本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)，更具體地，涉及一種通過生物技術(shù)降解動物飼料中的玉米赤霉烯酮的脫毒劑及其該脫毒劑的制備工藝。

背景技術(shù)：

飼料霉菌毒素：霉菌產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，對動物的生長速度、身體器官、繁殖性能、生產(chǎn)性能等帶來負面影響。

玉米赤霉烯酮：具有雌激素作用，主要作用于生殖系統(tǒng)，可使家畜，家禽產(chǎn)生雌性激素亢進癥。母畜動物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的飼料可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎；

霉菌毒素吸附劑：將部分、少量、特定毒素通過物理方式吸附掉，排出體外，不會改變毒素性狀和化學(xué)結(jié)構(gòu)；

目前我國原料污染比較嚴(yán)重，且霉菌毒素的污染已是一個全球性問題，據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織調(diào)查，全世界每年被真菌污染的谷物，油料種子和飼料約占其總量的10%左右，而據(jù)美國的調(diào)查，全世界貿(mào)易供應(yīng)的谷物中，有25%受到霉菌毒素的污染。霉菌毒素嚴(yán)重威脅著動物的生產(chǎn)性能和人類健康，每年給食品工業(yè)、飼料工業(yè)和畜牧業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。由于物理和化學(xué)方法去除霉菌毒素存在種種應(yīng)用缺陷，目前生物降解已成為安全、高效且環(huán)保的解毒方法而備受關(guān)注。

目前對霉菌毒素脫毒處理主要有：機械脫毒、生物脫毒、化學(xué)脫毒及物理吸附脫毒等方法。其中，機械脫毒、化學(xué)脫毒因操作繁雜、成本高昂、自身脫毒技術(shù)缺陷、以及化學(xué)品殘留等問題無法在生產(chǎn)實踐中有效使用；物理吸附劑脫毒法主要是通過在飼料或谷物中添加各種吸附劑，降低或消除霉菌毒素在胃腸道的吸收，即在飼料中添加可以吸附霉菌毒素的物質(zhì)，使毒素在經(jīng)過動物腸道時不被動物所吸收，直接排出動物體外。這是目前飼料市場上較為成熟且較可行的一種霉菌毒素脫毒方法，但是考慮到霉菌毒素結(jié)構(gòu)的多樣性、特異性和單一性、常規(guī)吸附劑物質(zhì)的局限性，任何單一、常規(guī)的吸附劑物質(zhì)均不能有效解決多種霉菌毒素的污染及危害問題。目前廣泛研究的霉菌毒素吸附劑包括粘土類吸附劑或者有機多聚體，但就目前使用的情況來看，效果均不理想。

目前市場上解決霉菌毒素問題基本以吸附劑為主，主要成分為基本為蒙脫石、酵母細胞壁多糖?；驹硎抢枚叩奈锢砦?，將部分毒素吸附后排除體外，但吸附劑的缺點是只能吸附部分毒素，不能徹底解決霉菌毒素帶來的危害；另外吸附劑在吸附毒素的同時還會吸附飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)及添加劑藥物，對動物的生產(chǎn)性能帶來負面影響，影響?zhàn)B殖者的經(jīng)濟效益。

玉米赤霉烯酮毒素具有雌激素作用，主要作用于生殖系統(tǒng)，可使家畜，家禽產(chǎn)生雌性激素亢進癥。母畜動物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的飼料可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎。

當(dāng)今去除玉米赤霉烯酮的方法主要為物理吸附方法，采用吸附劑去除飼料中的玉米赤霉烯酮，不僅效果不理想，而且在吸附玉米赤霉烯酮的同時會吸附飼料中的一些小分子營養(yǎng)物質(zhì)，造成飼料營養(yǎng)失衡，影響飼料的消化吸收。此外，實際生產(chǎn)中使用生物酶制劑去除飼料中的玉米赤霉烯酮，雖然效果可以，但是酶制劑的活性容易受到外界一些因素的干擾，如溫度、濕度以及飼料中的一些微生態(tài)制劑，而且酶制劑在飼料制粒過程中，往往會大大降低其活性，影響其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用。

生物脫毒為一種新型的霉菌毒素脫毒方式，主要有酶解法和微生物發(fā)酵法。酶解法主要是選用某些酶，利用其降解或破壞毒素。但此類方法由于霉菌毒素種類較多，要求酶系復(fù)雜完整，且易受動物消化器官功能的影響；另外由于酶不耐熱而在飼料加工過程中容易失活，并且成本較高，也難以在實際生產(chǎn)中推廣使用。采用微生物發(fā)酵來去除霉菌毒素有許多報道，如將霉菌毒素發(fā)酵轉(zhuǎn)化為其它的產(chǎn)物，但這種轉(zhuǎn)化通常是緩慢的，而且是不完全的，并且轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的安全性尚無定論，能否在實際生產(chǎn)中發(fā)揮作用還需作系統(tǒng)完善的研究。因此，研究一種安全、有效，既能有效地降低霉菌毒素對動物的危害，又不對動物生長造成負面影響，對藥物及其他營養(yǎng)物質(zhì)無吸附作用的霉菌毒素降解吸附劑，是一項極具前景的研究課題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有吸附劑的不足,提供一種能通過生物降解飼料中的玉米赤霉烯酮、增強動物機體抵抗力、調(diào)整腸道健康，有效預(yù)防、消除玉米赤霉烯酮對動物危害的飼料添加劑及其制備工藝。

為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種新型玉米赤霉烯酮脫毒處理技術(shù)，通過生物發(fā)酵技術(shù)，將能夠分解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌發(fā)酵形成產(chǎn)品，枯草芽孢桿菌進入體內(nèi)產(chǎn)生分解毒素的酶，對玉米赤霉烯酮生物降解以達到祛除毒素的目的。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種生物降解飼料中玉米赤霉烯酮的脫毒劑，所述脫毒劑由以下成分的重量份復(fù)配而成：

膨潤土 40～60；

免疫多糖 20；

自由基清除劑 10～20；

枯草芽孢桿菌粉劑 20～30；

其中，所述枯草芽孢桿菌粉劑為降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌制成的粉劑。

本發(fā)明的生物降解飼料中玉米赤霉烯酮的脫毒劑的制備工藝包括步驟：

1)將試管中奶粉保存的降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌原始菌種按2%的接種量接種于盛放LB培養(yǎng)基的三角瓶中，并于37℃，200r/min的條件下培養(yǎng)24h進行種子液活化，將活化好的種子液以2%的接種量接種于盛放培養(yǎng)基的一級發(fā)酵罐中進行種母培養(yǎng)，在發(fā)酵過程中通過空氣壓縮器不間斷將無菌空氣輸送到發(fā)酵罐中；

2）將一級發(fā)酵罐中發(fā)酵的種母培養(yǎng)液通過無菌管道輸入盛放LB培養(yǎng)基的二級發(fā)酵罐進行放大培養(yǎng)，調(diào)節(jié)發(fā)酵罐中培養(yǎng)基的pH值為8.0±0.5，且通過空氣壓縮機不間斷通入無菌空氣，調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度為37±2℃，轉(zhuǎn)速為200r/min，使有益菌發(fā)酵最大化；

3）通過高速離心分離器將菌體和發(fā)酵液進行分離，將分離得到的發(fā)酵液通過無菌管道，輸送到交換樹脂塔進行濃縮，濃縮后的發(fā)酵液通過噴霧干燥塔將菌液迅速干燥制成降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌粉劑；

4）將20重量份的免疫多糖、10～20重量份的自由基清除劑進行第一次混合,得到一次混合物；

5）在一次混合物中加入20～30重量份發(fā)酵的枯草芽孢桿菌粉劑進行第二次混合,得到二次混合物；

6）在第二次混合物中加入40～60重量份膨潤土作為載體,即得到成品。

所述一級發(fā)酵罐和二級發(fā)酵罐的LB培養(yǎng)基配方和配置方法為:胰蛋白胨10g，氯化鈉10g，酵母浸粉5g，用蒸餾水定容到1000mL，調(diào)節(jié)pH=7.4，封口后，于121℃，高壓滅菌20min。

所述一級發(fā)酵罐中進行種母培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分的重量百分比為：麩皮80%、稻殼15%、豆粕4.95%和硫酸鹽0.05&，料水比，1:1.1。

所述無菌空氣采用蒸汽滅菌器進行滅菌。

本發(fā)明將降解玉米赤霉烯酮毒素的枯草芽孢桿菌復(fù)合，芽孢桿菌進入體內(nèi)產(chǎn)降解毒素的酶，將霉菌毒素酶解成無毒物質(zhì)而達到去除毒素的目的,且在體內(nèi)能夠持續(xù)產(chǎn)酶，產(chǎn)酶量大，降解效率高；而且芽孢桿菌耐高溫、耐酸、耐抗生素，抗逆性強。所以以芽孢桿菌的形式復(fù)合產(chǎn)品優(yōu)勢較大。將降解毒素的酶提出做成產(chǎn)品,成本低，且酶的抗逆性強，耐高溫。

本發(fā)明對玉米赤霉烯酮的降解率高達95%以上，降解效率高，避免了吸附劑的缺陷，且產(chǎn)品中添加免疫多糖、清除自由基成分，能夠起到保肝護肝、提高機體免疫力的功能，效果明顯。

附圖說明

圖1是本發(fā)明脫毒劑的工藝流程圖。

具體實施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖和具體實施例，對本發(fā)明進一步詳細說明。

本發(fā)明是通過多株不同的有益菌組合，有益菌在體內(nèi)產(chǎn)生降解玉米赤霉烯酮的酶，將玉米赤霉烯酮酶解成無毒物質(zhì)，從而達到消除毒素的目的，這種生物降解方法降解效率高，特異性強，排毒效果速度。且配方中加入免疫多糖和清除自由基成分，起到提高機體免疫力和保肝護肝的效果，從根本上解決玉米赤霉烯酮帶來的危害。

本發(fā)明的技術(shù)方案：將降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌通過生物發(fā)酵的方式得到枯草芽孢桿菌菌粉，根據(jù)不同的飼料原料類型，將相應(yīng)的枯草芽孢桿菌復(fù)配形成產(chǎn)品。

圖1是本發(fā)明脫毒劑的工藝流程圖。如圖所示，本發(fā)明的工藝流程包括以下步驟：

1、將保存于奶粉試管中降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌按2%的接種量，接種于盛放LB培養(yǎng)基的三角瓶中（LB培養(yǎng)基配方: 胰蛋白胨 10 g，氯化鈉 10 g，酵母浸粉 5 g，用蒸餾水定容到1000mL，調(diào)節(jié)pH=7.4。封口后，于121℃，高壓滅菌20min），并于37℃，200r/min的條件下培養(yǎng)24h進行種子液活化，將活化好的種子液以2%的接種量接種于然后在一級發(fā)酵罐中進行種母培養(yǎng)（培養(yǎng)基成分：麩皮80%，稻殼15%，豆粕4.95%，硫酸鹽0.05%，料水比，1:1.1），由于發(fā)酵的菌是好氧菌，所以在發(fā)酵過程中需要不斷將無菌空氣（采用蒸汽滅菌器進行滅菌）通過空氣壓縮器輸送到發(fā)酵罐中；

2、將一級發(fā)酵罐中發(fā)酵完成的種母培養(yǎng)液通過無菌管道進入二級發(fā)酵罐（培養(yǎng)基成分同一級發(fā)酵罐）進行放大培養(yǎng)，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH=8.0±0.5值，且通過空氣壓縮機不斷通入無菌空氣，調(diào)節(jié)發(fā)酵溫度為37±2℃，轉(zhuǎn)速為200r/min，使有益菌發(fā)酵最大化；

3、將二級發(fā)酵罐中的發(fā)酵產(chǎn)物通過高速離心分離器將菌體和發(fā)酵液進行分離，將分離得到的發(fā)酵液通過無菌管道，輸送到交換樹脂塔進行濃縮，濃縮后的發(fā)酵液通過噴霧干燥塔將菌液迅速干燥制成粉劑，即得到降解玉米赤霉烯酮的菌粉；

根據(jù)不同動物的配方特點，所采用的原料特點，將40%～60%的膨潤土、20%的免疫多糖、10%～20%自由基清除劑、20%～30%發(fā)酵的芽孢桿菌粉劑進行復(fù)配。具體復(fù)配方法：a、按上述比例稱取原料；b、將免疫多糖、自由基清除劑進行第一次混合,得到一次混合物；c、在一次混合物中加入發(fā)酵的枯草芽孢桿菌粉劑進行第二次混合,得到二次混合物；d、在第二次混合物中加入載體膨潤土,即得到成品。

霉菌毒素降解劑的降解機理是通過枯草芽孢桿菌產(chǎn)酶，將霉菌毒素酶解成無毒物質(zhì)而達到去除毒素的目的。如果將降解毒素的酶提出做成產(chǎn)品是最好的，但是這種技術(shù)的缺點是成本太高，且酶的抗逆性差。比如：不耐高溫。

本發(fā)明是由有益菌在體內(nèi)產(chǎn)生降解毒素的酶，將毒素酶解成無毒物質(zhì)，從而達到消除毒素的目的，這種生物降解方法降解效率高，特異性強，排毒效果速度。且配方中加入免疫多糖和清除自由基成分，起到提高機體免疫力和保肝護肝的效果，從根本上解決霉菌毒素帶來的危害。本發(fā)明是將降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢桿菌復(fù)合，枯草芽孢桿菌進入體內(nèi)產(chǎn)生降解霉菌毒素的酶，且在體內(nèi)能夠持續(xù)產(chǎn)酶，產(chǎn)酶量大，降解效率高；而且枯草芽孢桿菌耐高溫、耐酸、耐抗生素，抗逆性強。所以以枯草芽孢桿菌的形式復(fù)合產(chǎn)品優(yōu)勢較大。

以上所述的具體實施例，對本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進行了進一步的詳細說明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的具體實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。