本發(fā)明涉及農(nóng)藥組合物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種含吡唑萘菌胺和異菌脲的殺菌組合物及其制劑與應(yīng)用。
（二）
背景技術(shù)：
灰霉病由灰葡萄孢菌侵染所致，屬真菌病害，是露地、保護(hù)地作物常見且比較難防治的一種真菌性病害，屬低溫高濕型病毒，灰霉病菌也能侵染黃瓜、番茄、豆角、辣椒、茄子、草莓。近年來，溫室大棚的種植面積逐年增加，灰霉病菌的傳播導(dǎo)致灰霉病的發(fā)生逐年加重，由于常規(guī)殺菌劑連續(xù)施用，導(dǎo)致病菌的抗藥性增加，防治難度加大。菜農(nóng)不得不加大用藥量，增加施藥頻率，使得蔬菜中農(nóng)藥的殘留量超標(biāo)，同時(shí)增加了成本，對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重影響，因此，篩選高效、低毒的藥劑非常必要。
吡唑萘菌胺，屬于吡唑-酰胺類化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)中吡唑、酰胺和苯并降冰片稀環(huán)賦予它高活性。該藥劑屬于琥珀酸脫氫酶抑制劑類，作用機(jī)制是通過抑制病原菌線粒體電子傳遞鏈上琥珀酸脫氧酶的活性，使得病原真菌無法經(jīng)由呼吸產(chǎn)生能量，進(jìn)而瓦解病菌的生長。對(duì)病原孢子發(fā)芽、發(fā)芽管的生長及吸附器的形成具有較強(qiáng)的抑制作用，對(duì)少部分真菌，也具有抑制菌絲生長及孢子形成的作用。但該類藥劑作用位點(diǎn)單一，已被歸為中毒抗性風(fēng)險(xiǎn)殺菌劑，起抗性風(fēng)險(xiǎn)備受關(guān)注。因此，對(duì)于吡唑萘菌胺的復(fù)配制劑的開發(fā)成為了研究的熱點(diǎn)。
異菌脲是二甲酰亞胺類高效廣譜、觸殺型殺菌劑。對(duì)孢子、菌絲體、菌核同時(shí)起作用，抑制病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長。在植物體內(nèi)幾乎不能滲透，屬保護(hù)性殺菌劑，適用于瓜類、番茄、辣椒、茄子、園林花卉、草坪等多種蔬菜及觀賞植物等；主要防治對(duì)象為由葡萄孢菌、珍珠菌、交鏈孢菌、核盤菌等引起的病害，如灰霉病、早疫病、黑斑病、菌核病等。異菌脲屬低毒殺菌劑，作用機(jī)制為，異菌脲能抑制蛋白激酶，控制許多細(xì)胞功能的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)，包括碳水化合物結(jié)合進(jìn)入真菌細(xì)胞組分的干擾作用。因此，它既可抑制真菌孢子的萌發(fā)及產(chǎn)生，也可抑制菌絲的生長，即對(duì)病原菌生活史中的各發(fā)育階段均有影響。
（三）
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種藥效時(shí)間長、防治效果好的含吡唑萘菌胺和異菌脲的殺菌組合物及其制劑及應(yīng)用。
本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
一種含吡唑萘菌胺和異菌脲的殺菌組合物，其特征在于：由吡唑萘菌胺和異菌脲混合組成，吡唑萘菌胺和異菌脲的質(zhì)量比為1-20：20-1。
本發(fā)明獎(jiǎng)吡唑萘菌胺和異菌脲進(jìn)行復(fù)配，通過大量的生物測定篩選，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的殺菌劑對(duì)灰霉病菌表現(xiàn)出明顯的增效作用。參照孫云沛（Sun YP）法評(píng)價(jià)本發(fā)明中兩種不同活性組分混合后的相互作用，其中，共毒系數(shù)大于120為增效作用，共毒系數(shù)小雨80為拮抗作用，共毒系數(shù)在兩者之間為想家作用。通過計(jì)算吡唑萘菌胺和異菌脲混用后的共毒系數(shù)，評(píng)價(jià)兩者混用后效果，結(jié)果顯示了吡唑萘菌胺和異菌脲的重量配比。
本發(fā)明的更優(yōu)技術(shù)方案為：
所述吡唑萘菌胺和異菌脲的質(zhì)量比優(yōu)選為2-1:1-10，更優(yōu)選的是1:2-8，最優(yōu)配比為1:3.5。
由于原藥是無法直接使用的，本發(fā)明提供了一種殺菌劑，它由殺菌組合物和農(nóng)藥制劑上可接受的輔料制成，其中殺菌組合物的質(zhì)量百分含量為2-60%，優(yōu)選的是2-40%。
上述殺菌劑可采用目前任意已知的方法加工制成合適劑型的制劑，合適的劑型包括但不限于懸浮劑、懸乳劑、乳油、水乳劑、微乳劑、水分散劑、可濕性粉劑、顆粒劑、澆潑劑、滴劑、微膠囊劑或微膠囊懸浮乳劑等。
由于上述吡唑萘菌胺和異菌脲按照上述比例復(fù)配后的增效作用，本發(fā)明所述的殺菌組合物在防治蔬菜灰霉病中的應(yīng)用，也在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明殺菌組合物對(duì)蔬菜灰霉病的防效遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于單劑的防效，且均在80%以上。
本發(fā)明以吡唑萘菌胺和異菌脲按照一定比例混配后，對(duì)灰霉病菌具有明顯的增效作用；由于吡唑萘菌胺和異菌脲兩種藥劑作用機(jī)理互不相同，組合物的應(yīng)用有助于延緩病菌抗藥性的發(fā)展，延長藥劑的使用壽命；將吡唑萘菌胺和異菌脲混配后的殺菌組合物制成各種劑型的農(nóng)藥制劑，對(duì)黃瓜、番茄、豆角、辣椒、茄子、草莓等作物上發(fā)生的灰霉病具有較好的防治效果。
（四）具體實(shí)施方式
下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
將不同的農(nóng)藥有效成分組合應(yīng)用，是目前開發(fā)和研制新農(nóng)藥的一種有效和快捷的方式。不同品種的農(nóng)藥混合后，通常表現(xiàn)為三種類型：相加作用、增效作用和拮抗作用。但具體為何種作用無法預(yù)測，只有通過大量的試驗(yàn)才能知道。復(fù)配增效是綜合防治的重要手段。
本發(fā)明的含吡唑萘菌胺和異菌脲的殺菌組合物以吡唑萘菌胺和異菌脲為有效成分，兩者按照一定配比組合，對(duì)灰霉病菌具有明顯的增效作用；而不是兩種藥物的簡單加和，具體采用聯(lián)合毒力進(jìn)行室內(nèi)生物測定。
供試藥劑：92%吡唑萘菌胺原藥，96%異菌脲原藥。
試驗(yàn)對(duì)象：灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers. ex Fr.）。
藥劑配制：將原藥（折百后）按常規(guī)方法配制成需要的試驗(yàn)藥劑。
室內(nèi)生測試驗(yàn)：
參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑》進(jìn)行，在室內(nèi)采用菌絲生長速率法，測定不同配比對(duì)菌株的毒力，4d后用十字交叉法測定菌落直徑，計(jì)算各處理凈生長量、菌絲生長抑制率。
凈生長量（mm）=測量菌落直徑-8；
。
采用機(jī)率分析法和DPSv7.5 軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)算出每種藥劑的EC50值。用EC50值按孫云沛法計(jì)算共毒系數(shù)，計(jì)算公式如下：
。
設(shè)混合藥劑為M，組成的各單劑為A、B、C…。LC50A 為藥劑A 的抑制中濃度；LC50B為藥劑B 的抑制中濃度，LC50M為藥劑A +藥劑 B +藥劑C+…的混劑的抑制中濃度，混劑共毒系數(shù)為CTC，有效成分的百分含量為P。
共毒系數(shù)（CTC）≥120表現(xiàn)為增效作用，CTC≤80表現(xiàn)為拮抗作用，80＜CTC＜120表現(xiàn)為相加作用。
實(shí)施例1：將吡唑萘菌胺和異菌脲分別按照不同的質(zhì)量比進(jìn)行復(fù)配試驗(yàn)，室內(nèi)毒力測定結(jié)果如下表所示；
由上表可知，吡唑萘菌胺和異菌脲對(duì)番茄灰霉病菌的EC50分別為1.15mg/L和8.36mg/L。吡唑萘菌胺和異菌脲配比在1:20-20:1時(shí)，增效比值SR均大于120，說明吡唑萘菌胺和異菌脲兩者在1:20-20:1范圍內(nèi)混比均表現(xiàn)明顯的增效作用，尤其是當(dāng)兩者配比在2:1-1:10時(shí)，增效作用更為明顯突出，其中更優(yōu)為的比例范圍為1:2-1:8，其中當(dāng)兩者比例為1:3.5時(shí)聯(lián)合毒力最高。
下述實(shí)施例2-10分別為將本發(fā)明殺菌組合物制成的各種制劑，可以用已知的方法制備成適合農(nóng)業(yè)使用的任意一種劑型，比較好的劑型為懸浮劑、懸浮種衣劑、懸乳劑、乳油、水乳劑、微乳劑、水分散粒劑、可濕性粉劑、顆粒劑、澆潑劑、滴劑、微囊懸浮劑、微囊懸浮-懸浮劑。
為了更明確本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)，本發(fā)明用以下具體實(shí)施例進(jìn)行說明，但其活性成分及其配比、助劑等都不僅限于以下實(shí)施例。
實(shí)施例2：2%吡唑萘菌胺+1%異菌脲懸浮劑
以質(zhì)量百分含量計(jì)，本實(shí)施例中各組分的含量如下：
92% 吡唑萘菌胺原藥（折百） 2%
96% 異菌脲原藥（折百） 1%
木質(zhì)素磺酸鈉（分散劑） 5%
聚羧酸鹽（分散劑） 3%
烷基酚聚氧乙烯醚（潤濕劑） 1%
黃原膠（懸浮穩(wěn)定劑） 0.15%
硅酸鎂鋁（懸浮穩(wěn)定劑） 1%
乙二醇 （防凍劑） 2%
有機(jī)硅消泡劑 0.1%
水 補(bǔ)足至100%
將活性組分、分散劑、潤濕劑和水等各組分按照配方的比例混合，經(jīng)10000r/min高速剪切5分鐘均勻，加入砂磨機(jī)研磨到所要求的粒徑（平均粒徑小于3微米），制成2%吡唑萘菌胺+1%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例3：1%吡唑萘菌胺+1%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和1%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+1%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例4：1%吡唑萘菌胺+2%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和2%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+2%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例5：1%吡唑萘菌胺+3.5%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和3.5%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+3.5%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例6：1%吡唑萘菌胺+4%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和4%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+4%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例7：1%吡唑萘菌胺+8%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和8%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+8%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例8：1%吡唑萘菌胺+10%異菌脲懸浮劑
將實(shí)施例2中的有效成份按照1%吡唑萘菌胺和10%異菌脲稱取，其它組分和制備過程與實(shí)施例2相同，得到1%吡唑萘菌胺+10%異菌脲懸浮劑。
實(shí)施例9：2%吡唑萘菌胺+7%異菌脲可濕性粉劑
92% 吡唑萘菌胺原藥（折百） 2%
96% 異菌脲原藥（折百） 7%
十二烷基硫酸鈉（潤濕劑） 2%
木質(zhì)素磺酸鈉（分散劑） 6%
聚羧酸鹽（分散劑） 6%
高嶺土 補(bǔ)足至100%
將上述組分混合均勻，經(jīng)過氣流粉碎，即形成1%吡唑萘菌胺+4%異菌脲可濕性粉劑。
實(shí)施例10：8%吡唑萘菌胺+28%異菌脲水分散粒劑
稱取8.70g 92%唑蟲酰胺原藥，29.17g 96%異菌脲原藥，3g 2700（分散劑），5g木質(zhì)素磺酸鈣（分散劑），1g十二烷基苯磺酸鈉（潤濕劑），1g硫酸鈉（崩解劑），高嶺土補(bǔ)至100g?；旌暇鶆蚝?，進(jìn)行氣流粉碎，再用水做粘合劑進(jìn)行造粒，制成8%吡唑萘菌胺+28%異菌脲水分散粒劑。
田間試驗(yàn)防治番茄灰霉?。涸囼?yàn)方法
試驗(yàn)在山東省泰安市蔬菜種植區(qū)，共施藥3次，每個(gè)處理重復(fù)4次，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，小區(qū)面積20m2，每個(gè)小區(qū)調(diào)查5株，每株調(diào)查全部果實(shí)，計(jì)算病果率并根據(jù)以下分級(jí)方法分別予以記錄。
分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：
0級(jí)：無病斑；
1級(jí)：殘留花瓣發(fā)病或柱頭發(fā)??；
3級(jí)：萼片腐爛或柱頭發(fā)病蔓延到果臍部；
5級(jí)：果臍部有浸潤斑無霉層；
7級(jí)：果臍部有霉層但未擴(kuò)展到其它部位；
9級(jí)：霉層擴(kuò)展到果的其它部位。
調(diào)查時(shí)間和次數(shù)：
試驗(yàn)共調(diào)查1次，于第三次施藥后14d，計(jì)算病指及防治效果。
藥效計(jì)算方法：
病果率（%）=病果數(shù)/調(diào)查總果數(shù)×100；
病情指數(shù)=∑(各級(jí)病果數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值)/(調(diào)查總果數(shù)×9)×100；
防治效果（%）=[（1-空白對(duì)照區(qū)藥前病情指數(shù)×處理區(qū)藥后病情指數(shù)）/（空白對(duì)照區(qū)藥后病情指數(shù)×處理區(qū)藥前病情指數(shù)）]×100。
試驗(yàn)藥劑對(duì)番茄灰霉病的田間防治效果，如下表所示：
從上表中可以看出不同比例的混配藥劑，對(duì)灰霉病的防效均優(yōu)于兩種單劑的防效，尤其在1:3.5的復(fù)配比例下，其防治效果最好。
綜上所述，本發(fā)明將吡唑萘菌胺和異菌脲混配后，兩者在一定比例范圍內(nèi)對(duì)蔬菜灰霉病菌起到增效作用，且對(duì)其靶標(biāo)作物安全。本復(fù)配制劑的發(fā)明與推廣有助于對(duì)瓜類、番茄、豆角、辣椒、茄子、草莓等作物的灰霉病的防治工作，降低農(nóng)藥使用量，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有十分重要的價(jià)值。