專利名稱：一種制備鹿茸膠原蛋白的酶解方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備鹿茸膠原蛋白的酶解方法，屬于中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
鹿鸞是鹿科動(dòng)物梅花鹿(Cervusnippon Temminck)或馬鹿(Cervus eIaphusLinnaeus)的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》?！侗静菥V目》謂鹿茸能夠“生精補(bǔ)髓，養(yǎng)血益陽(yáng)，強(qiáng)筋健骨，治一切虛損、耳聾、目暗、眩暈虛痢”。鹿茸中的化學(xué)成分比較復(fù)雜，含氨基酸、磷脂、脂肪酸、蛋白多肽類、激素樣物質(zhì)、核酸以及各種無(wú)機(jī)元素等。通過(guò)對(duì)多種品系的鹿茸中的化學(xué)成分分析表明，粗蛋白質(zhì)的含量都占干重的50%以上，而膠原蛋白是鹿茸中含量最高的蛋白質(zhì)。藥理研究表明，鹿茸膠原對(duì)大鼠成骨細(xì)胞具有明顯的促貼壁和增殖作用，對(duì)去勢(shì)雌性大鼠骨質(zhì)疏松癥具有一定的治療作用。雖然鹿茸有較好的醫(yī)用價(jià)值和較強(qiáng)的保健作用，但由于鹿茸的組織結(jié)構(gòu)獨(dú)特一通過(guò)鹿茸組織結(jié)構(gòu)研究表明，鹿茸(除茸皮外)從項(xiàng)部到基部是由發(fā)育程度不同的骨組織構(gòu)成；因此鹿茸中含有大量構(gòu)成骨及前骨的材料一硫酸軟骨素和膠原纖維，因此對(duì)鹿茸并沒(méi)有好的利用方法；在傳統(tǒng)的中醫(yī)醫(yī)療中，鹿茸作為中藥配伍的一部分，只能進(jìn)行水煎，在利用過(guò)程中利用率只有2%左右，絕大部分都廢棄；而作為傳統(tǒng)的補(bǔ)品，一般只能用于泡酒等，利用率則更低。因此，傳統(tǒng)鹿茸的利用方式，對(duì)鹿茸資源是很大的浪費(fèi)。

因此，本發(fā)明提供一種酶解法制備鹿茸膠原蛋白，充分利用寶貴的鹿茸資源，更好的發(fā)揮鹿茸的藥用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種制備鹿茸膠原蛋白的酶解方法，充分利用寶貴的鹿茸資源，更好的發(fā)揮鹿茸的藥用價(jià)值。本發(fā)明的技術(shù)解決方案包括以下步驟:
(1)取新鮮的鹿茸加入緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，調(diào)溶液的PH值為6.0-8.0，按鹿茸重量的0.005 0.01加入一種或多種生物催化劑，同時(shí)加入一種或多種酶激活劑；
(2)在溫度20°C—60°C，Ph6.0—pH8.0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)2小時(shí)一5小時(shí)；
(3)然后離心或硅藻土過(guò)濾，得到澄清金黃色的鹿茸水解液，水解率在60%-70%。緩沖液包括:磷酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽緩沖液。生物催化劑包括:胰蛋白酶、胃蛋白酶、HAP堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、堿性內(nèi)切蛋白酶、風(fēng)味酶。激活劑包括:磷酸氫二鈉，磷酸二氫鈉，硫酸鈉和Ca2+、M克2+、Zn2+等氯化物。水解液中含有多種有效物質(zhì):經(jīng)過(guò)分析，鹿茸水解后的溶液中含有大量的小分子多肽、脂類(主要有磷脂、體化合物、脂肪酸、中性脂和前列腺素等)、游離氨基酸、微量元素、糖類等多種有效成分。
本發(fā)明的積極效果在于:鮮鹿茸經(jīng)過(guò)水解方法處理后，其平均水解率達(dá)70%左右(水解率根據(jù)鮮鹿茸的質(zhì)量不同在60— 75%之間)；水解后的殘余物為鹿茸鈣化的部分及部分皮毛，所有的有機(jī)質(zhì)基本都變成溶液狀態(tài)，鹿茸中幾乎所有的有效成分都變成了易于人體吸收的溶液狀態(tài)。得到的產(chǎn)品可應(yīng)用于制藥、保健品、食品的諸多方面，應(yīng)用極其方便，同時(shí)利用本技術(shù)對(duì)鹿茸產(chǎn)品進(jìn)行開(kāi)發(fā)可衍生很多新的開(kāi)發(fā)途徑，得到系列新產(chǎn)品。
具體實(shí)施例方式鹿茸的前處理，將新鮮的鹿茸去皮后，切成I一2 cm3的小塊，用流水沖洗至無(wú)血色，再用蒸餾水沖洗干凈，置_20°C冰箱中保存。實(shí)施例1
取一定量新鮮的鹿茸I千克，加入3000毫升乳酸鹽的緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，加入生物催化劑:木瓜蛋白酶I克，加入激活劑:磷酸氫二鈉0.1克，調(diào)pH值為8.0，將溶液的溫度調(diào)至52°C，放入反應(yīng)罐反應(yīng)3小時(shí)，離心去殘?jiān)占该鞒吻宓囊后w3080毫升。實(shí)施例2:
取一定量新鮮的鹿茸I千克，加入3000毫升檸檬酸鹽的緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，力口入生物催化劑:木瓜蛋白酶8克，加入激活劑:氯化鈣0.1克，調(diào)pH值為7.0，將溶液的溫度調(diào)至37°C，放入反應(yīng)罐反應(yīng)5小時(shí)，離心去殘?jiān)?，收集透明澄清的液體3300毫升。實(shí)施例3
取一定量新鮮的鹿茸I千克，加入3000毫升乳酸鹽的緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，加入生物催化劑:胰蛋白酶I克，加入激活劑:氯化錳0.1克，調(diào)pH值為8.0，將溶液的溫度調(diào)至52°C,放入反應(yīng)罐反應(yīng)3小時(shí)，離心去殘?jiān)?，收集透明澄清的液體3340毫升。實(shí)施例4
取一定量新鮮的鹿茸I千克，加入3000毫升磷酸鹽的緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，加入生物催化劑:胃蛋白酶I克，加入激活劑:氯化鋅0.1克，調(diào)pH值為6.0，將溶液的溫度調(diào)至25°C，放入反應(yīng)罐反應(yīng)4小時(shí)，離心去殘?jiān)?，收集透明澄清的液體3200毫升。實(shí)施例5
取一定量新鮮的鹿茸I千克，加入3000毫升檸檬酸鹽的緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，力口入生物催化劑:堿性內(nèi)切蛋白酶0.5克、風(fēng)味酶0.5克，加入激活劑:氯化鋅0.1克，調(diào)pH值為6.0，將溶液的溫度調(diào)至25°C，放入反應(yīng)罐反應(yīng)4小時(shí)，離心去殘?jiān)?，收集透明澄清的液體3200暈升。
權(quán)利要求
1.一種制備鹿茸膠原蛋白的酶解方法，其特征在于: 包括以下步驟完成的: (I)取新鮮的鹿茸加入緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，調(diào)溶液的PH值為6.0-8.0，按鹿茸重量的0.005 0.01加入一種或多種生物催化劑，同時(shí)加入一種或多種酶激活劑；(2)在溫度20°C—60°C，PH6.0—PH8.0條件下進(jìn)行水解反應(yīng)2小時(shí)一5小時(shí)；(3)然后離心或硅藻土過(guò)濾，得到澄清金黃色的鹿茸水解液，水解率在60%-70%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物催化劑，其特征在于:包括共有胃蛋白酶、HAP堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶 、胰蛋白酶、堿性內(nèi)切蛋白酶、風(fēng)味酶中的一種或多種。
全文摘要
一種制備鹿茸膠原蛋白的酶解方法，取新鮮的鹿茸加入緩沖液，用組織絞碎機(jī)絞碎，調(diào)pH值為6.0-8.0，將溶液的溫度調(diào)至20℃-35℃，加入復(fù)合的生物催化劑進(jìn)行水解，然后離心或硅藻土過(guò)濾，得到澄清金黃色的鹿茸水解液。得到的產(chǎn)品可應(yīng)用于制藥、保健品、食品的諸多方面，應(yīng)用極其方便，同時(shí)利用本技術(shù)對(duì)鹿茸產(chǎn)品進(jìn)行開(kāi)發(fā)可衍生很多新的開(kāi)發(fā)途徑，得到系列新產(chǎn)品。
文檔編號(hào)A23L1/29GK103169942SQ201110438488
公開(kāi)日2013年6月26日 申請(qǐng)日期2011年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月24日
發(fā)明者魏強(qiáng), 王宇菲 申請(qǐng)人:欒清楊