專利名稱：從魚(yú)皮中提取魚(yú)膠原蛋白的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚(yú)膠原蛋白的制備方法。
背景技術(shù)：
目前，從魚(yú)皮中提取膠原蛋白的研究很多，一般工藝都包括原料的處理、酶解、過(guò)濾、濃縮和噴霧干燥等步驟。但多數(shù)在提取和純化過(guò)程中會(huì)使用到有機(jī)或無(wú)機(jī)溶劑，對(duì)產(chǎn)品中可能超標(biāo)的砷等重金屬也沒(méi)有進(jìn)行處理，因此不能滿足人們的需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從魚(yú)皮中提取魚(yú)膠原蛋白的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。本發(fā)明的方法，包括如下步驟(1)膠原蛋白的提取將魚(yú)皮在20 50°C下，加入蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間為 0. 5 1小時(shí)，然后升溫到110 120°C滅酶2 8min，得到膠原蛋白粗提取液；所述蛋白酶為來(lái)源于枯草芽孢桿菌的中性蛋白酶和來(lái)源于菠蘿的菠蘿蛋白酶的混合物，中性蛋白酶可采用南寧龐博生物工程有限公司生產(chǎn)的牌號(hào)為中性蛋白酶的酶，菠蘿蛋白酶采用南寧龐博生物工程有限公司牌號(hào)為菠蘿蛋白酶的酶，重量比為中性蛋白酶菠蘿蛋白酶=3 6 8 ；所述酶的加入總重量，為魚(yú)皮重量的0. 3% 0. 7% ；優(yōu)選的，所述為深海魚(yú)的魚(yú)皮，包括真鱈、狹鱈或黑線鱈中的一種以上；(2)脫色將所述步驟(1)得到的膠原蛋白粗提取液降溫至60 70°C，加入凈魚(yú)皮重量 3%的活性炭攪拌20 50min，進(jìn)行脫色脫腥，過(guò)濾得到膠原蛋白清液；(3)除重金屬將步驟⑷得到的膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂，利用除砷樹(shù)脂對(duì)砷等重金屬和膠原蛋白結(jié)合力大小的差異及兩種物質(zhì)在層析介質(zhì)中的遷移速度的不同進(jìn)行分離，然后用純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱，收集洗脫液；所述除砷樹(shù)脂為非離子交換樹(shù)脂，原理是利用粒狀含水氧化鈰作為吸附劑，可采用日本海水株式會(huì)社牌號(hào)為READ-As的產(chǎn)品。膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂時(shí)的線速度6 Sml/min，膠原蛋白清液與除砷樹(shù)脂的比例為:1500 2500膠原蛋白清液/克除砷樹(shù)脂；純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱時(shí)，純化水的線速度6 Sml/min ；純化水與除砷樹(shù)脂的比例為1 3克純化水/克除砷樹(shù)脂；(4)成品將步驟(3)的洗脫液，蒸發(fā)濃縮至原體積的25-30%，在140_150°C下噴霧干燥，得到分子量為2000 3000道爾頓的魚(yú)皮膠原蛋白。其中分子量是采用JY/T024-1996，QB/T2879-2007的方法，進(jìn)行檢測(cè)的。優(yōu)選的，本發(fā)明的方法，還包括如下步驟原料處理將深海魚(yú)皮放入水中浸泡3 5小時(shí)，進(jìn)行洗滌，然后用電導(dǎo)率為3 4. 3us/cm的純化水進(jìn)行清洗5-9小時(shí)，以除去魚(yú)皮中的鹽分，所述純化水的用量為魚(yú)皮重量的5 10倍，然后將漂洗干凈的魚(yú)皮進(jìn)行絞碎，獲得清洗干凈絞碎的魚(yú)皮；優(yōu)選的還包括殺菌步驟，所述殺菌步驟任如下將絞碎后的魚(yú)皮按料水比 1 0. 3 0. 9的重量比加入純化水，加熱到95 100°C，保溫10 30min，得到殺菌后的魚(yú)皮；本發(fā)明的有益效果是生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，而且產(chǎn)品質(zhì)量好、純正無(wú)污染，不僅操作簡(jiǎn)便，而且所獲得的膠原蛋白產(chǎn)品不存在有毒有害試劑的殘留問(wèn)題，可以很好的除去深海魚(yú)中的重金屬，有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，有很高的安全性。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1將真鱈魚(yú)的魚(yú)皮放入水中浸泡5小時(shí)，進(jìn)行洗滌，然后用電導(dǎo)率為4. 3us/cm的純化水進(jìn)行清洗9小時(shí)，所述純化水的用量為魚(yú)皮重量的10倍，然后將漂洗干凈的魚(yú)皮進(jìn)行絞碎，獲得清洗干凈絞碎的魚(yú)皮；將絞碎后的魚(yú)皮按料水比1 0.9的重量比加入純化水，加熱到100°C，保溫 30min，得到殺菌后的魚(yú)皮；將上述的魚(yú)皮在50°C下，加入蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間為0. 5小時(shí)，然后升溫到 120°C滅酶2min，得到膠原蛋白粗提取液；所述蛋白酶為來(lái)源于枯草芽孢桿菌的中性蛋白酶和來(lái)源于菠蘿的菠蘿蛋白酶的混合物，中性蛋白酶采用南寧龐博生物工程有限公司生產(chǎn)的牌號(hào)為中性蛋白酶的酶，菠蘿蛋白酶采用南寧龐博生物工程有限公司牌號(hào)為菠蘿蛋白酶的酶，重量比為中性蛋白酶 菠蘿蛋白酶=3 6所述酶的加入總重量，為魚(yú)皮重量的0. 7% ；脫色將得到的膠原蛋白粗提取液降溫至70°C，加入凈魚(yú)皮重量3%的活性炭攪拌50min，進(jìn)行脫色脫腥，過(guò)濾得到膠原蛋白清液；除重金屬將得到的膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂，然后用純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱，收集洗脫液；所述除砷樹(shù)脂采用日本海水株式會(huì)社牌號(hào)READ-As為的產(chǎn)品；膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂時(shí)的線速度為6ml/min，膠原蛋白清液與除砷樹(shù)脂的比例為1500ml克膠原蛋白清液/克除砷樹(shù)脂；純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱時(shí)，純化水的線速度為6ml/min ；純化水與除砷樹(shù)脂的比例為2克純化水/克除砷樹(shù)脂；將洗脫液蒸發(fā)濃縮至原體積的25%，在140°C下噴霧干燥，得到平均分子量為 2000道爾頓的魚(yú)皮膠原蛋白。采用JY/T024-1996，QB/T2879-2007標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下
權(quán)利要求
1.從魚(yú)皮中提取魚(yú)膠原蛋白的方法，其特征在于，包括如下步驟(1)膠原蛋白的提取將魚(yú)皮加入蛋白酶進(jìn)行酶解，然后滅酶，得到膠原蛋白粗提取液；(2)脫色在所述步驟(1)得到的膠原蛋白粗提取液中，加入凈活性炭攪拌進(jìn)行脫色脫腥，過(guò)濾得到膠原蛋白清液；(3)除重金屬將步驟⑷得到的膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂，然后用純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱，收集洗脫液；(4)成品將步驟(3)的洗脫液，蒸發(fā)濃縮，噴霧干燥，得到分子量為2000 3000道爾頓的魚(yú)皮膠原蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，將魚(yú)皮在20 50°C下，加入蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間為0. 5 1小時(shí)，然后升溫到110 120°C滅酶2 8min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶為來(lái)源于枯草芽孢桿菌的中性蛋白酶和來(lái)源于菠蘿的菠蘿蛋白酶的混合物，重量比為中性蛋白酶菠蘿蛋白酶= 3 6 8 ；所述酶的加入總重量，為魚(yú)皮重量的0.3% 0.7%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂時(shí)的線速度 6 Sml/min，膠原蛋白清液與除砷樹(shù)脂的比例為1500 2500膠原蛋白清液/克除砷樹(shù)脂；純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱時(shí)，純化水的線速度6 Sml/min ；純化水與除砷樹(shù)脂的比例為1 3克純化水/克除砷樹(shù)脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述為深海魚(yú)的魚(yú)皮，包括真鱈、狹鱈或黑線鱈中的一種以上。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，還包括如下步驟原料處理將深海魚(yú)皮放入水中浸泡3 5小時(shí)，進(jìn)行洗滌，然后用電導(dǎo)率為3 4. 3us/cm的純化水進(jìn)行清洗5-9小時(shí)，以除去魚(yú)皮中的鹽分，所述純化水的用量為魚(yú)皮重量的5 10倍，然后將漂洗干凈的魚(yú)皮進(jìn)行絞碎，獲得清洗干凈絞碎的魚(yú)皮。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，還包括如下步驟將絞碎后的魚(yú)皮按料水比1 0. 3 0. 9的重量比加入純化水，加熱到95 100°C，保溫10 30min，得到殺菌后的魚(yú)皮。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從魚(yú)皮中提取魚(yú)膠原蛋白的方法，包括如下步驟(1)膠原蛋白的提取將魚(yú)皮加入蛋白酶進(jìn)行酶解，然后滅酶，得到膠原蛋白粗提取液；(2)脫色在所述步驟(1)得到的膠原蛋白粗提取液中，加入凈活性炭攪拌進(jìn)行脫色脫腥，過(guò)濾得到膠原蛋白清液；(3)除重金屬將步驟(4)得到的膠原蛋白清液流過(guò)除砷樹(shù)脂，然后用純化水沖除砷樹(shù)脂交換柱，收集洗脫液；(4)成品將步驟(3)的洗脫液，蒸發(fā)濃縮，噴霧干燥，得到分子量為2000～3000道爾頓的魚(yú)皮膠原蛋白。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)品質(zhì)量好，所獲得的膠原蛋白產(chǎn)品不存在有毒有害試劑的殘留問(wèn)題，可以很好的除去深海魚(yú)中的重金屬，有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，有很高的安全性。
文檔編號(hào)C12P21/02GK102242172SQ20101017044
公開(kāi)日2011年11月16日 申請(qǐng)日期2010年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月10日
發(fā)明者鄭元生 申請(qǐng)人:上海海健堂生物科技有限公司