一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法。該培養(yǎng)基是在Neurobasal-A?medium中含有B-27?Supplement?without?retinoic?acid，L-Glutamine，F(xiàn)BS，β-NGF，BDNF，RA，維生素E。該培養(yǎng)基不僅成本低，而且關鍵是解決了現(xiàn)有的神經(jīng)干細胞分化效率低的問題，明顯提高了神經(jīng)干細胞分化成神經(jīng)元的效率。
【專利說明】一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于神經(jīng)干細胞培養(yǎng)分化的【技術領域】，具體涉及一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法。
【背景技術】
[0002]傳統(tǒng)觀點普遍認為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的自我修復能力有限，損傷后的神經(jīng)元將不能再生。盡管如此，全世界的學者們都在努力試圖挑戰(zhàn)這種傳統(tǒng)的觀念。自從Reynolds和Weiss在20世紀90年代從小鼠的紋狀體組織中分離、培養(yǎng)出神經(jīng)干細胞以來，人們不僅從各類動物及人的胚胎，而且從成年動物及人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織內(nèi)分離、培養(yǎng)出了神經(jīng)干細胞，并且證明其具有很強的增殖及自我更新能力，打破了這一傳統(tǒng)觀念。學術界目前將神經(jīng)干細胞的特性概括描述為一類具有增殖、自我更新和多向分化潛能力的母細胞，它通過不對等的分裂方式進行增殖，并且根據(jù)培養(yǎng)條件的不同，可分化出神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞等神經(jīng)組織的各類細胞。
[0003]神經(jīng)干細胞向神經(jīng)細胞的分化不僅可以應用于臨床治療各種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，如帕金森癥、腦卒中、脊髓病變等；另外也可以作為體外研究哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的模型，不但能獲得均勻大量的細胞，而且能控制增殖速度和分化方向，易與宿主細胞形成正常的細胞聯(lián)系。目前基于神經(jīng)細胞的替代療法主要有兩類，一類是通過調(diào)控體內(nèi)神經(jīng)干細胞的增殖分化來實現(xiàn)；另一類是通過神經(jīng)干細胞移植來替代丟失的神經(jīng)組織。大腦損傷后，新生的神經(jīng)元數(shù)量非常少，而且可能不具有功能，不能整合到宿主的大腦環(huán)路中。這時候可以選擇移植神經(jīng)干細胞到損傷區(qū)域，使其定向分化成神經(jīng)元，但是，移植的細胞面臨著同樣的問題，那就是神經(jīng)元樣分化、成熟以及如何整合到宿主的神經(jīng)功能網(wǎng)絡中。因此，如何誘導神經(jīng)干細胞增生并分化為神經(jīng)元，提高神經(jīng)干細胞分化成神經(jīng)元的效率成為干細胞移植前非常關鍵的基礎。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法，解決現(xiàn)有的神經(jīng)干細胞分化效率低的問題，提高神經(jīng)干細胞分化成神經(jīng)元的效率。
[0005]一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基，是在Neurobasal-A medium中含有
[0006]
【權利要求】
1.一種促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium中含有
2.根據(jù)權利要求1所述的促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium 中含有
3.權利要求1所述的促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，初始狀態(tài)的細胞數(shù)為5Χ 105-2X IO6個細胞/ml培養(yǎng)液，37°C、5% CO2條件下進行培養(yǎng)，分化培養(yǎng)時間為5-7天，培養(yǎng)過程中隔天半量換液。
4.根據(jù)權利要求3所述的促進大鼠神經(jīng)干細胞分化的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于,25cm2培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基用量為5_6ml。
【文檔編號】C12N5/0797GK104017771SQ201410288590
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月24日 優(yōu)先權日:2014年6月24日
【發(fā)明者】李志遠, 鄧思浩, 薛志琴, 賀旭, 鐘小林, 胡杏 申請人:中南大學