一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素b1和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙的制作方法
【專利摘要】一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，由背板、吸水板、硝酸纖維素膜、樣品吸液板、微孔試劑組成；從硝酸纖維素膜靠近樣品吸液板的那一端開始依次設(shè)置T2試驗(yàn)線、T1試驗(yàn)線、和一條控制線；T1試驗(yàn)線和T2試驗(yàn)線分別由黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮人工抗原包被；控制線由羊抗鼠多克隆抗體包被；微孔試劑為凍干后的膠體金標(biāo)記黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗體。本實(shí)用新型在傳統(tǒng)的膠體金免疫層析試紙基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，將膠體金標(biāo)記抗體復(fù)合物直接凍干于微孔中，使得檢測(cè)過程中待測(cè)樣本與金標(biāo)抗體充分反應(yīng)，提高檢測(cè)靈敏度，可經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)糧食和飼料樣品中的黃曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮?dú)埩簟?br>【專利說明】
一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型涉及糧食和飼料中黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮快速檢測(cè)領(lǐng)域，尤其 是涉及一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃曲霉毒素(aflatoxin，AFT)主要是由黃曲霉和寄生曲霉等真菌產(chǎn)生的一類有毒 次生代謝物。在世界不同地區(qū)都發(fā)現(xiàn)了這些真菌大量存在于供人類食用的食品中，黃曲霉 毒素污染已導(dǎo)致嚴(yán)重的食品安全問題。黃曲霉毒素是一類毒性極強(qiáng)的物質(zhì)，具有強(qiáng)致癌性 和強(qiáng)免疫抑制性。1993年AFT被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為I類致癌物。黃曲 霉毒素廣泛的分布于發(fā)霉的糧食及其制品中，特別是花生、花生油、玉米及其制品、乳及乳 制品，發(fā)霉的飼料中也有發(fā)現(xiàn)含有較多的黃曲霉毒素。迄今為止，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的黃曲霉毒素至 少包含黃曲霉毒素8132、61、62、]\11、]\12等17種結(jié)構(gòu)相似且特征已知的化合物。其中黃曲霉 毒素 B1是(AFTB1)是自然發(fā)生潛力最大、最為常見的一種毒素。是黃曲霉毒素中的主要成 份，其毒性和致癌性也最強(qiáng)。
[0003] 玉米赤霉稀酮(Zearalenone，ZEN)又稱F-2毒素，主要成分為禾谷鐮刀菌和黃色鐮 刀菌等產(chǎn)生的2,4_二羥基苯甲酸內(nèi)酯類化合物。ZEN主要污染玉米、麥類、谷物等作物，具有 很強(qiáng)的雌性激素作用，可引起豬、大鼠、小鼠、家禽等動(dòng)物的雌激素過多癥和嚴(yán)重的生殖道 癥狀及不孕癥，還具有免疫毒性、基因毒性等，對(duì)人也有雌激素作用。
[0004] 目前黃曲霉毒素 B1、玉米赤霉烯酮常用的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法 (HPLC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)和免疫分析法。由于高效液相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用法 儀器昂貴，操作繁瑣，很難廣泛地應(yīng)用到真菌毒素的檢測(cè)中。免疫分析法主要包括酶聯(lián)免疫 法，雖然靈敏度高，但還是存在檢測(cè)費(fèi)用高、操作復(fù)雜的缺點(diǎn)，不適合基層單位大規(guī)模使用。
[0005] 因此，對(duì)黃曲霉毒素 B1、玉米赤酶稀酮快速檢測(cè)技術(shù)的研究迫在眉睫。對(duì)玉米赤酶 稀酬殘留的快速檢測(cè)能適時(shí)的保障糧食、伺料及其制品中的質(zhì)量，將毒素超標(biāo)的廣品控制 在市場(chǎng)之外，減少對(duì)人們的危害。因此，快速檢測(cè)技術(shù)對(duì)于掌握糧食中黃曲霉毒素 B1、玉米 赤酶烯酮的殘留情況，有效控制其殘留量，具有非常現(xiàn)實(shí)的意義。近年來已有利用膠體金法 檢測(cè)糧食和飼料中黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮?dú)埩舻膱?bào)道，但只能檢測(cè)單一品種，且靈 敏度較低。 【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0006] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本
【申請(qǐng)人】提供了一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素 B1和玉 米赤霉烯酮的膠體金試紙。本實(shí)用新型在傳統(tǒng)的膠體金免疫層析試紙基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)， 將膠體金標(biāo)記抗體復(fù)合物直接凍干于微孔中，使得檢測(cè)過程中待測(cè)樣本與金標(biāo)抗體充分反 應(yīng)，提高檢測(cè)靈敏度，可經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)糧食和飼料樣品中的黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯 酮?dú)埩簟?br>[0007] 本實(shí)用新型的技術(shù)方案如下：
[0008] 一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，由背板（1)、吸水板 (2)、硝酸纖維素膜(3)、樣品吸液板(4)、微孔試劑(8)組成；
[0009] 所述硝酸纖維素膜(3)疊放在背板1的中部上面;所述吸水板(2)疊放在背板（1)的 其中一端的端頭部分上面，所述樣品吸液板(4)疊放在背板(1)的另一端的端頭部分上面；
[0010] 所述硝酸纖維素膜(3)兩端分別與吸水板(2)和樣品吸液板(4)相交疊，且所述硝 酸纖維素膜(3)位于吸水板(2)和樣品吸液板(4)的下方；
[0011] 從所述硝酸纖維素膜(3)靠近樣品吸液板(4)的那一端開始，依次設(shè)置T2試驗(yàn)線 (6)、T1試驗(yàn)線(5)、和一條控制線(7);所述T1試驗(yàn)線(5)和T2試驗(yàn)線(6)分別由黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮人工抗原包被;所述控制線(7)由羊抗鼠多克隆抗體包被；
[0012]所述微孔試劑(8)為凍干后的膠體金標(biāo)記黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗 體。
[0013]所述背板（1)是PVC背板，樣品吸液板(4)是玻璃纖維材料，微孔試劑(8)的微孔是 聚苯乙烯材料。
[0014]微孔試劑(8)由凍干后的金納米棒標(biāo)記黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗體 復(fù)合物代替。
[0015] 普通的膠體金試紙?jiān)谑褂脮r(shí)容易出現(xiàn)顯色條顯色較淺，或者暈色的問題，這是由 于吸水板(2)的吸水能力較差導(dǎo)致的。為了克服這一問題，在背板(1)和硝酸纖維素膜(3)之 間設(shè)置一層潤(rùn)濕墊(9);所述潤(rùn)濕墊(9)為3層多孔吸水布疊加而成，所述多孔吸水布上的孔 的直徑為20~40nm，每個(gè)孔的邊緣的距離均為2 5~50nm 〇
[0016]使用時(shí)稱取5g玉米、小麥、或者其他飼料樣品研磨至20目，加入0.1~0.5g鹽，加入 10~30mL 60~80 %甲醇-水溶液，振蕩2~10分鐘，于5000~lOOOOrpm離心2~5分鐘，棄沉 淀，取l〇〇yl上清液加入50~200yL純水混勻待檢。水相待測(cè)樣品，加入微孔中充分混合溶 解，樣品中若含有黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮，樣品中的黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮 將與微孔中黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物發(fā)生特異性結(jié)合，插 入試紙條，由于毛細(xì)管作用樣品將沿著試紙條吸水板端移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至試驗(yàn)線T1、T2時(shí)，由 于黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物與樣品中黃曲霉毒素 B1或玉米 赤霉烯酮優(yōu)先結(jié)合成復(fù)合物而不能與黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮-大分子蛋白偶聯(lián)物結(jié) 合，因此顯色的膠體金不能滯留于試驗(yàn)線上，試驗(yàn)線處沒有色帶顯示，即只有一條控制線為 陽(yáng)性。T1或T2任意一條顯色結(jié)果也判斷為陽(yáng)性。相反如果樣品中沒有黃曲霉毒素 B1或玉米 赤霉烯酮，黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮金標(biāo)單克隆抗體移動(dòng)到試驗(yàn)線上，相應(yīng)的黃曲霉 毒素 B1或玉米赤霉烯酮單克隆抗體就會(huì)與黃曲霉毒素 B1或玉米赤霉烯酮-大分子蛋白偶聯(lián) 物發(fā)生特異結(jié)合，使膠體金滯留于試驗(yàn)線上，即三條色帶為陰性。
[0017] 本實(shí)用新型有益的技術(shù)效果在于：
[0018] 本膠體金試紙改變了以往在樣品洗液板和硝酸纖維素膜之間設(shè)置膠體金結(jié)合墊 的方法，而是將待測(cè)樣品先放入一個(gè)微孔試劑中。這個(gè)微孔試劑是膠體金標(biāo)記了待測(cè)毒素 的抗體和膠體金后凍干后得到的，冷凍干燥在低溫下進(jìn)行，不會(huì)發(fā)生變性或失去生物活力。 在凍干過程中，微生物的生長(zhǎng)和酶的作用無(wú)法進(jìn)行，因此能保持原來的性狀。由于在凍結(jié)的 狀態(tài)下進(jìn)行干燥，因此制品的體積、形狀幾乎不變，保持了原來的結(jié)構(gòu)，不會(huì)發(fā)生濃縮現(xiàn)象。 干燥后的物質(zhì)疏松多孔，呈海綿狀，加水后溶解迅速而完全，幾乎立即恢復(fù)原來的性狀。本 實(shí)用新型具有一次檢測(cè)黃曲霉毒素 B1/玉米赤霉烯酮?dú)埩?、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、方便攜帶、 成本低、檢測(cè)結(jié)果可靠等特點(diǎn)。
【附圖說明】
[0019] 圖1為本膠體金試紙的主視結(jié)構(gòu)圖；
[0020] 圖2為本膠體金試紙的使用圖；
[0021 ]圖3為本膠體金試紙的陰性結(jié)果圖；
[0022] 圖4~6為本膠體金試紙的陽(yáng)性結(jié)果圖；
[0023] 圖7為背板和硝酸纖維素膜之間設(shè)置一層潤(rùn)濕墊；
[0024] 圖中1、背板，2、吸水板，3、硝酸纖維素膜，4、樣品吸液板，5、試驗(yàn)線T1，6、試驗(yàn)線 T2,7、控制線，8、微孔試劑。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 下面結(jié)合附圖，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行具體描述。
[0026] 一、本快速檢測(cè)黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮膠體金試紙的組成：
[0027] 如圖1所示，本膠體金試紙由背板1、吸水板2、硝酸纖維素膜3、樣品吸液板4、微孔 試劑8組成。其中硝酸纖維素膜3疊放在背板1的中部上面。
[0028] 吸水板2疊放在背板1的其中一端的端頭部分上面，樣品吸液板4疊放在背板1的另 一端的端頭部分上面。
[0029] 硝酸纖維素膜3兩端分別與吸水板2和樣品吸液板4相交疊，且硝酸纖維素膜3位于 吸水板2和樣品吸液板4的下方。
[0030] 從硝酸纖維素膜3靠近樣品吸液板4的那一端開始，依次設(shè)置T2試驗(yàn)線6、T1試驗(yàn)線 5、和一條控制線(C線)7,即控制線7靠近吸水板端。
[0031]微孔試劑8為凍干后的膠體金標(biāo)記黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗體。微 孔試劑8也可以由凍干后的金納米棒標(biāo)記黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗體復(fù)合物 代替。
[0032]二、黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮膠體金檢測(cè)試紙的制作：
[0033] 1、免疫原合成:利用活潑酯法合成玉米赤霉烯酮、黃曲霉毒素 B1免疫原。
[0034] 2、黃曲霉毒素 B1/玉米赤霉烯酮單克隆抗體采用如下步驟取得：
[0035] (1)免疫動(dòng)物
[0036]選擇6周齡雌性BALB/C小鼠，將抗原與福氏完全佐劑等量混合、乳化，經(jīng)腹部皮下 多點(diǎn)注射進(jìn)行基礎(chǔ)免疫。分別隔4周，進(jìn)行第二、三次免疫。第三次免疫后第7~10天，斷尾取 血，分離血清，用ELISA方法檢測(cè)血清效價(jià)。用生理鹽水稀釋免疫原對(duì)高效價(jià)小鼠進(jìn)行連續(xù) 加強(qiáng)免疫。
[0037] (2)細(xì)胞融合
[0038] 將50%PEG 4000、無(wú)血清培養(yǎng)液、HAT篩選培養(yǎng)液置37°CC02培養(yǎng)箱中預(yù)熱。收獲對(duì) 數(shù)生長(zhǎng)期的Sp2/0細(xì)胞，用無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌3次，作活細(xì)胞計(jì)數(shù)。無(wú)菌條件下分離脾細(xì)胞， 作活細(xì)胞計(jì)數(shù)。將1 X 108脾細(xì)胞與1 X 107Sp2/0細(xì)胞在50mL尖底離心管中混勻，離心棄去上 清液。將含有脾細(xì)胞和Sp2/0瘤細(xì)胞的50mL尖底離心管放于水杯中，用lmL吸管吸取0.7mL PEG 4000緩慢加入到細(xì)胞混懸液中，靜置90秒，加15mL 37°C預(yù)熱的無(wú)血清培養(yǎng)液，離心棄 去上清液，加入37°C預(yù)溫HAT培養(yǎng)液充分混勻。接種于含有飼養(yǎng)細(xì)胞的96孔培養(yǎng)板中，置37 °C、5 % C02及飽和濕度條件下培養(yǎng)。
[0039] (3)雜交瘤細(xì)胞的篩選和雜交瘤細(xì)胞的克隆
[0040] 融合5天觀察有小集落后，用HAT篩選培養(yǎng)液換液，10天后換HT培養(yǎng)液。集落長(zhǎng)至1/ 3~1/2孔時(shí)，取培養(yǎng)上清液，用間接ELISA法檢測(cè)陽(yáng)性孔。0D4 5Q值大于1時(shí)，判定為陽(yáng)性孔。將 陽(yáng)性孔細(xì)胞轉(zhuǎn)至24孔含有巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)板，待集落長(zhǎng)至1/3~1/2孔時(shí)，取培養(yǎng)上清液，用 間接ELISA法檢測(cè)特異性。檢出無(wú)交叉陽(yáng)性株，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，同時(shí)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶。
[0041]采用有限稀釋法分別對(duì)陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行了 3次克隆，用ELISA法篩選陽(yáng)性 率達(dá)到100 %的細(xì)胞株，且OD450值最高的細(xì)胞株。擴(kuò)大培養(yǎng)，凍存，建立細(xì)胞株系。
[0042] (4)腹水獲得
[0043]將篩選得到的細(xì)胞株生產(chǎn)細(xì)胞復(fù)蘇后，培養(yǎng)擴(kuò)增。于兩周前給小鼠腹腔注射降植 烷。然后將擴(kuò)增的雜交瘤細(xì)胞接種于用降植烷處理過的BALB/C小鼠腹腔內(nèi)。7~11天后小鼠 開始產(chǎn)生腹水。采用一次收集的方法收集腹水，離心，棄去上層油脂，吸取淡黃色腹水，分 裝，-20 °C凍存?zhèn)溆谩?br>[0044] (5)抗體的分離純化和鑒定
[0045] 純化抗體;SDS-PAGE電泳法鑒定抗體純度，抗體純度良好;ELI SA方法鑒定抗體活 性，〇D45Q值大于1，均合格;ELISA方法鑒定抗體特異性，檢測(cè)單抗只針對(duì)該毒素抗原特異，與 其它抗原不發(fā)生反應(yīng)，具有較好的特異性;抗體親和力測(cè)定。
[0046] 采用上述步驟獲得黃曲霉毒素 B1、玉米赤霉烯酮單克隆抗體，該抗體可用于膠體 金標(biāo)記。
[0047] 3、微孔試劑的制備
[0048]把黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆抗體混合，標(biāo)記膠體金液，吸附微孔上，凍 干后備用。
[0049]微孔試劑8也可以由凍干后的金納米棒標(biāo)記黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉烯酮單克隆 抗體復(fù)合物代替，金納米棒的制備方法如下：
[0050] 2.5ml 2.5X104的HAuCl4溶液與2.5ml 2.5X104的CTAB溶液混合，然后加入0.6ml 的冰凍的0.01M NaBH4溶液并攪拌lOmin得到種子溶液。5ml的0.08M十六烷基三甲基溴化銨 (CTAB)水溶液與4ml的0.25ml的5 X 104的氯金酸水溶液混合，加入0~50微升的0.01M硝酸 銀(AgN03)溶液，攪拌均勻然后加入20微升0.1M抗壞血酸，攪拌2min得到無(wú)色透明的生長(zhǎng)溶 液。lml種子溶液加入到9ml的生長(zhǎng)溶液中，攪拌lmin，然后靜置一周，得到深紫藍(lán)色納米金 棒溶液。
[00511把黃曲霉毒素 B1、玉米赤霉烯酮單克隆抗體標(biāo)記的金納米棒液，加入微孔上，凍干 后得到金納米棒標(biāo)記的微孔試劑8備用。
[0052] 4、試驗(yàn)線和控制線的制備
[0053]試紙的試驗(yàn)線和控制線平行于硝酸纖維素膜上。試紙的T2試驗(yàn)線6、T1試驗(yàn)線5和 控制線7平行于硝酸纖維素膜3上。T1試驗(yàn)線5和T2試驗(yàn)線6分別由黃曲霉毒素 B1和玉米赤霉 烯酮人工抗原包被?？刂凭€7由羊抗鼠多克隆抗體包被制成。
[0054] 5、檢測(cè)試紙的組合
[0055]試紙?jiān)诒嘲? 一端端頭為吸水板2，另一端頭為樣品吸液板4，背板中部為硝酸纖維 素膜3,硝酸纖維素膜上有三條檢測(cè)線，分別為T2試驗(yàn)線6、T1試驗(yàn)線5和控制線7,控制線7靠 近吸水板2端，硝酸纖維素膜3兩端分別與吸水板2和樣品吸液板4相交疊，且位于它們下方。 背板1是PVC背板，樣品吸液板4是玻璃纖維材料，微孔試劑8的微孔是聚苯乙烯材料。
[0056] 6、普通的膠體金試紙?jiān)谑褂脮r(shí)容易出現(xiàn)顯色條顯色較淺，或者暈色的問題，這是 由于吸水板2的吸水能力較差導(dǎo)致的。為了克服這一問題，在背板1和硝酸纖維素膜3之間設(shè) 置一層潤(rùn)濕墊9;所述潤(rùn)濕墊9為3層多孔吸水布疊加而成，所述多孔吸水布上的孔的直徑為 20~40nm，每個(gè)孔的邊緣的距離均為25~50nm。這一設(shè)計(jì)的原理是通過吸水布上與黃曲霉 素和膠體金的尺寸適配的空洞，多層疊加，可以很好的吸附并存留住試樣中的黃曲霉素和 膠體金，使其與試驗(yàn)線6更好的接觸，從而顯色更深、更清晰。
[0057]三、使用方法
[0058] (1)使用時(shí)稱取5g玉米、小麥、飼料樣品研磨至20目，加入0.1~0.5g鹽，加入10~ 30mL 60~80 %甲醇-水溶液，振蕩2~10分鐘，于5000~lOOOOrpm離心2~5分鐘，棄沉淀，取 100yl上清液加入50~200yL純水混勻待檢。
[0059] (2)用移液槍移取40iil待檢液加入微孔試劑8后反復(fù)吹打直至金標(biāo)孔中紅色固體 充分溶解混勻；插入本檢測(cè)試紙的樣品吸液端4,如圖2所示，同時(shí)開始計(jì)時(shí)；3分鐘讀取結(jié) 果，5分鐘后結(jié)果無(wú)效。
[0060]四、結(jié)果判讀
[0061 ] (1)陰性:T1、T2線色度比C線深或一樣深，表示樣品中待檢物濃度低于檢測(cè)限，或 不含待檢物，即三條色帶為陰性，如圖3所示。
[0062] (2)陽(yáng)性：只有一條控制線顯色為陽(yáng)性。T1或T2任意一條顯色結(jié)果也判斷為陽(yáng)性， 如圖4~6所示。
[0063] (3)無(wú)效:未出現(xiàn)質(zhì)控線C線顯色，表明操作過程不正確或檢測(cè)卡已失效。
[0064] 8、測(cè)試結(jié)果
[0065] 本實(shí)用新型可測(cè)出待測(cè)毒素的最低濃度如表1所示：
[0066] 表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種快速檢測(cè)黃曲霉毒素 BI和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，其特征在于由背板（1)、 吸水板(2)、硝酸纖維素膜(3)、樣品吸液板(4)、微孔試劑(8)組成； 所述硝酸纖維素膜(3)疊放在背板1的中部上面;所述吸水板(2)疊放在背板（1)的其中 一端的端頭部分上面，所述樣品吸液板(4)疊放在背板(1)的另一端的端頭部分上面； 所述硝酸纖維素膜(3)兩端分別與吸水板(2)和樣品吸液板(4)相交疊，且所述硝酸纖 維素膜(3)位于吸水板(2)和樣品吸液板(4)的下方； 從所述硝酸纖維素膜(3)靠近樣品吸液板(4)的那一端開始，依次設(shè)置T2試驗(yàn)線(6)、T1 試驗(yàn)線(5)、和一條控制線（7);所述Tl試驗(yàn)線(5)和Τ2試驗(yàn)線(6)分別由黃曲霉毒素 BI和玉 米赤霉烯酮人工抗原包被;所述控制線(7)由羊抗鼠多克隆抗體包被； 所述微孔試劑(8)為凍干后的膠體金標(biāo)記黃曲霉毒素 Bl和玉米赤霉烯酮單克隆抗體。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)測(cè)黃曲霉毒素 Bl和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，其 特征在于所述背板（1)是PVC背板，樣品吸液板(4)是玻璃纖維材料，微孔試劑(8)的微孔是 聚苯乙烯材料。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)測(cè)黃曲霉毒素 Bl和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，其 特征在于所述微孔試劑(8)由凍干后的金納米棒標(biāo)記黃曲霉毒素 Bl和玉米赤霉烯酮單克隆 抗體復(fù)合物代替。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)測(cè)黃曲霉毒素 Bl和玉米赤霉烯酮的膠體金試紙，其 特征在于:在背板(1)和硝酸纖維素膜(3)之間設(shè)置一層潤(rùn)濕墊(9);所述潤(rùn)濕墊(9)為3層多 孔吸水布疊加而成，所述多孔吸水布上的孔的直徑為20~40nm，每個(gè)孔的邊緣的距離均為 25~50nm〇
【文檔編號(hào)】G01N33/558GK205506834SQ201620012472
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年1月7日
【發(fā)明人】倫麗麗, 何奚君, 蔣少華, 賈敏
【申請(qǐng)人】江蘇美正生物科技有限公司