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一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法與流程

文檔序號:11667961閱讀:809來源:國知局
本發(fā)明主要涉及種植
技術(shù)領(lǐng)域
,尤其涉及一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法。
背景技術(shù)
:瓜蔞,又名栝樓、藥瓜等,為多年生草質(zhì)滕本全株供藥用的葫蘆科栝樓屬植物,果殼中藥名瓜蔞,種子中藥名瓜蔞仁,根中藥名天花粉。全瓜蔞入藥能清熱散結(jié),潤肺化痰,養(yǎng)胃生津等,天花粉針劑臨床上用于婦女中期妊娠、死胎、流產(chǎn),并對癌細(xì)胞滋生有明顯的抑制作用。目前瓜蔞的種植方法多采用種子繁殖和分根繁殖,種子繁殖需要的時間較長,而且雌雄株比例嚴(yán)重不協(xié)調(diào),分根繁殖發(fā)芽較慢,而且需要將塊根挖出,浪費(fèi)了大量的天花粉,目前瓜蔞的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)才開始起步,誘導(dǎo)分化階段需要25~30天才能出現(xiàn)誘導(dǎo)的細(xì)胞突起,需要的時間較長,因此,需要一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷,本發(fā)明的目的是提供一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法。一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,包括以下步驟:(1)外植體選取和處理:選擇生長旺盛、結(jié)果較多、抗逆性強(qiáng)的優(yōu)良植株,從葉柄處剪取嫩葉,不會對瓜蔞植株造成傷害,不影響瓜蔞的生長和結(jié)果,而且嫩葉來源廣泛,任何時期均可以進(jìn)行組織培養(yǎng),種植效率明顯提高,直接置于4~6℃、質(zhì)量濃度為2.1~2.3%的食鹽水中進(jìn)行浸泡25~30分鐘,取出后再置于22~24℃、體積分?jǐn)?shù)為3~4%的醋酸溶液中浸泡40~45分鐘,流水沖洗20分鐘后置于營養(yǎng)液中浸泡2~3小時,再用無菌水沖洗沖洗3~4次,營養(yǎng)均衡,促進(jìn)吸收,抑制病原微生物繁殖,可以避免使用過多的消毒液反復(fù)進(jìn)行浸泡消毒,簡化操作過程,節(jié)約成本,而且可以使外植體在微酸的環(huán)境中繼續(xù)吸收和積累營養(yǎng),加快成活和外植體誘導(dǎo)分化的過程,在超凈工作臺上斜剪葉柄底端少許,得外植體;(2)培養(yǎng)基的配制:配制b5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再加入輔料,加熱攪拌至完全溶解,調(diào)節(jié)ph為5.8~6.0,分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi),于121℃滅菌20分鐘,得培養(yǎng)基;(3)外植體接種:在超凈工作臺上,將外植體傷口處斜面朝下,斜插于培養(yǎng)基上,外植體與培養(yǎng)基的夾角為45~55°,每瓶接種一個外植體,接種后在接種處滴加1滴米糠提取物,能夠使傷口充分接觸營養(yǎng)成分,富含礦物成分,促進(jìn)營養(yǎng)成分的吸收,加快傷口愈合,增加米糠的利用途徑,變廢為寶,節(jié)約種植成本,得接種培養(yǎng)瓶;(4)誘導(dǎo)分化培養(yǎng):將接種培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室內(nèi),1~6天,溫度為22~23℃、濕度為86~88%、間歇光照為1600~1800lx、光照8小時、黑暗4小時,增強(qiáng)外植體的環(huán)境適應(yīng)能力和抗逆性,適合突然較濃的營養(yǎng)成分,間歇式光照能夠加快光合作用,促進(jìn)外植體內(nèi)營養(yǎng)成分的積累和愈傷組織形成及分化,7~25天,溫度為26~27℃、濕度為91~92%、間歇光照為2100~2300lx、光照9小時、黑暗3小時,能夠加快對營養(yǎng)成分的吸收,促進(jìn)傷口的愈合和分化,縮短培養(yǎng)時間,增強(qiáng)抗逆性,提高后期的煉苗成活率,明顯節(jié)約種植成本,得誘導(dǎo)分化苗。所述步驟(1)的營養(yǎng)液,由以下重量份的原料制成:銀耳提取物1.3~1.5、花生衣提取物1.1~1.3、蕓苔素內(nèi)酯0.13~0.15、發(fā)酵淘米水900~1000;所述的銀耳提取物,含量為30%。所述的花生衣提取物,是將花生衣洗凈,粉碎,加入花生衣重量50~55倍量的體積分?jǐn)?shù)為76~78%的酒精溶液,于56~58℃、32~34khz超聲30~35分鐘,過濾,重復(fù)超聲3次,每次超聲減少5分鐘,合并所有濾液,烘干至含水量6~8%,得花生衣提取物。所述的發(fā)酵淘米水,將第1~2次淘米時的水混合,向淘米水中加入混合菌,混合均勻,發(fā)酵4~5天,得發(fā)酵淘米水。所述的混合菌,由以下重量份的原料組成:啤酒酵母22~24、醋酸菌16~18、嗜熱鏈球菌16~18、德氏乳桿菌11~13。所述步驟(2)的輔料,由以下質(zhì)量濃度的原料組成:白砂糖21~23g/l、瓊脂6.2~6.4g/l、復(fù)硝酚鈉0.5~0.7g/l、氨茶堿0.24~0.26mg/l、縮節(jié)胺0.13~0.15mg/l,在提供基礎(chǔ)營養(yǎng)的同時,氨茶堿和縮節(jié)胺能夠保持外植體的細(xì)胞活性,加快營養(yǎng)的吸收,增加氨茶堿和縮節(jié)胺的新的應(yīng)用方法,促進(jìn)外植體愈傷組織形成,加快誘導(dǎo)和分化,增強(qiáng)抗逆性。所述步驟(3)的米糠提取物,將米糠粉碎至80~100目,加入米糠重量8~10倍量的水,混合均勻,加入淀粉酶和纖維素酶的混合酶,使混合酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.03~0.05%,于38~40℃攪拌酶解180~200分鐘,于126~128℃蒸煮30~35分鐘,過濾后再加入米糠重量8~10倍量的水,反復(fù)蒸煮4次,合并所有濾液,加熱濃縮至體積為原來的1/5,得米糠提取物。所述的混合酶,淀粉酶和纖維素酶的重量比為4~5:1~2。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:本發(fā)明提供的一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,方法簡單,加快瓜簍組織培養(yǎng)時的誘導(dǎo)分化,b5培養(yǎng)基培養(yǎng)16天后開始產(chǎn)生黃綠色細(xì)胞突起,接著出現(xiàn)分化的芽叢,明顯縮短誘導(dǎo)分化的時間,提高種植效率,經(jīng)濟(jì)收入提高16.2%;以優(yōu)良植株的嫩葉作為外植體,不會對瓜蔞植株造成傷害,不影響瓜蔞的生長和結(jié)果,而且嫩葉來源廣泛,任何時期均可以進(jìn)行組織培養(yǎng),種植效率明顯提高;外植體剪取后分別用食鹽水、醋酸溶液及營養(yǎng)液處理,營養(yǎng)液由多種原料組成,營養(yǎng)均衡,促進(jìn)吸收,抑制病原微生物繁殖,可以避免使用過多的消毒液反復(fù)進(jìn)行浸泡消毒,簡化操作過程,節(jié)約成本,而且可以使外植體在微酸的環(huán)境中繼續(xù)吸收和積累營養(yǎng),加快成活和外植體誘導(dǎo)分化的過程;用b5培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),在培養(yǎng)基中加入多種輔料,在提供基礎(chǔ)營養(yǎng)的同時,氨茶堿和縮節(jié)胺能夠保持外植體的細(xì)胞活性,加快營養(yǎng)的吸收,增加氨茶堿和縮節(jié)胺的新的應(yīng)用方法,促進(jìn)外植體愈傷組織形成,加快誘導(dǎo)和分化,增強(qiáng)抗逆性;接種時將外植體進(jìn)行斜插,增加與培養(yǎng)基的接觸面積,接種后在接種處滴加米糠提取物,能夠使傷口充分接觸營養(yǎng)成分,富含礦物成分,促進(jìn)營養(yǎng)成分的吸收,加快傷口愈合,增加米糠的利用途徑,變廢為寶,節(jié)約種植成本;培養(yǎng)時先進(jìn)行低溫培養(yǎng),增強(qiáng)外植體的環(huán)境適應(yīng)能力和抗逆性,適合突然較濃的營養(yǎng)成分,間歇式光照能夠加快光合作用,促進(jìn)外植體內(nèi)營養(yǎng)成分的積累和愈傷組織形成及分化,提高溫度后,能夠加快對營養(yǎng)成分的吸收,促進(jìn)傷口的愈合和分化,縮短培養(yǎng)時間,增強(qiáng)抗逆性,使后期的煉苗成活率高達(dá)97.6%,明顯節(jié)約種植成本。具體實(shí)施方式下面用具體實(shí)施例說明本發(fā)明。實(shí)施例1一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,包括以下步驟:(1)外植體選取和處理:選擇生長旺盛、結(jié)果較多、抗逆性強(qiáng)的優(yōu)良植株,從葉柄處剪取嫩葉,不會對瓜蔞植株造成傷害,不影響瓜蔞的生長和結(jié)果,而且嫩葉來源廣泛,任何時期均可以進(jìn)行組織培養(yǎng),種植效率明顯提高,直接置于4℃、質(zhì)量濃度為2.1%的食鹽水中進(jìn)行浸泡25分鐘,取出后再置于22℃、體積分?jǐn)?shù)為3%的醋酸溶液中浸泡40分鐘,流水沖洗20分鐘后置于營養(yǎng)液中浸泡2小時,再用無菌水沖洗沖洗3~4次,營養(yǎng)均衡,促進(jìn)吸收,抑制病原微生物繁殖,可以避免使用過多的消毒液反復(fù)進(jìn)行浸泡消毒,簡化操作過程,節(jié)約成本,而且可以使外植體在微酸的環(huán)境中繼續(xù)吸收和積累營養(yǎng),加快成活和外植體誘導(dǎo)分化的過程,在超凈工作臺上斜剪葉柄底端少許,得外植體;(2)培養(yǎng)基的配制:配制b5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再加入輔料,加熱攪拌至完全溶解,調(diào)節(jié)ph為5.8~6.0,分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi),于121℃滅菌20分鐘,得培養(yǎng)基;(3)外植體接種:在超凈工作臺上,將外植體傷口處斜面朝下,斜插于培養(yǎng)基上,外植體與培養(yǎng)基的夾角為45~55°,每瓶接種一個外植體,接種后在接種處滴加1滴米糠提取物,能夠使傷口充分接觸營養(yǎng)成分,富含礦物成分,促進(jìn)營養(yǎng)成分的吸收,加快傷口愈合,增加米糠的利用途徑,變廢為寶,節(jié)約種植成本,得接種培養(yǎng)瓶;(4)誘導(dǎo)分化培養(yǎng):將接種培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室內(nèi),1~6天,溫度為22℃、濕度為86%、間歇光照為1600lx、光照8小時、黑暗4小時,增強(qiáng)外植體的環(huán)境適應(yīng)能力和抗逆性,適合突然較濃的營養(yǎng)成分,間歇式光照能夠加快光合作用,促進(jìn)外植體內(nèi)營養(yǎng)成分的積累和愈傷組織形成及分化,7~25天,溫度為26℃、濕度為91%、間歇光照為2100lx、光照9小時、黑暗3小時,能夠加快對營養(yǎng)成分的吸收,促進(jìn)傷口的愈合和分化,縮短培養(yǎng)時間,增強(qiáng)抗逆性,提高后期的煉苗成活率,明顯節(jié)約種植成本,得誘導(dǎo)分化苗。所述步驟(1)的營養(yǎng)液,由以下重量份的原料制成:銀耳提取物1.3、花生衣提取物1.1、蕓苔素內(nèi)酯0.13、發(fā)酵淘米水900;所述的銀耳提取物,含量為30%。所述的花生衣提取物,是將花生衣洗凈,粉碎,加入花生衣重量50倍量的體積分?jǐn)?shù)為76%的酒精溶液,于56℃、32khz超聲30分鐘,過濾,重復(fù)超聲3次,每次超聲減少5分鐘,合并所有濾液,烘干至含水量6~8%,得花生衣提取物。所述的發(fā)酵淘米水,將第1~2次淘米時的水混合,向淘米水中加入混合菌,混合均勻,發(fā)酵4~5天,得發(fā)酵淘米水。所述的混合菌,由以下重量份的原料組成:啤酒酵母22、醋酸菌16、嗜熱鏈球菌16、德氏乳桿菌11。所述步驟(2)的輔料,由以下質(zhì)量濃度的原料組成:白砂糖21g/l、瓊脂6.2g/l、復(fù)硝酚鈉0.5g/l、氨茶堿0.24mg/l、縮節(jié)胺0.13mg/l,在提供基礎(chǔ)營養(yǎng)的同時,氨茶堿和縮節(jié)胺能夠保持外植體的細(xì)胞活性,加快營養(yǎng)的吸收,增加氨茶堿和縮節(jié)胺的新的應(yīng)用方法,促進(jìn)外植體愈傷組織形成,加快誘導(dǎo)和分化,增強(qiáng)抗逆性。所述步驟(3)的米糠提取物,將米糠粉碎至80目,加入米糠重量8倍量的水,混合均勻,加入淀粉酶和纖維素酶的混合酶,使混合酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.03%,于38℃攪拌酶解180分鐘,于126℃蒸煮30分鐘,過濾后再加入米糠重量8倍量的水,反復(fù)蒸煮4次,合并所有濾液,加熱濃縮至體積為原來的1/5,得米糠提取物。所述的混合酶,淀粉酶和纖維素酶的重量比為4:1。實(shí)施例2一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,包括以下步驟:(1)外植體選取和處理:選擇生長旺盛、結(jié)果較多、抗逆性強(qiáng)的優(yōu)良植株,從葉柄處剪取嫩葉,不會對瓜蔞植株造成傷害,不影響瓜蔞的生長和結(jié)果,而且嫩葉來源廣泛,任何時期均可以進(jìn)行組織培養(yǎng),種植效率明顯提高,直接置于5℃、質(zhì)量濃度為2.2%的食鹽水中進(jìn)行浸泡28分鐘,取出后再置于23℃、體積分?jǐn)?shù)為3%的醋酸溶液中浸泡40分鐘,流水沖洗20分鐘后置于營養(yǎng)液中浸泡2.5小時,再用無菌水沖洗沖洗3~4次,營養(yǎng)均衡,促進(jìn)吸收,抑制病原微生物繁殖,可以避免使用過多的消毒液反復(fù)進(jìn)行浸泡消毒,簡化操作過程,節(jié)約成本,而且可以使外植體在微酸的環(huán)境中繼續(xù)吸收和積累營養(yǎng),加快成活和外植體誘導(dǎo)分化的過程,在超凈工作臺上斜剪葉柄底端少許,得外植體;(2)培養(yǎng)基的配制:配制b5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再加入輔料,加熱攪拌至完全溶解,調(diào)節(jié)ph為5.8~6.0,分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi),于121℃滅菌20分鐘,得培養(yǎng)基;(3)外植體接種:在超凈工作臺上,將外植體傷口處斜面朝下,斜插于培養(yǎng)基上,外植體與培養(yǎng)基的夾角為45~55°,每瓶接種一個外植體,接種后在接種處滴加1滴米糠提取物,能夠使傷口充分接觸營養(yǎng)成分,富含礦物成分,促進(jìn)營養(yǎng)成分的吸收,加快傷口愈合,增加米糠的利用途徑,變廢為寶,節(jié)約種植成本,得接種培養(yǎng)瓶;(4)誘導(dǎo)分化培養(yǎng):將接種培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室內(nèi),1~6天,溫度為22℃、濕度為87%、間歇光照為1700lx、光照8小時、黑暗4小時,增強(qiáng)外植體的環(huán)境適應(yīng)能力和抗逆性,適合突然較濃的營養(yǎng)成分,間歇式光照能夠加快光合作用,促進(jìn)外植體內(nèi)營養(yǎng)成分的積累和愈傷組織形成及分化,7~25天,溫度為26.5℃、濕度為91%、間歇光照為2200lx、光照9小時、黑暗3小時,能夠加快對營養(yǎng)成分的吸收,促進(jìn)傷口的愈合和分化,縮短培養(yǎng)時間,增強(qiáng)抗逆性,提高后期的煉苗成活率,明顯節(jié)約種植成本,得誘導(dǎo)分化苗。所述步驟(1)的營養(yǎng)液,由以下重量份的原料制成:銀耳提取物1.4、花生衣提取物1.2、蕓苔素內(nèi)酯0.14、發(fā)酵淘米水1000;所述的銀耳提取物,含量為30%。所述的花生衣提取物,是將花生衣洗凈,粉碎,加入花生衣重量53倍量的體積分?jǐn)?shù)為77%的酒精溶液,于57℃、33khz超聲33分鐘,過濾,重復(fù)超聲3次,每次超聲減少5分鐘,合并所有濾液,烘干至含水量6~8%,得花生衣提取物。所述的發(fā)酵淘米水,將第1~2次淘米時的水混合,向淘米水中加入混合菌,混合均勻,發(fā)酵4~5天,得發(fā)酵淘米水。所述的混合菌,由以下重量份的原料組成:啤酒酵母23、醋酸菌17、嗜熱鏈球菌17、德氏乳桿菌12。所述步驟(2)的輔料,由以下質(zhì)量濃度的原料組成:白砂糖22g/l、瓊脂6.3g/l、復(fù)硝酚鈉0.6g/l、氨茶堿0.25mg/l、縮節(jié)胺0.14mg/l,在提供基礎(chǔ)營養(yǎng)的同時,氨茶堿和縮節(jié)胺能夠保持外植體的細(xì)胞活性,加快營養(yǎng)的吸收,增加氨茶堿和縮節(jié)胺的新的應(yīng)用方法,促進(jìn)外植體愈傷組織形成,加快誘導(dǎo)和分化,增強(qiáng)抗逆性。所述步驟(3)的米糠提取物,將米糠粉碎至100目,加入米糠重量9倍量的水,混合均勻,加入淀粉酶和纖維素酶的混合酶,使混合酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.04%,于39℃攪拌酶解180分鐘,于127℃蒸煮33分鐘,過濾后再加入米糠重量9倍量的水,反復(fù)蒸煮4次,合并所有濾液,加熱濃縮至體積為原來的1/5,得米糠提取物。所述的混合酶,淀粉酶和纖維素酶的重量比為5:2。實(shí)施例3一種促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,包括以下步驟:(1)外植體選取和處理:選擇生長旺盛、結(jié)果較多、抗逆性強(qiáng)的優(yōu)良植株,從葉柄處剪取嫩葉,不會對瓜蔞植株造成傷害,不影響瓜蔞的生長和結(jié)果,而且嫩葉來源廣泛,任何時期均可以進(jìn)行組織培養(yǎng),種植效率明顯提高,直接置于6℃、質(zhì)量濃度為2.3%的食鹽水中進(jìn)行浸泡30分鐘,取出后再置于24℃、體積分?jǐn)?shù)為4%的醋酸溶液中浸泡45分鐘,流水沖洗20分鐘后置于營養(yǎng)液中浸泡3小時,再用無菌水沖洗沖洗3~4次,營養(yǎng)均衡,促進(jìn)吸收,抑制病原微生物繁殖,可以避免使用過多的消毒液反復(fù)進(jìn)行浸泡消毒,簡化操作過程,節(jié)約成本,而且可以使外植體在微酸的環(huán)境中繼續(xù)吸收和積累營養(yǎng),加快成活和外植體誘導(dǎo)分化的過程,在超凈工作臺上斜剪葉柄底端少許,得外植體;(2)培養(yǎng)基的配制:配制b5培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再加入輔料,加熱攪拌至完全溶解,調(diào)節(jié)ph為5.8~6.0,分裝于培養(yǎng)瓶內(nèi),于121℃滅菌20分鐘,得培養(yǎng)基;(3)外植體接種:在超凈工作臺上,將外植體傷口處斜面朝下,斜插于培養(yǎng)基上,外植體與培養(yǎng)基的夾角為45~55°,每瓶接種一個外植體,接種后在接種處滴加1滴米糠提取物,能夠使傷口充分接觸營養(yǎng)成分,富含礦物成分,促進(jìn)營養(yǎng)成分的吸收,加快傷口愈合,增加米糠的利用途徑,變廢為寶,節(jié)約種植成本,得接種培養(yǎng)瓶;(4)誘導(dǎo)分化培養(yǎng):將接種培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)室內(nèi),1~6天,溫度為23℃、濕度為88%、間歇光照為1800lx、光照8小時、黑暗4小時,增強(qiáng)外植體的環(huán)境適應(yīng)能力和抗逆性,適合突然較濃的營養(yǎng)成分,間歇式光照能夠加快光合作用,促進(jìn)外植體內(nèi)營養(yǎng)成分的積累和愈傷組織形成及分化,7~25天,溫度為27℃、濕度為92%、間歇光照為2300lx、光照9小時、黑暗3小時,能夠加快對營養(yǎng)成分的吸收,促進(jìn)傷口的愈合和分化,縮短培養(yǎng)時間,增強(qiáng)抗逆性,提高后期的煉苗成活率,明顯節(jié)約種植成本,得誘導(dǎo)分化苗。所述步驟(1)的營養(yǎng)液,由以下重量份的原料制成:銀耳提取物1.5、花生衣提取物1.3、蕓苔素內(nèi)酯0.15、發(fā)酵淘米水1000;所述的銀耳提取物,含量為30%。所述的花生衣提取物,是將花生衣洗凈,粉碎,加入花生衣重量55倍量的體積分?jǐn)?shù)為78%的酒精溶液,于58℃、34khz超聲35分鐘,過濾,重復(fù)超聲3次,每次超聲減少5分鐘,合并所有濾液,烘干至含水量6~8%,得花生衣提取物。所述的發(fā)酵淘米水,將第1~2次淘米時的水混合,向淘米水中加入混合菌,混合均勻,發(fā)酵4~5天,得發(fā)酵淘米水。所述的混合菌,由以下重量份的原料組成:啤酒酵母24、醋酸菌18、嗜熱鏈球菌18、德氏乳桿菌13。所述步驟(2)的輔料,由以下質(zhì)量濃度的原料組成:白砂糖23g/l、瓊脂6.4g/l、復(fù)硝酚鈉0.7g/l、氨茶堿0.26mg/l、縮節(jié)胺0.15mg/l,在提供基礎(chǔ)營養(yǎng)的同時,氨茶堿和縮節(jié)胺能夠保持外植體的細(xì)胞活性,加快營養(yǎng)的吸收,增加氨茶堿和縮節(jié)胺的新的應(yīng)用方法,促進(jìn)外植體愈傷組織形成,加快誘導(dǎo)和分化,增強(qiáng)抗逆性。所述步驟(3)的米糠提取物,將米糠粉碎至100目,加入米糠重量10倍量的水,混合均勻,加入淀粉酶和纖維素酶的混合酶,使混合酶的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,于40℃攪拌酶解200分鐘,于128℃蒸煮35分鐘,過濾后再加入米糠重量10倍量的水,反復(fù)蒸煮4次,合并所有濾液,加熱濃縮至體積為原來的1/5,得米糠提取物。所述的混合酶,淀粉酶和纖維素酶的重量比為5:1。對比例1步驟(1)中的嫩葉改為莖尖,其余方法,同實(shí)施例1。對比例2去除步驟(1)中的食鹽水、醋酸溶液及營養(yǎng)液浸泡,改為傳統(tǒng)的消毒,其余方法,同實(shí)施例1。對比例3步驟(2)中的b5培養(yǎng)基改為ms培養(yǎng)基,其余方法,同實(shí)施例1。對比例4去除步驟(2)中的輔料,其余方法,同實(shí)施例1。對比例5步驟(3)中的外植體進(jìn)行垂直接種,去除米糠油提取物,其余方法,同實(shí)施例1。對比例6步驟(4)中的培養(yǎng)條件一直保持溫度為26℃、濕度為91%、光照為2100lx、每天連續(xù)光照10小時,其余方法,同實(shí)施例1。對比例7現(xiàn)有傳統(tǒng)的促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化方法。實(shí)施例和對比例促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化方法的促進(jìn)效果:分別選擇同一優(yōu)良瓜蔞的嫩葉和莖尖,分別用實(shí)施例和對比例的促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化方法進(jìn)行組培,每組培養(yǎng)100瓶,在培養(yǎng)16天時觀察每組開始分化的外植體,計(jì)算分化率,培養(yǎng)煉苗后在安徽省蚌埠地區(qū)進(jìn)行栽植,觀察成活率,實(shí)施例和對比例促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化方法的促進(jìn)效果見表1。表1:實(shí)施例和對比例促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化方法的促進(jìn)效果項(xiàng)目分化率(%)煉苗成活率(%)栽植成活率(%)實(shí)施例19896.693.6實(shí)施例29797.694.7實(shí)施例39896.593.9對比例19496.392.8對比例27490.294.2對比例37989.491.7對比例47584.392.2對比例57889.591.3對比例68286.790.8對比例71383.488.5從表1的結(jié)果表明,實(shí)施例的促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法,分化率、煉苗成活率及栽植成活率明顯較對比例高,說明本發(fā)明提供的促進(jìn)瓜蔞組培育苗分化的方法具有很好的育苗效果。當(d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