專利名稱：肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)方法和誘導(dǎo)培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物愈傷組織的誘導(dǎo)方法，具體涉及肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)方法。
背景技術(shù)：
肉蓯蓉又名地精、大蕓，為列當(dāng)科肉蓯蓉屬多年生高等寄生植物，寄生于梭梭(Haloxylon ammodendron)、白梭梭(H.persicum)和怪柳屬(Tamarix)等植物的根上，主要產(chǎn)于我國內(nèi)蒙古、新疆等地以及哈薩克斯坦等中亞國家的沙漠中，有“沙漠人參”之稱(鄭虎占，董澤宏，余靖，中藥現(xiàn)代研究與應(yīng)用(卷2)，北京學(xué)苑出版社，1997)。
肉蓯蓉味甘咸，微辛酸、微溫，在《神農(nóng)百草經(jīng)》中列為上品，具有補中、入肝、益精、滋腎、壯陽等功效。在補舒助陽藥物中，除少數(shù)動物類藥材外，肉蓯蓉常為首選藥材。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，肉蓯蓉具有增強人體免疫功能，提高神經(jīng)系統(tǒng)興奮性，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，促進代謝，清除自由基，防止細胞老化以及消除疲勞、迅速恢復(fù)體能等功效。由于肉蓯蓉的特殊藥用價值，自古以來被廣泛用于臨床治療，其利用幾率僅次于人參。
目前野生肉蓯蓉的年產(chǎn)量大約為1200噸，并呈逐年下降的趨勢。這幾年隨著人們生活水平的提高和保健意識的增強，珍貴藥材的需求呈日益增長的趨勢。但是長期以來，肉蓯蓉來源于民間采挖，由于沒有科學(xué)管理，濫采亂挖現(xiàn)象十分嚴重，肉蓯蓉寄主梭梭、白梭梭等毀壞嚴重，破壞了自然生態(tài)環(huán)境，加速了土地沙漠化，野生資源日益減少，已被列為國家二級保護植物(朱詠華，羅澤民，肉蓯蓉的研究進展及前景分析，湖南林業(yè)科技，2000，27(4)19-22)。
近年來有人提出以人工栽培作為補救途徑，但由于其種植時間長(寄主種植需3-5年，肉蓯蓉種子萌發(fā)需1-3年)，受寄主植物的數(shù)量、分布與根系發(fā)育等條件的影響，大量發(fā)展尚有一定困難，人工栽培技術(shù)也不是一個理想的解決措施(朱詠華，羅澤民，肉蓯蓉的研究進展及前景分析，湖南林業(yè)科技，2000，27(4)19-22)。
近年來，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)利用現(xiàn)代生物技術(shù)的愈傷組織培養(yǎng)方法生產(chǎn)荒漠肉蓯蓉的替代品，使其在工業(yè)條件下大量分裂繁殖，累積野生植物的藥物成分，是解決野生荒漠肉蓯蓉資源的有效途徑，并取得了很好的效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)方法。本發(fā)明的方法是將肉蓯蓉的小塊鱗片置于添加了補充成分的MS或B5培養(yǎng)基(參見李浚明編譯，植物組織培養(yǎng)教程，第二版，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社)中進行培養(yǎng)。所述補充成分包括6-芐基氨基嘌呤(6-BA)和/或激動素(KT)的至少一種以及萘乙酸(NAA)和/或2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)的至少一種。所述MS或B5培養(yǎng)基優(yōu)選是固體培養(yǎng)基。
具體而言，本發(fā)明的方法包括以下步驟肉蓯蓉用清水沖洗后，撕取或剪取鱗片，將鱗片消毒后，用無菌水沖洗，將鱗片切成小片，分別置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，置于23～25℃下培養(yǎng)，所用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在固體MS或B5基本培養(yǎng)基中添加6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.1～2.0mg/L和/或激動素(KT) 0.1～2.0mg/L中至少一種，以及萘乙酸(NAA) 0.1～2.0mg/L和/或2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.1～2.5mg/L中至少一種。
優(yōu)選的方法是指所用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在固體B5基本培養(yǎng)基中添加6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.1～2.0mg/L和/或激動素(KT) 0.1～2.0mg/L中至少一種，以及萘乙酸(NAA) 0.1～2.0mg/L和/或2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.1～2.5mg/L中至少一種。
更優(yōu)選的方法是指所用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在固體B5基本培養(yǎng)基中添加6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.5～2.0mg/L激動素(KT) 0.1～1.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.5～2.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)0.5～2.0mg/L最優(yōu)選的方法是指所用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在固體B5基本培養(yǎng)基中添加6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 2.0mg/L激動素(KT) 1.0mg/L萘乙酸(NAA) 1.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)0.5mg/L采用上述培養(yǎng)基可以誘導(dǎo)出荒漠肉從蓉的愈傷組織，長勢好，誘導(dǎo)率高(6/30～29/30)。
以上培養(yǎng)基按常規(guī)方法配制。
具體實施例方式
下面用實施例具體說明本發(fā)明實施例一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L NAA，0.2mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為7/30，長勢中(++)。
實施例二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢中(++)。
實施例三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢可(+)。
實施例四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.5mg/L2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為12/30，長勢中(++)。
實施例五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.5mg/L2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為6/30，長勢可(+)。
實施例六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為14/30，長勢中(++)。
實施例七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/LNAA，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為13/30，長勢中(++)。
實施例八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/LNAA，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢可(+)。
實施例九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/LNAA，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為9/30，長勢可(+)。
實施例十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/LNAA，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為13/30，長勢中(++)。
實施例十一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為13/30，長勢中(++)。
實施例十二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為7/30，長勢可(+)。
實施例十三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為23/30，長勢良(+++)。
實施例十四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為20/30，長勢中(++)。
實施例十五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為21/30，長勢良(+++)。
實施例十六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為10/30，長勢中(++)。
實施例十七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為17/30，長勢中(++)。
實施例十八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為19/30，長勢中(++)。
實施例十九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.0mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為20/30，長勢良(+++)。
實施例二十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為9/30，長勢可(+)。
實施例二十一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，2.0mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為6/30，長勢可(+)。
實施例二十二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/LNAA，0.2mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢良(+++)。
實施例二十三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/LNAA，2.0mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢良(+++)。
實施例二十四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為7/30，長勢可(+)。
實施例二十五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.5mg/L2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為13/30，長勢良(+++)。
實施例二十六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.5mg/L2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢中(++)。
實施例二十七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為15/30，長勢良(+++)。
實施例二十八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/LNAA，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為12/30，長勢良(+++)。
實施例二十九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/LNAA，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為7/30，長勢可(+)。
實施例三十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/LNAA，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢中(++)。
實施例三十一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/LNAA，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為15/30，長勢良(+++)。
實施例三十二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為14/30，長勢良(+++)。
實施例三十三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為9/30，長勢中(++)。
實施例三十四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，2.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為22/30，長勢良(+++)。
實施例三十五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為19/30，長勢良(+++)。
實施例三十六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為27/30，長勢良(+++)。
實施例三十七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，2.5mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為15/30，長勢良(+++)。
實施例三十八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L 2，4-D，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為16/30，長勢中(++)。
實施例三十九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，0.2mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為20/30，長勢良(+++)。
實施例四十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.2mg/L6-BA，2.0mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為25/30，長勢良(+++)。
實施例四十一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，0.2mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢中(++)。
實施例四十二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L6-BA，2.0mg/L NAA，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢中(++)。
實施例四十三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為8/30，長勢中(++)。
實施例四十四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為10/30，長勢可(+)。
實施例四十五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢可(+)。
實施例四十六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為18/30，長勢中(++)。
實施例四十七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為9/30，長勢可(+)。
實施例四十八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢中(++)。
實施例四十九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為12/30，長勢可(+)。
實施例五十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為24/30，長勢中(++)。
實施例五十一荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體MS基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為15/30，長勢中(++)。
實施例五十二荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為7/10，長勢良(+++)。
實施例五十三荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為21/30，長勢中(++)。
實施例五十四荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+0.5mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為9/30，長勢可(+)。
實施例五十五荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為24/30，長勢良(+++)。
實施例五十六荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為6/30，長勢良(+++)。
實施例五十七荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+1.0mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為27/30，長勢良(+++)。
實施例五十八荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，0.5mg/L NAA，2.0mg/L 2，4-D，0.5mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為10/30，長勢中(++)。
實施例五十九荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，1.0mg/L NAA，0.5mg/L 2，4-D，1.0mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為29/30，長勢優(yōu)(++++)。
實施例六十荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)荒漠肉蓯蓉用清水沖洗5小時后，撕取鱗片，將鱗片置于70％乙醇中消毒30秒，再轉(zhuǎn)入10％ Antiformin消毒8分鐘，然后用無菌水沖洗5次，將鱗片切成小片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體B5基本培養(yǎng)基+2.0mg/L 6-BA，2.0mg/L NAA，1.0mg/L 2，4-D，0.1mg/L KT，置于25℃培養(yǎng)箱中12/12光照培養(yǎng)，誘導(dǎo)愈傷。在誘導(dǎo)約20天后，某些鱗片周圍有突起并逐漸長出愈傷組織，30天后統(tǒng)計出愈率為11/30，長勢良(+++)。
權(quán)利要求
1.一種荒漠肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)方法，包括以下步驟將肉蓯蓉的小片鱗片置于添加了補充成分的MS或B5培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，直至長出愈傷組織。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述補充成分包括6-芐基氨基嘌呤(6-BA)和/或激動素(KT)的至少一種以及萘乙酸(NAA)和/或2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)的至少一種。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。
4.權(quán)利要求2或3的方法，其中培養(yǎng)溫度為23～25℃。
5.權(quán)利要求4的方法，其中補充成分為6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.1～2.0mg/L激動素(KT)0.1～2.0mg/L中至少一種，以及萘乙酸(NAA) 0.1～2.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸 0.1～2.5mg/L(2，4-D)中至少一種。
6.權(quán)利要求5的誘方法，其中補充成分為6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.1～2.0mg/L激動素(KT)0.1～2.0mg/L中至少一種，以及萘乙酸(NAA) 0.1～2.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.1～2.5mg/L中至少一種。
7.權(quán)利要求6的方法，其中補充成分為6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.5～2.0mg/L激動素(KT) 0.1～1.0mg/L萘乙酸(NAA)0.5～2.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.5～2.0mg/L
8.權(quán)利要求7的方法，其中補充成分為6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 2.0mg/L激動素(KT) 1.0mg/L萘乙酸(NAA)1.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.5mg/L
9.一種培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基是在MS或B5培養(yǎng)基中添加以下補充成分6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.1～2.0mg/L激動素(KT) 0.1～2.0mg/L中至少一種，以及萘乙酸(NAA)0.1～2.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.1～2.5mg/L中至少一種。
10.權(quán)利要求9的培養(yǎng)基，其中所述補充成分為6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 2.0mg/L激動素(KT) 1.0mg/L萘乙酸(NAA)1.0mg/L2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D) 0.5mg/L
全文摘要
本發(fā)明涉及植物愈傷組織的誘導(dǎo)方法，具體涉及肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)方法。本發(fā)明還涉及用于誘導(dǎo)肉蓯蓉愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
文檔編號C12N5/04GK1730651SQ20041005800
公開日2006年2月8日 申請日期2004年8月6日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月6日
發(fā)明者齊一伯, 盛長忠, 張向飛, 姜燕 申請人:天津天士力制藥股份有限公司, 上海天士力藥業(yè)有限公司