專利名稱：一種混合型食用菌提取液保鮮牛肝菌的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種混合型食用菌提取液保鮮牛肝菌的方法，屬食品保藏技術領域。
背景技術：
牛肝菌類是云南野生菌市場上重要的種類之一，約占總貿(mào)易量的30%。以美味牛 肝菌、遠東疣柄牛肝菌、磚紅絨蓋牛肝菌等最為常見。美味牛肝菌也是國際著名的食用菌， 在歐洲國家深受歡迎，是出口創(chuàng)匯的重要種類之一。美味牛肝菌(Boletus edulis Ball, ex Fr)屬于擔子菌亞門(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、傘菌目(Agaricases) 牛肝菌科(Boletaceae)中的一種。美味牛肝菌不僅具有一定的營養(yǎng)價值，而且具有較高的 藥用價值，是世界范圍內(nèi)分布的食藥兼用經(jīng)濟價值較高的真菌之一。干子實體中粗蛋白占 17. 89 %、粗脂肪占8. 41 %，粗纖維占9. 37 %、胞內(nèi)多糖占7. 84 %、灰分9. 06 %、碳水化合物 占47. 43%。因野生的牛肝菌生長于自然環(huán)境，未受到農(nóng)藥、化肥等的污染，是天然無公害 的“綠色食品”。但牛肝菌等食用菌含水量高，組織非常細嫩，常溫下采后l-2d，菇體內(nèi)的水 分就會大量蒸發(fā)散失，菌蓋及菌褶開始破膜、開傘、失水、萎縮、褐變甚至腐爛，商品價值下 降甚至喪失。一旦因采后造成積壓導致品質(zhì)下降從而達不到出口和加工要求，給產(chǎn)地農(nóng)民 和食品加工出口企業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。因此，解決好鮮菇的采后保鮮問題，延長其運 輸和貯藏期限，是野生食用菌產(chǎn)業(yè)化發(fā)展迫在眉睫的大事。通過添加保鮮劑，來延長食品的 保質(zhì)期是有效的方法。食品生產(chǎn)企業(yè)中使用的保鮮劑主要分為化學合成保鮮劑和天然保鮮 劑。目前食品工業(yè)中常用的保鮮劑以化學合成保鮮劑居多，但是化學合成保鮮劑的副作用 也給食品防腐保鮮提出了難題，同時隨著社會的發(fā)展各國法律都已經(jīng)開始限制使用某些化 學保鮮劑。在化學保鮮劑越來越受到質(zhì)疑的同時，人們正試圖尋找化學防腐劑的替代品。同 時天然防腐劑具有抗菌性強、安全無毒、水溶性好、熱穩(wěn)定性好、作用范圍廣、無副作用等化 學合成保鮮劑無法比擬的優(yōu)點。因此，近年來，天然保鮮劑的研究和開發(fā)利用成了食品工業(yè) 的一個熱點。迄今，尚未有以食用菌提取液保鮮牛肝菌的相關報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服了現(xiàn)有技術的不足，提供了一種牛肝菌的保鮮制劑，具有抗 菌性強、安全無毒、水溶性好、熱穩(wěn)定性好、作用范圍廣、無副作用等優(yōu)點。本發(fā)明采用的真菌是棘托竹蓀Dictyophora echinovolvata D_07# ；保藏單位中 國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院中國 科學院微生物研究所；保藏日期2009年12月03日；保藏登記入冊的編號CGMCC N0. 3465?；⒄凭訉嶓w由市場上購買得到。本發(fā)明實施的技術方案如下1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取1-4份虎掌菌子實體于提取罐 中，加入25-100份蒸餾水，分別加入0. 01-0. 04份木瓜蛋白酶、0. 01-0. 04份纖維素酶，通入 蒸汽加熱至40-501，保溫0.5-1.511，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 40-1 80，升溫至65-75°C，保溫加熱0. 5-1. 5h(滅酶)，倒出混合物，自然降溫。4000r min—1離心lOmin, 取上清液濃縮至原體積的1/3-1/5，即得虎掌菌子實體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為-5%葡萄糖；0. -0.5%蛋白胨；0.02% -0. 磷酸二 氫鉀；0. 02% -0. 硫酸鎂；余下為水，pH值自然。(1)將D-07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基， 于18-26°C下培養(yǎng)6-12d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為5% -7%，于21-25°C靜置培養(yǎng)24-48h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為 5% -7%，置 100r mirT1 旋轉(zhuǎn)式搖床 21-25°C培養(yǎng) 4_10d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為 100-120r/min ；接種量為 5% -10% ；罐壓0. 04Mpa ；起始 pH 為 4. 5 ； 溫度為22-26°C ；通氣培養(yǎng)96-144h，獲得的菌絲體于55_65°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將1-4份菌絲體干粉，用 適量水浸泡，加熱升溫至40-50°C，調(diào)pH值至4. 0-5. 0,加入0. 01-0. 04份纖維素酶，酶 促反應30-90min，再加入0. 01-0. 04份木瓜蛋白酶，酶促反應30_90min后，再補水至 1 40-1 80，升溫至 65-75°C滅酶并保溫浸提 0. 5-1.5h，降溫至 45-55°C，4000r .?。?！土！!-1 離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3-1/5，即得棘托竹蓀菌絲體酶提液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為5% -95% 95% -5%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮牛肝菌，進行去 除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，l-3min后取出，晾干，即可進行常溫或 冷藏保鮮。本發(fā)明的有益效果是在常溫通風環(huán)境中能保鮮7-8d，其失重率低于10 %，無褐 變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1-4°C)中則能保鮮20-30d。該保鮮劑能有效抑制常見食 品腐敗菌，因而對牛肝菌有明顯的保鮮效果。
具體實施例方式實施例一美味牛肝菌的保鮮1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取1份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入25份蒸餾水，分別加入0. 01份木瓜蛋白酶、0. 01份纖維素酶，通入蒸汽加熱至40°C， 保溫0.5h，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 40，升溫至65°C，保溫加熱0.5h(滅酶)，倒 出混合物，自然降溫。4000r min-1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3，即得虎掌菌 子實體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為葡萄糖；0. 蛋白胨；0. 02%磷酸二氫鉀；0. 02%硫酸鎂； 余下為水，PH自然。(1)將D_07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基，于18°C下培養(yǎng)12d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150mi)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為5%，于21°C靜置培養(yǎng)48h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為5%，置 100r mirT1旋轉(zhuǎn)式搖床21°C培養(yǎng)10d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為100r/min ；接種量為5% ；罐壓0. 04Mpa ；起始pH為4. 5 ；溫度為 22°C ；通氣培養(yǎng)144h，獲得的菌絲體于55°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將1份菌絲體干粉，用適量水 浸泡，加熱升溫至40°C，調(diào)pH值至4. 0，加入0. 01份纖維素酶，酶促反應90min，再加入0. 01 份木瓜蛋白酶，酶促反應90min后，再補水至1 40，升溫至65°C滅酶并保溫浸提0. 5h，降 溫至45°C，4000r mirT1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3，即得棘托竹蓀菌絲體酶 提液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為5% -95%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮美味牛肝菌，進 行去除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，lmin后取出，晾干，即可進行常溫 或冷藏保鮮。經(jīng)處理后的美味牛肝菌從保鮮液中取出，在常溫通風環(huán)境中可保鮮4d，其失重率 低于10%，無褐變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1_4°C )中則能保鮮約15d。實施例二 遠東疣柄牛肝菌的保鮮1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取4份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入100份蒸餾水，分別加入0. 04份木瓜蛋白酶、0. 04份纖維素酶，通入蒸汽加熱至50°C， 保溫1.5h，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 80，升溫至75°C，保溫加熱1.5h(滅酶)，倒 出混合物，自然降溫。4000r min-1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/5，即得虎掌菌 子實體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為5%葡萄糖；0. 5%蛋白胨；0. 磷酸二氫鉀；0. 硫酸鎂；余 下為水，pH自然。(1)將D_07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基， 于26°C下培養(yǎng)6d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為7%，于25°C靜置培養(yǎng)24h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為7%，置 100r min—1旋轉(zhuǎn)式搖床25°C培養(yǎng)4d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min ；接種量為10% ；罐壓0. 04Mpa ；起始pH為4. 5 ；溫度為 26°C ；通氣培養(yǎng)96h，獲得的菌絲體于65°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將4份菌絲體干粉，用適量水浸泡，加熱升溫至50°C，調(diào)pH值至5. 0，加入0. 04份纖維素酶，酶促反應90min，再加入0. 04 份木瓜蛋白酶，酶促反應90min后，再補水至1 80，升溫至75°C滅酶并保溫浸提1.5h，降 溫至55°C，4000r min_1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/5，即得棘托竹蓀菌絲體酶提液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為95% -5%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮遠東疣柄牛肝 菌，進行去除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，3min后取出，晾干，即可進行 常溫或冷藏保鮮。經(jīng)處理后的遠東疣柄牛肝菌從保鮮液中取出，在常溫通風環(huán)境中可保鮮5d，其失 重率低于10%，無褐變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1_4°C )中則能保鮮約20d。實施例三磚紅絨蓋牛肝菌的保鮮1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取3份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入75份蒸餾水，分別加入0. 03份木瓜蛋白酶、0. 03份纖維素酶，通入蒸汽加熱至45°C， 保溫lh，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 60，升溫至70°C，保溫加熱lh (滅酶)，倒出混 合物，自然降溫。4000r mirT1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/4，即得虎掌菌子實 體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為3%葡萄糖；0. 3%蛋白胨；0. 06%磷酸二氫鉀；0. 06%硫酸鎂； 余下為水，PH自然。(1)將D_07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基， 于24°C下培養(yǎng)8d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為6%，于23°C靜置培養(yǎng)36h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為6%，置 100r mirT1旋轉(zhuǎn)式搖床23°C培養(yǎng)6d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為110r/min ；接種量為8% ；罐壓0. 04Mpa ；起始pH為4. 5 ；溫度為 24V ；通氣培養(yǎng)72h，獲得的菌絲體于60°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將3份菌絲體干粉，用適量水 浸泡，加熱升溫至45°C，調(diào)pH值至5. 0，加入0. 03份纖維素酶，酶促反應60min，再加入0. 03 份木瓜蛋白酶，酶促反應60min后，再補水至1 60，升溫至65°C滅酶并保溫浸提lh，降溫 至50°C，4000r mirT1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/4，即得棘托竹蓀菌絲體酶提 液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為75% -25%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮磚紅絨蓋牛肝 菌，進行去除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，3min后取出，晾干，即可進行 常溫或冷藏保鮮。
經(jīng)處理后的磚紅絨蓋牛肝菌從保鮮液中取出，在常溫通風環(huán)境中可保鮮8d，其失 重率低于10%，無褐變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1_4°C )中則能保鮮約25d。實施例四美味牛肝菌的保鮮1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取4份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入100份蒸餾水，分別加入0. 04份木瓜蛋白酶、0. 04份纖維素酶，通入蒸汽加熱至50°C， 保溫1.5h，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 80，升溫至75°C，保溫加熱1.5h(滅酶)，倒 出混合物，自然降溫。4000r mirT1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/5，即得虎掌菌 子實體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為5%葡萄糖；0. 5%蛋白胨；0. 磷酸二氫鉀；0. 硫酸鎂；余 下為水，pH自然。(1)將D_07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基， 于26°C下培養(yǎng)6d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為7%，于25°C靜置培養(yǎng)24h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為7%，置 100r min—1旋轉(zhuǎn)式搖床25°C培養(yǎng)4d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min ；接種量為10% ；罐壓0. 04Mpa ；起始pH為4. 5 ；溫度為 26°C ；通氣培養(yǎng)96h，獲得的菌絲體于65°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將4份菌絲體干粉，用適量水 浸泡，加熱升溫至50°C，調(diào)pH值至5. 0，加入0. 04份纖維素酶，酶促反應90min，再加入0. 04 份木瓜蛋白酶，酶促反應90min后，再補水至1 80，升溫至75°C滅酶并保溫浸提1.5h，降 溫至55°C，4000r mirT1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3，即得棘托竹蓀菌絲體酶 提液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為95% -5%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮美味牛肝菌，進 行去除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，3min后取出，晾干，即可進行常溫 或冷藏保鮮。經(jīng)處理后的美味牛肝菌從保鮮液中取出，在常溫通風環(huán)境中可保鮮6d，其失重率 低于10%，無褐變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1-4°C )中則能保鮮20d。實施例五磚紅絨蓋牛肝菌的保鮮1、虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取4份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入100份蒸餾水，分別加入0. 04份木瓜蛋白酶、0. 04份纖維素酶，通入蒸汽加熱至50°C， 保溫1.5h，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 80，升溫至75°C，保溫加熱1.5h(滅酶)，倒 出混合物，自然降溫。4000r min-1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/5，即得虎掌菌 子實體酶提液。2、棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)
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液體培養(yǎng)基配方為5%葡萄糖；0. 5%蛋白胨；0. 磷酸二氫鉀；0. 硫酸鎂；余 下為水，pH自然。(1)將D_07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基， 于26°C下培養(yǎng)6d，獲得試管種。(2)將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為 前述液體培養(yǎng)基配方，接種量為7%，于25°C靜置培養(yǎng)24h ；(3) 二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為7%，置 100r min—1旋轉(zhuǎn)式搖床25°C培養(yǎng)4d ；(4)將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0. 8v/ (v min)；攪拌轉(zhuǎn)速為120r/min ；接種量為10% ；罐壓0. 04Mpa ；起始pH為4. 5 ；溫度為 26°C ；通氣培養(yǎng)96h，獲得的菌絲體于65°C烘箱中烘干后粉碎備用。3、棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將4份菌絲體干粉，用適量水 浸泡，加熱升溫至50°C，調(diào)pH值至5. 0，加入0. 04份纖維素酶，酶促反應90min，再加入0. 04 份木瓜蛋白酶，酶促反應90min后，再補水至1 80，升溫至75°C滅酶并保溫浸提1.5h，降 溫至55°C，4000r min_1離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3，即得棘托竹蓀菌絲體酶 提液。4、將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按 重量計其混合比例范圍為95% -5%。5、保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮磚紅絨蓋牛肝 菌，進行去除根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，3min后取出，晾干，即可進行 常溫或冷藏保鮮。經(jīng)處理后的磚紅絨蓋牛肝菌從保鮮液中取出，在常溫通風環(huán)境中可保鮮6d，其失 重率低于10%，無褐變，無不良氣味；如在冷藏環(huán)境(1_4°C )中則能保鮮20d。
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權利要求
一種真菌-棘托竹蓀，其特征是該真菌(Dictyophora echinovolvata)D-07#；保藏日期2009年12月03日；保藏登記入冊的編號CGMCC NO.3465。
2.一種混合型食用菌提取液保鮮牛肝菌的方法，其操作步驟如下(1)虎掌菌子實體有效成分的提取按重量計稱取1-4份虎掌菌子實體于提取罐中， 加入25-100份蒸餾水，分別加入0. 01-0. 04份木瓜蛋白酶、0. 01-0. 04份纖維素酶，通入蒸 汽加熱至40-50°C，保溫0. 5-1.5h，然后加入蒸餾水，使料液比達到1 40_1 80，升溫至 65-75°C，保溫加熱0. 5-1. 5h(滅酶)，倒出混合物，自然降溫；4000r · min—1離心lOmin，取 上清液濃縮至原體積的1/3-1/5，即得虎掌菌子實體酶提液；(2)棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)培養(yǎng)方法(以下為重量百分比)液體培養(yǎng)基配方為葡萄糖；0. 1% -0. 5%蛋白胨；0. 02% -0. 磷酸二氫鉀； 0. 02% -0. 硫酸鎂；余下為水，pH值自然；①將D-07#的菌絲體接種到試管瓊脂培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)基配方為PDA培養(yǎng)基，于 18-26°C下培養(yǎng)6-12d，獲得試管種；②將試管種接種到250ml三角瓶(每瓶裝150ml)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基配方為前述液 體培養(yǎng)基配方，接種量為5% -7%，于21-25°C靜置培養(yǎng)24-48h ；③二級液體菌種培養(yǎng)選用500mL三角瓶，裝液體培養(yǎng)基300mL，接種量為5% -7 %，置 IOOr · rnirT1 旋轉(zhuǎn)式搖床 21-25°C培養(yǎng) 4-10d ；④將二級液體菌種接種到25L自動發(fā)酵生產(chǎn)線的發(fā)酵罐中，通氣量為1 0.8v/ (ν .min)；攪拌轉(zhuǎn)速為 100-120r/min ；接種量為 5% -10% ；罐壓0. 04Mpa ；起始 pH 為 4. 5 ； 溫度為22-26°C ；通氣培養(yǎng)96-144h，獲得的菌絲體于55_65°C烘箱中烘干后粉碎備用；(3)棘托竹蓀菌絲體有效成分的提取按重量計稱取將1-4份菌絲體干粉，用適 量水浸泡，加熱升溫至40-50 °C，調(diào)pH值至4. 0-5. 0，加入0. 01-0. 04份纖維素酶，酶 促反應30-90min，再加入0. 01-0. 04份木瓜蛋白酶，酶促反應30_90min后，再補水至 1 40-1 80，升溫至 65-75°C滅酶并保溫浸提 0.5-1. 5h，降溫至 45-55°C，4000r .mirT1 離心lOmin，取上清液濃縮至原體積的1/3-1/5，即得棘托竹蓀菌絲體酶提液；(4)將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按重 量計其混合比例范圍為5% -95% 95% -5% ；(5)保鮮劑使用方法挑選大小較為均勻，無損傷，色澤純正的新鮮牛肝菌，進行去除 根部泥土雜質(zhì)等處理后，浸入配制好的保鮮劑中，l-3min后取出，晾干，即可進行常溫或冷 藏保鮮。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種混合型食用菌提取液保鮮牛肝菌的方法，屬食品保藏技術領域。本發(fā)明的操作步驟如下(1)虎掌菌子實體有效成分的提取；(2)棘托竹蓀菌絲體的培養(yǎng)；(3)棘托竹蓀菌絲體有效成分的提??；(4)將虎掌菌子實體酶提液與棘托竹蓀菌絲體酶提液混合構(gòu)成牛肝菌保鮮制劑，按重量計其混合比例范圍為5％-95％∶95％-5％；(5)保鮮劑使用方法。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，保鮮效果穩(wěn)定，無異味，無殘留?？蓮V泛用于生產(chǎn)實踐中牛肝菌的保鮮處理。
文檔編號A23L3/3571GK101851585SQ20101012692
公開日2010年10月6日 申請日期2010年3月18日 優(yōu)先權日2010年3月18日
發(fā)明者呂德平, 吳素蕊, 朱立, 楊威, 羅曉莉, 郭永紅, 陳龍, 高觀世 申請人:中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所;云南省供銷合作社科學研究所;云南菌苑科技有限公司;云南省菌類開發(fā)公司