專利名稱：一種瑞士乳桿菌h9及其用途的制作方法
一種瑞士乳桿菌H9及其用途
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于微生物技術(shù)應用領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種瑞士乳桿菌 (Lactobacillus helveticus)H9，還涉及所述瑞士乳桿菌H9在制備預防心血管疾病的藥物中的用途，還涉及所述瑞士乳桿菌H9在生產(chǎn)保健食品中的用途。
背景技術(shù)：
高血壓是導致心臟病、腦血管病、腎臟病發(fā)生和死亡的最主要危險因素，是一種嚴重威脅人類健康和影響生活質(zhì)量，并已給社會造成巨大經(jīng)濟損失的最常見的慢性疾病，而且有著發(fā)病年齡不斷降低，發(fā)病率逐年上升的趨勢。臨床證明化學合成藥物雖有降壓作用， 但長期使用具有不同程度的副作用。從而食品來源的抗高血壓活性物質(zhì)研究早已成為防治高血壓研究領(lǐng)域的熱點。乳酸菌作為公認的安全的微生物，用于多種發(fā)酵食品加工，已被人類食用上千年， 而且乳酸菌的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血脂和降血壓等諸多生理功能已被醫(yī)界公認。乳酸菌的降血壓作用大致來自四個方面①通過乳酸菌的蛋白水解作用，從食物蛋白(如，酪蛋白) 中釋放出降血壓活性肽；②乳酸菌的菌體成分，如多糖_肽聚糖成分；③部分乳酸菌，尤其是以活菌形式達到腸道的乳桿菌，在腸道內(nèi)促進機體對部分可以調(diào)節(jié)血壓的礦物質(zhì)的吸收；④乳酸菌產(chǎn)生的部分胞外多糖。瑞士乳桿菌(Lactobacillushelveticus)是防治高血壓方面，利用最多的微生物之一。CN102098923A公開了能產(chǎn)生大量降血壓肽，特別是IPP、VPP和LPP的瑞士乳桿菌的新菌株。該發(fā)明還涉及含有三肽IPP、VPP和LPP的混合物和瑞士乳桿菌菌株的發(fā)酵乳制品。該發(fā)明還涉及由三肽IPP、VPP和LPP組成的特定的肽混合物以及發(fā)酵產(chǎn)物或肽的混合物在食品、食品補充劑或藥物組合物中用于降低或預防高血壓的用途。CN101420969A公開了一種具有可改善血管內(nèi)皮相關(guān)功能、預防與血管內(nèi)皮功能相關(guān)的各種疾病、或者具有抑制血管內(nèi)膜增厚的作用、有望具有動脈硬化預防等作用、安全性優(yōu)異、具有改善血管內(nèi)皮功能和抑制血管內(nèi)膜增厚的至少一種作用的藥劑；以及動脈硬化預防劑。該發(fā)明的藥劑含有(a)Xaa Pro Pro、或(b)含Xaa Pro Pro的動物乳酪蛋白的水解物或其濃縮物、或(c)通過屬于瑞士乳桿菌種的菌株使含有乳蛋白質(zhì)的原料發(fā)酵得到的含IlePro Pro和/或Val Pro Pro的發(fā)酵物作為有效成分。目前，還沒有文獻報道瑞士乳桿菌H9生物學特性、篩選方法與應用。因此，本發(fā)明人經(jīng)過大量實驗研究，終于完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容[要解決的技術(shù)問題]本發(fā)明的目的是提供一種瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)H9。本發(fā)明的另一個目的是提供一種瑞士乳桿菌H9在制備預防心血管疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一個目的是提供一種瑞士乳桿菌H9在生產(chǎn)保健食品中的用途。[技術(shù)方案]本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。本發(fā)明涉及一種瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)H9。該菌菌株已于2011 年4月28日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心保藏，保藏號為 CGMCC 4811。本發(fā)明還涉及所述的瑞士乳桿菌H9在制備預防心血管疾病的藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明，所述的心血管疾病是冠心病、高血壓、運動猝死、心絞痛、急性心肌梗死、冠心病或高血脂。所述的藥物是由所述的瑞士乳桿菌H9粉劑與在藥學上可接受的載體組成的。在藥學上可接受的載體是一種或多種選自在藥學上通常使用的填充劑、粘合劑、 潤濕劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑或矯味劑的載體。所述藥物的劑型是片劑、丸劑、膠囊或微膠囊劑型。本發(fā)明還涉及本發(fā)明所述的瑞士乳桿菌H9在生產(chǎn)保健食品中的用途。根據(jù)本發(fā)明，所述的保健食品是含有本發(fā)明所述瑞士乳桿菌H9的面包、點心或飲料。本發(fā)明所述的瑞士乳桿菌H9是按照下述篩選方法篩選得到的。該篩選方法包括下述步驟A、以傳統(tǒng)發(fā)酵酸牦牛奶作為乳酸菌分離樣品，取2_3mL所述酸牦牛奶放入滅菌小試管中，再取0. 5-lmL所述發(fā)酵酸牦牛奶放入裝有滅菌CaCO3粉的無菌采樣管中，在溫度 2-6 °C條件下冷藏備用；B、用滅菌吸管吸取0. 5-lmL所述酸牦牛奶樣品并接種于5_10mL石蕊脫脂乳培養(yǎng)基；并置于溫度30 40°C恒溫箱中增菌培養(yǎng)至酸化凝固并呈現(xiàn)粉紅色；C、在步驟B)增菌培養(yǎng)后，用滅菌接種環(huán)挑取劃線接種于含有以重量計IOppm放線菌酮和IOppm硫酸粘菌素的BL瓊脂培養(yǎng)基中；將其放入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐中，在溫度30 40°C 的條件下培養(yǎng)48 72小時，形成菌落后，用接種環(huán)挑取菌落，接種于MRS培養(yǎng)液中，再置于培養(yǎng)箱中在溫度30 40°C的條件下培養(yǎng)24 48小時；D、待步驟C)菌株生長良好后，再次劃線接種于BL瓊脂培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)箱中在溫度30 40°C的條件下培養(yǎng)24 48小時，觀察記錄菌落形態(tài)和革蘭氏染色細胞形態(tài)特征，并進行過氧化氫酶試驗，分離出在所述試驗中呈陰性的桿菌，所述桿菌為乳桿菌；E、所述的乳桿菌接著在培養(yǎng)基MRS中在溫度37°C的條件下進行純化培養(yǎng)，然后在溫度-80°C至_85°C的條件下進行低溫冷凍保存，待用；F、取5mL脫脂乳在溫度121°C下滅菌7min，急冷至溫度40°C ；然后接種以其滅菌脫脂乳重量計11%在步驟E)得到的冷凍保存乳桿菌，在溫度37°C的條件下進行第1代活化；然后，把以其滅菌脫脂乳重量計2%第1代活化種子轉(zhuǎn)接到MRS培養(yǎng)基中，在溫度37°C 的條件下培養(yǎng)18h進行第2代活化，然后使用BCP瓊脂培養(yǎng)基進行計數(shù)；再將菌液離心后使用含有以重量計胰蛋白胨和0. 谷氨酸鈉的PBS保護劑在4°C冰箱中保存，用于發(fā)酵乳的制備；G、將已計數(shù)的菌株以5X 106Cfu/mL接種量于在溫度95°C下滅菌IOmin的11%脫脂乳中，在溫度37 °C下恒溫發(fā)酵至pH值4. 5時，將樣品迅速冷卻，并對樣品進行酸度、OD600 值、游離氨基氮和ACE抑制活性的測定，從而篩選出具有抗高血壓潛能的乳桿菌；H、采用血壓測量方法和靶器官組織鏡下觀察分析方法，研究與評價瑞士乳桿菌H9 發(fā)酵乳對患高血壓鼠和正常血壓鼠的影響；I、將該菌株制成供試菌液，吸取1. OmL懸浮菌液加入到9. OmL pH值2. 5的人工胃液中，在溫度37°C下消化3h，在其過程中分別于lh、2h、3h取樣測定活菌數(shù)，并計算菌株存活率；然后，吸取1. OmL消化3h后的pH值2. 5的含菌人工胃液，加入到9. OmL的人工胰液中，繼續(xù)在溫度37°C下進行培養(yǎng)，分別于0h、4h、8h取樣測定活菌數(shù)，并按照下式計算菌株
存活率
菌林存活率(％) = I^Vixl00O7o
IogcfluVoN1——菌株處理后活菌數(shù)；N0——菌株初始活菌數(shù)；根據(jù)發(fā)酵乳酸度、OD600值、游離氨基氮和ACE抑制活性和菌株存活率選育出具有優(yōu)良抗高血壓效應的瑞士乳桿菌H9。下面將更詳細地描述本發(fā)明。本發(fā)明涉及一種瑞士乳桿菌H9。該菌菌株已于2011年4月28日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心保藏，保藏號為CGMCC 4811。本發(fā)明的瑞士乳桿菌H9是采用下述篩選方法獲得的。結(jié)合附

圖1對該方法步驟描述如下A、以傳統(tǒng)發(fā)酵酸牦牛奶作為乳酸菌分離樣品，取2_3mL所述酸牦牛奶放入滅菌小試管中，再取0. 5-lmL所述發(fā)酵酸牦牛奶放入裝有滅菌CaCO3粉的無菌采樣管中，作為備用樣品放在冰箱內(nèi)，在2-6°C條件下冷藏，以備用。傳統(tǒng)發(fā)酵酸牦牛奶取自西藏那曲地區(qū)的酸牦牛奶，關(guān)于這種酸牦牛奶的化學組成、微生物組成、微生物特性，請參見發(fā)明人在《International Journalof Food Sciences and Nutrition)), 2009,60 (S7) :243_250 禾口〈〈International Journalof Dairy Technology》，2010，63 (3) 437-444 中詳細說明。在無菌采樣管中裝有滅菌CaCO3粉的目的在于穩(wěn)定pH環(huán)境。本發(fā)明使用的無菌采樣管是目前市場上銷售的產(chǎn)品，例如友康基業(yè)生物科技(北京)有限公司生產(chǎn)的無菌采樣管。B、用滅菌吸管吸取0. 5-lmL所述酸牦牛奶樣品并接種于5_10mL石蕊脫脂乳培養(yǎng)基；并置于30 40°C恒溫箱中增菌培養(yǎng)至酸化凝固并呈現(xiàn)粉紅色。石蕊是一種pH指示劑，當pH升至8. 3堿性時顯藍色，pH降至4. 5酸性時顯紅色； PH接近中性，未接種的培養(yǎng)基為紫藍色。石蕊也是一種氧化還原指示劑，可以還原為白色， 所以，石蕊牛乳是用來測定被檢細菌幾種代謝性質(zhì)的一種鑒別培養(yǎng)基。石蕊脫脂乳培養(yǎng)基是把石蕊酒精飽和溶液加到新鮮脫脂乳中，再分裝成小管，然后使用蒸汽滅菌得到的。C、在步驟B)增菌培養(yǎng)后，用滅菌接種環(huán)挑取劃線接種于含有IOppm放線菌酮和IOppm硫酸粘菌素的BL瓊脂培養(yǎng)基中。將其放入?yún)捬跖囵B(yǎng)罐中，置于30 40°C條件下培養(yǎng)48 72小時，形成菌落后，用接種環(huán)挑取菌落，接種于MRS培養(yǎng)液中，再置于培養(yǎng)箱中在溫度30 40°C的條件下培養(yǎng)24 48小時。放線菌酮(Actidione)由產(chǎn)生放線菌酮的放線菌發(fā)酵液中提得的一種抗生素。它是無色晶體，熔點119 121°C，它易溶于甲醇、乙醇和丙酮中，微溶于水中，它耐酸，也耐熱。它在堿性條件下易分解。它對酵母菌、霉菌、原蟲等病原菌等有抑制作用，而對細菌無顯著抑制作用。硫酸粘桿菌素為白色或近白色粉末，易溶于水，微溶于甲醇、乙醇中，溶于丙酮、乙醚等溶劑中。在PH 3-7. 5范圍內(nèi)穩(wěn)定。硫酸粘桿菌素由多粘桿菌產(chǎn)生，對革蘭氏陰性菌有較強的抗菌作用。BL瓊脂培養(yǎng)基是本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的培養(yǎng)基，它是GB標準培養(yǎng)基，它含有肝浸粉、蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、可溶性淀粉、L-半胱氨酸、葡萄糖、 磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、大豆胨、硫酸鎂、硫酸亞鐵、氯化鈉、瓊脂、硫酸錳、吐溫80，pH值 7. 2 士 0. 1。MRS培養(yǎng)基是本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的培養(yǎng)基，它含有牛肉蛋白粉、魚肉汁、 酵母浸出汁粉、葡萄糖、醋酸鈉、檸檬酸二銨、吐溫80、硫酸鎂、硫酸錳，pH 6. 2 6. 4。D、待步驟C)菌株生長良好后，再次劃線接種于BL瓊脂培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)箱中在溫度30 40°C的條件下培養(yǎng)24 48小時，觀察記錄菌落形態(tài)和革蘭氏染色細胞形態(tài)特征，并進行過氧化氫酶試驗，分離出在所述試驗中呈陰性的桿菌，所述桿菌為乳桿菌。觀察菌落形態(tài)是邊緣整齊、表面光滑，中央扁平的白色菌落觀察革蘭氏染色細胞形態(tài)是經(jīng)革蘭氏染色后呈紫色，為革蘭氏陽性菌。過氧化氫酶試驗是挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加3%過氧化氫溶液2mL，觀察結(jié)果，有過氧化氫酶的細菌，能催化過氧化氫生成水和新生態(tài)氧，繼而形成分子氧出現(xiàn)氣泡。能夠發(fā)生氣泡者為陽性，不發(fā)生氣泡者為陰性。革蘭陽性球菌中，葡萄球菌和微球菌均產(chǎn)生過氧化氫酶，故此試驗常用于革蘭陽性球菌的初步分群，而鏈球菌屬為陰性。由菌落形態(tài)、革蘭氏染色細胞形態(tài)與過氧化氫酶試驗確定為乳酸菌。E、所述的乳桿菌接著在培養(yǎng)基MRS中在培養(yǎng)溫度37°C的條件下進行純化培養(yǎng)，然后在溫度-80°C至_85°C的條件下進行低溫冷凍保存，待用。根據(jù)本發(fā)明，純化培養(yǎng)應該理解是一種能夠分離出單一菌種的培養(yǎng)方法。F、取5mL脫脂乳在溫度121°C下滅菌7min，急冷至溫度40°C ；在得到的滅菌脫脂乳中，接種以其滅菌脫脂乳重量計11%在步驟E)得到的冷凍保存乳桿菌，在溫度37°C的條件下進行第1代活化；然后，把以其滅菌脫脂乳重量計2%第1代活化種子轉(zhuǎn)接到MRS培養(yǎng)基中，在溫度37°C的條件下培養(yǎng)18h進行第2代活化，使所述乳桿菌株活力得到充分恢復，然后使用日本榮研株式會社生產(chǎn)的BCP瓊脂培養(yǎng)基(溴甲酚紫固體培養(yǎng)基)進行計數(shù)，其計數(shù)方法參見Guo, Z.等 In vitro comparison of probiotic propertiesof Lactobacillus casei Zhang, a potential new probiotic, with selected probioticstrains[J]. LffT-Food Science and Technology, 2009,42(10) : 1640-1646。將菌液離心后使用含有以重量計胰蛋白胨和0. 谷氨酸鈉的PBS保護劑在4°C冰箱中保存，用于發(fā)酵乳的制備。BCP瓊脂培養(yǎng)基的成分是酵母膏25g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，溴甲酚紫0. 04g，瓊脂 15g溶于IOOOml水中，調(diào)pH至7. 0。用BCP瓊脂培養(yǎng)基分離乳酸細菌時，可根據(jù)菌落周圍培養(yǎng)基顏色的變化(由紫變黃)和菌落形態(tài)(乳酸細菌的菌落一般為針尖狀)分離、純化出乳酸細菌。G、將已計數(shù)的菌株以5X 106Cfu/mL接種量于11%脫脂乳中(95°C殺菌IOmin)， 37°C恒溫發(fā)酵至pH值4. 5時，將樣品迅速冷卻，并按照下面描述的方法對樣品進行酸度、 OD600值、游離氨基氮和ACE抑制活性的測定，從而篩選出具有抗高血壓潛能的乳桿菌，并進一步進行體內(nèi)降血壓效應研究。H、通過血壓測量方法和靶器官組織鏡下觀察分析方法，研究與評價瑞士乳桿菌H9 發(fā)酵乳對高血壓(SHR鼠)和正常血壓(WKY鼠)的影響。血壓測量方法是尾袖法，具體參見文獻K Tokunaga等Antihypertensiveeffect of peptides from royal jelly in spontaneously hypertensive rats[J]. Biological & Pharmaceutical Bulletin, 2004, 27 (2) :189_192.)。通過用瑞士乳桿菌 H9 發(fā)酵乳喂鼠觀察血壓變化，可以分析其發(fā)酵乳對鼠血壓的影響。靶器官組織鏡下觀察分析方法是蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining，簡稱HE染色法)，具體的操作可以參考文獻Kiernan JA(2008)Histological and Histochemical Methods Theory andPractice. 4th ed. Bloxham, UK :Scion。通過用瑞士乳桿菌H9發(fā)酵乳喂鼠觀察左心室和腎臟切片的病理變化，可以評價分析發(fā)酵乳對大鼠心肌纖維、血管、腎小球和腎小管單位組織病變的影響。兩種方法測定結(jié)果結(jié)合分析瑞士乳桿菌H9發(fā)酵乳對高血壓大鼠疾病嚴重程度的影響。I、將該菌株制成供試菌液，吸取1. OmL懸浮菌液加入到9. OmL pH值2. 5的人工胃液中，在溫度37°C下消化3h，在其過程中分別于lh、2h、3h取樣用日本榮研株式會社制備的 BCP瓊脂培養(yǎng)基測定活菌數(shù)，并計算菌株存活率。然后，吸取1. OmL消化3h后的pH值2. 5 的含菌人工胃液，加入到9. OmL的人工胰液中，繼續(xù)在溫度37°C下進行培養(yǎng)，分別于0h、4h、 8h取樣用日本榮研株式會社制備的BCP瓊脂培養(yǎng)基測定活菌數(shù)，并計算菌株存活率。人工胃液是根據(jù)《Journalof Dairy Science》，1999，82 (2) =243-248.制備的，其組成是 NaCl 0. 2%、胃蛋白酶(pepsin, sigma)0. 30%，pH 值 2. 5。人工胰液是根據(jù)《Journalof Dairy Science》，1999，82 (2) =243-248.制備的，其人工腸液制備方法將下述a液和b液以2 1混合即為人工腸液。a.胰腺液 胰蛋白酶(Trypsin，sigma) 0. 1 %，調(diào)整pH為8. 0后，過濾除菌備用。b.膽液Bile Salts (Difco) 1.8%,調(diào)整pH為8. 0，過濾除菌備用。
菌林存活率(％) = I^Vixl00O7o
IogcfluVoN1——菌株處理后活菌數(shù)；N0——菌株初始活菌數(shù)下面分別描述各種測定方法。
A、酸度測定方法準確稱量5. OOg發(fā)酵乳樣品，置于IOOmL三角瓶中，往其中加入40mL去CO2水，再加入0. 5mL 0.5% (重量)酚酞乙醇溶液，小心搖勻，用0. lmol/L氫氧化鈉標準水溶液滴定至微紅色在Imin內(nèi)不消失為止。消耗0. lmol/L氫氧化鈉標準水溶液毫升數(shù)除以樣品g 數(shù)，再乘以100，得到酸度(° T)。B、OD6tltl值測定方法取0. 5mL乳樣，往其中加入4. 5mL 0. 2% (重量)、pH 12冰冷EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)水溶液，振蕩混勻，然后使用日本島津公司以商品名UV-1700銷售的分光光度計， 以EDTA中加未接菌的乳樣為參照液，測定在600nm處的吸光度值，得到0D_值。C、游離氨基氮含量測定方法將50mL IOOmM硼砂水溶液、5mL 20% (重量)十二烷基硫酸鈉水溶液、80mg鄰苯二甲醛(溶于2!^甲醇中)和20(^1^ β-巰基乙醇混合，然后用去離子水定溶至IOOmL,得到一種反應試劑。然后，將50 μ L發(fā)酵乳樣品加到2mL所述反應試劑中，在室溫下進行反應兩分鐘，再用UV-1700(島津，日本)在340nm處檢測吸光度。用酪蛋白胰蛋白酶胨作為標準品按照常規(guī)方法繪制標準曲線，再根據(jù)檢測吸光度計算出游離氨基氮含量。D、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制活性測定a.將上述制備的發(fā)酵乳在8000g條件下進行離心lOmin，得到的上清液再用 IOmol/L NaOH水溶液將其pH調(diào)節(jié)至8. 3，再在8000g條件下進行離心lOmin，得到的上清液作為測定ACE抑制活性的待測樣品。b.將馬尿酰組氨酰亮氨酸(HHL)和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)溶于含0. 3mol/L NaCl的0. lmol/L硼酸鈉緩沖溶液(pH 8. 3)中。在1. 5mL離心管中加入50 μ L0. OlOmol/ L馬尿酰-組氨酰-亮氨酸(HHL)溶液和50 μ L上述上清液，充分震蕩混勻，然后在溫度 37°C下孵育2min，再加入50 μ L0. 010U/mLACE溶液，充分震蕩混勻，在溫度37°C下反應 30min，再在溫度85°C水浴中加熱lOmin，使酶失活并終止反應。采用反相高效液相色譜法 (RP-HPLC)測定在反應液中的馬尿酸(Hippruic acid, HA)含量。使用的色譜柱Z0RBAX C18(4. 6X250mm,5ym,Agilent,USA)；流動相由以體積計 22% 乙腈(含 0. 1% TFA(三氟乙酸))和78%去離子水(含0.1% TFA)；流速1.5mL/min ；檢測波長228nm ；柱溫30°C ； 進樣量:20uLoACE抑制率按照下述公式進行計算ACE 抑制率(％ ) = ([HA] C-[HA] s) / ([HA] c_[HA]h) X100%式中[HA] c為對照樣品馬尿酸濃度(加去離子水)；[HA] s為待測樣品馬尿酸濃度；[HA] h為HHL標準品中馬尿酸濃度。綜合考慮該菌株發(fā)酵乳的發(fā)酵時間、酸度、游離氨基氮含量和ACE抑制活性等指標篩選出具有抗高血壓潛能的乳桿菌，瑞士乳桿菌H9。通過血壓和靶器官組織鏡下觀察分析研究、評價了瑞士乳桿菌H9發(fā)酵乳對高血壓(SHR)和正常血壓(WKY鼠)的影響。研究表明，該菌株發(fā)酵乳具有較好的體內(nèi)降血壓效應，同時具有起效時間長、不影響血液循環(huán)， 對正常血壓大鼠(WKY)無不利影響等特點。

所述瑞士乳桿菌H9的生物學特性列于表1 表1 瑞士乳桿菌H9的生物學特性中。
權(quán)利要求
1.一種瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus)H9，該菌菌株已于2011年4月28日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心保藏，保藏號為CGMCC 4811。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瑞士乳桿菌H9在制備預防心血管疾病的藥物中的用途。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的心血管疾病是冠心病、高血壓、運動猝死、心絞痛、急性心肌梗死、冠心病或高血脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述的藥物是由所述的瑞士乳桿菌H9粉劑與在藥學上可接受的載體組成的。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于在藥學上可接受的載體是一種或多種選自在藥學上通常使用的填充齊 、粘合劑、潤濕劑、崩解齊 、吸收促進齊 、表面活性齊 、吸附載體、 潤滑劑或矯味劑的載體。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于所述藥物的劑型是片劑、丸劑、膠囊或微膠囊劑型。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的瑞士乳桿菌Η9在生產(chǎn)保健食品中的用途。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于所述的保健食品是含有權(quán)利要求1所述瑞士乳桿菌Η9的面包、點心或飲料。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種瑞士乳桿菌(Lactobacillus helveticus H9)及其在抗高血壓和預防心血管疾病中的應用，包括菌株分離、菌株鑒定、菌株保存、菌株培養(yǎng)、菌液制備、發(fā)酵乳制備、ACE抑制活性菌株篩選；進一步評價了Lactobacillus helveticus H9發(fā)酵乳對高血壓(SHR)和正常血壓(WKY鼠)的影響。研究表明，該菌株發(fā)酵乳具有較好的體內(nèi)降血壓效應，同時具有起效時間長、不影響血液循環(huán)，對正常血壓無不利影響等有益效果。
文檔編號C12R1/225GK102329762SQ20111033771
公開日2012年1月25日 申請日期2011年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月1日
發(fā)明者張和平, 陳永福 申請人:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學