本發(fā)明涉及一種以酵母培養(yǎng)物為載體的葡萄糖氧化酶飼料添加劑的制備及使用方法。
背景技術：
近年來隨著人們對于食品安全及生態(tài)環(huán)境問題的日益關注，使得抗生素在畜牧業(yè)上的應用越來越被重視。長期使用抗生素不僅會帶來大量的藥物殘留，直接危害到人們的身體健康，而且會使動物產(chǎn)生耐藥性，進而影響其生產(chǎn)性能。近年來，國家不斷出臺政策縮小抗生素的使用種類和使用劑量，旨在提高食品安全及生態(tài)環(huán)境的改善，因此能夠替代抗生素的綠色飼料添加劑成了研究的熱點。
葡萄糖氧化酶系統(tǒng)名稱為β-D-葡萄糖氧化還原酶，在動物胃腸道內(nèi)消耗大量的氧氣，將β-D-葡萄糖催化生成葡萄糖酸和過氧化氫。它的功能主要有以下幾個方面：
1、制造胃腸道厭氧環(huán)境：
葡萄糖氧化酶在發(fā)生催化反應的過程需要消耗大量的氧氣，為胃腸道營造一個厭氧的生態(tài)環(huán)境，有利于腸道內(nèi)有益菌的增殖，同時又抑制性的限制了有害菌的生長，改善并優(yōu)化了胃腸道內(nèi)的菌群結構，提高了動物腸道健康。
2、降低胃腸道PH值：
催化過程中產(chǎn)生大量的葡萄糖酸及過氧化氫，葡萄糖酸是一種天然酸化劑，與過氧化氫一起降低了胃腸道內(nèi)的PH值，這種酸性環(huán)境能夠刺激腸道蠕動，提升腸道動力，激活內(nèi)源酶的活性，有利于食糜與消化酶的均勻混合，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率。
3、凈化腸道作用：
催化產(chǎn)物過氧化氫具有強大的殺菌能力，直接抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的生長，能夠減少腸道疾病的發(fā)生。
4、保護腸道發(fā)育作用：
葡萄糖氧化酶具有抗氧化作用，能夠清除動物體內(nèi)因疾病及應激狀態(tài)產(chǎn)生的自由基，保護腸道上皮細胞完整，阻止病原菌入侵。葡萄糖酸在腸道后段被菌群利用產(chǎn)生丁酸，為腸上皮提供能量，刺激腸上皮細胞生長，增強黏膜通透性，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
5、祛除霉菌毒素作用：
葡萄糖氧化酶能夠抑制黃曲霉、黑根霉和青霉等多種霉菌。對黃曲霉毒素B1有氧化作用，使其毒性消失；同時能刺激胃腸產(chǎn)生解毒酶，誘發(fā)機體自身解毒能力增強，破壞黃曲霉毒素B1分子結構，使毒性消失。
1999年農(nóng)業(yè)部將葡萄糖氧化酶作為新型飼料添加劑，多年來的生產(chǎn)實踐證明，其可以有效的替代抗生素或是減少抗生素的使用，保護動物機體健康，提高其生產(chǎn)性能。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供了一種以酵母培養(yǎng)物為載體的葡萄糖氧化酶飼料添加劑，以解決目前單獨使用酶制劑或酵母培養(yǎng)物而產(chǎn)生的作用效果單一的缺點。
本發(fā)明將葡萄糖氧化酶和酵母培養(yǎng)物有機結合，通過改善動物胃腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境，根據(jù)腸道微生物區(qū)系平衡原理，結合分子生物學和基因工程學，選取高效酵母菌進行深度發(fā)酵的代謝物為載體，精準添加高酶活的葡萄糖氧化酶，兩者互為促進、協(xié)同作用。
本產(chǎn)品主要成分為葡萄糖氧化酶，載體為酵母培養(yǎng)物，兩者比例1:15-35。各種有效成分的范圍為：葡萄糖氧化酶酶活為≥60000U/g，酵母培養(yǎng)物粗蛋白質(zhì)≥15％，甘露聚糖≥1％。
發(fā)明產(chǎn)品的制備：
1、葡萄糖氧化酶的制備：
(1)、培養(yǎng)黑曲霉細胞。(2)、過濾、酸化濾液。(3)、分離、洗脫、離心得到沉淀物。(4)、結晶、冷凍干燥得到純品。
2、酵母培養(yǎng)物的制備：
(1)、高效酵母菌“賽克靈”在液體培養(yǎng)基上進行種菌培養(yǎng)、增殖與發(fā)酵。(2)、將谷物培養(yǎng)基與液體發(fā)酵液相混合繼續(xù)發(fā)酵，然后將發(fā)酵產(chǎn)物進行烘干、粉碎，包裝。酵母培養(yǎng)物包括酵母細胞、酵母細胞代謝物及變性的培養(yǎng)基。
3、復合：
將上述制備的葡萄糖氧化酶與酵母培養(yǎng)物按照1：25-40的比例加入螺旋混合機充分混合。
本發(fā)明產(chǎn)品的使用方法簡單，將其按照0.1％的比例與配合飼料混合均勻即可。與現(xiàn)有的技術相比，本發(fā)明的飼料添加劑主要有以下優(yōu)點：
將葡萄糖氧化酶和酵母培養(yǎng)物有機結合，發(fā)揮兩者協(xié)同作用，添加量低、使用成本低、作用效果明顯，能夠有效替代抗生素或減少抗生素的使用。
1、有效調(diào)節(jié)胃腸道生理環(huán)境，低PH值能夠激發(fā)腸道動力、促進消化酶分泌及活性、增強消化酶與食糜的混合，有效提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。
2、直接為動物胃腸道微生物提供營養(yǎng)物質(zhì)，同時厭氧環(huán)境可以促進有益菌增殖、抑制有害菌、平衡胃腸道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境及菌群結構，有利于提高飼料利用率。
3、本產(chǎn)品可以清除體內(nèi)自由基及具有抗氧化的作用，提高動物機體的特異性及非特異性免疫水平，促進免疫器官發(fā)育、保護腸道，提高機體抗病能力。
4、葡萄糖氧化酶及酵母培養(yǎng)物可以協(xié)同作用祛除霉菌毒素，在實際生產(chǎn)中具有非常重要的現(xiàn)實意義。
具體實施方式
本發(fā)明結合以下實例進行進一步說明。
實施例1：
取葡萄糖氧化酶與酵母培養(yǎng)物按照1：30的比例一起置于螺旋混合機中混合均勻，得到本發(fā)明的一種豬用飼料添加劑。
動物研究表明，添加了0.1％發(fā)明產(chǎn)品，使得仔豬平均日增重提高了10.3％、飼料轉(zhuǎn)化效率提高了8.4％、腸道內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)分別提高了9.6％和7.5％、大腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的數(shù)量分別下降了15.6％和2.8％。
實施例2：
取葡萄糖氧化酶與酵母培養(yǎng)物按照1：35的比例一起置于螺旋混合機中混合均勻，得到本發(fā)明的一種禽用飼料添加劑。
動物研究表明，添加0.1％發(fā)明產(chǎn)品，使得蛋雞產(chǎn)蛋率提高了16.7％、破蛋率下降了50.3％，飼料轉(zhuǎn)化率提高了10.3％、死淘率下降了65.4％。