專利名稱：一種β－瓊膠酶基因aga及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種海洋假別單胞菌(Pseudoalteromonas sp.)CY24的β-瓊膠酶基因agaA。本發(fā)明還公開了含有該基因的載體和大腸桿菌重組株及其表達產物的生產方法和應用。
一種β-瓊膠酶基因agaA，其特征在于它是編碼假別單胞菌CY24的β-瓊膠酶的基因。
一種β-瓊膠酶基因agaA的制備方法，其特征在于以鳥槍法克隆假別單胞菌CY24的β-瓊膠酶基因agaA。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌克隆載體pA5。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌重組株pA5/DH5α。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌表達載體pEAG。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌重組株pEAG/BL21。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于制備重組β-瓊膠酶。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于降解瓊脂糖制備新瓊寡糖。
將本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA用于從瓊脂糖凝膠中回收DNA。
本發(fā)明的β-瓊膠酶基因agaA是編碼假別單胞菌CY24的β-瓊膠酶的基因，用其生產的重組β-瓊膠酶溫度和pH穩(wěn)定性好，活性高，能降解瓊脂糖，降解產物主要為聚合度2-6的新瓊寡糖，因此可以用于新瓊寡糖的制備以及從瓊脂糖凝膠中回收DNA。本發(fā)明的大腸桿菌重組株pEAG/BL21所表達的重組β-瓊膠酶占總蛋白的24％，表達水平高，易于純化，且連續(xù)傳代20代后表達量未有降低，所以通過本發(fā)明可以大量生產重組β-瓊膠酶，成本較低。
附圖
2為根據(jù)β-瓊膠酶基因agaA的核苷酸序列推測的氨基酸序列。
權利要求
1.一種β-瓊膠酶基因agaA，其特征在于它是編碼假別單胞菌CY24的β-瓊膠酶的基因。
2.一種β-瓊膠酶基因agaA的制備方法，其特征在于以鳥槍法克隆假別單胞菌CY24的β-瓊膠酶基因agaA。
3.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌克隆載體pA5。
4.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌重組株pA5/DH5α。
5.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌表達載體pEAG。
6.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于制備大腸桿菌重組株pEAG/BL21。
7.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于制備重組β-瓊膠酶。
8.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于降解瓊脂糖制備新瓊寡糖。
9.將權利要求1所述的β-瓊膠酶基因agaA用于從瓊脂糖凝膠中回收DNA。
全文摘要
本發(fā)明的β－瓊膠酶基因agaA是編碼假別單胞菌CY24的β－瓊膠酶的基因，用其生產的重組β－瓊膠酶溫度和pH穩(wěn)定性好，活性高，能降解瓊脂糖，降解產物主要為聚合度2－6的新瓊寡糖，因此可以用于新瓊寡糖的制備以及從瓊脂糖凝膠中回收DNA。本發(fā)明的大腸桿菌重組株pEAG/BL21所表達的重組β－瓊膠酶占總蛋白的24％，表達水平高，易于純化，且連續(xù)傳代20代后表達量未有降低，所以通過本發(fā)明可以大量生產重組β－瓊膠酶，成本較低。
文檔編號C12N1/21GK1460716SQ0311251
公開日2003年12月10日 申請日期2003年6月4日 優(yōu)先權日2003年6月4日
發(fā)明者褚艷, 韓峰, 李京寶, 路新枝 申請人:中國海洋大學