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技術(shù)領(lǐng)域:
】本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種改進(jìn)的甘蔗雜交制種方法。
背景技術(shù):
:甘蔗是我國最主要的糖料作物,蔗糖約占糖總產(chǎn)量的80%。有性雜交是甘蔗育種的基礎(chǔ),是品種改良和更新、保證蔗糖產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的應(yīng)用最廣、效果顯著的育種方式。甘蔗開花后,確保雜交成功,提高雜交種子質(zhì)量,是甘蔗雜交制種工作的基礎(chǔ)。目前常用的雜交方法有:第一種,父母本鄰行種植法,此法要求父母本花期一致,較難實(shí)現(xiàn)。第二種,亞硫酸養(yǎng)莖法,此法父本都采用亞硫酸養(yǎng)莖,在后熟期對母本的保育較嚴(yán)格,以防花穗枯死,獲得的種子質(zhì)量較差。第三種,母本自生根,父本亞硫酸養(yǎng)莖法,此法母本不便移動,只能在室外進(jìn)行雜交,環(huán)境影響較大。第四種,母本包莖高壓發(fā)根,父本亞硫酸養(yǎng)莖法,此法與第三種方法一樣,因蔗莖生長有根,養(yǎng)分供應(yīng)好,結(jié)實(shí)率高,種子質(zhì)量好,但要求在大田中觀察母本的孕穗情況,一旦發(fā)現(xiàn)孕穗,即用營養(yǎng)基質(zhì)包裹母本,待包莖處生出較多須根后,截?cái)嗪筮\(yùn)回雜交溫室進(jìn)行雜交。目前大部分育種場采用第四種方法,但此法存在諸多問題。首先包莖的時間選擇,時間選擇早了,花穗未開,包莖的營養(yǎng)基質(zhì)干枯,剛長出來的須根枯死。其次,全憑經(jīng)驗(yàn)確定哪些適合做母本,然而每年氣候不一樣,環(huán)境影響不同,同樣的親本花粉育性年際存在差異。第三,包莖的條數(shù)選擇,有時候一個親本處理幾十條,實(shí)際使用的才幾條花穗,造成極大的浪費(fèi)。第四,進(jìn)入孕穗期,親本通常有3-5米高,需要借助樓梯,才能完成包莖工作,工作量極大。第五,包莖生根后,母本的高度固定,在進(jìn)入雜交籠后,需要絞盡腦汁考慮父本的懸掛高度。因此,有必要提出一種新的甘蔗雜交方法,降低工作量,提高結(jié)實(shí)率。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的發(fā)明目的在于:針對上述的問題,本發(fā)明提供一種成本低、操作簡單的雜交方法,避免采集花穗時手寫標(biāo)簽造成的錯誤,克服傳統(tǒng)甘蔗雜交制種的包莖難、費(fèi)人工、費(fèi)花穗等問題,提高花穗的利用率和種子的結(jié)實(shí)率。為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:一種改進(jìn)的甘蔗雜交制種方法,包括以下具體步驟:(1)親本培育:將易花親本在當(dāng)年春季下種,難花親本相比易花親本要提前下種,在每年的6月上旬停止施肥;(2)標(biāo)記親本:給每一個親本制作對應(yīng)的親本條形碼標(biāo)簽牌進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記,并于每年10月上旬懸掛于親本種植處;(3)采集花穗:親本已抽穗1/3-1/2、頂部有少量小穗已開花時即可采集,從蔗莖基部截?cái)?,保持蔗莖最長狀態(tài),剪除大部分葉片,使用手持掃描打印機(jī)掃描懸掛的親本條形碼標(biāo)簽牌,打印2份新的與步驟(2)同樣名稱的條形碼,第1份粘貼在截?cái)嗟挠H本上,同時采集該親本已開花的花軸3-8枝,并收藏于收納盒中且附上對應(yīng)的第2份條形碼,基部截?cái)嗟恼崆o運(yùn)回雜交溫室,用清水噴濕花穗,按順序插入清水養(yǎng)莖池中保育;所述養(yǎng)莖池分隔為兩列,每列分隔為若干個小分格,每個小分格的外側(cè)設(shè)置有位置編號條形碼卡槽區(qū);利用掃描器掃描親本條形碼和該親本所在位置的位置條形碼,通過處理器進(jìn)行處理后,將統(tǒng)計(jì)采集到的花穗數(shù)量及位置顯示于顯示器中;(4)檢測花粉育性:從步驟(3)取回的花軸上,任意選取已開花小穗臨近的未開花小穗2粒,每粒小穗含3枚花藥,共選取3枝有效花軸,總共獲得18枚花藥,置于載玻片上,加i-ki溶液染色,用玻棒搗碎花藥,在顯微鏡下檢測花粉育性,確定其父母性;(5)配制組合:根據(jù)采集到的花穗和雜交計(jì)劃,制定當(dāng)天可配置的雜交組合,并打印出組合標(biāo)簽牌,將組合中的母本和父本置于同一雜交籠中;先固定父本的位置,父本的高度控制在低于雜交籠頂端30-50cm處,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為5-10l的養(yǎng)莖溶液瓶,將父本的下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織切除,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中;母本置于雜交籠中間,母本在下方,父本在上方,使父母本重疊1/3,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為5-10l的養(yǎng)莖溶液瓶,用鋒利的刀快速切除母本下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中,將組合標(biāo)簽牌懸掛于母本蔗莖中部;(6)母本促根處理:確定并固定好母本后,在花穗基部以下200cm-250cm的莖段,選2-4個節(jié)撥除葉鞘,用營養(yǎng)基質(zhì)包裹,進(jìn)行快速促根處理7-15天;(7)人工授粉:上午8時至10時,每隔1小時進(jìn)行人工授粉,只敲動父本花穗,使花粉飄落至母本花穗上;授粉期間,若父本花期提前結(jié)束,應(yīng)及時補(bǔ)充父本,直到母本開花基本結(jié)束止,控制人工授粉期間雜交溫室內(nèi)溫度為25-28℃,相對濕度為75-85%;(8)種子后熟:雜交結(jié)束后,丟棄父本穗莖,將母本移入后熟室,檢查促根處理效果,并用紗袋向下套住整個花穗,將組合標(biāo)簽牌放入紗袋中,下端扎緊,防止標(biāo)簽牌掉落;所述檢查促根處理效果的方法是:若生出較多須根,從包莖下方2-3cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;若未能生出須根,則用鋒利的刀快速切去母本下端5-10cm節(jié)間組織,迅速插入盛有20l、150ppm亞硫酸溶液的桶中,待生出較多須根,從包莖下方2-3cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;(9)收獲種子:當(dāng)母本頂部種子顯白色絮狀,小穗脫落三分之二以上時,剪下花穗,放入烘干房進(jìn)行干燥處理,然后去除紗袋,將種子裝入防水紙袋中,在-15~-21℃下可長期貯存;所述干燥處理的條件是:溫度11℃,濕度13%,干燥4天;進(jìn)一步說明,所述營養(yǎng)基質(zhì)按照重量份數(shù)計(jì),包括以下原料制備而得:吲哚丁酸0.1-0.5份、萘乙酸0.1-0.5份、生根粉0.5-1.6份、酒精1-5份、復(fù)方氨基酸注射液0.3-0.7份、改性陶粒粉10-25份、椰糠10-20份、復(fù)合微生物菌肥5-10份;所述復(fù)合微生物菌肥是有以下原料按照重量百分?jǐn)?shù)混合而成:1-3%地衣芽孢桿菌液、2-3%巨大芽孢桿菌液、1-2%黃霉菌液、1-3%膠凍樣芽孢桿菌液、2-3%蘇云金桿菌液、1-3%哈茨木霉菌液,余量為基礎(chǔ)料補(bǔ)充到100%;其中,衣芽孢桿菌液的有效含菌量為3×108-5×108個/ml、巨大芽孢桿菌液的有效含菌量為2×109-3×109個/ml、黃霉菌液的有效含菌量為4×109-6×109個/ml、膠凍樣芽孢桿菌液的有效含菌量為2×108-6×108個/ml、蘇云金桿菌液的有效含菌量為3×108-5×108個/ml、哈茨木霉菌液的有效含菌量為1×109-3×109個/ml;所述基礎(chǔ)料包括泥炭、磷礦粉、廢糖渣按照重量比為2-4:2:2-3。進(jìn)一步說明,所述營養(yǎng)基質(zhì)的養(yǎng)分含量按照質(zhì)量百分比計(jì),含有有機(jī)質(zhì)55%-65%,銨態(tài)氮3%-4%,硝態(tài)氮0.1%-0.5%,總養(yǎng)分10%-20%,速效磷5%-8%,速效鉀8%-15%。進(jìn)一步說明,所述地衣芽孢桿菌液是將地衣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.08-0.1g、ch3coona3-5g、nahco35-8g、(nh4)2so46-8g、nh4cl2-3g、k2hpo43-4g、kh2po40.2-0.5g、nacl0.5-0.6g、mgso40.1-0.3g、cacl20.2g、酵母膏15g、蛋白胨5-10g、蒸餾水1l,用乙酸調(diào)節(jié)ph值為7.3配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到地衣芽孢桿菌有效含菌量為3×108-5×108個/ml,即可;所述巨大芽孢桿菌液是將巨大芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.1-0.2g、ch3ch2coona1.5-2.5g、(nh4)2so41.0-1.5g、k2hpo40.6-0.8g、kh2po40.1-0.3g、mgso40.2-0.25g、nacl0.1-0.15g、cacl20.2-0.3g、酵母膏1.5-2.0g、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-5d得到有效含菌量為2×109-3×109個/ml,即可。進(jìn)一步說明,所述黃霉菌液具體是將黃霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為4×109-6×109個/ml,即可;所述哈茨木霉菌液具體是將哈茨木霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為1×109-3×109個/ml,即可。進(jìn)一步說明,所述膠凍樣芽孢桿菌是將液膠凍樣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.1-0.15g、蛋白胨5-10g、酵母膏3-5g、kh2po41.0-2.0g、mgso41.5-2.5g、麥芽汁150ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-5d得到有效含菌量為2×108-6×108個/ml,即可;所述蘇云金桿菌液是將蘇云金桿菌的菌種接種到肉湯瓊脂培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行斜面活化培訓(xùn),培養(yǎng)10-20天后再轉(zhuǎn)至由檸檬酸二銨2.5-2.8g、蛋白胨30g、酵母膏0.5-1.0g、ch3ch2coona2.5-3.5g、kh2po41.0-2.0g、mgso40.8-1.2g、麥芽汁100ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-5d得到有效含菌量為3×108-5×108個/ml,即可。進(jìn)一步說明,所述改性陶粒粉將陶粒進(jìn)行超微磨粉后加入研缽中加入橄欖油研磨20-30s,接著經(jīng)過γ射線照射5-8s。進(jìn)一步說明,在步驟(2)中,所述親本條形碼標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:親本名稱、親本名稱對應(yīng)的條形碼、親本來源、開花順序、往年父母性、花粉育性。進(jìn)一步說明,在步驟(5)中,所述組合標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:母本名稱、母本位置、父本名稱、父本位置、雜交籠號、配制日期和組合編號。綜上所述,由于采用了上述技術(shù)方案,本發(fā)明的有益效果是:1、應(yīng)用本發(fā)明可以準(zhǔn)確的記錄親本名稱,防止手寫錯誤;準(zhǔn)確的判定親本的性別,減少無效雜交組合;提高親本利用率,減少包莖工作量,節(jié)省勞力和財(cái)力,便于室內(nèi)集中管理;包莖后生長的須根,利于蔗莖養(yǎng)分吸收,最終結(jié)實(shí)率高,種子質(zhì)量好。2、應(yīng)用本發(fā)明中的營養(yǎng)基質(zhì)含有的營養(yǎng)物質(zhì)齊全,能夠更快的促進(jìn)包莖后蔗莖長出須根,須根的根數(shù)多,且根較粗,須根上帶有大量活化的有益微生菌,能保證通過該營養(yǎng)基質(zhì)包莖后蔗莖存活率高?!靖綀D說明】圖1為本發(fā)明的促根處理10天后的狀態(tài)圖;圖2為本發(fā)明的包裹營養(yǎng)基質(zhì)后的示意圖;圖3為本發(fā)明的親本粘貼親本條形碼后的示意圖;圖4為本發(fā)明的套上紗袋收集種子的示意圖;圖5為手持掃描打印機(jī)掃描懸掛的親本條形碼標(biāo)簽牌,打印同名條形碼?!揪唧w實(shí)施方式】為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合實(shí)施例,進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。實(shí)施例1:一種改進(jìn)的甘蔗雜交制種方法,包括以下具體步驟:(1)親本培育:將易花親本在當(dāng)年春季下種,難花親本相比易花親本要提前下種,在每年的6月上旬停止施肥;(2)標(biāo)記親本:給每一個親本制作對應(yīng)的親本條形碼標(biāo)簽牌進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記,并于每年10月上旬懸掛于親本種植處,親本條形碼標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:親本名稱、親本名稱對應(yīng)的條形碼、親本來源、開花順序、往年父母性、花粉育性;(3)采集花穗:親本已抽穗1/3、頂部有少量小穗已開花時即可采集,從蔗莖基部截?cái)?,保持蔗莖最長狀態(tài),剪除大部分葉片,使用手持掃描打印機(jī)掃描懸掛的親本條形碼標(biāo)簽牌,打印2份新的與步驟(2)同樣名稱的條形碼,第1份粘貼在截?cái)嗟挠H本上,同時采集該親本已開花的花軸3枝,并收藏于收納盒中且附上對應(yīng)的第2份條形碼,基部截?cái)嗟恼崆o運(yùn)回雜交溫室,用清水噴濕花穗,按順序插入清水養(yǎng)莖池中保育;所述養(yǎng)莖池分隔為兩列,每列分隔為若干個小分格,每個小分格的外側(cè)設(shè)置有位置編號條形碼卡槽區(qū);利用掃描器掃描親本條形碼和該親本所在位置的位置條形碼,通過處理器進(jìn)行處理后,將統(tǒng)計(jì)采集到的花穗數(shù)量及位置顯示于顯示器中;(4)檢測花粉育性:從步驟(3)取回的花軸上,任意選取已開花小穗臨近的未開花小穗2粒,每粒小穗含3枚花藥,共選取3枝有效花軸,總共獲得18枚花藥,置于載玻片上,加i-ki溶液染色,用玻棒搗碎花藥,在顯微鏡下檢測花粉育性,確定其父母性;(5)配制組合:根據(jù)采集到的花穗和雜交計(jì)劃,制定當(dāng)天可配置的雜交組合,并打印出組合標(biāo)簽牌,組合標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:母本名稱、母本位置、父本名稱、父本位置、雜交籠號、配制日期和組合編號,然后將組合中的母本和父本置于同一雜交籠中;先固定父本的位置,父本的高度控制在低于雜交籠頂端30cm處,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為5l的養(yǎng)莖溶液瓶,將父本的下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織切除,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中;母本置于雜交籠中間,母本在下方,父本在上方,使父母本重疊1/3,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為5l的養(yǎng)莖溶液瓶,用鋒利的刀快速切除母本下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中,將組合標(biāo)簽牌懸掛于母本蔗莖中部;(6)母本促根處理:確定并固定好母本后,在花穗基部以下200cm的莖段選2個節(jié)撥除葉鞘用營養(yǎng)基質(zhì)包裹,進(jìn)行快速促根處理7天;(7)人工授粉:上午8時至10時,每隔1小時進(jìn)行人工授粉,只搖動父本花穗,使花粉飄落至母本花穗上;授粉期間,若父本花期提前結(jié)束,應(yīng)及時補(bǔ)充父本,直到母本開花基本結(jié)束止,控制人工授粉期間雜交溫室內(nèi)溫度為25℃,相對濕度為75%;(8)種子后熟:雜交結(jié)束后,丟棄父本穗莖,將母本移入后熟室,檢查促根處理效果,并用紗袋向下套住整個花穗,將組合標(biāo)簽牌放入紗袋中,下端扎緊,防止標(biāo)簽牌掉落;所述檢查促根處理效果的方法是:若生出較多須根,從包莖下方2cm截?cái)啵サ舭谋∧?,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;若未能生出須根,則用鋒利的刀快速切除母本下端5cm節(jié)間組織,迅速插入盛有20l、150ppm亞硫酸溶液的桶中,待生出較多須根,從包莖下方2cm截?cái)啵サ舭谋∧?,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;所述紗袋是由透明紗布料制作成的一端封口、另一端開口的紗袋,直徑40cm,長度80-100cm,開口端帶鎖扣。(9)收獲種子:當(dāng)母本頂部種子顯白色絮狀,小穗脫落三分之二以上時,剪下花穗,放入烘干房進(jìn)行干燥處理,然后去除紗袋,將種子裝入防水紙袋中,在-21℃下可長期貯存;所述干燥處理的條件是:溫度11℃,濕度13%,干燥4天;按照重量份數(shù)計(jì),包括以下原料制備得到養(yǎng)分含量按照質(zhì)量百分比計(jì),含有有機(jī)質(zhì)65%,銨態(tài)氮4%,硝態(tài)氮0.5%,總養(yǎng)分11%,速效磷5%,速效鉀14.5%的營養(yǎng)基質(zhì):吲哚丁酸0.1份、萘乙酸0.1份、生根粉0.5份、酒精1份、復(fù)方氨基酸注射液0.3份、將陶粒進(jìn)行超微磨粉后加入研缽中加入橄欖油研磨20s,接著經(jīng)過γ射線照射5s得到的改性陶粒粉10份、椰糠10份、復(fù)合微生物菌肥5份。上述復(fù)合微生物菌肥是有以下原料按照重量百分?jǐn)?shù)混合而成:1%地衣芽孢桿菌液、2%巨大芽孢桿菌液、1%黃霉菌液、1%膠凍樣芽孢桿菌液、2%蘇云金桿菌液、1%哈茨木霉菌液,余量為基礎(chǔ)料補(bǔ)充到100%,基礎(chǔ)料包括泥炭、磷礦粉、廢糖渣按照重量比為2:2:2;其中,地衣芽孢桿菌液是將地衣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.08g、ch3coona3g、nahco35g、(nh4)2so46g、nh4cl2g、k2hpo43g、kh2po40.2g、nacl0.5g、mgso40.1g、cacl20.2g、酵母膏15g、蛋白胨5g、蒸餾水1l,用乙酸調(diào)節(jié)ph值為7.3配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到地衣芽孢桿菌有效含菌量為3×108個/ml,即可;其中,巨大芽孢桿菌液是將巨大芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.1g、ch3ch2coona1.5g、(nh4)2so41.0g、k2hpo40.6g、kh2po40.1g、mgso40.2g、nacl0.1g、cacl20.2g、酵母膏1.5g、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3d得到有效含菌量為2×109個/ml,即可;其中,黃霉菌液具體是將黃霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為4×109個/ml,即可;其中,哈茨木霉菌液具體是將哈茨木霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為1×109個/ml,即可;其中,膠凍樣芽孢桿菌是將液膠凍樣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.1g、蛋白胨5g、酵母膏3g、kh2po41.0g、mgso41.5g、麥芽汁150ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3d得到有效含菌量為2×108個/ml,即可;所述蘇云金桿菌液是將蘇云金桿菌的菌種接種到肉湯瓊脂培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行斜面活化培訓(xùn),培養(yǎng)10天后再轉(zhuǎn)至由檸檬酸二銨2.5g、蛋白胨30g、酵母膏0.5g、ch3ch2coona2.5g、kh2po41.0g、mgso40.8g、麥芽汁100ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3d得到有效含菌量為3×108個/ml,即可。實(shí)施例2:一種改進(jìn)的甘蔗雜交制種方法,包括以下具體步驟:(1)親本培育:將易花親本在當(dāng)年春季下種,難花親本相比易花親本要提前下種,在每年的6月上旬停止施肥;(2)標(biāo)記親本:給每一個親本制作對應(yīng)的親本條形碼標(biāo)簽牌進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記,并于每年10月上旬懸掛于親本種植處,親本條形碼標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:親本名稱、親本名稱對應(yīng)的條形碼、親本來源、開花順序、往年父母性、花粉育性;(3)采集花穗:親本已抽穗1/2、頂部有少量小穗已開花時即可采集,從蔗莖基部截?cái)啵3终崆o最長狀態(tài),剪除大部分葉片,使用手持掃描打印機(jī)掃描懸掛的親本條形碼標(biāo)簽牌,打印2份新的與步驟(2)同樣名稱的條形碼,第1份粘貼在截?cái)嗟挠H本上,同時采集該親本已開花的花軸8枝,并收藏于收納盒中且附上對應(yīng)的第2份條形碼,基部截?cái)嗟恼崆o運(yùn)回雜交溫室,用清水噴濕花穗,按順序插入清水養(yǎng)莖池中保育;所述養(yǎng)莖池分隔為兩列,每列分隔為若干個小分格,每個小分格的外側(cè)設(shè)置有位置編號條形碼卡槽區(qū);利用掃描器掃描親本條形碼和該親本所在位置的位置條形碼,通過處理器進(jìn)行處理后,將統(tǒng)計(jì)采集到的花穗數(shù)量及位置顯示于顯示器中;(4)檢測花粉育性:從步驟(3)取回的花軸上,任意選取已開花小穗臨近的未開花小穗2粒,每粒小穗含3枚花藥,共選取3枝有效花軸,總共獲得18枚花藥,置于載玻片上,加i-ki溶液染色,用玻棒搗碎花藥,在顯微鏡下檢測花粉育性,確定其父母性;(5)配制組合:根據(jù)采集到的花穗和雜交計(jì)劃,制定當(dāng)天可配置的雜交組合,并打印出組合標(biāo)簽牌,組合標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:母本名稱、母本位置、父本名稱、父本位置、雜交籠號、配制日期和組合編號,然后將組合中的母本和父本置于同一雜交籠中;先固定父本的位置,父本的高度控制在低于雜交籠頂端50cm處,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為10l的養(yǎng)莖溶液瓶,將父本的下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織切除,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中;母本置于雜交籠中間,母本在下方,父本在上方,使父母本重疊1/3,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為10l的養(yǎng)莖溶液瓶,用鋒利的刀快速切除母本下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中,將組合標(biāo)簽牌懸掛于母本蔗莖中部;(6)母本促根處理:確定并固定好母本后,在花穗基部以下250cm的莖段選4個節(jié)撥除葉鞘用營養(yǎng)基質(zhì)包裹,進(jìn)行快速促根處理15天;(7)人工授粉:上午8時至10時,每隔1小時進(jìn)行人工授粉,只搖動父本花穗,使花粉飄落至母本花穗上;授粉期間,若父本花期提前結(jié)束,應(yīng)及時補(bǔ)充父本,直到母本開花基本結(jié)束止,控制人工授粉期間雜交溫室內(nèi)溫度為28℃,相對濕度為85%;(8)種子后熟:雜交結(jié)束后,丟棄父本穗莖,將母本移入后熟室,檢查促根處理效果,并用紗袋向下套住整個花穗,將組合標(biāo)簽牌放入紗袋中,下端扎緊,防止標(biāo)簽牌掉落;所述檢查促根處理效果的方法是:若生出較多須根,從包莖下方3cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;若未能生出須根,則用鋒利的刀快速切除母本下端10cm節(jié)間組織,迅速插入盛有20l、150ppm亞硫酸溶液的桶中,待生出較多須根,從包莖下方3cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;所述紗袋是由透明紗布料制作成的一端封口、另外一端開口的紗袋,直徑40cm,長度80cm,開口端帶鎖扣。(9)收獲種子:當(dāng)母本頂部種子顯白色絮狀,小穗脫落三分之二以上時,剪下花穗,放入烘干房進(jìn)行干燥處理,然后去除紗袋,將種子裝入防水紙袋中,在-15℃下可長期貯存;所述干燥處理的條件是:溫度11℃,濕度13%,干燥4天;按照重量份數(shù)計(jì),包括以下原料制備得到養(yǎng)分含量按照質(zhì)量百分比計(jì),含有有機(jī)質(zhì)58%,銨態(tài)氮3%,硝態(tài)氮0.1%,總養(yǎng)分20%,速效磷8%,速效鉀10.9%的營養(yǎng)基質(zhì):吲哚丁酸0.5份、萘乙酸0.5份、生根粉1.6份、酒精5份、復(fù)方氨基酸注射液0.7份、將陶粒進(jìn)行超微磨粉后加入研缽中加入橄欖油研磨30s,接著經(jīng)過γ射線照射8s得到的改性陶粒粉25份、椰糠20份、復(fù)合微生物菌肥10份。上述復(fù)合微生物菌肥是有以下原料按照重量百分?jǐn)?shù)混合而成:3%地衣芽孢桿菌液、3%巨大芽孢桿菌液、2%黃霉菌液、3%膠凍樣芽孢桿菌液、3%蘇云金桿菌液、3%哈茨木霉菌液,余量為基礎(chǔ)料補(bǔ)充到100%,基礎(chǔ)料包括泥炭、磷礦粉、廢糖渣按照重量比為4:2:3;其中,地衣芽孢桿菌液是將地衣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.1g、ch3coona5g、nahco38g、(nh4)2so48g、nh4cl3g、k2hpo44g、kh2po40.5g、nacl0.6g、mgso40.3g、cacl20.2g、酵母膏15g、蛋白胨10g、蒸餾水1l,用乙酸調(diào)節(jié)ph值為7.3配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到地衣芽孢桿菌有效含菌量為5×108個/ml,即可;其中,巨大芽孢桿菌液是將巨大芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.2g、ch3ch2coona2.5g、(nh4)2so41.5g、k2hpo40.8g、kh2po40.3g、mgso40.25g、nacl0.15g、cacl20.3g、酵母膏2.0g、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5d得到有效含菌量為3×109個/ml,即可;其中,黃霉菌液具體是將黃霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為6×109個/ml,即可;其中,哈茨木霉菌液具體是將哈茨木霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為3×109個/ml,即可;其中,膠凍樣芽孢桿菌是將液膠凍樣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.15g、蛋白胨10g、酵母膏5g、kh2po42.0g、mgso42.5g、麥芽汁150ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5d得到有效含菌量為6×108個/ml,即可;所述蘇云金桿菌液是將蘇云金桿菌的菌種接種到肉湯瓊脂培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行斜面活化培訓(xùn),培養(yǎng)20天后再轉(zhuǎn)至由檸檬酸二銨2.8g、蛋白胨30g、酵母膏1.0g、ch3ch2coona3.5g、kh2po42.0g、mgso41.2g、麥芽汁100ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5d得到有效含菌量為5×108個/ml,即可。實(shí)施例3:一種改進(jìn)的甘蔗雜交制種方法,包括以下具體步驟:(1)親本培育:將易花親本在當(dāng)年春季下種,難花親本相比易花親本要提前下種,在每年的6月上旬停止施肥;(2)標(biāo)記親本:給每一個親本制作對應(yīng)的親本條形碼標(biāo)簽牌進(jìn)行區(qū)別標(biāo)記,并于每年10月上旬懸掛于親本種植處,親本條形碼標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:親本名稱、親本名稱對應(yīng)的條形碼、親本來源、開花順序、往年父母性、花粉育性;(3)采集花穗:親本已抽穗1/3、頂部有少量小穗已開花時即可采集,從蔗莖基部截?cái)?,保持蔗莖最長狀態(tài),剪除大部分葉片,使用手持掃描打印機(jī)掃描懸掛的親本條形碼標(biāo)簽牌,打印2份新的與步驟(2)同樣名稱的條形碼,第1份粘貼在截?cái)嗟挠H本上,同時采集該親本已開花的花軸5枝,并收藏于收納盒中且附上對應(yīng)的第2份條形碼,基部截?cái)嗟恼崆o運(yùn)回雜交溫室,用清水噴濕花穗,按順序插入清水養(yǎng)莖池中保育;所述養(yǎng)莖池分隔為兩列,每列分隔為若干個小分格,每個小分格的外側(cè)設(shè)置有位置編號條形碼卡槽區(qū);利用掃描器掃描親本條形碼和該親本所在位置的位置條形碼,通過處理器進(jìn)行處理后,將統(tǒng)計(jì)采集到的花穗數(shù)量及位置顯示于顯示器中;(4)檢測花粉育性:從步驟(3)取回的花軸上,任意選取已開花小穗臨近的未開花小穗2粒,每粒小穗含3枚花藥,共選取3枝有效花軸,總共獲得18枚花藥,置于載玻片上,加i-ki溶液染色,用玻棒搗碎花藥,在顯微鏡下檢測花粉育性,確定其父母性;(5)配制組合:根據(jù)采集到的花穗和雜交計(jì)劃,制定當(dāng)天可配置的雜交組合,并打印出組合標(biāo)簽牌,組合標(biāo)簽牌中包含了以下的資料:母本名稱、母本位置、父本名稱、父本位置、雜交籠號、配制日期和組合編號,然后將組合中的母本和父本置于同一雜交籠中;先固定父本的位置,父本的高度控制在低于雜交籠頂端40cm處,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為7l的養(yǎng)莖溶液瓶,將父本的下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織切除,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中;母本置于雜交籠中間,母本在下方,父本在上方,使父母本重疊1/3,并在雜交籠相應(yīng)的位置上固定有容積為8l的養(yǎng)莖溶液瓶,用鋒利的刀快速切去母本下端采集時舊切口處的部分節(jié)間組織,迅速插入盛有5l、150ppm亞硫酸溶液的養(yǎng)莖溶液瓶中,將組合標(biāo)簽牌懸掛于母本蔗莖中部;(6)母本促根處理:確定并固定好母本后,在花穗基部以下230cm的莖段選3個節(jié)撥除葉鞘用營養(yǎng)基質(zhì)包裹,進(jìn)行快速促根處理10天;(7)人工授粉:上午8時至10時,每隔1小時進(jìn)行人工授粉,只搖動父本花穗,使花粉飄落至母本花穗上;授粉期間,若父本花期提前結(jié)束,應(yīng)及時補(bǔ)充父本,直到母本開花基本結(jié)束止,控制人工授粉期間雜交溫室內(nèi)溫度為26℃,相對濕度為80%;(8)種子后熟:雜交結(jié)束后,丟棄父本穗莖,將母本移入后熟室,檢查促根處理效果,并用紗袋向下套住整個花穗,將組合標(biāo)簽牌放入紗袋中,下端扎緊,防止標(biāo)簽牌掉落;所述檢查促根處理效果的方法是:若生出較多須根,從包莖下方2.5cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;若未能生出須根,則用鋒利的刀快速切除母本下端8cm節(jié)間組織,迅速插入盛有20l、150ppm亞硫酸溶液的桶中,待生出較多須根,從包莖下方2.5cm截?cái)?,去掉包裹的薄膜,放入流動的清水中保育,直至種子成熟;所述紗袋是由透明紗布料制作成的一端封口、另一端開口的紗袋,直徑40cm,長度100cm,開口端帶鎖扣。(9)收獲種子:當(dāng)母本頂部種子顯白色絮狀,小穗脫落三分之二以上時,剪下花穗,放入烘干房進(jìn)行干燥處理,然后去除紗袋,將種子裝入防水紙袋中,在-18℃下可長期貯存;所述干燥處理的條件是:溫度11℃,濕度13%,干燥4天;按照重量份數(shù)計(jì),包括以下原料制備得到養(yǎng)分含量按照質(zhì)量百分比計(jì),含有有機(jī)質(zhì)63%,銨態(tài)氮3.6%,硝態(tài)氮0.4%,總養(yǎng)分18%,速效磷7%,速效鉀8%的營養(yǎng)基質(zhì):吲哚丁酸0.3份、萘乙酸0.4份、生根粉0.9份、酒精4份、復(fù)方氨基酸注射液0.6份、將陶粒進(jìn)行超微磨粉后加入研缽中加入橄欖油研磨25s,接著經(jīng)過γ射線照射6s得到的改性陶粒粉17份、椰糠15份、復(fù)合微生物菌肥8份。上述復(fù)合微生物菌肥是有以下原料按照重量百分?jǐn)?shù)混合而成:2%地衣芽孢桿菌液、3%巨大芽孢桿菌液、1%黃霉菌液、2%膠凍樣芽孢桿菌液、2%蘇云金桿菌液、2%哈茨木霉菌液,余量為基礎(chǔ)料補(bǔ)充到100%,基礎(chǔ)料包括泥炭、磷礦粉、廢糖渣按照重量比為3:2:2;其中,地衣芽孢桿菌液是將地衣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.09g、ch3coona4g、nahco36g、(nh4)2so47g、nh4cl2.5g、k2hpo43.5g、kh2po40.3g、nacl0.55g、mgso40.2g、cacl20.2g、酵母膏15g、蛋白胨7g、蒸餾水1l,用乙酸調(diào)節(jié)ph值為7.3配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到地衣芽孢桿菌有效含菌量為4×108個/ml,即可;其中,巨大芽孢桿菌液是將巨大芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.15g、ch3ch2coona2.0g、(nh4)2so41.7g、k2hpo40.7g、kh2po40.2g、mgso40.22g、nacl0.12g、cacl20.24g、酵母膏1.7g、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4d得到有效含菌量為2.5×109個/ml,即可;其中,黃霉菌液具體是將黃霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為5×109個/ml,即可;其中,哈茨木霉菌液具體是將哈茨木霉菌的菌種接種到pda培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行活化培養(yǎng),然后再轉(zhuǎn)入pda液體培養(yǎng)基進(jìn)行液體培養(yǎng),接著轉(zhuǎn)接到肉湯培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)至有效含菌量為2×109個/ml,即可;其中,膠凍樣芽孢桿菌是將液膠凍樣芽孢桿菌的菌種放置由na2seo30.12g、蛋白胨7g、酵母膏4g、kh2po41.5g、mgso41.8g、麥芽汁150ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4d得到有效含菌量為3×108個/ml,即可;所述蘇云金桿菌液是將蘇云金桿菌的菌種接種到肉湯瓊脂培養(yǎng)基斜面上進(jìn)行斜面活化培訓(xùn),培養(yǎng)15天后再轉(zhuǎn)至由檸檬酸二銨2.6g、蛋白胨30g、酵母膏0.8g、ch3ch2coona3.0g、kh2po41.5g、mgso41.0g、麥芽汁100ml、蒸餾水1000ml配置成的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4d得到有效含菌量為4×108個/ml,即可。實(shí)施例4:步驟與具體操作與實(shí)施例3基本相同,不同點(diǎn)是:營養(yǎng)基質(zhì)由生根粉+椰糠+復(fù)合肥混合而成。實(shí)施例5:步驟與具體操作與實(shí)施例3基本相同,不同點(diǎn)是:營養(yǎng)基質(zhì)中不含有復(fù)方氨基酸注射液。實(shí)施例6:步驟與具體操作與實(shí)施例3基本相同,不同點(diǎn)是:營養(yǎng)基質(zhì)中不含有改性陶粒粉。實(shí)施例7:步驟與具體操作與實(shí)施例3基本相同,不同點(diǎn)是:營養(yǎng)基質(zhì)中不含有復(fù)合微生物菌肥。實(shí)施例8:步驟與具體操作與實(shí)施例3基本相同,不同點(diǎn)是:營養(yǎng)基質(zhì)中的復(fù)合微生物菌肥不含有基礎(chǔ)料。采用實(shí)施例1-8的方法對母本使用營養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行包裹促根,在處理完成后觀察根須情況,任意選取10株進(jìn)行記錄如下項(xiàng)目的均值:檢測項(xiàng)目根須數(shù)目/條根須長度/cm根須直徑/mm實(shí)施例1728.801.2實(shí)施例2928.681.2實(shí)施例36510.551.3實(shí)施例4433.150.5實(shí)施例5384.210.8實(shí)施例6414.141.0實(shí)施例7453.560.8實(shí)施例8393.580.9由上表可知,綜合使用本申請的營養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行包莖處理后,根須長勢在數(shù)目、長度和根須直徑上都具有優(yōu)良的性狀表現(xiàn)。將實(shí)施例1-8經(jīng)過包莖后的母本任意選取各實(shí)施例20株進(jìn)行清水養(yǎng)育,其他的條件相同,在養(yǎng)育的第40天后觀察母本的存活情況,實(shí)施例1-8存活的株數(shù)分別為20、20、20、17、18、18、19、19;實(shí)施例1-8的母本長勢情況分別是:長出新葉3片、蔗葉青綠,長出新葉3片、蔗葉青綠,長出新葉3片、蔗葉青綠,長出新葉1片、蔗葉綠,長出新葉2片、蔗葉青綠,長出新葉2片、蔗葉青綠,長出新葉2片、蔗葉青綠,長出新葉2片、蔗葉青綠。將實(shí)施例1-3的方法(母本先進(jìn)行養(yǎng)莖再進(jìn)行包莖)與對比例1、2進(jìn)行比較,對比例1的不同點(diǎn)是母本只進(jìn)行養(yǎng)莖處理;對比例2的不同點(diǎn)是母本先進(jìn)行包莖再進(jìn)行養(yǎng)莖的方式處理;備注:花穗利用率=有效的已使用的包莖個數(shù)/總包莖個數(shù)由上表可知,采用本發(fā)明先養(yǎng)莖后包莖的方式,花穗利用率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于養(yǎng)莖處理或先包莖后養(yǎng)莖的方式。由平均發(fā)芽數(shù)代表種子的結(jié)實(shí)率;平均發(fā)芽數(shù)越高,種子結(jié)實(shí)率越高;而且不發(fā)芽的(發(fā)芽數(shù)=0)花穗數(shù)量,2016年比2015年降低,也說明提高了種子結(jié)實(shí)率。以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式,其描述較為具體和詳細(xì),但并不能因此而理解為對本發(fā)明范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是,對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下,還可以做出若干變形和改進(jìn),這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此,本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。當(dāng)前第1頁12