專利名稱：一種釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基和釀酒酵母高密度發(fā)酵方法
技術領域：
本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵技術領域，具體涉及釀酒酵母發(fā)酵技術，尤其涉及一種釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，以及利用該培養(yǎng)基進行釀酒酵母高密度發(fā)酵的方法。
背景技術：
酵母是一類單細胞低等真核生物，它既具有類似原核生物易培養(yǎng)、繁殖快、便于遺傳操作等生長特性，又具有典型真核生物的分子和細胞生物學特性。釀酒酵母是人類利用最早的微生物，現已廣泛應用于食品、飼料、醫(yī)藥、釀造工業(yè)等領域，而且以釀酒酵母為宿主系統(tǒng)表達或構建文庫等基因工程技術得到了飛速的發(fā)展。在飼料行業(yè)，酵母菌既不干擾抗生素的作用，又可以增加飼料的穩(wěn)定性，其本身就具有十分豐富的營養(yǎng)價值。而且酵母菌作為消化劑，還可通過刺激消化效率，有利于動物的消化吸收，加速動物的生長發(fā)育及生產性能的發(fā)揮；同時增強了厭氧菌的生長繁殖，能提高動物的搞病防病能力，是配制畜、魚、蝦及珍貴毛皮動物飼料的理想蛋白質原料。用酵母菌部分替代魚粉及豆粕，可有效降低成本，使飼料廠和養(yǎng)殖戶獲得更佳經濟效益。因此，酵母菌作為益生菌在飼料中具有廣闊的應用前景。高細胞密度發(fā)酵就是要在單位時間、單位反應器體積內，在不影響胞內產物得率的基礎上，盡可能多的積累細胞量。高細胞密度發(fā)酵中的培養(yǎng)基應充分滿足微生物的營養(yǎng)要求，并為細胞的生長繁殖提供適宜的環(huán)境條件。鑒于酵母優(yōu)良特性及其廣泛使用，所以對酵母進行高密度發(fā)酵，尤其對釀酒酵母進行高密度發(fā)酵是十分有價值的。對高密度發(fā)酵技術來說，培養(yǎng)基的設計是發(fā)酵過程能否成功的關鍵因素之一。其中，培養(yǎng)基中碳氮比對微生物生長繁殖和產物的合成的影響極為顯著。酵母高密度發(fā)酵所使用的培養(yǎng)基需要適當的碳源和氮源的比例，碳氮比偏小會導致菌體生長旺盛，造成菌體提前衰老自溶；碳氮比過大，菌體繁殖數量少，造成細菌代謝不平衡，影響產物的積累。高密度發(fā)酵工藝的另一個重要改善方法是延長菌株對數生長期，國內外對酵母高密度發(fā)酵策略已有了較多的報道，幾乎所有高生物量的獲得都離不開補料的添加。在酵母發(fā)酵期間進行補料的合理添加，可以保證菌體的持續(xù)生長繁殖，延緩細胞衰老死亡速度，提高菌體密度，是酵母高密度發(fā)酵成功的關鍵。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種比現有技術更加能有效發(fā)酵釀酒酵母獲得高生物量的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種采用上述釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，并在釀酒酵母發(fā)酵期間合理添加補料，從而能比現有技術獲得更高生物量的釀酒酵母高密度發(fā)酵方法。一種釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基， 其配方包含蔗糖75. 80 77. 12 g/L、酵母浸膏33. 31 34. 25 g/L、酸水解干酪素15. 86 16.15 g/L、硫酸銨0.55 g/L、硫酸鎂1.03 g/L、磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸2.03 g/ L0一種釀酒酵母高密度發(fā)酵方法，該發(fā)酵方法包括如下步驟 步驟1.種子液體的制備
將保存的釀酒酵母甘油菌種劃線于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置觀 30°c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至長出單菌落；在上述單菌落中挑取飽滿的單菌落劃線接種于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置觀 30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1 2天，再取飽滿的菌種接入液體麥芽汁培養(yǎng)基中，28 30°C， 200 250 r/min搖瓶培養(yǎng)過夜，得到所需種子液。步驟2.
將步驟1制備所得種子液以8 10%的接種量接入釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中開始發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)采用觀 30°C，200 250 r/min搖瓶培養(yǎng)；自發(fā)酵培養(yǎng)1 開始補糖， 采用預先配制的濃度為150 g/mL的蔗糖溶液，每隔1 補糖一次，每次補入1. 30 1. 60 mL ；發(fā)酵培養(yǎng)60 72 h后終止發(fā)酵。上述步驟1中，種子液體培養(yǎng)是本領域技術人員的常用操作，其中用到的麥芽汁培養(yǎng)基平板和液體麥芽汁培養(yǎng)基也均為本領域技術人員在種子活化時的常用培養(yǎng)基，均采用標準配方配制。上述步驟1中，為了取得很好的種子活化效果，所以發(fā)明人對常規(guī)甘油-80°C保存的酵母菌種進行兩次平板活化，兩次平板活化后再進行液體麥芽汁培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)過夜，從而得到所需種子液；因為經過了兩次平板活化，所以能夠確保甘油的完全去除，菌種完全恢復，有利于后期實驗。上述步驟2中，8 10%的接種量是指種子液的體積占釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基體積的8 10%。上述步驟2中，釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方包含蔗糖 75. 80 77. 12 g/L、酵母浸膏33. 31 34. 25 g/L、酸水解干酪素15. 86 16. 15 g/L、硫酸銨0.55 g/L、硫酸鎂1.03 g/L、磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸2.03 g/L。上述發(fā)酵結束后，檢測釀酒酵母的生物量干重達50 g/L以上，說明該發(fā)酵方法可有效獲得高生物量的釀酒酵母。與現有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果
1.本發(fā)明的重點是對后期發(fā)酵培養(yǎng)基配方及其相應工藝進行了研究改進，發(fā)酵時所用的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基配方的組分及其用量是本發(fā)明人通過大量實驗方案設計和數據分析后優(yōu)選而得的，培養(yǎng)基中碳氮比得搭配對釀酒酵母的生長繁殖和產物合成非常有利；
2.本發(fā)明的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)方法，采用分批補料策略，分批補料的參數優(yōu)化搭配發(fā)酵培養(yǎng)基的配方優(yōu)化，從而保證了高密度、高產率和高濃度培養(yǎng)釀酒酵母的實現；
3.本發(fā)明的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)方法，其發(fā)酵所得釀酒酵母的菌體濃度在50g/ L以上，明顯優(yōu)于現有發(fā)酵工藝，并且本發(fā)明的發(fā)酵方法在實現高密度、高產率和高濃度培養(yǎng)的同時，也相應地縮小生物反應器的容積，減少了廢水處理設備和費用，并且無需濃縮， 降低了生物量的分離費用，將會給飼料酵母工業(yè)帶來了巨大的經濟效益和環(huán)境效益。


圖1為實施例1中釀酒酵母GIM2. 126菌體在進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)時的生長曲線其中，1為發(fā)酵過程中有補糖操作時的釀酒酵母GIM2. 126菌體生長曲線，2為對比試驗 (未補糖)中釀酒酵母GIM2. 126菌體生長曲線，3為本發(fā)明人在進行實施例1補糖最佳時間研究時所測定的未補糖時發(fā)酵培養(yǎng)基中的殘?zhí)乔闆r；
圖2為實施例2中釀酒酵母GIM2. 113菌體在進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)時的生長曲線圖； 其中，1為發(fā)酵過程中有補糖操作時的釀酒酵母GIM2. 113菌體生長曲線，2為對比試驗 (未補糖)中釀酒酵母GIM2. 113菌體生長曲線，3為本發(fā)明人在進行實施例2補糖最佳時間研究時所測定的未補糖時發(fā)酵培養(yǎng)基中的殘?zhí)乔闆r；
圖3為實施例3中釀酒酵母GIM2. 44菌體在進行高密度發(fā)酵培養(yǎng)時的生長曲線圖； 其中，1為發(fā)酵過程中有補糖操作時的釀酒酵母GIM2. 44菌體生長曲線，2為對比試驗 (未補糖)中釀酒酵母GIM2. 44菌體生長曲線，3為本發(fā)明人在進行實施例2補糖最佳時間研究時所測定的未補糖時發(fā)酵培養(yǎng)基中的殘?zhí)乔闆r。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步地描述，但具體實施例并不對本發(fā)明做任何限定。實施例1釀酒酵母GIM2. 126的高密度發(fā)酵
本實施例的釀酒酵母購于廣州菌種保藏中心，其菌種編號為GIM2. 126。在對上述釀酒酵母進行高密度發(fā)酵前，本發(fā)明人先對該釀酒酵母進行了一些基礎研究
1.針對釀酒酵母GIM2.126，為了獲得高生物量，本發(fā)明人對其生長曲線進行了研究， 研究發(fā)現4 16 h為該釀酒酵母的對數生長期的前期和中期，因此本發(fā)明人確定在發(fā)酵培養(yǎng)1 后對其進行補糖；
2.在考察碳氮源的添加量及配比對GIM2.1 生物量的影響的基礎上，得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的較佳配比，并以最終的細胞生物量為響應值按中心組合原理設計響應面分析試驗，進一步優(yōu)化得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的最佳配比，最終確定本實施例釀酒酵母GIM2. 126的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方包含蔗糖75. 80 8/1、酵母浸膏33.31 g/L、酸水解干酪素15. 86 g/L、硫酸銨0.55 g/L、硫酸鎂1.03 g/L、磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸2.03 g/L。對釀酒酵母GIM2. 126進行高密度發(fā)酵，該發(fā)酵方法包括如下步驟 步驟1.種子液體的制備
將保存的釀酒酵母GIM2. 126甘油菌種劃線于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天，直至長出單菌落；再挑取飽滿的單菌落劃線接種于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天后再將菌種接入IOmL液體麥芽汁培養(yǎng)基中，28°C，250 r/min搖瓶培養(yǎng)過夜，得到所需種子液。步驟2.
在無菌操作室中，在火焰的保護下將步驟1制備所得種子液以10%的接種量接入釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)采用^°C，250 r/min搖瓶培養(yǎng)；
自發(fā)酵培養(yǎng)16h開始補糖，采用預先配制的濃度為150 g/mL的蔗糖溶液，每隔1 補糖一次，每次補入1. 30mL，使蔗糖濃度維持在初始濃度的70 80 % ；
發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 126的生物量干重，結果顯示釀酒酵母 GIM2. 126的生物量干重達50 g/L以上，如圖1所示。本實施例還做了對比實驗，該對比試驗也是采用步驟1所得種子液進行步驟2的操作，但是在步驟2中不進行補糖操作，發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 126 的生物量干重，結果如圖1所示。從圖1可以看出，發(fā)酵培養(yǎng)16 h后開始第一次補糖，補糖之后釀酒酵母GIM2. 126 的生長速率逐漸增加并超過對比實驗(未補糖)中釀酒酵母的生長速率；在48小時進行第三次補加蔗糖后，釀酒酵母細胞仍保持較高的生長速度；60 h后，生物量達到了 52. 36 g/L, 相比與對比試驗(對比實驗中釀酒酵母GIM2. 126的生物量干重為38. 08g/L)，其生物量提高了 37. 5%ο實施例2釀酒酵母GIM2. 113的高密度發(fā)酵
本實施例的釀酒酵母購于廣州菌種保藏中心，其菌種編號為GIM2. 113。在對上述釀酒酵母進行高密度發(fā)酵前，本發(fā)明人先對該釀酒酵母進行了一些基礎研究
1.針對釀酒酵母GIM2.113，為了獲得高生物量，本發(fā)明人對其生長曲線進行了研究， 研究發(fā)現4 16 h為該釀酒酵母的對數生長期的前期和中期，因此本發(fā)明人確定在發(fā)酵培養(yǎng)1 后對其進行補糖；
2.在考察碳氮源的添加量及配比對GIM2.113生物量的影響的基礎上，得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的較佳配比，并以最終的細胞生物量為響應值按中心組合原理設計響應面分析試驗，進一步優(yōu)化得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的最佳配比，最終確定本實施例釀酒酵母GIM2. 113的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方包含蔗糖76. 54 g/L、酵母浸膏33. 78 g/L、酸水解干酪素16. 05 g/L、硫酸銨0.55 g/L、硫酸鎂1.03 g/L、磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸2.03 g/L。對釀酒酵母GIM2. 113進行高密度發(fā)酵，該發(fā)酵方法包括如下步驟 步驟1.種子液體的制備
將保存的釀酒酵母GIM2. 113甘油菌種劃線于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置30°C培養(yǎng)基中培養(yǎng)1天，直至長出單菌落；再挑取飽滿的單菌落劃線接種于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置 30°C培養(yǎng)基中培養(yǎng)1天后再將菌種接入15mL液體麥芽汁培養(yǎng)基中，30°C，250 r/min搖瓶培養(yǎng)過夜，得到所需種子液。步驟2.
在無菌操作室中，在火焰的保護下將步驟1制備所得種子液以10%的接種量接入釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中開始發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)采用30°C，250 r/min搖瓶培養(yǎng)；
自發(fā)酵培養(yǎng)16h開始補糖，補糖采用預先配制的濃度為150 g/mL的蔗糖溶液，每隔1 補糖一次，每次補入1. 50mL，使蔗糖濃度維持在初始濃度的70 80 % ；
發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 113的生物量干重，結果顯示釀酒酵母 GIM2. 113的生物量干重達50 g/L以上，如圖2所示。本實施例還做了對比實驗，該對比試驗也是采用步驟1所得種子液進行步驟2的操作，但是在步驟2中不進行補糖操作，發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 113 的生物量干重，結果如圖2所示。從圖2可以看出，發(fā)酵培養(yǎng)16 h后開始第一次補糖，補糖之后釀酒酵母GIM2. 113 的生長速率逐漸增加并超過對比實驗(未補糖)中釀酒酵母的生長速率；在48小時進行第三次補加蔗糖后，釀酒酵母細胞仍保持較高的生長速度；60 h后，生物量達到了 52. 14 g/L, 相比與對比試驗(對比實驗中釀酒酵母GIM2. 113的生物量干重為37. 98g/L)，其生物量提高了 37. 28%ο實施例3 釀酒酵母GIM2. 44的高密度發(fā)酵
本實施例的釀酒酵母購于廣州菌種保藏中心，其菌種編號為GIM2. 44。在對上述釀酒酵母進行高密度發(fā)酵前，本發(fā)明人先對該釀酒酵母進行了一些基礎研究
1.針對釀酒酵母GIM2.44，為了獲得高生物量，本發(fā)明人對其生長曲線進行了研究，研究發(fā)現4 16 h為該釀酒酵母的對數生長期的前期和中期，因此本發(fā)明人確定在發(fā)酵培養(yǎng) 16h后對其進行補糖；
2.在考察碳氮源的添加量及配比對GIM2.44生物量的影響的基礎上，得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的較佳配比，并以最終的細胞生物量為響應值按中心組合原理設計響應面分析試驗，進一步優(yōu)化得到蔗糖、酵母浸膏和酸水解干酪素的最佳配比，最終確定本實施例釀酒酵母GIM2. 44的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方包含蔗糖77. 12 g/L、酵母浸膏34. 25 g/L、酸水解干酪素16. 15 g/L、硫酸銨0.55 g/L、硫酸鎂1.03 g/L、磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸2.03 g/L。對釀酒酵母GIM2. 44進行高密度發(fā)酵，該發(fā)酵方法包括如下步驟 步驟1.種子液體的制備
將保存的釀酒酵母GIM2. 44甘油菌種劃線于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置30°C培養(yǎng)基中培養(yǎng)1天，直至長出單菌落；再挑取飽滿的單菌落劃線接種于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置 30°C培養(yǎng)基中培養(yǎng)1天后再將菌種接入15mL液體麥芽汁培養(yǎng)基中，30°C，200 r/min搖瓶培養(yǎng)過夜，得到所需種子液。步驟2.
在無菌操作室中，在火焰的保護下將步驟1制備所得種子液以10%的接種量接入釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中開始發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)采用30°C，200 r/min搖瓶培養(yǎng)；
自發(fā)酵培養(yǎng)16h開始補糖，補糖采用預先配制的濃度為150 g/mL的蔗糖溶液，每隔1 補糖一次，每次補入1. 50mL，使蔗糖濃度維持在初始濃度的70 80 % ；
發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 44的生物量干重，結果顯示釀酒酵母 GIM2. 44的生物量干重達50 g/L以上，如圖3所示。本實施例還做了對比實驗，該對比試驗也是采用步驟1所得種子液進行步驟2的操作，但是在步驟2中不進行補糖操作，發(fā)酵培養(yǎng)60 h終止發(fā)酵，檢測釀酒酵母GIM2. 44的生物量干重，結果如圖3所示。從圖3可以看出，發(fā)酵培養(yǎng)16 h后開始第一次補糖，補糖之后釀酒酵母GIM2. 44 的生長速率逐漸增加并超過對比實驗(未補糖)中釀酒酵母的生長速率；在48小時進行第三次補加蔗糖后，釀酒酵母細胞仍保持較高的生長速度；60 h后，生物量達到了 51. 49 g/L， 相比與對比試驗(對比實驗中釀酒酵母GIM2. 44的生物量干重為38. 12g/L)，其生物量提高了 ；35%。實施例4本發(fā)明發(fā)酵方法與現有發(fā)酵方法的對比
本實施例是取實施例3中步驟1所得種子液，采用現有發(fā)酵工藝對該種子液進行發(fā)酵培養(yǎng)，接種量為10%，發(fā)酵培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基也是現有發(fā)酵工藝常用的液體發(fā)酵培養(yǎng)基，其配方為包含葡萄糖4%、蛋白胨洲和酵母1%，所述百分比為質量百分比，發(fā)酵培養(yǎng)條件為 30°C,150r/min搖瓶培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)過程中不進行補料，發(fā)酵培養(yǎng)時間為60 h停止發(fā)酵，測定釀酒酵母GIM2. 44的生物量干重，結果為23. 0 g/L。對比實施例3和實施例4可以看出，實施例3獲得了釀酒酵母GIM2. 44的高生物量，實現了高密度、高產率和高濃度培養(yǎng)，由此說明本發(fā)明的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵過程中的補料操作搭配，確實能夠比現有技術獲得更高生物量。
權利要求
1.一種釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方包含蔗糖75. 80 77. 12 g/L，酵母浸膏33. 31 34. 25 g/L，酸水解干酪素 15. 86 16. 15 g/L，硫酸銨0. 55 g/L，硫酸鎂1.03 g/L，磷酸二氫鉀2.62 g/L和甘氨酸 2. 03 g/L ο
2.一種采用權利要求1所述釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的釀酒酵母高密度發(fā)酵方法， 其特征在于該發(fā)酵方法包括如下步驟步驟1.種子液體的制備將保存的釀酒酵母甘油菌種劃線于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，放置觀 30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至長出單菌落；在上述單菌落中挑取飽滿的單菌落劃線接種于麥芽汁培養(yǎng)基平板上，于觀 30°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1 2天，再挑取飽滿的菌種接入液體麥芽汁培養(yǎng)基中，觀 30°C，200 250 r/min搖瓶培養(yǎng)過夜，得到種子液；步驟2.將步驟1制備所得種子液以8 10%的接種量接入權利要求1所述釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中開始發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)采用觀 30°C，200 250 r/min搖瓶培養(yǎng)；自發(fā)酵培養(yǎng)16h開始補糖，補糖采用預先配制的濃度為150 g/mL的蔗糖溶液，每隔1 補糖一次，每次補入1. 30 1. 60 mL ；發(fā)酵培養(yǎng)60 72 h后終止發(fā)酵。
3.根據權利要求2所述一種釀酒酵母高密度發(fā)酵方法，其特征在于所述釀酒酵母甘油菌種是釀酒酵母GIM2. 126甘油菌種、釀酒酵母GIM2. 113甘油菌種或釀酒酵母GIM2. 44 甘油菌種，所述釀酒酵母GIM2. 1 甘油菌種、釀酒酵母GIM2. 113甘油菌種或釀酒酵母 GIM2. 44甘油菌種，均來自廣州菌種保藏中心。
全文摘要
本發(fā)明公開一種釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基和釀酒酵母高密度發(fā)酵方法，該釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基的配方包含蔗糖75.80～77.12g/L，酵母浸膏33.31～34.25g/L，酸水解干酪素15.86～16.15g/L，硫酸銨0.55g/L，硫酸鎂1.03g/L，磷酸二氫鉀2.62g/L和甘氨酸2.03g/L。本發(fā)明的釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基中碳氮比的搭配對釀酒酵母的生長繁殖和產物合成非常有利，采用該培養(yǎng)基并結合分批補料策略，發(fā)酵所得釀酒酵母的菌體濃度在50g/L以上，明顯優(yōu)于現有發(fā)酵工藝，實現了高密度、高產率和高濃度培養(yǎng)，同時也相應地縮小生物反應器的容積，減少了廢水處理設備和費用，無需濃縮，降低了生物量的分離費用，將會給飼料酵母工業(yè)帶來了巨大的經濟效益和環(huán)境效益。
文檔編號C12N1/18GK102311927SQ20111023937
公開日2012年1月11日 申請日期2011年8月19日 優(yōu)先權日2011年8月19日
發(fā)明者余以剛, 劉冬梅, 吳暉, 唐語謙, 李慶全, 李曉鳳, 汪芳, 袁琨 申請人:華南理工大學