專利名稱：一種用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)的新型滾芯式轉(zhuǎn)瓶裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種用于提高動(dòng)物細(xì)胞貼壁培養(yǎng)產(chǎn)率的新型轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)裝置。
背景技術(shù)：
轉(zhuǎn)瓶(roller bottle)培養(yǎng)技術(shù)(也稱“滾瓶技術(shù)”)，是指采用滾動(dòng)的圓柱形培養(yǎng)瓶系統(tǒng)來培養(yǎng)貼壁依賴性動(dòng)物細(xì)胞。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)可以利用瓶子的幾乎全部內(nèi)壁表面進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。盡管在任一時(shí)間僅有15-20％的內(nèi)表面積被培養(yǎng)液覆蓋，瓶子的轉(zhuǎn)動(dòng)使細(xì)胞與培養(yǎng)液、空氣交替接觸。這種方式降低了所需培養(yǎng)基的體積，并且利用瓶內(nèi)較大的頂部空間維持足夠的氧氣需要。由于轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)技術(shù)是一種多過程系統(tǒng)，因此存在勞動(dòng)強(qiáng)度大，單位體積提供細(xì)胞生長的表面積小，按體積計(jì)算細(xì)胞產(chǎn)量低，人力資源與材料使用效率不高，監(jiān)測和控制環(huán)境條件受到限制等缺點(diǎn)。但是，由于其結(jié)構(gòu)簡單、投資少，技術(shù)成熟，重現(xiàn)性好，放大只是簡單地增加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等特點(diǎn)，因此轉(zhuǎn)瓶系統(tǒng)目前仍是生產(chǎn)廠商在規(guī)模生產(chǎn)中仍廣為采用的技術(shù)方法。為充分提高轉(zhuǎn)瓶系統(tǒng)的生產(chǎn)效率，國內(nèi)外針對(duì)增加轉(zhuǎn)瓶的內(nèi)表面積都曾進(jìn)行了一些研究。目前已經(jīng)報(bào)道的美國專利有US4962033，US5101013，US5527705；中國專利有CN2106834u和CN2040101u。已經(jīng)研發(fā)出的技術(shù)方案主要有以下幾種(1)螺旋轉(zhuǎn)瓶(SpiraCel)；Bibby Sterilin公司使用的Spiracel轉(zhuǎn)瓶是一種螺旋聚苯乙烯轉(zhuǎn)瓶，使用時(shí)細(xì)胞在螺旋中的均勻分步非常重要，否則會(huì)造成生長非常不平衡，產(chǎn)量也會(huì)很低。由于鏡檢時(shí)只能看到螺旋外部的細(xì)胞，如果細(xì)胞分布不均勻有可能造成假象。(2)玻璃管Bellco-Corbeil培養(yǎng)系統(tǒng)；這是在轉(zhuǎn)瓶內(nèi)裝填有由硅氧烷分隔環(huán)分離的平行小玻璃管組成。通過儲(chǔ)液瓶向交替進(jìn)行正反向360度旋轉(zhuǎn)的培養(yǎng)瓶中灌注培養(yǎng)液。(3)BibbySterilin(Corning)公司的ESRB轉(zhuǎn)瓶或Ashby Scientific和Integra Biosciences的ImmobaSil轉(zhuǎn)瓶。這是采用了表面有起伏的轉(zhuǎn)瓶，以求能夠在相同直徑下增大培養(yǎng)的表面積。上述這些產(chǎn)品必須采用專門的制作工藝生產(chǎn)，不僅制作成本高，而且如果生產(chǎn)中需要重復(fù)使用，則必須進(jìn)行煩瑣的清洗和消毒工序。此外，對(duì)于已經(jīng)采用傳統(tǒng)轉(zhuǎn)瓶(roller bottle)的生產(chǎn)廠家來說，如果要更換成上述這些轉(zhuǎn)瓶，就意味著原有的大量瓶子要全部淘汰，這無疑是巨大的浪費(fèi)。
本實(shí)用新型所采用的技術(shù)方案是為了有效的增加轉(zhuǎn)瓶(roller bottle)的貼壁表面積，在現(xiàn)有的培養(yǎng)瓶中增加一個(gè)壁上有孔、內(nèi)裝有固相載體的滾芯。滾芯內(nèi)的載體由玻璃微球或合成材料構(gòu)成，當(dāng)滾芯被放置在轉(zhuǎn)瓶內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，隨著轉(zhuǎn)瓶的轉(zhuǎn)動(dòng)，滾芯在瓶內(nèi)也進(jìn)行滾動(dòng)。被培養(yǎng)的細(xì)胞不僅能夠在轉(zhuǎn)瓶的瓶壁上生長，同時(shí)也可以借助于滾芯內(nèi)部的載體表面進(jìn)行生長。轉(zhuǎn)瓶與滾芯構(gòu)成了一套新型的滾芯式轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)裝置。本實(shí)用新型能夠在不改變?cè)谢九囵B(yǎng)設(shè)備和工藝的條件下，為細(xì)胞提供更大的貼壁面積。由于本實(shí)用新型轉(zhuǎn)瓶裝置的滾芯制作簡單，使用容易，成本低廉，可以重復(fù)使用。采用本裝置改進(jìn)后，不僅不會(huì)造成原有培養(yǎng)瓶的大量廢棄，對(duì)原來的生產(chǎn)工藝也不需要做大的調(diào)整，就可以有效的增加貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)產(chǎn)率。


以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步說明。
圖1為新型轉(zhuǎn)瓶裝置的原理示意圖圖2為滾芯的結(jié)構(gòu)示意圖實(shí)施步驟在圖1中，本實(shí)用新型轉(zhuǎn)瓶裝置主要是由傳統(tǒng)的培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶(roller bottle)(1)和滾芯(2)構(gòu)成。
在圖2所示實(shí)施例中，滾芯(2)是由端頭羅帽(3)、管體(4)和固相載體(5)組成。在滾芯(2)的管體(4)外壁上布滿0.1-5毫米不規(guī)則小孔，滾芯兩端d的端頭羅帽(3)的最大外徑應(yīng)大于管體(4)的外徑，使?jié)L芯(2)在轉(zhuǎn)瓶(1)內(nèi)滾動(dòng)時(shí)僅有端頭區(qū)域接觸轉(zhuǎn)瓶(1)內(nèi)壁。管體的中部有孔部分不會(huì)接觸瓶壁。滾芯(2)的總長度要略小于轉(zhuǎn)瓶(1)的直壁部分的長度，兩端端頭最大部分的直徑應(yīng)小于轉(zhuǎn)瓶(1)瓶口直徑，使?jié)L芯(2)能夠順利的從瓶口放入轉(zhuǎn)瓶(1)內(nèi)或取出。使用時(shí)，在滾芯(2)內(nèi)裝入大于壁孔的固相載體，固相載體的材料是(但不限于是)玻璃、陶瓷、纖維素、殼聚糖、葡聚糖、明膠或各種高分子聚合材料。經(jīng)過預(yù)處理和消毒后，將滾芯自轉(zhuǎn)瓶瓶口放入轉(zhuǎn)瓶中，當(dāng)轉(zhuǎn)瓶滾動(dòng)時(shí)，滾芯也會(huì)在瓶內(nèi)隨著一起滾動(dòng)。加入培養(yǎng)液和細(xì)胞種，置轉(zhuǎn)瓶機(jī)上進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，被培養(yǎng)的細(xì)胞能夠同時(shí)利用轉(zhuǎn)瓶的內(nèi)壁和滾芯內(nèi)的固相載體進(jìn)行貼壁生長。
權(quán)利要求1，一種用于提高動(dòng)物細(xì)胞貼壁培養(yǎng)產(chǎn)率的新型滾芯式轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)裝置，其特征是由轉(zhuǎn)瓶(1)和裝有固相載體的滾芯(2)構(gòu)成，滾芯中的固相載體表面和轉(zhuǎn)瓶內(nèi)壁能夠同時(shí)為細(xì)胞培養(yǎng)提供貼壁表面積。
2，一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于滾芯(2)是由端頭羅帽(3)、管體(4)、固相載體(5)組成。
3，一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于在滾芯(2)的管體(4)外壁上布滿0.1-5毫米直徑的小孔，滾芯兩端的端頭羅帽(3)最大外徑大于管體(4)的外徑，滾芯(2)的總長度小于轉(zhuǎn)瓶(1)的直壁壁長，兩端端頭最大部分的直徑小于轉(zhuǎn)瓶(1)瓶口直徑。
4，一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于在滾芯(2)內(nèi)裝入的固相載體材料是直徑大于管體(4)壁孔的顆粒狀玻璃或其他高分子聚合材料。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種用于提高動(dòng)物細(xì)胞貼壁培養(yǎng)產(chǎn)率的新型轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)裝置。在培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶中增加一個(gè)壁上有孔、內(nèi)裝有固相載體的滾芯。滾芯內(nèi)的固相載體由玻璃、陶瓷、纖維素或合成材料構(gòu)成，當(dāng)滾芯被放置在轉(zhuǎn)瓶內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，隨著轉(zhuǎn)瓶的轉(zhuǎn)動(dòng)，滾芯在瓶內(nèi)也進(jìn)行滾動(dòng)。被培養(yǎng)的細(xì)胞不僅能夠在轉(zhuǎn)瓶的瓶壁上生長，而且可以借助于滾芯內(nèi)部的載體表面進(jìn)行生長，能夠給傳統(tǒng)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞提供了更大的貼壁面積。
文檔編號(hào)C12M3/00GK2801788SQ2005200832
公開日2006年8月2日 申請(qǐng)日期2005年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月18日
發(fā)明者韓毅鵬, 張瀟文 申請(qǐng)人:韓毅鵬, 張瀟文