專利名稱：生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝。
背景技術(shù)：
水解酶PNGase F為N-糖苷酶F(Peptide-N4-(N-acetyl-β-D-glucosaminyl)asparigiene amidase；EC 3.5.1.52)，由314個(gè)氨基酸組成，分子量為34779Da。能夠從糖肽和糖蛋白表面完整地切下N-糖苷，其作用位點(diǎn)是N-乙酰葡萄糖胺殘基和天冬酰胺之間的價(jià)鍵結(jié)構(gòu)。本發(fā)明所用PNGase F是將來(lái)源于腦膜炎農(nóng)桿菌(Flavobacterium meningoseptium)的N-糖苷酶F基因重組到S.cerevisiae細(xì)胞表面進(jìn)行表達(dá)的，酶活測(cè)定結(jié)果為20U/L發(fā)酵液(1個(gè)酶活單位定義為每分鐘能夠完全水解1μmol核糖核酸酶B)。
研究證明，唾液酸寡糖在細(xì)胞識(shí)別、病毒感染和中和毒素等生命活動(dòng)中起著非常重要的作用，其糖鏈末端的唾液酸殘基是多種病原體和毒素侵染細(xì)胞的識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)，如流感病毒和造成幼兒腹瀉的輪狀病毒；同時(shí)，對(duì)肝廓清機(jī)制的研究表明，能夠清除血液中異源復(fù)合物的肝凝集素，是去唾液酸糖蛋白受體(ASGR)，它能夠識(shí)別去掉唾液酸的半乳糖殘基，因此帶有唾液酸寡糖的重組蛋白藥物可明顯提高藥物在血液中的穩(wěn)定性和半衰期；日本科學(xué)家飼喂小鼠的實(shí)驗(yàn)證明，日糧中添加一定比例的蛋黃唾液酸寡糖，可明顯提高幼鼠的智力(Yamamoto，T.，et al，Oyotosbitsu Kagaku 9，15-18)。因此，寡糖，尤其是唾液酸寡糖在醫(yī)藥、食品等行業(yè)中有很大的應(yīng)用開發(fā)潛力。目前，在人乳、牛乳、雞蛋等材料中，已成功的分離出游離的唾液酸寡糖成分，并進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析鑒定和其生物學(xué)活性的試驗(yàn)，唾液酸寡糖化學(xué)合成的研究也是糖合成研究的熱點(diǎn)之一，肼解法也成功的從雞蛋蛋黃中分離出蛋黃唾液酸寡糖(Koketsu，M.，et al，Journal of Food Science 58，743-747)，但由于受材料和成本的限制，以上所得到的唾液酸寡糖只是用于分析鑒定，日本TaiyoKagaku公司里用蛋白酶水解法制備帶有唾液酸寡糖的糖肽產(chǎn)品(SunsialTM)已廣泛地應(yīng)用于各類功能食品(Koketsu，M.，et al，1995c，Journal ofAgricultural and Food Chemistry 43，858-861)，利用酸水解法從蛋黃中制備唾液酸的工藝已投入了應(yīng)用(European Patent，Publication number0474410A2)，我國(guó)江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室利用酸水解法在蛋黃中制備高唾液酸含量的水解清液(仇海英等，食品科技，2003，No228-33)。但截止于目前為止，還未見利用雞蛋蛋黃或生產(chǎn)蛋黃抗體的廢液進(jìn)行規(guī)模制備唾液酸寡糖的報(bào)道。
雞蛋使人們公認(rèn)的具有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的食品，作為生命起源的基礎(chǔ)，雞蛋中貯有大量的各類功能化合物，從雞蛋中提取制備的蛋黃抗體(IgY)、軟磷脂等產(chǎn)品目前已廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化妝品等行業(yè)。近年來(lái)的研究證明，雞蛋蛋黃中的唾液酸含量可高達(dá)0.2％，而且還含有2.8μmol/eggyolk(8.0mg/egg yolk，蛋黃干重為9.6克)的帶有N-糖苷的游離糖肽，雞蛋蛋黃是一個(gè)具有高含量N-糖苷的物質(zhì)庫(kù)。同時(shí)，在蛋黃抗體的制備中，其生產(chǎn)廢液中還存有大量的糖蛋白，游離糖肽沒有損失，而且蛋白未被變性處理，利于進(jìn)行后續(xù)的酶解操作，將此廢液作為蛋黃寡糖提取制備的原料，原料成本極為低廉，急需一種適于進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化操作的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝，該制備方法是以新鮮雞為蛋黃原料，價(jià)格適中，而且寡糖資源無(wú)任何損失，產(chǎn)品收率高，容易產(chǎn)業(yè)化。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是提供一種生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝，其工藝流程包括以下步驟篩選蛋黃原料、脫脂、蛋白酶水解變性處理、離心后取上清液、N-糖苷酶F水解、離心后取上清液、超濾、脫鹽、離子交換、減壓干燥、蛋黃寡糖產(chǎn)品、產(chǎn)品檢測(cè)、包裝、成品。
所述蛋黃原料包括有A)新鮮雞蛋中的蛋黃；B)商品化的蛋黃粉；C)蛋黃抗體生產(chǎn)的下腳料廢液。
所述脫脂為低溫離心脫脂法，其條件為溫度-10℃-4℃，轉(zhuǎn)速為3000-6000rpm，時(shí)間為1-3hr。
所述蛋白酶水解中的蛋白酶為木瓜蛋白酶，最適酶解溫度為50-70℃，最適pH值為7.0，酶解作用時(shí)間2-24hr。
所述N-糖苷酶F水解工藝，是利用在釀酒酵母表面表達(dá)的N-糖苷酶，直接加入水解液進(jìn)行酶解或利用固定化細(xì)胞的方法水解液過(guò)柱進(jìn)行酶解擇一，酶解條件溫度為25-42℃，時(shí)間2-48hr。
所述超濾為截留分子量為10000的膜過(guò)濾。
所述酶解最佳條件為30-37℃，20-36hr。
所述超濾為采用截留分子量為10000的膜過(guò)濾，操作壓力為0.4Mpa，操作溫度為40-55℃。
所述超濾的最佳溫度條件為45-50℃。
所述脫鹽為通過(guò)葡聚糖凝膠G25的脫鹽柱或納濾進(jìn)行脫鹽，脫鹽后電導(dǎo)率低于200μs/cm。
本發(fā)明的效果是利用在釀酒酵母表面高效表達(dá)的N-糖苷酶F，通過(guò)酶法水解雞蛋蛋黃中糖蛋白和糖肽，提取制備蛋黃N-寡糖，尤其是提取制備N-唾液酸寡糖的技術(shù)工藝，它可利用低廉的生物材料，大量提取制備某些具有重要生物學(xué)功能和應(yīng)用價(jià)值的寡糖，與合成法相比，本方法的寡糖制造成本大大降低，有利于產(chǎn)業(yè)化操作。采用不同的蛋黃原料進(jìn)行蛋黃寡糖的制備，并取得了較高純度的蛋黃N-寡糖的混合物，本制備方法特別是以新鮮雞為蛋黃原料，價(jià)格適中，而且寡糖資源無(wú)任何損失，產(chǎn)品收率高。


圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式
結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝加以說(shuō)明。
本發(fā)明的蛋黃寡糖主要是存在于雞蛋蛋黃中糖蛋白和糖肽所攜帶的N-寡糖，所提取的酸性寡糖的主要結(jié)構(gòu)為N連接雙天線唾液酸寡糖鏈，其結(jié)構(gòu)為 如圖1所示，本發(fā)明工藝技術(shù)流程為以下步驟篩選蛋黃原料A.新鮮雞蛋中的蛋黃；B.商品化的蛋黃粉；C.蛋黃抗體生產(chǎn)的下腳料廢液。
脫脂所述的脫脂工藝包括有有機(jī)溶劑脫脂法(適于蛋黃粉)和低溫離心脫脂法(適于液體原料)，從環(huán)保和操作安全考慮，本發(fā)明推薦使用后者。低溫離心脫脂的條件為-10℃-4℃，3000rpm，1hr。
蛋白酶水解所用蛋白酶為木瓜蛋白酶，最適酶解溫度為50-70℃，最適pH為7.0，酶解作用時(shí)間2-24hr。
變性處理變性處理是指加熱至90℃，時(shí)間20min處理，使蛋白酶滅活，并增加N-糖苷酶F的酶解效率。
離心后取上清液N-糖苷酶F水解所指N-糖苷酶F水解工藝，是利用在釀酒酵母表面表達(dá)的PNGase，直接加入水解液進(jìn)行酶解，或利用固定化細(xì)胞的方法，水解液過(guò)柱進(jìn)行酶解。酶解條件為25-42℃，2-48hr。最佳條件為30-37℃，20-36hr。
離心后取上清液超濾(分子量截留為10kD)所述的超濾工藝為截留分子量為10000的膜過(guò)濾，操作壓力為0.4Mpa，操作溫度為40-55℃，最佳溫度條件為45-50℃。
脫鹽所述的脫鹽工藝為通過(guò)葡聚糖凝膠G25的脫鹽柱或納濾進(jìn)行脫鹽，脫鹽后電導(dǎo)率低于200μs/cm，其中，納濾在脫鹽的同時(shí)還起到了濃縮的作用，可減低后續(xù)工藝的負(fù)擔(dān)。
離子交換減壓干燥后得到蛋黃寡糖產(chǎn)品經(jīng)產(chǎn)品檢測(cè)所述產(chǎn)品檢測(cè)方法是指純度和含量測(cè)定，可用薄層層析法(TLC)或高效薄層層析法(HPTLC)進(jìn)行純度檢測(cè)，酸性寡糖可通過(guò)間苯二酚法測(cè)定的唾液酸含量來(lái)確定酸性寡糖的含量，蛋黃寡糖總含量的測(cè)定可利用酸水解后測(cè)定還原糖的含量來(lái)確定。
最后包裝、成品。
本發(fā)明是一種適于進(jìn)行規(guī)?；僮鞯模蒙锩阜ㄌ崛≈苽潆u蛋蛋黃寡糖的工藝流程。
具體實(shí)施例
實(shí)施例1利用蛋黃粉制備蛋黃寡糖1.1蛋黃粉的脫脂1.1.1丙酮萃取取蛋黃粉2000克(購(gòu)自大連生化制藥公司)，加入10升丙酮，加熱至回流(57-58℃)，回流2小時(shí)后，停止加熱，靜止30分鐘，棄去上清液(橙黃色)，重復(fù)上述操作2次。
1.1.2甲醇萃取丙酮萃取結(jié)束后，用相同體積的甲醇按上述方法萃取三次。
1.1.3脫脂蛋黃粉(DEY，dilapidated egg yolk)的制備萃取結(jié)束后，45℃干燥過(guò)夜，將干燥產(chǎn)品稱重結(jié)果為813克，將DEY至于干燥處室溫放置備用。
1.2蛋白酶處理DEY將制備的800克DEY溶于8000ml 0.01mol/l的磷酸鈉緩沖液(pH7.0)，并加入32克木瓜蛋白酶(Fisher Scientific Ltd.)，在攪拌狀態(tài)下65℃酶解反應(yīng)4小時(shí)后，90℃減壓濃縮至2000ml。
濃縮后的酶水解液離心處理(3000g，30分鐘，室溫)，上清液用0.22μm濾膜過(guò)濾，收集體積為1220ml，放置已滅菌的2000ml三角瓶中備用。
1.3 N-糖苷酶F酶解1.3.1 N-糖苷酶F的制備培養(yǎng)細(xì)胞表面表達(dá)N-糖苷酶F的釀酒酵母細(xì)胞(Saccharomyces cereviae，此重組酵母菌種為本課題組構(gòu)建)2000ml，誘導(dǎo)表達(dá)后，離心收集濕菌體26克，備用。
1.3.2酶解條件在上述收集的1220ml水解液中加入乙酸鈉1.09克，SDS 1.2克，用濃乙酸調(diào)pH至5.5。在旋轉(zhuǎn)震蕩條件下(80rpm)，37℃，酶解24小時(shí)。
1.3.3酶解液后處理酶解結(jié)束后，水解液離心處理，其工藝條件為溫度4℃，轉(zhuǎn)速6000rpm，時(shí)間10min，收集上清液約1250ml備用。
1.4寡糖分離1.4.1超濾處理用攪拌杯式超濾器，選用截留分子量為10000的濾膜，氮?dú)饧訅哼^(guò)濾，濾層用去離子水洗滌4次，30ml/次。收集濾過(guò)液，共1300ml，70℃減壓濃縮至200ml，4℃放置備用。
1.4.2納濾濃縮、除鹽在納濾過(guò)程中，由DS-11型電導(dǎo)儀檢測(cè)透過(guò)液的電導(dǎo)率，并不斷用去離子水進(jìn)行洗滌，直至電導(dǎo)率降至180μs/cm，收集納濾后的濃縮液，共50ml，4℃放置備用。
1.4.3離子交換柱分離寡糖選用東洋曹達(dá)DEAE-Toyopearl 650M陰離子交換樹脂，5mM Tris-HCl緩沖液pH值8.0平衡交換柱，用NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫為0-0.1M，流速30ml/min，10ml/收集管，HPTLC檢測(cè)，最后收集第10-18管，檢測(cè)陽(yáng)性，合并，按1.4.2所述方法，再次進(jìn)行納濾脫鹽，直至透過(guò)液電導(dǎo)率恒定至150μs/cm，共收集得到50ml脫鹽濃縮液。
1.4.4減壓、冷凍干燥用RE 52A型上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，先將50ml脫鹽濃縮液在60℃條件下，減壓濃縮至20ml體積，再利用冷凍干燥去出剩余水分，共得到2.1克干品。
實(shí)施例2利用新鮮雞蛋制備蛋黃寡糖2.1脫脂蛋黃的制備取100個(gè)新鮮雞蛋，破碎后取蛋黃，得到1.6升蛋黃液，將此蛋黃液冰浴冷凍至4℃，加入5倍體積的等離子水，溫度為4℃，劇烈攪拌1小時(shí)(整個(gè)操作過(guò)程中，溶液溫度在-10℃-4℃之間)，離心處理的工藝條件為溫度4℃，轉(zhuǎn)速4000rpm，時(shí)間1hr后，收集上清液，共9.2升，即為脫脂蛋黃溶液。在此過(guò)程中溫度掌握在-10℃-4℃之間，均能達(dá)到上述同樣的結(jié)果。
2.2蛋白酶酶解在制備蛋黃溶液中，并加入30克木瓜蛋白酶(Fisher Scientific Ltd.)，在攪拌狀態(tài)下65℃酶解反應(yīng)4小時(shí)后，90℃減壓濃縮至2000ml。
濃縮后的酶水解液離心處理(8000g，30分鐘，4℃)，上清液用0.22μm濾膜過(guò)濾，收集體積為1850ml，放置已滅菌的2000ml三角瓶中備用。
2.3 N-糖苷酶F酶解2.3.1 N-糖苷酶F的制備培養(yǎng)重組釀酒酵母細(xì)胞1500ml，誘導(dǎo)表達(dá)后，離心收集濕菌體20克，備用。
2.3.2酶解條件在上述收集的1850ml水解液中加入乙酸鈉1.65克，SDS 1.85克，用濃乙酸調(diào)pH至5.5。在震蕩條件下，37℃，酶解24小時(shí)。
2.3.3酶解液后處理酶解結(jié)束后，水解液離心處理工藝條件溫度4℃，轉(zhuǎn)速6000rpm，時(shí)間10分鐘后，收集上清液約1800ml備用。
2.4寡糖分離2.4.1超濾處理用攪拌杯式超濾器，選用截留分子量為10000的濾膜，氮?dú)饧訅哼^(guò)濾，濾層用去離子水洗滌3次，30ml/次，收集濾過(guò)液，共1900ml，70℃減壓濃縮至400ml，4℃放置備用。
2.4.2納濾濃縮、除鹽在納濾過(guò)程中，由DS-11型電導(dǎo)儀檢測(cè)透過(guò)液的電導(dǎo)率，并不斷用去離子水進(jìn)行洗滌，直至電導(dǎo)率降至180μs/cm，收集納濾后的濃縮液，共30ml，4℃放置備用。
2.4.3離子交換柱分離寡糖選用東洋曹達(dá)DEAE-Toyopearl 650M陰離子交換樹脂，5mM Tris-HCl緩沖液pH值8.0平衡交換柱，用NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫為0-0.1M，流速30ml/min，10ml/收集管，HPTLC檢測(cè)，最后收集第10-18管(檢測(cè)陽(yáng)性)，合并，按2.4.2所述方法，再次進(jìn)行納濾脫鹽，直至透過(guò)液電導(dǎo)率恒定至150μs/cm，共收集得到50ml脫鹽濃縮液。
2.4.4冷凍干燥利用冷凍干燥去出剩余水分，共得到3.3克蛋黃寡糖產(chǎn)品。
2.5產(chǎn)品檢測(cè)間苯二酚法檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)品唾液酸含量為0.31克；還原糖檢測(cè)結(jié)果為產(chǎn)品還原糖含量為91％(以葡萄糖為基準(zhǔn))。
實(shí)施例3利用蛋黃抗體制備廢液制備蛋黃寡糖3.1原料脫脂取9升原料液(山東省農(nóng)科院家禽研究所提供)，1000克冰塊，劇烈攪拌1小時(shí)(整個(gè)操作過(guò)程中，溶液溫度不高于4℃)，離心處理(4℃，4000g，1hr)后，收集上清液，共9.6升，即為脫脂蛋黃溶液。
3.2蛋白酶酶解在制備蛋黃溶液中，并加入20克木瓜蛋白酶(Fisher Scientific Ltd.)，在攪拌狀態(tài)下65℃酶解反應(yīng)4小時(shí)后，90℃減壓濃縮至2000ml。
濃縮后的酶水解液離心處理(8000g，30分鐘，4℃)，上清液用0.22μm濾膜過(guò)濾，收集體積為1920ml，放置已滅菌的2000ml三角瓶中備用。
3.3 N-糖苷酶F酶解
3.3.1 N-糖苷酶F的制備培養(yǎng)重組釀酒酵母細(xì)胞1000ml，誘導(dǎo)表達(dá)后，離心收集濕菌體13克，備用。
3.3.2酶解條件在上述收集的1900ml水解液中加入乙酸鈉1.70克，SDS 1.90克，用濃乙酸調(diào)pH至5.5。在旋轉(zhuǎn)震蕩條件下(80rpm)，37℃，酶解24小時(shí)。
3.3.3酶解液后處理酶解結(jié)束后，水解液離心處理(4℃，6000rpm，10min)，收集上清液約1850ml備用。
3.4寡糖分離3.4.1超濾處理用攪拌杯式超濾器，選用截留分子量為10000的濾膜，氮?dú)饧訅哼^(guò)濾，濾層用去離子水洗滌(50ml/次)3次，收集濾過(guò)液，共2000ml，70℃減壓濃縮至300ml，4℃放置備用。
3.4.2納濾濃縮、除鹽在納濾過(guò)程中，由DS-11型電導(dǎo)儀檢測(cè)透過(guò)液的電導(dǎo)率，并不斷用去離子水進(jìn)行洗滌，直至電導(dǎo)率降至180μs/cm，收集納濾后的濃縮液，共30ml，4℃放置備用。
3.4.3離子交換柱分離寡糖選用東洋曹達(dá)DEAE-Toyopearl 650M陰離子交換樹脂，5mM Tris-HCl緩沖液(pH 8.0)平衡交換柱，用NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫(0-0.1M)，流速30ml/min，10ml/收集管，HPTLC檢測(cè)，最后收集第10-18管(檢測(cè)陽(yáng)性)，合并，按2.4.2所述方法，再次進(jìn)行納濾脫鹽，直至透過(guò)液電導(dǎo)率恒定至150μs/cm，共收集得到50ml脫鹽濃縮液。
3.4.4冷凍干燥利用冷凍干燥去出剩余水分，共得到1.45克蛋黃寡糖產(chǎn)品。
3.5產(chǎn)品檢測(cè)間苯二酚法檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)品唾液酸含量為0.13克；還原糖檢測(cè)結(jié)果為產(chǎn)品還原糖含量為94％(以葡萄糖為基準(zhǔn))。
通過(guò)以上實(shí)例可以看出，本發(fā)明利用重組N-糖苷酶F，采用不同的蛋黃原料進(jìn)行蛋黃寡糖的制備，并取得了較高純度的蛋黃N-寡糖的混合物，證明本發(fā)明的制備方法是可行的。特別是以新鮮雞為蛋黃原料，價(jià)格適中，而且寡糖資源無(wú)任何損失，產(chǎn)品收率高，其產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的潛力很大。
權(quán)利要求
1.一種生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝，其工藝流程如下篩選蛋黃原料→脫脂→蛋白酶水解→變性處理→離心后取上清液→N-糖苷酶F水解→離心后取上清液→超濾→脫鹽→離子交換→減壓干燥→蛋黃寡糖產(chǎn)品→產(chǎn)品檢測(cè)→包裝→成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述蛋黃原料包括有A)新鮮雞蛋中的蛋黃；B)商品化的蛋黃粉；C)蛋黃抗體生產(chǎn)的下腳料廢液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述脫脂為低溫離心脫脂法，其所需離心溫度為-10℃-4℃，轉(zhuǎn)速為3000-6000rpm，時(shí)間為1-3hr。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述蛋白酶水解中的蛋白酶為木瓜蛋白酶，最適酶解溫度為50-70℃，最適pH值為7.0，酶解作用時(shí)間2-24hr。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述N-糖苷酶F水解工藝，是利用在釀酒酵母表面表達(dá)的PNGase，直接加入水解液進(jìn)行酶解或利用固定化細(xì)胞的方法水解液過(guò)柱進(jìn)行酶解，酶解條件溫度為25-42℃，時(shí)間2-48hr。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述超濾為截留分子量為10000的膜過(guò)濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備工藝，其特征是所述酶解最佳條件為30-37℃，20-36hr。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備工藝，其特征是所述超濾為采用截留分子量為10000的膜過(guò)濾，操作壓力為0.4Mpa，操作溫度為40-55℃。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備工藝，其特征是所述超濾的最佳溫度條件為45-50℃。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備工藝，其特征是所述脫鹽為通過(guò)葡聚糖凝膠G25的脫鹽柱或納濾進(jìn)行脫鹽，脫鹽后電導(dǎo)率低于200μs/cm。
全文摘要
本發(fā)明提供一種生物酶法提取雞蛋蛋黃寡糖的制備工藝，其工藝流程包括以下步驟篩選蛋黃原料、脫脂、蛋白酶水解變性處理、離心后取上清液、N－糖苷酶F水解、離心后取上清液、超濾、脫鹽、離子交換、減壓干燥、蛋黃寡糖產(chǎn)品、產(chǎn)品檢測(cè)、包裝、成品。有益效果是利用低廉的生物材料，大量提取制備某些具有重要生物學(xué)功能和應(yīng)用價(jià)值的寡糖，與合成法相比，本方法的寡糖制造成本大大降低，有利于產(chǎn)業(yè)化操作。采用不同的蛋黃原料進(jìn)行蛋黃寡糖的制備，并取得了較高純度的蛋黃N－寡糖的混合物，本制備方法特別是以新鮮雞為蛋黃原料，價(jià)格適中，而且寡糖資源無(wú)任何損失，產(chǎn)品收率高。
文檔編號(hào)C12P19/08GK1680570SQ20051001310
公開日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2005年1月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月17日
發(fā)明者王鵬 申請(qǐng)人:天津科貝思生物試劑有限公司