專利名稱：偶聯(lián)輔酶依賴型酶反應(yīng)系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種偶聯(lián)酶作用反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于反應(yīng)在均勻的溶劑混合物中進(jìn)行。具體而言，本發(fā)明涉及一種反應(yīng)系統(tǒng)，其包括有機(jī)化合物的輔酶依賴型酶轉(zhuǎn)化，其中該輔酶在相同的系統(tǒng)中用酶再生。
背景技術(shù)：
通過生物催化方法制造諸如醇和氨基酸的光活性有機(jī)化合物越來越重要。具有輔酶再生作用的兩種脫氫酶的偶聯(lián)用途已成為大規(guī)模工業(yè)合成這些化合物的方法(DE19753350)。
方程式1 用NAD依賴型甲酸脫氫酶在丙酮酸三甲基酯的還原性氨基化作用中于原位使NADH再生以得到L-叔亮氨酸(Bommarius等，TetrahedronAsymmetry 1995，6，2851-2888)。
在水性介質(zhì)中有效使用的生物催化劑，除了其催化特性和功效以外，還具有以下優(yōu)點與大量的合成型含金屬的催化劑相反，無需使用含金屬的原料，特別是那些含有重金屬并因此而有毒的物質(zhì)。也無需在不對稱還原反應(yīng)中使用昂貴且有害的還原劑，例如硼烷。
然而，水溶性差的基材反應(yīng)存在困難。相似的困難也存在于水溶性差的產(chǎn)品中。原則上可能的溶液可以是在極性有機(jī)溶劑或其水溶液中進(jìn)行生物催化還原反應(yīng)。這此情況下，酶和基材以及若合適的產(chǎn)品均應(yīng)為水溶性的。然而，直接存在有機(jī)溶劑的普遍缺點在于在這些條件下，酶活性通常會顯著降低(例如參見Anderson等，Biotechnol.Bioeng.1998，57，79-86)。具體而言，作為工業(yè)規(guī)模上目前唯一使用并具有可商購數(shù)量的甲酸脫氫酶，F(xiàn)DH不幸地對有機(jī)溶劑具有高敏感性。這在比較例1中表現(xiàn)得很明顯，比較例1使用在各種情況下的添加量為10％的DMSO、環(huán)丁砜、MTBE、丙酮、異丙醇和乙醇作為有機(jī)溶劑成分(參見

圖1)。
用于解決來自Candida boidinii的甲酸脫氫酶在有機(jī)溶劑存在的情況下的穩(wěn)定化問題的各種配置品是已知的，例如額外使用表面活性劑作為表面活性物質(zhì)來進(jìn)行反應(yīng)。然而，其缺點是反應(yīng)速率下降約40倍，并發(fā)生甲酸脫氫酶的抑制作用(B.Orlich等，Biotechnol.Bioeng.1999，65，357-362.)。此外該作者還指出，因為所用的醇脫氫酶的穩(wěn)定性低，所以在微乳液的這些條件下的還原反應(yīng)不經(jīng)濟(jì)。
原則上另一種進(jìn)行生物催化反應(yīng)的可能性包括在有機(jī)溶劑中使用固定化酶，或在含有水和可與水混溶的有機(jī)溶劑的均勻溶液中使用酶。然而，這些其中有機(jī)溶劑與酶發(fā)生直接接觸的方法僅限于少數(shù)幾種酶，特別是水解酶。因此例如DE4436149指出，“直接存在的有機(jī)溶劑(可與水混溶或不可與水混溶的)僅適合少數(shù)屬于水解酶的酶”。此外，其它種類酶的一些實例雖然是已知的(例如尤其是醇腈酶)，但DE4436149的陳述仍適用于大多數(shù)的酶。例如來自Candida boidinii的FDH的有效固定化作用并不是已知的。此外，固定化作用本身會由于固定化步驟和固定化材料而產(chǎn)生額外成本。
因為酶的去活化或改性具有風(fēng)險，因此工業(yè)上開發(fā)了避免存在有機(jī)溶劑的方法。例如DE4436149描述了一種方法，其中通過產(chǎn)品可透過的膜，特別是疏水膜，將產(chǎn)品從反應(yīng)溶液中提取至有機(jī)溶劑中。然而，與攪拌釜反應(yīng)器中的標(biāo)準(zhǔn)方法相比，尤其是因為所需的有機(jī)膜也是額外的價格因素，所以該方法需要明顯更多的技術(shù)費用。此外，該方法僅適于連續(xù)處理。
總之，可以說還沒有有助于克服上述缺點的方法是已知的。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的在于提供一種可能性，它使得偶聯(lián)輔酶依賴型的酶反應(yīng)足以在特別弱水溶性的有機(jī)化合物中進(jìn)行，從而使其可在特別有利于經(jīng)濟(jì)和環(huán)保的條件下應(yīng)用于工業(yè)規(guī)模。
該目的是根據(jù)本發(fā)明的權(quán)利要求加以實現(xiàn)的。權(quán)利要求1至8涉及一種根據(jù)本發(fā)明運(yùn)行的反應(yīng)系統(tǒng)。權(quán)利要求9保護(hù)一種裝置。權(quán)利要求10涉及一種根據(jù)本發(fā)明運(yùn)行的方法，而權(quán)利要求11和12涉及一種根據(jù)本發(fā)明的反應(yīng)系統(tǒng)的優(yōu)選的用途。
通過提供一種偶聯(lián)酶反應(yīng)系統(tǒng)，其包括有機(jī)化合物的輔酶依賴型的酶轉(zhuǎn)化以及輔酶的酶再生，該反應(yīng)系統(tǒng)在包括具有至少兩個羥基或醚基的有機(jī)烴類的均勻水性溶劑系統(tǒng)中運(yùn)行，特別地，所述目的通過驚人的、無法預(yù)計的且根據(jù)本發(fā)明而特別有利的方法加以實現(xiàn)。與可由現(xiàn)有技術(shù)得出的觀點相反，雖然存在特別的水溶性有機(jī)烴類，仍可驚人地使該偶聯(lián)酶反應(yīng)系統(tǒng)能夠在不由溶劑引發(fā)其中一種酶的活性損失的情況下運(yùn)行。
已證明優(yōu)選使用的有機(jī)烴類是通式(I)的化合物 其中n是0至10的整數(shù)，m是0或1，
R1至R8相互獨立地代表H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烷氧基烷基、(C6-C18)芳基、(C7-C19)芳烷基、(C1-C8)烷基-(C6-C18)芳基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C1-C8)烷基-(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C8)烷基。
就此而言，特別優(yōu)選使用乙二醇、DME或甘油。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以任意選擇將有機(jī)助溶劑添加至反應(yīng)混合物中的量。因此，最優(yōu)的量可通過常規(guī)實驗加以確定。基于存在的水性相，添加量優(yōu)選為1至80體積％，更優(yōu)選為5至60體積％，尤其優(yōu)選為10至45體積％。
作為輔酶，優(yōu)選使用在反應(yīng)條件下最常見且運(yùn)行最經(jīng)濟(jì)的輔酶。它們特別是輔酶NADH或NADPH。
優(yōu)選使用脫氫酶作為用于使有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化的酶。然而原則上，該反應(yīng)系統(tǒng)也可用任何其它輔酶依賴型的氧化還原酶來運(yùn)行，其中該輔酶被氧化還原酶消耗并可通過第二酶系統(tǒng)再生，即該系統(tǒng)是偶聯(lián)酶系統(tǒng)。其它合適的此類酶可參見文獻(xiàn)(有機(jī)合成中的酶催化劑(EnzymeCatalysis in Organic Synthesis)；Ed.K.Drauz，H.Waldmann，Vol.I and II，VCH，1995)。
已證明醇脫氫酶或氨基酸脫氫酶是優(yōu)選使用的酶。
輔酶的再生特性主要取決于所用的輔酶本身。輔酶的各種再生方法參見上述文獻(xiàn)。在溶劑、酶和空間/時間產(chǎn)率的給定邊界條件下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可自由選擇再生介質(zhì)。通常就作為輔酶的NAD+(在氧化反應(yīng)中)而言，出自例如短乳桿菌或L.kefir的氧化酶NADH是合適的(DE10140088)。在還原反應(yīng)的情況下，由甲酸脫氫酶使輔酶NADH再生也被進(jìn)一步證明是非常成功的。
本發(fā)明還涉及一種用于使包含本發(fā)明反應(yīng)系統(tǒng)的有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化的裝置。其例如可為酶試劑盒。
有利地使用的裝置是例如攪拌釜或串聯(lián)攪拌釜，或膜反應(yīng)器，其可以分批式地以及連續(xù)地工作。
在本發(fā)明的范疇內(nèi)，膜反應(yīng)器應(yīng)理解為可將催化劑封閉入反應(yīng)器中，而低分子量物質(zhì)可被送入該反應(yīng)器中或可將其去除的任何反應(yīng)容器。此處的膜可直接整合到反應(yīng)空間內(nèi)，或于外部并入分離的過濾組件中，其中該反應(yīng)溶液連續(xù)或間歇地流經(jīng)該過濾組件，而殘留的產(chǎn)品被再循環(huán)至所述反應(yīng)器中。特別是WO 98/22415；以及Wandrey等在Yearbook 1998，Verfahrenstechnik und Chemieingenieurwesen[Process Technology andChemical Engineering]，VDI p.151及隨后頁；Wandrey等在AppliedHomogeneous Catalysis with Organometallic Compounds，vol.2，VCH 1996，p.832及隨后頁；Kragl等，Angew.Chem.1996，6，684 et seq描述了合適的具體實施方案。
可在該裝置中進(jìn)行的連續(xù)過程，除分批式處理和半連續(xù)式處理以外，此處還可以根據(jù)需要以交叉流動過濾模式(圖3)或終端過濾(圖2)進(jìn)行。現(xiàn)有技術(shù)中基本上描述了這兩種不同的方法(Engineering Processesfor Bioseparations，ed.L.R.Weatherley，Heinemann，1994，135-165；Wandrey等，Tetrahedron Asymmetry 1999，10，923-928)。
本申請還提供一種使用根據(jù)本發(fā)明的反應(yīng)系統(tǒng)使有機(jī)化合物發(fā)生酶轉(zhuǎn)化的方法。該方法優(yōu)選用于制備對映異構(gòu)體富集的有機(jī)化合物，優(yōu)選為α-氨基酸或手性醇。
借助于所述的反應(yīng)系統(tǒng)和下述的實施例，該工藝過程可由本領(lǐng)域技術(shù)人員如所期望地實現(xiàn)。因此，在給定的邊界條件下對用于酶反應(yīng)的其他已知的條件進(jìn)行設(shè)定。
本發(fā)明一個方面還在于根據(jù)本發(fā)明的反應(yīng)系統(tǒng)使有機(jī)化合物發(fā)生酶轉(zhuǎn)化或用于判斷或分析特殊的有機(jī)物質(zhì)的用途。有機(jī)化合物的酶轉(zhuǎn)化優(yōu)選在形成對映異構(gòu)體富集產(chǎn)品的情況下實施。
根據(jù)本發(fā)明，偶聯(lián)酶系統(tǒng)應(yīng)理解為在消耗輔酶的情況下進(jìn)行有機(jī)化合物的酶轉(zhuǎn)化，并且通過第二酶系統(tǒng)在原位使該輔酶再生。因此，這減少了昂貴的輔酶的使用。
這里令人十分驚奇的是，不同于現(xiàn)有的教導(dǎo)，存在的有機(jī)介質(zhì)并不會破壞所用的兩種酶，因此可以以非常優(yōu)良的空間/時間產(chǎn)率制備所期望的產(chǎn)品。
如所示出的，與大多數(shù)導(dǎo)致所用的FDH迅速失活的有機(jī)溶劑(參見比較例)相反，使用DME和乙二醇，在數(shù)天以后仍可觀察到甲酸脫氫酶突出的穩(wěn)定性特性。例如，在丙酮和DMSO存在的情況下，酶的活性在24小時以內(nèi)分別下降了35和66％，而在10％DME存在的情況下，即使在5天以后酶的活性仍保持在80％。DME和乙二醇的結(jié)果如圖1所示，并列于表3中。其它有機(jī)溶劑的比較例也如圖1中所示。
用來自Candida boidinii的野生型甲酸脫氫酶以及該酶通過基因工程改性的形式實施方法(DE19753350)。如上所述，優(yōu)選使用NADH作為輔酶。對于實驗性研究，例如可使用自然的或重組形式的來自紅球菌屬的ADH，優(yōu)選來自紅平紅球菌的ADH作為ADH成分。所用的酶可以任何期望的提純的天然形式或重組制備的形式用于該反應(yīng)中。也可將它們以寄助物的完整全細(xì)胞的形式加以使用。在本說明書的范疇內(nèi)，其中兩種酶系統(tǒng)以適合于最優(yōu)反應(yīng)的狀態(tài)存在于全細(xì)胞催化劑中(DE10218689)的實施方案同樣是有利的。
更有趣的是，醇脫氫酶在式(I)的有機(jī)烴類存在的情況下也具有高穩(wěn)定性。因此，根據(jù)本發(fā)明的溶劑系統(tǒng)適合于進(jìn)行不對稱生物催化還原反應(yīng)。這通過分別從對氯乙酰苯或?qū)?(正丁基)乙酰苯起始的不對稱合成1-對氯苯乙烷-1-醇或1-正丁苯乙烷-1-醇而已經(jīng)試驗性地加以研究。
在110小時的反應(yīng)時間之后，對氯乙酰苯或?qū)?(正丁基)乙酰苯作為基材分別以59％或70％的形成率形成產(chǎn)品。
本方法的一個主要優(yōu)點在于該方法的簡單性。例如，該方法不包括昂貴的方法步驟，而且該方法可在分批式反應(yīng)器中實施，也可連續(xù)地實施。與以前的方法相反，該方法也不需要將水性介質(zhì)與有機(jī)介質(zhì)分離的特殊膜。本方法中還省略了目前在一些方法中需要添加的表面活性劑。這一點無法從現(xiàn)有技術(shù)中看出，然而卻使本方法極其有利。
直鏈型或分支型(C1-C8)烷基可為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基或辛基，包括它們所有相關(guān)的異構(gòu)體。(C2-C8)烷氧基烷基是指烷基鏈被至少一個氧官能團(tuán)間隔并且兩個氧原子不能彼此相連的基團(tuán)。碳原子數(shù)是指該基團(tuán)中所含碳原子的總數(shù)。也包括所有相關(guān)的異構(gòu)體。
(C3-C8)環(huán)烷基是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基等。由雜原子取代的環(huán)烷基優(yōu)選為例如1-、2-、3-、4-哌啶基、1-、2-、3-吡咯烷基、2-、3-四氫糠基、2-、3-、4-嗎啉基。
(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C8)烷基是指經(jīng)由上述烷基與分子鍵結(jié)的上述環(huán)烷基。
(C6-C18)芳基是指具有6至18個碳原子的芳基。其特別包括諸如苯基、萘基、蒽基、菲基和聯(lián)苯基的基團(tuán)。
(C7-C19)芳烷基是經(jīng)由(C1-C8)烷基與分子鍵結(jié)的(C6-C18)芳基。
對映異構(gòu)體富集是指一種旋光對映體在它的其他旋光對映體的混合物中所占的比例大于50％。
所示的結(jié)構(gòu)涉及所有可能的非對映體，并且就一個非對映體而言，涉及此處所討論化合物的兩種可能的對映異構(gòu)體。
均勻的水性溶劑系統(tǒng)，根據(jù)本發(fā)明是指所用的烴類形成一種具有水相的均勻溶液，并因此最終僅存在一種液態(tài)相。
具體實施例方式
用下述實施例闡明根據(jù)本發(fā)明的方法。
圖2所示為具有終端過濾的膜反應(yīng)器。將基材1經(jīng)過泵2傳遞至包含膜5的反應(yīng)器空間3中。在用攪拌器工作的反應(yīng)器空間中，除溶劑以外，還有催化劑4、產(chǎn)品6和未反應(yīng)的基材1。低分子量產(chǎn)品6主要由膜5濾出。
圖3所示為具有交叉流過濾的膜反應(yīng)器。此處將基材7經(jīng)過泵8傳遞至攪拌的反應(yīng)器空間中，其中還有溶劑、催化劑9和產(chǎn)品14。由泵16形成經(jīng)過可能存在的熱交換器12導(dǎo)入交叉流過濾室15中的溶劑流。此處由膜13將低分子量產(chǎn)品14分離開。然后使高分子量的催化劑9隨溶劑流，若適當(dāng)則再次經(jīng)過熱交換器12，若適當(dāng)則經(jīng)過閥11，返回反應(yīng)器10中。
實驗部分實施例1(FDH活性的比較例)稱出2.72g(0.8mol/l)的甲酸鈉和1.14g(0.1mol/l)的三水合磷酸氫二鉀，并溶解于40ml完全軟化的水中。用氨水(25％)和甲酸(100％)或合適的稀釋物將該溶液的pH調(diào)節(jié)至8.2。然后將該溶液移至50ml的容量瓶中，并用完全軟化的水加滿。除此以外，稱出71.7mg(4mmol/l)的三水合NAD+，并溶解于約20ml完全軟化的水中。用氨水(25％)和甲酸(100％)或合適的稀釋物將該溶液的pH調(diào)節(jié)至8.2。然后將該溶液移至25ml的容量瓶中，并用完全軟化的水加滿。然后將各500μl基材溶液和NADH溶液在用于測量的1cm的室中混合。在添加10μl的酶溶液之后，使用有機(jī)溶劑(參見表)在水中的10％的溶液作為溶劑，將該混合物簡單搖動，將該室置于光度計中并開始記錄數(shù)據(jù)。僅在開始測量之前立即添加酶溶液。在一定的時間間隔之后通過光度測量由NAD+生成NADH的反應(yīng)而確定酶的活性。在溫度為30℃、波長為340nm及測量時間為15分鐘的條件下進(jìn)行光度測量。結(jié)果列于表1和表2中。
表1以U/ml計的FDH酶活性作為溶劑和時間的函數(shù)

表2以U/ml計的FDH酶活性作為溶劑和時間的函數(shù)

實施例2(測量FDH活性)按照實施例1中的方法測定活性，使用DME和乙二醇作為有機(jī)溶劑成分。結(jié)果列于表3中。
表3以U/ml計的FDH酶活性作為溶劑和時間的函數(shù)

實施例3將在酶濃度為0.1U/ml S-ADH和0.2U/ml FDH(DM)下的含有25mM對氯乙酰苯以及0.1mM NAD+和75mM甲酸鈉的反應(yīng)混合物，在含有90體積％100mM pH為7.5的磷酸鹽緩沖液和10體積％DME的溶劑系統(tǒng)中，在反應(yīng)溫度為30℃下攪拌110小時。然后用二氯甲烷將有機(jī)成分萃取出，丟棄水相并用硫酸鈉干燥有機(jī)相。使過濾后所得的濾液在真空中去除易揮發(fā)的成分，并通過1H核磁共振光譜分析所得油的形成率。測得形成率為59％。
實施例4將在酶濃度為0.2U/ml S-ADH和0.4U/ml FDH(DM)下的含有25mM對-(正丁基)乙酰苯以及0.1mM NAD+和75mM甲酸鈉的反應(yīng)混合物，在含有90體積％100mM pH為7.5的磷酸鹽緩沖液和10體積％DME的溶劑系統(tǒng)中，在反應(yīng)溫度為30℃下攪拌110小時。然后用二氯甲烷將有機(jī)成分萃取出，丟棄水相并用硫酸鈉干燥有機(jī)相。使過濾后所得的濾液在真空中去除易揮發(fā)的成分，并通過1H核磁共振光譜分析所得油的形成率。測得形成率為70％。
實施例5具有20％(體積/體積)的乙二醇含量的反應(yīng)將在酶含量為24U來自R.erythropolis(在E.coli中表達(dá))的(S)-ADH和24U來自Candida boidinii(二突變體C23S、C262A；在E.coli中表達(dá))的甲酸脫氫酶下的含有1.3mmol對氯乙酰苯(208.3mg；13mM)以及0.24mmol NADH(169.4mg；2.4mM)和6.2mmol甲酸鈉(62mM；421.7mg；4.8當(dāng)量，基于酮)的反應(yīng)混合物，在含有80體積％50mM pH為7.0的磷酸鹽緩沖液和20體積％乙二醇的溶劑系統(tǒng)中，在反應(yīng)溫度為30℃下攪拌21小時。在此期間取出樣品，并通過PLC測定特別的轉(zhuǎn)化率。21小時之后，發(fā)現(xiàn)酮完全轉(zhuǎn)化。然后用4×100ml的甲基叔丁基醚將有機(jī)成分萃取出，丟棄水相并用硫酸鈉干燥有機(jī)相。使過濾后所得的濾液在真空中去除易揮發(fā)的成分，并且在進(jìn)一步添加MTBE并將形成的兩相分離之后，通過1H核磁共振光譜分析所得剩余物的形成率。測得形成率大于99％。
實施例6具有40％(體積/體積)的乙二醇含量的反應(yīng)將在酶含量為52.4U來自R.erythropolis(在E.coli中表達(dá))的(S)-ADH和52.4U來自Candida boidinii(二突變體C23S、C262A；在E.coli中表達(dá))的甲酸脫氫酶下的含有2.63mmol對氯乙酰苯(407.3mg；26.3mM)以及0.52mmol NADH(372.1mg；5.2mM)和14.4mmol甲酸鈉(144mM；979.3mg；5當(dāng)量，基于酮)的反應(yīng)混合物，在含有60體積％50mM pH為7.0的磷酸鹽緩沖液和40體積％乙二醇的溶劑系統(tǒng)中，在反應(yīng)溫度為30℃下攪拌21小時。在此其間取出樣品，并通過PLC測定特別的轉(zhuǎn)化率。21小時之后，發(fā)現(xiàn)酮完全轉(zhuǎn)化。然后用2×100ml的甲基叔丁基醚將有機(jī)組分萃取出，丟棄水相并用硫酸鈉干燥有機(jī)相。使過濾后所得的濾液在真空中去除易揮發(fā)的成分，并且在進(jìn)一步添加MTBE并將形成的兩相分離之后，通過1H核磁共振光譜分析所得剩余物的形成率。測得形成率大于99％。
權(quán)利要求
1.一種偶聯(lián)酶反應(yīng)系統(tǒng)，其包括有機(jī)化合物的輔酶依賴型的酶轉(zhuǎn)化以及輔酶的酶再生，其中該反應(yīng)系統(tǒng)在包括具有至少兩個羥基或醚基的有機(jī)烴類的均勻水性溶劑系統(tǒng)中運(yùn)行。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，該所用的有機(jī)烴類具有根據(jù)通式(I)的結(jié)構(gòu) 其中n是0至10的整數(shù)，m是0或1，R1至R8相互獨立地代表H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烷氧基烷基、(C6-C18)芳基、(C7-C19)芳烷基、(C1-C8)烷基-(C6-C18)芳基、(C3-C8)環(huán)烷基、(C1-C8)烷基-(C3-C8)環(huán)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C8)烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，使用乙二醇、DME或甘油作為所述有機(jī)烴類。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，基于水性相，所述有機(jī)烴類的含量為1至80體積％，更優(yōu)選為5至60體積％，尤其優(yōu)選為10至45體積％。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，使用NADH或NADPH作為所述輔酶。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，使用脫氫酶作為使所述有機(jī)化合物發(fā)生轉(zhuǎn)化的酶。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，使用醇脫氫酶或氨基酸脫氫酶。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求之一所述的反應(yīng)系統(tǒng)，其特征在于，利用甲酸脫氫酶使所述輔酶再生。
9.用于使有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化的裝置，其包含根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)系統(tǒng)。
10.用于使有機(jī)化合物發(fā)生酶轉(zhuǎn)化的方法，其包括使用根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)系統(tǒng)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的反應(yīng)系統(tǒng)用于使有機(jī)化合物發(fā)生酶轉(zhuǎn)化或用于判斷或分析的用途。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的用途，其用于制備對映異構(gòu)體富集的有機(jī)化合物的方法中。
全文摘要
本申請涉及一種反應(yīng)系統(tǒng)，其中借助于偶聯(lián)酶作用轉(zhuǎn)化方法可得到對映異構(gòu)體純度高的有化學(xué)價值的化合物。在此范疇內(nèi)的偶聯(lián)酶作用反應(yīng)系統(tǒng)包括消耗輔酶的酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)，并使消耗的輔酶發(fā)生酶再循環(huán)，其中該過程在包括具有至少兩個羥基或醚基的有機(jī)烴類的均勻水性溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行。
文檔編號C12P41/00GK1768134SQ200480008366
公開日2006年5月3日 申請日期2004年3月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月27日
發(fā)明者克勞迪婭·羅爾曼, 哈拉爾德·格勒格爾, 維爾納·胡梅爾, 安德烈亞斯·博馬留斯, 卡爾海因茨·德拉茨 申請人:德古薩股份公司