一種從動物軟骨提取軟骨鈣粉的方法(cn103114116a)，是將動物軟骨粉碎、酶解、沉淀、氧化脫色、干燥、沉淀得到骨鈣粉。關(guān)于魚骨的綜合利用，王本新等人公開了一種用魚骨制備硫酸軟骨素并聯(lián)產(chǎn)膠原蛋白肽、生物鈣的方法(cn104480168a),是將魚骨預(yù)處理后經(jīng)發(fā)酵、分離等步驟，上清夜經(jīng)離心、噴霧干燥得到生物鈣，沉淀經(jīng)酶解、純化、噴霧干燥制得膠原蛋白肽，用氯化鈉洗脫后進(jìn)一步得到硫酸軟骨素。硫酸軟骨素和鈣是鱘魚魚骨中的主要營養(yǎng)功效成分，但目前還未見綜合利用魚骨提取這兩種成分的報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于開發(fā)一種綜合利用鱘魚骨制備硫酸軟骨素和鈣的工藝，該工藝對魚骨中的硫酸軟骨素和鈣進(jìn)行連續(xù)提取，不僅高效的利用了鱘魚魚骨原料，而且比分別提取這兩種營養(yǎng)組分節(jié)省了工藝步驟，降低了生產(chǎn)成本。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種利用鱘魚骨制備硫酸軟骨素和鈣的工藝，包括以下步驟：

s1、以鱘魚骨為原料，80～90℃熟化，用8～10倍所述鱘魚骨質(zhì)量的脫腥劑浸泡脫腥，撈出后用3～5倍所述鱘魚骨質(zhì)量的無水乙醇浸泡脫脂，60℃烘干，粉碎得到直徑小于0.5mm的骨粉；將得到的骨粉在121～125℃、0.1～0.5兆帕的條件下，高溫高壓處理15～30分鐘；

s2、用蛋白酶解法處理骨粉，使硫酸軟骨素與蛋白分離，得到粗硫酸軟骨素，靜置冷卻后離心，分別收集上清液及沉淀，向所述上清液中加入所得上清液體積0.09～0.1倍的體積濃度為80％三氯乙酸沉淀蛋白，靜置8小時后離心取上清液，加入3～4倍體積的無水乙醇沉淀硫酸軟骨素，靜置8小時后離心，將沉淀溶于2～3倍去離子水，透析袋截留液經(jīng)真空凍干后得到硫酸軟骨素粉末；

s3、采用乳酸或檸檬酸和蘋果酸的混合液酸處理步驟s2酶解后收集的沉淀，靜置離心后取上清，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph7～8，真空凍干后得到檸檬酸蘋果酸鈣(cmc)粉末。

優(yōu)選方式下，步驟s1所述脫腥劑為0.1g/l氯化鈉和0.5g/l生姜1:1配制成的溶液。本發(fā)明采用氯化鈉和生姜制成的脫腥劑對本發(fā)明的脫腥效果最好。

優(yōu)選方式下，步驟s2所述酶解法提取為加入干料重2％的胰蛋白酶和干料10倍體積的水，冰醋酸調(diào)ph至6～7，55～65℃攪拌6～7小時，80～90℃加熱30～60分鐘。

優(yōu)選方式下，步驟s1粉碎采用球磨機(jī)粉碎，其頻率為30hz,時間為120秒。

優(yōu)選方式下，步驟s2所述透析使用截留分子量7.5～10kd的透析裝置。

優(yōu)選方式下，步驟s3所述酸處理為加入15～20倍乳酸或10～15倍檸檬酸和蘋果酸按質(zhì)量比1:1配制的混合液，50～60℃震蕩2～3小時。

所述蘋果酸和檸檬酸純度為95％，乳酸純度為80％。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

1、本發(fā)明避免了堿處理對硫酸軟骨素的破壞。

2、本發(fā)明以鱘魚加工下腳料魚骨為原料，原料來源豐富，連續(xù)提取硫酸軟骨素和活性鈣，實(shí)現(xiàn)了原料的綜合利用，聯(lián)產(chǎn)(同時提取硫酸軟骨素和活性鈣)工藝比單產(chǎn)工藝設(shè)備利用率高，節(jié)約能源，降低生產(chǎn)成本。

3、本發(fā)明用酶法和有機(jī)酸制備產(chǎn)品，條件溫和，不會對生產(chǎn)者和食用者產(chǎn)生危害。

4、本發(fā)明提取的硫酸軟骨素和活性鈣，具有綜合保健效果，且益于人體吸收。經(jīng)專利檢索，目前國內(nèi)外還未有此產(chǎn)品。

綜上所述，本發(fā)明依次提取魚骨中的硫酸軟骨素和鈣，提取硫酸硫酸軟骨素過程中的粉碎、酶解等處理有助于骨中鈣的釋放。對魚骨中的硫酸軟骨素和鈣進(jìn)行連續(xù)提取，不僅高效的利用了鱘魚魚骨這一魚子醬加工的副產(chǎn)物，而且比分別提取這兩種營養(yǎng)組分節(jié)省了工藝步驟，降低了生產(chǎn)成本。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(1)以190g鱘魚骨為原料，切塊后，85℃熟化去除魚肉，用10倍的0.1g/l氯化鈉和0.5g/l生姜1:1配制成的溶液浸泡脫腥，撈出后用5倍的無水乙醇浸泡脫脂，60℃烘干后用球磨機(jī)以30hz,120秒為條件粉碎得到骨粉，121℃，0.2兆帕，20分鐘高溫高壓殺菌處理；

(2)加入干料重2％胰蛋白酶和10倍水，冰醋酸調(diào)ph6.05,60℃攪拌6小時，85℃加熱40分鐘，靜置冷卻后離心，取上清液，加入酶提取液體積0.1倍的80％三氯乙酸沉淀蛋白，靜置8小時后離心取上清液，加入3倍體積的無水乙醇沉淀硫酸軟骨素，靜置8小時后離心，將沉淀溶于2倍去離子水，用截留分子量7.5～10kd的透析裝置透析，真空凍干后得到硫酸軟骨素粉末18604mg；

(3)骨粉加入10倍檸檬酸和蘋果酸按質(zhì)量比1:1配制的混合溶液，60℃震蕩2小時，靜置離心后取上清，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph7.1，真空凍干后得到cmc活性鈣粉末14.8g。

實(shí)施例2

(1)以121g鱘魚骨為原料，切塊后，90℃熟化去除魚肉，用9倍的0.1g/l氯化鈉和0.5g/l生姜1:1配制成的溶液浸泡脫腥，撈出后用4倍的無水乙醇浸泡脫脂，60℃烘干后用球磨機(jī)以30hz,120秒為條件粉碎得到骨粉，121℃，0.2兆帕，20分鐘高溫高壓殺菌處理；

(2)加入干料重2％胰蛋白酶和10倍水，冰醋酸調(diào)ph6.2,65℃攪拌6小時，85℃加熱40分鐘，靜置冷卻后離心，取上清液，加入酶提取液體積0.09倍的80％三氯乙酸沉淀蛋白，靜置8小時后離心取上清液，加入3倍體積的無水乙醇沉淀硫酸軟骨素，靜置8小時后離心，將沉淀溶于2倍去離子水，用截留分子量7.5～10kd的透析裝置透析，真空凍干后得到硫酸軟骨素粉末11823mg；

(3)骨粉加入20倍乳酸，60℃震蕩3小時，靜置離心后取上清，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph7.07，真空凍干后得到cmc活性鈣粉末10.5g。

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。