本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種潤腸通便保健食品及其制備方法。
背景技術(shù)：
便秘是臨床最常見的復(fù)雜的消化道癥狀，它既是一種病，也是其他疾病的并發(fā)癥。隨著人們飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣的變化，便秘的發(fā)病率異常升高。便秘后機體會出現(xiàn)腹脹、精神倦怠、體重減輕、不思飲食、面色晦暗、色斑出現(xiàn)、反應(yīng)遲緩、大便色黑，干燥。同患者也會伴有易怒、口臭，食欲減退等諸多病征，給患者帶來了極大的不適和痛苦，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。中醫(yī)將便秘分為實證和虛證兩大類，其中實證便秘包括腸胃積熱型、氣機郁滯型和陰寒積滯型，虛證便秘包括氣虛型、血虛型、陰虛型和陽虛型。燥熱內(nèi)結(jié)于腸胃者，屬熱秘；氣機郁滯者，屬氣秘；氣血陰陽虧虛者，為虛秘；陰寒積滯者，為冷秘或寒秘。四者之中，又以虛實為綱，熱秘、氣秘、冷秘屬實，陰陽氣血不足的便秘屬虛。而寒、熱、虛、實之間，常又相互兼夾或相互轉(zhuǎn)化。如熱秘久延，津液漸耗，損及腎陰，病情由實轉(zhuǎn)虛。氣郁化火，則氣滯與熱結(jié)并存。氣血不足者，易受飲食所傷或情志刺激，則虛實相兼。陽虛陰寒凝結(jié)者，如溫燥太過，津液被耗，或病久陽損及陰，則可見陰陽俱虛之證。血虛兼寒凝型便秘，在現(xiàn)代女性中尤為多見，嗜食寒涼，脾運不足，寒凝于下，大腸傳導(dǎo)失職；脾胃虛寒，寒自內(nèi)生，運化失健，久而成寒積，使腸道傳送無力則大便艱澀；陰寒內(nèi)盛，氣機阻滯，腹氣不通則腹痛。臨床表現(xiàn)有唇淡白、口淡、舌苔白滑、小便清，或有腸鳴，腹痛等。治宜溫而通之，宜用溫藥而兼潤燥之法。
目前對血虛兼寒凝型便秘目前尚無有效的專用治療藥，也無大眾認(rèn)可的保健食品，常用的治療用藥是瀉藥，有些按照中醫(yī)理論研制的純中藥制劑對血虛兼寒凝型便秘有一定的治療效果，但近年來，部分便秘患者出現(xiàn)了藥物依賴性便秘的現(xiàn)象，便秘的治療難度明顯增加。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種潤腸通便保健食品。
本發(fā)明的另一目的是提供制備該潤腸通便保健食品的方法。
本發(fā)明提供的一種潤腸通便保健食品，由以下中藥制成：當(dāng)歸、干姜、大棗、枳殼和蜂蜜。
該保健食品由以下重量份的中藥制成：當(dāng)歸2-6份、枳殼1-2份、干姜1-2份、大棗4-8份和蜂蜜8-32份。
為了進(jìn)一步實現(xiàn)本發(fā)明，該保健食品由以下重量份的中藥制成：當(dāng)歸3份、枳殼1份、干姜1份、大棗4份和蜂蜜16份。
本發(fā)明還提供了上述潤腸通便保健食品的制備方法，包括以下四種實施方式：
第一種：制備丸劑具體步驟如下：按配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜和大棗，混合后粉碎，按配比量取蜂蜜加入中藥粉末中，再加入輔料，制備成制劑。
第二種：制備流浸膏劑具體步驟如下：按配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜和大棗，分次加入藥材重量6-10倍量的溶媒，提取2-4次，每次0.5-5h，過濾，合并濾液，濃縮，按配比量取蜂蜜加入濃縮液中，再加入輔料，制備成制劑。
第三種：制備膏劑具體步驟如下：按配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜和大棗，分次加入藥材重量6-10倍量的溶媒，提取2-4次，每次0.5-5h，過濾，合并濾液，濃縮后干燥，按配比量取蜂蜜加入干燥顆粒中，加入輔料，制備成制劑。
第四種：制備口服液具體步驟如下：按配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜和大棗，分次加入藥材重量6-10倍量的溶媒，提取2-4次，每次0.5-5h，過濾，合并濾液，濃縮，按配比量取蜂蜜加入濃縮液中，再加入蒸餾水定容至每100ml溶液中中藥含量為5-10g。
為了進(jìn)一步實現(xiàn)本發(fā)明，針對第一、二、三種實施方式中的輔料為麥芽糊精。
為了進(jìn)一步實現(xiàn)本發(fā)明，針對第二、三、四種實施方式中的溶媒為蒸餾水。
為了進(jìn)一步實現(xiàn)本發(fā)明，針對第二、三、四種實施方式中的濃縮采用常壓濃縮方式或減壓濃縮方式。
為了進(jìn)一步實現(xiàn)本發(fā)明，針對第三種實施方式中的干燥采用噴霧干燥、冷凍干燥、減壓干燥、微波干燥或常壓干燥。
本發(fā)明提供的潤腸通便保健食品及其制備方法具有以下優(yōu)點：
1、方解：
潤腸通便保健食品的發(fā)明方案是首先按中醫(yī)學(xué)理論的君、臣、佐、使配伍及辯證施治原則，選用具有補氣養(yǎng)血、健脾和胃、溫中散寒、潤腸通便的中藥組成復(fù)方，然后制備成臨床可以接受的劑型。
當(dāng)歸：甘、辛，性溫。歸肝、心、脾經(jīng)。具有補血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤腸通便的功效。用于血虛萎黃、眩暈心悸、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、虛寒腹痛、腸燥便秘、風(fēng)濕痹痛、跌撲損傷、癰疽瘡瘍。
枳殼：苦，辛，酸，性溫。歸脾，胃經(jīng)。具有理氣寬中，行滯消脹的功效。用于胸脅氣滯，脹滿疼痛，食積不化，痰飲內(nèi)停；胃下垂，脫肛，子官脫垂。
干姜：辛、性熱。歸脾、胃、腎、心、肺經(jīng)。具有溫中散寒，回陽通脈，燥濕消痰的功效。用于脘腹冷痛，嘔吐泄瀉，肢冷脈微，痰飲喘咳。
大棗：甘，性溫。歸脾、胃經(jīng)，具有益氣補血，健脾和胃，養(yǎng)血安神，緩和藥性的功效。用于脾虛食少，乏力便溏，婦人臟躁，貧血。
蜂蜜：甘，性平。歸肺、脾、大腸經(jīng)。具有補中，潤燥，止痛，解毒的功效。用于脘腹虛痛，肺燥干咳，腸燥便秘；外治瘡瘍不斂，水火燙傷。
本發(fā)明的方中當(dāng)歸甘辛性溫，歸于肝、心、脾經(jīng)，甘以養(yǎng)血，辛則行散，溫可勝寒，既可養(yǎng)血益精，潤腸通便，又可活血行氣，導(dǎo)滯通腑，還可溫陽散寒，潤秘溫下，集補、行、溫于一身，正合血虛冷秘之虛、秘、寒之根本，一藥三用而為君藥；枳殼辛苦微寒，歸于脾、胃、大腸之經(jīng)，苦泄辛散，行氣消痞，化積導(dǎo)滯，既可降氣通腑以承六腑通降之性，又可消導(dǎo)積聚以下胃腸停滯之便，氣、便同治而為臣藥，雖性微寒，但合于大劑溫品之中，制性存用，取長棄短，不失為配伍之真諦；干姜、大棗，直入中焦，促進(jìn)脾土運化，資化氣血之源，既可建中以通腑，又可滋血以通便，且干姜運脾以升清，合枳殼苦泄以降濁，升降相因，調(diào)理中氣，又性溫辛散，合當(dāng)歸之溫散以助陽祛寒，溫下通秘，又可防止枳殼苦寒傷正，大棗酸甘而溫，養(yǎng)血斂陰，健脾益氣、生津，以助氣血之化源，合當(dāng)歸以潤腸通便，二味相合，運潤兼施，溫散并行，共為佐藥；蜂蜜甘平，歸于大腸，潤腸通便，兼可調(diào)和諸藥，為使藥。五藥相伍，養(yǎng)血潤腸，散寒通便，血虛得補，陰寒得散，瘀滯暢行，六腑通降，則秘自下。
2、本發(fā)明的保健食品以當(dāng)歸、枳殼、干姜、大棗和蜂蜜配伍，旨在養(yǎng)血溫陽、潤腸導(dǎo)滯，主治血虛、寒凝、瘀滯之冷秘，有較強的潤腸、通便和調(diào)節(jié)胃腸道功能的作用，對脾胃虛寒型便秘、陰虛血瘀型便秘和慢傳輸型便秘均有潤腸通便的功能，未見急性毒性反應(yīng)，尤其可以用于血虛兼寒凝型便秘，效果優(yōu)于現(xiàn)有藥物，且價格低廉、制備簡單，無副作用。
具體實施方式
以下結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明。
本發(fā)明所述的細(xì)粉是按《中國藥典》對細(xì)粉的規(guī)定，即指能全部通過五號篩，并含能通過六號篩不少于95%的粉末。
實施例1：
當(dāng)歸150g、枳殼50g、干姜50g、大棗200g、蜂蜜800g。本實施例為最佳實施例。
實施例2：
當(dāng)歸300g、枳殼50g、干姜100g、大棗400g、蜂蜜1600g。
實施例3：
當(dāng)歸250g、枳殼100g、干姜100g、大棗400g、蜂蜜1600g。
實施例4：
當(dāng)歸100g、枳殼50g、干姜50g、大棗300g、蜂蜜400g。
實施例5：
按實施例1中的配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜，混合，粉碎成細(xì)粉，大棗破開并去核并干燥，粉碎成細(xì)粉，混勻兩組細(xì)粉，加蜂蜜800g，加麥芽糊精拌勻，制成大蜜丸。
實施例6：
按實施例2中的配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜，混合，粉碎，過10目篩，大棗破開或去核并與其他中藥粉末混勻，加9000ml70℃蒸餾水，浸泡2h，煎煮1.5h，過濾，留濾液；藥渣中加入7200ml蒸餾水，煎煮1.5h，過濾；藥渣中加入6300ml蒸餾水，煎煮1.5h，過濾；藥渣中加入5400ml蒸餾水，煎煮0.5h，過濾，合并四次濾液，濃縮，量取蜂蜜1600g加入濃縮液中，再加麥芽糊精，將溶液混勻，制成流浸膏。
實施例7：
實施例7與實施例6的區(qū)別，僅在于提取次數(shù)為2次，分別加入9000ml和5400ml的蒸餾水。
實施例8：
按實施例3中的配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜，混合，粉碎，過10目篩，大棗破開或去核并與其他中藥粉末混勻，加8500ml70℃蒸餾水，浸泡2h，煎煮5h，過濾，留濾液；藥渣中加入5100ml蒸餾水，煎煮1.5h，過濾，合并兩次濾液，濃縮，噴霧干燥，量取蜂蜜1600g加入干燥顆粒中，再加入麥芽糊精，混勻，制成膏劑。
實施例9：
實施例9與實施例8的區(qū)別，僅在于提取次數(shù)為4次，分別加入8500ml、6800ml、5900ml和5100ml的蒸餾水。
實施例10：
按實施例4中的配比稱取當(dāng)歸、枳殼、干姜，混合，粉碎，過10目篩，大棗破開或去核并與其他中藥粉末混勻，加5000ml70℃蒸餾水，浸泡2h，煎煮1.5h，過濾，留濾液；藥渣中加入3000ml蒸餾水，煎煮0.5h，過濾，合并兩次濾液，濃縮，量取蜂蜜400g加入濃縮液中，并定容至2000ml，此時，每100ml溶液中中藥含量為6.25g，灌裝，制成口服液。
實施例11：
實施例11與實施例10的區(qū)別，僅在于提取次數(shù)為4次，分別加入5000ml、4000ml、3500ml和3000ml的蒸餾水。
服用方法：
大蜜丸每丸重12g，每丸中藥含量為4.8g、蜂蜜8g；服用方法為1丸/次，2次/天；
流浸膏每20g中藥含量為8.5g、蜂蜜16g；服用方法為20g/次，2次/天；
膏劑每20g中藥含量為8.5g、蜂蜜16g；服用方法為20g/次，2次/天；
口服液每100ml中藥含量為6.25g、蜂蜜8g；服用方法為100ml/次，2次/天。
實驗例1：本發(fā)明對脾胃虛寒型小鼠便秘的潤腸通便作用
1材料
1.1動物
昆明種小鼠，60只，SPF級，雌雄各半，體重18-22g，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK（甘）2011-0001。動物自由攝食、飲水，喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料；飼養(yǎng)溫度23-26℃，相對濕度30%-40%。
1.2藥品與試劑
本發(fā)明實施例1的藥物，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加6倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至500mL，取250mL藥液加蜂蜜800g，加麥芽糊精得流浸膏，蒸餾水定容至1000ml，備用。
潤腸丸，自制（元·《丹溪心法》卷五處方：麻子仁30g、當(dāng)歸30g、桃仁30g、生地黃30g、枳殼30g；取處方10倍用量藥材，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加8倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至1500mL，備用）。
活性炭粉末：由天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號：20140106。
2 方法
隨機取10只為正常組，其余50只用活性炭冰水混合物（0-2℃）灌胃3d后隨機分為模型組、陽性組，本發(fā)明高、中、低劑量組，共6組。陽性組灌胃潤腸丸相當(dāng)于臨床成人日用量的10倍用量，本發(fā)明高、中、低劑量組分別灌胃本發(fā)明，分別相當(dāng)于推薦人用量的100倍、50倍和25倍，正常組和模型組灌胃等容量蒸餾水，給藥容量為20ml/kg體重，每天1次，連續(xù)3d。第2d給藥后記錄首次排便時間和6h內(nèi)排便總重量，第3d在藥液中加入活性炭（終濃度為10%），灌胃20min后處死，解剖，觀察結(jié)腸大體形態(tài)，測量小腸總長和炭末推進(jìn)距離，計算炭末推進(jìn)率。小腸炭末推進(jìn)率=炭末在小腸內(nèi)的推進(jìn)距離（cm）/小腸總長度（cm）×100%，數(shù)據(jù)采用表示，用SPSS 17.0軟件處理，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3 結(jié)果
3.1一般情況
模型小鼠均出現(xiàn)豎毛，少動，蜷曲，行動遲緩，被毛干枯、色暗，尿液呈現(xiàn)黃色，大便干硬、排便次數(shù)減少，解剖發(fā)現(xiàn)結(jié)腸內(nèi)糞便多呈球狀或串珠狀，質(zhì)輕干硬。
3.2本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠首次排便時間的影響
與正常組比較，模型組小鼠排便時間明顯延長（P<0.01）；與模型組比較，陽性組和本發(fā)明高、中劑量組排便時間明顯縮短（P<0.01），本發(fā)明低劑量組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。
表1本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠首次排便時間的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.3本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠排便量的影響
與正常組比較，模型組小鼠排便量明顯減少（P<0.01）；與模型組比較，陽性組和本發(fā)明高、中劑量組排便量明顯增加（P<0.01，P<0.05）；本發(fā)明低劑量組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。
表2 本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠排便量的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.4本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠小腸推進(jìn)率的影響
與正常組比較，模型組小腸推進(jìn)率明顯減?。≒<0.05）；與模型組比較，陽性組、本發(fā)明高、中劑量組小腸推進(jìn)率明顯增加（P<0.01，P<0.05），本發(fā)明低劑量組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。
表3本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠小腸推進(jìn)運動的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.5本發(fā)明對脾胃虛寒型便秘小鼠結(jié)腸大體形態(tài)的影響
結(jié)果顯示，正常小鼠結(jié)腸內(nèi)糞便較少，少量糞便不定形，模型組小鼠結(jié)腸內(nèi)糞便呈球形，串珠樣，質(zhì)地較硬，陽性組和本發(fā)明高、中劑量組小鼠結(jié)腸內(nèi)糞便不定形、質(zhì)地較軟。
4 小結(jié)
本實驗例結(jié)果表明本發(fā)明具有一定的潤腸通便作用，可有效緩解脾胃虛寒引發(fā)的便秘，提高腸道收縮幅度和蠕動，縮短小鼠排便時間，加快腸道推進(jìn)速度，為本發(fā)明用于改善脾胃虛寒型便秘提供了實驗依據(jù)，同時也為本發(fā)明的進(jìn)一步研究和改善奠定了基礎(chǔ)。
實驗例2：本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠的潤腸通便作用
1 材料
1.1 實驗動物
昆明種小鼠，60只，SPF級，雌雄各半，體重18-22g，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK（甘）2011-0001。動物自由攝食、飲水，喂飼標(biāo)準(zhǔn)飼料；飼養(yǎng)溫度23-26℃，相對濕度30%-40%。
1.2藥品與試劑
本發(fā)明實施例1的藥物，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加6倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至500mL，取250mL藥液加蜂蜜800g，加麥芽糊精得流浸膏，蒸餾水定容至1000ml，備用。
潤腸丸，自制（元·《丹溪心法》卷五處方：麻子仁30g、當(dāng)歸30g、桃仁30g、生地黃30g、枳殼30g；取處方10倍用量藥材，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加8倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至1500mL，備用）。
氫化可的松注射液（國藥準(zhǔn)字H20023069，國藥集團容生制藥有限公司，批號1507281），甲狀腺素片（國藥準(zhǔn)字H31022151，上海長城藥業(yè)有限公司，批號20150103），活性炭粉末（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號20140106）。
2 方法
2.1 造模、分組與給藥
取60只小鼠，雌雄兼用，隨機分為6組，設(shè)正常組、模型組、陽性組、本發(fā)明高、中、低劑量組，每組10只，除正常組外，其余各組小鼠每天灌胃甲狀腺素150mg/kg和皮下注射氫化可的松2.0mg/kg，連續(xù)7d。造模第3d，陽性組灌胃潤腸丸相當(dāng)于臨床成人日用量的10倍用量，本發(fā)明高、中、低劑量組分別灌胃本發(fā)明，分別相當(dāng)于推薦人用量的100倍、50倍和25倍，正常組和模型組灌胃等容量蒸餾水，給藥容量為20ml/kg體重，每天1次，連續(xù)7d。
2.2 指標(biāo)檢測
2.2.1排便時間
給藥第7d，灌胃60min后，各組小鼠灌胃10%活性炭1.0ml/只，單籠飼養(yǎng)，記錄各小鼠首次排黑便時間。
2.2.2糞便重量和糞便含水量
記錄6小時內(nèi)排便總粒數(shù)，稱糞便濕重，80℃烘干4h，稱糞便干重，計算糞便含水量，糞便含水量=（糞便濕重-糞便干重）/糞便濕重×100%。
2.2.3 小腸推進(jìn)率
給藥第8d，禁食不禁水12h，各組小鼠灌胃60min后，各組小鼠灌胃10%活性炭1.0ml/只，30min后，處死小鼠，摘自幽門部到回盲部的全部腸管，在光滑桌面鋪直，觀察腸道形態(tài)，測量腸管全長、活性炭在腸管內(nèi)推進(jìn)距離，計算小腸推進(jìn)率。小腸推進(jìn)率（%）=碳末推進(jìn)距離（cm）/腸道總長（cm）×100%
2.3 統(tǒng)計學(xué)方法
數(shù)據(jù)以表示，采用SPSS 13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3 結(jié)果
3.1 一般情況
試驗期間小鼠均未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，與正常組小鼠比較，造模組小鼠精神亢奮，喜動，活動時間長。
3.2 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠排便時間的影響
與正常組比較，模型組小鼠排便時間明顯延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；與模型組比較，陽性組、本發(fā)明高、中、低劑量組小鼠排便時間明顯縮短，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），見表1。
表 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠排便時間的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.3 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠排便量的影響
與正常組比較，模型組小鼠排便量明顯減少（P<0.01）；與模型組比較，陽性組和本發(fā)明高劑量組排便量明顯增加（P<0.01）；本發(fā)明中、低劑量組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。
表2 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠排便量的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.4本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠糞便含水量的影響
與正常組比較，模型組小鼠糞便含水量明顯減少（P<0.01）；與模型組比較，陽性組和本發(fā)明高劑量組糞便含水量明顯增加（P<0.01，P<0.05）；本發(fā)明中、低劑量組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。
表3本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠糞便含水量的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01; 與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.5 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠小腸推進(jìn)率的影響
與正常組比較，模型組小腸推進(jìn)率明顯減?。≒<0.05）；與模型組比較，本發(fā)明高劑量組小腸推進(jìn)率明顯增加（P<0.05），本發(fā)明中、低劑量組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表4。
表4 本發(fā)明對陰虛血瘀型便秘小鼠小腸推進(jìn)率的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01; 與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
4 小結(jié)
本實驗例通過對陰虛血瘀型便秘小鼠排便時間、排便量、糞便含水量和小腸推進(jìn)率進(jìn)行測定，與正常組小鼠比較，模型組排便時間明顯延長，排便量和糞便含水量均明顯減少，推進(jìn)率也隨之減小。與模型組小鼠比較，本發(fā)明高、中劑量組小鼠排便時間明顯縮短，排便量明顯增多，推進(jìn)率不同程度增大，表明本發(fā)明對陰虛血於型便秘有一定的療效。
實驗例3：本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠潤腸通便作用
1材料
1.2 實驗動物
昆明種小鼠，60只，SPF級，雌雄兼用，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，自由攝食飲水，喂標(biāo)準(zhǔn)飼料，溫度19-25℃，相對濕度30-40%，晝夜交替12小時環(huán)境飼養(yǎng)，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天。
1.2 藥品與試劑
本發(fā)明實施例1的藥物，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加6倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至500mL，取250mL藥液加蜂蜜800g，加麥芽糊精得流浸膏，蒸餾水定容至1000ml，備用。
潤腸丸，自制（元·《丹溪心法》卷五處方：麻子仁30g、當(dāng)歸30g、桃仁30g、生地黃30g、枳殼30g；取處方10倍用量藥材，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加8倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至1500mL，備用）。
復(fù)方地芬諾酯片（國藥準(zhǔn)字H4102025，新鄉(xiāng)市常樂制藥有限責(zé)任公司，生產(chǎn)批號1407025），活性炭（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號20140106）。
2方法
取60只小鼠，雌性兼用，隨機分為6組，設(shè)正常組、模型組、陽性組、本發(fā)明高、中、低劑量組，每組10只。陽性組灌胃潤腸丸相當(dāng)于臨床成人日用量的10倍用量，本發(fā)明高、中、低劑量組分別灌胃本發(fā)明，分別相當(dāng)于推薦人用量的100倍、50倍和25倍，正常組和模型組灌胃等容量蒸餾水，給藥容量為20ml/kg體重，每天1次，連續(xù)7d。末次給藥后各小鼠隔夜禁水不禁食20h，除正常組外，其余各組小鼠分別灌胃復(fù)方地芬諾酯10mg/kg，正常組組灌胃等量生理鹽水，30min后，各組小鼠給藥1次并灌胃10%活性炭1.0ml/只。立即單籠飼養(yǎng)，記錄各小鼠首次排黑便時間，6小時內(nèi)排便總粒數(shù)，稱糞便濕重，80℃烘干4h，稱糞便干重，計算糞便含水量。處死小鼠，摘自幽門部到回盲部的全部腸管，在光滑桌面鋪直，觀察腸道形態(tài)，測量腸管全長、活性炭在腸管內(nèi)推進(jìn)距離，計算小腸推進(jìn)率。小腸推進(jìn)率（%）=碳末推進(jìn)距離（cm）/腸道總長（cm）×100%
數(shù)據(jù)以表示，采用SPSS 13.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3結(jié)果
3.1一般情況
正常組小鼠反應(yīng)靈活，糞便稀軟，不成形；模型小鼠出現(xiàn)煩躁不安，排便量減少，大便質(zhì)硬；本發(fā)明各劑量組和陽性組有所改善。
3.2 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠排便時間的影響
與正常組比較，模型組小鼠首次排黑便時間明顯延長，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；與模型組比較，陽性組、本發(fā)明高、中、低劑量組的首次排黑便時間均顯著縮短，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），見表1。
表1 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠排便時間的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.3 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠排便量的影響
與正常組比較，模型組小鼠排便量明顯減少，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與模型組比較，本發(fā)明高、中、低劑量組小鼠排便量均顯著增多，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01，P<0.05），見表2。
表2 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠排便量的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.3本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠糞便含水量的影響
與正常組比較，模型組小鼠糞便含水量明顯降低，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與模型組比較，本發(fā)明高、低劑量組小鼠糞便含水量均顯著增加，組間差異均有度統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），見表3。
表3 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠糞便含水量的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
3.4本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠小腸推進(jìn)率的影響
與正常組比較，模型組小鼠小腸推進(jìn)率明顯降低，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；與模型組比較，陽性對照組，本發(fā)明高、中劑量組的小腸推進(jìn)率均升高，組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表4。
表4 本發(fā)明對慢傳輸型便秘小鼠小腸推進(jìn)率的影響（）
注：與正常組比較 *P<0.05，**P<0.01；與模型組比較 #P<0.05，##P<0.01。
4 小結(jié)
慢傳輸型便秘（STC）嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，發(fā)病逐年呈上升趨勢，給患者帶來了極大的痛苦和生活不便。
本實驗例以復(fù)方地芬諾酯建立小鼠慢傳輸便秘模型，以排黑便時間、排便量、糞便含水量和小腸推進(jìn)率為指標(biāo)，研究本發(fā)明潤腸通便作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)本發(fā)明明顯縮短了排便時間，增加了糞便含水量和小腸推進(jìn)率，表明本發(fā)明有一定的潤腸通便作用。
實驗例4：本發(fā)明急性毒性作用
1 材料
1.1 實驗動物
昆明種小鼠，SPF級，18~22g，雌雄兼用，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，合格證號SCXK（甘）2015-0002，動物實驗設(shè)施使用證號SYXK（甘）2015-0005。SPF級飼料（由北京科奧協(xié)力飼料有限公司提供）喂養(yǎng)，自由進(jìn)食，自由飲水，動物按性別分籠飼養(yǎng)，室溫25±0.5℃，相對濕度55±5%，12h燈光，12h黑暗，適應(yīng)3d后開始實驗。
1.2 藥品與試劑
本發(fā)明實施例1的藥物，加10倍量水煎煮1h，過濾，藥渣再加6倍量水煎煮40min，合并藥液濃縮至500mL，取250mL藥液加蜂蜜800g，加麥芽糊精得流浸膏，蒸餾水定容至1000ml，備用，成人擬用量每日24.25g生藥（含蜂蜜16g）。
2.方法及結(jié)果
2.1本發(fā)明經(jīng)口LD50測定
Dmin和Dmax的測定：取小鼠，分別以1：10：100劑量比例灌胃（20ml/kg體重）找出受試物的0%和100%估計致死量。另取小鼠，以受試物0%和100%估計致死量為依據(jù)，分別以1：4：16劑量比例灌胃（20ml/kg體重），測定受試物的Dmin和Dmax。
LD50的測定：根據(jù)Dmin和Dmax的值，以及計劃分組數(shù)，計算組間劑量比值（K），以Dmin作為最低劑量組，Dmax作為最高劑量組，按K值計算出中間幾組劑量。灌胃（20ml/kg體重）后觀察并詳細(xì)記錄動物的反應(yīng)情況，并記錄動物死亡分布結(jié)果，采用LD50數(shù)據(jù)處理軟件（Bliss法）計算受試物樣品的LD50和LD50的95%可信區(qū)間。
結(jié)果顯示，本發(fā)明無法測定Dmin和Dmax，無法直接測定其LD50和LD50的95%可信區(qū)間。
3.3本發(fā)明經(jīng)口MTD測定
另取小鼠40只，雌雄各半，隨機分為對照組和受試組，每組20只，禁食不禁水12h，受試組小鼠按40ml/kg體重的容量灌胃（10g本發(fā)明溶于20ml蒸餾水），共2次，間隔6h，對照組小鼠灌胃等容量蒸餾水。觀察各小鼠的飲食、活動、精神狀態(tài)、皮毛膚色、大小便、體重變化及死亡情況，連續(xù)觀察14d，頸椎脫臼處死小鼠，大體解剖，觀察肝、腎、肺、脾、心等臟器形態(tài)和色澤。
按下列公式計算小鼠1日MTD相當(dāng)于臨床成人日用量的倍數(shù)。
結(jié)果顯示，按最高濃度最大給藥容量灌胃后，各小鼠的飲食、自主活動均未出現(xiàn)異常，皮毛膚色未見異常，體重增加正常，大小便未見異常；持續(xù)觀察14d，期間未見動物死亡；頸椎脫臼處死小鼠，大體解剖，肝、腎、肺、脾、心等臟器形態(tài)、色澤未見異常，結(jié)果見表1。
經(jīng)計算，本發(fā)明小鼠1日最大給藥量（MTD）為40.0g /kg體重，折合為臨床70kg成人日用量（7g）的400倍。
表1. 本發(fā)明對小鼠體重的影響（，n=20）
注：與對照組比較 #P <0.05，##P <0.01。
4.小結(jié)
本發(fā)明以40.0g/kg體重灌胃（相當(dāng)于70kg成人日用量的400倍），對小鼠未見明顯急性毒性反應(yīng)，提示本發(fā)明小鼠灌胃LD50大于40.0g/kg體重，口服安全性較高。