納豆激酶的制造方法
【專利摘要】本發(fā)明的納豆激酶的制造方法中，采用鷹嘴豆粉作為原料組成培養(yǎng)基的固態(tài)原料，通過加水定容、高溫滅菌、降溫、納豆芽孢桿菌接種、菌種培養(yǎng)、濃縮、干燥等步驟生產(chǎn)出納豆激酶及納豆粉。利用經(jīng)典深層發(fā)酵技術，通過引入鷹嘴豆粉作為原料組成混合培養(yǎng)基，改善原有納豆激酶生產(chǎn)工藝流程，使納豆激酶結合鷹嘴豆微量元素的功效，使制得產(chǎn)品在溶解血栓的基礎上能夠有效降低血糖。另外由于產(chǎn)品不具氨臭味，所以在產(chǎn)品形式上更容易被廣大消費者所接受。
【專利說明】納豆激酶的制造方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及保健品生產(chǎn)的【技術領域】，具體說是一種具有溶解血栓，減少血栓形成并有效降低血糖功效的納豆激酶的制造方法。
【背景技術】
[0002]納豆激酶(NarroKunase, NK)由食品納豆中提取或納豆菌發(fā)酵生產(chǎn)，是一種分子量遠遠小于UK、SK、tPA的蛋白質，并可由腸道，吸收，納豆激酶的體外、體內溶栓性質通過實驗也已得到確定，同時得出納豆激酶的體內溶栓活性為纖溶酶的四倍，在體內作用迅速、持續(xù)時間長，還能激活體內的tPA，使之溫和、持續(xù)地提高血液的纖溶活性?；夹募」Ｈ奈ｋU患者,一次需投入尿激酶30萬單位，而50克的納豆中含有80萬單位尿激酶的血栓溶解作用。每克濕重納豆約相當于1600尿激酶單位。
[0003]日本生物科學研究所最近發(fā)現(xiàn)，納豆激酶有抑制血小板凝固的作用，有助于預防高血壓和動脈硬化。
[0004]因而，納豆激酶成為一種新型的口服性溶血栓藥物，在預防、治療心腦血管栓塞癥及栓塞性老年癡呆癥等方面起到積極作用。
[0005]鷹嘴豆含有微量元素鉻，鉻在機體的糖代謝和脂肪代謝中發(fā)揮著重要作用。糖尿病患者正是因為胰島素相對或絕對不足引起糖代謝，脂肪代謝，蛋白質代謝紊亂。鉻是葡萄糖耐量因子(GTF)的組成 部分，鷹嘴豆對糖尿病具有控制、降低血糖，預防和減緩糖尿病并發(fā)癥的作用，世界各地都有關于糖尿病患者鉻含量低于健康人的報道，人體血糖代謝的調節(jié)取決于3個因素的水平和協(xié)調作用，這3個因素是胰島素、葡萄糖耐量受體和胰島受體。人體含鉻量減少，就會導致胰島素活性降低，受體數(shù)量減少，糖耐量受損，從而引發(fā)糖尿病。食用鷹嘴豆產(chǎn)品就可以使體內胰島素活性和胰島素受體數(shù)量增加，達到控制血糖、改善糖尿病癥狀的目的。
[0006]鷹嘴豆中含有的鉻元素和多不飽和脂肪酸可促進膽固醇代謝防止脂質在肝臟和動脈壁沉積、降低血小板凝結能力，防止血栓形成。防止血管損傷面的炎癥反應，對血管有良好的保護作用，可有效的預防和減緩糖尿病并發(fā)癥。很多血糖高居不下，波動較大，不穩(wěn)定的糖尿病患者，在食用了鷹嘴豆產(chǎn)品3個月之內血糖都得到了有效的控制，其并發(fā)癥也得到了有效的預防和減緩。
[0007]現(xiàn)有技術的工業(yè)化納豆激酶的制備方法中仍然沿用了原始的納豆發(fā)酵方法，所產(chǎn)出的納豆產(chǎn)品內有效活性物的濃度較低，且最終產(chǎn)品多為濕體納豆，其本身帶有濃重的氨臭味，無法被廣大消費者所接受。

【發(fā)明內容】

[0008]本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種具有溶解血栓，減少血栓形成并有效降低血糖功效的納豆激酶的制造方法。
[0009]本發(fā)明為解決公知技術中存在的技術問題所采取的技術方案是:[0010]本發(fā)明的納豆激酶的制造方法，包括以下步驟:
[0011]A、配制培養(yǎng)基中的固態(tài)原料，將研磨后的麩皮與鷹嘴豆粉按質量比1: 2的比例進行配比，形成固態(tài)混合原料；
[0012]B、向上述固態(tài)混合原料中加水定容，加水至固態(tài)混合原料占總質量的18% _24%，形成固液混合培養(yǎng)基，固液混合培養(yǎng)基定容值700-800升；
[0013]C、將固液混合培養(yǎng)基投入發(fā)酵罐，密封發(fā)酵罐并加熱至121°C，進行高溫滅菌20-30分鐘；
[0014]D、高溫滅菌后，將發(fā)酵罐自然冷卻；
[0015]E、當發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基冷卻至36_38°C時，向培養(yǎng)基中接入一株納豆芽孢桿菌；
[0016]F、將接入納豆芽孢桿菌的培養(yǎng)基在保持溫度37°C、ph值6-7、通氣量10升/分鐘的發(fā)酵罐中培養(yǎng)27-30小時；
[0017]G、當培養(yǎng)基中ph值超出6-7的范圍即標志發(fā)酵過程結束，產(chǎn)生納豆激酶；
[0018]H、將上述發(fā)酵液濃縮至400升,發(fā)酵液中納豆激酶活力達到1500-2000u/ml，在濃縮的發(fā)酵液中添加相當于發(fā)酵液總質量4-10%的糊精作為保護劑，進行負壓離心噴霧干燥。
[0019]本發(fā)明具有的優(yōu)點和積極效果是:
[0020]本發(fā)明的納豆激酶的制造方法，利用經(jīng)典深層發(fā)酵技術，通過引入鷹嘴豆粉作為原料組成混合培養(yǎng)基，改善原 有納豆激酶生產(chǎn)工藝流程，使納豆激酶結合鷹嘴豆微量元素的功效，使制得產(chǎn)品在溶解血栓的基礎上能夠有效降低血糖。另外由于產(chǎn)品不具氨臭味，所以在產(chǎn)品形式上更容易被廣大消費者所接受。
【具體實施方式】
[0021]以下參照實施例對本發(fā)明進行詳細的說明。
[0022]實施例1:本發(fā)明的納豆激酶的制造方法，包括以下步驟:
[0023]A、配制培養(yǎng)基中的固態(tài)原料，將研磨后的麩皮與鷹嘴豆粉按質量比1: 2的比例進行配比，形成固態(tài)混合原料；
[0024]B、向上述固態(tài)混合原料中加水定容，加水至固態(tài)混合原料占總質量的18%，其中麩皮占總質量的6%，鷹嘴豆粉占總質量的12%，最終定容為700升固液混合培養(yǎng)基；
[0025]C、將固液混合培養(yǎng)基投入發(fā)酵罐，密封發(fā)酵罐并加熱至12TC，進行高溫滅菌20分鐘；
[0026]D、高溫滅菌后，將發(fā)酵罐自然冷卻；
[0027]E、當發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基冷卻至36°C時，向培養(yǎng)基中接入一株納豆芽孢桿菌；
[0028]F、將接入納豆芽孢桿菌的培養(yǎng)基在保持溫度37°C、ph值6-7、通氣量10升/分鐘的發(fā)酵罐中培養(yǎng)27小時；
[0029]G、當培養(yǎng)基中ph值超出6-7的范圍即標志發(fā)酵過程結束，產(chǎn)生納豆激酶；
[0030]H、將上述發(fā)酵液濃縮至400升,發(fā)酵液中納豆激酶活力達到1500u/ml，在濃縮的發(fā)酵液中添加相當于發(fā)酵液總質量4%的糊精作為保護劑，進行負壓離心噴霧干燥。干燥后納豆激酶活力為13800u/g，菌種活力可達到10(8次方)cfu/ml，氨基態(tài)氮濃度為
0.6一0.8g/100g。[0031]實施例2:本發(fā)明的納豆激酶的制造方法，包括以下步驟:
[0032]A、配制培養(yǎng)基中的固態(tài)原料，將研磨后的麩皮與鷹嘴豆粉按質量比1: 2的比例進行配比，形成固態(tài)混合原料；
[0033]B、向上述固態(tài)混合原料中加水定容，加水至固態(tài)混合原料占總質量的24%，其中麩皮占總質量的8%，鷹嘴豆粉占總質量的16%，最終定容為800升固液混合培養(yǎng)基；
[0034]C、將固液混合培養(yǎng)基投入發(fā)酵罐，密封發(fā)酵罐并加熱至12TC，進行高溫滅菌30分鐘；
[0035]D、高溫滅菌后，將發(fā)酵罐自然冷卻；
[0036]E、當發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基冷卻至38°C時，向培養(yǎng)基中接入一株納豆芽孢桿菌；
[0037]F、將接入納豆芽孢桿菌的培養(yǎng)基在保持溫度37°C、ph值6-7、通氣量10升/分鐘的發(fā)酵罐中培養(yǎng)30小時；[0038]G、當培養(yǎng)基中ph值超出6-7的范圍即標志發(fā)酵過程結束，產(chǎn)生納豆激酶；
[0039]H、將上述發(fā)酵液濃縮至400升，發(fā)酵液中納豆激酶活力達到2000u/ml，在濃縮的發(fā)酵液中添加相當于發(fā)酵液總質量10%的糊精作為保護劑，進行負壓離心噴霧干燥。干燥后納豆激酶活力為15934u/g，菌種活力可達到10 (9次方)cfu/ml，氨基態(tài)氮濃度為
0.6一0.8g/100g。
[0040]實施例3:本發(fā)明的納豆激酶的制造方法，包括以下步驟:
[0041]A、配制培養(yǎng)基中的固態(tài)原料，將研磨后的麩皮與鷹嘴豆粉按質量比1: 2的比例進行配比，形成固態(tài)混合原料；
[0042]B、向上述固態(tài)混合原料中加水定容，加水至固態(tài)混合原料占總質量的21%，其中麩皮占總質量的7%，鷹嘴豆粉占總質量的14%，最終定容為750升固液混合培養(yǎng)基；
[0043]C、將固液混合培養(yǎng)基投入發(fā)酵罐，密封發(fā)酵罐并加熱至12TC，進行高溫滅菌28分鐘；
[0044]D、高溫滅菌后，將發(fā)酵罐自然冷卻；
[0045]E、當發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基冷卻至37°C時，向培養(yǎng)基中接入一株納豆芽孢桿菌；
[0046]F、將接入納豆芽孢桿菌的培養(yǎng)基在保持溫度37°C、ph值6-7、通氣量10升/分鐘的發(fā)酵罐中培養(yǎng)28小時；
[0047]G、當培養(yǎng)基中ph值超出6-7的范圍即標志發(fā)酵過程結束，產(chǎn)生納豆激酶；
[0048]H、將上述發(fā)酵液濃縮至400升,發(fā)酵液中納豆激酶活力達到1800u/ml，在濃縮的發(fā)酵液中添加相當于發(fā)酵液總質量6%的糊精作為保護劑，進行負壓離心噴霧干燥。干燥后納豆激酶活力為18750u/g，菌種活力可達到10(9次方)cfu/ml，氨基態(tài)氮濃度為
0.6一0.8g/100g。
[0049]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，雖然本發(fā)明已以較佳實施例公開如上，然而，并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉本專業(yè)的技術人員，在不脫離本發(fā)明技術方案范圍內，當然會利用揭示的技術內容作出些許更動或修飾，成為等同變化的等效實施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術方案的內容，依據(jù)本發(fā)明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均屬于本發(fā)明技術方案的范圍內。
【權利要求】
1.一種納豆激酶的制造方法，包括以下步驟: A、配制培養(yǎng)基中的固態(tài)原料，將研磨后的麩皮與鷹嘴豆粉按質量比1: 2的比例進行配比，形成固態(tài)混合原料； B、向上述固態(tài)混合原料中加水定容，加水至固態(tài)混合原料占總質量的18%-24%，形成固液混合培養(yǎng)基，固液混合培養(yǎng)基定容值700-800升； C、將固液混合培養(yǎng)基投入發(fā)酵罐，密封發(fā)酵罐并加熱至121°C，進行高溫滅菌20-30分鐘； D、高溫滅菌后，將發(fā)酵罐自然冷卻； E、當發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基冷卻至36-38°C時，向培養(yǎng)基中接入一株納豆芽孢桿菌； F、將接入納豆芽孢桿菌的培養(yǎng)基在保持溫度37°C、ph值6-7、通氣量10升/分鐘的發(fā)酵罐中培養(yǎng)27-30小時； G、當培養(yǎng)基中ph值超出6-7的范圍即標志發(fā)酵過程結束，產(chǎn)生納豆激酶； H、將上述發(fā)酵液濃縮至400升,發(fā)酵液中納豆激酶活力達到1500-2000u/ml，在濃縮的發(fā)酵液中添加相當于發(fā)酵液總質量`4-10%的糊精作為保護劑，進行負壓離心噴霧干燥。
【文檔編號】C12N9/54GK103849610SQ201210512373
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2012年12月4日 優(yōu)先權日:2012年12月4日
【發(fā)明者】李寶恒 申請人:天津市寶恒生物科技有限公司