專利名稱：診斷神經(jīng)變性疾病的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及診斷神經(jīng)變性疾病、特別是阿爾茨海默病的方法。
背景技術(shù)：
神經(jīng)變性疾病的診斷并不容易。因此，對于阿爾茨海默病，根據(jù)常規(guī)"NINCDS-ADRDA〃標(biāo)準(zhǔn)(McKhann et al., (1984)Neurology34:939_944)，在患者尸體解剖和腦神經(jīng)病理檢查表明一方面存在老年斑，另一方面存在神經(jīng)原纖維變性后，區(qū)分可能的阿爾茨海默病、很可能的阿爾茨海默病以及明確的阿爾茨海默病，同時(shí)僅在驗(yàn)尸后可能建立明確的阿爾茨海默病的診斷。可能的或很可能的阿爾茨海默病的診斷，實(shí)質(zhì)上基于臨床標(biāo)準(zhǔn)和神經(jīng)心理學(xué)測驗(yàn)，所述測驗(yàn)首先旨在確立個(gè)體是否表現(xiàn)出癡呆綜合征，這通常根據(jù)DSM IV標(biāo)準(zhǔn)(Diagnostic and Statistical Manual for Mental Disorders, 4th edition, AmericanPsychiatric Association, 1994)來進(jìn)行,接著確定癡呆的病因。癡呆的標(biāo)準(zhǔn)基本上包括記憶障礙和對社會-職業(yè)活動具有影響并且與以前的功能相比導(dǎo)致衰退的其他認(rèn)知功能障礙。通過監(jiān)測患者的進(jìn)展，加強(qiáng)診斷，這使得指明癡呆的原因成為可能，特別是，通過排除認(rèn)知衰退的其他原因。在這方面，通過評估局部海馬萎縮，并通過排除認(rèn)知障礙的其他原因，如中風(fēng)的副作用，腦成像是診斷的重要要素，然而，海馬萎縮可以存在于侵襲老年人的其他疾病中。然而，通常認(rèn)為，僅約85%的很可能的阿爾茨海默病病例在死后得到證實(shí)。15%的假陽性通常起因于其他神經(jīng)變性疾病，如額顳癡呆，包括特別是具有路易體的癡呆(Delacourte (1998) Annales de Biologie Clinque 56:133-142)。因此，目前的診斷阿爾茨海默病的方法缺少特異性。另外，看起來，在出現(xiàn)第一認(rèn)知障礙所限定的疾病引發(fā)與可以引起可能的或和很可能的阿爾茨海默病診斷的建立的癡呆首發(fā)癥狀之間，存在超過10年的時(shí)間段(Amieva et al. (2008)Ann.Neurol.64:479-480)。因此阿爾茨海默病的診斷一般是晚期建立的，然而該疾病完全處于晚期。然而，為了有效，目前為阿爾茨海默病所設(shè)想的治療需要從病理過程開始時(shí)即進(jìn)行，例如當(dāng)待治療的個(gè)體仍然表現(xiàn)出輕度認(rèn)知障礙(MCI)時(shí)，這意味著要能早期診斷所述疾病。實(shí)際上，可以進(jìn)行輔助檢查，如分析患者腦脊液中的生化標(biāo)志物，以便改善阿爾茨海默病的診斷。因此，已經(jīng)特別證明，測定腦脊液中￠-淀粉樣蛋白卜心肽(AP42)的水平和tau(Tubulin Associated Unit,微管蛋白相關(guān)單元)肽的總水平，即磷酸化形式和非磷酸化形式，使得診斷阿爾茨海默病成為可能，且靈敏度為92%，特異性為89%(Sunderland etal.(2003) JAMA 289:2094-2103)。此后，除了 AP 42 和總 tau(T_tau)外，增加了第三個(gè)標(biāo)志物，即磷酸化的tau(ptau),特別是在蘇氨酸181 (ptaul81)上磷酸化。此外，已可表明，這三種標(biāo)志物的組合可能檢測患有MCI的個(gè)體的初期阿爾茨海默病，其靈敏度為83%，且特異性為 72%(Matteson et al.(2009) JAMA302:385-393)。然而，在目前，這些檢測并不能以常規(guī)方式進(jìn)行，部分原因是，它們在診斷阿爾茨海默病的可靠性和阿爾茨海默病早期診斷方面實(shí)現(xiàn)的增益，通常不足以證明求助于所述檢測是正當(dāng)?shù)?。雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)是絲氨酸/蘇氨酸激酶，其主要靶標(biāo)是真核翻譯起始因子2 a (eIF2 a )。通過446位的蘇氨酸和/或451位的蘇氨酸的磷酸化，PKR以激活的形式存在。已經(jīng)可證明，特別是在患有阿爾茨海默病、亨廷頓病以及克雅氏病患者的腦中以及在患有阿爾茨海默病患者的血液淋巴細(xì)胞中高水平的激活的PKR(對于綜述，參見Hugon et al.(2009)Expert Rev.Neurother.9:1455-1457)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明由本發(fā)明人的證明而來，即測定個(gè)體腦脊液中PKR的水平，特別是磷酸化的激活形式的PKR的水平，具有選擇性且特異性診斷這些個(gè)體的阿爾茨海默病的用途，包括在所述疾病的初期或早期階段，任選地?zé)o癥狀階段。因此，本發(fā)明涉及特別是體外診斷個(gè)體的神經(jīng)變性疾病的方法，其中:-測定來自所述個(gè)體的生物樣品中特別是腦脊液樣品中雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)的水平，-由此推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。本發(fā)明還涉及特別是體外診斷個(gè)體的神經(jīng)變性疾病的方法，其中:-測定來自所述個(gè)體的生物樣品中、特別是腦脊液樣品中激活的PKR的水平與總PKR水平的比，

-由此推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。本發(fā)明還涉及特別是體外診斷未表現(xiàn)出癡呆癥狀的個(gè)體的神經(jīng)變性疾病的方法，其中:-測定來自所述個(gè)體的生物樣品中、特別是腦脊液樣品中雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)的水平，-由此推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。本發(fā)明還涉及用于測定未表現(xiàn)出神經(jīng)變性疾病癥狀的個(gè)體會患有神經(jīng)變性疾病的風(fēng)險(xiǎn)的方法，特別是體外方法，其中:-測定來自所述個(gè)體的生物樣品中、特別是腦脊液樣品中雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)的水平，-由此推斷所述個(gè)體是否處于發(fā)展神經(jīng)變性疾病的風(fēng)險(xiǎn)中。如本文所意圖的，措辭〃神經(jīng)變性疾病〃表示變性疾病，即影響神經(jīng)系統(tǒng)、特別是腦的漸進(jìn)性退化疾病。優(yōu)選，本發(fā)明的神經(jīng)變性疾病是癡呆。癡呆是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的；通常認(rèn)為癡呆的特征是個(gè)體的智力功能漸進(jìn)性惡化，因此危害其適應(yīng)環(huán)境的能力，特別是在面對新形勢時(shí)，這導(dǎo)致其喪失自主性。優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明，癡呆的癥狀特別是美國精神病學(xué)會(American Psychiatric Association, DSM IV)有關(guān)阿爾茨海默病型癡呆的手冊:Diagnostic and Statistical Manual for Mental Disorders, 4th edition (1994)所限定的那些癥狀，即:A.發(fā)展出同時(shí)通過以下表現(xiàn)其自身的多種認(rèn)知缺陷:
(I)記憶障礙(獲悉新信息和記住以前所獲悉的信息的能力降低)；(2) 一種(或多種)下述認(rèn)知障礙:(a)失語癥(語言障礙)，(b)失用癥(盡管運(yùn)動機(jī)能完整，但是進(jìn)行運(yùn)動活動的能力降低)，(C)失認(rèn)癥(盡管感覺功能完整，但是不能識別或確定物體)，(d)執(zhí)行功能(即規(guī)劃、組織、順序分解、抽象思考)障礙。B.標(biāo)準(zhǔn)Al和A2的認(rèn)知缺陷各自引起明顯的社會或職業(yè)功能障礙，并且與以前的功能水平相比，表現(xiàn)出明顯下降。C.發(fā)展的特征是漸進(jìn)性引發(fā)和持續(xù)認(rèn)知下降。D.標(biāo)準(zhǔn)Al和A2的認(rèn)知缺陷不是由于任一下述所致:(I)引起漸進(jìn)性認(rèn)知和記憶缺陷的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病(例如，腦血管疾病、帕金森病、亨廷頓病、硬腦膜下血腫、正常壓力腦積水、腦瘤)；(2)已知引起癡呆的系統(tǒng)病(例如，甲狀腺功能減退、維生素B12或葉酸缺乏癥、煙堿酸缺乏癥、高鈣血癥、神經(jīng)梅毒、HIV感染)；(3)物質(zhì)誘導(dǎo)的疾病。E.僅在精神錯(cuò)亂期間發(fā)生所述缺陷。F.所述問題不能更好地理解為由另一 Axis I病癥(在DSM IV的涵義內(nèi)，即需要及時(shí)關(guān)注)(例如，重度抑郁癥或精神分裂癥)所引起的。優(yōu)選地，本發(fā)明的神經(jīng)變性疾病選自阿爾茨海默病、亨廷頓病、克雅氏病以及帕金森病。特別優(yōu)選的是，本發(fā)明的神經(jīng)變性疾病是阿爾茨海默病。本發(fā)明的個(gè)體優(yōu)選是人類。本發(fā)明的個(gè)體可以表現(xiàn)出一種或多種癡呆癥狀或可以
患有癡呆。本發(fā)明的個(gè)體還可能未患有癡呆或未表現(xiàn)出癡呆癥狀。當(dāng)未表現(xiàn)出癡呆時(shí)，本發(fā)明的個(gè)體可能患有認(rèn)知障礙，特別是輕度認(rèn)知障礙(MCI)，這是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，特別是如Petersen et al., (1999)Arch.Neurol.56:303-308所限定。在主訴涉及客觀上明顯的記憶功能缺陷與缺乏日常生活活動的全面認(rèn)知和智力功能和完整性的情況下，個(gè)體通常被解釋為患有MICI。優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明，患有MCI的個(gè)體具有簡明精神狀態(tài)檢查量表(MiniMental State Examination, MMSE)檢測、特別是兩愿版本的 Groupe de Reflexion sur IesEvaulations Cognitives (GRECO)[認(rèn)知評估研究組]評分，作為其年齡與其社會文化水平的函數(shù)，所述評分高于對應(yīng) 于第5個(gè)百分點(diǎn)的評分。此外，本發(fā)明的個(gè)體可能還未表現(xiàn)出任何認(rèn)知障礙。當(dāng)本發(fā)明的個(gè)體未患有癡呆、特別是未患有阿爾茨海默病時(shí)，或未表現(xiàn)出癡呆、特別是阿爾茨海默病的任何癥狀時(shí)，特別是，具體而言，當(dāng)所述個(gè)體患有MCI，本發(fā)明的方法使得特別是在初期或早期、甚至無癥狀階段確定所述個(gè)體是否患有癡呆、特別是阿爾茨海默病成為可能，或使得確定所述個(gè)體是否處于發(fā)展癡呆、特別是阿爾茨海默病風(fēng)險(xiǎn)成為可能。同樣優(yōu)選，來自所述個(gè)體的腦脊液樣品中神經(jīng)變性疾病的至少以一種生物標(biāo)志物的水平是正常的。如本文所意圖的，當(dāng)神經(jīng)變性疾病的生物標(biāo)志物的水平小于本領(lǐng)域技術(shù)人員普遍接受的用于將個(gè)體診斷為患有與所述標(biāo)志物相關(guān)的神經(jīng)變性疾病的閾值時(shí)，則認(rèn)為所述神經(jīng)變性疾病的生物標(biāo)志物的水平是正常的。神經(jīng)變性疾病、特別是阿爾茨海默病的許多生物標(biāo)志物是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明，神經(jīng)變性疾病的生物標(biāo)志物是阿爾茨海默病的生物標(biāo)志物，特別是選自標(biāo)志物￠-淀粉樣蛋白(AP)特別是￠-淀粉樣蛋白42)、總tau(T-tau),以及磷酸化的tau(ptau)、特別是在蘇氨酸181上磷酸化的tau(PtaulSl)。這些標(biāo)志物和用于測量其在腦脊液樣品中水平的方法，是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并特別限定于 Sunderland et al.(2003) JAMA289:2094-2103, Blennow etal.(2006) Lancet368:387-403 和 Mattson et al.(2009) JAMA302:385-393 中。雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)也稱為E2AK2，其是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并且特別是限定于Hugon et al.(2009)Expert Rev.Neurother.9:1455-1457 或由 UniProtKB數(shù)據(jù)庫的登錄號P19525限定。如本文所意圖的，措辭〃雙鏈RNA依賴性蛋白激酶〃或"PKR"與非磷酸化的PKR無差別地指在446位的蘇氨酸(pPKR446)和/或451位的蘇氨酸(pPKR451)磷酸化的PKR(pPKR)，或指所有這些PKR形式。本發(fā)明生物樣品中磷酸化和非磷酸化形式的PKR的全體也稱為總PKR。因此，在本發(fā)明的診斷或風(fēng)險(xiǎn)確定方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，基于樣品中磷酸化的PKR、特別是pPKR446的水平，基于樣品中總PKR的水平，或基于樣品中磷酸化的PKR、特別是PPKR446的水平與所述樣品中總PKR水平的比，推斷個(gè)體患有神經(jīng)變性疾病、特別是阿爾茨海默病。在本發(fā)明的診斷或風(fēng)險(xiǎn)確定的方法另一優(yōu)選實(shí)施方式中，基于以下的比較，推斷所述個(gè)體患有神經(jīng)變性疾病、特別是阿爾茨海默病:-樣品中磷酸 化的PKR、特別是pPKR446的水平，樣品中總PKR的水平，或樣品中磷酸化的PKR、特別是pPKR446的水平與所述樣品中總PKR的比，與-至少一個(gè)預(yù)定的值，特別是當(dāng)樣品中磷酸化的、特別是PPKR446的水平，樣品中總PKR的水平，或樣品中磷酸化的PKR、特別是pPKR446的水平與所述樣品中總PKR的水平的比，大于所述預(yù)定值時(shí)。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地測定本發(fā)明的預(yù)定值。特別是，其可以是本發(fā)明PKR的平均水平，或來自未患有認(rèn)知障礙的對照個(gè)體的CSF樣品中多個(gè)大于I的這種平均水平。其也可以是從接受操作特征(Receiving Operating Characteristics, ROC)曲線所獲得的閾值，如下述實(shí)施例所述，通過固定具體選擇性和特異性值，特別是用于最大化選擇性和特異性的總和，針對總PKR、磷酸化的PKR特別是PPKR446，或樣品中磷酸化的PKR特別是PPKR446的水平與樣品中總PKR的水平的比建立所述曲線。因此，作為實(shí)例，根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)樣品中磷酸化的PKR、特別是pPKR446的水平與所述樣品中總PKR的水平的比大于0.76或
0.77時(shí)，個(gè)體被診斷為患有阿爾茨海默病。而且，在另一具體實(shí)施方式
中，本發(fā)明的診斷或風(fēng)險(xiǎn)確定方法還包括測定神經(jīng)變性疾病特別是阿爾茨海默病的如上文所限定的至少一種其他生物標(biāo)志物的水平。本發(fā)明的生物樣品優(yōu)選是流體生物樣品、更優(yōu)選腦脊液(CSF)的流體生物樣品。本領(lǐng)域技術(shù)人員完全了解如何從個(gè)體獲得CSF，例如通過腰椎穿刺。優(yōu)選地，在本發(fā)明的方法中，本發(fā)明的生物樣品中本發(fā)明的PKR水平，借助免疫學(xué)方法測定，即利用下述的方法:特異性抗PKR即基本上不結(jié)合生物樣品、特別是CSF樣品的任何其他組分的抗體、特別是單克隆抗體、包含抗體的特異性結(jié)合抗原的一部分的抗體片段或其他適體。正如對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯然的是，用于測量總PKR水平的抗體針對未被磷酸化修飾的PKR的一部分；相反，用于測量pPKR446或pPKR451水平的抗體結(jié)合PKR的磷酸化的一部分(并且不結(jié)合未磷酸化的同一部分)。這類抗PKR抗體是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。根據(jù)本發(fā)明，免疫學(xué)方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的，并且特別涵蓋蛋白質(zhì)印跡或ELISA技術(shù)。借助下文的附圖和實(shí)施例，會以非限制性方式進(jìn)一步說明本發(fā)明。


圖 1、2 和 3圖1-3以箱形圖表示，與未患有認(rèn)知障礙的對照個(gè)體的CSF中所測量的(對照)相t匕，在患有阿爾茨海默病(AD)的患者的CSF中測量的總PKR(PKR)的水平(任意單位)(圖1)、pPKR446 (pPKR)的水平(任意單位)(圖 2)以及 pPKR446/ 總 PKR 比乘以 100 (pPKR/PKR)(圖 3)。圖 4、5 和 6圖4-6表示ROC曲線，其給出了基于總PKR水平(圖4)、pPKR446水平(圖5)以及PPKR446/總PKR比(圖6)進(jìn)行阿爾茨海默病診斷的靈敏度(y軸)和1_特異性(y軸)。Ml圖7 表示 CSF 中 pPKR446/ 總 PKR 比乘以 100 (pPKR/PKR, y 軸，任意單位)與 ptaul81水平(ptau, X-軸，pg/ml)之間的關(guān)系以及相應(yīng)的線性相關(guān)線。圖8圖8表示下述的CSF中pPKR446的水平與總PKR水平的比(y-軸，任意單位):患有阿爾茨海默病(AD)、特別是具有正常(AD-PLn)或中間(AD-PLi)水平的AP 42、T_tau以及PtaulSl標(biāo)志物的患者；未患有認(rèn)知障礙的對照個(gè)體(HC);患有非阿爾茨海默病相關(guān)認(rèn)知障礙的對照(CC);患有酒精性癡呆的個(gè)體(OH);以及患有輕度認(rèn)知障礙(MCI)的個(gè)體。圖 9、10、11圖9-11分別表示在實(shí)施例3中所測量的對照個(gè)體(NC)、患有遺忘型輕度認(rèn)知障礙(MCI)的個(gè)體和患有阿爾茨海默病的個(gè)體的SCF中總PKR和pPKR446水平(光密度單位)以及pPKR446/總PKR比(無單位)。實(shí)心水平條表示平均值，而虛線水平條表示閾值。
實(shí)施例實(shí)施例11.患者和方法患者本研究包括46名診斷為患有阿爾茨海默病(AD)的患者和39名未患有阿爾茨海默病的對照個(gè)體。基于NINCDS-ADRDA標(biāo)準(zhǔn)收入AD患者。所有的患者均來自Lariboisi色re醫(yī)院的Centre Memoire [記憶中心](法國巴黎)。沒有對照個(gè)體表現(xiàn)出任何認(rèn)知障礙且滿足阿爾茨海默病標(biāo)準(zhǔn)。在常規(guī)診斷程序下，聯(lián)合神經(jīng)學(xué)檢查、常規(guī)血液試驗(yàn)、神經(jīng)心理學(xué)測驗(yàn)以及腦MRI成像，在腰椎穿刺后，收集腦脊液(CSF)樣品。研究獲得了巴黎Nord Bichat醫(yī)院倫理委員會(Paris Nord B ichat hospital)的許可。利用蛋白質(zhì)印跡分析CSF:測定總PKR和在蘇氡酸446 h磷酸化的PKR(pPKR446)的水平用柱(ProteoExtract , Calbiochem* )預(yù)處理CSF樣品，以便除去白蛋白和IgG,隨后根據(jù)蛋白質(zhì)印跡的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)制備。利用Micro BCA Protein Assay試劑盒(ThermoScientific),根據(jù)制造商的說明書，測定蛋白濃度。在NuPAGE BisTris4_12%聚丙烯酰胺凝膠(Invitrogen)上分離CSF樣品，并隨后電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜(GE Healthcare)上。將膜與分別識別特別是在磷酸化的蘇氨酸446處的pPKR446和所有PKR蛋白的兔一抗(SantaCruz) —起孵育、在5%乳的PBS溶液中封閉，并隨后在存在稀釋至1/5000的、偶聯(lián)于抗兔抗體(Rockland Immunochemical Inc.)的IR Dye 800突光團(tuán)的情況下孵育。借助Odyssey成像系統(tǒng)(L1-C0R Biosciences)顯示結(jié)合的蛋白，隨后通過密度測定法利用Multigauge軟件(Fuji)定量。測定每一患者和每一對照個(gè)體的pPKR446/總PKR比。相對于內(nèi)部對照(患有阿爾茨海默病的人腦)，調(diào)整所有結(jié)果。借助版本5的Prism軟件(GraphPad)進(jìn)行定量結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析。通討ELISA分析CSF: 3 -淀粉樣蛋白夂(A 3 42)、總tau (T~tau)、在蘇氡酸181磷酸化的 tau (ptau!81)根據(jù)制造商的推薦，利用ELISA (Innotest tests Abeta, Innoteststau, Innotests pl81tau, Innogenetics, Ghent, Belgium)測定與用于測定總 PKR 和PPKR446水平相同的CSF樣品的AP 42、T-tau和ptaul81水平。統(tǒng)計(jì)分析用描述統(tǒng)計(jì)學(xué)描述患者和對照的特征。利用斯氏t檢驗(yàn)比較所述組的連續(xù)測量結(jié)果，并利用chi2檢驗(yàn)比較比例。用箱形表方法表示兩個(gè)組(患者和對照)的總PKR和PPKR446水平分布和pPKR446水平與總PKR水平的比(pPKR446/總PKR)。用ROC(接受操作特征)曲線分析測定所測量的CSF標(biāo)志物水平的最佳截止值，并計(jì)算曲線下面積(AUC)。最佳截止值定義為給出靈敏 度和特異性的最高總和。還測定一方面PKR與pPKR446之間和另一方面AP 42、T-tau以及ptau之間的斯皮爾曼相關(guān)系數(shù)。2.結(jié)果下文的復(fù)I給出了所研究個(gè)體的特征:表1:本研究中個(gè)體的特征
權(quán)利要求
1.體外診斷個(gè)體的神經(jīng)變性疾病的方法，其中: -測定來自所述個(gè)體的腦脊液樣品中雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)的水平， -由此推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)變性疾病選自阿爾茨海默病、亨廷頓病、克雅氏病以及帕金森病。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述神經(jīng)變性疾病是阿爾茨海默病。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述個(gè)體未患有癡呆。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述個(gè)體患有輕度認(rèn)知障礙(MCI)。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中神經(jīng)變性疾病的至少一種生物標(biāo)志物在腦脊液樣品中的水平是正常的。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中所述生物標(biāo)志物選自標(biāo)志物P-淀粉樣蛋白(A3)、總tau(T-tau)以及磷酸化的tau(ptau)。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其中基于所述樣品中磷酸化的PKR水平、所述樣品中總PKR水平，或所述樣品中磷酸化的PKR水平與所述樣品中總PKR水平的比，推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。
9.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中基于以下之間的比較，推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病: -所述樣品中磷酸化的PKR水平、所述樣品中總PKR水平，或所述樣品中磷酸化的PKR水平與所述樣品中總PKR水平的比，與 -至少一個(gè)預(yù)定值。
10.如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，還包括測定權(quán)利要求6或7所限定的神經(jīng)變性疾病的至少一種其他生物標(biāo)志物的水平。
全文摘要
本發(fā)明涉及體外診斷個(gè)體的神經(jīng)變性疾病的方法，其中測定來自所述個(gè)體腦脊液的樣品中雙鏈RNA依賴性蛋白激酶(PKR)的水平，由此推斷所述個(gè)體是否患有神經(jīng)變性疾病。
文檔編號C12Q1/48GK103140590SQ201180047665
公開日2013年6月5日 申請日期2011年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月11日
發(fā)明者雅克·于貢, 克萊雷·帕凱, 朱利恩·迪米爾吉耶, 弗朗索瓦·穆頓-利熱 申請人:公共救濟(jì)事業(yè)局-巴黎醫(yī)院